HEMATOPOIEZA

Definiie
Procesul prin care iau natere celulele sanguine mature, funcionale
Iniiat n viaa intrauterin i cantonat n final la nivelul mduvei osoase
(m.o)
Necesit celule de origine i micromediul hematopoietic
Celule hematopoietice (de origine) 3 grupe
I - Celule stem pluripotente
II - Celule progenitoare hematopoietice ca CFC-GEMM, CFC-GM, E, -M,
-Meg, -Eo, -Bazo, etc.
III - Celule hematopoietice ale seriilor sanguine
 Micromediul hematopoietic
n luna a 5-a fetal, n dou sptmni cavitile osoase sunt populate cu celule
stromale
- Celulele hematopoietice migrate din ficat traverseaz pereii vaselor
sinusoidale i formeaz parenchimul hematopoietic
- Componentele micromediului sunt:
- celulele stromale mezenchimale
- reeaua matriceal extracelular
- factorii de cretere produi de celulele stromale
Celulele stromale mezenchimale
1. Macrofagul stimulat de FSC-M
- rol n eliminarea resturilor celulare
- sintetizeaz factori stimulatori i reglatori ai hematopoiezei
(interleukine, leucotriene, prostaglandine)
2. Celula endotelial dispus n stratul luminal al sinusurilor medulare
- permite pasajul celulelor mature prin intermediul
receptorilor din membrana bazal
- stimulat de IL1, TNF, FSC-GM
- prezint antigenul factorului von Willebrand
3. Fibroblatii au caracter contractil
- fuzioneaz n complexe sinciiale
- sintetizeaz colagen I, III, IV
4. Celulele adipoase rezervor energetic
- ocup spaiile disponibile
- secret IL6, FSC-M, FIL
Celulele stromale realizeaz o reea tridimensional oferind nie ecologice pentru
eritropoiez, granulopoiez, megacariopoiez

- Distribuia celulelor n mduva hematogen nu este ntmpltoare:

- insulele eritropoietice se dezvolt n vecintatea peretelui sinusal;

- precursorii granulocitari sunt situai profund ctre axul osului i nu

migreaz spre sinusuri dect la stadiul de metamielocit
- megacariocitele se ataeaz la suprafeele adventiciale ale sinusurilor i
cnd devin trombocitogene emit ctre sinusuri benzi de trombocite

- celulele stem pluripotente se cantoneaz la periferia cavitilor osoase

Acestea au un situs (tripeptid, arginina-glicina-acid aspartic) recunoscut de
celulele progenitoare prin intermediul 1-integrinei.
Scderea forei de atracie dintre celule realizat prin consumarea FSC-GM.
Micromediul din timus
Organ limfoepitelial ce are n cortex limfocite, celule epiteliale, macrofage.
Nidarea limfocitelor T se face prin atragerea n afara vaselor de ctre 2-
microglobuline i dirijarea ctre zona cu celule epiteliale.
Diferenierea i maturarea se face n zona epitelial
Migrarea celulelor mature se face ctre zona medular.
Factori reglatori ai hematopoiezei
Sunt citokine de cretere sau stimulatori ai coloniilor de celule.
Acioneaz prin structura chimic specific, cantitate, cooperare.
Se leag de receptori specifici reacie alosteric de iniiere i activare a
reglatorului intracelular protein-kinaza C transmite mesajul genelor ce
comand iniierea diviziunii/diferenierii celulei.
Factori stimulatori
- FSC-S
- FSC-GM
- FSC-G
- FSC-M
Eritropoietina sintetizat n celulele epiteliale ale vaselor tubulare renale
- senzori de oxigen
Trombopoietina
IL1-13
TNF produs de macrofag, limfocit B, limfocit NK
- induce sinteza FSC-GM, activeaz limfocitele T i B
- inhib sinteza eritropoietinei
Oncostatina M citokin produs de limfocitul T activat
- acioneaz asupra celulelor stromale
FIL induce diferenierea i reduce proliferarea celulelor leucemice
Factorii inhibitori ai hematopoiezei
ICS
TNF
INF i
Factorul IV plachetar
Rolul cromosomului 5 n hematopoiez
- Situate majoritatea genelor ce codific citokinele reglatoare ale
hematopoiezei
- Deleia braului lung exprimat prin SMD
 Cinetica hematopoiezei
1. Prima treapt ierarhic celula stem pluripotent (CSP)
- din 1-2 x 106 CSP se formeaz 2 x 1011 celule
mature sanguine pe zi
- 90% din CSP repaos mitotic, mai puin
vulnerabile la factori nocivi
2. A doua treapt ierarhic celulele progenitoare multiliniare
- CFC-GEMM
- CFC-Li B+T
3. A treia treapt celule progenitoare monoliniare timpurii
- CFC-EB, CFC-MegB, CFC-GM
- doar 10-20% sunt n ciclul mitotic, restul fiind n rezerv
4. A patra treapt ierarhic - celule progenitoare monoliniare tardive
- CFC-E, CFC-Meg, CFC-G, CFC-M, CFC-Ba,CFC-Eo
- pierd AgCD34
- apar Ag specifice liniei respective
- proliferarea i diferenierea crescute
 Migrarea celulelor stem
n viaa intrauterin migreaz din sacul vitelin n ficat, din ficat n mduva osoas,
timus splin, ggl.
La adult CSP se gsesc n sngele circulant i m.o.
Migrarea este explicat de:
- intervenia CSP n sectoarele medulare intens solicitate
- cutarea de noi teritorii hematopoietice
- meninerea unei rezerve de CSP n snge atunci cnd mduva este lezat

Morfologia celulei stem

n microscopia optic nu poate fi difereniat de limfocit
Celula care candideaz la funcia de celul stem:
8-10, form rotund
- nucleu rotund/reniform, cromatina fin dispersat cu nucleoli
- citoplasm albastru deschis fr granulaii
 Maduva osoas (m.o)
Localizare :
- Corticala oaselor lungi, scurte i plate
Traversat de trabecule osoase i format dintr-o reea de sinusuri venoase nconjurat de matricea
extracelular

Vascularizaia
- Artera nutritiv - sursa principal
- ptrunde n cortical prin orificiul nutritiv i hrnete trabeculele osoase
- se ramific n spaiile hematopoietice
- n interiorul cavitii medulare se bifurc n 2 artere medulare din care pornesc arteriole
radiale care reintr n endost i micoreaz calibrul i se scurg n sistemul Haversian
- dup reintrarea n cavitatea medular arteriolele se deschid ntr-o reea sinusal unele se
orienteaz periferic spre os, majoritatea merg spre centru unde formeaz un sinus central din
care sngele dreneaz prin venule i vase ntr-un trunchi colector comun vena longitudinal
central care prsete osul prin orificiul nutritiv
Sinusurile +arteriolele radiale+artera nutritiv+artera muscular = compartimentul vascular
Caracteristici ale vascularizaiei m.o
- Nu sunt vase limfatice rolul ndeplinit de sinusurile (sinusoidele) medulare = microcirculaia
medular
sinus = unitatea structural a vascularizaiei m.o
= bariera dintre circulaie i parenchimul hematopoietic
= locul de trecere al celulelor sanguine mature din parenchim n compartimentul
vascular
- circulaie nchis
Sinusurile sunt corespondentul capilarelor din alte esuturi dar prezint particulariti:
-Perete complet format din 3 straturi:
- luminal (endoteliu)
- membrana bazal
- strat extern format din celule reticulare adventiciale

b) n unele poriuni peretele este format numai din endoteliu

c) n altele numai din endoteliu dublat de prelungiri reticulare
-

Endoteliu- format din celule plate

- singurul component constant i continuu al peretelui sinusal
- efectueaz o endocitoz activ
- prezint receptori pentru FSC
- au capacitate contractil- produc modificri ale suprafeei sinusoidale
Celulele adventiciale sunt celule reticulare fixe
- sintetizeaz fibre de reticulin
- au concentraie mare de FAL n membrana lor
- au CD10,CD13, HDL-DR I
- conin actin muscular, laminin, fibronectin, colagen I,III,IV
- cu origine mezenchimal, nrudite cu fibroblatii, dar sunt CD34-
- au mitoze rare , capacitate fagocitant redus
- nu se difereniaz n celule hematopoietice
Celulele adventiciale +prelungirile lor+fibrele de reticulin = reticulul medular
 Dezvoltarea sistemului hematopoietic
sacul vitelin insule sanguine (area vasculosa) insulele Wolff i Pander-
(19 zi spt.10) hemangioblatii se difereniaz n 2 direcii celule periferice ce
formeaz vasele sanguine i celule progenitoare hematopoietice .
- hematopoieza produce numai progenitori eritroblastici (intravascular,
megaloblastic)
n paralel se dezvolt canale vasculare care fac legtura ntre sacul vitelin i embrion
trec celulele stem hematopoietice n circulaia embrionar i apoi n organele
hematopoietice

Dup spt.11-a hematopoieza primar migreaz ctre parenchimul hepatic (spt 11-
24) hematopoieza devine extravascular parenchimatoas eritrocite anucleate,
nc macrocitare, conin HbF; sunt prezente celulele seriilor granulocitare ,
megacariocitare
Luna a 4-a apar cavitile osoase primitive primele celule- celulele stromale
Luna a5-a - maximum hematopoiezei hepato-splenice
Din luna a5-a- celulele stem se stabilesc n aceste caviti ncepnd cu clavicula,
hematopoieza hepato-splenica scade progresiv ncepnd cu luna a6-a
n ultimul trimestru de sarcin cavitile osoase medulare devin sediul exclusiv al
mielo i megacariopoiezei. Eritropoieza are loc n ficat i splin din ce n ce mai
puin i m.o devine sediul principal.
La natere singurul organ hematoformator devine m.o.
n jurul vrstei de 4 ani mduva roie din diafizele oaselor lungi dispare treptat fiind
nlocuit cu celulele adipoase
La 18 ani esut hematopoietic se gsete n vertebre, stern, coaste, oasele craniene,
pelvine, partea proximal a epifizelor oaselor lungi.

Tesut limfatic
- Strns legat de formarea m.o.
- Apare n plexul limfatic n spt.a9-a i glandele limfatice n spt. a 11-a
- Splina n perioada de declin a mielopoiezei apare limfopoieza
- Timus limfopoietic n spt. a 9-a , aici vin celulele stem din ficat, splin, m.o.
Dup natere
-esut limfatic prezent n m.o dar mult extins n ggl. limfatici, plci Peyer, timus
 SERIA ERITROCITAR
Eritronul totalitatea elementelor masei eritrocitare
- are 3 compartimente:
- I eritropoieza naterea elementelor imature (fixe)
- II viaa eritrocitelor: eritrocitele circulante plus cele
stagnante n sinusurile sanguine, cu rol funcional
- III moartea eritrocitelor: retragerea eritrocitelor uzate din
circulaie (hemoliza) i recuperarea materialelor din care sunt
alctuite (catabolismul eritrocitar).

I Eritropoieza
Definiie
- Proliferarea (nmulirea) i diferenierea (maturarea) precursorilor
eritrocitari mpreun cu hemoglobinosinteza
- Diabaza trecerea n circulaie a eritrocitelor funcionale , precum i
a factorilor care regleaz aceste procese.
CSP sub aciunea IL-3, IL-6, IL-11, Epo (eritropoietina) , trombopoietina se angajeaz spre linia
eritroid.
- Epo
- glicoprotein produs de esut renal, hepatic (doar 10-15% la adult) i m.o., este esenial
pentru proliferarea, diferenierea i supravieuirea elementelor eritroide, ntrziind apoptoza.
- se ataeaz la receptori specifici prezeni n numr mare pe suprafaa celulelor progenitoare
eritroide i proeritroblati, dar abseni pe eritrocite.
Scopul eritropoiezei sinteza de hemoglobin
Secvena eritropoiezei
PROERITROBLASTUL
ERITROBLASTUL BAZOFIL
ERITROBLASTUL POLICROMATOFIL
ERITROBLASTUL OXIFIL
RETICULOCITUL
Formarea eritroblatilor
Comport 2 tipuri de fenomene
- Sinteza de ADN urmat de mitoz.
- Sinteza proteic n citoplasm, respectiv sinteza hemoglobinei, principala
protein sintetizat de acesat serie.
- Cele 2 fenomene sunt sincronizate.
Durata eritropoiezei
- 7 zile 1Proeritroblast = 8Reticulocite
- primele 4 zile multiplicare i maturare
- urmtoarele 3 zile maturare fr diviziune
Reglarea eritropoiezei
- Sub controlul eritropoietinei

II Fiziologia eritrocitului
- zilnic 2x1011 eritrocite
III Supravieuirea eritrocitar
- Eritrocitul supravieuiete 4 luni

Locul distrugerii:
- Hemoliza extravascular reprezint 80-90% din procesul de distrucie
eritrocitar
- particip sistemul macrofagic predominant din splin, ficat

- Hemoliza intravascular doar 10-20% distruse n circulaie cu eliberarea

Hb n plasm
 GRANULOPOIEZA

Definiie totalitatea precursorilor i a celulelor adulte neutrofile, eozinofile,

bazofile ce pot fi recunoscute sau nu morfologic

Cr.5
FSC-GM (18-28KDa) produs de mastocite, limfocite T, celule

endoteliale, fibroblati, celule epiteliale timice

prin stimulare cu TNF-, IL-1, lipopolizaharid

CFC-GEMM

CFC-EB

CFC-Meg

CFC-Eo

CFC-GM

- la oarece deficitul n FSC-GM susceptibilitate crescut la infecii cu

microorganisme obligat intracelulare
 FSC-G produs de monocite, macrofage, celule endoleliale,
si fibroblati
prin inducerea IL-1, TNF-, endotoxina
gena cr.17
- Model animal deficiena neutropenie+lipsa neutrofiliei ca
rspuns la infecii

Utilizarea n terapie
- Neutropenia cronic sever, neutropenia ciclic
- Mobilizarea CSP n circulaie ( transplant)
- Tratamentul LAM, SMD + citozin arabina
Seria granulocitar neutrofil
Morfologie
Mieloblastul 10-18
Promielocit - 12-25
Mielocitul 12-18
Metamielocitul 10-18
Nesegmentatul 16-18
Neutrofilul segmentat - 15
Ciclul de via
-etapa medular proliferare, maturare, stocare a celulelor devenite
adulte
-etapa sanguin -de transport ctre zonele unde sunt chemate
-etapa tisular de exercitare a funciilor specifice
Reglarea granulopoiezei neutrofile
- Stimularea CFC-GM, CFC-G prin FSC-GM, FSC-G
- n infecii i inflamaii limfocit T activat

macrofage activateIL-1
IL-6
celule endoteliale i
fibroblati sinteza factori stimulatori
- Inhibiia produciei de PN macrofagul elibereaz PGE care inhib FSC-
GM
- Factorul de eliberare a neutrofilelor+IL-1- n infecii stimuleaz descrcarea
din rezervele medulare
Funciile granulocitelor neutrofile
Fagocitoza
Activitatea secretorie
Seria granulocitar eozinofil
Morfologie mielocitul eozinofil
granulaii mari, egale, rotunde, rou-portocaliu, 0,5 1,5
- m.e. granulaiile formate dintr-un corp central dens, matrice,
membran cu dublu strat
- conin 4 proteine bazice
- proteina bazic major- leziuni endocard i epiteliu respirator la cei
cu astm
- proteina cationic eozinofil- activeaz FXII, plasminogenul-
tromboembolii
- neurotoxina derivat din eozinofil
- peroxidaza eozinofilului aciune toxic asupra helminilor
Eo nucleul 2 lobi,n desag
- granulaiile specifice
Receptorii exprimai pe eozinofil
- Pentru Ig G,A,D,E
- Pentru mediatori solubili , IL-5
- Fraciuni ale C
- Receptori de adeziune
- De aderare pe proteine extracelulare fibronectina, colagen,
hialuronat
Membrana bogat n lizofosfolipaze enzime ce cristalizeaz cristale
Charcot-Leyden
Pot sintetiza leucotriene, PG
Cinetica eozinofilelor
- Timpul de tranzit 11 zile
- 2,5 zile destinate compartimentului de maturare
- n snge -3-8 ore
- n esuturi
Funciile granulocitului eozinofil
- Fagocitoza
- citotoxic- antiparazitar, proteina bazic major
Seria granulocitar bazofil
CFC-Ba
KL- kit ligand citokina, factor de cretere al
mastocitelor
Bazofile +mastocite
Morfologia
Mielocitul
Bazofil granulaii metacromatice numeroase
- nucleul situat central, segmentat
- poate migra n esuturi (mai lent)
Mastocitul celula din esuturi mai mare dect bazofilul din snge
- nucleu nesegmentat
-granulaii mai mici i numeroase
Ciclul de via puin cunoscut
CFC-BaIL4, IL3 LT

Ba
Funciile
- Fagocitoz redus
- Degranularea cea mai important
- se produce n ntreaga celul
- eliberarea mediatorilor
- degranularea anafilactic receptorii cu afinitate pentru IgE
eliberarea de mediatori i substane vasoactive proinflamatorii
-mastocitul activat rol n inflamaie
- angiogenez
- remodelare osoas
- ateroscleroz
- antitumoral
 Seria monocito-macrofagic

Sistem macrofagic, sistem reticuloendotelial(SRE)

Sistem reticulohistiocitar(SRH), sistemul fagocitelor mononucleare

Definiie - totalitatea celulelor din mduva osoas, snge i esuturi nalt

specializate n aprarea organismului
- linie celular continu monoblast, promonocit, monocit, macrofage
( histiocite)
1892 Metchinikoff
1924 Aschoff concept de SRE - n sens strict
- n sens larg
1949 Thomas SRH
1969 van Furth i Langevoort (OMS) sistem al fagocitelor mononucleare
- criterii ciclul de via origine
- cinetica
- distrugere
- structura
- funcia
celulele progenitoare m.o
promonocite m.o
monocite m.o.+s.p.
macrogfage
Morfologie
Monoblatii ~ mieloblati
Promonocite
Monocitele
Macrofagele
Ciclul de via
CSP

CFC-GEMM

CFC-GM
5-7zile factori de cretere IL-3, FSC-GM
CFC-M (sau G)
FCM-factorul de cretere a monocitelor
orienteaz ctre CFC-M
monoblast

promonocit (compartiment proliferativ)
5 zile
monocite medulare 7,3x109 n mduv

snge
Reglarea produciei de de fagocite mononucleare
- factori stimulatori / inhibitori
- Inhibitori PGE
- FSC-M reglatorul zilnic al produciei de mononucleare

Funciile monocitomacrofagelor
- Funcia cognitiv
- Activarea prin diveri stimuli
- Activitatea bactericid
- Modularea rspunsului inflamator
- Iniierea i modularea rspunsului imun
- Controlul granulopoiezei i eritropoiezei
 Seria megacariocito-trombocitar

Megacariopoieza procesul de formare a megacariocitelor trombocitogene

Compartimentul progenitorilor (de proliferare)
CSP BFU-Mk- CFU-Mk
Compartimentul maturativ megacarioblati, megacariocii
Markeri imunologici
BFU-MK progenitori mieloizi
CFU-Mk gp IIb-IIIa
Promegacarioblast gp Ib, IIb- IIIa
- fvW
- TSP(trombospondina)
- f4pl (F4T)
- peroxidaza plachetar (POP)
- ncepe poliploidizarea (endomitoze)- 4,8,16,32,64 N
Celulele ce pot fi recunoscute morfologic > 8N
Maturaia citoplasmei
- Dup 2-3 cicluri endomitotice maturarea citoplasmei sinteza, granulaii
, corpi deni, membrane de demarcaie
Trombocitopoieza
- Megacariocite emit pseudopode n sinusurile capilare- flux sanguin
desprinde TR
Distribuia trombocitelor
- Normal 2/3 n circulaie
- 1/3 sechestrate n splin TR tinere adera la celulele splenice
Heterogenitatea TR- cele tinere mari cu granule, btrne mici i degranulate
Durata de via 8-12 zile utilizate zilnic pentru meninerea integritii
endoteliale
- Tr btrne macrofage splenice, hepatice, M.o.
- praf plachetar
Reglarea megacariopoiezei
Masa megacariocitar, trombocitar
Stimulatori - progenitori IL3, FSC-GM
- Mk-CSA (megakaryocit colony stimulating
activity)
- factori sinergici IL1, FSC-G
- TPO trombopoietina
- citokine IL-6, LIF, IL11
- efect sinergic maturativ eritropoietina
Inhibitori -f4pl
- Interferon, IL-4
Structura megacariocitilor i trombocitelor
- Reprezint o cantitate minor a celulelor hematopoietice 0,05%
Morfologie
Megacarioblast( I) 30-40
- raport N/C =10/1
-nucleu mare, ovalar, nelobat
- civa nucleoli
Promegacariocit (Megacariocit bazofil) (II)
- 40-50
- Nucleu incizat fr nucleoli
- Citoplasma abundent bazofil
Megacariocitul granular (III) 50-100
- nucleu polilobat
- citoplasma abundent acidofil cu numeroase granulaii
azurofile ()
Confuzie cu osteoclati, osteoblati, plasmocite multinucleate, celule S-R
Citochimie peroxidaza negativ
- PAS +
- FAc +
- esteraze negativ
Ultrastructura
- n citoplasma 3 zone - perinuclear ap. Golgi, reticul endoplasmatic
rugos, neted
- granule
- corpi deni
- lizozomi arilsulfataza, catepsina
- zona intermediar sistem membrane de demarcare
- zona periferic filamente actin, miozin
Marcheri megacariocitari
- POP
- Gp Ib
- Proteine citoplasmatice- fvW, trombospondina, Fg
Trombocitul
m.o. fragmente de citoplasma 2,5 V= 7,8 3
Hialomer+granulomer
Ultrastructur
-Zon periferic glicocalix- gp (IIb/IIIa) receptor pentru Fg
- membrana plachetar
-Zona submembranar filamente de actin
-Zona sol-gel (citoscheletul)- microtubului+microfilamente
-Granule lizozomi
- corpi deni (10/TR)- ATP,ADP, Ca 2+ ,serotonin
- numeroase 100/TR
- proteine adezine
-factori coagulare
-Sistemul de membrane creaz sistem canalicular deschis crete
suprafaa de contact
- sistem tubular nchis derivat din reticulul
endoplasmatic neted loc de depozitare a Ca 2+ i activitate ciclooxigenaz
Funcii
-Hemostaza primar
-Stabilizarea dopului hemostatic
-Retracia cheagului
-Meninerea integritii peretelui vascular
 Compozitia sangelui

Hematocritfractiunea din volumul sangvin ocupata de eritrocite

(45% la barbati)
 Volumul total sangvin 5,5 L, din care plasma ocupa 3,0 L iar eritrocitele 2,5 L

Plasma sangvina substante organice (proteine, glucoza, aminoacizi, lipide, colesterol)

si anorganice (electroliti, Na+, K+, Ca2+; gaze, CO2, O2, NO), dizolvate in H2O;
deasemenea, produsi de excretie: uree, bilirubina, creatinina, acid uric
Leucocitele-clasificare granulocite polimorfonucleare (eosinofile, bazofile, neutrofile);
monocite; limfocite

Produse de maduva osoasa; monocitele si anumite limfocite se diferentiaza in

tesutul gazda
Hematopoieza

-producerea celulelor
sangelui pornind de la
celulele stem
hematopietice
pluripotente

-proces stimulat de
factorii de crestere
hematopoietici (HGF)