LP 6.

Dozarea LDH / 2 ore

Determinarea activitatii LDH LDH este o enzima intracelular, larg distribuita in organism, fiind intalnita cu precadere in rinichi, miocard, musculatura scheletica, creier, ficat si plamani. Desi cresterile LDH sunt nespecifice, acest test este util pentru confirmarea diagnosticului de infarct miocardic sau pulmonar. In infarctul miocardic persistenta nivelului LDH crescut este mai indelungat dect a celorlalte enzime. LDH este o oxidoreductaz ce particip la glicoliza anaerob, catalizand reactia reversibila de conversie a acidului lactic in acid piruvic. Este o enzim citoplasmatic tetramerica, compusa din subunitati H (Heart) si M (Muscle), larg distribuita in organism.
LDH se gaseste in aproape toate tesuturile organismului, de aceea cresterea nivelului LDH are o valoare diagnostica limitata, in absenta corelarii cu datele clinice si alte investigatii de laborator. Efortul fizic sustinut precum si efortul din cursul travaliului pot determina cresteri ale LDH. Afectiunile cutanate pot produce false cresteri ale LDH.

LDH este un indicator nespecific de lezare tisulara. Pentru a identifica sursa cresterii nivelului enzimatic sunt necesare izolarea si cuantificarea celor 5 fractiuni diferite ale LDH-ului rezultate prin combinarea in diferite proportii a celor doua tipuri de monomeri H si M: LDH-1 (H4), LDH-2 (H3M), LDH-3 (H2M2), LDH-4 (HM3) si LDH-5 (M4). Specificitatea tisulara deriva din faptul ca in anumite tesuturi exista sinteza specifica de diferite subunitati in raporturi bine definite. Astfel celulele cardiace, eritrocitele si rinichii sintetizeaza preferential subunitati H (LDH-1 -H4), in timp ce hepatocitele sintetizeaza aproape exclusiv subunitati M. Musculatura striata scheletala produce, de asemenea, in mare masura, subunitati M, astfel incat LDH-5 creste atat in afectiuni hepatice cat si musculare. LDH-1 si LDH-5 sunt cel mai adesea utilizate pentru a indica patologie cardiaca sau hepatica. LDH-2 se gaseste in eritrocite, inima, rinichi, sistemul reticuloendotelial, LDH-3 se intalneste preferential in plamani, limfocite si pancreas, iar LDH-4 in musculatura striata, ficat, rinichi sau pancreas2;3. Recomandari pentru determinarea izoenzimelor LDH Diagnosticul afeciunilor cardiace, hepatice, musculare, renale, pulmonare sau hematologice; Diagnosticul diferenial al bolilor cardiace, hepatice, musculare, renale, pulmonare sau hematologice; Diagnosticul IMA (infarct miocardic acut) in combinatie cu creatinkinaza totala (CK) si CK-MB; Investigarea cauzelor inexplicabile de cresteri LDH; Detectarea formelor macro-LDH.

Recomandari pentru determinarea LDH diagnosticul retroactiv al infarctului miocardic; stabilirea gradului de activitate a bolii in alveolita fibrozant criptogenic i in alveolita alergic extrinsec; marker al hemolizei in vivo (anemii hemolitice) sau in vitro (artefact); monitorizarea terapiei citostatice in diverse tumori. Dozarea LDH prin metoda spectrofotometrica (cinetic) Pp. metodei Lactat dehidrogenaza (EC 1.1.1.27: L-lactat: NAD+ Oxidoreductaza; LDH) catalizeaz conversia piruvatului la L-lactat n prezena NADH, care este transformat n NAD+. Viteza de conversie NADH/NAD+ este msurat la 340 nm, i este proporional cu activitatea LDH. Reactivi Reactiv R1 - tampon phosphat pH 7.50 50 mM Reactiv R2 piruvat de sodiu 0.60 mM, NADH 0.18 mM. Se amesteca R1 cu R2 in cantitati recomandate de producator. Proba Ser nehemolizat, proaspat Plasma heparinizata Mod de lucru Intr-o eprubeta se pipeteaza 1 ml amestec R1 + R2 si 10 l ser sau plasma. Se agita si se incubeaza timp de 1min la 370C. Se masoara variatia absorbantei la = 340 nm fata de apa distilata, in cuve de 1 cm, timp de 3 min., la fiecare minut. Se calculeaza variatia absorbantei pe minut (A/min). Calcul CP = (A/min) x 16030 in U/l unde: CP concentratia probei A/min variatia absorbantei pe minut Factor de conversie: U/L x 0.0167 = kat/L.

Valori normale Adulti 135 - 225 U/l Sugari 0 1 an 225 600 Copii 2 14 ani 120 - 300 Variatii fiziologice crete in efort fizic

Variatii patologice Valori crescute: in infarctul miocardic apar niveluri crescute de LDH la 36-55 ore de la debut, care persista 3-10 zile; in infarctul pulmonar cresterile LDH se inregistreaza in decurs de 24 ore de la debutul durerii toracice; - insuficienta cardiaca congestiva, afectiuni hepatice (ciroza, alcoolism, hepatita acuta virala), tumori solide, leucemii, limfoame, hipotiroidism, afectiuni musculare (distrofii, traumatisme), anemii megaloblastice si hemolitice, convulsii, delirium tremens, soc, hipoxie, hipotensiune, hipertermie, infarct renal, pancreatita acuta, fracturi, obstructie intestinala, mononucleoza infectioasa1. Valori scazute: se asociaza cu un raspuns bun la terapia citostatica