LP 7

Determinarea acidului lactic (lactatului)

Acidul lactic este produs de celulele musculare, eritrocite, creier şi alte Ńesuturi în
timpul producerii anaerobe de energie. Producerea anaerobă de energie apare în
condiŃii hipoxice sau de nefuncŃionare corespunzătoare a mitocondriilor. Acidul lactic
rezultat este metabolizat la nivel hepatic.

În mod normal acidul lactic format disociază imediat şi se formează sarea acidului
lactic. Această reacŃie are loc dacă mediul în care se găseşte acidul lactic sau a fost
produs este mai mult alcalin (disocierea lui este influenŃată de nivelul de aciditate din
muşchi, spaŃiu interstiŃial şi sânge).

În timpul efortului fizic, principalul combustibil al muşchiului este glucoza, care

poate proveni fie din rezervele de glicogen, fie din sânge. Întregul complex de reacŃii
ce se desfăşoară are ca finalitate producerea de energie înmagazinată în molecule de
ATP. Pe lângă energie aceste reacŃii chimice furnizează şi materia primă în
regenerarea permanentă a celulelor şi Ńesuturilor.

Rolul acidului lactic în organism:

– stimularea producŃiei de glucoză şi glicogen la nivel hepatic;
– ajutor al utilizării eficiente a carbohidraŃilor ca sursă rapidă de energie;
– principală sursă de energie pentru creier, inimă şi muşchi;
– rol în mecanismele de adaptare la stres;
– stimulator al secreŃiei de testosteron şi a hormonilor de creştere.

Acidul lactic se dozează pentru:

- stabilirea gradului de oxigenare tisulară

- depistarea unei acidoze

Principiul metodei

În prezența lactat oxidazei ți a oxigenului, lactatul se transformă în piruvat ți

apă oxigenată. Apa oxigenată rezultată din reacție, în prezența peroxidazei ți a
unui compus colorat se transformă în chinonimină de culoare roție. Intensitatea
colorației este direct proporțională cu concentrația lactatului.
 lactat oxidaza
lactat + O2 → piruvat + H2O2
peroxidaza
H2O2 + 4-clorfenol + 4-aminoantipirina → chinonimină + H2O + HCl

Materiale necesare
eprubete
stativ pentru eprubete
pipete de sticlă
pipete semiautomate
conuri
termostat
spectrofotometru
cuve 1 cm
vase cu soluŃie dezinfectantă
apă distilată
tifon

Reactivi
Reactiv 1: standard lactat
Reactiv 2: 4-clorfenol
Reactiv 3: 4-aminoantipirina, peroxidază, lactat oxidază

Proba
Plasmă nehemolizată

Tehnica de lucru

Se pregătesc trei eprubete: martor, standard, probă.

Se pipetează în eprubete conform tabelului următor:

Reactivi Martor Standard Proba

Amestec reactivi R2 + 1 mL 1 mL 1 mL
R3
Apă distilată 10 µL – –
Standard (R1) – 10 µL –
Probă – – 10 µL

După amestecare şi incubare timp de 5 minute la 25ºC (30, 37ºC) se măsoară

extincŃiile probei (Ep) şi standardului (Es) faŃă de martor, la lungimea de undă de 505
nm, în cuve de 1 cm.
Calcul

C p = E p / E s × Cs

unde:
Cp = concentraŃia probei
Ep = extincŃia probei
Es = extincŃia standardului
Cs = concentraŃia standardului

Valori normale: 5–20 mg/dL

VariaŃii patologice:
Valori crescute ale acidului lactic se întâlnesc în:
şoc
ischemii tisulare
intoxicaŃie cu CO/alcool etilic
afecŃiuni hepatice severe
insuficienŃă respiratorie
defecte metabolice ereditare
diabet zaharat
efort fizic intens

Valorile scăzute nu au semnificație clinică