Investigarea

dezechilibrului
leucocitar

1
 ELEMENTELE SERIEI
ALBE

POLIMORFONUCLEARE MONONUCLEARE

Bazofile Neutrofile
Eozinofile Monocite Limfocite
2
 POLIMORFONUCLEARE
NEUTROFILELE - fagocitoza (PMN neutrofile
fagociteaza in 3 etape:leucotaxia, ingestia, etapa
bactericida)
- secretie (transcobalamina, alfa-
globulina)
EOZINOFILELE - fagocitoza; factori activi chemotactic
: complexe antigen-anticorp, fibrina, histamina; mai
putin active decat neutrofilele pe bacterii si fungi
BAZOFILELE - se degranuleaza eliberand heparina,
histamina, serotonina
3
 Bazofil FSP
Neutrofil FSP

Eozinofil FSP 4
 MONONUCLEARE
LIMFOCITELE recunosc antigenele (receptori
specifici); dupa interactiunea cu Ag secreta
substante efectoare ce duc la distrugerea lui;
recunosc antigenele tisulare proprii-self-nu
reactioneaza(toleranta); 2 populatii de limfocite: T
(raspuns celular) si B (raspuns umoral)
MONOCITELE devin active in tesuturi; indeparteaza
celule lezate, regleaza functiile limfocitelor, aparare
impotriva unor microorganisme
5
Limfocit FSP Monocit FSP

6
 TESTE SCREENING
A. LEUCOGRAMA cuprinde NUMARAREA
LEUCOCITELOR si FORMULA LEUCOCITARA

1. NUMARAREA LEUCOCITELOR
-pipeta Potain cu bila alba (diviz. 0.5-sg, 11 lichid
dilutie), dilutie 1:20, camera de numarare Burker-
Turck, se numara pe 4 patrate de 1mm2, se face
media, se face corectia de inaltime si dilutie: nr.
Leucocite=Mx10x20
-valori normale: 4000-9000/mm3 la adult
7
 VARIATIILE NUMARULUI DE LEUCOCITE

a. Leucocitoza nr >10000/mm3
fiziologica-hemoconcentratie, efort muscular intens
patologica- inflamatii, in special infectioase
b. Reactia leucemoida- crestere masiva sugerand
leucemia; determinata de stimularea maduvei de
toxine bacteriene, chimice, virusuri
c. Leucopenia nr sub 3500/mm3
fiziologica-batrani, surmenaj
patologica-inhibitie medulara(radiatii, citostatice,
virusuri) sau distrugere exgerata(boli autoimune,
hipersplenism) 8
2. FORMULA LEUCOCITARA-raportul procentual
al leucocitelor pe frotiul de sange periferic dupa
numararea a cel putin 100 elemente.
-coloratia May-Grunwald-Giemsa
NUMAR LEUCOCITE ADULT(4-9000) 0/0 VALOARE ABSOLUTA
NEUTROFILE 1-4 0-300
NESEGMENTATE
NEUTROFILE 50-70 2500-6000
SEGMENTATE
EOZINOFILE 1-4 50-300
BAZOFILE 0-1 0-80
LIMFOCITE 20-40 1200-2400
MONOCITE 4-8 240-600
9
 VARIATII PATOLOGICE ALE FL
-neutrofilia- (>6500/mm3) infectii bacteriene, boli
inflamatorii, tumori, stress, arsuri.
-neutropenia-(< 1500/mm3); (<500/mm3)
agranulocitoza (severa); medicamente,
splenomegalie
-eozinofilia-(>500/mm3)boli alergice, iradiere; boli
dermatologice, parazitare
-eozinopenia-(<500/mm3)stress, exces de ACTH,
cortizon
-bazofilia (>80/mm3)-leucemie mieloida cronica,
splenectomie, Hodgkin, colita ulceroasa, varicela

10
 -limfocitoza (> 2500/mm3)-relativa(nr. limfocitelor
e neschimbat dar scade nr. neutrofile); acompaniaza
situatiile cu neutropenie; sau absoluta (creste nr. de
limfocite), in leucemie limfocitara cronica,
mononucleoza infectioasa, pertusis, infectii
virale(rubeola, rujeola), bacteriene(tbc, bruceloza,
sifilis)
-limfopenie (<1200/mm3 )-falsa(cresterea
granulocitelor) sau reala(imunodeficiente, Hodgkin)
-monocitoza(>750/mm3)-leucemie cu monocite,
mononucleoza infectioasa, endocardita bacteriana
-monocitopenie(<240/mm3)-infectii masive, aplazii
medulare 11
 TESTE ANALITICE
A. FROTIU DE MADUVA OSOASA punctie
sternala (creasta iliaca, platou tibial, calcaneu);
frotiu, numarare sau fixare la parafina cu
sectiuni
Normal-50-80000/mm3;

2/3 seria granulocitara, 1/3 seria eritrocitara

12
Aspecte patologice
-hiperplazie medulara=crestere, predominant pe o
serie
-hipoplazie medulara=scadere
-aplazie=scadere marcata/absenta
-+++limfoblasti=L.A. limfoblastica
-+++mieloblasti=L.A. mieloblastica
-maduva plasmocitara=mielom
multiplu(plasmocitom)
-epuizarea activitatii leucopoietice=agranulocitoza
-infiltratii cu neutrofile nesegmentate=infectii acute
13
 B. METODE CITOCHIMICE SI ENZIMATICE

1. Cercetarea fosfatazei alcaline (FAL)=enzima

prezenta in 10-50 % din granulatiile neutrofilelor
adulte si normale. Alte celule(limfocite, monocite,
eozinofile) nu contin FAL
PATOLOGIC: FAL +++ in reactii leucemoide, FAL
sau absenta in leucemii granulocitare cronice
(granulocite adulte dar anormale, maligne)

14
 2. Cercetarea peroxidazelor (POX)=enzime prezente in
celulele seriei granulocitare normale

POX + =leucemie acuta mieloblastica (LAM)

POX - =leucemie acuta limfoblastica (LAL)

3. Cercetarea prezentei polizaharidelor: coloratia PAS=in

prezenta acidului periodic Schiff glicogenul si alti hidrati de
carbon se coloreaza rosu-aprins; normal glicogenul e
redus in limfocitele adulte si normale, in leucemii
limfocitare creste

-reactie PAS+ =leucemie acuta limfoblastica(LAL)

-reactie PAS- =leucemie acuta mieloblastica(LAM) 15
 TESTE DE DIAGNOSTIC IN LEUCEMII
LEUCEMII - BOLI MALIGNE ALE ORGANELOR
HEMATOFORMATOARE
-poate apare o inmultire excesiva pe linia mieloida sau
limfoida ce poate interesa numai pool-ul de celule
tinere(blasti), sau pool-ul anumitor varste diferentiate
pe linia mieloida, limfoida, eritrocitara sau
megacariocitara
-neoplazia incepe in organul leucopoietic apoi se
intinde si in alte tesuturi cu potential hematopoietic (in
LLC incepe in noduri limfatice si se extinde in maduva,
splina, alte tesuturi. 16
 -

Diagnostic de laborator:

-examen sange periferic

-examen maduva osoasa

-punctie splenica, ganglionara, hepatica

-examene citochimice

-examene citogenetice

-examene imunologice
17
A. Leucemii acute = proliferare maligna a celulelor
tinere, blastice, cu blocarea maturatiei. Apare la
varste tinere, poate fi rapid fatala.
Clinic: sindrom infectios, hemoragic, anemic, debut
brusc sau insidios, usoara splenomegalie,
hepatomegalie, polimicroadenopatie
-poate fi leucemie acuta limfoblastica (LAL) sau
leucemie acuta mieloblastica (LAM)
Diagnostic
1.Numararea leucocitelor in sange periferic:
-80-100000 forme leucenice
-50-60000 forme subleucemice
-10-15000 forme aleucemice 18
2. Formula leucocitara = sange periferic colorat May-
Grunwald-Giemsa; apare hiatusul leucemic=70-80 %
blasti si 20-30% celule mature fara forme intermediare
3. Frotiu de maduva = monoton cu celule tinere, rar apar
cuiburi hematoformatoare normale (exista hiatus
leucemic)

4. Examene citochimice si citoenzimatice = POX pozitiva in

LAM, negativa in LAL; PAS pozitiva in LAL, negativa in LAM

5. Alte explorari = anemie, scaderea trombocitelor

6. Biopsie ganglionara, splenica, hepatica

19
B. Leucemii cronice = proliferare de celule mature si
in stadii intermediare de maturatie.
-leucemie limfocitara cronica -LLC
-leucemie granulocitara(mieloida) cronica -LGC
-LGC = afecteaza ambele sexe, prdomina intre 30-50
de ani; splenomegalie dura, nedureroasa, insotita
de hepatomegalie, rar adenomegalii. Proliferarea e
lenta si progresiva.

-LLC = dupa 50 de ani, predomina la barbati. Evolutie

fatala, este totusi cea mai blanda. Clinic gasim
adenopatii simetrice nedureroase, hepatomegalie
moderata, manifestari asociate. 20
Diagnostic
1. Numar de leucocite = peste 100000 in forme
leucemice, 50-60000 in forme subleucemice
(frecvent 100-300000/mm3)
2. Formula leucocitara = 80-90% celule mature si in
diferite stadii de maturatie ale seriei maligne, 10-
20% celule din celelalte serii.
3. Frotiu de maduva = hiperplazie granulocitara cu
putine granulatii sau agranulate
4. Examene citochimice si citoenzimatice: FAL +++ in
reactii leucemoide (celule normale) si FAL in LGC
(celule canceroase)
5. Splenograma, adenograma, eritrocite, plachete 21
22