Hemoglobin

Structura tridimensional a hemoglobinei

Structura tridimensional a hemului. Ionul de Fe2+ este reprezentat de sfera gri central; N albastru, O rou, C
bleu, H alb
Hemoglobina este pigmentul respirator (pigmentul rou), a tuturor vertebratelor, fiind prezent n eritrocite,
unde are rol n transportul oxigenului[A] (oxihemoglobin), i a CO2 (carbohemoglobin). Constituit dintr-o
component proteic numit globin[B] i o component prostetic, colorat, hemul, un nucleu porfirinic cu 11
duble legturi conjugate. Molecula hemoglobinei este un ansamblu alctuit din 4 subuniti proteice, formate
dintr-un lan proteic strns asociat cu grupul hemic. Fiecare lan proteic adopt o conformaie de alfa helix
identic cu globina din alte proteine (mioglobina de exemplu).
Hemoglobina reprezinta componentul principal al eritrocitelor (95 % din proteinele citoplasmatice
eritrocitare) si serveste ca vehicul pentru transportul oxigenului si dioxidului de carbon. Hemoglobina este o
proteina conjugata constand dintr-un tetramer format din 2 perechi de lanturi polipeptidice (globine), fiecare
dintre acestea fiind conjugat cu un grup hem, un complex al unui ion de fier cu pigmentul rosu, porfirina, care
confera sangelui culoarea rosie. Fiecare gram de hemoglobina poate transporta 1.34 mL oxigen per 100 mL
desange.
Hemoglobina serveste de asemenea ca tampon in lichidul extracelular. In tesuturi, la pH scazut, oxigenul se
disociaza de Hb; Hb deoxigenata se leaga de ionii de hidrogen; in eritrocite anhidraza carbonica converteste
dioxidul de carbon in bicarbonat si ioni de hidrogen. Pe masura ce ionii de hidrogen se leaga de hemoglobina,
ionii bicarbonat parasesc celula; pentru fiecare ion bicarbonat care paraseste celula intra un ion de clor.
Formele de hemoglobina prezente in mod normal in circulatie includ: deoxihemoglobina (HHb),
oxihemoglobina (O2Hb), carboxihemoglobina (COHb) si methemoglobina (MetHb), toate acestea fiind
determinate impreuna in sangele total. In anumite situatii clinice diferitele forme de Hb pot fi determinate
individual.

Structur
Gruparea hemic are un atom de fier cuplat cu inelul porfirinic. Atomul de fier
realizeaz o legtur puternic cu proteina globular prin intermediul nucleului
imidazolic al unei molecule de histidin[C], protein situat de obicei n planul
inferior comparativ cu planul hemul.
Complexul are structur octaedric
Planul superior este ocupat de o legtur reversibil cu oxigenul din heterociclu,
configuraia compusului format fiind cea de tip octaedric. Atunci cnd oxigenul nu

este legat, locul su este luat de o molecul de ap, conformaia fiind a unui octaedru neregulat. Fierul are 2
ioni : Fe2+ i Fe3+, ns Fe3+ nu poate lega O; legarea O se face i cu oxidarea de ctre oxigen a Fe la Fe3+, deci
fierul trebuie s existe n forma de oxidare +2 pentru a lega oxigenul. La om hemoglobina are o conformaie
de tetramer, numit hemoglobina A, format din 2 lanuri i 2 lanuri , formate fiecare din 141, respectiv
146 aminoacizi. Hemoglobina A se numeroteaz 12, subunitile fiind legate prin puni de sare, legturi de
hidrogen i interacii hidrofobe astfel: 11 12. Ionii de Fe2+ i Fe3+ conin respectiv 24 25 e- (configuraia
electronic este [Ar]3d6 4s2, [Ar]3d5 4s2d).

Configuratia ionului de Fe
Din punct de vedere magnetic oxihemoglobina este diamagnetic,[D] dar configuraia electronilor de joas
energie att la nivelul oxigenului ct i a fierului denot caracter paramagnetic. Oxigenul triplet cu cea mai
joas energie, are 2 electroni n orbitali moleculari de antilegtur. Ionul de Fe2+ are tendina de a adopta o
configuraie de spin nalt, electronii neparticipani aflndu-se de asemenea n orbitali de antilegtur. Fe3+ are
de asemenea electroni neparticipani. Toate aceste molecule au caracter paramagnetic i nu diamagnetic cum
ar trebui n mod teoretic. Exist dou explicaii pentru acest lucru:

Fe2+ se leag de oxigenul singlet. Amndou speciile sunt diamagnetice.

Spinul nalt al Fe3+ detremin legarea de O22- (anionul superoxid), manifestndu-se
antiferomagnetismul care aliniaz electronii neparticipani, determinnd proprieti diamagnetice.
Fe2+ cu configuraie de spin jos se leaga de O22-. Amndou speciile sunt diamagnetice.

Spectroscopia electronica cu raze X sugereaz c starea de oxidare a fierului este de aproximativ 3,2, spectrul
n infrarosu a legturii O-O sugereaz un tip de legtur foarte asemntoare cu configuraio ionului
superoxid. Starea de oxidare corect este +3 pentru fier i 1 pentru oxigen. Diamagnetismul acestei
configuraii este dat de electronii ionului superoxid care au o aliniere antiferomagnetic, n sensul opus
alinierii electronilor de Fe2+, opiune nefiind deloc surprinztoare deoarece singletul oxigenului precum i
larga separaie a ncrcrii sunt nefavorabile strii de energie nalt. Schimbarea valenei de Fe2+ la Fe3+
determin scderea mrimii atomului i permite acestuia s intre n acelai plan cu ciclurile pirolice, putnd
astfel coordina restul de histidin, iniiind schimbri alosterice m lanul globulinic. De fapt se pare c
structura adoptat este una de echilibru ntre aceste 3 forme.

Complexarea liganzilor
Atunci cnd oxigenul se leag de ionul de Fe, are loc o contracie a atomului de Fe determinnd mutarea n
interioriul planului porfirinic, concomitent cu ndeprtarea de atomul de oxigen i apropierea de restul
histidinic. La hemoglobina uman legarea oxigenului este de tip cooperativ. Hemoglobina are afinitate pentru
oxigen, afinitate crescut de saturarea moleculei cu oxigen; primul atom de oxigen legat influeneaz forma
site-ului de legare pentru urmtorul atom. Acest lucru este posibil, cnd datorit oxigenrii hemoglobinei,
subunitile proteice ale acesteia sufer modificri, modificri ce se traduc prin schimbri n ntregul complex
hemoglobinic determinnd ca altor subuniti s le creasc afinitatea pentru oxigen.
Datorit procesului de legare de tip cooperativ, curba de legare a
oxigenului de Hb are o form sigmoid
Drept consecin, curba de legare a oxigenului de hemoglobin
este de tip sigmoid sau S, opus curbei de tip hiperbol asociat
cu legarea de tip noncooperativ. Legarea oxigenului de
hemoglobin este sczut n prezena monoxidului de carbon,
deoarece acesta intr n competiie pentru site-urile de legare,
monoxidul legndu-se de preferin n aceleai locuri ca i
oxigenul. Dioxidul de carbon are un alt situs de legare,

neafectnd formarea complexului HbO. Sub infleuna anhidrazei carbonice, dioxidul de carbon se scindeaz n
acid carbonic instabil care se descompune imediat punnd n libertate ionul carbonat HCO3- i un proton H+.
CO2 + H2O H2CO3 HCO3- + H+
Sngele ncrcat cu dioxid de carbon are un pH acid, i din acest motiv poate lega protonul i dioxidul de
carbon determinnd transformri conformaionale n partea proteic i la nivelul capacitii de legare i de
eliberare a oxigenului. Protonul poate fi legat n diferite locuri de-a lungul lanului proteic, dar dioxidul de
carbon se poate lega doar de gruparea amino din poziia alpha formnd ionul carbamat. Atunci cnd nivelul de
dioxid de carbon scade (de exemplu n capilarele pulmonare), CO2 i H sunt eliberai de la nivelul
hemoglobinei, crescnd afinitatea proteinei pentru O2. Acest control al hemoglobinei pentru oxigen prin
legarea i eliberarea CO2 i acidului poart denumirea de efectul Bohr. Monoxidul de carbon afecteaz
legarea oxigenului de hemoglobin, datorit afinitii de circa 200 de ori mai mare fa de oxigen. Acest lucru
este tradus prin aceea c o cantitate extrem de mic de CO (provenit de exemplu din fumul de igar,
eapamentul automobilelor), reduce foarte mult capacitatea de legare a O2 de ctre hemoglobin. Monoxidul
formeaz carboxihemoglobina, un compus extrem de stabil, de culoare rou strlucitor. Asemntor cu
monoxidul de carbon se comport i ionii CN- (cian), SO (monoxidul de sulf), NO2 (dioxid de azot), S2(sulfit). Toi aceti compui manifest afinitate crescut pentru ionul de Fe de care se leag fr a-i schimba
starea de oxidare, i mai grav neinhibnd legarea oxigenului, determinnd intoxicaii grave. Oxidarea Fe2+ la
Fe2+ deteremin conversia hemoglobinei la hemiglobin saau methemoglobin, compus care nu poate lega
oxigenul. n sngele normal hemoglobina este protejat printr-un sistem reductor de aceast transformare.
ns anumii anioni de tipul oxidului nitros N2O, sau dioxidului de NO2, sunt capabili s transforme o fracie
foarte mic de hemoglobin n methemoglobin, acest lucru neavnd importan medical (NO2 este nociv
prin alt mecanism, n timp ce N2O este folosit n anestezii de scurt durat, ceea ce nu permite afectarea
hemoglobinei. La populaiile aclimatizate la nlimi mari concentraia de esterului glicerin-2-3-difosfat
sanguin este mult crescut, ceea ce permite transportul unor cantiti mai mari de oxigen la nivelul esuturilor
n condiiile unei presiuni a oxigenului sczut. Acest fenomen n care o molecul Y afecteaz legarea
moleculei X pentru transportul moleculei Z.

Degradarea hemoglobinei
Atunci cnd are loc moartea hematiilor, membrana lor se rupe, hemoglobina este hidrolizat iar Fe recuperat.
Ciclul porfirinic se desface iar fragmentele sunt metabolizate de ficat. n urma procesului rezult o molecul
de CO pentru fiecare molecul de hemoglobin metabolizat. Procesul este unul natural i reprezint o surs
de CO pentru corpul uman, monoxid care se elimin prin aerul expirat. Produsul de metabolizare final este
bilirubina, un pigment de culoare galben a crui nivel semnific distrugerea hematiilor. Dac ritmul de
degradare a hemoglobinei este prea rapid, ea poate bloca anumite capilare mai ales capilarele din rinichi
determinnd apariia unor boli. Scderea hemoglobinei neasociat cu scderea numrului de hematii poart
denumirea de anemie; anemia are drept principal cauz deficiena de Fe. Ca urmare a acestei deficiene,
scade sinteza de hemoglobin, hematiile vor fi de tip hipocrom (srace n pigment) i microcitic (mai mici
dect n mod normal). n hemoliz (distrugere a hematiilor mai rapid dect sinteza), icterul asociat este cauzat
de metabolitul bilirubin i de hemoglobina circulant care poate determina blocaj renal.
Hemoglobinopatiile sunt mutaii la nivelul lanului globinei, cele mai des ntlnite fiind anemia falciform
(siclemia) i talasemia; tot n cadrul globinopatiilor sunt i porfiriile, caracterizate de erori n sinteza hemului.
La nivel mai mic se pare c hemoglobina A se combin cu glucoza, pe care o leag ntr-un anumit situs,
formnd compusul HbA1c (hemoglobina glucosilat, sau glicat). Pe msur ce concentraia glucozei crete ,
procentul de HbA trasnformat n HbA1c crete i el. La diabetici, unde glucoza are valori foarte mari, i
compusul tinde ctre valori mari, procentul su fiind reprezentativ pentru nivelul glucozei sanguine datorit
timpului de via a hematiilor 50-55 zile.

Msurare (teste de laborator)

Hemoglobina este urmrit n permanen n cadrul testelor sanguine, (numrarea hematiilor), rezultatele fiind
exprimate n uniti de concentraie masic: g/L, g/dL, mol/L (1g/dL = 0,621mmol/L). Dac concentraia Hb
totale scade sub acest punct, este vorba de o anemie. Determinarea Hb se face prin analiz sanguin i
urmrirea valorii hematocritului care reprezint volumul ocupat de hematii n cadrul volumului sanguin.
Datorit legrii glucozei la Hb cu formarea complexului HbA1C, a crui nivel este direct proporional cu
cantitatea glucozei sanguine, se poate monitoriza mai precis cantitatea glucozei sanguine care ar fi relativ greu
de efectuat din cauza variaiilor orare ce ar da rezultate ce nu pot fi semnificative i pot da erori la
interpretare. Pentru acest motiv se urmrete complexul HbA1C. De obicei o valoare mai mic sau egal cu
6% reprezint un nivel normal al glucozei sanguine, n timp ce valori de peste 7% indic un nivel ridicat al
glucozei (diabet). Urmrirea valorii complexului se poate face doar la subiecii sntoi care au un ciclu al
hematiilor normal. La indivizii cu dereglri ale acestui ciclu cum ar fi bolnavii cu anemie falciform, unde se
pot ntlni alte tipuri de hemoglobina (Hb S), ciclul de via este mult mai scurt. Din acest motiv se folosete
testul nivelului de fructozamin, test care are la baz msurarea gradului de legare a glucozei de albumina
seric, detereminndu-se astfel nivelul sanguin al glucozei. Concentraia sanguin a hemoglobinei poate fi
msurat cu hemoglobinometru electronic.[E]

Tipuri de hemoglobin
Hemoglobin uman
1. La embrion: Gower 1 (22)
Gower 2 (22) [F]
Hemoglobina Portland (22)
2.La fetus:Hemoglobina F (22) [G]
3.La adult:
Hemoglobina A (22) [H] - Tipul cel mai des ntnit.
Hemglobina A2 (22) - Lanurile se sintetizeaz cam din al III-lea semestru de sarcin i al aduli
reprezint cam 2,5%.
Hemoglobina F (22) - La aduli hemoglobina F este restrns la o populaie limitat de hematii
numite celule F.
Hemoglobina S - Tipul de hemoglobin ntlnit la hematiile n form de secer (anemia falciform).

Alte tipuri de (hemo)globin

Mioglobina: Este identificat n muchi, ntlnindu-se la toate vertebratele, unde coloreaz muchii n rou
sau cenuiu nchis. Este foarte asemntoare cu hemoglobina, ns difer de aceasta prin faptul ca nu prezint
uniti tetramerice. De regul stocheaz oxigenul pentru a fi transportat mai departe.
Hemocinina: Este al 2-lea transportor de oxigen din mediul animal, identificat la artropode i molute, avnd
heteroatom ionul de Cu, iar culoarea sa datorit acestui fapt este albastr atunci cnd leag oxigenul.
Hemeritrina: ntlnit la unele nevertebrate marine i anumite specii de anelide, avnd heteroatom ionul de
Fe, culoarea sa este roz/violet cnd este oxigenat, incolor cnd oxigenul nu este legat.
Clorocruorina: Identificat la multe anelide, asemntoare cu eritrocruorina, ns grupare hemic este
diferit. Cnd nu leag oxigenul are culoarea verde, n timp ce oxigenat are culoare roie.
Vanabina: ntlnit la urocordate, se pare c heteroatomul este ionul de vanadiu (ipotez neconfirmat).
Eritrocruorina: Identificat la multe anelide, este un complex proteic cu masa de peste 3,5 milioane daltoni.
Pinaglobina: Identificat doar la molusca Pinna squamosa, heteroatomul fiind ionul de Mn.
Leghemoglobina: Identificat la specii de leguminoase (lucern, soia), bacteriile fixatoare de azot sunt
protejate de aceast protein care are drept heteroatom ionul de Fe.