1

RETICULOCITE
-cele mai tinere hematii
-provin din eritroblastul oxifil dupa expulzia nucleului
-contin ARN ribozomal
-se evidentiaza in coloratii speciale care evidentiaza ARN precipitat sub forma unui reticul
-se produc in maduva osoasa unde rami 2-3 zile apoi sunt eliberate in sangele periferic ; in sg
periferic ramin 1-2 zile pina isi pierd de tot ARN-ul ,ia forma biconcava si se transforma in
eritrocit
Clasificare –in functie de cantitatea de reticul :
-reticulocite de grad : I (mult reticul ) , II , III, IV (cel putin 2 puncte de reticul)
Evidentierea reticulocite
1.Microscopic:
-frotiuri colorate MGG-se evidentiaza MACROCITE POLICROMATOFILE=eritrocite mai mari
fara depresiune centrala, mai inchise la culoare; nu se apreciaza cantitativ in aceasta coloratie dar
se poate aprecia un numar mai mare de macrocite policromatofile
-frotiuri colorate special ( coloratie supravitala –frotiul nu se fixeaza ) –cu albastru de briliant
crezil care precipita ARN sub forma de granulatii fine care se aseaza in retea.
2.Analizoare automate –in citometrie de flux combinata cu tehnici de colorare cu substante
fluorescente / nefluorescente
-sunt stabile in sange recoltat pe EDTA –24
-ore la temp camerei ;citeva zile la 4 C
-metoda de referinta NCCLS pt numararea reti=metoda cu new methylene blue
Numararea la microscopul optic
-se foloseste coloratia supravitala (preparat nefixat ) cu albastru de metilen sau albastru de
briliant crezil care precipita ARN sub forma unei retele/reticul
- cu albastru de metilen –eritrocit se coloreaza verde-albastrui pal si reticul in albastru intens
-se foloseste sange venos (pe EDTA ) sau sange capilar
-tehnica :
-pe o lama se pune 1 picatura colorant + 1 picatura de sange , se amesteca ,se lasa 5
minute pentru reactie apoi se intind frotiuri care se usuca la aer
 2

-se examineaza cu obiectivul cu imersie : se alege o zona in care frotiul este bine etalat,
elementele nu se ating si se numara : hematii/camp si reticulocite /acelasi camp ; se numara pina
la 1000 hematii
-exprimarea : reticulocite la %0 sau reticulocite la % de hematii
RETICULOCITE = element figurat anucleat al seriei eritrocitare care mai are cel putin 2 puncte
din reticulul de ARN la coloratia supravitala
Valori de referinta :
-Numar relativ de reticulocite = procent din eritrocite
0,4-2 % ;0,8 -2,5 –barbati ;0,8-4,1 –femei
0,5-2 %
- Numar absolute de reticulocite =numar de reticulocite/mmc sau /L
18-158 x 109 / L ; 40-140 x 109 / L
20-100 x 10 9 /L
Raportarea rezultate
-daca nu se remarca R la examinari repetate : nu se intilnesc sau 1 %0
!!! Valori critice : Reticulocitopenia survenita intro anemie care intial era regenerativa poate
insemna instalarea unie aplazii pure a seriei eritrocitare (PRCA)
Numararea automata a reticulocitelor
-citometrie de flux combinata cu tehnici de colorare cu subs.fluorescente (thiazol orange ,acridin
orange,etc ) ;
-fluorocromii se leaga si de AND => si celulele nucleate vor fi fluorescente
-colorarea ARN cu compusi neflourescenti : albastru de metilen ,oxazyne 750-depisteaza
reticulocite prin dispersia unui fascicul de lumina sau absorbtia luminii
-este influentata de : tipul de colorant ,durata/temperatura de incubare ,plasarea pragurilor care
separa reticulocite de celule nucleate ,excluderea elemente autofluorescnte
-nr R scade-proba la temperatura camerei peste 24 ore ; se poate conserva 72 ore la rece
-erori la numararea automata :
-valori fals crescute
-autofluorecscenta inalta – nn , postsplenectomie, c.Heinz prezenti
 3

-legarea fluorocrom de alt material decit ARN : leucocitoze,Eb circulanti,

limfocite patologice in LLC, C Howel Jolly ,aglutinine la rece, trombocite gigante ,c
Heinz,siclemie
-legarea cromofori nefluorecenti de altceva decit ARN-microcite
-determinarea fractiei de reticulocite mature : influentata de leucocitoza
-determinare indici reticulocitari : influentata de trombocite gigante
Surse de eroare
-la numarare manuala : Eb circulanti ,Leucocitoza ,Paraziti intraeritrocitari
-la numarare automata - trombocite gigante ,aglomerari de T
-leucocitoze –LLC ,LNH
- Eb circulanti
-c Pappenheimer ,c H-J ,p-ctii bazofile
-paraproteine
-plasmodium ,babesia
-aglutinine la rece ,siclemie ,incluzii Hb H
-fluorescenta indusa de medicamente,administrare de subst. de contrast fluores.
Clasificarea anemiilor in functie de R
Hiporegenerative R < 50 x 10 9 /L Regenerative R > 100 x 10 9 /L
Anemie aplastica Hemoliza
-afectati progenitori primitivi sau CSM
-adesea pancitopenie
PRCA -Imuna
-Afectata doar SE -Neimuna
-parvovirus B -Congenitala : defecte de
19,CMV,v.herpetice,HIV,medicamente membrana,siclemie,talasemii,enzimopatii.Hb
instabile
-Dobindita-medicamente,intox cu
Pb ,Zn,Cu
.HPN,a.microangiaopatica,Hsplenism
SMD
Displazie, ineficienta ,apoptoza crescuta in HEMORAGII
maduva
CSM
Deficit Fe si B 12 –se diferentiaza prin VEM
Anemia cronica simpla
Infiltratii /fibroze medulare
Anemie din IR –prin insuficienta de EPO
 4

IR=indice reticulocitar =corectie numarului de R in functie de gradul anemiei si Hct

IR= Reticulocite % X Hct
Hct ideal
IPR=indice de productie reticulocitara=corectie in functie de Htc si timpul de maturare a R in sg
periferic ( intro anemie regenerativa R sunt eliberate prematur din maduva si petrec mai mult
timp in sg periferic ca reticulocite-pina la maturarea completa ca hematie
IPR =IR : media timp de maturatie a R in sange
Timp de maturatie Htc %
1 zi 45
1,5 zile 35
2 zile 25
3 zile 15

-la un Htc normal –peste 45 valoare IPR este 1

Interpretare IPR la pacient anemic
-IPR sub 2= hipoproductie eritroida in maduva osoasa
-IPR 2-3=raspuns la limita
-IPR peste 3 =Hiperproductie eritrocitara in MO
-IPR exprima de cite ori este crescuta productia de hematii fata de normal
Clasificarea anemii in functie de IPR
-cu eritropoeza ineficicienta =IPR sub 2 –anemii hipoproliferative
- defecte de maturare
- cu eritropoeza eficicienta=IPR peste 3 -anemii posthemoragice si hemolitice
Fractiuni reticulocitare –analizoare automate
LFR ; MFR ; HFR = low ;midle ;high fluorescence ratio –in functie de dimensiunea reticlu
IRF = immature reticulocyte fraction
=MFR + HFR
=proportia de reticulocite imature ;indicator sensibil si timpuriu al activ.eritropoetice
=utilitate clinica IRF :
1-clasificarea anemii
 5

2.-cresterea IRF dupa o reticulocitopenie severa indica reluarea eritropoezei si regenerare

medulara (post chimio sau transplant-semnaleaza succes transplant )
3.-deosebeste :
-anemii cu eritropoeza crescuta –AH dobindite ,poshemoragice care au R ↑ si IRF ↑↑
-anemii cu activ medulara scazuta –A din afectiuni renale care au R ↆ si IRF ↆↆ
-anemii din SMD si infectii acute –cu disociere intre R N sau ↆ si IRF ↑
4-ajuta la monitorizarea eficientei trat anemiilor prin deficit nutritional : B12,ac,folic,Fe-
IRF creste cu citeva zile inainte de creterea reticulocite
5.-prezice cresterea fractiunii CD 34 + in sange,dupa stimulare ( factori de crestere )

Indici reticulocitari –similari cu cei eritrocitari

-aduc informatii despre f-ionarea SE in timp real pt ca R traiesc 2-3 zile in MO si sg
-MCVr=volum R mediu-scazut in deficit de Fe ; creste prompt in trat.cu Fe; scade in anemiile
prin deficit de B12 si folic dupa inceperea tratamentului
-CHr=Hemoglobina reticulocitara medie
-reflecta sinteza de Hb,fiind o masura a disponibilitatii Fe pt eritropoeza
-CHr scazut –in deficit de Fe ,ACS, inflamatii ;scazut in deficit Fe real dar si functional
(trat ,.cu Epo) ;scazut in beta talasemia heterozigota desi rezerve de Fe sunt corespunzatoare
-creste rapid 24 ore dupa adm de Fe
-CHMr=concentratia medie de Hb reticulocitara
-RDWr=indice de distributie reticulocitara
-Hctr =hematocrit reticulocitar-folosit in detectarea abuz de EPO la sportivi