Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
125
Capitolul 8
8
GENA
Funcia genei
Gena deine secvena de nucleotide ce controleaz
sintez diferitor molecule de ARN (ARNm, ARNr, ARNt,
ARNsn) i a
diferitor molecule
de proteine.
Fiecare gen are o
succesiune
specific de baze,
de regul de pe ea
se sintetizeaz un
singur tip de ARN.
Complexitatea structurii i funciei organismelor vii este
determinat de spectrul proteinelor pe care le conine. De aceea,
organismele simple (de ex., bacteriile) conin cteva sute de
gene, iar organismele mai complexe - cteva zeci de mii de
gene. n setul diploid de cromozomi umani se conin circa
125000 de gene diferite.
Genele care codific ARNm, tradus n lanuri
polipeptidice specifice, sunt denumite gene structurale. Pentru
acestea se utilizeaz frecvent termenul de cistron. Genele care
se transcriu independent poart denumirea de uniti
transcripionale monocistronice (caracteristice pentru
eucariote), iar mai multe gene ce se transcriu n comun uniti
transcripionale policistronice (caracteristice procariotelor).
127
Capitolul 8
Prin sinteza diferitor tipuri de proteine genele
controleaz structurile, funciile i proprietile celulei i a
organismului n ntregime. Produii genelor, interacionnd cu
factorii de mediu, pot modula activitatea organismului pentru
adaptarea lui n condiiile schimbtoare ale ambiantului.
Sub aciunea factorilor de mediu genele i pot modifica
structura chimic (apar gene mutante). Mutaiile determin
apariia diferitor variante alelice ale uneia i aceleai gene care
pot avea asupra fenotipului diferite efecte:
- neutre apar variaii individuale ale unuia i aceluiai
caracter (grupele sanguine i serice la om);
- folositoare gene de rezisten la anumite noxe;
- defavorabile apar caractere patologice letale sau
semiletale (de ex., deficiene enzimatice i blocarea unor
lanuri metabolice).
Totalitatea genelor din setul diploid de cromozomi al
unui individ se numete genotip. Totalitatea caracterelor i
proprietilor individului controlate de genotip n interaciune cu
mediul se numete fenotip.
129
Capitolul 8
Particularitile organizrii genelor
structurale la eucariote
130
Capitolul 8
n afar de aceste boxe mai sunt i alte secvene consens,
ce se leag de proteine reglatoare specifice pentru gena dat (fig.
8.3). Acestea sunt necesare pentru o expresie difereniat a
genelor n celule diferite i perioade diferite ale ciclului celular
(de ex., genele pentru globin se transcriu doar n celulele
precursoare ale eritrocitelor, gena pentru miozin n celulele
musculare, iar gena pentru insulin - n celulele specializate ale
pancreasului etc.).
Secvene codificatoare
S-a demonstrat c la eucariote structura genei este
discontinu. Paradoxul valorii C confirm c din totalul ADN-
ului genomic doar o parte (10-15%) particip la sinteza
proteinelor. Secvenele neinformaionale au rol diferit:
separ genele (spacieri);
se conin n gene, dar nu sunt reprezentate n secvenele de
aminoacizi (introni);
au rol structural propriu-zis (telomeri, centromeri, satelii).
S-a constatat o discordan ntre dimensiune moleculei
de ARNm, cu cea a ARN precursor (transcript primar) i
dimensiunea secvenei de ADN care a servit ca matri pentru
transcripia ARN respectiv. P. Sharp (1977) a emis ipoteza
structurii discontinue, sau n mozaic, a genei la eucariote.
131
Capitolul 8
132
Capitolul 8
Regiunea transcriptibil a genelor la eucariote cuprinde secvene
codificatoare denumite exoni i secvene necodificatoare
introni (fig. 8.4). Numrul de exoni i introni
este variabil i depinde de complexitatea proteinei pe care o
codific:
- gena -globinei conine 3 exoni i 2 introni (fig. 8.5);
- gena pentru precolagen conine 51 exoni i 50 introni;
- gena pentru Hemofilia A conine 26 exoni i 25 introni
(secvena de ADN const din 180000 p.b., iar molecula
ARNm respectiv are o lungime de doar 9000 b. i constituie
0,2%);
- gena care codific distrofina conine mai mult de 25000000
pb, iar ARNm - doar 14000 b.
Exonii
Exonii reprezint secvene codificatoare ale genei ce se
transcriu, sunt prezeni n ARN precursor, n ARNm i se
regsesc n secvena de aminoacizi a proteinei (fig. 8.4). La
captul 5 al primului exon este o secven scurt de cteva zeci
de nucleotide (secvena lider) cu rol de iniiere a translaiei care
este urmat de codonul universal de iniiere a translaiei ATG.
La captul 3 al ultimului exon se afl unul din cei trei codoni de
STOP informaional (TAA, TAG, TGA) ce determin
terminarea sintezei proteinei i o secven scurt netranslat.
133
Capitolul 8
Intronii
Intronii reprezint secvene necodificatoare ale genei ce
se transcriu, sunt prezeni n ARN-precursor, dar nu sunt
prezeni n ARNm (fig. 8.4). n timpul maturizrii ARNm
(splicing) intronii sunt eliminai din ARN-precursor.
Intronii au o lungime cuprins ntre 100 i 10000 pb i,
de regul, sunt mai lungi dect exonii (fig. 8.7). Majoritatea
intronilor prezint la extremitatea 5' secvena dinucleotidic GT
iar la 3' AG, astfel sunt recunoscui de enzimele ce i nltur n
timpul splicing-ului.
Tabelul 8.2. Funciile intronilor
134
Capitolul 8
Particularitile organizrii genelor
pentru ARNr i ARNt la eucariote
135
Capitolul 8
Particularitile organizrii
genelor la procariote
Aparatul genetic al procariotelor este reprezentat de
molecule circulare de ADN (nucleoid i plasmide). Genomul
procariotelor conine puine secvene necodificatoare. Genele se
caracterizeaz printr-o structur mai simpl i sunt lipsite de
introni. Deoarece metabolismul este intens i necesit modificri
rapide n dependen de condiiile de moment ale mediului,
majoritatea genelor implicate ntr-un lan metabolic formeaz
uniti transcripionale numite operoni.
Operonul conine un singur promotor la captul 5, mai
multe gene structurale (numrul de gene structurale este egal cu
numrul proteinelor implicate n procesul metabolic dat), iar la
captul 3 se afl terminatorul (fig. 8.9). Unii operoni pot conine
i alte secvene reglatoare (secvene operatoare, secvene
atenuatoare etc.).
136
Capitolul 8
Particularitile organizrii
genomului uman
Genomul uman const din ADN nuclear (98%) i ADN
mitocondrial (2%). Genele acestor dou sisteme interacioneaz
ntre ele i controleaz activitatea organismului uman prin
controlul sintezei proteinelor de structur, enzimelor i
proteinelor reglatoare.
Genomul nuclear
Genomul nuclear al celulelor somatice este reprezentat
de 46 molecule de ADN, ce corespund celor 46 de cromozomi
monocromatidieni din setul diploid. n nucleul celulelor umane
se conin circa 125000 de gene. Acestea sunt repartizate de-a
lungul cromozomului. ntre gene sunt secvene necodificatoare,
reprezentate de spaceri, ADN-satelit. Fiecare cromozom conine
137
Capitolul 8
n mediu 3000 de gene (fig. 8.12). Sub aspect funcional genele
nucleare pot fi clasificate n gene eseniale (comune pentru toate
celulele organismului), gene ce intervin n specializarea
celulelor i gene ce codific proteinele reglatoare. De aceea, n
diverse esuturi sau etape ale ontogenezei se exprim (se
transcriu) un numr diferit de gene.
n genomul nuclear pot exista mai multe copii ale
aceleai gene. Grupul de gene, exonii crora sunt asemntori,
codific proteine cu secven i proprieti similare, derivate de
la o gen ancestral, se numete familie de gene. Familiile de
gene pot fi repetitive, nerepetitive i pseudogene.
Familiile de gene repetitive - reprezint repetri ale
uneia i aceleiai gene de mai multe ori per genom. Pot s
funcioneze n acelai esut simultan, sau n esuturi diferite
(genele pentru histone, ARNr, ARNt etc.).
Familiile de gene nerepetitive sunt repetiii ale unor
gene cu efect similar, dar care se deosebesc att prin structur,
ct i prin modul de aciune (gene pentru globine, HLA etc.).
n fig. 8.13 este prezentat organizarea clusterului pentru
-globine. Familia const din patru gene funcionale (, 1, 2,
) i trei pseudogene (, , ). Globina ntr n compoziia
hemoglobinei embrionare, iar globinele n compoziia
hemoglobinelor embrionare, fetale i la adult.
138
Capitolul 8
139
Capitolul 8
Genomul mitocondrial
Genomul mitocondrial este reprezentat de molecule
circulare de ADN cu lungimea de 16.6 kb. n fiecare
mitocondrie se conine un numr variabil de molecule n
dependen de necesitatea energetic a celulei. Aproape toate
nucleotidele aparin secvenelor codante, secvenele ADN cu
funcii reglatoare fiind foarte mici (ADN mitocondrial al
celulelor umane nu conine introni). Toate genele formeaz dou
uniti transcripionale: una pe catena grea cu promotorul HSP i
una pe catena uoar LSP (fig. 8.14). ADN mitocondrial deine
13 gene structurale, dou gene pentru ARNr i 22 gene pentru
ARNt.
Genele structurale codific enzimele implicate n
metabolismul energetic. O gen pentru citocromul b (cit b), trei
gene pentru subunitile 1-3 ale citocrom-c-oxidazei (COI-III),
ase gene pentru subunitile 1-6 i 4L ale NADH
dehidrogenazei (ND 1-6 i ND4L), dou gene pentru
subunitile 6 i 8 ale ATP-sintetazei (A6 i A8) (fig.8.14).
Genele pentru ARNr controleaz sinteza a dou tipuri de
molecule: ARNr 12S i 16S se asociaz cu proteinele importate
din citoplasm la formarea ribosomilor.
ADN mitocondrial codific doar 22 molecule de ARNt.
De regul, ARNt mitocondrial recunoate specific doar primele
dou baze ale codonului din molecula de ARNm. A treia poziie
a codonului poate fi ocupat de o alt baz din aceeai clas
(purinic sau pirimidinic).
Replicarea ADN mitocondrial nu este limitat la faza de
sintez a ciclului celular. Moleculele de ADN se replic
aleatoriu, unele de dou ori, iar altele - nici odat. Totui, n
fiecare ciclu celular, numrul moleculelor de ADN mitocondrial
se dubleaz, meninndu-se constant cantitatea de ADNmt per
celul. Genele mitocondriale se transmit pe linie matern.
140
Capitolul 8
Transpozonii
Secvenele de ADN capabile s migreze de sine stttor
i ocupa o nou poziie n genom poart denumirea de elemente
genetice migratoare sau transpozoni. Cei mai simpli
transpozoni au fost depistai la E.coli i constau din gena
transpozaza flancat de elemente repetitive invertate. Ele
formeaz o familie cu denumirea de IS (insertion sequences).
De obicei ele se insereaz n locuri int cu o secven specific
pentru fiecare transpozon (des. 8.15).
142
Capitolul 8
Unii transpozoni poart i alte gene, de exemplu gene de
rezisten la antibiotice sau alte preparate medicamentoase. Din
ei face parte familia Tn care conine o regiune central cu gene
specifice, iar regiunile periferice sunt reprezentate de elemente
IS (fig. 8.16).
143
Capitolul 8
Retrotranspoziia are loc n dou etape. Mai nti
elementul migrator se transcrie, apoi de pe copia de ARN cu
ajutorul revertazei (ADN-polimeraz ARN-dependent) are loc
sinteza unei molecule complementare de ADN. Fragmentul nou
format se integreaz n locus nou. Ca efect are loc creterea
cantitii de material genetic.
144
Capitolul 8
Transpozonii pot cauza mai multe rearanjri genomice
dintre care cele mai importante sunt:
translocarea poate provoca deleii sau ntreruperi ale genelor,
ceea ce cauzeaz inactivarea genelor;
elementele migratoare servesc ca substrat pentru sistemele
de recombinare celular; dou copii ale aceluiai transpozon n
diferite poziii n cromozom pot cauza recunoaterea i
mperecherea incorect a cromozomilor pe parcursul crossing-
overului.
Verificarea cunotinelor:
1. Definii noiunile: gen, gen structural, cistron, promotor,
exon, intron, operon, transpozon.
2. Care este structura general a genelor?
3. Care sunt funciile secvenelor promotorilor la eucariote?
4. n ce const structura mozaic a genelor?
5. Ce reprezint operonul?
6. Care sunt particularitile genomului mitocondrial?
7. Prin ce se deosebesc transpozonii IS, Tn i
retrotranspozonii?
145