LP 9

Fosfataza alcalină – FAL sau ALP

FAL este o α-globulină care face parte din clasa hidrolazelor.

Catalizează hidroliza esterilor fosforici la pH alcalin;
Participă la transportul fosforului.
Există trei izoenzime: hepatică, osoasă, intestinală dar și o formă tranzitorie, in
sarcină. Izoenzimele FAL pot fi determinate individual în laboratorul clinic.
Se află în:

- sistemul osos
- mucoasa intestinală
- corticala renală
- glanda mamară
- ficat
- placentă - forma tranzitorie

Dozarea activității FAL este recomandată în diagnosticul diferențial al bolilor

hepatice, afecțiunile osoase, hiperparatiroidism și ca marker tumoral în depistarea
metastazelor hepatice sau osoase.

Determinarea activitatii FAL prin metoda spectrofotometrică

Principiul metodei

In mediu alcalin, FAL catalizează hidroliza monofosfaților. In urma reacției

se formează p-nitrofenol și fosfat anorganic. Ionii de Mg2+ activează
enzima. Activitatea enzimatică este direct proporțională cu concentrația de
p-nitrofenol eliberată, respectiv cu intensitatea colorației obținute.

Reactivi

Reactiv R1 – tampon dietilamina, pH 9,8 si MgCl 0,6 mmol/l

Reactiv R2 – fosfat de p-nitrofenil 10 mmol/l
Se amesteca R1 cu R2 in cantitati recomandate de producator.

Proba

Ser nehemolizat sau

Plasmă heparinizată

Mod de lucru

Intr-o eprubetă se pipetează 1 ml amestec R1 + R2 si 20 μl ser sau plasmă.

Se agită si se incubează timp de 1min. la 370C.
Se masoara variatia absorbantei la λ = 405 – 410 nm față de apă distilată, in cuve
de 1 cm, timp de 3 min.
Se calculează variația absorbanței pe minut (ΔA/min).

Calcul

CP = (ΔA/min) x 3000 la λ = 405 nm

unde: CP – concentrația probei

ΔA/min – variatia absorbantei pe minut

Daca variatia absorbantei/min este mai mare de 0,25 U/l, proba se dilueaza cu
NaCl 1:10, si se va relua analiza si se va tine cont de dilutie (x 10).

Valori normale

Femei 55 – 170 UI/l

Barbați 70 – 175 UI/l
Copii in perioada de creștere < 700 UI/l

Variații fiziologice

FAL depinde de vârstă și sex.

Valori mari ale izoenzimei osoase duble sau triple față de adulți se găsesc la
copii in perioada de creștere datorită creșterii osului in lungime (300 – 500UI/l).

Variații patologice
Este singura enzima care se determină pentru diagnosticul afecțiunilor osoase.

Valori crescute:
- de origine hepatică cele mai marcate creșteri se intâlnesc in obstrucția
mecanică a căilor biliare extrahepatice sau in colestaza intrahepatică:
- o creștere de 10 ori – in cancer de cap de pancreas, litiaza coledociană, hepatita
colestatică medicamentoasă;
- o creștere de 5-20 ori – in ciroza biliara primitiva, carcinoame hepatice primare
sau metastatice;
- creșteri usoare/moderate (de 2 ori normalul) se inregistreaza in hepatita virala si
ciroza;
- in mononucleoza infecțioasă și in infecția cu citomegalovirus pot apărea creșteri
de până la 5 ori normalul;
- in ingestia cronică de alcool, fosfataza alcalină poate avea valoare normală sau
crescută, sunt insă constant crescute GGT, AST si eventual bilirubina;
- valori crescute mai pot aparea in bolile hepatice de cauză infiltrativă (sarcoidoza,
tuberculoza, amiloidoza, abcese).
- de origine osoasă: hiperparatiroidism, hipertiroidism, boala Paget,
metastaze osoase, tumori osoase, osteomalacie, rahitism, in evolutia fracturilor
multiple.
- de origine placentară: apar in saptămânile 16-20 ale unei sarcini normale,
crescând până la nivelul maxim (de 2 ori normalul) la debutul travaliului.
- de origine intestinală: in diverse afecțiuni ulcerative ale tractului
gastrointestinal, malabsorbtie severă, infarct intestinal.
- in neoplasme: ocazional tumorile (in special hipernefromul) pot produce
o fosfataza alcalina identica sau similara cu forma placentara (izoenzima Regan).

Valori scazute:

• hipofosfatazia familiala;
• hipotiroidism, cretinism;
• malnutritie;
• deficit de zinc;
• deficit de magneziu;
• femeile aflate in post menopauza cu osteoporoza care urmeaza tratament
estrogenic substitutiv.