Curs 2

BioSinteza proteinelor

Ribozomul este locul sintezei proteice , constituie un ansamblu ribo nucleo proteic

70S- subunitate mare 50 s format din Arn ribozomal 23 S si 5 S

Subunitatea mica- 16S arnr

La Pk exista asocieri de mai multi ribozomi atasati unui singur arn m , complexe numite poli ribozomi
= polizomi=ergozomi

Sunt imperecheri imperfecte intre bazele azotate care nu respecta complementaritatea whatson
crick (interactii wabble)

Structura arn T

Prezinta urmatoarele elemente distincte

Capat 5’ intotdeauna fosforilat

Capat 3’ care intotdeauna se termina cu inlantuirea de nucleotide cca, dintre care, la capatul
adenozinei exista o grupare hidroxil libera

Bucla DHU- (dihidrouridina)

Bucla anticodon- interactia codon anticodon – are o structura standard de 7 nucleotide

Structura 3d a moleculei de arn t are forma literei L intoarsa

Activarea aminoacizilor (legarea la capatul 3’ al ARNt)

Formarea legaturii peptidice, necesita aport energentic, forma activa a unui aa se noteaza
aminoacil¬arnT

Aa+arnT+atp ===> aa¬arnt +amp+pp, reactie catalizata de aminoacil arnt sintetaza

Aceste enzime pot fi de 2 clasa, de clasa 1 cand acileaza gruparea 2’oh din structura ribozei acilarea
pentru aa mai mici

Desen8

Cele de clasa 2 acileaza gruparea 3’ oh a ribozei

Trna joaca un rol de adaptor in procesul de activare a aminoacizilor

Etapele biosintezei proteinelor

1 etapa de initiere, in care se leaga primul aa la arnt , acest lucru se intampla in situsul p al
ribozomilor, primul aa la pk este formil met iar la ek met

2 etapa de elongare- formarea de leg peptidice intre aa, rezulta elongarea peptidei, si transferul
consecutiv din situsul a p si apoi in e , de unde este eliminat

3 etapa de terminare, presupune eliberarea peptidei din situsul e si dezasamblarea ribozomilor

Trna este eliberat si folosit pentru urmatoarea sinteza

1. Initierea

presupune atasarea formil metoninei la arnT

formarea complexului de initiere – 30s (subunitatea mica a ribozomului )

asamblarea intregului ribozom

aceasta etapa de initiere este asistata de 3 factori de initiere if 1 2 3

mai este nevoie si de ioni de Mg si consum de GTP

desen 10

dupa eapa de activare , adica atasarea n formil metioninei corespunzatoare codonului aug ,
urmeaza asamblarea subunitatii mici a ribozomului la arn mesager . Aceasa atasare se produce la
nivelul secventei shine -dalgarno . Acestei secvente ii corespunde secventa complementara ugg
ugg de la nivelul 16 s arn r din structura subunitatii mici

if1 se ocupa cu disocierea subunitatilor ribozomale (etapa de terminare)

if3 se leaga la subunitatea 30 s si o stabilizeaza astfel incat sa nu se asocieze cu subunitatea mare

50 s , decat in timpul sintezei proteice atunci cand nu se intampla sinteze, aceste subunitati
dezasamblate sa nu se asocieze intre ele

if2 este cel responsabil de legarea gtp si asista acea prima reactie de activare (legarea formil
metioninei la arn t )

2etapa de alungire presupune

Mutarea aminoacil¬arnt la situsul a

Formarea legaturii peptidice

Translocarea ribozomului

3terminarea

Apare cand in structura arn m se ajunge la codonul stop

Codonii stop sunt uaa uag uga

Aceasta etapa e asistata de niste factori de eliberare

Rf1 2 3

Rf1 recunoaste uaa uag

Rf2 uaa si uga

Rf3 asista ribozomul in dezasamblare si terminarea translatiei

Terminarea inseamna ca peptida este eliberata de enzima numita peptidil transferaza anrt este
eliberat de la situsul e si reciclat

Intregul aminoacid formil metionina este scindat din polipeptida

Energetica biosintezei proteice

Se consuma 4 legaturi macroergice

2 la activarea polipeptidului

O molecula de gtp pentru mutarea in situsul a

A 4-a molecula- o molecula de gtp pentru translocarea ribozomului si a peptidil trna

Inhibitori ai transcrierii proteice

Furomicina are o structura naaloga cu aminoacil trna – se poate lega la situsul a si astfel sa opreasca
sinteza proteica

Streptominina – inhiba initierea , produce citirea gresita a anr mesager

Tetraciclina blocheaza subbunit 30 s

Eritromicina ------------//-----------50 s

Eukariotele

Ribozomul are 2 subunitati

Mare 60 s 28 s arnr 5 s arn s 5,8 s specific ek

Mica 40 s – arn r 18 s

Arnm este monocistronic

Aminoacidul de initiere este metionina , cu acelasi codon start aug

Fiind monocistronic, nu sunt necesare secvente shine dalgarno

La ek factorii de initiere se numesc cbp cap binding protein