Nițoi Diana Andreea

CCSPA

Analiza microbiologică a apei

Indicatorii bacteriologici au un rol important în aprecierea calității apei. Aprecierea stării

de igiena a apei presupune: determinarea numărului total de germeni și a bacteriilor coliforme.

1. Determinarea numărului total de germeni

Numărul total de germeni reprezintă numărul de colonii care se dezvoltă în urma

însămânțării de 1cm3 de apă în mediu de cultură, după 48 ore de termostatare la 37 ºC. În cazul
în care se consideră că apa reprezintă un grad ridicat de contaminare mai mare se fac însămânțări
din diluții, conform schemei I, coloniilor din plăcile cu 30-300 de colonii.

2. Determinarea bacteriilor coliforme

Sursa cea mai importantă de poluare bacteriană a apei o constituie reziduurile,

excrementele umane și animale, care pot conține germeni patogeni. Metoda pentru determinarea
bacteriilor coliforme include teste prezumtive, de confirmare, bazate în primul rând pe
capacitatea bacteriilor de a fermenta lactoza cu producere de acid lactic, CO2, H2, timp de 48 de
ore la 35 ºC.

Testul prezumtiv constă în inocularea probei în mediu nutritiv cu, mediu de îmbogățire
favorabil înmulțirii atât a bacteriilor coliforme, cât și a altor bacterii care folosesc lactoza ca
sursă de carbon.

Testul de confirmare, constă în inocularea culturilor din eprubetele pozitive ale testului
prezumtiv pe medii selective, care inhibă dezvoltarea bacteriilor însoțitoare și asigură înmulțirea
bacteriilor coliforme. Din grupul coliform, cel mai frecvent este întâlnit genul Escherichia, cu
specia Escherichia coli, care indică o contaminare fecală recentă.

3. Tehnica de lucru

Din probă și diluții succesive de inoculează câte 1 mL în câte 3 eprubete cu BCLP. Se

termostatează la 37 ºC timp de 24-48 ore. Se înregistrează eprubetele pozitive (mediu tulbure,

1
 Nițoi Diana Andreea
CCSPA
bule de gaz în plutitor, pH acid), iar eprubetele negative sunt din nou termostatate timp de 24 ore
și se înregistrează din nou eprubetele pozitive.

Pentru confirmare, din eprubetele pozitive se recoltează câte o ansă și se inoculează

eprubete cu BBLVP, după incubare la 37 ºC timp de 48 de ore, În condițiile în care se produc din
nou gaze în plutitor, tulburare, virajul culorii indicatorului verde briliant de la verde la galben,
înseamnă că în apă sunt prezente bacteriile coliforme.

4. Calcul și interpretare

Folosind, metoda titrului, în funcție de numărul eprubetelor pozitive se stabilește cifra

caracteristică și din tabelul lui Mac Crady, corespunzător cifrei caracteristice, se notează numărul
probabil de coliformi. Pentru a calcula numărul probabil de coliformi/ cm 3 produs analizat,
valoarea din tabel se înmulțește cu factorul de diluţie corespunzător primei cifre din cifra
caracteristică.

Numărul de coliformi admiși în 100 mL apă, conform SR EN ISO 9308-1/2001, este 0.

2
 Nițoi Diana Andreea
CCSPA

3
 Nițoi Diana Andreea
CCSPA