Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
MACROFAGELE
Macrofagele (MF) provin din monocite.
Monocitele se formează în măduva hematogenă dintr-un precursor comun cu PMN. Din
punct de vedere funcţional monocitele sunt celule imature, în tranzit prin sânge de la locul de
origine – măduva hematogenă, spre ţesuturi. Ele reprezintă între 1 şi 9% din totalul leucocitelor
sanguine. Monocitele rămân în circulaţie aproximativ 3 zile, după care sunt activate la contactul cu
anumite substanţe, aderă de endoteliu, trec în interstiţiu prin diapedeză şi se localizează în diverse
ţesuturi şi organe. Extravazarea este ireversibilă. Raportul estimat dintre MF tisulare şi monocitele
sanguine este de 400/1.
MF se găsesc la nivelul: ţesutului conjunctiv; membranei bazale a vaselor de sânge de
calibru mic; ţesutului pulmonar (macrofagele alveolare); ficatului (celulele Kupffer); sinusoidelor
splenice; nodulilor limfatici; glomerulilor renali; microgliilor centrale; osteoclastelor. MF sunt
prezente difuz în organism, la nivelul ţesutului conjunctiv şi în apropierea membranei bazale a
vaselor sanguine mici. Ele se află în număr mare în zonele unde există un aflux important de
antigene: plămâni, ficat, splină şi ganglionii limfatici. Pe lângă MF din ţesuturi există şi MF libere
în cavităţile seroase: MF peritoneale, pleurale şi sinoviale. În anumite ţesuturi şi organe se găsesc
forme particulare de MF, prezentate în tabelul 1.
1
Tabelul 1. Forme particulare de macrofage
Ţesutul Forma particulară a MF
• ţesutul osos • osteoclastele
• articulaţiile • sinoviocitele
• alveolele pulmonare • MF alveolare
• lobulii hepatici • celulele Kuppfer
• SNC • microglia
• rinichii • celulele mezangiale
2
Rolul MF în cadrul apărării nespecifice (vezi apararea nespecifica)
Rolul MF în cadrul răspunsului imun
MF participă la răspunsul imun datorită funcţiei lor de APC profesioniste. În funcţia de
APC, MF parcurg o serie de etape :
• Captarea Ag
• Fagocitoza Ag
• Prelucrarea Ag
• Conservarea epitopilor
• Prezentarea epitopilor
Captarea Ag
MF captează în special Ag corpusculate: bacterii, virusuri, paraziţi mici, fragmente de
celule self devenite antigenice. Captarea este un proces imunologic nespecific, adică se face la fel,
indiferent de structura Ag. Captarea Ag se face prin receptorii membranari CR şi Fc γ R.
Ag corpusculate se află sub două forme: opsonizate sau neopsonizate. MF captează în
special Ag opsonizate, adică acoperite cu molecule solubile cu rol de opsonine: C3b sau IgG.
• Moleculele de C3b se găsesc permanent în lichidele interstiţiale. C3b se produce continuu, în
cantităţi mici, pe calea alternă a complementului. Moleculele C3b se depozitează pe toate
suprafeţele non-self, indiferent de specificitatea antigenică a acestora. După opsonizarea Ag
corpusculate cu C3b, acestea sunt captate de MF care au pe suprafaţă receptori pentru C3b,
numiţi CR (CR1 şi CR3).
• IgG se găsesc în cantităţi mari în lichidele interstiţiale şi în sânge. Moleculele de IgG recunosc
determinanţii antigenici de pe suprafaţa bacteriilor, de care se leagă prin fragmentul Fab. MF
captează bacteriile opsonizate pentru că au pe suprafaţă receptori pentru fragmentul Fc al IgG,
numiţi Fc γ R.
MF pot să capteze, cu eficienţă scăzută, şi bacterii neopsonizate, prin receptori care
recunosc oligozaharidele din membrana bacteriană (fucoză şi manoză).
Endocitarea Ag sau fagocitoza
Endocitarea este un proces complex care se face prin emiterea de pseudopode mobilizate
printr-un sistem contractil acto-miozinic. Pseudopodele se unesc înglobând Ag corpusculat într-o
vacuolă numită fagozom.
Prelucrarea Ag endocitate
După fagocitarea Ag corpusculat receptorii membranari sunt reutilizaţi.
Fagozomul se uneşte cu lizozomii din citoplasma MF, rezultând o veziculă numită
fagolizozom sau endozom. Ag nativ endocitat este fragmentat de enzimele din lizozomi, în special
de proteaze şi hidrolaze. Problema este degradarea limitată a Ag. Dacă nu este degradat, sau dacă
este degradat complet, Ag nu poate fi prezentat spre LT. De exemplu neutrofilele fagocitează Ag,
dar îl degradează complet. Din fragmentele rezultate este ales fragmentul cel mai imunogen, care
se numeşte epitop.
Conservarea epitopului
În MF se conservă o cantitate mică din epitopi, care sunt eliberaţi progresiv în următoarele
zile. Conservarea are rol în întreţinerea răspunsului imun mai mult timp şi în generarea unui
răspuns imun mai intens printr-o stimulare mai puternică şi prelungită a limfocitelor.
Prezentarea epitopului
Epitopul selectat este cuplat cu moleculele MHC II şi este expus pe membrana MF. Prin
expunerea cuplului MHC II-epitop se face prezentarea epitopului spre alte celule cu rol imun, în
special spre LTH.
Toate MF din organism au funcţie de celule fagocitare, dar numai o parte pot să sintetizeze
MHC II. MF care nu sintetizează MHC II nu participă la răspunsul imun.
3
Rolul imun al MF este complex:
• Iniţial MF captează şi prelucrează Ag
corpusculate.
• MF transportă Ag spre ariile timo-
dependente, adică populate cu LT, ale
organelor limfoide periferice: paracorticala
ganglionilor limfatici şi PALS internă a
splinei.
• În final MF prezintă în aceste arii epitopii
spre LTH.
Eficienţa sa în captarea antigenului este maximã, deoarece receptorul imunoglobulinic
leagã specific epitopii corespunzãtori chiar la concentraţii foarte mici, de 1000 de ori mai mici
decât cele necesare prezentãrii sale de cãtre macrofag sau de cãtre celula dendriticã.
Dupã ce a pãtruns în organism, antigenul este repede înglobat şi depozitat în interiorul
macrofagului. Scoaterea antigenului din circulaţie are o semnificaţie funcţionalã deosebitã,
4
deoarece constituie un depozit din care este eliberat treptat şi stimuleazã imunogeneza.
Antigenul liber în organism poate sã inducã una din cele douã stãri defavorabile pentru
reactivitatea imunitarã:
- poate fi eliminat prea rapid din organism, înainte de stimularea rãspunsului imun;
- dozele prea mari de antigen liber sunt defavorabile reactivitãţii imunitare, prin blocarea
rãspunsului limfocitelor.
Starea caracterizatã prin incapacitatea de rãspuns imun a organismului se numeşte
paralizie imunologicã. Este o stare de blocare completã a reactivitãţii imunitare prin
“inundaţie antigenicã”.
Antigenele moleculare sau particulate cu o bunã imunogenitate sunt reţinute parţial în
macrofag sub o formã rezistentã la degradare, pentru perioade mai lungi de timp.
Macrofagele modificã imunogenitatea antigenelor: dupã legarea de macrofag, cele
slab imunogene devin mai imunogene, iar cele cu imunogenitate ridicatã, dupã legarea de
macrofag îşi pierd parţial aceastã calitate.
CELULELE DENDRITICE
Celulele dendritice reprezintă aproximativ
2% din populaţia celulară a unui ţesut. Acestea
constituie un grup heterogen de celule, care se
diferenţiază dintr-un progenitor medular comun
CD34+ (dendritic cells), din care rezultă două linii
celulare, una mieloidă şi una limfoidă:
Din linia mieloidă se formează celulele
Langerhans şi celulele interstiţiale. Acestea
sunt localizate la nivelul principalelor porţi
de intrare în organism (epiderm, mucoase),
fiind primele care vin în contact cu Ag.
Din linia limfoidă se maturează alte celule dendritice.
Celulele dendritice mature şi activate secretă citokine (IL-1, TNF-α, IL-8, IL-10, IL-
12) şi chemokine, care acţionează autocrin sau paracrin asupra altor celule dendritice sau LT.
Celulele dendritice îndeplinesc în cadrul răspunsului imun următoarele funcţii:
Captează Ag de la porţile de intrare.
Transportă Ag spre organele limfoide secundare – ganglionii limfatici şi splină.
Prezintă în organele limfoide secundare Ag spre LB şi LT.
5
Celulele dendritice sunt specializate în prezentarea Ag. Ele se caracterizează printr-o
structură arborescentă, cu un corp celular cu puţină citoplasmă perinucleară şi numeroase
prelungiri ramificate care pătrund printre celulele din jur. Aceste pseudopode au un aspect
asemănător cu dendritele neuronilor :
• Sunt foarte multe, de ordinul sutelor pe o celulă
• Sunt foarte subţiri şi lungi, depăşind de 4-5 ori diametrul celulei
Datorită lungimii lor, pseudopodele celulelor dendritice permit supravegherea unor spaţii
întinse de ţesut cu ajutorul unui număr relativ mic de celule.
Celulele dendritice au rol de APC pentru că pot să capteze şi să prezinte Ag. Ele au pe
suprafaţă principalii receptori implicaţi în funcţia de APC : CR, Fc γ R şi pot să sintetizeze
moleculele MHC II.
Toate celulele dendritice se produc în măduva hematogenă şi apoi trec în sânge. Din
sânge majoritatea intră în ţesuturi şi organe, la porţile de intrare a Ag. Acestea sunt celulele
Langerhans şi celulele dendritice interstiţiale. Un număr mai mic dintre celulele dendritice intră
direct în organele limfoide secundare, în regiunile cu LB aşezate în foliculi limfoizi. Acestea sunt
celulele dendritice foliculare.
Celulele Langerhans sunt celulele
dendritice din tegumente şi submucoase. Ele
sunt aşezate la porţile de intrare ale Ag în
organism:
• În special subcutanat, în strat aproape
continuu în stratul spinos al epidermului.
• La nivelul submucoaselor bucală,
faringiană, bronşică, digestivă, a colului
uterin.
Rolul celulelor Langerhans este de
captare a Ag opsonizate. După ce
celulele Langerhans captează Ag din
ţesutul subcutanat şi submucos, ele trec
în limfă şi se transformă în celule cu
văluri, care au numai rol de transport al
Ag, aşa că ele nu au pe suprafaţă nici
receptori pentru Ag, nici molecule
MHC II. Celulele cu văluri ajung în
ganglionii limfatici, în zonele populate
cu LTH. Acolo ele se transformă în
celule dendritice interdigitate, care
prezintă Ag spre sute de LTH, cu
ajutorul moleculelor MHC II. Celulele
Langerhans, celulele cu voal şi celulele
interdigitate sunt stadii diferite ale
liniei celulelor dendritice. Iradierea
tegumentului cu raze UV duce la
dispariţia celulelor Langerhans.
6
Celulele dendritice interstiţiale se găsesc în interstiţiul organelor nelimfoide: ficat, rinichi,
plămân, cord. Ele captează Ag cu eceptorii de suprafaţă. Celulele dendritice interstiţiale nu
prezintă Ag, de aceea nu sintetizează moleculele MHC II. După ce celulele dendritice interstiţiale
captează Ag, ele trec în sânge şi se transformă în celule dendritice sanguine. Ele ajung în pulpa
albă a splinei, unde se transformă în celule dendritice interdigitate şi prezintă Ag spre LTH.
Celulele dendritice foliculare. O mică parte din celulele dendritice produse de măduva
hematogenă intră direct în organele limfoide secundare, respectiv în ganglionii limfatici şi pulpa
albă a splinei, în zonele populate cu LB. Celulele dendritice foliculare captează şi concentrează Ag
solubile, pe care le prezintă spre LB care sunt grupate
sub formă de foliculi limfoizi. Celulele dendritice
foliculare au pe suprafaţă un număr mare de receptori
FcγR şi CR. Ele prezintă prelungiri filiforme acoperite
cu antigene, care în 2-3 zile devin moniliforme, apoi se
fragmentează în iccosomi (immune complexes coated
bodies). Iccosomii sunt particule mici de citoplasmă
învelite cu antigene. LB captează iccosomii,
prelucrează Ag şi le prezintă apoi spre LTH, pe
moleculele MHC II. În această etapă LB au funcţie de
APC.
Celulele dendritice (DCs) au fost descrise în primul rând de către Steinman & Cohn în
1973. Aceste celule au fost identificate în splina șoarecilor. Progresele realizate în cercetarea cu
privire la aceste celule de atunci le conferă statut de celule-cheie care coordonează răspunsurile
imune. Ele sunt distribuite de-a lungul întregului corp, dar mai ales predomină în țesuturile
periferice. DCs imature joaca un rol central în activarea celulelor T naive și dirijarea răspunsului
imun ulterior către un ajutor TH1, Th2, Th17 sau Treg. Astfel, acestea sunt principalii reglatori ai
reacției ulterioare, care produc răspunsul optim împotriva unui antigen dat și dezvoltarea imunității
sau toleranța. Caracteristicile unice ale DCs le face celulele țintă ideală pentru vaccinuri. Ele apar
în starea lor imature în țesuturile periferice și odată ce acestea captează un antigen, acestea sunt in
masura sa se maturizeze si sa devina celule prezentatoare de antigen (APC), apoi migrează la
ganglionii limfatici. Acolo prezintă antigeni către MHC I și II ai LT, glicolipide and glicopeptide
către LT și LNK, polipeptide către LB.
Familia DCs este constituită din mai multe subseturi distincte. În termeni generali,
subseturi DC sunt definite pe baza expresiei markerilor de suprafață. Cum s-a mai precizat, există
două linii principale de celule dendritice la om:
7
DCs mieloide (clasice sau convenționale), cu originea într-o progenitoare mieloidă în
măduva osoasă
DCs plasmacitoide (PDCs) cu originea într-o progenitoare limfoidă în organele limfoide.
Mai recent (Salvador et al. 2012), celulele dendritice (DCs) au fost clasificate în două
tipuri: din sânge și din piele.
Celulele dendritice sanguine
PDCs sunt caracterizate prin expresia CD303 (BDCA-2), CD123 (IL-3Rα) și CD304
(BDCA-4) iar MDCs prin CD11c. În sânge, MDCs sunt împărțite în trei subseturi suplimentare,
numite CD1c + DCs, CD141 + DCs și CD16 + DCs. PDCs joaca un rol-cheie în imunitatea
antivirală pentru ca produce cantități mari de interferon de tip I (IFN), factor de necroză tumorală
(TNF) și IL-6. PDCs îmbunătățește funcționarea altor celule ale sistemului imunitar, cum ar fi
MDCs, NK sau LB, astfel, leagă brațele înnăscute și adaptive ale răspunsurilor imune. În condiții
de echilibru, PDCS se gasesc in fluxul sanguin. Ca urmare a inflamației, PDCS poate ajunge la
site-ul infecției și să ia parte la asimilarea de antigen și, ulterior, migrează la ganglionii limfatici
prin venulele endoteliale înalte. PDCs umane sunt capabile să prezinte peptide pe ambele molecule
MHC. Două subseturi PDC pot fi diferențiate în funcție de molecula de expresie CD2 (Matsui și
colab. 2009): DC2high și CD2low.
MDCs nu sunt atât de limitate la sânge și pot fi găsite, de asemenea, în mai multe țesuturi
periferice sau în organele limfoide secundare [Klechevsky și colab. 2009]. Ele sunt, de asemenea,
superioare PDCS la prezentarea antigenului [Lore și colab. 2007; Jones și colab. 2007]. MDCs
imature exprima o gamă largă de TLRs: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 și 10.
Celulele dendritice din piele
Pielea conține trei tipuri de MDCs: celulele Langerhans rezidente în epidermă (LCS) și
celulele dermice CD1a + și CD14 + DCs [Valladeau et al. 2005] care prezintă diferențe fenotipice
și funcționale.
8
LIMFOCITELE B
LB stimulate antigenic pot să aibă funcţie de APC pentru că :
• Au pe suprafaţă receptorii de captare a Ag: CR, Fc γ R, BCR.
• Produc MHC II.
Captarea Ag de către LB are următoarele caractere :
• LB captează numai Ag solubile, adică proteine simple.
• Captarea Ag este în principal imunologic specifică. Ea se face cu receptorii BCR care recunosc
determinanţii antigenici conformaţionali din Ag solubile.
• Într-o măsură mai mică la captarea Ag participă şi receptorii CR şi Fc γR, astfel că LB fac şi
captare imunologic nespecifică.
9
NEUTROFILELE
Neutrofilele se nasc în măduva hematogenă, din celula suşă comună pentru monocite şi
granulocite. Din seria granulocitară se diferenţiază neutrofilele (peste 90%), eozinofilele şi
bazofilele.
Neutrofilele trăiesc sub 24 h, chiar dacă nu extravazează spre un focar inflamator. Cam
jumătate din ele se deplasează lent, rostogolindu-se pe endoteliu.
În zonele cu procese inflamatorii neutrofilele extravazează prin diapedeză şi sunt atrase
prin chemotactism. Factorii chemotactici sunt:
• Produşii bacterieni
• Anafilatoxinele
• IL-8
Neutrofilele posedă receptori Fc γ R şi CR. Ele fagocitează:
• Complexe imune formate din antigene, anticorpi şi fracţiunea C3b
• Bacterii opsonizate
• Mai puţin celule mici, de exemplu hematii
Dacă capacitatea lor de fagocitoză este depăşită, neutrofilele deversează în exterior
enzimele lizozomale şi radicalii de oxigen producând leziuni tisulare.
10
• MHC I au rol în rejectia grefelor : domeniul α3 monomorf de pe celula self este recunoscut de
receptorul CD8 al LTC. Dacă celula este non-self, CD8 nu recunoaşte domeniul α3 şi celula
este distrusă.
Sunt esentiale pentru activarea si informarea LT CD8 (citotoxice) despre prezenta ag
patogen in cellule.
11
Clasa MHC I
Clasa MHC II
12
Semnificaţia MHC:
Rol în răspunsul imun
Rol în transplant
Rol în predispoziţia faţă de boli
Antigenele implicate în transplant sunt:
• Antigenele majore de histocompatibilitate (MHC/HLA)
• Antigenele minore de histocompatibilitate
• Alte antigene
– de grup sanguin
– specifice de ţesut
– superantigene
13
Pentru ca intervenţia limfocitelor Tc sã fie eficientã, este necesar ca moleculele MHC sã
fie prezente pe oricare celulã ce poate fi infectatã de un virus sau poate sã fie transformatã
malign. Pe de altã parte, moleculele MHC, al cãror rol esenţial este acela de a prezenta
epitopii nonself, trebuie sã permitã acţiunea eficientã şi rapidã a limfocitelor Tc.
Moleculele MHC îndeplinesc şi funcţii neimune. Moleculele MHC I sunt componente
ale receptorilor de hormoni. De exemplu, linia celularã stabilizatã Daudi nu exprimã
moleculele MHC I şi nu are nici receptor pentru insulinã, deoarece nu sintetizeazã β 2-
microglobulina.
14