Dr.

Ariela-Ligia OLTEANU

Proliferarea de celule mieloide maligne(clonala) cu

conservarea unei maturatiei (cel putin in faza cronica)
Clasificare: WHO
policitemia vera PV
leucemia granulocitara(mieloida) cronica Ph+
LGC/LMC
leucemie cronica cu neutrofile
sindromul hipereozinofilic
trombocitemia esentiala(hemoragica) TE/TH
metaplazia mieloida cu mieloscleroza (mielofibroza
primara) MMM/MP
sindroame mieloproliferative neclasabile
Din 2008 in clasificarea WHO: PV, MP,TE ,(Ph-)se
clasifica cu denumirea de neoplasme
mieloproliferative

a. Faza cronic:
Leucocitoz cu formul leucocitar
deviat la stnga
Bazofilie absolut (<20%)
Monocite < 3%
Trombocite 400.000 /mmc
Modificri displazice minime /
absente
Mitoze Ph+: 100%
Mutaie BCR/ABL+
Index FAL
. Faza accelerat:
Anemie i trombocitopenie
Trombocitoz rebel
Displazii celulare
Mielofibroz gr.I / II
Splenomegalie progresiv rebel
Febr neinfecioas

Snge i/sau M.O.*)

Bl < 15%
Bl + Pro < 30%

Snge i/sau
M.O.*)

Bl < 15-29%
Bl + Pro 30%
Bazofile 20%

c. Faza blastic:
)
Snge
i/sau
M.O.*
Febr > 380C, peste 7 zile
Bl > 30%
Deficit ponderal > 10%
Creterea splinei cu 25%
Fibroz reticulinic n M.O.
Anemie, trombocitopenie
Anomalii citogenetice
adiionale
Tumori blastice extramedulare
Dup:
1. Butoianu E, Niculescu-Mizil E, n Tratat de Medicin Intern
(Hematologie,
vol.II), sub redacia R. Pun (Edit. Medical Bucureti), 1999, p.
133.
2. Kantarjian H & colab, N.E.J.M., 2002, 346, 645*)

Cromozomul Philadelphia(Ph1) este prezent in 95% din

cazurile de LGC (prima anomalie cromozomiala
identificata in cancer)
Este o anomalie citogenetica clonala, castigata,
rezultatul unei translocatii reciproce, echilibrata, intre Cr
9 si Cr22
t(9:22);schimb de material genetic intre bratele lungi
ale cromozomilor 9 si 22
Anomalia moleculara : juxtapunerea situsului oncogenic
Abelson(abl) situat pe Cr 9 si a regiuniimajor
breakpoint cluster region(bcr) de pe Cr 22
Gena de fuziune, hibrida, rezultata bcr/abl duce la
sinteza de unui ARN mesager chimeric si la o activitate
kinazica crescuta
Proliferarea clonei bcr/abl antreneaza o expansiune a
compartimentului mieloid si supresia hematopoiezei
normale

Tehnica:
celulele medulare, recoltate prin aspirat
medular,sunt cultivate 48-72 ore pentru a
obtine un numar important de celule in
mitoza;
sunt blocate apoi in metafaza, cu colchicina,
dupa microfotografiere cromozomii fiecarei
perechi(1-23) sunt etalati pentru a fi analizati
in raport cu un cariotip normal

Celule Leucemice la diagnosticarea LMC 1: 1012

RASPUNS HEMATOLOGIC COMPLET (CHR):
- Normalizare completa a indicilor hematologici
cu nr. leucocite < 10 x 109/L
- nr. trombocite < 450 x 109 /L
- Fara celule imature : mielocite,
promielocite sau blasti in sangele periferic
- Fara semne si simptome ale bolii, fara splenomegalie
RASPUNS CITOGENETIC COMPLET (CCYR)2:
Fara metafaze Ph+
RASPUNS MOLECULAR MAJOR (MMR)3:
Reducere 3-Log
RASPUNS MOLECULAR COMPLET (CMR)4:
Transcripti BCR-ABL
nedetectabili

Southern-blot ; utilizarea unei sonde specifica

pt bcr
Hibridizarea in situ cu fluorescenta FISH
PT-PCR : dupa extractia ARNm, ARN-ul este
retro-transcris cu ajutorul revers transcriptazei
in ADNc simplu catenar specific pt bcr/abl;apoi
se efect PCR
Punerea in evidenta a unui transcript de
fuziune prin PCR este un element capital pentru
diagnostic si pentru supravegherea pacientului

D
i
a
g
n
o
s
t
i
c
s

Speed

Flexibility

Safety

Reliability

Success

Components

IZOLARE ARN
2x107 celule
IZOLARE CU TRIzol

METODOLOGIA LIGHTCYCLER
RQ-PCR
Nr copii Bcr/Abl

PCR CALITATIV MULTIPLEX

PCR
Tipuri de transcript