METABOLISMUL

NUCLEOTIDELOR

STRUCTURA NUCLEOTIDELOR
Nucleotidele = derivai ai bazelor azotate
Bazele azotate - purinice: adenina, guanina
- pirimidinice: citozina, uracil, timina
Tautomerie - amino - imino
- lactam - lactim

STRUCTURA NUCLEOTIDELOR
Nucleozid = baz azotat + pentoz - riboza
(legtur b-N-glicozidic)
- 2-dezoxiriboza

Nucleotid = nucleozid + acid fosforic (legtur esteric)

STRUCTURA NUCLEOTIDELOR
Nucleozid di- i trifosfai (legturi fosfo-anhidridice)

Nomenclatur
Baz
azotat

Nucleozid

Nucleotid

Adenina

Adenozina
Dezoxi-adenozina

AMP (acid adenilic)

dAMP

Guanina

Guanozina
Dezoxi-guanozina

GMP (acid guanilic)

dGMP

Citozina

Citidina
Dezoxi-citidina

CMP (acid citidilic)

dCMP

Uracil

Uridina

UMP (acid uridilic)

Timina

(Dezoxi)-Timidina

(d)TMP
(acid timidilic)

ROLURILE BIOLOGICE ALE NUCLEOTIDELOR

Unitile structurale ale acizilor nucleici: ADN, ARN

Rezerv de energie - nucleozid trifosfai (ATP, UTP) - legturi macroergice (tip

fosfo-anhidrid)
particip la reacii de sintez (endergonice)
Activarea precursorilor metabolici care particip la reacii de sintez:
- UDP-glucoza, UDP-glucuronat
- CDP-colina
- S-adenozil-metionina
Componente structurale ale unor coenzime:
- NAD, NADP, FAD, CoA
Semnalizarea celular nucleotidele ciclice au rol de mesageri secunzi
- AMPc, GMPc
Efectori alosterici ai unor enzime

Nucleotide i nucleozide cu roluri specifice

S-adenozil-metionina
UDP-glucoza

NAD

AMP ciclic

BIOSINTEZA NUCLEOTIDELOR PURINICE

Sursele de nucleotide - exogen (alimentar) - importan redus

- endogen - catabolismul acizilor nucleici celulari
- sinteza endogen de nucleotide

Biosinteza nucleotidelor purinice

2 ci:
Sinteza de novo - pornind de la precursori simpli
Calea de salvare - prin reutilizarea bazelor libere

I. Biosinteza de novo

Ficatul = sediul principal al sintezei (amploare mai mic n creier, leucocite)

Localizare: citosolic
Consumatoare de energie (6 ATP pentru un nucleotid purinic)
Produce direct nucleotide (bazele azotate nu sunt intermediari n cursul sintezei)
Se sintetizeaz mai nti ribonucleotide din acestea se obin dezoxiribonucleotide

Precursori:
intermediari amfibolici: aminoacizi (Gly, Gln, Asp), CO2, riboz-5-P
acidul tetrahidrofolic (FH4) = donor a 2 atomi de C, sub form de N10-formil FH4
Pornete de la riboz-5-P pe acesta se construiete nucleul de purin
Se sintetizeaz mai nti IMP (inozin monofosfat) precursorul AMP i GMP

Biosinteza de novo schem general

Primele 2 etape ale sintezei de novo

Riboz-5-P activat sub form de PRPP (5-P-ribozil-1-pirofosfat), prin transferul

gruprii pirofosfat din ATP, sub aciunea PRPP sintetazei
Gruparea amidic a glutaminei dezlocuiete PPi, sub aciunea PRPP glutamin
amido-transferazei 5-P-ribozil-amina (legtur b-N-glicozidic): conine N9 al
viitorului nucleu purinic
Urmeaz construcia pas cu pas a nucleului de purin

Biosinteza de novo a nucleotidelor purinice

Biosinteza AMP i GMP din IMP

Sinteza AMP - gruparea NH2 provine din aspartat
- particip GTP ca donor de energie
- cele dou reacii sunt similare reaciilor de formare i scindare a argininosuccinatului n ciclul ureei
Sinteza GMP - gruparea NH2 provine din glutamin
- particip ATP ca donor de energie

Reglarea sintezei de purine

Amploarea sintezei de purine depinde de urmtorii factori:

1. Concentraia PRPP depinde de:

disponibilitatea de riboz-5-P (format n calea pentoz-fosfailor)
activitatea PRPP sintetazei: inhibat alosteric de ADP i GDP
2. Etapa limitant de vitez = reacia catalizat de PRPP glutamin amido-transferaza
inhibat alosteric de produii finali: AMP i GMP
3. Asigurarea unei sinteze echilibrate a nucleotidelor adenilice i guanilice
AMP i GMP inhib propria lor sintez din IMP:
- AMP inhib adenilo-succinat sintetaza
- GMP inhib IMP-dehidrogenaza
ATP este necesar pentru transformarea IMP n GMP
GTP este necesar pentru transformarea IMP n AMP

Reglarea sintezei de purine

II. Biosinteza purinelor prin reutilizarea bazelor libere (calea de salvare)

Bazele azotate libere rezultate din catabolismul nucleotidelor pot fi reutilizate pentru
sinteza unor noi nucleotide
- are loc n multe esuturi (importan particular n creier, limfocite)
Mecanism:

Dou enzime:
APRT: adenin fosfo-ribozil transferaza

HGPRT: hipoxantin-guanin fosfo-ribozil transferaza

Calea de reutilizare a bazelor libere

Importan:
cale mult mai economic: prin reutilizarea produilor de catabolism, se
economisesc intermediari amfibolici i energie
AMP i GMP formate pe aceast cale diminu sinteza de novo (prin inhibiia
PRPP Gln amido-transferazei)
Eficacitate: reutilizarea a 90% din bazele purinice libere
PRPP = intermediar comun n - biosinteza de novo
- calea de salvare

Defecte enzimatice n calea de salvare

Sindromul Lesch-Nyhan
cauza: deficit genetic al HGPRT
reutilizrii hipoxantinei i guaninei transformrii lor n acid uric
formrii GMP nu mai inhib PRPP Gln amido-transferaza sinteza de novo
a purinelor producia de acid uric
=> hiperuricemie
manifestri: retard mental, manifestri neuro-psihice bizare (tendin la
automutilare)
explicaie: creierul este dependent, n mare msur, de calea de salvare pentru a-i
sintetiza nucleotidele purinice

Sindromul Lesch-Nyhan

Biosinteza nucleozid di- i trifosfailor

Prin transferul de grupri fosfat din ATP

Nucleozid monofosfat kinaze:

Adenilat kinaza (miokinaza):

ATP + AMP

2 ADP

Nucleozid difosfat kinaze:

Biosinteza dezoxiribonucleotidelor
Prin reducere la C2 al ribozei
Pornete de la ribonucleozid-difosfai
Catalizat de un complex enzimatic - ribonucleotid reductaza:
Tioredoxina: cofactor proteic care poate exista n form redus i oxidat
2 enzime: - ribonucleotid reductaza
- tioredoxin reductaza
O coenzim: NADPH
Reglare - alosteric:
ATP (+)
dATP ()

Vedere de ansamblu asupra biosintezei NTP i dNTP

Catabolismul nucleotidelor purinice

Xantin oxidaza:
- conine FAD, Mo, 4 centri cu Fe-S
- genereaz peroxid de hidrogen

Anomalii ale metabolismului purinelor

Hiperuricemii duc la apariia gutei:

acidul uric (urat de Na+ la pH fiziologic) hidrosolubilitate redus la concentraii
crescute precipit depunere sub form de cristale n esuturi (tofi)
- articulaii fenomene inflamatorii (artrit)
- esuturi moi
- cile urinare calculi urinari (litiaz uric)
Hiperuricemii primare (boli genetice)
cauzate de anomalii ale enzimelor implicate n metabolismul purinelor
sintez de nucleotide purinice producie de acid uric
activitii PRPP sintetazei (variant a enzimei cu Km )
activitii PRPP Gln amido-transferazei (mutaie la nivelul situsului alosteric
sensibilitate la controlul prin feed-back negativ)

Artrita gutoas

Anomalii ale metabolismului purinelor

Hiperuricemii secundare
turnover crescut al acizilor nucleici celulari (leucemii; chimioterapie, radioterapie)
scderea excreiei renale a acidului uric (insuficiena renal)

Tratamentul hiperuricemiilor:
Allopurinol analog structural al hipoxantinei inhib competitiv xantin oxidaza
(este substrat pentru XO oxidat la oxipurinol, care rmne ferm legat
n centrul activ al enzimei o inactiveaz)
scade producia de acid uric
hipoxantina i xantina devin produii finali ai catabolismului purinelor sunt
mai hidrosolubile dect acidul uric i nu precipit n esuturi

BIOSINTEZA NUCLEOTIDELOR PIRIMIDINICE

Precursori: acid aspartic, glutamin, CO2, PRPP
Localizare: citosol
Dou ci:
biosinteza de novo
biosinteza prin reutilizarea bazelor pirimidinice libere (amploare mult mai redus
dect n cazul purinelor)
Are loc diferit fa de sinteza purinelor: mai nti este sintetizat nucleul de pirimidin
(sub forma acidului orotic) apoi are loc ataarea de riboz-5-P (provenit din PRPP)
primul nucleotid este OMP UMP precursorul CTP i dTMP

Biosinteza nucleotidelor pirimidinice

Reacia iniial: sinteza carbamil-fosfatului sub aciunea carbamil-fosfat sintetazei II
(CPS-II CPS-I din ureogenez)

CPS-I

CPS-II

Localizare celular

Mitocondrie

Citosol

Calea metabolic

Ciclul ureei

Sinteza pirimidinelor

Sursa de azot

Amoniac

Gruparea amidic a
glutaminei

Reglatori

Activator:
N-acetil-glutamat

Inhibitor: UTP
Activator: PRPP

Reglarea sintezei de pirimidine:

CPS-II - inhibat feed-back de UTP
- activat de PRPP
Aspartat transcarbamilaza - inhibat feed-back de CTP

Biosinteza nucleotidelor pirimidinice

Biosinteza nucleotidelor pirimidinice

Defecte enzimatice n biosinteza pirimidinelor

Aciduria orotic ereditar

deficit genetic al orotat fosforibozil-transferazei sau OMP decarboxilazei
acidul orotic nu mai poate fi transformat n UMP se acumuleaz i se elimin
prin urin
deficit de sintez a pirimidinelor afectarea creterii organismului
tratament: administrare de uridin transformat n UMP precursorul
nucleotidelor cu citozin i timin

Sinteza TMP

Activ n celulele aflate n diviziune

(sintetizeaz ADN)
TMP exist numai ca dezoxiribo-nucleotid
Precursorul su este dUMP
Gruparea CH3 provine din N5,N10-CH2-FH4
FH4 se oxideaz la FH2 n cursul reaciei
Sinteza este catalizat de timidilat sintetaza
Dihidrofolat reductaza regenereaz FH4
proces esenial pentru multe reacii care
utilizeaz FH4
N5,N10-CH2-FH4 se reface pe seama serinei

Catabolismul nucleotidelor pirimidinice

Bazele azotate rezultate din catabolismul

nucleotidelor pirimidinice degradate n compui
hidrosolubili (b-alanin i b-amino-izobutirat
eliminai pe cale renal), CO2 i NH3

CHIMIOTERAPICE FOLOSITE N TRATAMENTUL CANCERULUI

Celulele canceroase: se divid activ necesiti de nucleotide ca precursori ai ADN
=> compuii care acioneaz ca inhibitori ai sintezei nucleotidelor afectarea sintezei
ADN blocarea diviziunii celulare
1) Analogi sintetici ai bazelor azotate
- sunt ncorporai n acizii nucleici perturb mperecherea bazelor n cursul sintezei
ADN

2) Inhibitori ai unor enzime implicate n biosinteza nucleotidelor

Analogi ai glutaminei inhib glutamin amido-transferazele
- ex: Azaserina

CHIMIOTERAPICE FOLOSITE N TRATAMENTUL CANCERULUI

2) Inhibitori ai unor enzime implicate n biosinteza nucleotidelor
Inhibitori ai sintezei TMP:
- 5-F-uracil inhib timidilat sintetaza
(dup transformare n F-dUMP)

- Metotrexat - analog al acidului folic inhib competitiv dihidrofolat reductaza

( mpiedic refacerea FH4, necesar sintezei TMP)