FMAM

Dr. Minodora Onisi

Clinica Hematologie SUUB

HEMATOLOGIE CLINICA
INTRODUCERE IN HEMATOLOGIE

Sangele
Doua componente majore:
Componenta plasmatica 55-60%
Contine plasma, electroliti, coloizi
Componenta celulara 40-45%
Contine eritrocite (celule rosii), leucocite (celule
albe), trombocite
Sintetizate de maduva hematogena osoasa
Evaluata cu ajutorul hemogramei si frotiului de
sange periferic

Componenta plasmatica
Componentele majore: electrolitii si
proteinele
Electrolitii:
Pozitivi (cationi): Na+, K+, Ca+2, Mg+2
Negativi (anioni): Cl, bicarbonat, acizii organici,

proteinele, fosfati, sulfati, etc.

Componenta plasmatica
Proteinele:
Albumine:
Determina presiunea osmotica; hipoalbuminemia
edeme!
Leaga diferite substante (nutritive, hormoni,
medicamente, etc)
Globuline
Notate in functie de greutatea moleculara (alfa, beta,
gamma)
Rol in formarea hemoglobinei si in raspunsul imun
Fibrinogen:
Glicoproteina cu rol vital in hemostaza (coagulare)
factorul I

Componenta plasmatica
Proteinele:
Sintetizate major de catre ficat: albuminele,

fibrinogenul, circa jumatate dintre globuline

Restul globulinelor in tesutul limfoid si sistemul
reticulo-endotelial
Rol in: balanta acido-bazica, activitatea
hormonala, coagulare, mecanisme de transport,
presiunea osmotica, vascozitatea sangvina
Deficite proteice in diferite boli, cum ar fi:
arsurile, afectare renala, denutritie importanta,
insuficienta hepatica, etc.

Componenta celulara:
eritrocite, leucocite, trombocite

Hematopoieza - Proprieti

Definiie : proces de formare a celulelor sangvine

Proces vital, continuu de-a lungul vieii
ncepe din VIU
Parcurge etape distincte
Proces adaptabil accelerare n condiii de stress
multiple bucle de reglare
Loc de desfurare : Mduva osoas
copil: oase lungi
adult : oase late
vrstnic: es. adipos, cel.
hematologice

Hematopoieza - Generaliti
Hematopoieza medular (MO) condiii normale
Hematopoieza extramedular (n afara MO) condiii

patologice: * thalasemia major (compensator)

* boli de celul STEM
Start: celula STEM pluripotent modelul piramidei
Organizare pe orizontal: mai multe compartimente

vertical: seriile medulare

Compatimente medulare (CM)

1. CM al celulelor STEM pluripotente

2. CM al celulelor STEM unipotente

3. CM al celulelor blastice cap de serie

4. CM de difereniere i maturaie
5. CM al celulelor efectorii/mature

1. CM al celulelor STEM pluripotente

1.

2.
3.
4.

* Proprieti eseniale:
Autoreplicare/autorennoire
menine stocul de celule stem
o celul stem 2 celule pluripotente
activare: stimul puternic + depopularea MO (ex.: post transplant medular)
Difereniere celula stem mieloid : seria mieloid
limfoid : seria limfoid
Migrare : baza transplant celule stem
Homing : repopuleaz MO
* Celula STEM :
nu se identific morfologic n MO (asemntoare unui limfocit mic)
inciden f. slab 0.01% din populaia celular MO
recunoatere: markeri imunologici fenotipici CD 34 stem pluripotent
metoda culturilor colony forming units (CFU)

2. CM celule stem unipotente

difereniere mai limitat:

neutrofile
Linii mieloide : granulocitar: granulocite eozinofile
bazofile
eritrocitar - eritroblastic
monocitar
trombocitar
Serii limfoide: B, T, NK (non B non T )

3. CM celule blastice cap de serie:

mieloblast
proeritroblast
megakarioblast
monoblast
limfoblast

* Blati: primele celule identificabile morfologic

4. CM de difereniere i maturaie:
cel mai voluminos
diferenierea celular caractere morfologice specifice
produs final: celule efectorii /mature
5. CM celule efectorii /mature:
Segmentatele
Eritrocite
Monocite
Trombocite
LB, LT, NK
* Celulele mature : n MO i n SP (frotiu sangvin, HLG)
* Etapa tisular ( diferenierea anumitor serii celulare):
LB n plasmocit secretant de Ig
monocit macrofag tisular
seria limfoid ggl. limfatici, timus

Markeri imunologici fenotipici caracteristici de serie:

s. granulocitar : CD 13, CD 33
s. megakariocitar: CD 61, CD 41, CD 42
s. monocitar: CD 14, 11b, HLA DR
s. eritrocitar: CD 36, glicophorina, R-transferina

Markeri caracteristici de etapa de diferentiere:

CD 34: celula stem marker de imaturitate;
se pierde pe masur ce se maturizeaz celula.
Imunofenotipare: a 2-a metod fundamental
pentru studiul populaiilor celulare

Hematopoieza intramedular
* Micromediu specific: nisa medular componente:
1. Celular: - celule fixe: macrofage, adipocite, fibroblaste, endoteliu capilar

- celule mobile: limfocite, monocite

2. Reteaua fibrilar: matricea extracelular: colagen, PG, fibronectin
3. Factori de cretere, CK:
secretai de componenta celular a micromediului + torent sangvin
asigur o retea informaional cu bucle de feedback + si
multiple categorii de factori de reglare hematopoietici
acioneaz la nivelul celulei stem, progenitori : CK / IL - IL 3, IL 6, IL 1
seriilor: GMCSF, MGCSF, GCSF
roluri: celule imature diviziune
celule mature mbuntesc funcionalitatea
utilitate farmacologic / hematologic ( aplazie medular)
Neulasta, Leucogen, Filgrastin
Eritropoietina specific pentru seria eritroid (anemii din insuf. renal
inflamatii cronice, neoplazii hematologice)
Trombopoietina: factor de cretere pentru seria megakariocitar

Seria eritrocitar

Produs final: ERITROCIT

Etape: (1) proeritroblast (2 ) eritroblast bazofil (3)
policromatofil (4) acidofil (5) reticulocit (6) eritrocit
Procese de baz:

progresiv dimensiunea: proeritroblast 18 - 20 ; eritrocit 7.2

modificri nucleare: progresiv n dimensiuni (proeritroblast nucleu

80% din suprafata celular eritroblast oxifil nucleu mic) se
pierde complet (reticulocite celule anucleate)
modificarea tinctorialitii: (1), (2) extrem de bazofile ARN ribozomal,
(3) progresiv acidofil acumulare Hb, (4) deja incarcat cu Hb, (5) mai
pstreaz urme de ARNr, neidentificabil cu coloraii obisnuite (coloraii
specifice albastru de briliant crezil )
modificarea formei: (1) rotund, (6) disc biconcav, 7.2 , elastic (form
absolut necesar trecerii prin microcirculaie; capilare ~ 4, strbtute
datorit elasticitii eritrocitului

Eritropoieza

Eritropoieza: celula se divide pn la reticulocit maturaie

Durat eritropoiez: 5 7 zile
Durat de via eritrocit: 120 zile
Distrucie = Hemoliza - fiziologic:
intramedular (10-15% din precursori distrui intramedular)
extramedular (sinusoide splenice - eritrocite senescente)
Echilibru eritropoiez / hemoliz menine constant indicii
eritrocitari (Hb, Ht, nr. Eritrocite, % reticulocite)

! Defect de producie / distrucie excesiv rupe echilibrul

anemie

SP - Seria rosie
Eritrocite celule rosii
Rol major:
Contin hemoglobina, care transporta oxigenul catre
tesuturi
Participa la transportul dioxidului de carbon (contin
anhidraza carbonica)
Productia: dupa nastere, exclusiv de catre maduva

hematogena
Celule anucleate, cu forma de disc biconcav, foarte
elastice; dimensiuni: aprox 7.5 microni
Durata de viata aprox 120 de zile.
Sinteza este controlata de eritropoietina

Granulopoieza

Celul cap serie: mieloblast

Produs final:

GRANULOCITE

Etape: (1) mieloblast (2) promielocit (3) mielocit

(4) metamielocit nesegmentat (5) metamielocit segmentat

Modificri form & nucleu: (1) 80% nucleu, multi nucleoli; (2) nucleu
excentric, oval; (3) bob de fasole; (4) covrig (5) nucleu polilobat
Achiziia de granule primare/azurofile mieloperoxidaza (din etapa 2)

secundare/specifice (din etapa 3):

s. neutrofile: coloraie neutr

s. bazofile: tinctorialitate bazofil
s. eozinofile: colorani acizi
Durat granulopoiez: 10 zile

Durat de via granulocite: ~ 8-12 ore in circulatie

2 compartimente: circulator, marginal
MO : raport G/E 3/1

SP - Leucocitele
Functia primara aparare rapida si puternica

impotriva organismelor straine

Origine si maturare: MO si organe limfoide
6 tipuri majore mature:

Neutrofile (granulocite, segmentate)

(granulocite) Eozinofile
(granulocite) Bazofile
Limfocite
Monocite
Plasmocite

2 grupuri mari: granulocite si leucocite fara

granulatii

SP - Leucocitele
Durata de viata in SP este limitata si variabila,
diferite tipuri de leucocite fiind mobilizate la
nevoie:
Granulocite: 12 ore; diapedeza!
Monocite: saptamani / luni; macrofage.
Limfocite: cateva ore in sange, dar pot trai ani de

zile in organele limfoide (limfocite de memorie)

SP - Leucocitele
In mod normal, sangele periferic contine
urmatoarele tipuri de leucocite evaluabile de
catre analizorul automat:
Neutrofile (granulocite segmentate)
Eozinofile
Bazofile
Limfocite
Monocite

Seria trombocitar

Precursor: megakarioblast
Produs final: TROMBOCIT
Etape: (1) megakarioblast (2) megakariocit (3) trombocit
1 megakariocit 4000 trombocite
Durat megakariopoiez: ~ 10 zile
Durat de via trombocit: ~ 7 zile in circulaie
Megakarioblast: - sufer progresiv replicare nuclear cu
endomitoze se dubleaz materialul nuclear i citoplasma
Megakariocit: - celul gigant, cu multinucleu (16 - 32 nuclei)
Trombocit: - celul matur anucleat, dimensiuni ~ 4 ,
- formare: fragmentarea citoplasmei scuturare
- structur: membran cu R glicoproteici I-IX,
citoplasm cu granule (serotonin, factori procoagulanti)
- roluri: hemostaza primara, infl., remaniere plgi

SP - Trombocite
Trombocite = Plachete
Sunt fragmente celulare anucleate, ce
rezulta din fragmentarea Megakariocitelor

medulare
Sinteza este controlata de trombopoietina
Rol in hemostaza: aderare, activare,
agregare, eliberare substante active (ex:
serotonina vasoconstrictie)
Durata de viata = 10-14 zile.

Seria monocitar

Celula cap sere: monoblast

Produs final: MONOCIT
Etape: (1) promonocit (2) monocit tnr (3) monocit adult
(nucleu faldat in steag)

Durata de via n circulaie: ~ 20 24 ore

Apoi se cantoneaz n esuturi macrofag tisular
Rolurile monocitelor: RI, inflamaie, procese specifice
Hematopoieza
Funcie fagocitar: esteraze (coloratii
specifice), lizozim (* lizozim seric/urinar marker
proliferri)
Sistemul monocito-macrofagic / tipuri de macrofage:
M ggl limfatici

celule Kupffer

Celule mezangiale R

Celule Langerhans (piele)

Microglia SNC

M splenice

M seroase perit., peric., pl.

M medulare

M alveolare

Seria limfoid

*Celule greu de identificat morfologic.

Celula cap serie: limfoblast

Produs final: LB, LT, NK
LBRIU secreie Ig (Ac): neutralizare, opsonizare, activare C
5 10% din populaia limfocitar n sngele periferic
Ontogeneza seriei LB: majoritar n MO; exprim Ig pe
suprafa
Element final = plasmocit:
celul oval, nucleu rotund, excentric, cromatin n roat
dinta,citoplasm intens bazofil
localizare: ggl. limfatici, MO
Markeri imunologici:
prezena Ig pe suprafaa celular
CD 79a: marker timpuriu; leucemii acute
CD 20: marker de maturitate; dispare pe plasmocit

Seria limfoid

LT ~ 60 70 % din limfocitele circulante n sngele periferic

LTh CD 4
LTcs CD 8
LT organ majoritar de limfopoiez (timus)
rol n ordonarea i reglarea rspunsului imun
Markeri = Tcell Receptor ancorat pe suprafaa LT (R tip IG):
CD 3 de suprafa pt. celule mature
citoplasmatic pt. celule imature
CD 7, CD 2, CD 5
CD 4, CD 8 etapa maturitii
Celula stem afectarea ei det. afectarea tuturor seriilor
patologic: blocaj total(maturatie+diferentiere): leucemii acute
hematopoieza displazic: sd. mielodisplazice
TDT marker de celul stem unipotent limfoid, de absolut
imaturitate

Investigatii specifice in
Hematologie

Hemograma
Frotiul de sange periferic
Numaratoarea reticulocitelor
Medulograma; aspiratul medular si biopsia osteomedulara
Biopsie cutanata, ganglionara
Testul Coombs
Imunofenotiparea
Examenul citogenetic si molecular
Electroforeza de proteine serice
Electroforeza de hemoglobina
Vascozitatea plasmatica
Coagulograma

Hemograma
Primul pas in evaluarea functiei hematologice si in

diagnosticul patologiei hematologice.

Hemograma si frotiul de sange periferic ofera informatii
diagnostice importante, permite efectuarea
diagnosticului diferential si oportunitatea testelor
aditionale.
Elementele din sange:
eritrocite, leucocite si trombocite.
Cuantificarea acestor elemente prin metode manuale si

automatice

Hemograma
Probele de sange trebuie obtinute in conditii optime
Factori ce pot influenta rezultatele: gradul de activitate,

nivelul de hidratare, medicatie, sex, varsta, rasa, fumatul,

vechimea probei.
Sangele este recoltat pe anticoagulant, de preferinta
EDTA (ethylenediaminetetraacetic acid) inlatura calciul
si previne formarea cheagului de sange, cu efecte
minime morfologice si fizice asupra celulelor.