Principii de numărare a elementelor figurate sanguine  33 

PRINCIPII DE NUMĂRARE A ELEMENTELOR FIGURATE 
SANGUINE 
 
 
METODA AUTOMATĂ 
 

16
Hemoleucograma completă poate fi efectuată cu un analizator automat care determină 
numărul și tipul diferitelor celule din sânge. O probă foarte mică de sânge este aspirată 
printr‐un sistem subțire de tuburi. În interiorul acesui sistem există senzori care numără 

20
celulele  și  care  pot  identifica  diferitele  tipuri  de  celule;  această  metodă  se  numește 
citometrie  în  flux.  Pentru  detecție  sunt  folosiți  senzori  optici  și/sau  se  măsoară 
impedanțe electrice. Unul dintre criteriile prin care aparatul poate discrimina tipurile de 

e,
celule este dimensiunea acestora. Alte  aparate pot  determina diferite  caracteristici ale 
celulelor pentru a le clasifica. 

gi
 
 
METODA MANUALĂ 
lo
 
io
Această  metodă  utilizează  microscopul  și  o  cameră  specială  de  numărare 
(hemocitometru), determinarea făcându‐se din sânge diluat. 
iz

 
-F

Hemocitometrul  este  o  lamă  groasă  de  sticlă  pe  care,  prin  șanțuri,  este  delimitată  o 
cameră dreptunghiulară. Pe această cameră este gravată o rețea de linii perpendiculare. 
Dispozitivul  este  precis  gravat  astfel  încât  ariile  suprafețelor  delimitate  de  linii  și 
adâncimea  camerei  sunt  cunoscute.  Astfel,  este  posibilă  numărarea  celulelor  sau 
r

particulelor dintr‐un anumit volum de lichid, putându‐se apoi calcula numărul de celule 
ta

din volumul întreg. Se folosesc diferite tipuri de hemocitometre; noi vom folosi camera 
de numărare Türk, gravată cu două șanțuri adânci paralele și unul transversal, în formă 
ep

de  “H”,  care  asigură  suportul  pentru  fixarea  lamelei  de  sticlă  și  separă  cele  două  zone 
gravate (vezi Figura 5). Fiecare suprafață de numărare are o arie de 9 mm2. Adâncimea 
dr

dintre  lamelă  și  suprafața  lamei  este  1/10 mm.  Rețeaua  camerei  de  numărare  este 
formată din linii perpendiculare aflate la o distanță de 1/5 mm, respectiv 1/20 mm (vezi 
În

Figura 6). Liniile perpendiculare delimitează pătrate și dreptunghiuri pentru numărarea 
celulele sanguine: 
– pătrate mici cu aria de 1/400 mm2 pentru numărarea globulelor roșii (hematii), 
–  pătrate  mari  cu  aria  de  1/25 mm2  pentru  numărarea  globulelor  albe 
(leucocite), 
– dreptunghiuri cu aria de 1/100 mm2 pentru numărarea trombocitelor. 
 
 34  Lucrări practice de fiziologie 

16
 

20
Figura 5. Hemocitometrul – vedere laterală și de sus 

e,
gi
lo
io
iz
r -F
ta

 
ep

Figura 6. Rețeaua camerei Türk 
 
Pipetele de diluție (pipete Potain) sunt pipete capilare (foarte subțiri) care au o cameră 
dr

de  amestecare  (omogenizare).  În  camera  de  amestecare  se  găsește  o  perlă  de  culoare 
roșie  în  cazul  pipetei  pentru  hematii  și  albă  în  cazul  pipetei  pentru  leucocite.  Pe 
În

porțiunea capilară a pipetei se află gradațiile pentru 0,5 și 1 µl, iar deasupra camerei de 
amestecare se află o gradație pentru 101 µl pe pipeta pentru hematii și 11 µl pe pipeta 
pentru leucocite (vezi Figura 7). La extremitatea superioară a pipetei este atașat un tub 
de cauciuc prevăzut cu o piesă bucală. 
 Principii de numărare a elementelor figurate sanguine  35 

16
20
e,
gi  
lo
Figura  7.  Pipete  de  diluție  (Potain)  pentru  hematii  (stânga)  și 
leucocite (dreapta) 
io
 
iz

 
r -F
ta
ep
dr
În
În
dr
ep
ta
r -F
iz
io
lo
gi
e,
20
16
 Numărarea hematiilor  37 

NUMĂRAREA HEMATIILOR 
 
 
MATERIALE NECESARE 
 
– hemocitometru, 
– pipetă de diluție pentru hematii, 

16
–  soluție  de  diluție  (soluție  Hayem;  Na2SO4  5 g,  NaCl  1 g,  sublimat  0,5 g,  apă 
distilată ad 200 g) 

20
– microscop optic, 
–  pentru  recoltarea  sângelui:  tampoane  de  vată,  alcool,  ace  sterile,  mănuși  de 
unică folosință. 
 

e,
 
METODA DE LUCRU 
 

gi
lo
Curățați  hemocitometrul  și  lamela  de  sticlă  cu  o  bucată  de  vată  îmbibată  cu  alcool  și 
lăsați să se usuce. Pregătiți hemocitometrul prin așezarea lamelei pe lamă. 
io
 
Pentru a evita riscul de infecție, spălați‐vă mâinile cu apă și săpun 
iz

înainte și după efectuarea oricăror teste sanguine. Când manipulați 
probele de sânge ale altor persoane, folosiți mănuși de unică folosință. 
-F

 
Aruncaţi acele folosite în recipientele special destinate acestui scop. 
 
Curățați vârful degetului cu vată îmbibată cu alcool. Lăsați degetul să se usuce. Folosind 
r

un ac steril, de unică folosință, faceți rapid o singură puncție la vârful degetului curățat 
ta

(țineți‐l  ferm  între  police  și  index),  suficient  de  adâncă  încât  sângele  să  curgă  liber  din 
rană. Ștergeți cu vată prima picătură de sânge. După ce s‐a format a doua picătură, se 
ep

aspiră  în  pipetă.  Nu  aspirați  până  când  nu  s‐a  format  o  picătură  suficient  de  mare 
deoarece  aceste  pipete  au  un  lumen  foarte  îngust  și  sângele  coagulează  extrem  de 
dr

repede în interior. Nu stoarceţi degetul! 
Așezați  vârful  pipetei  în  picătura  de  sânge.  Aspirați,  folosind  piesa  bucală,  o  coloană 
În

continuă de sânge în pipetă până la gradația 0,5 a pipetei. Ștergeți excesul de sânge de 
pe  vârful  pipetei.  Introduceți  vârful  pipetei  în  soluția  de  diluție  pentru  hematii  (soluția 
Hayem);  menținând  pipeta  în  poziție  verticală,  aspirați  soluție  de  diluție  exact  până  la 
gradația  101.  Diluția  ar  trebui  făcută  foarte  repede  și  exact  pentru  a  evita  coagularea 
sângelui și pentru a asigura precizia. Astfel se obține o diluție de 200 de ori (volumul din 
camera de amestecare este 101 µl‐1 µl=100 μl, conținând 0,5 µl sânge). 
Acoperiți  capetele  pipetei  cu  policele  și  degetul  mijlociu  și  agitați  pipeta  timp  de  3 
minute. 
 38  Lucrări practice de fiziologie 

Aruncați  primele  două  picături  din  pipetă  (provin  din  porțiunea  capilară  a  acesteia  și 
conțin  doar  soluție  de  diluție)  și  cu  a  treia  picătură  umpleți  hemocitometrul:  lăsați 
picătura  să  cadă  în  apropierea  lamelei  și  camera  de  numărare  se  va  umple  prin 
capilaritate. Lichidul în exces va curge în șanțuri. 
Așezați  hemocitometrul  la  microscopul  optic  și  examinați  proba  folosind  obiectivul  cu 
putere  mică  (10 x)  și  luminozitate  scăzută.  Numărați  hematiile  în  80  de  pătrate  mici 
consecutive,  luând  în  considerare  celulele  aflate  în  interiorul  pătratului  și  pe  două  din 
laturile acestuia. 

16
 
 

20
REZULTATE 
 
Raportați  numărul  de  hematii  ca  celule/mm3.  Întâi  trebui  calculat  numărul  mediu  de 

e,
hematii  într‐un  pătrat  mic:  N  (numărul  total  de  hematii  numărate)/80  (numărul  de 
pătrate  ‐  NrP).  Acesta  trebuie  raportat  la  volumul  (V)  corespunzător  unui  pătrat  mic: 

gi
aria*înălțimea  (A*Î)  camerei.  În  final,  rezultatele  trebuie  corectate  cu  diluția  sângelui 
(D).  lo
N N
Nr. Hematii    
io
NrP  V  D NrP  A  Î  D
iz

N N
Nr. Hematii    400  10  200  N  10000  
-F

1 1 1 80
80   
400 10 200
 
r

 
ta

INTERPRETAREA REZULTATELOR 
 
ep

Valori normale: 
– bărbați: 4.7–5.2*106/mm3 
– femei: 4.2–4.7*106/mm3 
dr

– nou‐născuți, copii mici: 5.5‐6*106/mm3 
În

Valori crescute – policitemie, poliglobulie: 
– fiziologic: gen, vârstă, altitudine înaltă, efort, etc. 
– patologic: boală cronică cardiacă, pulmonară sau a măduvei osoase 
Valori scăzute – anemie 
– sângerare 
– scădere a producerii de hematii 
– distrugere crescută a hematiilor 
 Numărarea leucocitelor  39 

NUMĂRAREA LEUCOCITELOR 
 
MATERIALE NECESARE 
 
– hemocitometru, 
– pipetă de diluție pentru leucocite (Figura 7), 
– soluție de diluție (soluție Türk: acid acetic glacial 0,5 ml, violet de gențiană 1% 

16
1,5 ml, apă distilată ad 150 ml) 
– microscop optic, 

20
–  pentru  recoltarea  sângelui:  tampoane  de  vată,  alcool,  ace  sterile,  mănuși  de 
unică folosință. 
 
 

e,
METODA DE LUCRU 
 

gi
Curățați  hemocitometrul  și  lamela  de  sticlă  cu  o  bucată  de  vată  îmbibată  cu  alcool  și 
lo
lăsați să se usuce. Pregătiți hemocitometrul prin așezarea lamelei pe lamă. 
 
io
Pentru a evita riscul de infecție, spălați‐vă mâinile cu apă și săpun 
înainte și după efectuarea oricăror teste sanguine. Când manipulați 
iz

  probele de sânge ale altor persoane, folosiți mănuși de unică folosință. 
Aruncaţi acele folosite în recipientele special destinate acestui scop. 
-F

 
Curățați vârful degetului cu vată îmbibată cu alcool. Lăsați degetul să se usuce. Folosind 
un ac steril, de unică folosință, faceți rapid o singură puncție la vârful degetului curățat 
r

(țineți‐l  ferm  între  police  și  index),  suficient  de  adâncă  încât  sângele  să  curgă  liber  din 
ta

rană. Ștergeți cu vată prima picătură de sânge. După ce s‐a format a doua picătură, se 
aspiră  în  pipetă.  Nu  aspirați  până  când  nu  s‐a  format  o  picătură  suficient  de  mare 
ep

deoarece  aceste  pipete  au  un  lumen  foarte  îngust  și  sângele  coagulează  extrem  de 
repede în interior. Nu stoarceţi degetul! 
dr

Așezați  vârful  pipetei  în  picătura  de  sânge.  Aspirați,  folosind  piesa  bucală,  o  coloană 
continuă de sânge în pipetă până la gradația 0,5 a pipetei. Ștergeți excesul de sânge de 
În

pe vârful pipetei. Introduceți vârful pipetei în soluția de diluție pentru leucocite (soluția 
Türk);  menținând  pipeta  în  poziție  verticala,  aspirați  soluție  de  diluție  exact  până  la 
gradația  11.  Diluția  ar  trebui  făcută  foarte  repede  și  exact  pentru  a  evita  coagularea 
sângelui și pentru a asigura precizia. Astfel se obține o diluție de 20 de ori (volumul din 
camera de amestecare este 11 μl–1 μl=10 μl, conținând 0.5 µl sânge). 
Acoperiți  capetele  pipetei  cu  policele  și  degetul  mijlociu  și  agitați  pipeta  timp  de  3 
minute. 
 40  Lucrări practice de fiziologie 

Aruncați  primele  două  picături  din  pipetă  (provin  din  porțiunea  capilară  a  acesteia  și 
conțin  doar  soluție  de  diluție)  și  cu  a  treia  picătură  umpleți  hemocitometrul:  lăsați 
picătura  să  cadă  în  apropierea  lamelei  și  camera  de  numărare  se  va  umple  prin 
capilaritate. Lichidul în exces va curge în șanțuri. 
Așezați  hemocitometrul  la  microscopul  optic  și  examinați  proba  folosind  obiectivul  cu 
putere  mică  (10 x)  și  luminozitate  scăzută.  Numărați  leucocitele  în  25  de  pătrate  mari 
consecutive,  luând  în  considerare  celulele  aflate  în  interiorul  pătratului  și  pe  două  din 
laturile acestuia. 

16
 
 

20
REZULTATE 
 
Raportați numărul de leucocite ca celule/mm3. Întâi trebuie calculat numărul mediu de 

e,
leucocite într‐un pătrat mare: N (numărul total de leucocite numărate)/25 (numărul de 
pătrate  ‐  NrP).  Acesta  trebuie  raportat  la  volumul  (V)  corespunzător  unui  pătrat  mare: 

gi
aria*înălțimea  (A*Î)  camerei.  În  final,  rezultatele  trebuie  corectate  pentru  diluția 
sângelui (D).  lo
N N
Nr. Leucocite    
io
NrP  V  D NrP  A  Î  D
iz

N N
Nr. Leucocite    25  10  20  N  200  
-F

1 1 1 25
25   
25 10 20
 
r

 
ta

INTERPRETAREA REZULTATELOR 
 
ep

Valori normale: 
– adulți: 6000‐8000/mm3 
– nou‐născuți, copii mici: 14000‐20000/mm3 
dr

Valori crescute – leucocitoză: 
În

– fiziologic: după efort, post‐prandial, femei: menstruație, sarcină, lăuzie 
– patologic: infecție, inflamație, otrăvire 
Valori scăzute – leucopenie: șoc anafilactic, infecții virale, expunere la radiații X, etc. 
 
 Numărarea eozinofilelor  41 

NUMĂRAREA EOZINOFILELOR 
 
 
MATERIALE NECESARE 
 
– hemocitometru, 
– pipetă de diluție pentru leucocite (Figura 7), 

16
– soluție de diluție (soluție de eozină: eozină 2% 5 ml, acetonă 5 ml, apă distilată 
90 ml) 

20
– microscop optic, 
–  pentru  recoltarea  sângelui:  tampoane  de  vată,  alcool,  ace  sterile,  mănuși  de 
unică folosință. 
 

e,
 
METODA DE LUCRU 
 

gi
lo
Pregătiți hemocitometrul și dezinfectați degetul așa cum a fost descris mai sus. 
 
io
Pentru a evita riscul de infecție, spălați‐vă mâinile cu apă și săpun 
înainte și după efectuarea oricăror teste sanguine. Când manipulați 
iz

  probele de sânge ale altor persoane, folosiți mănuși de unică folosință. 
Aruncaţi acele folosite în recipientele special destinate acestui scop. 
-F

 
Faceți o puncție la nivelul degetului și aspirați sângele în pipetă până la gradația 1, așa 
cum  a  fost  descris  mai  sus.  Umpleți  pipeta  cu  soluție  de  eozină  până  la  gradația  11, 
r

obținând  o  diluție  de  10  ori.  Agitați  pipeta  timp  de  3‐5  minute,  apoi  umpleți 
ta

hemocitometrul cu a treia picătură. 
Așezați  hemocitometrul  la  microscopul  optic  și  examinați  proba  folosind  obiectivul  cu 
ep

putere  mică  (10 x)  și  în  luminozitate  scăzută.  Identificați  eozinofilele  colorate  în  roșu 
aprins. Numărați eozinofilele pe toată suprafața zonei gravate (9 mm2). 
dr

 
 
În

REZULTATE 
 
Raportați  numărul  de  eozinofile  ca  celule/mm3.  Numărul  total  de  eozinofile  numărate 
(N)  trebuie  raportate  la  volumul  corespunzător  zonei  gravate:  aria*înălțimea  camerei 
(A*Î). În final, rezultatele trebuie corectate pentru diluția sângelui (D). 

N N
Nr. Eozinofile    
V  D A Î  D
 42  Lucrări practice de fiziologie 

N N N
Nr. Eozinofile    10  10   100  
1 1 9 9
9 
10 10
 
 
INTERPRETAREA REZULTATELOR 
 

16
Valori normale: 100‐200/mm3 
Valori crescute – eozinofilie: 
– alergii, 

20
– infecții parazitare. 
Valori scăzute – eozinopenie: arsuri, șoc, administrare de hormoni steroidieni, etc. 
 

e,
gi
lo
io
iz
r -F
ta
ep
dr
În
 Numărarea trombocitelor  43 

NUMĂRAREA TROMBOCITELOR 
 
 
MATERIALE NECESARE 
 
– hemocitometru, 
– pipetă de diluție pentru leucocite (Figura 7), 

16
– soluție de diluție (soluție Dameshek: clorhidrat de cocaină 3 g, clorură de sodiu 
0,2 g, apă distilată ad 100 ml) 

20
– microscop optic, 
–  pentru  recoltarea  sângelui:  tampoane  de  vată,  alcool,  ace  sterile,  mănuși  de 
unică folosință. 
 

e,
 
METODA DE LUCRU 
 

gi
lo
Curățați  hemocitometrul  și  lamela  de  sticlă  cu  o  bucată  de  vată  îmbibată  cu  alcool  și 
lăsați să se usuce. Pregătiți hemocitometrul prin așezarea lamelei pe lamă. 
io
 
Pentru a evita riscul de infecție, spălați‐vă mâinile cu apă și săpun 
iz

înainte și după efectuarea oricăror teste sanguine. Când manipulați 
probele de sânge ale altor persoane, folosiți mănuși de unică folosință. 
-F

 
Aruncaţi acele folosite în recipientele special destinate acestui scop. 
 
Curățați vârful degetului cu vată îmbibată cu alcool. Lăsați degetul să se usuce. Folosind 
r

un ac steril, de unică folosință, faceți rapid o singură puncție la vârful degetului curățat 
ta

(țineți‐l  ferm  între  police  și  index),  suficient  de  adâncă  încât  sângele  să  curgă  liber  din 
rană. Ștergeți cu vată prima picătură de sânge. După ce s‐a format a doua picătură, se 
ep

aspiră  în  pipetă.  Nu  aspirați  până  când  nu  s‐a  format  o  picătură  suficient  de  mare 
deoarece  aceste  pipete  au  un  lumen  foarte  îngust  și  sângele  coagulează  extrem  de 
dr

repede în interior. Nu stoarceţi degetul! 
Așezați  vârful  pipetei  în  picătura  de  sânge.  Aspirați,  folosind  piesa  bucală,  o  coloană 
În

continuă de sânge în pipetă până la gradația 0,5 a pipetei. Ștergeți excesul de sânge de 
pe  vârful  pipetei.  Introduceți  vârful  pipetei  în  soluția  de  diluție  pentru  hematii  (soluția 
Dameshek); menținând pipeta în poziție verticala, aspirați soluție de diluție exact până la 
gradația  11.  Diluția  ar  trebui  făcută  foarte  repede  și  precis  pentru  a  evita  coagularea 
sângelui și pentru a asigura precizia. Astfel se obține o diluție de 20 de ori (volumul din 
camera de numărare este 11 μl–1 μl=10 μl, conținând 0,5 µl sânge). 
Acoperiți capetele pipetei cu policele și degetul mijlociu și agitați timp de 5 minute. 
 44  Lucrări practice de fiziologie 

Aruncați primele două picături din pipetă (provin din porțiunea capilară a pitei și conțin 
doar soluție de diluție) și cu a treia picătură umpleți hemocitometrul: lăsați picătura să 
cadă în apropierea lamelei și camera de numărare se va umple prin capilaritate. Lichidul 
în exces va curge în șanțuri. Așteptați 20 de minut epentru lizarea completă a celorlalte 
celule sanguine. 
Așezți  hemocitometrul  la  microscopul  optic  și  examinați  proba  cu  obiectivul  cu  putere 
mică  (10 x)  și  în  lumină  scăzută.  Numărați  trombocitele  în  100  de  dreptunghiuri 
consecutive,  luând  în  considerare  celulele  aflate  în  interiorul  pătratului  și  pe  două  din 

16
laturile acestuia. 
 

20
 
REZULTATE 
 
Raportați numărul de trombocite ca celule/mm3. Întâi trebuie calculată media numărului 

e,
de  trombocite  într‐un  dreptunghi:  N  (numărul  total  de  trombocite  numărate)/100 

gi
(numărul  de  dreptunghiuri  –  NrD).  Aceasta  trebuie  raportată  la  volumul  (V) 
corespunzător unui dreptunghi: aria*înălțimea (A*Î) camerei. În final, rezultatele trebuie 
lo
corectate pentru diluția sângelui (D). 
io
N N
Nr. Trombocite    
NrD  V  D NrD  A  Î  D
iz
-F

N N
Nr. Trombocite    100  10  20  N  200  
1 1 1 100
100   
100 10 20
r

 
ta

 
INTERPRETAREA REZULTATELOR 
ep

 
Valori normale: 
– 150000‐300000/mm3 
dr

Valori crescute – trombocitoză: 
În

– boli ale măduvei osoase 
Valori scăzute – trombocitopenie: 
  – boli autoimune, medicație, idiopatică