ERITROCITOPOIEZA
GRANULOCITOPOIEZA
MEGAKARIOCITOPOIEZA
MONOCITOPOIEZA
1
n Precursorii diferitelor serii iau naştere prin
diferenţierea progenitorilor
- elemente tinere
- identificabile morfologic pe frotiu
- celule cap de serie: proeritroblaşti, mieloblaşti,
monoblaşti, megacarioblaşti
2
Celulele precursoare
n nu se reînnoiesc
n identificabile morfologic,
aparținând unei singure linii
hematopoietice, total
diferenţiate
3
Criterii morfologice ale dezvoltării celulelor sângelui
n Mărimea celulei: celulele imature sunt mai mari
n Afinitatea tinctorială: celulele tinere sunt bazofile, apoi trec spre
normocromie
n Structura nucleului:
– Configuraţia cromatinei: celule tinere, cromatina mai puţin condensată
– Dispariţia nucleolului: semn de trecere de la un stadiu imatur la forme
apropiate de cea adultă
– Lobulaţia nucleului: granulocitele dobândesc forma lobulată în cursul
dezvoltării
– Pierderea nucleului: seria roşie
n Prezenţa produşilor de diferenţiere
– Granule citoplasmatice pentru granulocite
– Hemoglobina pentru seria roşie
4
Eritrocitopoieza, granulocitopoieza, monocitopoieza, megakariocitopoieza
5
CSH
CFU-GM
6
ERITROCITOPOIEZA
7
Seria eritrocitară
8
Transformările celulelor nucleate în cursul procesului de
maturare
► ↓ progresivă a dimensiunilor
nucleului şi celulei
► ↑ progresivă a cantităţii de
cromatină nucleară condensată
► ↑ progresivă a conţinutului de
Hgb (aspect roz pe frotiuri), în
paralel cu ↓ ARN-ului ribozomal
(colorat în albastru), realizând
în ansamblu un aspect
policromatofil al celulei
9
10
n Eritrocitopoieza cuprinde şase celule
Sectorul de diviziune
♦ PROERITROBLAST
(pronormoblast)
♦ ERITROBLAST BAZOFIL
(normoblast bazofil)
♦ ERITROBLAST
POLICROMATOFIL (normoblast
policromatofil)
Sectorul de maturare
♦ ERITROBLAST OXIFIL
(normoblast oxifil)
♦ RETICULOCIT
♦ HEMATIE 11
Maturarea eritrocitelor
12
Sectorul de diviziune
n PROERITROBLAST
(Pronormoblast )
- Ø: 16 µ liber şi 25µ pe frotiu
13
PROERITROBLAST
Ø:16-25µ
N: rotund, eucrom
Nucleoli: 2
Cromatina: fină
Citoplasma: bazofilă
N/C 8:1
Măduvă: 1%
Sânge: 0%
14
n ERITROBLASTUL
BAZOFIL
(Normoblastul bazofil)
- mai mic decât proeritoblastul
(10 - 15µ)
- citoplasma: redusă,
moderat bazofilă
(nr. poliribozomi)
- Hbg continuă să se
formeze, dar este mascată
de bazofilie
- se divide prin mitoză
15
Eritroblast bazofil
Ø:10-15 µ
N: mare, rotund
Nucleoli: greu vizibili
Cromatina: fină
Citoplasma:
moderat bazofilă,
nu prezintă granule
N/C 4:1
Măduvă: 0 - 1%
Sânge: 0%
16
n ERITROBLASTUL POLICROMATOFIL
(Normoblastul policromatofil)
- Ø: 10 -12 µ
- nucleul mai intens cromatic, heterocrom,
excentric, mai mic
- nucleol: nu este vizibil
- citoplasma: acidofilă dat. Hb, dar se găsesc
urme de bazofilie datorită poliribozomilor
- după ebl. policromatofil nu mai au loc diviziuni
17
Eritroblast policromatofil
Ø:10-12µ
N: mai mic, rotund, excentric
Nucleoli: 0
Cromatina condensată
Citoplasma: bleu-gri
N/C 4:1
Măduvă: 10 - 20%
Sânge: 0%
18
Sectorul de maturare
n ERITROBLAST OXIFIL
(Normablastul oxifil)
- Dimensiuni mai mici: 8 -10µ
- Nucleul excentric, cu
cromatina condensată,
picnotic, fără nucleoli, tinde să
părăsească celula
- Citoplasma: roz
Bazofilia celulei scade şi
cantitatea de Hb creşte →
culoarea citopl. ~ cu cea a
reticulocitului
- Nu se mai divide
- În final, nucleii sunt eliminaţi
cu o cantitate redusă de
citoplasmă şi sunt ingeraţi de
Mf asociate cu stroma măduvei
19
Eritroblast oxifil
Ø: 8 -10 µ
N: rotund, excentric
Nucleoli: 0
Cromatina
condensată complet
Citoplasma:
roz-portocaliu
N/C 0,5:1
Măduvă: 5 - 10%
Sânge: 0%
20
n RETICULOCITUL
- Ø: 7-10 µ
- în sângele periferic 0,5-2 % de hematii
- se colorează cu coloranţi vitali: albastru
crezil sau albastru de metilen:
evidenţiază o reţea filamentoasă,
reticulară de culoare violetă (rest de
ARN şi poliribozomi)
n Reticulocitele rămân în măduva osoasă
1-2 zile, după care sunt eliberate în
sângele periferic, unde rămân 1 zi în
circulaţie, după care se matureză
devenind eritrocite
21
Reticulocit
Ø:7- 10 µ
N: NU
Nucleoli: NU
Cromatina: NU
Citoplasma roz-portocaliu
N/C NU
Măduvă: 1%
Sânge: 0,5-2%
22
Concluzie:
n Stadiile din procesul de eritropoieză sunt manifestări
morfologice ale sintezei hemoglobinei
23
n HEMATIA
- Ø 7,6 µ; în frotiu : 8,5µ
- Formă de lentilă biconcavă
- În coloraţia Giemsa se colorează
în roşu cărămiziu
- ♂ : 5 mil/mm3
- ♀ : 4,5 mil/mm3
24
Eritrocit
Ø:7- 8µ
N: NU
Nucleoli: NU
Cromatina: NU
Citoplasma roz-portocaliu
N/C NU
Măduvă: NU
Sânge: tip celular
predominant
25
Variaţii de formă şi mărime ale hematiilor
26
NORMOCITE
n Dimensiuni comparabile
cu ale nucleului unui lf
Populatie dimorfică de
Macrocite Microcite eritrocite
Boli de ficat Anemie prin deficit de fier,
Transfuzia
Deficienţa de vit. B12, folat sideroblastică
Sindroamele
Nou-născut Thalasemie minor
mielodisplazice
Intoxicaţie cu Pb
Anemiile prin deficit de vit.
Unele hemoglobinopatii
B12, de folat sau de fier
27
MODIFICĂRI ALE CONŢINUTULUI ÎN Hb
n NORMOCROMIE
(eritrocite
normocrome)
28
MODIFICĂRI ALE FORMEI ŞI CULORII ERITROCITELOR
Acantocite Sferocite
n Eritrocite cu Eritrocite cu formă rotundă
proiecţii neregulate, fără zonă palidă central
variabile ca formă, (sferocitoza ereditară,
nr, lăţime si lungime
(ex. splenectomie, anemie hemolitică)
malabsorbţie, boli
severe de ficat)
Echinocite
n Eritrocite cu contur
crenelat, proiecţii
scurte, egal
distanţate
(ex. uremie, anemie
hemolitică
microangiopatică,
artefacte de
realizare a frotiului)
29
Modificări ale formei şi culorii eritrocitelor
Drepanocite
n Eritrocite cu formă
alungită, cu
terminaţii ascuţite;
pot fi curbate sau în
formă de S
(Hemoglobinopatia
S: siclemie)
Eliptocite/ovalocite
Stomatocite Eritrocite în formă de
Eritrocite cu defect de ţigară (eliptocite) sau în
culoare, cu regiune
formă de ou (ovalocite)
centrală mai palidă, în
formă de
“gură” (stomatocitoza
ereditară, alcoolism, boli
de ficat)
Dacriocite
He “în formă de lacrimă”
Eritrocite în formă pară sau de
picătură
(Mielofibroza cu metaplazie
Thalasemii) 30
INCLUZIUNI ÎN ERITROCITE
Corpii Howel-Jolly
Culoare: închisă, spre violet
Compoziţie: ADN (spelenectomia,
anemia megaloblastică, anemia
hemolitică)
Inele Cabot
Culoare: albastru închis → violet
Formă: ansă, inel, sau 8
Compoziție: resturi ale fusului de diviziune
(Sd. mielodisplazice, anemia megaloblastică)
31
GRANULOCITOPOIEZA
n Seria granulocitară
reprezentată prin 6 celule
♦ Sectorul de diviziune
mieloblastul
promielocitul
mielocitul
♦ Sectorul de maturare
metamielocitul
granulocitul nesegmentat
granulocitul segmentat
32
33
34
SERIA GRANULOCITARĂ
Transformările produse în cursul ciclului de
maturare:
38
Mieloblast
Ø:10 -20µ
N: rotund/oval
Nucleoli: 4-5
Cromatina fină
Citoplasma
moderat bazofilă
Granule absente
N/C 4:1
Măduvă: 0-1%
Sânge: 0%
39
n PROMIELOCITUL
- mai mare decât mieloblastul
• nucleul - mare, rotund sau oval, cu cromatina mai densă, difuză
şi nucleolii mai puţin clari
• citoplasma - în general bazofilă, prezintă granulaţii dense
azurofile (granulaţii primare), nespecifice - tip de lizozomi
primari, delimitate de o membrană
40
Promielocit
41
n MIELOCITUL
- celula cheie (ultima care se divide şi
prima care se maturează)
• semnele de maturare: apariţia de
granulaţii specifice: neutrofile, eozinofile
şi bazofile
• mielocitele sunt mai mici ca dimensiuni
(12-18 µ)
• citoplasma mai slab bazofilă
• nucleul : escavat, în formă de potcoavă
• granulaţiile specifice (cele mai mici
granulaţii sunt cele neutrofile, cele mai
mari bazofile, eozinofile intermediare)
Mielocit eozinofil
Mielocit neutrofil
42
Mielocit
Ø:12-18 µ
N: rotund/oval
Nucleoli: Nu
Cromatina: mai
condensată decât
în promielocit
Citoplasma uşor
bazofilă
Granulaţii specifice
prezente
N/C 2:1
Măduvă: 5-19%
Sânge: 0%
43
Sectorul de maturare
n METAMIELOCITUL
- dupărepetate diviziuni, mielocitul
devine mai mic şi nu se mai divide
Ø:10-15 µ
N: indentat
Nucleoli: Nu
Cromatina: bulgări
Citoplasma
de la albastru pal la roz
Granule prezente
N/C 1,5:1
Măduvă: 13 - 22%
Sânge: 0 %
45
n GRANULOCITUL
NESEGMENTAT
• Formula leucocitară:
GNeSg (N = 0 - 5 %)
Apariţia unui număr mai mare de
celule imature în sânge -
“deviere spre stânga” a formulei
leucocitare
46
Neutrofil
nesegmentat
Ø:10-15µ
N: în potcoavă
Nucleoli: Nu
Cromatina:
bulgări mari
Citoplasma
eozinofilă
Granule prezente
N/C: citoplasma
predominentă
Măduvă: 17 - 33%
Sânge: 0 - 5%
47
Granulocite segmentate
49
Neutrofil segmentat
(adult)
Ø:10-15µ
N: 2-5 lobi
Nucleoli: Nu
Cromatina: bulgări
mari
Citoplasma
eozinofilă
Granule prezente
N/C: citoplasma
predominentă
Măduvă: 3 - 11%
Sânge: 40 - 75%
50
51
52
Diferenţierea
granulocitelor
eozinofile:
stadii identice
morfologic cu
neutrofilele
până la
etapa de
mielocit eozinofil
53
Mielocit eozinofil
Ø:12-18µ
N: rotund/oval
Nucleoli: Nu
Cromatina: bulgări
mari, mai condensat
decât promielocit
Citoplasma (palid)
eozinofilă
Granule prezente
N/C: 2:1
Măduvă: 0 – 2 %
Sânge: 0 %
54
Metamielocit eozinofil
Ø:10-15µ
N: Indentat
Nucleoli: Nu
Cromatina: bulgări
mari
Citoplasma
eozinofilă
Granule prezente
N/C: 1,5:1
Măduvă: 0-2%
Sânge: 0%
55
Eozinofil nesegmentat
Ø:10-15µ
N: în potcoavă
Nucleoli: Nu
Cromatina: bulgări
mari
Citoplasma
eozinofilă
Granule prezente
N/C: Predomină citoplasma
Măduvă: 0-2%
Sânge: rar
56
n Granulocitele eozinofile
- la adult 2 - 4% ; la copil 2 - 6%;
- Ø: 12-14 µ
57
Eozinofil
58
Eozinofil segmentat
Ø:12-17µ
N: în desagă
Nucleoli: Nu
Cromatina: bulgări
mari
Citoplasma
eozinofilă
Granule prezente
N/C: Predomină citoplasma
Măduvă: 0 - 3%
Sânge: 0 - 5%
59
60
Diferenţierea granulocitelor
bazofile:
61
n Maturarea precursorilor
bazofilelor este paralelă cu
stadiile de maturare pentru
eozinofile şi neutrofile
n Diferenţele
ţin numai de
culoarea, tipul granulelor şi
culoarea citoplasmei
n Stadiile
imature ale
bazofilelor sunt observate
foarte rar
62
n Granulocitele bazofile
0,5% din nr. de granulocite (Ø: 8 -10µ)
● Nucleul: trilobat (nucleu în treflă), fără nucleoli
● Granulaţiile citoplasmatice :
MO (col MGG): bazofile, inegale ca mărime şi inegal
distribuite, acoperă suprafaţa nucleului; granulaţiile se
colorează metacromatic cu albastru de toluidină (în roşu
violet), PAS pozitive
Conţin: heparină, histamină, serotonină
ME: alcătuite din numeroase granule fine, rotunde,
strâns împachetate
64
65
MEGAKARIOCITOPOIEZA
Formarea plăcuţelor sanguine
n Megacarioblastul
(celula progenitoare unipotentă: CFU-MK)
● Ø (25 - 40µ), mai voluminoasă decât blaştii altor serii
● nucleul: mai mulţi lobi, rap. N/C este↑
prin endomitoză devine mai mare şi nucleul apare poliploid
● citoplasma: bazofilă, acumulează granule azurofile
66
n Megacariocitul bazofil :
mai mare decât megacarioblastul, nucleu polilobat,
citoplasma intens bazofilă, poate conţine câteva
granulaţii azurofile
67
68
Megakarioblaste
Ø:20-90µ
N: multilobat (2-16,
comun 8)
Mărime celulară
corespunzătoare cu
nr de lobi
Heterocromatina
Citoplasma
bazofilă, abundentă
Granule azurofile
N/C: variabil
Măduvă: 5 -10 la
ob. 10x
Sânge: 0%
69
► Maturarea nucleului : prin
endomitoze → celulă poliploidă
Maturarea citoplasmei constă în
creşterea progresivă a volumului
ei şi scăderea bazofiliei
► Megacariocitele:
localizate lângă sinusoide în care
pătrund prelungirile lor. De-a
lungul canalelor de demarcaţie,
prelungirile se fragmentează în
proplăcuţe
► Fiecare Mk şi nucleul,
degenerează şi sunt fagocitate de
Mf
70
PLĂCUŢELE SANGUINE
- fragmente citoplasmatice
(anucleate)
- formă rotundă sau
ovalară
- Ø: 2-5 µ → 30 µ
n ME:
numeroşi microtubuli,
circumscriu plăcuţa la
periferie şi îi dau formă
72
n Granulele cu miez dens (granule δ, Ø =100 -150nm)
- conţin: Ser, ADP, ATP şi Ca
Megakariocit
74
Megakariocite
75
MONOCITOPOIEZA
n Celulele bipotente CFU-GM se divid şi
dau naştere la CFU-G şi la CFU-M→
Monoblast → Promonocit→Monocit
n Promonocitul
- celulă mare (16-18 µ)
- nucleu rotund, excentric
- citoplasma: albăstruie cu
numeroase granule azurofile
77
Mielograma
n În măduvă există un alt
raport decât în sânge al
elementelor sanguine
n Mielograma se realizează
prin puncţie sternală sau din
creasta iliacă
n Mielograma demonstrează
raporturile între :
- diferite serii celulare
- celulele mature şi tinere
n Numărul de celule circulante
rămâne constant tot timpul,
deoarece celulele din cele
două compartimente se află
în echilibru
78
Distribuţia celulelor hematopoietice în parenchimul
MRH
1. Nr. total de celule
a. 60% situate în granulocitopoieză (formare de neutrofile,
bazofile, eozinofile)
b. 30% în eritrocitopoieză (formare de eritrocite);
c. 10% în trombocitopoieză, monocitopoieză şi limfopoieză
(formare de plachete, monocite, limfocite)
2. Raportul mieloid/eritroid (M/E): volumul total (sau nr) de celule
care sunt angajate în granulocitopoieză raportat la volumul total
(sau nr) de celule angajate în eritropoieză în MRH
a. Normal raportul M/E 3:1 (2:1→4:1)
b. Raport > (ex.M/E 8:1) indică diminuarea eritrocitopoiezei sau
creşterea granulocitopoiezei (ex. leucemia mieloidă cronică)
c. Raport < (ex.M/E 1:5) indică creşterea eritrocitopoiezei (ex.
policitemie) sau scăderea granulocitopoiezei
79
n Alte raporturi în mielogramă exprimă numărul de celule
mature şi imature:
- seria granulocitară: 64/36 cel. mature/cel. imature
- seria monocitară: 80/120 cel.mature/ cel. imature
n Numărul mitozelor: -
seria granulocitară: la 1000 celule sunt 5-6 mitoze
- seria eritrocitară : la 1000 celule sunt 15-18 mitoze
n Megacariocitele sunt cele mai puţine: la 100 celule nucleate
se găsesc ~ 2 MK
80
Mielograma
n Celule eritropoietice
– Eritroblaşti bazofili (şi proeritroblaste) 3% (0,2-4%)
– Eritroblaşti policromatofili 12% (6-18%)
– Eritroblaşti ortocromatofili 3% (1-5%)
n Celule granulopoietice
– Promielocite (şi mieloblaste) 3% (0,4%-5%)
– Mielocite
§ Neutrofile 12 % (5-19%)
§ Eozinofile 1,5% (0,5-3%)
§ Bazofile 0,3% (0-0,5%)
– Metamielocite (toate tipurile) 8% (4-15%)
– Celule nesegmentate 24%
– Neutrofile 18% (13-20%)
– Eozinofile 2% (0-6%)
– Bazofile 0,2% (0-5%)
n Limfocite 10% (10-16%)
n Monocite 2% (0-6%)
n Plasmocite 0,3% (0-2%)
81
Frotiu medular
82
Frotiu medular - seria granulocitară
83
Frotiu medular – seria eritrocitară
84