COALA.......................

METABOLISMUL PROTEINELOR. BIOSINTEZA HEMOGLOBINEI

Coordonator:
Prof.

Student:
HOAR ANCA

- Decembrie 2015 -

CUPRINS:

I.

Proteinele definiie, generaliti

II.

Clasificarea proteinelor

III.

Cromoproteinele clasificare

IV.

Metabolismul proteic

V.

Metabolismul cromoproteinelor. Biosinteza hemoglobinei

VI.

Abrevieri folosite in text

VII. Bibliografie

I.

Proteinele definiie, generaliti

Proteinele sunt componeni de baz ai celulei, reprezentnd aproximativ 50% din greutatea ei uscat.
Proteinele se gsesc n toate compartimentele celulare, fiind substane fundamentale din toate punctele de
vedere pentru structura i funcia celulei. Prin hidroliza proteinelor se obin compui cu greutate moleculara
mic, aminoacizi.
n organism proteinele ndeplinesc funcii multiple (plastic, energetic, catalitic etc.) care le
difereniaz de lipide sau glucide.
n alctuirea moleculelor proteice, aminoacizii se unesc prin legturi amidice numite legturi peptidice,
care se realizeaz prin eliminarea unei molecule de ap ntre gruparea carboxil a unui aminoacid i gruparea
amino a aminoacidului urmtor.
Proteinele sunt biopolimeri macromoleculari care conin n molecul peste 100 de resturi de
aminoacizi unii prin legturi peptidice. Numrul, natura i modul de aranjare al aminoacizilor n molecul
variaz de la o proteina la alta. Moleculele proteice pot adopta diverse conformaii n spaiu, fiind descrise
astfel mai multe niveluri de organizare: primar, secundar, teriar i cuaternar.
a. Structura primar
Structura primar reprezint numrul i ordinea aminoacizilor n molecul.

b. Structura secundar
Structura secundar reprezint cel de-al doilea nivel de organizare structural a proteinelor,
reprezentnd aranjarea spaial a moleculei proteice pe o singur ax. Acest lucru este posibil datorit
legturilor de hidrogen formate ntre resturile carboxil i amino aparinnd legturilor peptidice.
Cea mai mare contribuie la elucidarea structurii secundare a proteinelor au avut-o lucrrile lui
Pauling si Corey care au elaborat dou modele teoretice: modelul helicoidal (spiralat) i modelul straturilor
pliate, modele care explic destul de bine proprietile fizico-chimice i biologice ale moleculelor proteice.

b.1. Structura sau modelul helicoidal rezult prin spiralarea catenei polipeptidice n jurul unui
cilindru imaginar (fig. 1)
n funcie de orientarea aminoacizilor, elicea poate fi de tip -dreapta, care are sensul de rotaie al
unui urub cu filetul spre dreapta i de tip -stnga cu sensul de rotaie spre stnga. n ambele forme radicalii
R ai aminoacizilor sunt proiectai spre exteriorul elicei; n elicea dreapta radicalul R se afl n poziie trans
fa de oxigen, motiv pentru care aceasta forma este mai stabil.

Figura 1 Structura

b.2. Structura sau modelul straturilor pliate se bazeaz pe formarea legaturilor de hidrogen
intercatenare i poate apare n doua variante: modelul paralel al straturilor pliate (caracteristic -keratinei) i
modelul antiparalel (ce poate fi ntlnit n cazul fibroinei din mtase).
n modelul paralel (a) toate lanurile polipeptidice sunt aezate paralel, cu gruprile R orientate n
acelai sens, n timp ce n straturile antiparalele (b) catenele polipeptidice sunt aezate fa n fa. Spre
deosebire de -helix, n structura de tip , legturile de hidrogen sunt aproape perpendiculare pe axa lanului
polipeptidic (fig. 2).

Figura 2 Structura

n afara celor dou modele caracteristice pentru structura secundar a proteinelor descrise mai sus,
mai exist o structur particular ntalnit n colagen, o proteina fibrilar, insolubil i elastic prezent n
esuturile animale (esut conjunctiv, tendoane, ligamente, cartilagii, piele, oase etc.) i care reprezint
aproximativ 25% din proteinele corpului - Structura Colagenul.

Structura secundar a colagenului este un triplu helix de dreapta format din trei lanuri polipeptidice
(fiecare fiind un helix de stnga) legate intre ele prin legaturi de hidrogen. O caracteristic interesant a
structurii colagenului este faptul c ntre capetele moleculelor de colagen se gsesc spaii libere care joac un
rol nsemnat n formarea osului, ntruct n aceste spaii se fixeaz calciu, sub form de hidroxiapatit (fosfat
bazic de calciu).

c. Structura teriar
Structura teriar reprezint interaciunea spaial ntre segmente care nu sunt vecine n lanul
polipeptidic, avnd ca rezultat o structur tridimensional, globular. Ea este caracteristic n special proteinelor
globulare, a cror catene macromoleculare sunt strnse sub forma unor cilindri elipsoidali cu o lungime care nu
depete de 2-6 ori diametrul lor. Este rezultatul interaciunii dintre radicalii R ai resturilor de aminoacid din
lanul polipeptidic. Forele de atracie implicate n formarea structurii teriare sunt datorate urmtoarelor tipuri
de legturi (fig. 3):
a) Legturi de hidrogen care pot fi stabilite ntre gruparea fenolic a tirozinei i o grupare carboxil de la
acidul glutamic sau acidul aspartic, sau ntre radicalul imidazolic al histidinei i gruparea hidroxilic a
serinei.
b) Legturi ionice ntre grupele carboxil ale acizilor dicarboxilici i grupele amino ale acizilor diaminai.
Studii de difracie a razelor X au evideniat c n realitate se formeaz un numr mai mic de legturi
ionice, datorit faptului c majoritatea gruprilor care ar putea realiza aceste legturi intr n interaciune
cu solventul.
c) Legturi nepolare prin fore van der Waals care se stabilesc ntre radicalii hidrocarbonai al alaninei,
fenilalaninei, leucinei etc. Aceste legturi sunt cele mai importante pentru meninerea proteinei n
structura teriar. Resturile nepolare, hidrofobe se gsesc n interiorul ghemului rezultat prin ncolcirea
lanului polipeptidic avnd ca efect stabilizarea din punct de vedere termodinamic a moleculei, mai mult
dect n cazul n care aceste resturi ar fi orientate spre mediul exterior. Din acest motiv lanurile
peptidice introduse n soluie apoas se ncolcesc spontan aa fel nct resturile nepolare se situeaz n
interiorul ghemului, iar gruprile polare rmn pe suprafaa moleculei.
d)

Legturi disulfidice S -S-, covalente, pot contribuie la meninerea structurii teriare a proteinelor

globulare limitnd tendina de depliere a moleculei, ns contribuia lor este mic, deoarece sunt puine.

Figura 2 Tipuri de legaturi

d. Structura cuaternar
Un numr mare de proteine sunt constituite din mai multe lanuri polipeptidice, formnd oligomeri.
Lanurile individuale se numesc protomeri sau subuniti, fiecare avnd structur primar, secundar i teriar
proprie. Subunitile se asambleaz n structura cuaternar prin fore asemntoare celor din structura teriar,
cu deosebirea, c n acest caz, legturile se stabilesc ntre subuniti.
n general, proteinele cu greutate molecular mai mare de 50.000 sunt formate din mai multe subuniti
polipeptidice i sunt active sub form de oligomeri, protomerii fiind inactivi. n multe proteine subunitile sunt
identice: chimotripsina, fosfataza alcalin (dou subuniti), aldolaza (trei subuniti), glutamat dehidrogenaza
(patru subuniti), catalaza (optsprezece subuniti), iar n altele, subunitile sunt diferite: hemoglobina (dou
lanuri a i dou b ), lactat dehidrogenaza tetramer format din dou tipuri de subuniti notate H (heart) i M
(muscle).
Asamblarea subunitilor n structura cuaternar este posibil datorit existenei unor zone
complementare spaial si electric pe suprafeele subunitilor.
Interaciunile dintre subuniti prin suprafeele complementare sunt caracterizate prin fenomenul de
cooperare, adic primele contacte odat realizate, favorizeaz formarea celorlalte.

II.

Clasificarea proteinelor

Proteinele se clasific n general dup forma moleculelor i dup compoziia lor chimic. n clasificarea
proteinelor dup forma molecular deosebim:
- proteine globulare (sferoproteine) care au form aproape sferic (ovoidal) i sunt, n general,
solubile n ap, n soluii diluate de acizi, baze i sruri. Din aceast clas fac parte albuminele, globulinele,
histonele, protaminele i prolaminele;
-

proteine fibrilare (scleroproteine), caracterizate prin structur fibroas, de forma unui elipsoid ntins cu
raportul dintre axe de cel puin 1 : 100, sunt foarte greu solubile n ap, au vscozitate mare i putere de
difuzie mic. Aceste proprieti explic prezena lor n esuturile de susinere. Din aceast clas fac parte
colagenul, elastina, fibrinogenul, miozina, actina, keratina etc.
Dup compoziia chimic, proteinele se pot clasifica n:

proteine simple (holoproteine), constituite din aminoacizi;

proteine conjugate (heteroproteine), conin pe lng aminoacizi i o grupare prostetic. n funcie de
natura acestei grupri, heteroproteinele se mpart n fosfoproteine, glicoproteine, lipoproteine,
metaloproteine, nucleoproteine i cromoproteine.

III.

Cromoproteinele clasificare

Cromoproteinele sunt proteine conjugate care au drept grupare prostetic, o grupare cromofor. Dup
natura acestei grupri, se disting dou mari clase de cromoproteine:
a. porfirinice - care conin un nucleu tetrapirolic
b. neporfirinice care conin drept grupare prostetic derivai de izoaloxazin sau carotene (vit. B2 i
A).
Dintre cromoproteinele neporfirinice deosebit de importante sunt flavoproteinele care au drept grupare
prostetic o flavin (derivat de izoaloxazin) i care ndeplinesc n organism rol catalitic, precum i
carotenoproteinele, a cror grupare prostetic este un derivat terpenic (carotenii). Acestea din urm, sunt
importante n procesul vederii.
Cromoproteinele porfirinice conin n molecul un nucleu substituit de porfirin. Ele ndeplinesc
diverse funcii biologice, cum ar fi: transportul de oxigen, transportul de electroni, cataliza enzimatic.
Specificitatea de funcie a acestor proteine se datoreaz apoproteinei legate de nucleul porfirinic. Sunt
reprezentate de mioglobin, hemoglobin, citocromi, hemenzime.

Porfirinele sunt derivai de porfirin, un compus ciclic format din patru nuclee pirolice unite prin
grupri metinice (-CH=).

Prin substituirea atomilor de hidrogen din poziiile 1-8 cu diferii radicali se obin porfirinele, care se
denumesc i se clasific n funcie de aceti substitueni n: etioporfirine, mezoporfirine, protoporfirine i
coproporfirine. Dintre acestea cel mai des ntlnite sunt protoporfirinele care conin patru grupri metilice, dou
grupri vinil i dou resturi de acid propionic. Datorit celor trei tipuri de substitueni din molecul, pot exista
15 forme izomere de protoporfirine. Cea mai nsemnat dintre ele este protoporfirina IX (1,3,5,8-tetrametil-2,4divinil-6,7-dipropionil-porfirina). Porfirinele posed un sistem de duble legturi conjugate ce confer acestor
compui stabilitate, culoare roie-violet, absorbia caracteristic i fluorescen. Reducerea gruprilor metinice
duce la formarea de compui necolorai, numii porfirinogeni. Prin intermediul azotului pirolic, porfirinele pot
fixa ioni metalici cum sunt: Fe, Mg, Zn, Cd, Co, Cu, Mn, V sub form de compleci chelatici. Un astfel de
complex al protoporfirinei IX cu Fe 2+ se numete protohem sau hem, un complex similar cu Fe3+ poart numele
de hemin sau hematin.
Hemul este situat ntr-o cavitate a moleculei proteice. Cele dou resturi propionat, ionizate la pH
fiziologic, sunt orientate spre suprafa, iar restul hemului n interiorul cavitii, nconjurat de aminoacizi
nepolari, cu excepia a dou resturi de histidin prin care se face legtura cu partea proteic.

IV.

Metabolismul proteic

n organism are loc un permanent transfer proteic intertisular. La fondul comun de aminoacizi
contribuie att aminoacizii de origine alimentar, ct i cei provenii din degradarea proteinelor tisulare. Fondul
comun de aminoacizi va fi utilizat pentru sinteza de proteine, pentru sinteza de produi specializai (serotonina,
adrenalina, tiroxina), sau pentru degradare n scopuri energetice.
Cantitatea minim de proteine necesar organismului este de aproximativ 30 g/zi. Cnd consumul de

proteine este inadecvat, ficatul nu poate sintetiza suficiente proteine plasmatice pentru meninerea balanei ntre
fluide i esuturi, favoriznd apariia edemelor.
Valoarea biologic a unei proteine alimentare depinde de compoziia sa n aminoacizi. Valoarea este
cu att mai mare cu ct coninutul n aminoacizi este mai bogat, mai variat i mai apropiat de compoziia
proteinelor proprii organismului. Msura acestei valori este dat de coeficientul de utilizare a proteinelor care se
exprim prin raportul:
N ingerat N urinar
N ingerat
Coeficientul indic n ce msur o protein ingerat este ncorporat n proteinele proprii. Atunci cnd,
dup administrarea unei proteine, eliminarea urinar de azot este crescut, nseamn c aminoacizii din proteina
respectiv au fost n principal degradai i nu ncorporai n proteinele proprii organismului.
Proteinele de origine vegetal, n special fina de porumb, care este lipsit de triptofan, tirozin i
lizin, au valoare biologic redus. Proteinele de origine animal au valoare biologic ridicat.
Balana azotat nu poate fi meninut dac din alimentaie lipsesc urmtorii aminoacizi: fenilalanina,
valina, triptofanul, treonina, lizina, leucina, histidina, arginina, izoleucina i metionina, aa numii aminoacizi
eseniali. Arginina i histidina sunt considerai aminoacizi semieseniali deoarece n perioada de cretere,
necesarul pentru arginin i histidin este crescut i sinteza endogen nu asigur ntreaga cantitate necesar.
Cnd unul dintre aminoacizii eseniali lipsete, sinteza proteinelor n componena crora intr aceti
aminoacizi nu mai are loc, iar ceilali aminoacizi sunt dezaminai i degradai; bilanul azotat devine negativ.
Valoarea biologic a unei proteine depinde i de digestibilitatea ei; proteinele din plante, fiind protejate
de un nveli de celuloz, sunt mai greu digestibile. Un caz aparte l constituie albuul de ou crud i fasolea soia,
care conin factorii antitriptici ce se opun digestiei.
Digestia i absorbia proteinelor
n tubul digestiv, proteinele nu pot fi absorbite ca atare i de aceea sunt supuse aciunii unor enzime
numite peptidaze sau proteaze, care le scindeaz pn la aminoacizi.
Dup specificitate, peptidazele se mpart n endopeptidaze i exopeptidaze. Ele sunt capabile s
scindeze legturile peptidice situate fie n mijlocul unui lan polipeptidic (endopeptidaze), fie la capetele
acestuia (exopeptidaze). La rndul lor, exopeptidazele sunt aminopeptidaze i carboxipeptidaze dup cum
detaeaz un aminoacid din captul N-terminal sau C-terminal:

Peptidazele digestive sunt elaborate sub form inactiv n scopul de a proteja celulele i canalele secretoare de
aciunea lor proteolitic. Aceti precursori (proenzime sau zimogeni) devin activi n lumenul tubului digestiv.
Activarea lor se realizeaz prin hidroliza unor legturi peptidice care fie c detaeaz anumite peptide sau
aminoacizi, fie c modific plierea lanului polipeptidic, demascnd centrul activ al enzimei. De multe ori acest
proces se petrece autocatalitic.
Digestia proteinelor alimentare ncepe n stomac. Principala enzim proteolitic gastric este pepsina.
Pepsina, o endopeptidaz, este secretat de celulele mucoasei gastrice sub form de pepsinogen.
Activarea are loc sub aciunea acidului clorhidric din stomac, sau autocatalitic. Pepsina acioneaz optim la pH
1-2 i prezint specificitate pentru legturile peptidice a cror grupare NH- provine de la tirozin i
fenilalanin.
Enzimele pancreatice (tripsina, chimotripsina, elastaza, carboxipeptidaza) acioneaz asupra
proteinelor neatacate de pepsina gastric ct i asupra produilor de digestie ale acesteia. Sub aciunea
combinat a proteazelor pancreatice rezult di- sau oligopeptide.
Tripsina endopeptidaz pancreatic, rezult din tripsinogenul activat de enterokinaz sau autocatalitic.
Activarea implic detaarea unui hexapeptid din captul N-terminal. Are pH optim la 7-8 i specificitate pentru
legturile peptidice a cror grupare carboxil provine de la un aminoacid bazic, cum ar fi arginina.
Chimotripsina endopeptidaz pancreatic secretat sub forma inactiv de chimotripsinogen i
activat de tripsin care detaeaz patru aminoacizi sub forma a dou dipeptide. Chimotripsina are specificitate
pentru legturile peptidice n care sunt implicate gruprile carboxil ale fenilalaninei, tirozinei i triptofanului.
Absorbia aminoacizilor prin mucoasa intestinal este n parte o difuzie pasiv, dar n cea mai mare
msur este un transport intermediat de proteinele transportoare specifice (translocaze). Translocazele seamn
cu enzimele: prezint fenomenul de saturare cu substrat, sunt specifice, sunt susceptibile la aciunea unor
inhibitori. Proteinele transportoare de aminoacizi sunt determinate genetic i defecte genetice ale acestor
proteine altereaz capacitatea de absorbie a mucoasei intestinale pentru unul sau mai muli aminoacizi. Erorile
ereditare de absorbie a aminoacizilor determin tulburri grave de nutriie i metabolism (boala Hartnup,
cistinuria, glicinuria).
Peptidele mici absorbite, sunt rapid hidrolizate de ctre peptidazele localizate chiar n celulele care fac
absorbia, nct n circulaia portal sunt eliberai numai aminoacizi.

V.

Metabolismul cromoproteinelor. Biosinteza hemoglobinei

Cromoproteinele porfirinice sunt formate dintr-o protein i o grupare prostetic, reprezentat de o

structur porfirinic.
Porfirinele sunt compui ciclici, formai din patru nuclee pirolice unite prin legturi metenil (-C= ).
O proprietate caracteristic a porfirinelor este formarea de complexe cu ionii metalici, care se leag de atomii de
azot din nucleele pirolice.
Printre porfirinele naturale care ndeplinesc funcii biologice importante se numr: hemoglobina,
mioglobina, citocromii, catalaza, peroxidazele, triptofan-pirolaza, clorofila etc., hemoglobina fiind porfirina
major din organism.

Biosinteza hemoglobinei
Sinteza hemoglobinei are loc n celulele eritropoietice din mduva osoas, ficat i splin.
Biosinteza hemului - Prima i ultimele trei enzime ce intervin n procesul biosintezei hemului se gsesc
n mitocondrii, pe cnd celelalte patru se afl n citosol ( ura 343-l). Prima enzim, 5-aminolevulinat sintetaza
(ALA sintetaza), catalizeaz condensarea glicinei activat de piridoxal fosfat i succinil coenzima A pentru a
forma ALA. n ficat, aceast enzim cu valoare limitant este indus de ctre o varietate de droguri, steroizi i
alte substane chimice. Formele distincte eritroid-specifice i non-eritroide (respectiv de curare) ale ALA
sintetazei sunt codificate de gene separate. Cele dou gene ale ALA sintetazei asigur bazele pentru reglarea cii
specifice n functie de esut. Cea de-a doua enzim, 5-aminolevulinat dehidraza (ALA dehidraza), catalizeaz
condensarea a dou molecule de ALA pentru a forma porfobilinogen (PBG). Patru molecule de PBG se
condenseaz pentru a forma tetrapirol uroporfirinogen III printr-un proces n doua faze, catalizat de
hidroximetilbilan sintetaza (HMB sintetaza, cunoscut i ca PBG-dezaminaza sau uroporfirinogen I sintetaza) i
de uroporfirinogen HI sintetaza (URO sintetaza). HMB sintetaza catalizeaz condensarea cap-coada a patru
molecule de PBG printr-o serie de dezaminri pentru a forma tetrapirol hidroximetilbilanul liniar.
Uroporfirinogen III sintetaza (URO sintetaza) catalizeaz rearanjarea i ciclizarea rapid a HMB pentru a forma
asimetricul, fiziologicul, octacarboxilat porfirinogenul uroporfirinogen III.
Cea de-a cincea enzim din acest proces, uroporfirinogen decarboxilaza (URO decarboxilaza), catalizeaz
ndepartarea secvenial a celor patru grupri carboxil ale legturilor laterale ale acidului acetic din
uroporfirinogen III pentru a forma copro-porfirinogen III, un porfirinogen tetracarboxilat. Acest compus intr
apoi n mitocondrie, unde copro-porfirinogen oxidaza (COPRO oxidaza), cea de-a asea enzim, catalizeaz
decarboxilarea a dou dintre cele patru grupri ale acidului propionic pentru a forma cele dou grupri nii ale
proto-porfirinogenului IX, un porfirinogen decarboxilat. Apoi, proto-porfirinogen oxidaza (PROTO oxidaza)
oxideaz protoporfiri-nogenul IX n protoporfirina IX prin ndepartarea a ase atomi de hidrogen. Produsul
reaciei este o porfirin (forma oxidat), spre deosebire de produii intermediari precedeni de tip tetrapirol, care

sunt porfirinogeni (forme reduse). Ultimul pas este inseria fierului n protoporfirina IX pentru a forma
hemul. Aceasta reacie este catalizat de ctre a opta enzim a procesului, ferochelataza (cunoscut i sub
denumirea de hemsintetaza sau protohem feroliaza).
Fiecare dintre enzimele ce intervin n biosinteza hemului este codificat de o gen separat. ntreaga
lungime a ADN uman pentru fiecare din aceste enzime, incluznd pe cele pentru ambele forme ale ALA
sintetazei, au fost izolate i secvenializate, iar localizarea cromozomial a genelor a fost identificat (elul 3433).
Reglarea biosintezei hemului - Aproximativ 85% din hem este sintetizat n celulele eritroide pentru a
furniza hemul pentru hemoglobin i mare parte din rest este produs n ficat, unde procesul de biosintez a
hemului este sub control feedback negativ. Hemul "liber" din ficat regleaz sinteza i translocaia mitocondrial
a formei neeritroide a ALA sintetazei hepatice. Hemul reprim sinteza ARNm si a ALA sintetazei i, de
asemenea, mpiedic transportul de enzime din citosol n mitocondrie. ALA sintetaza este indus de multe din
aceleai substane chimice care induc enzimele citocromului P450 n reticulul endoplasmatic al ficatului. Pentru
c majoritatea hemului sintetizat n ficat este folosit pentru sinteza enzimelor citocromului P450, ALA sintetaza
hepatic i citocromul P45Os sunt produse ntr-un mod coordonat.
Mecanisme de reglare diferite controleaz producia de hem pentru hemoglobin. ALA sintetaza eritroid
specific codificat pe cromozomul X este exprimat la niveluri mai mari dect enzima hepatic, iar un
mecanism de control eritroid specific regleaz transportul fierului n hematie. n timpul diferenierii eritroidului,
activitatea enzimelor biosintezei hemului crete ntr-un mod coordonat.
Degradarea hemoglobinei (Bilirubinogenez)
Bilirubina se formeaz n organism prin desfacerea oxidativ a inelului porfirinic din Hb i alte
hemoproteine. Locul de formare al bilirubinei este reprezentat de celulele sitemului reticuloendotelial din
splin, ficat (celulele Kupfer), ganglioni limfatici i macrofagele din diverse esuturi.
Sursa principal de bilirubin este Hb hematiilor mbtrnite. Mecanismul enzimatic al formrii
bilirubinei implic mai nti aciunea unui sistem enzimatic microsomal hemoxigenaza microsomal, care n
prezena oxigenului molecular i a NADPH desface nucleul porfirinic din hem cu eliberarea Fe, C sub form
de CO i biliverdin. n activarea O2 intervine citocromul P450, iar pentru transferul H de pe NADPH
intervine o flavoprotein. Fe este preluat de feritin n vederea reutilizrii lui n resinteza hemoproteinelor.
Feritina poate stoca pn la 4.500 Fe3+/molecul.
Biliverdina, compus colorat intens n verde, este n continuare redus sub aciunea biliverdinreductazei la bilirubin. Alturi de bilirubin se formeaz i mici cantiti de compui mono- i dipirolici
bilifuxina i mezobilifuxina.

Viteza de formare a bilirubinei depinde de activitatea hemoxigenazei microsomale, care este etapa
limitant a procesului. Biliverdin-reductaza este totdeauna n exces, de aceea nu se acumuleaz biliverdin
(pigment verde).
Bilirubina format n celulele sitemului reticulo-endotelial este un pigment galben, insolubil n ap.
Fiind liposolubil, poate ptrunde cu uurin prin membranele celulare de natur lipoproteic.
Bilirubina difuzeaz din celule n snge unde se fixeaz pe albumin, formnd fracia plasmatic a
bilirubinei cunoscut sub denumirea de bilirubin indirect sau neconjugat.
Prin fixarea pe albuminele serice, bilirubina este reinut n lumenul vaselor i transportat la ficat. Aici, datorit
fenestraiilor largi ale capilarelor sinusoidale, bilirubina este preluat de pe albumin de ctre celulele hepatice.
Procesul de captare este facilitat de existena unor proteine transportoare ligandine proteina I i proteina Z.
Datorit faptului c bilirubina este liposolubil, ea ar putea difuza prin membrana hepatocitului i s se
rentoarc n plasm. Acest proces este blocat n momentul n care bilirubina este conjugat cu acidul glicuronic.
Conjugarea este catalizat de bilirubin-glucurono-transferaza, enzim care particip la reacie sub form activ,
localizat la nivelul microzomilor din hepatocit. Acidul glucuronic, sintetizat din glucoz se activeaz la acid
UDP-glucuronic (UDPGA).
Formarea bilirubin-diglucuronidului poate avea loc i n regiunea canalicular biliar a membranei
hepatocitare printr-o UDP-glucuronil-transferaz similar.
O mic parte din bilirubin rmne sub form de monoglucuronid. Prin conjugare bilirubina devine
hidrosolubil, fapt ce favorizeaz eliminarea ei prin bil i meninerea ei n soluie pe cile biliare intra- i
extrahepatice.
Secreia bilei n canaliculele biliare este un proces biologic activ, energodependent i saturabil.
Preluarea bilirubinei conjugate se realizeaz tot prin participarea unei proteine acceptoare specifice. Eliminarea
bilirubinei n bil, mai ales curgerea ei prin cile biliare, depinde i de fluxul apos al bilei.
Un adult sntos elimin zilnic prin bil 200 300 mg bilirubin (1,0-1,2 mg/dL ser). n poriunea
final a ileonului i mai ales n colon are loc un proces de hidroliz a bilirubinei conjugate sub aciunea unei b
-glicuronidaze bacteriene i n acelai timp are loc o reducere a bilirubinei rezultnd o serie de compui
tetrapirolici incolori urobilinogeni (stercobilinogeni). Urobilinogenul este forma de eliminare care n contact
cu aerul este oxidat la urobilin (stercobilin), colorat.

La nivelul colonului, o mic cantitate de urobilinogen se reabsoarbe, este trecut n circulaie, ajunge la
ficat i excretat n bil, proces dependent de energie (circuit enterohepatic). O mic parte (0-4 mg/24h) scap n
vena suprahepatic i apare n urin, unde prin oxidare trece n urobilin. Cantitile acestea de urobilinogen nu
pot fi decelate cu reactiv Erlich.
n cazul formrii de bilirubin n exces (icter hemolitic) i a eliminrii crescute de pigmeni biliari n
intestin se formeaz cantiti mari de urobilinogen care pot depi capacitatea de captare i excreie a
hepatocitelor i n consecin, apar n urin cantiti detectabile. Urobilinogenuria apare i n caz de afeciuni
hepatocelulare, cnd mecanismul activ de captare i transport a urobilinogenului de ctre hepatocite este
perturbat. Creteri ale eliminrilor urinare de urobilinogen au loc i n cazuri de proliferare microbian
intestinal, n unele cazuri de constipaie, cnd prin stagnarea coninutului intestinal, crete posibilitatea de
absorbie a urobilinogenului din colon.
Cantitatea maxim de urobilinogen urinar se depisteaz ntre orele 14-16 probabil datorit faptului c
dup masa de prnz se ajunge la concentraia cea mai mare de bil n intestin.
Eliminarea urinar de urobilinogen se face prin filtrare glomerular i secreie tubular. Se poate spune
deci c urobilinogenuria depinde de cantitatea absorbit n intestin, de funcia hepatic i de funcia renal.
Bilirubina direct i indirect
Msurarea bilirubinei directe i indirecte servete pentru stabilirea naturii icterului.
-

Icter prehepatic (icter hemolitic) - n unele boli sau n intoxicaii se produce degradarea unor
cantiti mai mari de eritrocite i deci eliberarea unei cantiti mai mari de hemoglobin. Bilirubina
indirect care se formeaz n exces, transportat la ficat depete capacitatea de conjugare a celulei
hepatice. Rezultatul este creterea concentraiei de bilirubin n plasm, nsoit de creterea
produciei de urobilinogen, ce apare n cantiti mari n urin. Astfel de situaii se ntlnesc i la

nou-nscuii cu incompatibilitate de Rh. De obicei aceti copii sunt prematuri i pe lng

problemele hemolitice de cele mai multe ori prezint i deficit de enzime necesare pentru
glucuronoconjugare. Creterea bilirubinei poate depi de 16-20 ori valoarea normal i este n
principal indirect.
-

Icter hepatic. n bolile difuze ale ficatului, cum ar fi hepatitele i cirozele, celulele hepatice pierd
capacitatea de captare a bilirubinei din snge i capacitatea de conjugare i de aceea nivelele
bilirubinei sunt de obicei crescute, cu creterea fraciunii indirecte, dar uneori poate crete i
bilirubina direct deoarece lezarea celulei hepatice permite totui trecerea glucuronidului n
circulaie. Urobilinogenul este crescut.

Icter posthepatic (icter prin obstrucie) Blocarea cilor biliare mpiedic bilirubina de a prsi
celula hepatic. Consecina primar este diminuarea formrii urobilinogenului i astfel absena lui
n urin. Fecalele sunt decolorate din cauza lipsei stercobilinei. Formarea continu a bilirubinei
duce la creterea bilirubinei totale n ser (la nceput, bilirubina direct, care apare i n urin),
ducnd la apariia unui pigment brun n urin. n snge se va gsi att bilirubin direct ct i
indirect.

Bilirubina care apare n urin este n cea mai mare parte direct, probabil din cauza faptului c n urin
se excret numai bilirubin conjugat, mai solubil. De subliniat c bilirubina n urin apare atunci cnd exist o
cretere a bilirubinei directe n ser.
Dozarea bilirubinei totale este considerat util i n detectarea unui icter latent, cnd valorile sunt
cuprinse ntre 1,5-2 mg/dL ser.
Hiperbilirubinemia poate fi ntlnit i n alte stri de boal care implic hemoliza, cum ar fi bolile
infecioase, anemia pernicioas, sau hemoragiile.
Evoluia unui icter manifest poate fi urmrit prin dozri repetate ale bilirubinei n ser:
-

creterea concentraiei bilirubinei n ser este semn nefavorabil,

scderea progresiv a bilirubinei serice indic o ameliorare a bolii hepatice sau a obstruciei cilor
biliare.

VI.

Abrevieri folosite n text

ADN = Acizi deoxiribonulcleic

ADH = Alcool dehidrogenaz
ALA = Alanin
ARN = Acizi ribonulcleic
ARNm = ARN mesager
Hb = Hemoglobin

NADP (NADP+) = Nicotin adenin dinucleotid fosfat (forma oxidat)

NADPH (NADPH + H+) = Nicotin adenin dinucleotid fosfat (forma redus)
PBG = porfobilinogen

UDP = Uridin difosfat

UDP-G = Uridin difosfat-glucoza

VII. Bibliografie

Biochimie medical. Lsi, Leonid. USMF "Nicolae Testemianu". - Ed. a 2-a. - Chiinu : Universul,
2007. - 620 p

BIOCHIMIE MEDICAL Suport curs pentru studenii Facultilor de Medicin i Asisten

Medical - www.medtorrents.com/load/biochimia/biochimie_medicala

http://www.mediculmeu.com/endocrinologie-si-metabolism/hiperlipoproteinemiile/biosintezahemului-si-reglarea-biosintezei-hemului.php