HEMOPROTEINE HEMOGLOBINA I MIOGLOBINA

HEMOPROTEINE HEMOGLOBINA I MIOGLOBINA

Porfirinele de fier constituie grupri prostetice (grupri active) pentru o clas important de proteine i enzime, cunoscut sub denumirea de hemoproteine. Aceste proteine pot prezenta funcii diferite: - transportarea oxigenului (hemoglobina) - depozitarea oxigenului (mioglobina) - transferul de electroni - utilizarea peroxidului de hidrogen (catalaze, peroxidaze) Prefixele hemoi hemi sunt derivate de la denumirea unitilor de fie-orfirina ( hem) pentru porfirina de Fe(II) i respectiv Fe(III). Hemoproteinele sunt formate din protoporfirina IX i o apoprotein. Prin chelarea Fe2+ de ctre protoporfirin cei doi protoni de la atomii de azot sunt nlocuii i se obine protehemul sau hemul b neutru din punc de vedere electric (Fig. 2, 3). n sistemele biologice, ncorporarea ionului de Fe(II) n porfirin este opera unei enzime speciale ferochelataza.

Fig. 2 Hemul b

Fig. 3 Hemul Structura tridimensionala

Deoarece hemul este oxidat ireversibil de aer n mediu apos la specia corespunztoare a Fe3+ (hemina), hemul nsui nu poate aciona ca transportor de oxigen in vivo. Natura a gsit soluia, prin ncadrarea hemului ntr-o matrice de protein (globina) fiind nconjurat de grupri hidrofobe din aminoacizi. Funcia de transport i depozitare a oxigenului la animalele superioare este efectuat de hemoglobina (Hb Fig. 4, 5) i mioglobina (Mb Fig. 8). Prima transport oxigenul de la surs (plmni, bronhii sau piele) la locul de utilizare din interiorul celulelor muchilor. Aici oxigenul este transferat mioglobinei pentru utilizarea n respiraie. Hemoglobinele mpreun cu mioglobina reprezint 98% din proteinele corpului uman; fiecare om adult are un kg de hemoglobin care se regenereaz la fiecare 3-4 luni.

Se cunosc mai multe varieti de hemoglobin, de exemplu: hemoglobina A (HbA) a omului normal, hemoglobina F (HbF) a fetusului i o serie de hemoglobine patologice.

Structura moleculara a hemoglobinei si mioglobinei, a fost stabilit de

profesorul Perutz (premiul Nobel n 1966 ), prin cristalografie de raze X. n ambele proteine, fierul este coordinat la cei patru atomi de azot ai protoporfirinei IX i la un atom de azot al unei grupri imidazolice al histidinei din lanul polipeptidic globina n poziia axial, denumit poziie proxim. Cea de-a asea poziie de coordinare, axial, de cealalt parte a planului hemului este neocupat n absena unor molecule mici cum ar fi O2, CO, NO, H2O, deoarece un atom de azot al histidinei se afl la o distan prea mare pentru a fi coordinat; aceast a asea poziie de coordinare se numete distal.

Fig. 4 Hemoglobina

Fig. 5 Structura tridemensional a hemoglobinei

Fig. 6 Rolul hemoglobinei n globula roie a sngelui n cea de-a asea poziie de coordinare (distala) vacant, se pot lega i ali liganzi n locul oxigenului. Liganzii care stabilesc legturi puternice sunt favorizai i de aceea CO, liganzii care conin S i P se pot lega mai uor decat O2; n prezena unor cantiti mari din oricare dintre acetia, hemoglobina este blocat i devine inaccesibil pentru transportul oxigenului (de

exemplu prin coordinarea CO, se formeaz carboxihemoglobina, care avnd o stabilitate de circa 200 de ori mai mare decat a oxihemoglobinei, se descompune lent). Rolul poriunii peptidice (globina) a hemoglobinei n prevenirea oxidrii ireversibile cu 2+ O2 a Fe este dublu: - nconjurarea hidrocarbonat a hemului are o constant dielectric sczut i acioneaz ca un solvent nepolar care nu suport (mpiedic) separarea de sarcina care apare la oxidarea Fe2+; - nconjurarea steric protectoare denumit simbolic buzunarul hemului previne formarea unui dimer -oxo-hem, care pare a fi intermediarul necesar mecanismului oxidrii ireversibile.

(a) (b) Fig. 7 Structura hemoglobinei cu (a) i fr (b) molecula de oxigen Mioglobina (Fig. 8), prezent n esutul muscular, cu o greutate molecular de 17000 este alctuit dintr-un nucleu heminic i un lan polipeptidic format din 153 resturi de aminoacizi, numit i lan m; lanul polipeptidic are un grad de ordonare mare. Fig. 8 Mioglobina Structura Tridimensional Structura proteinei n hemoglobin const ntr-un lan peptidic cu diferite catene laterale. Acestea definesc o suprafa pentru polimer, care const dintr-o varietate de grupri nepolare (hidrocarburi), cationice (de ex. NH3) i anionice (de ex. CO2-). Punile de hidrogen dintre gruprile N-H i O=C ale unitilor lanului peptidic i interaciile dintre zonele

nepolare ale suprafeei polimere determin o structur polimer (n general de doua feluri, helix sau plan). Mioglobina are suprafaa peptidei neconductiv la auto-asociere, spre deosebire de hemoglobina. n consecin mioglobina este monomer, n timp ce hemoglobina este o unitate tetramer constnd din patru uniti hem i cte dou lanuri peptida i dispuse tetraedric (Fig. 6). Lanurile conin resturile a 141 aminoacizi i cele , 146 aminoacizi. Hemoglobina fetal (HbF), hemoglobina minor a adultului (HbA2) precum i hemoglobina embrionar (HbE) conin n afar de dou lanuri , alte dou lanuri , , i respectiv . De menionat c structura catenelor polipeptidice este determinat genetic. Studiile de raze X efectuate asupra deoxi-Hb i deoxi-Mb au indicat c apar foarte semnificative modificrile n interaciile NH3..- O2C- n interiorul i ntre lanurile peptidice. Exist opt asemenea puni saline n deoxi-Hb, care se rup la coordinarea O 2 la Fe; dou ruperi apar n interiorul lanurilor , patru ntre unitile i cte unul ntre fiecare din perechile , . Se consider c lanurile peptidice sunt constrnse de aceste puni saline (n numr de 8) n deoxiHb. n aceast form tensionat a asea poziie de coordinare a Fe2+ este orientat n interior i blocat steric de o grupare salin. Ruperea punii care apare la coordinarea O2 de ctre prima unitate hem este asociat cu o modificare conformaional n care aceast a asea poziie este expus, i punile saline inter- i intraproteic se rup. Tetrametrul complet tensionat se relaxeaz astfel nct se expune a asea poziie de coordinare a ionului de fier din alt unitate hem, i aa mai departe. Ruperea punilor saline este nsoit de deplasri ale lanurilor peptidice: dou se apropie ntre ele cu 1,0 , n timp ce celelalte se separ cu aproximativ 7,0 . Perutz a sugerat un mecanism care explic cooperarea celor patru grupri hem n Hb; acesta este fundamentat pe ideea c o interacie ntre o molecul de oxigen i o grupare hem poate afecta poziia lanului protein ataat de el, care la rndul ei afecteaz celalalt lan protein prin legturi de hidrogen, i aa mai departe. Acest mecanism nu este n afar de unele dificulti i a fost puternic criticat. Totui, cooperativitatea dintre gruprile hem este real i pn n prezent nu s-a propus alt mecanism pentru acest fenomen.