HEMOGRAMA

DR.OLTEANU ARIELA
LABORATORUL CLINIC DE ANALIZE MEDICALE
SPITALUL CLINIC JUDETEAN DE URGENTA

 reflecta un numar mare de mecanisme fizio-patologice:

hematopoieza, apararea organismului,hemostaza
ofera informatii pretioase pentru activitatea mai multor organe ;
maduva osoasa, ganglioni,tesut limfoid, sistemul monocito-macrofagic
examenul cel mai cerut pe biletele de trimitere
Cuprinde :
numaratoarea eritrocitelor (eritrocitometrie)
determinarea hemoglobinei (Hb)
determinarea hematocritului (Ht)
determinarea constantelor eritrocitare :VEM,HEM,CHEM
rata de distributie a populatiei eritrocitare (RDW)
numaratoarea reticulocitelor ( Ret % ,#)


numaratoarea leucocitelor si formula leucocitara(%,#)

numaratoarea trombocitelor(plachetele sanguine)

In cazul modificarilor acestor parametrii se completeaza investigatiile cu

examenul morfologic al frotiului sanguin

Tehnicile de laborator utilizate pentru efectuarea hemogramei:
tehnica manuala :numaratori in pipeta Potain/Unopette(Er,L,Tr)
determinarea spectrofotometrica a Hb
determinarea hematocritului (centrifugare)
tehnica automata : numaratori electronice automatizate
principiu de determinare diferit in functie de
analizor 3diff/5diff
numararea unui numar mare de celule(mii)
fiabilitate buna
reproductibilitate foarte buna
sistem de control precis care poate afisa alarme

Hemograma automata : principiul determinarii

elementele sanguine sunt absorbite intr-o solutie de electroliti,

capabila sa conduca curentul electric, solutie in care sunt
imersati doi electrizi separati de un perete de sticla care este deschis intr-un singur
punct(apertura)
celulele sanguine impreuna cu solutia de electroliti(diluentul)
sunt absorbite prin aplicarea unui vacum si trec prin apertura
la trecerea prin apertura rezistenta la flux de curent creste si va determina aparitia unui
impuls electric
numarul impulsurilor electrice generate este direct proportional cu
numarul elementelor sanguine din proba iar
dimensiunea impulsurilor este proportionala cu volumul celulei
trombocitele sunt numarate pe principiul dimensiunii diametrului
, intre 2-20(fl) , unde nu interfereaza cum eritrocitele

Automatul Beckman Coulter

Principiul Coulter: permite numararea hematiilor, leucocitelor si

trombocitelor si masurarea volumului lor;
celulele sunt suspendate in lichid conductor si numarate la trecerea
print-un mic orificiu(apertura)
trecerea fiecarei celule creste rezistenta electrica intre 2 electrozi si
genereaza un impuls electric a carui amplitudine este proportionala cu
volumul sau
numarul de impulsuri este egal cu numarul de celule care au trecut
prin apertura
impulsurile sunt clasate in functie de amplitudine in diferite canale
ducand la constructia unor histograme de distributie volumetrica
=principiul de variatie a impedantei

Automatul Sysmex XE 2100

Principiul de masurare:hematiile si trombocitele se masoara cu

ajutorul curentului direct(CD), care permite masurarea taliei celulelor
ce traverseaza apertura(masurare prin impedanta cu focalizare
hidrodinamica)
hematocritul =cumul de impulsuri masurate
hemoglobina se masoara prin metode colorimetrica(in camera
specifica)
leucocitele se efectueaza prin citometrie in flux cu fluorescenta in
doua canale diferite, pentru comparatie (GB/BASO,DIF);in caz de
discordanta se masoara si pe al treilea NRBC

 Formula leucocitara :

manual : frotiu sanguin din sange periferic colorat MGG

examinare optica la microscop
exprimare % din numarul de leucocite
metoda de referinta
automat : se face diferit in functie de analizorul utilizat
exprimarea se face % si in valoare absoluta(#)
Beckman-Coulter :Volum/Conductivitate /Difractie
volumul celulei : variatia impedantei
conductivitatea: explorarea nucleului cu un curent
electric de inalta frecventa
difractia: luminii monocromatice a unui fascicol laser la
intalnirea cu celula furnizeaza informatii despre
granulatii si suprafata celulei

Sysmex XE 2100: prin citometrie in flux

folosita pentru determinareacaracteristicilor chimice si fiziologice ale
celulei; studiu precis pe celulea individualizata datorita focalizarii
hidrodinamice
canalul GB/Baso : distrusa membrana celulei(-bazofile)
canal IM : curent direct pentru masurarea taliei celulei
radiofrecventa pentru nucleu si granulatii
canal NRBC: masurare prin citometrie in flux
canal RET : citometrie in flux

subestimare

supraestimare

TROMBOCITE

Falsa trombocitopenie

Falsa augumentare

cause

EDTA
satelitism

microcitoza

LEUCOCITE

Falsa neutropenie

Falsa augumentare

cauze

EDTA
Satelitism

Agregate trombocitare
Eritroblasti circulanti
Hemoliza
Crioglobulinemie

ERITROCITE

Falsa diminuare
(Er,VEM,Ht, CHEM)

Falsa augumentare

cauze

Aglutinine la rece

Leucocitoza mare

HEMOGLOBINA

Falsa crestere

cauze

Hiperbilirubinemie
Ser lactescent
Hemoliza
Crioglobuline
hiperleucocitoza

HEMOGRAMA NORMALA
Notiunea de normalitate are o definitie statistica;
variabilele biologice ce include 95% din indivizii normali
Rezultatul unei hemograme trebuie interpretate in context clinic de
catre medicul practician
Valorile hemogramei variaza si cu varsta ,sexul si rasa
Exprimarea rezultatelor se face in unitati internationale:
10 TERA (T)pt.H
10 MILLI (m)
10 GIGA (G)pt.L,Tr
10 MICRO ()
10 MEGA (M)
10 NANO ()
10 KILO (K)
10PICO (p)
10FEMTO(f)
Hb mmol/l ; Ht l/l; HEM fmol

Unitati de exprimare : pentru numaratori : /mmc, 10-10 /l

pentru Hb g/dl; Ht %
pentru VEM (fl)
pentru HEM pg (fmol)
Intre unitatile internationale si unitatile vechi de exprmare,

care se mai folosesc inca, exista factori de conversie

ex : L 5000/mmc
10/10 5G/l
H 4000000/mmc 10/10 4T/l
Ret 20000/mmc
20G/l
Ht 40%
0.40

Linia eritrocitara:
hematii
barbati

4.5 6.0 x
10/L
4.5_ 5.8 x
10/L

femei

4.o -5.5 x
10/L
3.8 5.4 x
10/L

Nou-nascut

>5.5 x 10/L

hematocrit
0.40 - 0.54
40% - 50%

hemoglobina
13 17g/dl
13 17 g/dl

0.37 0.47
37 47 %

11.5 15g/dl
12 15g/dl

0.44 -0.64

14 19g/dl

Constantele eritrocitare :

VEM(volum eritrocitar mediu)=Ht(%)x 10/Nr hematii (T/L)

= 85-95 fl ; 82-100fl
HEM(Hb eritrocitara medie)= Hb(g/dl) x 10/Nr hematii
= 27 32 pg ; 27 34pg
CHEM(conc.eritrocitara medie)= Hb(g/dl) x 100/Ht(%)
= 31-35 g/dl; 32-36g/dl
IDR = 12- 15 %
Reticulocite

0.5 1.5%; 0.5- 2.0%

0.25-0.75 x 10/l
sunt hematii tinere care au iesit din maduva <48 ore
pastreaza in citoplasma lor resturi de ribonucleoproteine ce pot fi reperate la
microscop peintr-o coloratie cu briliant crezyl blau

 Hematiile normale au aceeasi morfologie pe frotiurile colorate: discoid aplatizat,

forma rotunda
coloratie roz/oranj mai intensa la periferie
diametrul 7-8, grosimea 2
VEM 85(82)-95(100) fl
In anumite afectiuni pot apare anomalii morfologice :

anomalii de talie: anizocitoza(diametru variabil), macro

sau microcite(variatie de volum)

anomalii de coloratie: anizocromie si policromatofilie

anomalii de forma: poikilocitoza(variabilit. de forma),

dacriocite(picaturi,lacrima)
schizocite(hematii fragmentate)
acantocite si echinocite(crenelate)
sferocite,ovalocite,drepanocite,in tinta

prezenta de incluziuni intra-eritrocitare anormale :corpi Jolly,

inele Cabot, punctatii bazofile; cu coloratii speciale : siderocite,corpi Heinz)

Patologia hematiilor: 1 . Anemii

2 .Poliglogulii
1. Definitia: scaderea nivelului de Hb : fatigabilitate, dispnee
<13g/dl la barbati ; <12g/dl la femei ;<15g/dl la nn;<11.5g/dl la copii
1. Se cauta mecanismul apoi etiologia :

Numarul de reticulocite : crescut =anemie periferica ,regenerativa

scazut = anemie centrala,nonregenerativa
Valoarea constantelor eritrocitare : VEM,HEM,CHEM
anemii normocitare , macrocitara, microcitara
anemii normocrome, hipocrome
Examinarea frotiului sanguin :
anemie dimorfe cu constante normale
anizocitoza,anizocromie,poikilocitoza,policromatofilie
acantocitoza,schizocitoza,dacriocitoza
sferocite,ovalocite
hematii cu incluziuni intracitoplasmatice(corpi Jolly etc)
paraziti intra eritrocitari: paludism

1. Mecanismul anemiei :

a.anemie periferica : anemie hemoragica, anemie feripriva

anemie hemolitica : congenitala ,castigata
b.anemia centrala : aplazia medulara
mielodisplazia
2. Definitia : cresterea nivelului de Hb si Ht : hipervascozitate

Hb>17g/dl; Ht> 54% la barbati

Hb>13g/dl; Ht >47% la femei
2. Mecanismele poliglobuliei :
poliglobulie secundara: afect. resp.,afect.cardiace,renale
(hipersecretie de eritropoietina)
poliglobulie primitiva: Policitemia vera(L,Tr,mielemie)

Linia leucocitara
adulti

leucocite neutrofil
e

eozinofil bazofile
e

limfocit
e

monocit
e

4-10 x
10/L
4-10 x
10/l

0.04-0.5
x
10/L
0-0.7 x
10/l
0-5%

0.01-0.1
x
10/L
0-0.2 x
10/l
0-1%

1.5-4 x
10/L
1.5-4 x
10/l

0.2-1 x
10/L
0.2-1 x
10/l

20-45%

2-10%

0-0.6 x
10/L

0-0.2 x
10/l

1.5-6.5 x
1 0/L

0-0.8 x
10/L

0-0.85 x
10/L

0-0.64 x
10/l

2-11 x
10/L

0.4-3.1 x
10/L

2-7.5 x
10/L
2-7.5 x
10/l
45-75%

Copii
10 ani

5-15 x
10/L

1.8-8 x
10/L
2-7.5 x
10/l

Nou
nascut
i

10-30 x
6-26 x
10/L
10/L
In primele

In prima copilarie pana la 4 ani procentajul limfocitelor poate sa fie

mai mare decat al neutrofilelor

La rasa neagra exista o neutropenie fiziologica datorita unei
hipermarginatii vasculare, < 30% PMN
In formula leucocitara nu trebuie sa apara leucocite morfologic
anormale si nici precursori medulari
In interpretarea formulei leucocitare se tine seama de cifrele absolute
nu de exprimarea la%
Formula Arneth: : PMN cu 1 lob<5%; 2lobi 10-30%;3lobi40-50%;
4lobi 10-20%; <5% cu 5lobi ;<1% cu 6 lobi sau
In cazul anomaliilor cantitative se efectueaza frotiu de sange periferic
colorat MGG si se cauta si anomaliile calitative

Anomalii celulare cantitative si morfologice :

Anomalii morfologice ale citoplasmei sau ale nucleului PMN:

asincronism de maturatie nucleo/citoplasmatic,corpiDohle,

corpi May-Hegglin,incluzii Chediak-Higashi,anomalia PelgerHuet,anomalia Adler,hipo-agranularitate;aceste anomalii pot fi
congenitale sau castigate
Mielemia :prezenta in sangele periferic a precursorilor medulari al
PMN(uneori si eritrocitari);caracteristica sd.mieloproliferative acute si
cronice,poate sa apara ca epifenomen in cancere,
infectii,toxice,iradieri.limfoame,sarcinaprezenta eritroblastilor
circulanti necesita corectia numarului de leucocite
Anomalii morfologice castigate ale limfocitelor care caracterizeaza
anumite afectiuni: tricoleucocitele,limfocitegranulare, celule Sezary

Anomalia Pelger-Huet

Anomalia May-Hegglin


Patologia leucocitelor:
1.Neutrofilia : cresterea nr. de neutrofile>7.5 x10/L
examenul frotiului periferic:anomalii de granulatii(toxice)
anomalii de nucleu(hipo/hipersegm)
determinarea FAL :in reactii leucemoide
etiologie:fiziologic in sarcina,nn,exercitii fizice,stres, tabagism
medicamentoase:corticoterapie, neopogen
patologic;sd.inflamator,infectii bacteriene,necroze tisulare,
hemoragii, hemolize,cancere,hemopatii
2.Neutropenia :scaderea nr.de neutrofile<1.5x10/L
riscul infectios proportional cu nr. de neutrofile (<0.5 import.)
dificil de efectuat FL
etiologie:fiziologic:rasa neagra, varsta
periferica:hipermarginatie,hipersplenism,toxice,autoimune
centrale:insuficienta medulara
mielodisplazie

3.Eozinofilia : cresterea nr. de eozinofile>0.5x10/L

etiologie : parazitoze,boli alergice, hemopatii,

sd.hipereozinofilic
4. Bazofilia : cresterea nr.de bazofile > 0.1x10/L
etiologie : observata in sd. mieloproliferatice cronice
5. Limfocitoza : cresterea nr de limfocite sanguine>4x10/L
examinarea frotiului sanguin evudentiaza o proliferare
polimorfa(reactiva) a limfocitelor
etiologie: convalescenta bolilor infectioase,MI,
sd.mononucleozice diverse,toxoplasmoza
proliferare monomorfa:la copii: tusea convulsiva
la adult:limfoproliferari cronice
LLc.HCl.sd Sezary

6. Limfopenie : diminuarea nr.limfocite < 1.0x10/L

risc infectios datorat deficitului de imunitate celulara(lyT)
etiologie : deficite congenitale a imunitatii celulare
deficite castigate : radiatii, chimioterapie
SIDA
hipersplenism, boli autoimune,tbc miliar
7. Monocitoza: cresterea nr de monocite>1.0x10/L
etiologie : tbc,leishmanioza,endocardite,sifilis, bruceloza
candidoza,paludism
proliferari maligneLMMC,LAM5
cancere,sarcoidoza,ciroze,postchimioterapie
8.Monocitopenia : rara im leucemia cu tricoleucocite

Trombocitele:plachete sanguine
celule anucleate ce intervin in hemostaza (in timpul vasculoplachetar)
explorarea se face manual in camera de numarat sau automat
pe analizoare hematologice
Valori de referinta : 150-400.000/L 150-400x10/L
1.Trombopenia : < 140.ooo/L(<120.000/L)
risc hemoragic in functie de numarul de trombocite:
<20.000 risc important
intre 20.000-50.000 risc moderat
intre 50.000-100.000 risc scazut
examinarea frotiului pentru excluderea unei pseudotrobocitopenii
(aglutinare la EDTA, satelitism), pentru a studia talia trobocitului
(macrotrombocite in regenerare,SMD,SMp,LAM7, trombopatii)
Mecanisme : periferice: distructie periferica(splina,ficat)
maduva bogata in megacariocite

Mecanisme : periferice: distructie periferica(splina)

maduva bogata in megacariocite
centrala : aplazie medulara
mielodisplazie
2.Trombocitoza : >450.000/L

apar tromboze si hemoragii()

frotiu sanguin evidentiaza numeroase trombocite pe lama, anomalii
morfologice(anizotrombocitoza)
etiologie: trombocitoze secundare:post splenectomie,sd infl,anemie
regeneretiva; < 700.000/L
trombocitoze primitive: sd. mieloproliferativ cronic(TE)
>1.000.000/L

Faza preanalitica

1.Recoltarea probelor primare:

intocmirea cererii de analiza: conform proceduri lab

pregatirea pacientului: a jeun

locul de recoltare; laborator, pct recoltare, spital

alegerea venei;plica cotului, nu la bratul cu perfuzie

durata mentinerii garoului: sub 1min

ordinea de recoltare a tuburilor vidate:tub fara anticoag

tubcu citrat de Na
(coagulograma)
tub cu heparina
tub cu EDTA
tub cu inhibitori ai glicolizei

acul de recoltare : 0.7-1mm(19-22G)

tubul vidat recomandat: 2-3 ml sticla sau plastic

anticoagulantul recomandat:EDTA dipotasic

mixarea probei dupa recoltare : rasturnare de 5X(fara spuma)

 Recoltarea sangelui capilar:

la adult partea laterala a pulpei degetului(inelar.mijlociu)

la nn, sugar partea plantara a calcaneului
dezinfectia tegumentului cu alcool,
se inteapa destul de profund
se indeparteaza prima picatura
recoltare in scopul propus
aplicare de tampon cu alcool
2. Transport :la 20-24 C

in pozitie verticala
3. Timp recoltare probe-procesare:

6-8 ore la temp. camerei

24 ore la 4C

stocarea peste acest interval duce la modificari ale unor parametrii

VEM,CHEMmodific ale FL(3diff)

efectuarea frotiurilor pentru morfologia celulara in 30min(ideal)max 2h

de la recoltare

4. Conditii de respingere a probelor primare:

-proba nu este identificabila(neetichet,incorect etichet.)
-proba nu corespunde cantitativ
-proba nu corespunde calitativ(coagulate,hemolizate,
lipemice
-proba transportata/stocata in conditii neadecvate
5.Prepararea probelor primare:
- omogenizarea probelor inaintea introducerii in aparate
- verificarea macroscopic a prezentei microcoagulilor

Faza analitica:
Pregatirea aparatului :intretinerea zilnica
Controlul intern: pe trei nivele(ISO 15189)

efectuare/interpretare/acceptare
Valori de panica: (Tratat de medicina interna/HematologieII,Radu
Paun,1999)
parametrul

joase

Nr leucocitex10/L

<2.0

Nr.
Eritrocitex10/L

<2.0

Hb g/dl

inalte
>20

<7

Ht %

<18

>60

VEM fl

<65

>120

Nr tromocite
x10/L
Nr neutrofilex10/L

<50

>900

<1,0

Frotiuri examinate de morfolog:(Tratat de Medicina Interna/HematologieII

alarma

valoarea

eozonofile

>0.7x10/L

blasti

totdeauna

Morfologia eritrocite

dupa caz

Morfologia leucocite

dupa caz

Aglutinare trombocitara
Cu scaderea nr. de trombocite

intotdeauna

Radu Paun1999)

Neutrof.nesegmentate

>20%pt L<11.0x10/L
>30% pt restul

Limfocite atipice

>5%

Eritroblasti

totdeauna

Granulocite imature

>5%

Plasmocite

totdeauna

Monocite

>2.0x10/L

Faza postanalitica
Eliberarea rezultatului dupa validare
Eliberare pe suport de hartie si LIS,lizibile si inmanate persoanelor autorizate
Biletului pt eliberarea rezultatelor (raport)trebui sa cuprinda:

identificarea clara a analizei(proceduri de masurare)

date de identificare ale laboratorului care a emis raportul

unica identificare apacientului

identificarea solicitantului

data si ora recoltarii probei primare

data si ora eliberarii raportului

originea si tipulprobei de analizat

rezultatul analizei raportat in unitati internationalesau care se pot

transforma in UI

intervale biologice de referinta

interpretarea rezultatelor

alte comentarii(ex.calitatea probei primare)

date de identificare ale persoanei care a autorizat emiterea raportului

daca este relevant rezultatele originale si corecturile aferente

semnatura si autorizatia persoanei care a verificat si emis rezultatul

VA MULTUMESC