Viteza de sedimentare a hematiilor

=ofera informatii asupra structurii proteice a sangelui. Cea mai utilizata metoda este metoda Westergreen. Materiale necesare: seringa si ac de punctie venoasa vata si alcool eprubete de hemoliza citrat de Na 3.8% pipete gradate de 1 si 2 ml pipete Westergreen cu diviziuni mm 0-200, gradatia incepand de sus in jos. Stativ

Tehnica de lucru 1 Intr-o eprubeta de hemoliza se introduc 0,4 ml de citrat de sodiu 3.8%, cu ajutorul unei pipete gradate de 1 ml. Intr-o eprubeta uscata se pune o qq de 2-3 ml de sange venos recoltat, de preferat, fara garou. Se aspira 1.6 ml sange cu ajutorul pipetei de 2 ml si se adauga in eprubeta de hemoliza, dupa care se omogenizeaza. Se aspira sangele in eprubeta Westergreen pana la diviziunea 0, apoi se astupa cu aratatorul partea de sus, pentru a se opri pe loc coloana de sange. Extremitatea inferioara a pipetei se fixeaza pe dopul de cauciuc a partii inferioare a suportului, iar extremitatea superioara a pipetei se fixeaza cu ajutorul clemei resort. Pozitia pipetei tb sa fie perfect verticala- se cronometreaza, 1,2,24h, se citeste valoarea- mm/unitate de timp. Valori normale: Barbati: 2-7 mm/h, 7-15 mm/2h Femei 4-9 mm/h, 12-17/2h Copii 9-12 mm/h Nou-nascut 0.5 mm/h Sarcina 35 mm/h

Numararea hematiilor

Principiu: Numararea hematiilor cu ajutorul microscopului, intr-un volum cunoscut de lichid, diluat intr-o proportie cunoscuta. Dilutia se realizeaza cu o solutie izotona cu hematiile si litica pentru celelalte elemente figurate. Materiale necesare: Lichid de dilutie-sol.Hayem-, pipeta Potain pentru eritrocite, camera de numarare Burker-Turck, microscop, lamele de sticla, hartie de filtru, vata, alcool, etc. Camera de numarare Burker-Turk Are o suprafata de 9mm2 si prezinta o retea gravata special- este delimitata prin linii triple, fiind impartita tot prin linii triple in 9 patrate cu S=1mm2 each. Patratul din mijloc de 1mm2 reprezinta reteaua Thoma, care prezinta 400 patrate mici, cu suprafata de 1/400, delimitate tot prin linii triple. Este folosita pentru numararea hematiilor si trombocitelor. Celelalte patrate se impart in 16 patrate, delimitate prin linii duble, cu suprafata de 1/25 mm2. Acestea se folosesc pentru numararea leucocitelor. Tehnica de lucru 1. Dilutia sangelui Pipeta Potain pentru eritrocite este un tub capilar gradat, cu notatiile 0.5 si 1, intre aceste notatii fiind divizata in 10 segmente egale si o bula de dilutie, ce prezinta o perla rosie, la al carui capat distal se observa notatia 101. Se dezinfecteaza pulpa degetului cu alcool, se sterge prima picatura cu hartie de filtru, dupa care se aspira sange pana la diviziunea 0.5 sau unu. Se aspira apoi lichid de dilutie pana la diviziunea 101. S-a realizat astfel dilutia sangelui 1/200 sau 1/100. 2. Umplerea camerei de numarat Se omogenizeaza amestecul, dupa care se lasa sa cada pe o hartie de filtru primele 2-3 picaturi. Se umple camera de numarat prin capilaritate, urmarind ca lichidul sa nu se prelinga pe marginile acesteia si patrunderea bulelor de aer.

Se asteapta 1-2 minute, timp in care hematiile sedimenteaza. 3. Tehnica de numarare Se fixeaza camera de numarat la miscroscop, astfel incat in campul microscopului sa apara camera Thoma. Numararea hematiilor se realizeaza pe 5 patrate mari- 80 patrate mici cu suprafata de 1/400 mm2. 4. Regula de numarare Numararea se incepe de la patratul din stanga sus. Se continua numararea cu urmatoarele 3 patrate din dreapta, dupa care se incepe numararea celui de-al doilea rand dinspre dreapta spre stanga, urmatorul dinspre stanga spre dreapta, etc. Pentru a numara o singura data fiecare eritrocit, hematiile aflate pe laturi se numara doar pe latura de sus si stg. 5. Calcul Se face corectia pe suprafata, inaltime si dilutie: Nr eritrocite/mm3= N / 80 x S x h x D 6. Valori normale: Barbat: 4,5 mil-5 mil Femeie: 4,2-4,5 miil Copil: 5-6 mil

/mmc

7. Variatii patologice Nr hematiilor creste in: boli congenitale cardiace, anumite boli pulmonare, deshidratare, boli renale sau policitemia vera. Nr hematiilor scade in : anemii, hemoragii severe, insuficienta medulara, malnutritie, hiperhidratare, lezare mecanica a hematiilor Indicii eritrocitari VEM, HEM, CHEM- parametrii care indica un anumit diagnostic, impreuna cu numararea hematiilor.

VEM= volumul eritrocitar mediu; estimeaza volumul hematiilor. Formula de calcul: VEM= Ht x 10 / E Unde Ht= hematocritul si E= nr de hematii Vn: 80-94 fl. Cresteri ale VEM= macrocitoza= anemie datorata deficientei nutritionale, hepatopatii, alcoolism, boli pulmonare cronice, terapia cu anumite medicatii. Scaderi ale VEM= microcitoza= deficit de Fe, boli cronice, anemie datorata unor afectiuni medulare, sarcina. HEM=hemoglobina eritrocitara medie= masa medie de Hb/hematie dintr-o proba de sange HEM= Hb x 10/E Vn: 25-32 g/hematie. CHEM= Hb x 100/Ht