Sunteți pe pagina 1din 82

O scurt introducere n biochimie

Cristina Bischin, Violeta-Florina Scurtu, Daniela Cioloboc, Radu Ghinga, Radu SilaghiDumitrescu

Facultatea de Chimie i Inginerie Chimic


Universitatea Babe-Bolyai
Cluj-Napoca, 2013

O scurt introducere n biochimie


Volumul se adreseaz celor interesai de cteva detalii introductive despre biochimie i despre
implicaiile ei in viaa de zi cu zi. Autorii presupun cteva cunotine de baz de chimie, fizic i
biologie, astfel inct textul s fie utilizabil pentru publicul non-specilist n biochimie, inclusiv
studeni ai unor specializri non-biochimice (de exemplu Sport, sau Fizic). Pe de alt parte,
prin anexele de la final, textul ofer cu titlu opional i aspecte semnificativ mai detaliate din
punct de vedere chimic, pentru cititorii pentru care acestea ar fi un punct de interes. n calitate
de foti studeni ai dnsului, autorii dedic volumul Prof. Dr. Ing. Florin-Dan Irimie, Director al
Departamentului de Biochimie i Inginerie Biochimic i creator al unei coli de biochimie n
cadrul Facultii de Chimie i Inginerie Chimic a Universitii Babe-Bolyai din ClujNapoca.

O scurt introducere n biochimie

Cuprins
1.

Introducere ............................................................................................................................... 5

2.

Glucidele (zaharidele) .............................................................................................................. 7


2.1. Monozaharidele ..................................................................................................................... 7
2.2. Oligozaharidele ..................................................................................................................... 8
2.3. Polizaharidele ........................................................................................................................ 8
2.4. Glicoconjugaii: proteoglicani, glicoproteine i glicolipide ................................................ 10

3.

Lipidele................................................................................................................................... 11
3.1. Acizii grai .......................................................................................................................... 11
3.2. Acilglicerolii (gliceride, sau grsimi).................................................................................. 12
3.3. Glicerofosfolipide i compui nrudii................................................................................. 13
3.4. Ceridele ............................................................................................................................... 13
3.5. Terpenele ............................................................................................................................. 14
3.6. Steridele (Izoprenoidele) ..................................................................................................... 14
3.7. Eicosanoidele ...................................................................................................................... 15
3.8. Membranele ......................................................................................................................... 15

4.

Proteinele i aminoacizii ........................................................................................................ 17


4.1. Aminoacizii ......................................................................................................................... 17
4.2. Structura proteinelor ............................................................................................................ 17
4.3. Enzime................................................................................................................................. 18

5.

Acizii nucleici ........................................................................................................................ 19


5.1. ADN .................................................................................................................................... 20
5.2. ARN .................................................................................................................................... 22

6.

Metabolismul .......................................................................................................................... 23
6.1. Catabolismul........................................................................................................................ 23
6.1.1.

Glicoliza ................................................................................................................... 24

6.1.2.

Ciclul Krebs (ciclul acizilor tricarboxilici, ciclul acidului citric) ............................ 24

6.1.3.

Lanul transportor de electroni i fosforilarea oxidativ .......................................... 25

6.1.4.

Calea pentozo-fosfailor i alte ci ale metabolizrii hexozelor .............................. 26

6.1.5.

Catabolismul acizilor grai ....................................................................................... 26

6.1.6.

Catabolismul proteinelor .......................................................................................... 27

6.1.7.

Degradarea aminoacizilor ........................................................................................ 27

6.2. Anabolismul ........................................................................................................................ 27


6.2.1.

Gluconeogeneza ....................................................................................................... 27

O scurt introducere n biochimie


6.2.2.

Biosinteza lipidelor .................................................................................................. 28

6.2.3.

Sinteza aminoacizilor ............................................................................................... 28

6.2.4.

Fotosinteza ............................................................................................................... 29

7.

Aspecte de nutriie .................................................................................................................. 30

8.

Sistemul imunitar ................................................................................................................... 35


8.1. Anticorpii (imunoglobulinele)............................................................................................. 35
8.2. Celulele sistemului imunitar................................................................................................ 36
8.3. Vaccinurile i imunitatea ..................................................................................................... 37
Enzimologie clinic ................................................................................................................ 38

9.

9.1. Proteine serice ..................................................................................................................... 38


9.2. Enzime implicate n patologia cardiac .............................................................................. 38
9.3. Analize n explorarea ficatului ............................................................................................ 39
9.4. Enzime implicate n patologia pancreasului ........................................................................ 40
9.5. Analize exploratorii ale funciei renale ............................................................................... 40
9.6. Alte enzime cu relevan clinic ......................................................................................... 41
10.

Dopajul i substanele interzise ........................................................................................... 42

10.1. Substane interzise att n timpul ct i n afara competiiilor .......................................... 42


10.1.1.

Substane farmacologice care nu sunt aprobate pentru uz uman terapeutic ......... 42

10.1.2.

Ageni anabolizani ............................................................................................... 42

10.1.3.

Hormoni peptidici, factori de cretere, i substane nrudite cu acestea ............... 43

10.1.4.

Agoniti beta ......................................................................................................... 43

10.1.5.

Hormoni i modulatori metabolici (alii dect hormonii peptidici) ...................... 43

10.1.6.

Ageni diuretici, i ali ageni de mascare............................................................. 43

10.2. Proceduri interzise att n timpul ct i n afara competiiilor .......................................... 43


10.2.1.

Mrirea artificial a capacitii de transport a oxigenului .................................... 43

10.2.2.

Manipularea fizica sau chimic ............................................................................ 43

10.2.3.

Dopajul genetic ..................................................................................................... 43

10.3. Substane interzise doar pe parcursul competiiilor .......................................................... 44


10.3.1.

Ageni stimulani .................................................................................................. 44

10.3.2.

Narcoticele ............................................................................................................ 44

10.3.3.

Canabinoidele ....................................................................................................... 44

10.3.4.

Glucocorticosteroizii ............................................................................................ 44

10.4. Substane interzise selectiv, doar n anumite sporturi ....................................................... 44


11.

Anexe .................................................................................................................................. 45

O scurt introducere n biochimie

1. Introducere
Biochimia se ocup cu structura moleculelor din sistemele vii i cu procesele n care
aceste molecule sunt implicate. La intersecia dintre biologie, chimie i fizic, ea detaliaz
modurile n care organismele vii obin energie pentru a se hrni, i transmit trsturile ctre
urmai (ereditatea), sunt supuse bolilor, etc.
n alimentaie, biochimia este folosit printre altele n scopul gsirii unor surse de
nutrieni mai abundente i ieftine, n determinarea compoziiei chimice a alimentelor, n
dezvoltarea unor procedee de reciclare a nutrienilor din unele deeuri sau inventarea unor ci de
prelungire a timpului de via al produselor alimentare. n agricultur, biochimitii studiaz
interaciunea ierbicidelor cu plantele, analiznd relaia dintre structura i activitatea compuilor,
determinnd abilitatea lor de a inhiba creterea i evalund efectul toxic al mediului nconjurtor.
De asemenea, biochimia i gsete o importan aplicativ n domenii ca farmacologia,
fiziologia, microbiologia, chimia clinic. n aceste domenii, biochimitii pot investiga
mecanismul de aciune al medicamentelor sau utilizeaz concepte, metode i tehnici chimice
pentru studiul diagnozei i a terapiei bolilor, precum i al evalurii sntii. Cum pot compuii
organici din organism s fie transformai de ctre enzime n produi toxici sau cum pot poluanii
din mediul exterior s afecteze sntatea, este un alt domeniu de interes al biochimiei medicale,
mai exact al toxicologiei. n tiina sportului, biochimia contribuie la nelegerea proceselor de
alimentaie, al celor implicate n efortul fizic, dar i a dopajului.
Caracteristicile organismelor vii, care le difereniaz fundamental de alte sisteme, sunt:
1. Capacitatea de reproducere i de autoasamblare. O singur celul bacterian plasat ntrun mediu steril cu nutrieni este capabil s produc miliarde de celule identice, n 24 de
ore. Fiecare celul conine mii de molecule, unele extrem de complexe; fiecare bacterie
este o copie fidel a celulei din care provine, contrucia sa fiind dictat de informaii
preluate de la celula original.
2. Sistemele pentru extragerea, transformarea i utilizarea energiei din mediul nconjurtor
permit organismelor sa-i construiasc i s-i menin propria structura i s se angajeze
n activiti mecanice, chimice, i electrice.
3. Mecanisme de adaptare la noi condiii din mediu.
4. Un grad ridicat de complexitate chimic i organizare microscopic. Celula este alctuit
din mii de molecule diferite. ntre ele, fiecare subsistem are o funcie, iar ntre acestea
exist o strns conexiune.
Compoziia organismelor vii: circa 30 de elemente chimice sunt eseniale organismelor
vii. Carbonul, hidrogenul, oxigenul i azotul constituie mpreun mai mult de 99% din masa
celulei, i sunt numite de aceea elemente eseniale majore. Acestea elemente pot forma legturi
chimice puternice. Restul de 1% din masa celulei este datorat unor elemente care din cauza
concentraiei mai mici sunt numite i eseniale n urme sau oligoelemente. De exemplu,
hemoglobina, proteina transportatoare de oxigen din sngele multor organisme superioare, este
absolut dependent de fier. Cu, Zn, Co, Na, K, Mg, Ca, sunt alte cteva exemple de metale de o
importan vital.
Un rol important n alctuirea moleculelor biologice l are carbonul. El poate forma
legturi simple cu atomi de hidrogen, legturi duble sau simple cu atomi de oxigen sau azot, etc.
De o importan covritoare n biologie, este capacitatea unui atom de carbon de a se lega
covalent de un alt atom de carbon prin legturi simple, duble sau triple, formnd structuri stabile.

O scurt introducere n biochimie


n acest fel, se formeaz structurile chimice care constituie scheletul moleculelor importante din
biologie, pe care sunt apoi grefate alte diferite grupri de atomi, numite grupri funcionale, care
confer proprieti chimice specifice fiecrei molecule. Niciun alt element nu poate forma,
asemenea carbonului, molecule att de variate ca dimensiune, form i diversitate de grupri
funcionale.
Din punct de vedere al compoziiei chimice, toate organismele conin 5 clase de
substane: proteine, glucide, lipide, acizi nucleici, vitamine, i ioni metalici la care se adaug
apa (vezi Anexa 1).
Interaciuni chimice n organismele vii: n afara legturilor covalente, ntre molecule
apar i unele fore mai slabe, de atracie sau repulsie, cunoscute sub denumirea de legturi
necovalente. Din categoria acestora fac parte legturile van der Waals, ionice i de hidrogen. Ele
difer n geometrie, trie i specificitate. Fiecare dintre acestea are o contribuie semnificativ la
structura, stabilitatea i funcionalitatea macromoleculelor.
Un alt tip de interaciuni des ntlnite n biochimie sunt interaciunile hidrofobe. Acestea
apar ca urmare a tendinei moleculelor hidrofobe de a se auto-asocia pentru a minimiza energia
nefavorabil interaciunii cu apa. Astfel, unele proteine tind sa-i ascund ca ntr-un buzunar
partea hidrofob, evitnt astfel contactul acesteia cu mediul apos nconjurtor.
Fenomene ca replicarea ADN-ului, mpachetarea proteinelor n structuri tridimensionale,
recunoaterea enzim-substrat sau detectarea moleculelor semnal sunt dependente de aceste fore
slabe, care sunt afectate ntr-o msur foarte mare i de prezena apei.
Celula: toate organismele vii cunoscute de noi pn azi sunt formate din celule. O celul,
n sensul biologic, are trei componente: o membran care ii delimiteaza marginile, coninutul
apos (citoplasma) delimitat de aceast membran i nucleul aflat in mijlocul citosolului:
- Membrana celulei are rolul de a delimita spaiul celular i de a separa coninutul
acestuia de exterior; datorit structurii sale impermeabile la ap (hidrofob), ea
permite trecerea controlat a unor compui ncrcai electric. Unele componente
inserate n membrane ndeplinesc apoi roluri diverse - transportor, receptor,
catalizator, semnalizator, micare, i altele. Datorit faptului c moleculele din
constituia membranei nu sunt legate ntre ele prin legturi chimice puternice, ntreaga
structur este flexibil, permind schimbri n form i mrime.
- Citoplasma, coninutul celulei, este compus dintr-o soluie apoas, citosolul, n care
se gsesc alte multe particule cu funcii specifice. Citosolul este o soluie foarte
concentrat n substane chimice - proteine, glucide, acizi nucleici, vitamine, dar i
sute de molecule mici numite metabolii, rezultai n cile de sintez i degradative.
- Nucleul: toate celulele au un nucleu, care depoziteaz n molecula numit ADN (acid
deoxiribonucleic) informaia esenial funcionrii celulei (informaia genetic).
pH-ul n organismele vii: pH-ul afecteaz structura i funcia biomoleculelor, activitatea
catalitic a enzimelor, prin urmare, schimbrile de pH pot fi distructive metabolismului.
Organismele posed o varietate de mecanisme prin care pH-ul intra i extracelular este pstrat
constant (pentru detalii vezi Anexa 1).

O scurt introducere n biochimie

2. Glucidele (zaharidele)
Cele mai abundente molecule de provenien biologic ntlnite n natur sunt glucidele,
cunoscute i sub numele de zaharuri, carbohidrai, sau hidrai de carbon - datorit formulei
moleculare de baz (CH2O)n, unde n3. n general, denumirile compuilor care fac parte din
aceast clas poart terminaia -oz. n organismele vii, glucidele servesc drept surs de
energie, rezerv de energie, material de rezisten mecanic (structural), componente ale unor
sisteme mai complexe (ca acizii nucleici sau vitaminele), elemente de recunoatere (etichete
pentru celule), elemente de adeziune ntre celule i intermediari metabolici.
Glucidele/zaharidele se mpart n trei categorii: monozaharide, oligozaharide i
polizaharide. A patra categorie sunt compuii n care glucidele particip alturi de alte substane.
2.1. Monozaharidele
Monozaharidele sunt cele mai simple glucide; ele conin ntre 3 i 7 atomi de carbon,
conectai ntre ei ntr-o structur liniar. Atomii de oxigen din compozitia monozaharidelor se
regasesc sub form de grupri OH (hidroxil), cte unul per atom de carbon, cu excepia unui
oxigen per glucid care apare sub form de grupare =O (carbonil). Gruparea carbonil se poate
gsi fie la primul atom de carbon din structur (caz n care acea glucid este numit aldoz, din
cauza similaritii cu compuii organici numii aldehide), fie la al doilea atom de carbon din
structur (caz n care vorbim de cetoze datorit similaritii cu compuii organici numii cetone).
Mai multe detalii sunt prezentate n Anexa 2.
Izomeria optic: Structurile care au aceeai formul molecular dar difer prin
organizarea intern a atomilor sunt numite izomeri. Monozaharidele n general prezint unul sau
mai muli atomi de carbon n jurul crora cele patru legturi sunt formate cu patru atomi sau
grupuri de atomi diferii ntre ei. Acei atomi de carbon sunt asimetrici (se folosete i termenul de
chirali). Pentru aldehida gliceric (Figura 1) se observ c, din cauza acestei asimetrii, atomii
pot fi aranjai n dou feluri diferite, rezultnd dou structuri chimic diferite notate cu D i L (a se
vedea Anexa 2 pentru regulile dup care se fac aceste notaii), care au proprietatea de a fi, una
fa de cealalt, imagini n
oglind.
CHO
CHO
n structura glucozei din
Figura 2 se poate observa c 4
dintre atomii de carbon din
CH2OH
CH2OH
interiorul lanului au fiecare cte 4
vecini diferii. Moleculele cu
L-aldehida gliceric
D-aldehida gliceric
patru sau mai muli atomi de
Figura 1. Ilustrare a asimetriei din cea mai simpl glucid. carbon au aadar mai muli centri
chirali. Ele primesc eticheta D sau
L n funcie de poziia gruprii OH de la atomul de carbon chiral aflat la cea mai mare distan
de gruparea carbonil (pentru detalii vezi Anexa 2). Este de notat c aproape toate glucidele
ntlnite n organismele vii sunt de tip D, dei, din punct de vedere al reactivitii chimice,
izomerul L nu este mai puin stabil sau foarte diferit. Motivul pentru care, i mai ales modul n
care dintre cei doi izomeri optici organismele primitive au reuit s selecteze unul singur, sunt
nc o parte a incomplet elucidatului mecanism prin care a aprut viaa pe planeta noastr.
HO

OH

O scurt introducere n biochimie


Structuri ciclice: n soluii apoase, monozaharidele au tendina de a renuna la structura
lor liniar i de a forma cicluri, aa cum se ilustreaz n cazul glucozei n Figura 2 (pentru detalii
vezi Anexa 2).
H
HO
H
H

H
OH

CHO
CH2OH
OH
OH H
H
H
H
OH H C
OH
O
OH
OH D-glucoza
H
OH
CH2OH

CH2OH
O
H
OH H
H
OH
forma

H
OH

CH2OH
O
H
OH H

OH

OH
H

2.2. Oligozaharidele
Oligozaharidele sunt compui
formai
din
lanuri
de
2-10
monozaharide unite ntre ele prin
legturi chimice. Cel mai cunoscut
reprezentant al oligozaharidelor este
zaharoza (sau sucroza, sau zahrul de
buctrie) care este o dizaharid
format prin legarea unei molecule de
glucoz de una de fructoz:

H
OH
forma

Figura 2. Dou forme diferite ale glucozei pot fi


obinute n mod reversibil una din cealalt: i .
Pe primul rnd sunt date dou reprezentri ale
aceleiai structuri liniare structur care n mod
reversibil se poate transforma in cele dou forme
ciclice. Cnd este dizolvat n ap, D-glucoza se
prezint o treime sub forma , dou treimi i mai
puin de 1% form aciclic.

CH2OH
glucoza

H
OH

OH

OH
CH2OH
H

fructoza
H

OH
CH2OH

H
Dei n natur se gsesc o varietate de oligoOH
i polizaharide, la baza formrii acestora sunt n
Figura 3. Zaharoza
general doar cteva monozaharide: glucoza, fructoza,
manoza, galactoza, riboza i xiloza.
Maltoza este o diglucid alctuit doar din glucoz (formele i ilustrate in Figura 2)
i este rezultatul descompunerii amidonului (a se vedea mai jos) de ctre enzime numite amilaze
(notm aici c enzimele sunt substane care catalizeaz reaciile chimice din organismele vii i
c numele lor are de obicei terminaia specific -az). Lactoza este principala glucid din lapte;
este o diglucid format din galactoz i glucoz.
Stahioza este o oligoglucid din fasole, mazre, tre i gru. Ea nu este digerat de
enzimele stomacale, ns poate fi degradat de bacteriile intestinale, provocnd flatulen prin
gazele pe care le degaj.
Oligozaharidele intr i n compoziia unor antibiotice, cum este streptomicina, sau cum
este i bleomicina folosit la tratarea unor tipuri de tumori.

2.3. Polizaharidele
Polizaharidele sunt compui obinui prin polimerizarea monozaharidelor, prin legturi
similare celor din oligozaharide. Cea mai comun monozaharid util n acest sens este Dglucoza. Polizaharidele difer ntre ele prin tipul monozaharidei din alctuirea lor, dar i prin
lungimea lanului polimeric, modul de ramificare al acestuia i rolul ndeplinit n organismele vii
i anume rol energetic (poliglucide de rezerv) sau rol structural.

O scurt introducere n biochimie


Cele mai importante polizaharide cu rol energetic sunt amidonul (din plante) i
glicogenul (din animale i ciuperci) iar principala polizaharid cu rol structural este celuloza.
Amidonul este de fapt un amestec de doi polimeri diferii, ambii formai din glucoz:
amiloza (un polimer liniar) i amilopectina (un polimer ramificat). n organismul nostru, atunci
cnd consumm amidon, digestia sa ncepe n cavitatea bucal, sub aciunea enzimei numite
amilaz; o amilaz se gsete apoi i la nivelul intestinului, adus de sucul pancreatic.
Glicogenul, principala rezerv energetic de la animale, este, la fel ca amilopectina, un
polimer ramificat pe baz de glucoz ns este mai compact dect aceasta. Este abundent n
ficat i muchii scheletici, unde poate fi supus clivrii de ctre amilaze i glicogen fosforilaze,
elibernd n cele din urm glucoz.
Celuloza este o polizaharid cu rol structural, are o molecul liniar format din
glucoz; moleculele sale formeaz fibre foarte lungi, aliniate n paralel una cu alta i conectate
prin reele foarte extinse de interaciuni slabe implicnd cte un hidrogen plasat ntre doi atomi de
oxigen (legturi de hidrogen, a se vedea Anexa 1 i Figurile 4 i 5).
molecul de glucoz
molecul de glucoz
punte eteric

H OH
O

...O

H
H
H

OH

molecul de glucoz
punte eteric

H OH

O
O

HO

molecul de glucoz

punte eteric

H OH
H

HO

H
H

OH

H
OH

H
H

H OH

O
O

HO

molecul de glucoz

punte eteric

H OH

H
O

HO

H
H

Figura 4. Alctuirea fibrei de celuloz

OH

H
HO

H
H

OH

O...
H

Figura 5. Alinierea fibrelor de celuloz


Aceste reele dau rezistena mecanic a celulozei, mult mai bun dect cea a amidonului
dei ele au la baz acelai component - glucoza, i asigur insolubilitatea n ap. Ea este ntlnit
n peretele celular al plantelor, cruia i ofer caracteristici structurale i mecanice deosebite.
Bumbacul este format numai din celuloz, iar acetaii de celuloz produi n industrie i gsesc o
larg aplicabilitate n industria textil. Prin tratarea celulozei cu acid azotic se obine un material
care st la baza celuloidului, dar are i proprieti explozive.
Cele mai multe animale nu pot folosi celuloza ca surs energetic deoarece le lipsesc
enzimele capabile s rup legturile dintre unitile de glucoz din acest polimer liniar. Termitele
pot digera celuloza datorit existenei n tractul lor intestinal a unui microorganism simbiotic,
care secret celulaz (ntmpltor, pentru om aceast bacterie este toxic). La fel, unele animale
ierbivore contin n sistemul digestiv bacterii capabile s degradeze celuloza; aceste bacterii
produc ns i efecte nedorite, i anume gaze nocive pentru atmosfer (metan n primul rnd),
astfel nct unii cercetatori consider c zootehnia genereaz efect de ser (nclzirea
ireversibil a atomsferei i distrugerea stratului de ozon) n msur cel puin egal cu arderea
combustibililor n industrie i transporturi.

O scurt introducere n biochimie


Chitina este al doilea polimer glucidic ca abunden n natur (dup celuloz). Structura
ei se aseamn cu a celulozei, coninnd ns, suplimentar, o serie de atomi de azot i de carbon
care o fac mai rezistent la ap (hidrofob), chitina se gsete n carapacea exterioar a unor
insecte, n ciuperci, molute i altele, unde are rol protector.
Celulele bacteriilor prezint, pe lng membrana care le delimiteaz, i un perete alctuit
din polizaharide bogate n azot (a se vedea Anexe). Aceti polimeri confer rigiditate peretelui,
protejnd celula de umflare excesiv care ar duce la distrugerea membranei. Enzimele, cum sunt
cele din lacrimi, sau cele produse de viruii care au ca int bacteriile, distrug aceti polimeri.
Penicilina i alte antibiotice omoar bacteriile prin faptul c mpiedic sinteza pereilor
bacteriilor. Tot cu rol protector n jurul bacteriilor sunt i dextranii (dei uneori ei sunt folosii i
ca form de depozitare a glucozei de ctre bacterii). Placa dentar, rezultat n urma activitii
bacteriilor la suprafaa dinilor, este bogat n dextrani. Ei au ns aplicaii i ca materie prim
pentru obinerea de materiale poroase utile n procese de separare i analiz de laborator.
Din pereii celulelor algelor se extrag polizaharide capabile s formeze geluri, cu
aplicaii n laboratorul de biochimie dar i ca alternativ vegetarian n industria alimentar la
agenii de gelifiere pe baz de gelatin (aceasta din urm fiind o protein de provenien
animal).
Acidul hialuronic, alctuit din doi derivai de glucoz (a se vedea i Anexele), este un
lichid vscos care servete ca lubrifiant coninut la nivelul articulaiilor, n ochi, cartilaje i
tendoane. Polimeri cu roluri i structuri similare sunt discutai n Anexe.
Heparina, produs de ctre celule din snge numite leucocite, este eliberat n circulaia
sanguin, unde inhib coagularea sngelui. Aceast coagulare este esenial n oprirea sngerrii
(formarea cheagului deasupra unei rni). Heparina este folosit adesea n laborator, atunci cnd se
dorete colectarea de probe de snge astfel nct el s nu coaguleze imediat dup ce a fost
recoltat, pentru a avea timp s efectum msurtorile dorite.
2.4. Glicoconjugaii: proteoglicani, glicoproteine i glicolipide
n afara rolului structural i energetic, oligozaharidele i polizaharidele sunt i purttori
de informaie. Ele servesc ca etichete cu rol n recunoaterea unor proteine, ca mediatori ai
interaciunii celul-celul i celul-mediu extracelular, n aderena celular, migrarea celular, n
sistemul imun, etc. n cele mai multe cazuri, rolurile descrise sunt ndeplinite de ctre glucide
legate de proteine (a se vedea i capitolul 4).
Proteoglicanii: sunt macromolecule de la suprafaa celulelor sau din matrixul
extracelular, n care lanuri de glicozaminoglicani sunt legate de proteine secretoare sau
membranare. Glicozaminoglicanii sunt heteropolimeri formai prin repetarea unor uniti
dizaharidice, traversate de proteine fibrilare ca elastina, colagenul, fibronectina i lamina.
Glicoproteinele conin una sau mai multe oligozaharide legate chimic de o protein.
Anumite glucide ataate pe suprafeele unor proteine servesc drept indicatori ai vrstei acelor
proteine: n timp, ei sunt pierdui de ctre protein, moment n care un receptor special de la
nivelul ficatului sesizeaz acest lucru i le scoate din circulaie ca fiind expirate.
Glicolipidele sunt lipide membranare la care de captul hidrofilic este legat un
polizaharid, fiind astfel uor recunoscute de ctre glicoproteine.

10

O scurt introducere n biochimie

3. Lipidele
Lipidele cuprind o clas variat de compui din organismele vii a cror trstur
comun este reprezentat de solubilitatea redus n ap i solubilitatea mare n solveni
organici. Principalele roluri pe care le au lipidele in organismele vii sunt: rezervoare de energie,
componente structurale principale ale membranei celulare, molecule de semnal (hormoni),
protecie (fa de frig, ap). Alte lipide, dei prezente ntr-o cantitate mai mic, pot ndeplini
rolul de emulsificatori n tractul digestiv, componente auxiliare ale enzimelor, mesageri
intracelulari, pigmeni care absorb lumina, transportori de electroni, etc. Lipidele sunt molecule
cu o mare diversitate structural; dintre acestea, cele mai notabile vor fi prezentate n continuare:
3.1. Acizii grai
Acizii grai apar rar liberi n sistemele biologice, de cele mai multe ori apar legai prin
legturi chimice la o structur cum ar fi, de exemplu, glicerolul. Derivaii acestora sunt
principalele rezerve energetice din organismele vii, arderea lor fiind o reacie puternic exoterm
care are loc ca produi CO2 i apa.
Acizii grai conin n general un lan liniar de atomi de carbon bogat n hidrogen (grupri
-CH2-), care poate fi privit ca un polimer al gazului metan. De aici i faptul c, asemeni
metanului, arderea acizilor grai permite obinerea de cantiti mari de energie de cca dou ori
mai mult dect din glucide. La unul dintre capete, acizii grai prezint ntotdeauna o grupare
carboxil COOH. Unii acizi grai sunt nesaturai, adic au pierdut civa dintre atomii de
hidrogen: ca efect, ntre atomii de carbon care au pierdut hidrogenul se stabilesc legturi duble,
dup cum se vede n Figura 6. Tot Figura 6 arat c geometria legturii duble poate fi organizat
n dou feluri, numite trans i cis. Acizii grai difer ntre ei prin numrul atomilor de carbon (de
cele mai multe ori cuprins ntre 12 i 24) i al legturilor duble. Absena legturii duble
ncadreaz acidul gras n categoria celor saturai. Acizii grai nesaturai se mpart n mononesaturai, atunci cnd n constituia lor apare doar o singur legtur dubl sau poli-nesaturai,
atunci cnd n molecula lor apar mai multe legturi duble. n natur legtura dubl apare n
configuraie cis dar, n anumite condiii (fermentaie, hidrogenare, unele boli), are loc
transformarea acesteia n trans.
O

O diet bogat n acizi grai


trans
duce
la o cretere a nivelului de
O
LDL din snge (o protein care
C
HO
transport lipide i este cunoscut i
drept colesterolul ru) i o cretere
a capacitii de oxidare a acestuia,
O
C
avnd efecte negative n ceea ce
HO
privete sntatea organismului, acest
Figura 6. Exemple de acid gras saturat (primul rnd),
fapt jucnd un rol important n
acid gras nesaturat cis (al doilea rnd), i acid gras
apariia bolilor cardiovasculare.
nesaturat trans (al treilea rnd). Locaia legturii duble
Cei mai ntlnii acizi grai
este specificat uneori, n formula chimic, folosind
din natur sunt cel stearic i cel
particula urmat de un numr.
palmitic - ambii saturai. Acizii grai
nesaturai sunt mai puin ntlnii i apar n special la plantele superioare. Dintre acetia, cel mai
rspndit este acidul oleic.
C

HO

11

O scurt introducere n biochimie


Acidul -linoleic, precursorul acidului arahidonic, necesar printre altele n sinteza
prostagandinelor, cu rol de hormoni, este un acid esenial adic, el nu este sintetizat n
organismul mamiferelor, dar este necesar pentru buna cretere i funcionare a acestuia i, de
aceea, trebuie obinut de organism din surse vegetale.
Cnd alimentele bogate n lipide sunt expuse prea mult timp unei atmosfere cu oxigen,
ele devin rncede, ca urmare a inserrii de atomi de oxigen n legturile duble din lipide, pn
la punctul n care acidul gras este rupt n dou buci mai mici, cu formare de compui oxidai
care prezint un numr mai mic de atomi de carbon.
3.2. Acilglicerolii (gliceride, sau grsimi)
Acilglicerolii sunt alctuii prin ataarea de acizi grai pe glicerol (glicerin), cum se
arat n Figura 7. Cnd toi cei trei atomi de oxigen ai glicerolului sunt esterificai cu cte un acid
gras, se formeaz un triacilglicerol, principala rezerv energetic din esutul adipos al
animalelor. Cei mai muli acilgliceroli sunt micti, cu mai multe tipuri de acizi grai n aceeai
molecul.
Proprietile fizice ale grsimilor sunt determinate de numrul atomilor de carbon i al
legturilor duble din structura acizilor grai. Astfel, cei saturai au capacitatea de a-i alinia
lanurile de atomi de carbon unul lng altul formnd interaciuni mai extinse ntre molecule
dect acizii grai nesaturai (unde legtura dubl induce un element de neregularitate care
limiteaz sau mpiedic alinierea eficient a catenelor de carbon). De aceea, grsimea animal,
bogat n acizi saturai, are o consisten vscoas-solid, pe cnd uleiurile din plante, bogate n
acizi nesaturai, sunt lichide. Un considerent pentru care triacilglicerolii sunt preferai de ctre
organism ca rezerve energetice este faptul c ei sunt hidrofobi i nu necesit la locul de
depozitare (esuturile adipoase) o cantitate suplimentar de ap pentru meninerea structurii spre
deosebire de glucide, care din cauza gruprilor OH atrag, n general, mult ap n jurul lor.
esutul adipos sevete nu numai ca rezerv energetic ci are un rol important, mai ales n cazul
animalelor polare, pentru meninerea temperaturii corpului constant (protecie fa de frig) n
condiii extreme.
Uleiurile vegetale pot fi transformate industrial, prin ataare de molecule de hidrogen, n
grsimi saturate deci solide, obinndu-se astfel margarina (reducerea unor duble legturi i
transformarea n cis a altora) n grsimi solide. Margarina are avantajul de a fi mai srac n acizi
nesaturai (ceea ce e un element pozitiv
pentru sistemul cardiovascular, aa cum
s-a artat mai sus), dar fr a fi de
origine animal i deci fr a avea
colesterol (colesterolul n exces fiind de
asemenea o cauz a problemelor
sistemului circulator). Pe de alt parte,
n procesul de hidrogenare n care dispar
acizii trans, o parte din ei sunt
transformai accidental n acizi cis, care
provoac ei nii probleme de sntate,
posibil mai mari dect trans.
O

H2C

HC

H2C

H2C

CH

H2C

Figura 7. Dou exemple de structuri de acilgliceroli

12

Acilglicerolii pot fi hidrolizai


prin nclzire cu un acid sau o baz sau

O scurt introducere n biochimie


prin tratare cu lipaz, o enzim care catalizeaz hidroliza legturilor esterice. Hidroliza n mediu
bazic poart numele de saponificare i are ca produi glicerolul i a sarea corespunztoare
acidului gras. Tradiional, ea poate fi realizat prin nclzirea de grsime animal cu cenu
(cenua fiind bogat n sodiu i potasiu surse de mediu bazic). Acizii grai rezultai din proces,
cuplai cu sodiu sau potasiu, au caracter dual (amfipatic sau amfifil): la un capt prezint
gruparea ncrcat negativ COO- care i face solubili n ap, iar n rest conin uniti -CH2- care
i fac capabili s se ataeze de materiale hidrofobe. Aceast dualitate le permite s functioneze ca
detergeni sau spunuri, care atrag n mediul apos depunerile insolubile (murdria) de pe
materialele solide.
3.3. Glicerofosfolipide i compui nrudii
n glicerofosfolipide, cunoscute i ca fosfogliceride, sunt ataai acizi grai la doi dintre
cei trei atomi de carboni ai glicerolului, iar de cel de-al treilea atom de carbon este ataat o
grupare fosfat, de care mai departe pot fi ataate i alte uniti hidrofile. Figura 8 ilustreaz astfel
de structuri.
O

Glicerofosfoli
pidele
sunt
C O
CH
componente
eseniale
O
O
ale
membranelor
H2C O P O X
celulelor, dup cum se
O
H
OH
va discuta mai jos.
COO
H
H
Dintre ele, dei n
OH
X=?
OH
O CH2CH2
O CH2 CH
H
O CH2 CH CH2
Figura 8 am ilustrat un
OH
OH
+
+
NH3
OH OH
N(CH3)3
O
H
compus
numit
fosfatidilcolina
lecitin,
este
de
fosfatidil
fosfatidil glicerol
fosfatidil serina
("lecitina")
inositol
subliniat
c
preparatele
vndute
Figura 8. Structura general a glicerofosfolipidelor i cteva exemple.
sub acest nume ca
suplimente nutritive sau componente ale spray-urilor de uz culinar non-stick (evit aderarea
mncrii la tigi, de exemplu) conin de fapt amestecuri complexe din toate lipidele ilustrate n
Figura 8, i nu doar un singur compus chimic. Lipidele aferente pot fi extrase din surse diverse
(ou, plante, animale), i sunt folosite n numeroase preparate comerciale alimentare ca ageni de
emulsificare (ajutnd la meninerea stabilitii mecanice a unor amestecuri de substante care altfel
nu ar putea fi amestecate omogen). Lista lipidelor fosforice este ns mult mai lung. Ele includ
printre altele sfingomielinele, importante n teaca de mielin a neuronilor, ceramidele sau
gangliozidele, i au funcii diverse, care includ recunoaterea celular, transmiterea de semnale,
sau roluri structurale.
Legturile ce implic gruparea fosforic din glicerofosfolipide sunt rupte cu ajutorul
unor enzime numite fosfolipaze, care sunt de exemplu o component notabil n unele veninuri
animale.
CH2

denumire
lipida

C O

3.4. Ceridele
Ceridele sunt compui formai prin legarea unui alcool cu un acid gras, de obicei saturat,
ambii avnd un lan lung de atomi de carbon. Ele confer rezisten la ap pielii animalelor,
frunzelor unor plante i aripilor psrilor. Suprafaa lucioas a unui mr este datorat acestor

13

O scurt introducere n biochimie


compui. Proprietile ceridelor le fac utile n activiti de lustruire a diferitelor obiecte sau ca
produi cosmetici i farmacologici care se absorb foarte repede n piele.
3.5. Terpenele
Terpenele sunt derivai ai izoprenului, un compus simplu format din hidrogen i 5 atomi
de carbon (cf. Anexe). Cteva exemple de structuri din aceste clase sunt redate n Anexe. Ele au
roluri diverse i includ compui foarte volatili i cu miros puternic, precum mentolul sau
limonenul, precursori ai colesterolului, pigmeni sensibili la lumin precum carotenoidele (caroten, care este precursor al vitaminei A i al pigmenilor din ochi), sau vitamine (K, E, Q n
care ns partea terpenic asigur doar hidrofobicitatea necesar pentru ataarea de membrane, nu
i principiul activ).
3.6. Steridele (Izoprenoidele)
Steridele prezint ca trstur comun prezena unui nucleu format din patru structuri
ciclice, trei dintre ele avnd 6 atomi de carbon, iar una 5 dup cum se ilustreaz n Figura 9.
Molecula de colesterol, sterolul majoritar din esuturile animalelor i precursorul hormonilor
steroidici, este amfipatic: prezint un capt polar (gruparea hidroxil de la C-3) i unul nepolar
(un lan alchil la poziia
17).
CH3
HC CH3

Colesterolul
apare n membranele
CH2
C O
celulare
plasmatice
OH
CH2
HO
(cele care delimiteaz
HC CH3
CH3
celula)
i
ntr-o
cantitate
mai
mic
n
CH3
membranele organitelor
O
intracelulare. Este o
component
a
HO
cortizol
colesterolul
lipoproteinelor
din
snge i intr n
CH2OH
constituia
plcii
OH
OH
C O
OH
aterosclerotice
din
peretele
vaselor
sanguine.
Steroidele
deriv
din
colesterol
i
O
O
HO
cuprind cinci clase de
estradiol
testosteron
progesteron
hormoni care regleaz
Figura 9. Colesterolul, i civa compui derivai din acesta.
citirea
informaiei
genetice din nucleele celulelor: androgeni, estrogeni, progesteroni, hormonii glucocorticoizi i
mineralocorticoizi. Ei controleaz dezvoltarea caracterelor i a funciilor sexuale la animale
(testosteronul i estradiolul din clasa androgenilor, respectiv, estrogenilor), particip n controlul
ciclului menstrual i al graviditii (progesteronul), n controlul metabolismului glucid, lipidic i
proteic (cortizolul din clasa glucocorticoizilor) i n echilibrul unor ioni (Na+, K+, Cl-) la nivelul
esuturilor (mineralocorticoizii).
CH2

CH2OH

14

O scurt introducere n biochimie


Acizii biliari sunt derivai polari ai colesterolului care, n intestine, se comport ca
detergeni, cu rol n emulsionarea grsimilor; ei sunt produi eliberai n intestinul subire de la
ficat, unde sunt depozitai n vezica biliar (de unde i numele lor); este de notat c la ceva vreme
dup eliberare ei sunt parial resorbii i trimii napoi la bil, fiind astfel recirculai alturi de alte
componente (dar nu toate) ale secreiei biliare.
n general plantele, cu cteva excepii minore de compui, care nu i includ ns pe cei
menionai mai sus, nu sintetizeaz i nu folosesc steroli; n cazul bacteriilor, absena este chiar
total. Produsele animaliere sunt aadar singura surs posibil de colesterol n alimentaie.
3.7. Eicosanoidele
Eicosanoidele sunt derivate din acidul arahidonic, un acid gras nesaturat cu 20 de atomi
de carbon. Anexa ilustreaz cteva exemple de astfel de structuri. Ele acioneaz ca molecule de
semnalizare care transmit mesaje n imediata vecintate a celulelor care i-au generat, fiind
implicai n funciile de reproducere, n procesele inflamatorii, febr, durere, reglarea presiunii
sngelui, n secreia acidului gastric i altele.
Printre eicosanoide se numr prostaglandinele, importante n contracia musculaturii
netede, n procese ca respiraia (la nivelul bronhiilor), circulaia sngelui sau naterea (contracia
uterului). Unele produc febr, inflamaii i durere. Alte eicosanoide, tromboxanii, sunt produi de
celulele numite trombocite i au rol n coagularea sngelui. Medicamentele antiinflamatorii ca
ibuprofenul sau aspirina inhib enzima care catalizeaz formarea prostagandinelor i a
tromboxanilor, plecnd de la acidul arahidonic.
O a treia categorie de eicosanoide este reprezentat de leucotriene, molecule semnal
foarte puternice care induc contracia musculaturii cilor aeriene; supraproducia acestora poate
cauza ocul astmatic.
3.8. Membranele
Celulele au numeroase tipuri de membrane, care ndeplinesc multiple funcii. Membrana
plasmatic izoleaz citoplasma de mediul exterior, permind traficul bidirecionat i controlat al
moleculelor i servind astfel la acumularea de nutrieni sau la detoxificarea celulei. Ea are de
asemenea un rol important n locomoie, reproducere, semnalizare, interaciune cu alte molecule
sau alte celule din vecintate.
Aa cum se va vedea n capitolele urmtoare, multe procese celulare au loc chiar n
membrane fie n cele care delimiteaz celula fie n cele care delimiteaz organitele celulare:
fotosinteza, lanul transportor de electroni, fosforilarea oxidativ, contracia muscular,
transmiterea impulsului nervos, etc.
Aa cum se ilustreaz n Figura 10, membranele biologice sunt alctuite din lipide i
proteine (ambele categorii avnd i opiunea, uneori folosit, de a fi legate suplimentar i de
uniti glucidice). Avnd i pri hidrofile i hidrofobe, lipidele membranare sunt molecule
amfipatice, care pot stabili contacte cu mediul apos din exteriorul celulei, n acelai timp
oferindu-i membranei proprieti hidrofobe, acionnd ca o barier efectiv mpotriva moleculelor
polare sau ncrcate electric. Cele dou straturi lipidice din componena membranei sunt inute
strns ntr-o structur unitar prin intermediul legturilor necovalente dintre unitile de acid gras
(A se vedea i Anexele).

15

O scurt introducere n biochimie


Proteinele
pot
interaciona cu lipidele din
proteina periferica
glicolipida
membrane n diferite moduri.
Unele se asociaz membranei
datorit
interaciunilor
electrostatice pe care le realizeaz
cu suprafaa acesteia, altele sunt
ncorporate n matricea hidrofob
din miezul membranei, iar altele,
fosfolipida
proteina
sunt legate prin legturi chimice
periferica
proteine integral membranare
de lipide membranare, fiind astfel
Figura 10. Reprezentare schemtic a membranei celulare.
ancorate n straturile lipidice.
Lipozomii, structuri lipidice care se aseamn cu membrana intact a unei celule (dar
fr proteine), sunt structuri artificiale produse n laborator prin agitarea puternic a unei
suspensii de fosfolipide. Ei sunt folosii n laborator pentru studiul proprietilor membranelor,
dar i n produse farmaceutice i medicale unde ei faciliteaz transportul prin organism a
componentei active i livrarea acesteia direct n celule prin contopirea membranei lipozomului cu
membrana celulei.
Toate membranele biologice sunt asimetrice din punct de vedere structural i funcional.
Suprafaa intern i cea extern a unei membrane difer att n compoziie ct i n activitate
enzimatic, aceste diferene stnd la baza bunei funcionri a ntregii celule. Aceste diferene in
att de lipidele ct i de proteinele membranare.

16

O scurt introducere n biochimie

4. Proteinele i aminoacizii
Proteinele sunt substane polimerice, formate prin legarea chimic a unui numr mai
mare de aminoacizi. Ele acioneaz ca i catalizatori (numite atunci enzime), semnalizatori
(hormoni de exemplu insulina, care controleaz procesarea glucozei), n aprare (anticorpi,
toxine, antibiotice), n micare (fibre musculare), transport (hemoglobina din snge pentru
oxigen, albumina din snge pentru lipide, vitamine i altele), depozitare (de exemplu feritina
pentru fier, ori cazeina din lapte) structural (colagenul), i altele. Unele conin pe lng
aminoacizi i o component de alt natur, numit grupare prostetic, ce le ajut s-i
ndeplineasc funia - lipidele (lipoproteinele din snge, de tipul LDL sau HDL), glucide,
metaloproteine (feritina cu Fe, alcool dehidrogenaza cu Zn, calmodulina cu Ca), i altele.
4.1. Aminoacizii
20 de aminoacizi sunt des ntlnii n proteine, fiecare avnd aceeai structur general: un
atom de carbon la care sunt legate patru uniti diferite - o grupare carboxilic COO-, o grupare
amino NH3+, un atom de hidrogen i o grupare simbolizat R, care este diferit la fiecare
aminoacid. Acest R variaz n structur i mrime; structurile celor 20 de aminoacizi importani
sunt ilustrate n Anexa 4. Pentru denumirea aminoacizilor se utilizeaz prescurtri din trei litere
sau un simbol dintr-o liter (ex: histidina His sau H; triptofan Trp sau W). Ca i n cazul
glucidelor, aminoacizii conin atomi de carbon chirali; spre deosebire de glucide, care erau
preferate de organisme sub forma D, aminoacizii sunt folosii preferenial sub forma L.
Doi aminoacizi pot fi legai ntrei ei covalent printr-o legtur numit i legtur
peptidic, se formeaz astfel o dipeptid. n mod similar se pot forma tripeptide, tetrapeptide, etc
(sau n general, oligopeptide). Atunci cnd numrul de aminoacizi care se leag este mai mare
(n general, peste 50) se obin proteinele (ele pot conine pn la cteva zeci de mii de aminoacizi,
fiind numite i polipeptide); ele sunt ntotdeauna polimeri liniari i nu ramificai.
Pe lng rolul de uniti de baz n construcia proteinelor, i de cel de resurs de energie,
aminoacizii sunt importani i n sinteza altor clase de compui. Astfel, fenilalanina reprezint
substana de plecare n producerea hormonilor tiroidieni. Triptofanul are un rol important n
metabolism, fiind strns legat de formarea vitaminei B3 dar i a serotononei din sistemul nervos.
Tirozina are o nsemntate deosebit n organismele animale prin faptul c poate forma
adrenalina (=epinefrina).
Pe lng cei 20 de aminoacizi comuni, exist i ali aminoacizi care intr n componena
unor proteine, adesea obinui prin modificarea unora din cei 20. Spre exemplu, aminoacizi cu
exces de oxigen se gsesc n esutul conjunctiv, iar aminoacizi cu exces de atomi de carbon se
gsesc n muchi.
4.2. Structura proteinelor
Compoziia aminoacizilor n structura proteinelor variaz n mare msur. n majoritatea
proteinelor se gsesc cei 20 de aminoacizi comuni, prezeni de obicei, n cantiti similare;
excepii sunt His, Cys, Met, Tyr i Trp care se gsesc n cantiti mai mici. Unele proteine
specializate au o compoziie neobinuit: spre exemplu mai mult de jumatate din protein numit
colagen e constituit doar din doi aminoacizi - glicina i prolina. Structura primar (sau
secvena) este definit ca ordinea n care sunt aezai aminoacizii ntr-o protein. Aceast
structur, principial liniar, se mpacheteaz n spaiu n forme complexe, n care diversele pri
ale polimerului se ntlnesc i interacioneaz ntre ele prin legturi de hidrogen, puni ionice,
interaciuni hidrofobe (a se vedea Anexa 1), i, mai rar, legturi cu metale i legturi sulf-sulf.

17

O scurt introducere n biochimie


Anumite poriuni din structura proteinelor adopt motive structurale comune n majoritatea
proteinelor cele mai importante fiind poriunile de tip spiral numite helixuri i poriunile de
lanuri aproximativ liniare i aliniate ntre ele, numite foi beta; generic, astfel de elemente locale
de organizare se numesc structur secundar (prin contrast cu cea primar descris mai sus).
Structura teriar se refer la aranjamentul de ansamblu al catenelor proteice n spaiul
tridimensional. Structura cuaternar se refer la aranjamentul n spaiu al proteinelor care
conin dou sau mai multe lanuri. Cel mai cunoscut exemplu de protein cu structur cuaternar
este hemoglobina din snge
Proteinele se clasific n trei mari clase: fibrilare (insolubile n ap, organizate sub form
de fibre, aa cum arat i numele), membranare (inserate n membranele celulelor, i de aceea
insolubile n ap) i globulare (solubile n ap).
4.3. Enzime
Enzimele sunt proteine specializate n a cataliza reacii (a le mri viteza) n organismele
vii. Substana asupra creia acioneaz o enzim este denumit n general substrat.
Majoritatea enzimelor conin n denumirea lor numele substratului pe care l leag sau
cuvinte/fraze ce descriu activitatea lor, i sufixul aze. Spre exemplu lipaza acioneaz asupra
lipidelor, proteaza acioneaz asupra proteinelor, etc. Alte enzime au fost ns denumite nainte
de a se cunoate modalitatea prin care acioneaz i poart numele aciunii n care sunt implicate
(pepsina, cu numele provenind din cuvntul grecesc nsemnnd digestie, este implicat n
digestia alimentelor).
Partea din enzim care particip direct la procesul de cataliz se numete centru catalitic;
se folosete i denumirea mai general de centru activ (aplicabil i poriunilor care execut alte
operaiuni dect cataliza). Unele enzime folosesc la centrul activ componente chimice adiionale
(deci, nu formate din aminoacizi ca restul proteinei), numii cofactori (n funcie de modul de
legare, ei pot fi ntlnii i ca grupri prostetice sau coenzime) care pot fi molecule pe baz
de carbon (inclusiv cunoscutele vitamine) sau chiar metale (Fe, Mg, Mn, Zn).
Multe substane pot afecta procesele metabolice prin faptul c influeneaz activitatea
enzimelor, micornd activitatea lor (se comporta ca inhibitori). Inhibiia st la baza funcionrii
multor produse farmaceutice.
Precum s-a menionat, reaciile enzimelor sunt asistate i de grupri non-proteice, numite
cofactori. O parte mare din aceti cofactori sunt formai prin modificarea unor substane eseniale,
numite vitamine (termenul provine de la faptul c vitamina B1, prima descoperit, coninea azot,
fiind clasificat de aceea ca amin de la termenul de amin vital provenind apoi prin
contracie cuvntul vitamin). Vitaminele sunt substane care nu pot fi sintetizate de ctre
organism, ns prezena lor n corpul uman este esenial pentru funcionarea acestora. n funcie
de solubilitatea lor n ap, vitaminele se clasific n dou categorii: hidrosolubile i liposolubile.
Ele sunt discutate n mai mult detaliu n capitolul 7.

18

O scurt introducere n biochimie

5. Acizii nucleici
Acizii nucleici au un rol important n depozitarea i transmiterea informaiei genetice. Ei
se mpart n dou clase majore: ADN-ul, implicat n depozitarea informaiei genetice i ARN-ul,
prezent n general n diferite etape ale citirii informaiei i n biosinteza proteinelor.
Asemeni proteinelor, acizii nucleici sunt polimeri liniari. Ei sunt alctuii din uniti
numite nucleotide; o nucleotid este la rndul ei alctuit din trei componente mai simple: un acid
fosforic (de aici i numele de acizi nucleici cealalt parte a numelui derivnd din faptul c mare
majoritate din funciile lor se desfoar n nucleul celulei), o glucid, (fie riboza, de la care
deriv numele de acid ribonucleic, prescurtat ARN, fie deoxiriboza, de la care deriv numele acid
deoxiribonucleic, ADN), i un compus coninnd azot care este numit generic baz azotat.
Cinci astfel de baze azotate sunt ntlnite n acizii nucleici ai tuturor organismelor vii; adenina
(A), guanina (G), citozina (C) i timina (T) i uracilul (U). A, G, C, T sunt prezente n ADN, iar
A, G, C, U sunt prezente n ARN. Structurile ADN i ARN sunt ilustrate n Figura 11.
O

timina

H3C

uracil
NH

NH
N

O NH2

citozina

HO

O
H
O

HO

N
H

O
H

OH
O

H
O

H
OH

guanina

H
O

H
OH

H
OH

O
N
N

NH
N

guanina

NH2

OH

O-

O-

adenina

O
H

NH2
N

NH2

O
H

O-

O
NH

O
N

O-

O
H

O-

adenina

O
P

NH2

citozina

O
H

O NH2

O-

H
OH
O-

P
O

ARN

ADN

Figura 11. Un fragment de patru nucleotide din alctuirea unei catene de acid nucleic.
Structura care se obine prin eliminarea acidului fosforic din nucleotid se numete
nucleozid; astfel, generic, unei nucleotide i se poate spune i nucleozid monofosfat (de exemplu,
adenozin monofosfat, prescurtat AMP); uneori pe nucleotidele libere se poate ataa la gruparea
fosfat o a doua, obinndu-se nucleozid difosfai (ADP, GDP, etc); cu nc o grupare fosfat se
obin nucleozid trifosfaii, dintre care ATP (adenozin trifosfat) are un rol remarcabil. Anume, din
cauz c legtura chimic dintre ultimele dou grupri fosfat din ATP se produce cu aport
energetic, i din cauz c la ruperea acelei legturi energia nmagazinat iniial poate fi eliberat,
ATP funcioneaz ca depozitar universal de energie n toate organismele pe care le cunoatem; se
mai folosete i expresia moneda universal de energie a celulelor vii. i alte nucleotide sau
nucleozide libere au funcii n afara participrii la structura ADN sau ARN; spre exemplu,
19

O scurt introducere n biochimie


adenozina funcioneaz ca hormon care controleaz printre altele dilatarea vaselor de snge,
contracia muscular, transmiterea impulusului nervos sau metabolismul grsimilor; cafeina i
compusul nrudit teobromina, care dau efectele stimulative ale cafelei i ceaiului. i datoreaz
activitatea faptului ca ntmpltor ao o structur similar cu a adenozinei).
5.1. ADN
ADN se gsete n general n
N
nucleul
celulei,
ntr-o
form
N
mpachetat alturi de proteine speciale,
N
O
O
O
N
sub forma unor formaiuni numite
cromozomi. Ordinea n care se aeaz
O P O P O P O
O
nucleotidele
n
structura
ADN
H
H
O
O
O
alctuiete un cod care arat compoziia
H
H
OH
OH
fiecrei proteine din celula respectiv
(din ce aminoacizi este ea format i n
Figura 12. Structura ATP. Este subliniat n gri
ce ordine sunt acetia aezai) toate
legtura n care este depozitat energia n
nscrise, pe rnd, n aceeai molecul de
funcionarea ATP ca moned universal de energie.
ADN. Acesta este rolul ADN unul
singur, spre deosebire de alte clase de
molecule (proteine, glucide, lipide) care au roluri mult mai diverse. Cum o celul tipic va
conine mii de proteine, ADN poate deveni destul de lung: spre exemplu, cel uman are cca 2
metri i este nevoie de operaii extrem de complexe ca acesta s poat fi mpachetat ntr-un
nucleu ce are un diamteru de cca un milion mai mic dect lungimea ADN. Este de menionat c,
n special la organismele mai complexe, ADN conine nu doar lista compoziiei tuturor
proteinelor pe care organismul respectiv le-ar putea sintetiza, ci, intercalate printre informaiile
referitoare la proteine, el mai conine i poriuni care funcioneaz drept comutatoare: aici se
pot lega molecule din exterior (de obicei tot proteine, produse de aceeai celul), care s
controleze n ce msur informaia referitoare la o anume protein trebuie citit astfel nct, n
condiii normale, fiecare protein este produs exact n cantitatea (diferit de la protein la
protein) n care ea este necesar; exist inclusiv proteine care este posibil s nu fie produse deloc
pe parcursul vieii unei anume celule, pentru ca nu s-au ndeplinit condiiile de mediu sau interne
n care s fie nevoie de ea. Pentru informaia depozitat n ADN se folosete i termenul de
informaie genetic. Modul (relativ simplu, dup cum se va vedea), prin care secvena de
nucleotide din ADN (A, T, C, G) este tradus n secvene de aminoacizi din proteine poart
numele de cod genetic. Remarcm faptul c aceast suma de informaii despre producerea
proteinelor este toat informaia de care are nevoie celula pentru a supravieui i a se multiplica;
nu gsim aici informaii directe despre alte molecule (glucide, lipide, vitamine): proteinele
produse pe baza ADN-ului se vor ocupa de prelucrarea tuturor celorlalte substane.
Dup cum s-a artat, ADN este esenial pentru funcionarea celulei. De aceea, nu
surprinztor, n mod obinuit molecula de ADN este prezent n celula vie sub form de dou
copii. Folosim ghilimelele pentru c cele dou lanuri de ADN nu sunt identice chimic unul cu
cellalt, dar conin totui aceeai informaie. Anume, cele dou catene profit de o proprietate a
bazelor azotate A, T, C i G de a se lega una de alta prin legturi de hidrogen (a se vedea i
Anexa) dar foarte selective: anume, A se leag doar de T, iar G doar de C. Cele dou catene de
ADN din nucleu se aliniaz una lng cealalt astfel nct ntotdeauna acolo unde o caten
conine A, cea de alturi s conin T, iar n dreptul unui G cealalt caten s conin un C.
NH2

20

O scurt introducere n biochimie


Prezena a dou catene de
ADN coninnd aceeai informaie n
CH
O
N
nucleul celulei prezint dou avantaje.
NH
Dintr-un punct de vedere, exist n
N
HN
A T
N
acest fel o copie de rezerv n cazul
G C
N
N
C G
n care reacii chimice ar afecta
O
accidental una dintre copii: e posibil
timina
adenina
astfel procesul de reparare, care are loc
continuu n celulele vii, a leziunilor
ADN; n fapt, pe parcursul unei zile
fiecare dintre celulele noastre sufer
zeci de mii de astfel de accidente,
H N
potenial letale, care sunt fiecare
N
O
corectate fr ca noi s percepem acest
N
N
N
NH
lucru n vreun fel. Pe de alt parte,
N
atunci cnd celula urmeaz s se divid
O
NH
n alte dou celule (forma de
multimplicare/reproducere a celulelor),
guanina
citozina
fiecare dintre cele doua celule-fiic va
primi cte o copie din ADN-ul celuleimam. Odat separate, fiecare caten de
Figura 13. Organizarea dublu catenar a ADN-ului.
ADN va servi ca model pentru
Remarcm faptul c cele dou catene, legate ntre
producerea unei noi copii.
ele prin legturi de hidrogen A---T i G---C, se i
Se vede aici c meninerea
rsucesc una n jurul celeilalte, astfel nct rezult o
integritii
ADN este esenial pentru
structur spiralat (un dublu helix).
supravieuirea unui organism i implicit
a speciei din care face el parte. Ca orice alt proces n natur, operaiile de copiere a ADN nu se
desfoar ntotdeauna fr greeli. Situaiile n care ADN-ul nou produs difer prin cel puin o
nucleotid de cel original, sunt numite mutaii genetice, iar indivizii respectivi sunt numii
mutani. Mutaiile genetice stau la baza evoluiei: acolo unde aceste accidente duc la indivizi
mai de succes, ele sunt perpetuate n descendenii acelor indivizi; acolo unde ele duc la
probleme de funcionare a organismului, ele tind s dipar treptat odat cu indivizii care le
produc. Tot mutaiile sunt cele reponsabile de unele boli (cancerul fiind unul dintre cele mai
cunoscute exemple), dar i, potrivit unor teorii, de procesul de mbtrnire. Multe dintre
substanele produse n mod accidental sau nu de activitatea uman pot afecta ADN-ul (i sunt
numite de aceea mutagene). O important surs a alterrii mutagenetice este stresul oxidativ
generat de speciile reactive provenite din molecula de oxigen (apa oxigenat, superoxidul i
altele) i de radicalii liberi (substane pe baz de carbon care, spre deosebire de cele obinuite, au
n structura lor un numr impar de electroni, ceea ce face ca n timp ce majoritatea electronilor lor
rmn cuplai n legturi chimice, unul singur dintre ei s rmn fr partener ceea ce l face s
reacioneze extem de uor cu alte molecule, deci greu de controlat i periculoi). Astfel de specii
reactive sunt prezente spre exemplu n fumul de igar. Un alt exemplu de ageni mutageni sunt
radiaiile de energie mai mare dect cea vizibil: cele ultraviolete (UV mpotriva crora se
folosesc spre exemplu pentru protecie cremele solare) dar i cele mult mai puternice (cum sunt
cele de tip x, produse de reaciile rare n care sunt alterate nucleele atomilor cazul centralelor
nucleare, bombelor atomice, dar i al aparatelor extrem de utile n medicin, de radiologie).
3

21

O scurt introducere n biochimie


n prezent biochimitii au dobndit cunotinele necesare pentru a manipula ADN-ul n
moduri multiple. El poate fi copiat n orice cantiti, fie n ntregime fie pe poriuni bine
determinate. Se pot introduce modificri selective n ADN, mergnd pn la situaia n care
poriuni de ADN dintr-un organism pot fi introduse n altul (care devine astfel modificat
genetic). Utilitatea acestei proceduri este inestimabil spre exemplu n medicin: putem produce
n cantiti nelimitate proteine umane necesare ca medicamente, cum este insulina, modificnd
genetic microbi pentru a o sintetiza; putem de asemenea aduce ntr-un bolnav poriuni de acid
nucleic ce nva celulele bolnave s lupte mpotriva bolii; nu n ultimul rnd, putem copia
selectiv poriuni din ADN-ul unor organisme sau virui periculoi, pentru a nelege mai bine
cum funcioneaz i a gsi astfel modaliti noi de a lupta mpotriva bolilor sau infeciilor.
5.2. ARN
n contrast cu ADN-ul, ARN-ul nu poate forma structuri de dublu helix dect pe poriuni
scurte (din cauza unui atom de oxigen pe care nucleotidele sale l au n plus fa de ADN).
Probabil din aceast cauz, ARN poate adopta o variatate mult mai mare de structuri spaiale i
de funcii. Se disting mai multe tipuri de ARN: ARNr (ribozomal, parte a componentelor
celulare care produc proteine, numite ribozomi), ARNt (de transport, care transport
aminoacizi ctre ribozomi), ARNm (mesager, care este o copie a unei poriuni de ADN, i care
este folosit de ribozomi pentru a citi informaia provenit de la ADN i a produce astfel
proteine), i altele mai puin cunoscute (unii chiar capabili s catalizeze reacii). Procesul prin
care se sintetizeaz proteine de ctre ribozomi se numete n biochimie translaie (un sinonim
pentru traducere, pentru c se traduce informaia scris sub form de nucleotide n ADN, n
informaie sub form de aminoacizi n protein), iar sinteza ARNm se numete transcripie (un
sinonim pentru transcriere, pentru c se transcrie o parte din informaia de pe ADN, de obicei,
cea referitoare la una sau cteva proteine), pe catena de ARNm. Anexele detaliaz aceste procese.
Din cauza versatilitii ARN comparativ cu ADN, unii cercettori presupun c
organismele promordiale ar fi nvat s foloseasc prima dat ARN, ADN aprnd doar ceva mai
trziu; n fapt, exist i azi virui, dar nu i organisme vii, care i stocheaz informaia genetic
pe ARN n loc de ADN.
Datorit faptului c sinteza proteinelor este o funcie central n fiziologia celular, ea
reprezint o int principal a multor antibiotice i toxine, care s blocheze funcionarea
ribozomului. Exemple sunt tetraciclina, cloramfenicolul sau streptomicina.
Etapa ultim a sintezei proteice const n mpachetarea i procesarea lanului proteic n
forma activ biologic. n timpul sintezei i dup, n mod progresiv ea i va dobndi forma util
pentru organism (form determinat de fore i componente discutate n capitolul 4).

22

O scurt introducere n biochimie

6. Metabolismul
Metabolismul servete dou scopuri principale: generarea energiei necesare tuturor
proceselor vitale din organism, i sinteza de biomolecule. El const n sute de reacii realizate de
enzime, organizate n diferite ci specifice. Cile metabolice se pot mpri n dou clase majore:
una catabolic, n care molecule mai complexe (carbohidraii, proteinele, grsimile) sunt
transformate, prin oxidare n produi mult mai simpli i mici (acid lactic, CO2, NH3, etc). Din
energia obinut, o parte este conservat de ctre ATP i de ctre molecule specializate n
transport de electroni (NADH, NADPH, FAD a se vedea i capitolul 7); restul se
transform n cldur;
una anabolic, sau biosintetic, n care precursori, sub forma moleculelor simple i mici,
servesc la construirea moleculelor complexe (lipide, proteine, polizaharide i acizi nucleici).
Aceste procese necesit energie, furnizat de ATP, NADH, NADPH i FADH2.
Dup cum s-a subliniat i n capitolele precedente, o parte din energia provenit de la
alimente i energia luminoas este transformat de ctre celul ntr-o molecul uor accesibil,
adenozin-trifosfat (ATP). Energia este apoi eliberat din ATP prin eliminarea unei legaturi fosfatfosfat (cum s-a indicat n Figura 12). ATP-ul este un transportor bun al gruprii fosfat, servind ca
principalul donor rapid de energie din sistemele biologice. Un organism uman aflat n repaus
consum aproximativ 40 de kg de ATP n 24 de ore. Pentru dou ore de alergare, sunt utilizate 60
kg ATP. A nu se nelege c organismul are un schimb cu mediul de 40 sau 60 de kg: ATP-ul se
poate compara cu un acumulator ncrcat cu energie, care, prin consumarea energiei, se
transform n ADP (adenozin difosfat - care este echivalentul unui acumulator descrcat);
acumulatorul exist n continuare n organism doar c necesit rencrcat. Deci, este vital s
existe mecanisme de regenerare a acestei molecule. Generarea ATP-ului este unul dintre rolurile
importante ale catabolismului. Carbonul din moleculele din alimentaie (glucide, lipide, proteine)
este oxidat la CO2, iar energia eliberat este folosit pentru regenerarea ATP-ului din ADP. Unii
compui ai sistemelor biologice au un potenial de transfer al gruprii fosfat mai mare dect al
ATP-ului. Din categoria acestora face parte fosfoenolpiruvatul (PEP) sau i creatininfosfatul;
aceste molecule pot ceda gruparea fosfat ctre ADP, cu formare de ATP. n muchi creatinina are
un rol important tocmai de a servi ca rezervor de grupri fosfat pentru regenerarea rapid a ATP,
atunci cnd el este consumat n ritm constant.

1)

2)

3)

6.1. Catabolismul
n generarea energiei provenite din surse alimentare, se descriu trei faze.
n prima faz, moleculele mari sunt transformate n uniti mici. Proteinele sunt hidrolizate
la cei 20 de aminoacizi, polizaharidele la zaharuri simple i glucoz, iar grsimile, la glicerol
i acizi grai.
n faza a doua, moleculele mici obinute n prima faz sunt degradate la uniti simple (de
obicei coninnd cte doi atomi de carbon), care joac un rol important n metabolism. n
aceast faz se produce o cantitate de energie mult mai mic dect cea obinut n cea de-a
treia faz. Principalul lan de reacii din aceast etap este glicoliza.
n cea de-a treia faz, ATP-ul este produs ca urmare a unei oxidri complete a unitilor
simple produse la punctul 2). Un element cheie aici este ciclul acizilor tricarboxilici (ciclul
Krebs sau ciclul acidului citric) Aici carbonul provenind din hran este finalmente
transformat n CO2; deoarece aceast oxidare nseamn i c s-au extras 4 electroni per atom
de carbon, acei electroni vor fi mai apoi utilizai pentru producerea ATP-ului.
23

O scurt introducere n biochimie

6.1.1. Glicoliza
Prin glicoliz, o molecul de glucoz cu ase atomi de carbon este scindat, n urma mai
multor reacii, n dou molecule de acidul piruvic (a cte trei atomi de carbon fiecare). n primul
pas, celula investete energie n glucoz, consumnd ATP pentru a plasa dou uniti de fosfat pe
glucoz. Astfel activat, ea devine mult mai reactiv i poate fi desompus mai uor, n civa
pai care duc la eliberarea unei cantiti mai mari de ATP dect cea investit, la eliberarea de
NADH (deci, tot energie provenit din glucoz), i, n cele din urm, de acid piruvic (AP). n
condiii normale, AP este apoi supus unei operaii intermediare prin care pierde un atom de
carbon sub form de CO2, dup care este prelucrat n ciclul lui Krebs pn la CO2 i ap.
Cele mai multe esuturi au nevoie de glucoz pentru a funciona. Pentru creier, aceast
nevoie este esenial. Modalitatea major de a metaboliza glucoza este glicoliza, proces care se
poate desfura n citosol, att n condiii aerobe, ct i anaerobe. Oxidarea glucozei dincolo de
piruvat necesit n om att oxigen ct i mitocondrii (organite celulare n care se extrage
majoritatea energiei din nutrieni, numite de aceea i uzinele energetice ale celulei). Aproape
toate celulele noastre conin mitocondrii; o excepie sunt cele roii din snge (eritrocitele).
Glicoliza este calea principal de a metaboliza att glucoza ct i fructoza, galactoza sau
ali carbohidrai provenii din diet. Capacitatea glicolizei de a produce ATP chiar i n absena
oxigenului are o importan deosebit, permind muchilor scheletici s funcioneze la un
randament nalt chiar atunci cnd aportul de oxigen este insuficient, asigurnd astfel
supravieuirea esutului n perioadele anoxice. Pe de alt parte, muchiul cardiac, fiind adaptat
pentru performane aerobice, are o activitate glicolitic i o capacitate de supravieuire relativ
mic n condiii de privare de oxigen. esuturile implicate n activiti intense i rapide (muchiul
pectoral la psri) sunt mai deschise la culoare, n timp ce esuturile implicate n activiti mai
uoare, dar de durat (muchiul piciorului) sunt nchise la culoare (muchiul rou). Culoarea
crnii nchise provine de la fierul prezent n proteine numite citocromi i implicate n faza final a
catabolismului glucozei, dup ciclul Krebs. n aceste esuturi, metabolismul glucozei este
predominant aerobic, ea fiind transformat complet n CO2 i ap. n contrast, muchiul deschis la
culoare conine puine mitocondrii, glucoza fiind metabolizat doar prin glicoliz, deci incomplet,
cu randament mai mic ns mai rapid. Compoziia muchilor atleilor reflect tipul de sport pe
care acetia l practic. Muchii piciorului unui adult conin cam jumtate din fiecare tip descris
mai sus. Un sprinter are o cantitate mai ridicat de muchi albi , n timp ce un maratonist are n
jur de 90% muchi rou.
Medical, deficienele n enzime implicate n glicoliz se reflect adesea n hemoliz
(celulele roii se distrug prea uor) i oboseala muscular. Pe de alt parte viteza ridicat de
funcionare a glicolizei n celule canceroase depeste mult capacitatea ciclului Krebs de a
metaboliza produsul acesteia, acidul piruvic (AP). Ca urmare, pe baza energiei acumulate n
exces n celul AP este transformat n acid lactic i contribuie astfel la creterea aciditii
mediului respectiv. Contracia muchilor n condiii anaerobe de asemenea produce acid lactic, a
crui acumulare d senzaia de febr muscular. De asemenea, aceast reacie poate fi produs de
unele bacterii, n procese ca fermentarea laptelui sau iaurtului. Nu n ultimul rnd, tot n condiii
anaerobe AP este transformat de unele microorganisme n alcool etilic (fermentaia alcoolic).
6.1.2. Ciclul Krebs (ciclul acizilor tricarboxilici, ciclul acidului citric)
Ciclul Krebs reprezint un punct central n metabolismul aerobic celular al oricrei
molecule care poate fi transformat ntr-o grupare din doi atomi de carbon (acetil) fie ea

24

O scurt introducere n biochimie


lipid, glucid, protein. El nu reprezint doar punctul final al oxidrii aerobice a carbohidrailor,
lipidelor i proteinelor, ci este o surs important de precursori ai aminoacizilor, acizilor nucleici,
colesterolului i altele, avnd un rol important n gluconeogenez (sinteza de glucoz) i
lipogenez (sinteza de lipide). Dei aceste procese se desfoar n multe tipuri de esuturi,
intensitatea maxim a acestora are loc la nivelul ficatului. Enzimele ciclului acidului citric sunt
localizate n mitocondrii, fie libere fie ataate de membrana intern (mitocondria este delimitat
de dou membrane proprii, una extern i una intern, aa cum se vede n Figura 14).
Ciclul Krebs const ntr-o serie de reacii de oxidare, care rezult n transformarea celor
doi atomi de carbon provenii din nutrieni n dou molecule de CO2. n acest proces se produce
i o cantitate relativ mic de ATP; majoritatea energiei degajate prin oxidare n ciclul lui Krebs
este stocat pe moleculele NAD i FAD. Aceti electroni sunt apoi transferai ctre pasul urmtor
de prelucrare: lanul transportor de electroni.
6.1.3. Lanul transportor de electroni i fosforilarea oxidativ
n urma glicolizei, a ciclului Krebs i a oxidrii acizilor grai, rezult electroni bogai n
energie, stocai pe molecule de NAD i FAD. Aceti electroni sunt apoi cedai ctre o serie de
proteine localizate n membrana intern mitocondrial i numit lanul transportor de electroni
(vezi Figura 14), care pe msur ce i transport le extrag energia i o folosesc pentru pomparea
protonilor afar din matrixul mitocondrial i ctre spaiul intermembranar. Distribuia inegal de
protoni astfel generat este o form de energie, care este folosit pentru sinteza ATP. Mai exact,
ATP-ul este sintetizat atunci cnd protonii ptrund din spaiul intermembranar napoi n matrix,
printr-o enzim numit ATP-az; aceast form de sintez a ATP se numete i oxidativ, i ea
este responsabil pentru peste 90% din ATP-ul sintetizat n organismele noastre.
Electronii nii, odat ajuni la finalul traseului din lanul transportor de electroni, au
deja o energie mult redus dup ce ea a fost cheltuit pentru acumularea de protoni n spaiul
intermembranar. Se pune prin urmare problema eliminrii lor din sistem prin plasarea pe o
molecul co de gunoi. Aceast molecul trebuie s ndeplineasc dou condiii: s poat
accepta electroni fr a genera produi toxici, i s se gseasc n abunden. n cazul
organismelor aerobe, inclusiv a oamenilor, aceast molecul este oxigenul molecular, O2:
acceptnd electroni, el devine ap, H2O. Exist ns i organisme (n special bacterii) care
folosesc alte molecule n locul oxigenului ca de exemplu azotat, sulfat, sau chiar sruri
anorganice insolubile (piatr). Seria de procese descrise aici este denumit generic respiraie.
Transformarea O2 n H2O la nivelul ultimei proteine din lanul transportor de electroni
este un proces foarte sensibil; proteina respectiv, numit enzima citocrom oxidaza i coninnd
fier, este blocat foarte eficient de otrvuri ca monoxidul de carbon sau cianura, care astfel
blocheaz respiraia inhib citocrom oxidaza i, prin urmare, opresc total respiraia.
n total, ciclul lui Krebs, lanul transportor de elctroni i ATPaza genereaz 38
ATP/glucoz consumat, spre deosebire de doar 2 ATP obinui n etapa anterioar, i anume
glicoliza. Se pot astfel constata, cu uurin, avantajul enorm al metabolismului aerobic,
desfurat n medii bine oxigenate.

25

O scurt introducere n biochimie

Figura 14. Organizarea general a unei mitocondrii, i detalii despre lanul transportor de
electroni.
6.1.4. Calea pentozo-fosfailor i alte ci ale metabolizrii hexozelor
O cale alternativ de metabolizare a glucozei este calea pentozo-fosfailor. Ea nu
genereaz ATP, dar prezint alte dou funcii majore: este unicul mod de generare al NADPH,
necesar pentru sinteza acizilor grai i a sterolilor, i servete la sinteza acizilor nucleici. Calea
pentozofosfailor este foarte activ n celulele roii ale mamiferelor. Aici, NADPH produs
servete ca surs de electroni pentru o enzim care lupt mpotriva stresului oxidativ (definit n
capitolele anterioare), ca i pentru pstrarea fierului din hemoglobin n forma Fe2+, singura
capabil s transporte O2 (altfel fierul tinde s se oxideze, i devine incapabil s transporte
oxigen).
Catabolismul altor carbohidrai implic transformarea lor n intermediari din glicoliz.
Prin diet, organismul primete o cantitate mare de dizaharide ca lactoza, manoza i zaharoz.
Primul pas n utilizarea acestora este reprezentat de conversia acestora n monozaharide;
deficiena n enzime necesare acestor ci poate cauza o varietate de probleme intestinale (ca de
exemplu intolerana la lactoz datorit lipsei lactazei).
6.1.5. Catabolismul acizilor grai
Principalele rezerve energetice ale organismelor animale sunt reprezentate de grsimile
insolubile, depozitate n esuturile adipoase (triacilglicerolii). Degradarea i sinteza acizilor grai
se desfoar la nivelul esuturilor adipoase n multe organe, dar intensitatea maxim este atins

26

O scurt introducere n biochimie


la nivelul ficatului. Separarea spaial a celor dou procese (biosinteza lipidelor n citosol, iar
catabolismul n mitocondrie) permite un control individual, ca rspuns al necesitii esutului.
Pentru obinerea energiei, lipidele trebuie s fie, mai nti, mobilizate din depozitele
esuturilor adipoase. n acest proces, triacilglicerolii sunt degradai la acizi grai i glicerol, n
procesul de lipoliz, catalizat enzimatic de ctre lipaze, enzime aflate sub control hormonal
(adrenalina, glucagonul, insulina, etc). Mai apoi, acizii grai sunt tiai n buci de cte doi atomi
de carbon, care sunt apoi supuse ciclului lui Krebs sau pot s fie transformate, la nivelul ficatului,
n corpi cetonici (aceton, acetoacetat, 3-hidroxibutirat) care servesc ca surse de energie
majoritar pentru unele esuturi, n special n condiii de deficit de glucoz.
6.1.6. Catabolismul proteinelor
n fiecare zi, 1-2% din totalul proteinelor corpului se renoiesc, n special cele din
esuturile musculare. Degradarea proteinelor are loc cu o frecven mult mai mare n esuturile n
care se produc rearanjri structurale permanente (ou, esutul uterin n timpul graviditii,
musculatura scheletului n timpul nfometrii, etc). Dintre aminoacizii eliberai n astfel de
degradri, aproximativ 75% sunt reutilizai. Excesul de aminoacizi, provenit fie din degradarea
proteinelor, fie dintr-o diet bogat n proteine, dac nu este utilizat n biosinteza unor noi
proteine, este degradat rapid. Azotul provenit din acest exces este transformat n uree, iar
scheletul carbonic este utilizat pentru sinteza carbohidrailor i a lipidelor sau pentru producerea
ATP-ului. De asemenea, n timpul nfometrii sau n cazul diabetului zaharat, cnd carbohidraii
nu sunt disponibili sau sunt utilizai ntr-un mod necorespunztor, ca surse energetice sunt
folosite proteinele celulare.
Degradarea proteinelor la aminoacizi este realizat cu ajutorul unor enzime specifice, de
tipul proteazelor i peptidazelor. Acestea nu se gsesc numai n tractul digestiv (pepsina, tripsina,
chimiotripsina), ci sunt prezente i n interiorul celulei.
6.1.7. Degradarea aminoacizilor
Degradarea aminoacizilor are loc, cu precdere, n ficat. Primul pas n catabolismul celor
mai muli aminoacizi const n ndeprtarea atomilor de azot. Un rol important n acest proces l
are glutamatul, molecula care preia azotul de pe un aminoacid. Scheletul carbonic astfel rezultat
va suferi modificri ulterioare care vor duce la obinerea unor precursori ai glucozei i
intermediari ai acidului citric.
NH3 (amoniacul), forma sub care este eliminat azotul din aminoacizi, este relativ toxic,
provocnd la concentraii ridicate afeciuni, n special, ale creierului. Din acest motiv, organismul
prezint mecanisme prin care amoniacul este inactivat i excretat. Astfel, amoniacul este
transformat n uree, n ciclul uric, care se desfoar numai la nivelul ficatului, cu debut n
mitocondrie i finalizare n citosol.
6.2. Anabolismul
6.2.1. Gluconeogeneza
Unele esuturi ale mamiferelor (esutul nervos, esutul embrionar, eritrocitele, medulara
renal, etc) depind n ntregime de glucoza din snge pentru metabolismul energetic. Numai
creierul are nevoie, ntr-o zi, de mai mult de jumtate din glucoza depozitat sub forma
glicogenului, n muchi i ficat. Mobilizarea glucozei din aceste rezerve nu este ntotdeauna
suficient; n perioada dintre mese, dup un post mai lung sau un efort intens, rezerva de glicogen
se epuizeaz i este activat o alt cale de generare a glucozei, din precursori nonzaharici. Ficatul

27

O scurt introducere n biochimie


este organul principal responsabil pentru gluconeogenez, dar aceasta se poate produce i la
nivelul rinichilor. Principalii precursori ai glucozei sunt aminoacizii, provenii din proteinele
musculare, lactatul, care se formeaz n eritrocite i n muchi din piruvat n absena oxigenului,
iar un al treilea precursor important este glicerolul, produs ca urmare a degradrii grsimilor.
Multe din reaciile catalizate n gluconeogenez sunt catalizate de aceleai enzime care
sunt prezente n glicoliz. Altele sunt specifice gluconeogenezei i sunt sintetizate sub aciunea
unor hormoni (cortizol i glucagon), atunci cnd este nevoie. Spre deosebire de glicoliz, care se
produce numai n citosol, gluconeogeneza poate avea loc i n mitocondrie i n reticulul
endoplasmatic. Pentru realizarea acestui proces este nevoie de consum de ATP.
Intensitatea glicolizei este determinat de concentraia glucozei, iar intensitatea
gluconeogenezei este determinat de concentraia lactatului i a altor prescursori ai glucozei. De
asemenea, o cantitate ridicat de AMP (adenozin monofosfat) indic o ncrctur energetic
mic n celul i declaneaz semnalul pentru generarea ATP (adenozin trifosfat); n schimb, o
concentraie mare de ATP indic o ncrctur energetic ridicat i o abunden de intermediari
biosintetici condiii n care glicoliza este oprit iar gluconeogeneza este stimulat.
Aminoacidul alanin, la fel ca lactatul, este precursorul majoritar al glucozei i se
formeaz din acid piruvic, la nivelul muchilor. Dup un efort fizic intens, n musculatura
scheletic se acumuleaz o cantitate mare de acid piruvic, astfel nct ciclul Krebs nu face fa
oxidrii ntregii cantiti. n aceste condiii, celula reduce piruvatul la lactat. Acesta este
transportat prin intermediul sngelui la ficat, unde va fi transformat ulterior n piruvat, acesta din
urm fiind convertit n glucoz, pe calea gluconeogenetic. Acest parcurs al acidului lactic-acid
piruvic-glucoz-acid piruvic-acid lactic poart denumirea de ciclu Cori.
Activitatea acestor sisteme de reacii este supus i controlului hormonal. Spre exemplu,
nivelul insulinei crete imediat dup mncare i stimuleaz glicoliza, n timp ce glucagonul crete
n timpul nfometrii i controleaz producerea enzimelor gluconeogenezei.
6.2.2. Biosinteza lipidelor
Biosinteza acizilor grai are loc n citoplasm n special la nivelul ficatului i necesit
aport de electroni adui de transportorul NADPH (generai n calea pentozofosfailor). Acizii
grai sunt apoi ataai de glicerol pentru a forma acilgliceroli. Pentru a ajunge la esuturile
periferice, grsimile sunt mpachetate de ctre ficat n complexe alturi de proteine (lipoproteice,
ca de exemplu VLDL very low density lipoprotein, LDL low-density lipoprotein), care sunt
eliberate n snge.
Lipogeneza este reglat de o gam larg de metabolii i hormoni, care includ insulina,
glucagonul i adrenalina.
Colesterolul este un component important al membranei celulare i, totodat, prescursorul
hormonilor steroizi (glucocorticoizi, mineralocorticoizi i hormoni sexuali) i ai acizilor biliari.
Organismul animal obine colesterol din diet dar n acelai timp i-l sintetizeaz i singur,
pornind de la aceleai uniti simple de doi atomi de carbon (acetil) ca i n sinteza glucozei,
acizilor grai, etc.
6.2.3. Sinteza aminoacizilor
Aminoacizii sunt crmizile din care sunt alctuie proteinele, fiind, totodat, surse
importante de azot pentru multe alte molecule, incluznd nucleotide, neurotransmitori sau
grupri prostetice, ca porfirinele. Scheletul carbonic al aminoacizilor provine din glicoliz, calea
pentozofosfailor sau ciclul acizilor carboxilici, iar azotul, sub forma amoniacului, provine dintr-

28

O scurt introducere n biochimie


una din cele mai remarcabile reacii din biochimie: fixarea azotului din atmosfer de ctre
microorganisme. nainte de a intra n circuitul natural al azotului, N2 atmosferic trebuie s fie
transformat ntr-o form mai reactiv, NH3. Problema aceasta este rezolvat de ctre nitrogenaze,
enzime prezente ntr-o gam foarte redus de bacterii i alge verzi, simbiotice cu unele plante
(leguminoase). Urmtorul pas al asimilrii azotului n biomolecule este reprezentat de intrarea
azotului n structura aminoacizilor prin intermediul a dou molecule cu rol cheie: gluatamatul i
glutamina. Gruprile amino ale tuturor aminoacizilor provin din gruparea amino a glutamatului,
prin transferul acesteia dup caz.
n funcie de calea biosintetic, aminoacizii se mpart n cinci familii, membrii fiecrei
familii provenind de la un precursor comun. Spre deosebire de plante i microorganisme,
mamiferele i pot sintetiza doar jumtate din cei 20 de aminoacizi. Restul, numii aminoacizi
eseniali (aminoacizii aromatici cu excepia tirozinei, leucina, valina, izoleucina, treonina, lizina
i metionina) trebuie s provin din diet. Valoarea nutritiv a proteinelor depinde mult de
coninutul n aminoacizi eseniali. De exemplu, proteinele vegetale provenite din cereale conin
cantiti reduse de lizin i metionin, spre deosebire de proteinele animaliere care conin o
cantitate echilibrat din fiecare aminoacid. Totui, sunt unele plante (leguminoasele) care pot
produce valori ridicate de proteine (soia).
6.2.4. Fotosinteza
Marea majoritate a energiei consumat de organismele vii provine de la soare i este
captat prin procesul fotosintezei. n acest mod, energia luminoas este folosit pentru a produce
substane organice din CO2 i ap, conform ecuaiei de mai jos:
CO2 + H2O (CH2O) + O2
Acest proprietate a organismelor autotrofe (plante, alge, unele bacterii) este exploatat
de ctre organismele heterotofe (animalele), care sunt dependente de substanele organice
nutritive furnizate prin diet. De asemenea, oxigenul atmosferic, care este vital pentru
supravieuirea organismelor superioare, deriv din fotosintez.
Mecanismul fotosintezei este complex i presupune interaciunea a numeroase proteine
i a unor molecule mai mici. La plantele verzi, fotosinteza se desfoar n membranele
cloroplastelor, organite celulare extrem de similare mitocondriilor. Energia luminoas captat de
molecule pigment (clorofile, carotenoide) este folosit iniial pentru a mbogi n energie
electronii acestor pigmeni; acei electroni vor fi folosii apoi pentru a produce NADPH i ATP,
dup mecanisme extrem de similare celor discutate anterior n mitocondrie pentru lanul
transportor de electroni (deplasare de ioni H+, ATPaz). Aceste molecule sunt apoi folosite pentru
a activa dioxidul de carbon din aer i a-l ncorpora ntr-o glucid, printr-o serie de reacii numite
ciclul Calvin.

29

O scurt introducere n biochimie

7. Aspecte de nutriie
Rolul alimentelor n organism este direct legat de metabolism; alimentele sunt materia
prim prin care se ndeplinesc cele dou funcii ale metabolismului:
- Funcia anabolic nutrienii din alimente sunt folosii pentru obinerea de compui care au
rol n construirea sau regenerarea de celule, esuturi etc.
- Funcia catabolic nutrienii sunt ari la nivel celular n scopul obinerii de energie
O diet sntoas trebuie s asigure ndeplinirea celor dou funcii; ea trebuie s fie
diversificat astfel nct s respecte necesarul organismului. Att lipsa unor nutrieni ct i
aportul excesiv al acestora poate duce la probleme de sntate. n cele ce urmeaz sunt trecute n
revist cteva aspecte ale acestui subiect, fr a se da o lista exhaustiv de nutrieni sau programe
alimentare.
Necesarul energetic
Necesarul energetic (caloric) reprezint cantitatea de energie necesar organismului
pentru meninerea compoziiei i greutii corporale, parcurgerea diferitelor perioade fiziologice
i desfurarea activitilor fizice i intelectuale cu pstrarea pe termen lung a strii de sntate.
Aportul caloric optim variaz n funcie de vrst, sex, stri fiziologice sau patologice (ex. crescut
n stri febrile, traumatisme, malabsorbie i sczut n obezitate i hipotiroidism), activitate fizic
(ex. sportivii).
Carbohidraii
Carbohidraii sau glucidele sunt o surs de energie uor accesibil. n alimentaie
glucidele sunt prezente ca monozaharide n fructe i miere (glucoz, fructoz), dizaharide n lapte
i produse ndulcite cu zahr (lactoz, zaharoz, maltoz) i polizaharide de origine vegetal
(amidon) sau animal (glicogen). ntr-o diet normal este recomandat ca glucidele s acopere
aprox. 55-60% din necesarul caloric zilnic prin consumul de cereale i produse din cereale,
fructe, legume i produse zaharoase, cu meniunea c produsele zaharoase nu trebuie s
depeasc 4-10% din necesarul energetic.
O clas de polizaharide nedigerabile sunt componente importante n fibre materiale
alimentare care dei nu aduc un aport energetic substantial sunt importante n alimentaie
deoarece determin saietatea reducnd tendina de supraalimetare (prin stimularea secreiei de
suc gastric i ntrzierea evacuarii stomacului), particip la eliminarea unor substane toxice din
intestinul gros, reduc riscul de constipaie prin retenia de apa i furnizeaz elemente nutritive
pentru celulele intestinale (prin degradarea acetora de ctre bacteriile din tractul digestiv). O parte
din fibre pot fi chiar parial digerabile. Pe lng glucide, fibrele pot conine i alte materiale,
inclusiv polimerice, iar adsorbite pe aceti polimeri pot rmne i componente cu valoare
nutritiv direct (vitamine, etc.).
Lipidele
Principalul rol al grsimilor n alimetaie este cel energetic, furniznd de dou ori mai
mult energie dect glucidele i proteinele. Lipidele sunt de asemenea eseniale n biosinteza
hormonilor steroidieni i aportul de vitamine liposolubile.
n alimente lipidele sunt prezente n catiti mari ca fosfolipide, colesterol i lipide simple;
lipidele simple se gsesc ca acizi grai saturai n unt, cacaval, smntn, glbenu, ca acizi grai
mononesaturai n ulei de msline, nuci, avocado i ca acizi grai polinesaturai n floarea
soarelui, porumb sau pete. Acizii grai polinesaturai sunt acizi grai eseniali avnd rol n

30

O scurt introducere n biochimie


funcionarea sistemului nervos central i a inimii prin efectul antiaterogen. ntr-o diet echilibrat
se recomand ca lipidele ingerate s acopere 20-30% din necesarul caloric.
Proteinele
Consumul de proteine asigur necesarul de aminoacizi utilizai pentru sinteza proteinelor.
Proteinele sunt eseniale n alimentaie deoarece furnizeaz organismului aminoacizi eseniali (ex.
treonin, triptofan, valin, izoleucin). Principalele surse de proteine sunt carnea, produsele
lactate, oule, fasolea i soia. Pe de alt parte, ele pot fi, aa cum s-a artat, i surse utile de
energie.
Vitaminele
n general o diet snatoas acoper necesarul zilnic de vitamine, ns n cazurile de
malnutriie, tulburri de resorbie sau tratamente care distrug flora intestinal apar
hipovitaminozele sau n cazuri extreme avitaminozele.
Vitamina A.
Formele fiziologic active ale vitaminei A sunt retinalul i acidul retinoic. Primul are un
rol n captarea luminii la pigmenii vizuali din ochi i iniierea unui impuls nervos, iar al doilea
controleaz creterea i meninerea normal a epiteliilor i mucoaselor.
Unii pigmeni din familia carotenoidelor, precum carotenul, pot fi transformai n retinal
i au de aceea o important nutriional deosebit deoarece sunt prezeni n alimente n cantiti
mari i deci principala surs de materie prim pentru vitamina A.
Deficienele uoare de vitamina A produc tulburri de adaptare la vederea nocturn,
distorsia vederii n culori, tulburari de auz, miros, echilibru. Deficienele severe i prelungite
orbire ireversibil. Lipsa de vitamina A este una dintre cauzele morii infantile prin creterea
susceptibilitii la infecii datorate deficienelor la nivelul esutului epitelial.
Vitamina E
Vitamina E este este de fapt un grup de compui, dintre care tocoferolii sunt cei mai
cunoscui. Ea este localizat n principal n membrane, unde i manifest o activitate de agent
antioxidant dar este implicat i n semnalizarea celular, modularea expresiei genelor i inhibiia
proliferrii celulelor.
Principalele surse de vitamina E sunt plantele verzi (tocoferolii sunt componeni
importani ai membranelor cloroplastelor), seminele, germenii de gru i glbenuul de ou. Din
cantitatea total de tocoferoli ingerat doar 20-40% este absorbit de intestin alturi de alte
grsimi din diet. Vitamina E este transportat la ficat unde este preluat de o protein de transfer
i exportat spre lipoproteinele cu densitate foarte mic (VLDL) alturi de care este eliberat n
fluxul sanguin.
Deficiena de vitamina E este ntlnit rar datorit depozitelor din esuturi, fiind
dezvoltat de copiii nscui prematur i de persoanele suferind de fibroz cistic, boli
hepatobiliare cornice, malabsorbie sever a lipidelor sau defecte genetice de sintez a VLDL sau
protein de transport a tocoferolului.
Vitamina K
Pincipala funcie a vitaminei K este carboxilarea unor proteine implicate n coagularea
sngelui, dar este implicat i n proteine din spaiul intermembranar al mitocondriilor unde au rol

31

O scurt introducere n biochimie


n acumularea calciului, n oase sau n sistemul nervos. Deficiena de vitamina K are ca efect
creterea timpului de coagulare ca rezultat al sintezei sczute a proteinelor dependente de
vitamina K.
Vitamina B1 Tiamina, TPP
Are rol n metabolismul glucidelor i al unor aminoacizi (ex. leucin, izoleucin, valin).
Deasemenea TPP-ul este implicat n calea pentozofosfailor i transmiterea impulsului nervos.
Vitamina B1 se afl n alimente (nuci, cereale integrale, drojdie, carne, ficat). Necesarul
de tiamin se calculeaz n funcie de cantitatea de glucide i proteine comsumate, fiind necesare
pentru funcionarea corect a organismului 0.5 mg tiamin/ 1000 kcal.
Lipsa de vitamina B1 cauzeaz beriberi, o boal a sistemului nervos caracterizat de
pierderi de memorie i nistagmus (micri neregulate i scadate ale ochilor). Deficiena de
vitamina B1 provoac pierderi n greutate, crampe musculare sau contracii neregulate ale inimii.
Vitamina B2 riboflavina FAD i FMN
Riboflavina este vitamin hidrosolubil cu strucutur flavinic al crei rol principal este
de coenzim n numeroase reacii de transfer de electroni ale proceselor metabolice. Formele
metabolic active sunt flavin mononucleotida (FMN) i flavin adenin dinucleotida (FAD). FAD
ndeplinete funcia de cofactor proteine sensibile la lumina albastr implicate n reglarea ritmului
circadian (sistemul prin care celulele in evidena timpului).
Vitamina B2 se gsete n alimente precum drojdia, produsele lactate, carnea, cerealele,
dar este sintetizat i de bacteriile din intestin. Avitamitoza B2 este relativ comun i se manifest
prin stomatit, oboseal, crampe musculare, dermatit seboreic i uneori conjunctivit.
Vitamina B3, sau PP - Niacina
Niacina (sau niacotinaminda) este precursorul i entitatea reactiv a NAD (nicotinamid
dinucleotida) i NADP (nicotinamid adenin dinucleotid fosfat), care particip n reacii care
necesit transportul simultan de protoni i electroni din metabolism, calea pentozo-fosfailor,
biosinteza acizilor grai. NAD este precursorul unor mesageri secundari n reglarea
metabolismului calciului.
Lipsa de niacin provoac apariia pelagrei, o boal caracterizat de dermatit
fotosensibil. n cazurile severe de pelagr alturi de leziunile pielii apar tulburri neurologice
(ex. depresie psihotic) i gastro-intestinale (ex. diaree acut).
Vitamina B6 Piridoxalul
Termenul de vitamina B6 se refer la 6 compui ndeaproape nrudii. Principalul ei rol
este n reacii asupra aminoacizilor (de exemplu, de transaminare), cu implicaii pentru ci
metabolice diverse - sinteza porfirinelor utile pentru pigmentul rou din snge, metabolismul
acidului linoleic, sinteza colesterolului i a fosfolipidelor, sinteza niacinei, reglarea activitii
hormonilor steroidieni.
Necesarul zilnic de vitamin B6 este asigurat att prin consumarea alimentelor precum
petele, carnea de pasre, bananele, fasolea, cerealele ct i prin aportul adus prin sinteza acesteia
de bacteriile din flora intestinal. Carenele severe sunt rare i se manifest cu convulsii la copii,
anemii feriprive, leziuni ale pielii.

32

O scurt introducere n biochimie


Vitamina B9 - Acidul folic
Acidul folic este esenial n sinteza bazelor azotate din componena ADN-ului, intervine
n maturarea celulelor stem din mduva osoas fiind important n formarea eritrocitelor. Rolul
acidului folic este transferul gruprilor coninnd un atom de carbon att n reacii catabolice ct
i de biosintez.
Lipsa de acid folic este asociat cu hipercisteinemie, depresie, irascibilitate sau probleme
de memorie.
Vitamina B12
Vitamina B12 este un compus pe baz de cobalt. Ea permite formarea unor legturi
neobinuite metal-carbon, rare n biochimie, i este implicat n enzime ce catalizeaz traficarea
atomilor de carbon sau rearanjarea lor n interiorul moleculelor.
Principalele surse alimentare de vitamina B12 sunt carnea, oule i produsele lactate.
Carena de vitamina B12 sau acid folic cauzeaz anemie megaloblastic, boli psihice, insomnie.
Biotina (Vitamina H)
Biotina este o coenzim implicat n gluconeogenez, sinteza acizilor grai i
catabolismul aminoacizilor. Necesarul zilnic de vitamina H poate fi acoperit prin consumul unei
varieti mari de alimente, printre care se afl glbenuul de ou, alunele, nucile i ficatul.
Carena de biotin este rar ntlnit fiind cauzat n majoritatea cazurilor de consumul de
albu nepreparat (albuul conine avidin, o protein cu afinitate mare pentru biotin, care astfel
scoate biotina din circulaie). Principalele simptome ale lipsei de vitamina H sunt alopecia
(cderea prului), conjunctivita, dermatita, halucinaii sau stri letargice.
Acidul pantotenic (Vitamina B5)
Acidul pantotenic este implicat n metabolismul glucidelor i lipidelor, ca grupare
funcional a coenzimei A, n biosinteza acizilor grai, n biosinteza steroidelor, porfirinelor i
acetilcolinei i altele.
Acidul pantotenic se gsete n aproape toate alimentele i este produs i de bacteriile
florei intestinale, astel nct cazurile de deficen de vitamin B5 sunt izolate.
Vitamina C (Acidul ascorbic)
Acidul ascorbic are rol bine definit n clase de enzime care se ocup cu producerea
moleculelor precum colagenul din esutul conjunctiv, pentru a le menine elasticitatea i
rezistena mecanic, dar are legtur i cu enzimele detoxifiante din ficat sau cu absorbia
intestinal a fierului, i funcioneaz ca agent protector mpotriva stresului oxidativ discutat n
capitolele anterioare.
Alimente bogate n vitamina C sunt citricele, ananasul, cartofii, varza, conopida, ardeiul
verde, broccoli, cpunii sau fructul de kiwi. Srurile acidului ascorbic sunt utilizate ca aditivi
alimentari. Beneficiile vitaminei C i disponibilitatea ei, i faptul c este bine cunoscut pentru
rolul su protector, face ca n unele cazuri s se administreze excese. Ca i n alte cazuri de
suplimente nutritive cu caracter antioxidant, excesul de vitamina C provoac un stres oxidativ n
organism (compusul dobndete aciune opus celei pe care o avea cnd era administrat n doze
mici); n principiu, acest stres poate aciona ca un vaccin, care s activeze apoi rspunsul natural
al corpului.

33

O scurt introducere n biochimie


Lipsa de vitamina C produce scorbutul caracterizat prin iritabilitate, stare anxioasa,
pseudoparalizie prin dureri musculare, hemoragii gingivale datorit fragilitii vasculare, iar n
cazurile avansate apar dureri osteoarticulare, cauzate de demineralizarea acestora ca rezultat al
producerii anormale a colagenului.
Carnitina
Carnitina este o substan relativ simpl care transport acizi grai din citosol n matrixul
mitocondrial. Dei organismul uman este capabil s sintetizeze carnitin pentru a acoperi
necesarul zilnic, alimentaia srac n lizin i metionin (aminoacizi din care se produce
carnitina) sau acidimiile provoac pierderea carnitinei fiind astfel recomandat consumul
alimentelor bogate n carnitin (ex. pete, carne de vit, lapte integral).
Fierul
Fierul este un element esenial pentru organism, intrnd n alctuirea unor proteine
implicate n transportul i stocarea oxigenului sau n diferite procese redox aferente cilor
metabolice eseniale. De exemplu, el se gsete n toate componentele lanului transportor de
electroni din respiraie, i n mioglobin i hemoglobin. Necesarul zilnic de fier, ~ 20 mg/zi,
poate fi asigurat prin consumul unei game destul de variate de alimente, fiind adsorbit la nivelul
intestinului iar apoi transportat spre diferite esuturi i organe unde este stocat i utilizat (ex. n
muchi pentru sinteza mioglobinei, n mduva osoas pentru sinteza eritrocitelor).
Principalele cauze ale deficienei de fier sunt alimentaia inadecvat (ex. dieta bazat pe
produse lactate), absorbia deficitar, aclorhidria (pierderea sau diminuarea secreiei gastrice) i
hemoragiile. Deficiena de fier evolueaz spre anemie ferodeficitar n trei stadii: scderea
rezervelor de fier fr afectarea funciilor, eritropoiez deficitar (scderea capacitii de formare
a celulelor roii) i anemie feripriv.

34

O scurt introducere n biochimie

8. Sistemul imunitar
Organismul uman a dezvoltat mecanisme de rezisten capabile s diferenieze ntre
componentele proprii i cele strine, mecanisme numite generic sistem imunitar. El folosete
att celule specializate ct i molecule izolate (dintre care imunoglobuline sunt cele mai
cunoscute); toate au ca tem general capacitatea de a se lega cu foarte mare selectivitate de
corpurile strine organismului (bacterii, virui, toxine, etc; ele sunt numite generic antigeni), i
de a bloca i/sau distruge acele corpuri.
8.1. Anticorpii (imunoglobulinele)
Anticorpii sau imunoglobulinele (Ig) sunt proteine specializate n legarea selectiv i
foarte puternic antigenilor; efectul acestei legri este de obicei inactivarea corpului strin, fie
direct fie prin faptul c alte componente ale organismului l atac ulterior, ca rezultat al
semnalului dat de anticorp. Ig sunt sintetizate n celule numite limfocite B. Exist o gam foarte
variat de imunoglobuline, clasificate n cinci clase: IgG, IgA, IgM, IgD i IgE, cf. Tabelul 1.

Tip
IgG
IgA
IgM
IgD
IgE

Tabelul 1. Funciile imunoglobulinelor.


Concentraia n
serul sanguin
Funcie
(mg/ml)
Anticorpul majoritar n raspunsul imun secundar neutralizarea
12
toxinelor bacteriene. Asigur protecia ftului i nou-nscutului
Anticorpul majoritar n secreii externe (ex. saliv, mucus
3
intestinal, bronic)
Anticorpul majoritar n rapunsul imun primar. Anticorpii grupelor
1
sangiune, al endotoxinei bacteriilor gram-negative
Prezente pe suprafaa limfocitelor B, implicate n recunoaterea
0,1
antigenelor
Prezente pe suprafaa mastocitelor i bazofilelor, rol n rspunsul
0,001
imun asociat parazitozelor intestinale i alergiilor. Stimuleaz
raspusul inflamator acut

Datorit afinitii i specificitii ridicate a interaciunilor anticorp-antigen, anticorpii sunt


utilizai i n diferite proceduri analitice, n determinrile fine ale unor cantiti mici de antigene
(tehnicile ELISA, RIA), sau n purificarea proteinelor n cromatografia de afinitate, identificarea
unor medicamente n ser i urin, sau identificarea unui agent infecios, prin reaciile serologice
care utilizeaz soluii de anticorpi (seruri imune) cu specificitate cunoscut. De asemenea, mai
recent, se profit de capacitatea de a se produce n laborator anticorpi la comand, astfel nct
se genereaz anticorpi capabili s contracatreze ageni care genereaz boli. Se comercializeaz
astfel n prezent anticorpi de puritate nalt pentru tratamentul unor boli specifice, dar i
amestecuri de anticorpi de la diferiti donatori (denumit IVIG imunoglobuline intravenoase) cu
rol mai general de suplimentare a sistemului imunitar n anumite boli.
Pe lng anticorpi, exist numeroase alte proteine importante n sistemul imun. Printre ele
sunt citokinele, care la rndul lor cuprind clase precum interleukine, interferoni, limfokine,
chemokine. Spre exemplu, interferonul este implicat n special n atacarea viruilor i a tumorilor.
n celulele bolnave el provoac blocarea translatiei/traducerii ADN, sintezei proteinelor, si
activeaza alte enzime, la celulele din jur sau direct la cele ale sistemului imun.
35

O scurt introducere n biochimie


Nu n ultimul rnd, exist i alte molecule importante n sistemul imun, una dintre cele
mai cunoscute fiind histamina; ea este implicat n procesul prin care permeabilitatea vaselor
circulatorii este mrit n jurul unei zone n care anticorpii au detectat un corp strin, astfel nct
celulele specializate ale sistemului imun s se poat deplasa la locul infectat. Acest fenomen
provoac, la limit, din cauza influxului de lichide care aduce celulele, creterea n volum a zonei
respective i creterea secreiilor. Fenimenul este notabil n cazul alergiilor medicamentele
antialergice avnd ca int important tocmai mecanismul bazat pe histamin (antihistaminice).
8.2. Celulele sistemului imunitar
Celulele sistemului imunitar sunt de diferite tipuri. Generic, se folosete termenul de
celule albe sau leucocite. Importana lor este ilustrat i de faptul c una dintre cele mai
cunoscute boli, leucemia, e cauzat tocmai de o dereglare n funcionarea leucocitelor. Spre
exemplu, limfocitele T ndeplinesc mai multe funcii printre care recunoaterea celulelor infectate
i distrugerea acestora, sau reglarea activitii altor celule; din aceast ultim categorie fac parte
limfocitelor helper (ajuttoare), care sunt veriga slab pe care o atac virusul HIV (human
immunodeficiency virus), cauznd incapacitatea de aprare a organismului, SIDA (sindromul
imunodeficienei dobndite). Mai multe exemple (dar nu o list complet) sunt date n Tabelul 2.
Tabelul 2. Cteva tipuri importante de celule componente ale sistemului imun.
Tip de
% n
inte principale
Durata de via
celul
aduli
Neutrofile 54
bacterii, ciuperci
6 orecteva zile; epuizate
62%
dup ce acioneaz asupra
unui numr redus de celule
strine
Eozinofile 16%
parazii mai mari, rspuns alergic
812 zile(circul efectiv 45
ore)
Bazofile
<1%
Elibereaz histamin pentru rspunsul
Cteva ore pn la cteva zile
alergic
Limfocite
28
Tip B: sintetizeaz anticorpi, ajut la
Ani de zile pentru celulele de
33%
activarea celulelor T
memorie, sptmni pentru
Tip T:
celelalte
T helper: reglare/activare alte celule
T citotoxice: celule tumorale sau
infectate de virui
de reglare: oprire a sistemului imun
la ncheierea infeciei
Natural killer cells: celule tumorale sau
infectate de virui
Monocite
210% Monocitele migreaz din snge ctre
Ore - zile
esuturi, unde se stabilesc i devin
macrofage
Macrofage
Fagocitare (inghiirea i distrugerea)
activate: zile
resturilor de celule i patogenilor;
altfel luni, ani
stimularea altor componente ale
sistemului imunitar

36

O scurt introducere n biochimie

Erorile de producie ale limfocitelor provoac apariia bolilor autoimune precum diabetul
zaharat de tip I, artita reumatoid sau scleroza multipl n care limfocite insuficient instruite
confund celule proprii ale organismului cu celule strine, i provoac procese de autodistrugere
n diverse esuturi.
8.3. Vaccinurile i imunitatea
Vaccinurile sunt produse biologice care conin bacterii vii cu virulen atenuat, bacterii
omorte, toxine modificate pentru a le face benigne, virusuri infecioase inactivate sau cu
virulen atenuat. Toate acestea, introduse n organismul uman, stimuleaz reactivitatea
imunitar, genernd o stare de protecie temporar fa de agentul infecios din care au fost
preparate.
Spre deosebire de vaccinuri, serurile imune sunt produse biologice obinute din serul
sanguin al unui animal imunizat prin vaccinare sau de la persoanele convalescente i conin
anticorpi specifici, capabili s neutralizeze aciunea antigenului corespunztor. Imunitatea
dobndit n urma administrrii serurilor imune se instaleaz imediat dar asigur o protecie de
scurt durat.
Tehnici mai moderne folosesc anticorpi capabili s recunoasc o celulul bolnav, ca
transportor pentru compui utili medical, astfel nct n organism acei compui s fie livrai
imediat la celula bolnav, fr a da efecte secundare nedorite prin interaciunea cu celule
sntoase din ntregul organism.

37

O scurt introducere n biochimie

9. Enzimologie clinic
n general, prin enzimologie clinic se nelege studiul activitii enzimatice din snge,
i, mai exact, din ser. Reamintim, sngele este format din celule n principal roii, dar i altele
i din partea lichid n care plutesc aceste celule, numit plasm. Mai departe, dac din plasm se
ndeprteaz (lsndu-i s precipite/coaguleze) agenii de coagulare, se obine ceea ce se numete
ser.
9.1. Proteine serice
Dup apartenen, proteinele serice se pot clasifica n trei categorii: proteine cu rol bine
definit n snge (ex. enzime implicate n coagulare), proteine exocrine i proteine intracelulare.
Enzimele aparinnd ultimelor dou clase apar n mod normal n plasm doar n concentraii mici;
prezena lor n concentraii mari semnaleaz distrugerea esuturilor din care provin.
Analiza proteinelor serice furnizeaz informaii cu privire la prezena unei boli, organul
implicat, natura i stadiul bolii respectiv gradul de extindere al acesteia. Testele de rutin includ
pe lng msurarea proteinelor totale, exprimat adeseori ca raport ntre albumin i globuline,
determinarea concentraiei unor enzime specializate.
Modificari ale concentraiilor proteinelor plasmatice totale sunt datorate n principal
schimbrilor care apar fie n sinteza sau n viteza de eliminare a acestora fie n volumul de
distribuie (ex. n cazuri de deshidratare are loc o cretere rapid a concentraiei proteinelor
serice).
Una dintre principalele metode utilizate n analiza proteinelor este electroforeza care, dei
n majoritatea cazurilor nu furnizeaz informaii suficiente pentru diagnosticarea diferitelor boli excepie paraproteinemia (excesul de -globulin), reprezint o metod preliminar rapid n
investigarea unor condiii patologice specifice.
Albumina este cea mai abudent protein seric (aprox. 80% din proteinele totale) avnd
numeroase roluri printre care meninerea presiunii osmotice i implicit a distribuiei fluidelor
extracelulare, transportul unor hormoni, ioni (ex. calciu), acizi grai sau medicamente.
Principalele cauze ale hipoalbuminemiilor sunt diminuarea sintezei, datorat unor boli ale
ficatului, malabsorbiei sau malnutriiei, creterea volumului de distribuie prin hiperhidratare sau
creterea permeabilitii capilarelor (n septicemii i hipoxii), sau excreie/degradare crescut (n
cazuri de arsuri hemoragii, trauma, boli maligne, infecii severe).
1-globulina (1-antitripsina) i 2-macroglobulina sunt o proteine sintetizate de ficat cu
rol n inhibarea proteazelor.
Ceruloplasmina este o 2-globulina cu rol n transportul cuprului; concentraia sczut a
acesteia este caracteristica bolii Wilson.
9.2. Enzime implicate n patologia cardiac
(Fosfo)Creatin chinaza (CPK) este o enzim ce funcionez ca rezerv de energie
cataliznd formarea de ATP prin transferul unei grupri fosfat de pe fosfocreatin pe ADP.
CPK se afl n citosol sub forma a 3 izoenzime: CK-MM (preponderent n muchii
scheletali), CK-MB (n muchiul cardiac alturi de MM) i CK-BB (n creier). Investigarea CPK
se utilizeaz n diagnosticarea infarctului miocardic i a evoluiei post-infarct, excluderea
infarctului miocardic n traume toracice sau a distrugerilor miocardice la pacienii cu intoxicaii
severe, controlul post-operator al interveniilor pe cord.

38

O scurt introducere n biochimie


Lactat dehidrogenaza (LDH) este o enzim care catalizeaz reacia reversibil de
transformare a acidului piruvic n acid lactic i se prezint sub cinci forme, notate LDH1-LDH5,
i care difer ca locaie (fie la miocard i eritrocite, fie la ficat i muchi scheletali, fie la rinichi i
pancreas, etc).
Valori LDH mrite se ntlnesc n cazul unor afeciuni precum infarctul miocardic,
pulmonar sau renal, accidentul vascular cerebral, anemia megaloblastic sau hemolitic,
pacreatit, hipotiroidism, afeciuni vasculare.
9.3. Analize n explorarea ficatului
Ficatul joac un rol important n metabolismul glucidelor, lipidelor i proteinelor, n
procesele de coagulare, detoxifiere (metabolii, medicamente), inactivarea unor hormoni. Apariia
diferitelor leziuni la ficat (inflamaii, necroze, fibroz, coleostazie) poate fi detectat prin
determinarea concentraiile diferitelor enzime sau substane sintetizate sau metabolizate de ficat.
Alanin aminotransferaza (ALT) i aspartat aminotransferaza (AST) sunt cele mai
abundente enzime din ficat, avnd rol n metabolismul glucidelor i aminoacizilor n cataliza
reaciilor de transaminare.
Alcalin fosfataza (ALP) un grup de enzime hidrolitice cu rol n clivarea legturii fosfat n
diferite molecule (nucleotide, proteine) este larg distribuit n organism regsindu-se n
concentraii mari n ficat, oase, rinichi, placent i intestine. Valorile plasmatice ridicate pot
indica obstrucia canalelor hepatobiliare sau diferite boli ale oaselor ca rahitism, boli neoplastice
n metastaze osoase sau vindecarea fracturilor.
- glutamiltransferaza (GGT) este o enzim localizat n principal n ficat, pancreas i
tuburile renale fiind implicat n transferul animoacizilor prin membran. Activitatea enzimei e
afectat de prezena alcoolului i a medicamentelor din clasa barbituricelor motiv pentru care este
utlizat ca marker n diagnosticul cirozei induse de consumul de alcool.
Albumina seric este un indicator primar al capacitii de sintez a ficatului. Deoarece
timpul de via al albuminei este de aprox. 20 zile, instalarea hipoalbuminamiei este lent chiar i
n cazul ntreruperii brute a sintezei, indicnd fie o afeciune cronic fie una acut sever a
ficatului.
Colinesteraza este enzima care hidrolizeaz legtura esteric din moleculele care conin
colin (ex. acetilcolina eliberat la nivelul terminaiilor nevoase pentru medierea transmiterii
impulsului neuronal). n organism se prezint sub mai multe forme, cele mai importante fiind cea
prezent n eritrocite, plmni, splin, materia cenuie, terminaiile nervoase cu specificitate
absolut (hidrolizeaz doar aceticolina) i cea prezent n ficat, pancreas, ser, materia alb a
creierului. Din punct de vedere clinic, analiza colinstereazei este important n diagnosticarea i
managementul cazurilor de otrvirii cu pesticide i inhibiiei datorate anestezicelor.
Bilirubina nu este o protein, ci un compus relativ simplu rezultat la descompunerea
hemului provenit n principal din hemoglobin. Fiind insolubil n ap, bilirubina este
transportat prin plasm legat de albumin, apoi preluat de ficat unde este mono- sau diglicozilat. Forma conjugat este excretat n bil, apoi n intestine unde este convertit de ctre
flora microbian i apoi excretat prin materiile fecale (la a cror culoare contribuie) fie reabsorbit
i excretat de rinichi.
Hiperbilirubenimia sau excesul de bilirubin, semnalat clinic de prezena icterului
(culoraia galben a ochilor, tegumentului i mucoaselor), este cauzat n principal de: hemoliz,
disfuncii ale mecanismelor de conjugare sau obstrucia sistemului biliar. Cele mai comune cauze

39

O scurt introducere n biochimie


n icterul acut sunt infeciile virale (ex. hepatita A) i otrvirea cu paracetamol sau cu diferite
toxine din ciuperci.
n investigarea ficatului sunt utile i analiza timpului de coagulare a plasmei, care poate fi
primul indicator al deteriorrii ficatului, concentraia globulinelor serice totale ca msur a
severitii bolii, 1-antitripsina i ceruloplasmina n afeciuni specifice, anticorpi i antigeni
specifici (ex. Ab HVA, Ag HBs), metabolii (acizi biliari, uree) sau compui metabolizai
(trigliceride, colesterol).
9.4. Enzime implicate n patologia pancreasului
Pancreasul este un organ al sistemului digestiv cu funcie de producere de hormoni
(insulin, glucagon tripsin, chimotripsin, carboxipeptidaze, lipaza, colipaza, amilaza).
Investigarea diferitelor afeciuni ale pancreasului se realizeaz prin msurarea activitii
enzimelor pe care le secret (valorile plasmatice i/sau n aspiratele duodenale) alturi de
imagistic (computer tomograf, ecografie).
-amilaza este o enzim digestiv secretat de glandele salivare i pancreas cu rol n
ruperea legturilor 1,4-glicozidice ale glucidelor polimerice. n plasm se afl sub forma a dou
izoenzime, S (specific glandelor salivare) i P (specific pancreasului). Valori plasmatice
ridicate sunt caracteristice pancreatitei acute, obstruciilor intestinale, intoxicaiilor acute cu
alcool, cetoacidozei cauzate de diabet sau afeciunilor glandelor salivare. Fiind o protein cu
mas molecular mic n mod normal este filtrat cu uurin de rinichi i excretat, ns n cazul
deteriorrii funiei renale, aceasta poate fi reinut nregistrndu-se o cretere a concentraiei
plasmatice a acesteia.
Lipaza pancreatic este o enzim hidrolitic sintetizat de pancreas cu rol n ruperea
legturilor esterice din trigliceride avnd activitate optim n prezena srurilor biliare i a colipazei. Se nregistreaz valori serice ridicate n pancreatite acute, stadiile incipiente ale
cancerului pancreatic, consumul de codeine i narcotice precum i n cazuri de insuficien renal
sau fracturi osoase (aprox. 40% din cazuri).
Tripsina este o proteaz care hidrolizeaz legturile din proteine care conin aminoacidul
arginin.
9.5. Analize exploratorii ale funciei renale
Rinichiul este un organ al aparatul excretor responsabil pentru meninerea echilibrului
elecrolititic, excretarea substanelor toxice i metaboliilor inutili, secreia unor hormoni
(eritropoietina rol n reglarea sintezei eritrocitelor, renina rol n reglarea echilibrului
sistemului sodiu-apa, prostaglandine implicate n reglarea tensiunii arteriale i a echilibrului
electrolitic), inactivarea insulinei, conversia formei inactive a vitaminei D n metabolit activ.
Cele mai frecvente teste aplicate n analiza funciei renale (glomerular sau tubular) sunt
rata de filtrate cleareance-ul, creatinina seric, ureea i acidul uric. Pentru diagnosticarea
specific a diferitelor boli renale este necesar i aplicarea unor proceduri particulare care includ
analiza creatininei, proteinelor, aminoacizilor, electroliilor n urin, hematuria (prezena celulelor
roii n urin).
Creatinina este un derivat al creatinei, substan implicat n contracia muchilor
scheletali (process mediat de creatin kinaza i ATP) i sintetizat n ficat printr-o serie de reacii
enzimatice. Se nregistreaz creteri ale concentraiei creatininei serice i independent de funcia
renal datorit dietei (crete cu pn la 30% dup ingerarea produselor cu coninut ridicat de
proteine), scderea masei musculare, sarcinii sau tratamentului cu corticosteroizi.

40

O scurt introducere n biochimie


Ureea este produsul rezultat la deaminarea aminoacizilor. Concentraiile plasmatice
normale ale ureei variaz cu vrsta, alimentaia (aportul de proteine crete concentraia ureei),
gradul de hidratare.
Acidul uric este produsul rezultat n urma degradrii nucleozidelor purinice fiind excretat
n cea mai mare parte pe cale renal. n cazurile n care concentraia crete mult peste 6.5 mg/dl,
acidul uric precipit formnd depozite la nivelul articulaiilor. Cteva din cauzele hiperuricemiei
sunt leucemia (prin distrugerile celulare), consumul de diuretice, unele boli ale oaselor,
cetoacidoza diabetic, insuficena renal.
9.6. Alte enzime cu relevan clinic
Acid fosfataza (ortofosforic monoester fosfohidrolaza) prezent n oase, splin, prostat
i eritrocite are ca principala aplicaie diagnosticul i monitorizarea tratametului cancerului de
prostat.
Glucozo-6-fosfat dehidrogenaza (G6PD). Deficiena de G6PD este cea mai comun
enzimeopatie conducnd, asociat cu stresul oxidativ sau infecii, la hemoliz.

41

O scurt introducere n biochimie

10. Dopajul i substanele interzise


Perceput ca folosirea de substane interzise n sport cu scopul de a dobndi performane
sporite, dopajul este inta unui form internaional, WADA (World Anti-Doping Agency),
nfiinat n 1999. Activiti care pot fi perecepute ca dopaj sunt nregistrate n istorie nc din
antichitate folosindu-se n acest scop alcoolul, sau plante ori ciuperci bogate n substane
psihoactive. n istoria recent, marurile sportive din Anglia de la nceputul secolului al XIX, care
ajungeau pn la 500 de mile, sunt documentate a fi fost un loc n care opiul sau alte substane
intoxicante erau folosite pentru a menine competitorii n form. Succesul la public al acestor
maruri a stimulat ulterior interesul pentru dezvoltarea competiiilor de ciclism, marcate i ele
nc de la nceput de folosirea de substane intoxicante. nc la nceputul secolului XX, exist
mrturii scrise ale medicilor sportivi i antrenorilor despre folosirea de alcool strincin i alte
droguri n competiiile sportive. Chiar i la acea dat, se remarca faptul c sportivii din
competiiile de anduran erau abuzai fizic i mental, uneori n manier complet ireversibil, nu
att de efortul sportiv ct de substanele care le erau administrate de ctre antrenorii i medicii
lor. Primul pas important, simbolic, mportiva acestor abuzuri poate fi socotit declararea n 1928
de ctre IAAF (International Association of Athletics Federations) a dopajului ca interzis. La
acea dat nu existau ns metode de analiz care s permit aplicarea n fapt a acestui principiu.
Conform WADA, se pot defini diverse forme de dopaj:
10.1. Substane interzise att n timpul ct i n afara competiiilor
10.1.1. Substane farmacologice care nu sunt aprobate pentru uz uman terapeutic
Intr n aceast categorie medicamentele care nc nu au autorizaie, sau crora aceasta le-a
expirat, sau cele veterinare, sau orice alt compus farmacologic care nu are reglementat n mod
expres folosirea de ctre autoritile de sntate
10.1.2. Ageni anabolizani
Acetia induc anabolismul; n cadrul acestuia sunt incluse multe procese, dar cel de sintez a
proteinelor din muchi este cel care a provocat interesul sportivilor. Anabolizanii interzii sunt
imprii n dou clase:
Steroizi anabolici androgeni: Intr aici hormonii de tipul testosteronului, dar i o list foarte
lung de derivai chimici similari acestora. Pentru izolarea acestor hormni, i descoperirea cilor
prin care ei pot fi sintetizai n cantiti nelimitate n laborator, s-au acordat n anii 1933-1939
dou premii Nobel. Dincolo de controlarea trsturilor masculine din organism, ei sunt utili
medical pentru tratatrea unor dezechilibre hormonale sau pentru ntrirea organismului n
anumite boli. Efectele lor secundare sunt cele care i fac s fie interzii n sport: dezechilibre in
colesterol, tensiune arteriale, probleme la ficat, la ventriculul stang, acnee, atrofie testicular.
Deja la finalul anilor 30 testosteronul era popularizat n reviste dedicate sportivilor n SUA, i se
consider c el a fost utilizat n scop militar n timpul celui de-al doilea rzboi mondial. Ulterior,
din cauza efectelor secundare, s-a dezvoltat o ntreag industrie farmaceutic dedicat sintezei de
substane steroide similare testosteronului dar care s aib mai puine efecte nedorite. Pe msur
ce implicaiile financiare i cele politice (ca de exemplu rzboiul rece) ale sportului au crescut,
prile cele mai competitive s-au angajat ntr-o curs a dopajului nu cu mult diferit de cea a
narmrii nucleare din aceeai perioad. Notorii sunt numele lui John Ziegler, chimistul care a
jucat un rol esenial n dezvoltarea steroizilor n SUA, sau cazul Germaniei de Est, azi disprut
ca ar, ai crei sportivi au fost faimoi pentru cazurile de dopaj. Ignorarea regulilor legate de
dopaj, uneori chiar de federaiile de specialitate, este ns nc non-neglijabil chiar i n statele
cele mai avansate; cazurile de dopaj ale atleilor americani n preajma Olimpiadei de la Seul au

42

O scurt introducere n biochimie


scos n eviden dovezi sugernd c sute de cazuri de dopaj trec nesancionate intern de federaia
de specialitate; una dintre victimele acestei situaii mrturisea ntr-adevr nu numai c dopajul
este bine cunoscut ntre atlei, dar i c ei, ca atlei nu pot face absolut nimic pentru a-l opri.
Ali ageni anabolizani:Intr aici medicamente de sintez sau substane extrase din ciuperci ori
alte organisme, ale cror structuri nu seamn cu ale testosteronului (nu sunt steroizi), dar au
efecte similare sau chiar mai puternice.
10.1.3. Hormoni peptidici, factori de cretere, i substane nrudite cu acestea
Intr aici substane de tipul eritropoietinei, implicate n siteza celulelor roii pentru snge,
hormoni ca insulina implicai n controlul catabolismului (arderilor celulare), hormoni de cretere
care afecteaz muchi, tendoane, ligamente, vascularizare, i altele.
10.1.4. Agoniti beta
Un agonist este o substan care e capabil s se lege n organism de anumii receptori i s
afecteze transmiterea unor semnale. Agonitii beta adrenergici afecteaz cile controlate de
adrenalin (epinefrin), controlnd pulsul, contraciile musculare i viteza anumotior pri ale
catabolismului. Printre cei mai cunoscui din aceast clas este salbutamolul.
10.1.5. Hormoni i modulatori metabolici (alii dect hormonii peptidici)
Intr n aceast categorie unele steroide, modulatori ai metabolismului steroidelor (n special n
relaie cu estrogenul), modulatori ai miostatinei (o protein care blocheaz dezvoltarea
muchilor), i altele.
10.1.6. Ageni diuretici, i ali ageni de mascare
Diureticele favorizeaz eliminarea rapid din organism a unor ageni dopani, i sunt de aceea
interzise ele nsele. De asemenea, produsele care se pot injecta n snge cu scopul de a-l dilua,
sau de a dezactiva ori bloca n el agenii dopani (soluii de albumina, i altele)nsunt interzise.
10.2. Proceduri interzise att n timpul ct i n afara competiiilor
10.2.1. Mrirea artificial a capacitii de transport a oxigenului
n aceast categorie intr injectarea de celule roii, fie provenite fie de la alt persoan fie
prelevate anterior de la sportivul n cauz. Aceast procedur, dei prin adugarea suplimentar
de celule roii permite transportul unei cantiti mai mari de oxigen de la snge ctre muchi i
creier, are riscuri precum infeciile (unele cunoscute, precum hepatita, altele probabil nc
necunoscute ns cu posibile efecte nocive pe viitor), etichetarea greit a grupei de snge (cu risc
letal), depozitarea improprie a sngelui nainte de transfuzie (acesta, chiar refrigerat n condiii
sterile potrivite, are o durat de valabilitate de cel mult o lun), creterea vscozitii cu
probleme pentru circulaie. Este interzis i folosirea de substane care transport oxigenul, altele
dect celulele roii.
10.2.2. Manipularea fizica sau chimic
Este interzis orice aciune care ar avea ca efect modificarea probelor colectate pentru dopaj, sau
a rezultatelor analizelor. De asemenea, eliminarea din circulaie a sngelui, urmat de
prelucrarea lui pentru a-l cura de ageni dopani, sau injecii de mai mult de 50 mL per ase
ore sunt interzise, n afara cazurilor medicale certificate.
10.2.3. Dopajul genetic
Este interzis introducerea de material genetic strin, n scopul de a altera funcionarea corpului,
sau introducerea de celule strine.

43

O scurt introducere n biochimie


10.3. Substane interzise doar pe parcursul competiiilor
10.3.1. Ageni stimulani
Intr n acest categorie att stimulani specifici (care au o anumit int n organsim, afecteaz o
cale metabolic bine definit, precum adrenalina), ct i cei non-specifici. n aceast ultim clas
intr amfetamina (cunoscut i ca speed, sau benzedrina).Despre ea se tie c a fost iniial
sintetizat ca medicament pentru probleme respiratorii; curnd i s-au descoperit proprietile
stimulante mai generale, iar la Olimipiada de la Berlin n 1936 era deja n uz sportiv. Se apreciaz
c pe parcursul celui de-al doilea rzboi mondial armatele combatante au consumat, n ambele
tabere, peste cel puin zeci de milioane de tablete de amfetamin; este bine documentat folosirea
ei i mai trziu, n rzboiul din Vietnam. O mare parte din aceste stiumlente produse pentru uz
militar au rmas nefolosite n parte datorit efectelor secundare serioase ajungnd n schimb
ca droguri pe piaa neagr.
10.3.2. Narcoticele
Intr aici morfina, heroina (diamorfina) i altele.
10.3.3. Canabinoidele
Intr aici compui sau amestecuri provenite din plante (hai, marijuana), dar i substane
sintetice care li se aseamn.
10.3.4. Glucocorticosteroizii
Acetia sunt hormoni steroidici care afecteaz metabolismul glucozei
10.4. Substane interzise selectiv, doar n anumite sporturi
Intr n aceast categorie alcoolul (pentru sporturi precum automobilismul, karate, i altele) i
beta-blocantele (care acioneaz asupra acelorai ci ca agonitii beta, a se vedea mai sus). Ele
sunt fie interzise fie cu utilizare n anumite limite; restriciile sunt valabile doar pe parcursul
competiiilor.

44

O scurt introducere n biochimie

11. Anexe
Anexa 1 Introducere in biochimie.
nc de la nivel celular se poate observa att unitatea ct i diversitatea lumii vii. Cele
mai mici organisme conin o singur celul i sunt microscopice (li se spune adesea microbi,
sau microorganisme), pe cnd organismele multicelulare (cum sunt de exemplu oamenii,
animalele, plantele sau ciupercile) conin tipuri diferite de celule, care variaz n mrime, form
i funcie. n ciuda acestor diferene evidente, compoziia chimic i organizarea celular
seamn foarte mult ntre diversele specii.
Toate organismele vii fac parte din una din cele trei ramuri pe care le cunoatem n
prezent, i despre care se consider c provin dintr-un strmo comun. Arhebacteriile i
eubacteriile au ca proprietate comuna faptul ca sunt monocelulare, i faptul c nucleul celulei lor
nu este delimitat foarte strict de restul citoplasmei (din acest al doilea motiv li se spune i
procariote). Diferenele dintre ele sunt date de mediul n care acestea triesc. Dac eubacteriile
populeaz solul, suprafaa apelor i esuturile altor organisme, arhebacteriile, descoperite mai
recent i caracterizate mai puin din punct de vedere biochimic, triesc n special n habitate
extreme (lacuri srate, mlatini acide sau fundul oceanelor). Organismele din cea de-a treia
categorie, eucariotele, sunt caracterizate de faptul c nucleele lor sunt inconjurate de o membran
separat; multe dintre eucariote sunt multicelulare inclusiv oamenii.
Pe lng bacterii i eucariote, mai exist o clas de entiti numite virui, care nu sunt
organisme vii dar sunt formai din dou categorii de molecule mprumutate de la materia vie.
Anume, viruii conin doar proteine i acizi nucleici fr a avea membran sau citoplasm.
Viruii nu se pot nmuli singuri i nu i pot extrage energie din mediu; ei paraziteaz ns
organismele vii, care i multiplic din eroare, confundndu-i cu componente proprii.
Un alt factor important n clasificarea organismelor este prezena oxigenului molecular n
mediul n care acestea i desfoar activitatea. Organismele aerobe, adic tritoare ntr-un
mediu bogat n molecule de oxigen (O2), i procur energia prin transferul de electroni de la o
substan combustibil la molecula de oxigen (arderi); din aceasta categorie fac parte
majoritatea organismelor cu care suntem familiarizai din viaa de zi cu zi inclusiv noi nine.
Cele anaerobe funcioneaz adesea n moduri similare aerobelor, doar c folosesc n locul
oxigenului alte substane, iar O2 este adesea pentru ele chiar toxic. Spre exemplu,
microorganismele adaptate mediilor anaerobe obin energia necesar proceselor vitale prin
transferul electronilor asupra nitrailor (formnd N2), sulfailor (formnd hidrogen sulfurat H2S)
sau dioxidului de carbon CO2 (formnd metan, CH4).
O alt clasificare a organismelor vii este fcut n funcie de modul n care acestea pot s
obin energia i carbonul necesare n sintezele materialului celular. Dup acest considerent,
organismele se mpart n fototrofe, atunci cnd utilizeaz energia solar sau chemotrofe, cnd
obin energia prin oxidarea unui combustibil. Mai mult, fototrofele se mpart n autotrofe, atunci
cnd tot carbonul de care au nevoie l obin de la CO2 i heterotrofe, cnd necesit compui pe
baz de carbon mai compleci dect CO2 (organici). Nici chemotrofele nu-i pot asigura n
ntregime necesarul de carbon numai de la CO2. Astfel, ele se mpart n litotrofe (sursa este un
compus anorganic piatr) sau organotrofe (sursa sunt compuii organici).
Apa un component esenial al sistemelor vii

45

O scurt introducere n biochimie


Interaciunile fizice dintre molecule sunt foarte importante, att pentru structura ct i
pentru funcionalitatea acestora. Tria i specificitatea interaciunilor sunt dependente de mediul
n care acestea se produc i anume, pentru biologie, apa.
Spre deosebire de ali compui cu o organizare atomic similar (NH3, H2S), apa posed
unele trsturi excepionale. Punctul de fierbere, de topire, cldura de evaporare, tensiunea
superficial sunt mult crescute pentru o substant cu o mas molecular relativ mic, neionic i
care nu conine n structura ei un metal. Aceste proprieti arat c forele de atracie dintre
moleculele de ap sunt foarte mari.
Cei doi atomi de hidrogen din molecula de ap sunt legai covalent de oxigen. n cadrul
acestor legturi, atomul de oxigen, fiind mai electronegativ, atrage electronii mai puternic dect
hidrogenul, conferindu-i moleculei caracterul polar (cu polul negativ la oxigen i cel pozitiv la
hidrogen). Avnd o sarcin parial pozitiv ca urmare a acestei interaciuni, atomul de hidrogen
este n plus atras electrostatic de un atom de oxigen al altei molecule de ap, fenomenul fiind
denumit legtur de hidrogen. Spre deosebire de legturile covalente, care pot fi rupte folosind
o energie de cca 470 kJ/mol, legturile de hidrogen sunt mult mai slabe, necesitnd pentru rupere
doar cca 23 kJ/mol. De asemenea, legturile de hidrogen sunt de aproximativ dou ori mai lungi
dect cele covalente.
Datorit polaritii sale ridicate, apa este un solvent foarte bun pentru substanele ionice
(precum srurile), dar i pentru substanele polare, cum sunt zaharurile, alcolii simpli, aminele,
aldehidele i cetonele, cu care formeaz legturi de hidrogen. Compuii care se dizolv uor n
ap sunt denumii n general hidrofilici. Prin contrast, compuii hidrofobi, cum sunt cloroformul
sau benzenul, dei sunt solveni buni pentru biomoleculele polare, nu pot fi dizolvai n ap,
nefiind capabili de a forma legturi de hidrogen cu aceasta. Moleculele lor mai degrab se
asociaz ntre ele ca urmare a unor fore hidrofobe mult mai slabe i mai puin specifice dect
legturile de hidrogen.
Multe biomolecule, cum sunt proteinele, diferii pigmeni, unele vitamine, steroli i
fosfolipide membranare, conin n structura lor att pri hidrofobe, ct i hidrofile. Astfel de
molecule se numesc amfipatice. Intercaiunile hidrofobe care apar la nivelul lor sunt eseniale
pentru structura i funcionalitatea acestora (ex., membrana celular, proteinele).
Datorit celor dou perechi de electroni din jurul oxigenului, apa este capabil s atace
alte molecule dac acestea au puncte cu sarcin electric pozitiv fie ea net ori parial. n
general, atacul apei are ca rezultat ruperea (hidroliza) legturilor amidice, glicozidice sau
esterice care stau la baza multor molecule din sistemele vii.
O alt caracteristic a apei este reprezentat de tendina uoar de a ioniza, cu formare de
OH i H+. Ionii produi de ctre ap, respectiv concentraia lor molar n special a protonilor,
[H+], sunt baza construirii scalei pH-ului: pH = -log[H+].
Msurarea pH-ului este una dintre cele mai importante i frecvente proceduri din
biochimie. pH-ul afecteaz structura i funcia biomoleculelor, activitatea catalitic a enzimelor
iar msurarea acestui parametru din snge i urin este o metod frecvent utilizat n diagnoza
unor boli. Organismele posed o varietate de mecanisme prin care pH-ul intra i extracelular este
pstrat constant.
Se definete n acest context soluia tampon ca un amestec ce menine pH-ul constant
chiar i atunci cnd i se adaug sau iau protoni. n general, o soluie tampon conine un acid/baz
slab i sarea sa conjugat (cu alte cuvinte, o specie chimic ce se prezint sub dou forme: una
care poate servi drept surs de protoni, i alta care poate servi drept acceptoare). Eficiena unui
astfel de sistem este maxim la pH-ul la care concentraia speciei donoare de proton este egal cu

46

O scurt introducere n biochimie


acea a speciei acceptoare. n preajma acestui punct, definit ca pKa i care este o caracteristic
ce difer de la substan la substan, pH-ul nu se modific dect foarte puin la adausul unui acid
sau al unei baze peste soluia tampon. Intracelular, pH-ul este meninut constant de ctre sistemul
fosfat (HPO42-/H2PO4-) i sistemul histidinic (a se vedea seciunea dedicat aminoacizilor). n
cazul animalelor, pH-ul extracelular este meninut constant de ctre sistemul de tamponare HCO3/H2CO3. Aminoacizii din constituia proteinelor posed unele grupri funcionale care sunt acizi
slabi sau baze slabe. Histidina, molecula de ATP i unii metabolii pot contribui la capacitatea de
tamponare a organismului. De asemenea, este cunoscut exemplul acizilor organici din vacuolele
plantelor sau sistemul tampon amoniacal din urin. n experimentele de laborator se folosesc
adesea soluii tampon ca medii de reacie pentru studierea moleculelor importante biologic,
preparate din diveri compui acetat, fosfat, borat, i altele.

47

O scurt introducere n biochimie


Anexa 2. Glucide
Monozaharide:
n funcie de numrul de atomi de carbon, monoglucidele se mpart n trioze, tetroze, pentoze,
hexoze i heptoze. n funcie de poziia gruprii carbonil la captul moleculei, deci aldehidic,
sau n interiorul moleculei, deci cetonic) i de numrul total de atomi de carbon, monozaharidele
se mpart n aldotrioze, aldopentoze, cetotrioze, cetohexoze, etc. Cea mai simpl aldoz este
aldehida gliceric iar cea mai simpl cetoz este di-hidroxi-acetona. Aldohexoza D-glucoz i
cetohexoza D-fructoz sunt cele mai comune monozaharide din natur. Aldopentozele D-riboz
i 2-deoxi-riboza intr n constituia nucleotidelor din acizii nucleici.
CHO
H

OH

CH2OH

CHO

CHO

D-glicerinaldehida

OH

OH

HO

ALDOTETROZE

OH
CH2OH

CH2OH

D-eritroza

D-treoza

CHO
H

CHO
OH

HO

CHO
H

CHO
OH

HO

HO

ALDOPENTOZE
H

OH

OH

HO

OH

HO

OH

CH2OH

CH2OH

D-riboza
CHO

OH

D-arabinoza
CHO

CHO
H

CH2OH

D-xiloza

D-lixoza

OH HO

OH

OH

HO

HO

OH HO

OH

OH

HO

OH

OH

OH

OH

HO

OH

OH

OH

OH

HO

H
OH

CH2OH

CH2OH

CH2OH

CH2OH

CH2OH

D-aloza

D-altoza

D-glucoza

D-manoza

D-guloza

ALDOHEXOZE

48

H
HO
H

CHO

CHO

CHO

OH HO

OH

CH2OH

CHO

CHO

OH
CH2OH

D-idoza

OH HO

HO

HO

OH
CH2OH

D-galactoza

OH
CH2OH

D-taloza

O scurt introducere n biochimie


CH2OH
C

CETOTRIOZA

CH2OH

D-hidroxiacetona

CH2OH
CH2OH
C

OH

CETOTETROZA

CH2OH

OH

HO

OH

CH2OH

D-eritruloza

OH

CH2OH

CETOPENTOZE

CH2OH

D-riboza

D-xiluloza

CH2OH

CH2OH

CH2OH

CH2OH

OH

HO

OH

HO

OH

HO

HO

OH

OH

OH

OH
OH

CH2OH

D-psicoza

CH2OH

CH2OH

D-fructoza

D-sorboza

CETOHEXOZE

CH2OH

D-tagatoza

Izomeria optic:
Cea mai simpl biomolecul care prezint un centru chiral i, prin urmare, doi izomeri
optic activi (enantiomeri), este aldehida gliceric. Prin convenie, izomerul care prezint
hidroxilul ataat centrului chiral pe partea stng, n formula de tip Fisher folosit n Figurile de
mai sus, face parte din seria D iar cel care prezint hidroxilul pe partea dreapt, face parte din
seria L. Din punct de vedere al proprietilor, singura diferen ntre doi izomeri chirali ine de
modul n care ei afecteaz lumina ce trece prin ei (i chiar acolo, este nevoie de un tip special de
lumin, polarizat). Notaiile D i L nu au legtur cu direcia n care este rotit planul luminii
polarizate. Pentru a sublinia i acest fapt, la denumire se specific prin semnul + capacitatea
dextrogir (de a roti lumina polarizat spre dreapt) sau capacitatea levogir a moleculei
respective. Toate moleculele care au hidroxilul centrului chiral aflat la cea mai mare distan de
gruparea carbonil n aceeai configuraie cu cea a hidroxilului de referin al aldehidei glicerice
face parte din seria respectiv (D sau L). Organismele vii folosesc aproape exclusiv glucide D.
Derivaii monozaharidelor
Ca urmare a unor reacii chimice sau enzimatice se produc diferii derivai monoglucidici.
Vor fi discutai, n cele ce urmeaz, cei mai importani:

49

O scurt introducere n biochimie


1) Esterii fosforici. Prin
CH2OH
condensarea unui acid
CH2OPO32CH2OPO32O
H
O
H
fosforic cu o grupare
H
OH
H
hidroxil
a
unei
OH
monozaharide
se
OPO32H
OH
OH
formeaz
un
ester
H
OH
H
OH
fosforic.
Derivaii
D-fructoza-1,6-bifosfat
-D-glucoza-1-fosfat
fosforici, astfel formai,
sunt stabili la pH fiziologic i ndeplinesc diferite roluri.
H
CH2OH
Fosforilarea glucidelor le activeaz pentru transformrile chimice
O
H
H
care vor avea loc sau le poate controla accesul prin membranele
celulare. Unele glucide fosforilate sunt importani intermediari
H
OH
H
metabolici, altele sunt componente ale nucleotidelor i acizilor
OH
nucleici.
2) Deoxiglucidele sunt monozaharide la care unul sau mai muli
2-deoxi--D-riboza
hidroxili au fost nlocuii cu hidrogen. Spee exemplu, 2-deoxiriboza este constituent a ADN-ului (n al crui nume se i
regsete acid deoxiribonucleic).
3) Derivaii aminici, ca DCH2OH
CH2OH
glucozamina
i
DO
OH
galactozamina, conin n
O
OH
OH
H
plus un atom de azot, sub
H
H
H
OH
H
forma unei grupri NH2
OH
H
(amino). Aceti derivai
H
H
OH
amino glucidici apar n
H
NH2
H
NH2
multe
oligoi
polizaharide, cum este
COOH
galactozamina
-D-glucozamina
chitina, polizaharidul din
C
O
exoscheletul crustaceelor
CH2OH
i al insectelor. Acidul
CH2
muramic i neuraminic,
O
H
H
O
H
C
OH
polizaharide componente
H
ale membranei celulare din
H
O
H3C
C
HN
C
H
organismele superioare i
OH
OH
HO
C
H
din peretele bacterian, sunt
glucozamine. Unii derivai
H
NH2
H
C
OH
de
acid
neuraminic,
CH3-CH-COOH
H
C
OH
cunoscui sub numele de
acizi sialici, sunt larg
CH2OH
rspndii n sistemele
acid N-acetil-D-neuraminic
acidul muramic
bacteriene i animale.
4) Alcoolii glucidici se pot
prepara prin reducerea gruprii carbonil a cetozelor sau aldozelor. Sorbitolul, manitolul i
xilitolul sunt caracterizai de un gust dulce, fiind folosii ca ndulcitori. Ribitolul este
constituentul vitaminelor/coenzimelor flavinice.

50

O scurt introducere n biochimie


5) Acizii glucidici sunt obinui prin oxidarea a unul sau doi atomi de carbon dintr-o glucid,
aprnd astfel grupri COOH
Oligo i polizaharide

H
H
OH

CH2OH
1

H
OH

OH

H
OH

OH
H

OH
H

CH2OH

CH2OH

CH2OH

O
H
OH

H
1 O4

H
OH

OH

OH
H

OH

CH2OH
H

OH

OH

H
OH

H
OH

maltoza

CH2OH

OH

OH

zaharoza

CH2OH

H
OH

OH

CH2OH

H
H
OH

1 O 4

CH2OH

OH

OH

OH

celobioza

lactoza

NH
CH2OH
NH

NHCNH2

OH

NHCNH2

OH

OH

OH

CH2
O

OH OH

OH

OH
OH
O

O
CHO

OH

CH3

H
O

OH
OH

H
O

OH
CH2OH

O
OH
O
OH

OH

OH
H

OH

CH2

OH
OH
OH
CH2OH

NHCH3

OH
O

OH

OH
OH

OH

trehaloza
streptomincina

stahioza

-Amiloza este un lan liniar, n care legturile glicozidice sunt de tipul 14 (unde prin
aceast notaie se indic numerotarea atomilor de carbon din cele dou glucide, care particip la
legtura C-O-C). Lanul polimeric poate varia n greutate, de la ordinul sutelor pn la ordinul
milioanelor. -Amiloza este uor solubil n ap, formnd micelii, cu structuri helicoidale.
Reacioneaz cu iodul care poate ptrunde n zonele mai hidrofobe, formnd un complex
caracteristic, de culoare albastr, ntr-un proces foarte des utilizat n laboratoarele de analiz.

51

O scurt introducere n biochimie


Amilopectina este un polimer ramificat ntlnit n amidon. Prezint o caten similar amilozei, dar spre deosedire de aceasta prezint i ramificaii (16), cte una la aproximativ 830 uniti monoglicidice. Masa molecular a acestui polimer este de ordinul sutelor de milioane.
La fel ca -amiloza, amilopectina formeaz micelii n ap, acestea dnd cu iodul o coloraie rouviolet.
Plantele depoziteaz amidonul n cloroplaste, locul n care se desfoar fotosinteza, i
n amiloplaste particule specializate pentru depozitarea acestuia. Printr-un clivaj fosforilitic,
realizat de ctre amidon fosforilaze, se elibereaz treptat glucoz. Legturile (16) din
amilopectin nu sunt susceptibile atacului fosforilazelor.
-amilaza, o exoamilaz prezent la plante i microorganisme, scindeaz dizaharidele
(maltoza) de la captul rezervelor poliglucidice. Nici -amilaza, nici -amilaza nu pot scinda
legturile (16) din amilopectin. Singura enzim capabil de a distruge asceste legturi este
(16) glucooxidaza.
Alginatul este o polizaharid ntlnit n algele brune. Atunci cnd nu leag nici un ion,
acetia au o structur asemntoare celulozei, pe cnd legarea unui ion (de litiu, calciu, sodiu sau
potasiu) modific structura acestora ntr-una de helix.
Acidul hialuronic, alctuit din acid D-glucoronic i N-acetilglucozamin, este un lichid
vscos care servete ca lubrifiant coninut n lichidul sinovial de la nivelul articulaiilor i din
umoarea vitroas a ochilor vertebratelor. De asemenea, acidul hialuronic este un component
esenial al cartilajelor i tendoanelor.
Condroitin sulfatul, cu rol imortant n reglarea tensiunii la nivelul cartilajelor,
tendoanelor i al aortei, se deosebete prin dou aspecte de acidul hialuronic: este un polimer mai
scurt i este legat covalent de proteine.
Keratan-sulfaii, prezeni n cornee, cartilaje, oase i alte structuri (pr, unghii, coarne)
nu prezint acid hialuronic n componena lor.
Heparina, un anticoagulant secretat de ctre unele leucocite, este eliberat n circulaia
sangvin, unde, prin legarea de o protein - trombina, inhib coagularea sngelui.
CH2OH

CH2OH

CH2OH

CH2OH

CH2OH

amiloza
CH2OH

CH2OH

CH2OH

CH2OH

CH2OH

amilopectina

52

CH2OH

CH2OH

CH2

O scurt introducere n biochimie


HO

OH
O

HO
O

O
O

HO

CH2OH
OH

HO

H
OH

H
H
OH

CH2OH

celuloza

H
OH

NH

CCH3

H
H

CH2OH

NH

NH

CCH3
O

CCH3
O

chitina

CH2OSO3O
H
H
OH

CH2OH

OSO3-

H
COOH
OH

CH2OH
OH

NHCOCH3

NHCOCH3

H
H

O
H

OH

OH

cheratan sulfat

condroitin-4-sulfat

CH2OH
H
-

COO
H

O
H
OH

CH2OSO3O
H
H
OH

COOH

OSO3-

NHSO3-

O
H
OH

OH

acid hialuronic

heparina

53

O
H

OH

O
H

O
H
O

NHCOCH3

O scurt introducere n biochimie


Anexa 3. Lipide
Unitile din terpene sunt legate n lanuri cu caten dreapt sau n structuri ciclice.
Monoterpenele (conin dou uniti izoprenice) sunt produse de ctre plantele superioare, n timp
ce sesquiterpenele (trei uniti izoprenice) i diterpenele (patru uniti izoprenice) sunt mai puin
cunoscute.
MONOTERPENE

DITERPENE

CHO

CH2OH

OH

citronelal

limonen

POLIPRENOLI

mentol

CH3
H2
C C C
H

CH3
H2 H2
C C C CH2 CH2 O
H

TRIPTERPENE

O-

P
-

13-23
dolicol fosfat

fitol

SESQUITERPENE

CH3
H3C

CH3 H3C

H
H
3

HO
CH3

HO
squalena

lanosterol

vitamina E (a-tocoferol)

bisabolen

TETRATERPENE
CHO

all-trans-retinal

licopen

O
O

CH3

H3CO

CH2CH

CH3

O vitamina K1

H3CO

vitamina K2

O
coenzima Q

CCH2 H
10

Membranele biologice nu sunt nite structuri rigide, statice ci, din contr, att lipidele
ct i proteinele componente se pot deplasa att n plan lateral ct i transversal. n bacterii de
exemplu, astfel de deplasri pot duce o lipid de la un capt al membranei pn la cellalt n mai
puin de o secund. Proteinele membranare pot forma clusteri, formai prin auto-asamblarea
acestora sau complexe multiproteice, care efectueaz diferite funcii n membran.
Asimetria transversal a membranei este, de asemenea, foarte important avnd n
vedere rolurile diferite pe care le au cele dou fee ale membranei. Gruprile carbohidrat ale
glicolipidelor se gsesc pe faa extern, unde particip la fenomenul de recunoatere celular, iar
sarcina total a celor dou fee membranare, determinat de distribuia diferit a lipidelor,
afecteaz potenialul membranar i implicit, funcionarea unor canale ionice i a altor proteine
membranare.
Crearea i meninerea asimetriei lipidice transversale este dependent de activitatea
flipazelor, proteine cu rol de a transporta rapid sau foarte rapid lipidele, printr-un proces pasiv
respectiv printr-unul ATP-dependent.

54

O scurt introducere n biochimie


Anexa 4 Proteine
Dintre cei 20 de aminoacizi, opt nu pot fi sintetizai n organismul uman, fiind obinui
doar pe calea alimentaiei - i se numesc de aceea aminoacizi eseniali: Val, Phe, Leu, Ile, Thr,
Trp, Met, Lys.

Acid aspartic
(Asp, D)

Acid glutamic
(Glu, E)

Asparagin
(Asn, N)

Glutamin
(Gln, Q)

Tirozin (Tyr, Y)
Lizin (Lys, K)

Treonin
(Thr, T)

Cistein (Cys, C)
Histidin
(His, H)

Alanin (Ala, A)

Metionin
(Met, M)

Prolin (Pro, P)
Fenilalanin
(Phe, F)

Izoleucin (Ile, I)
Triptofan
(Trp, W)

Glicin (Gly, G)

Serin (Ser, S)

Valin (Val, V)

Leucin (Leu, L)
Arginin (Arg, R)
Att aminoacizii n stare liber ct i peptidele au un punct izoelectric (pI) caracteristic,
punct la care numrul sarcinilor pozitive ale moleculei este egal cu numrul sarcinilor negative,
sarcina total fiind zero. La valori mai mici ale pH-ului, sarcina aminoacidului sau proteinei
devine pzoitiv din cauza atarii de exces de protoni; la pH mai mare, sarcina devine negativ

55

O scurt introducere n biochimie


Lungimea lanului peptidic variaz de la o protein la alta. Spre exemplu, citocromul c
uman conine n lanul su polipeptidic 104 aminoacizi legai ntr-un singur lan, iar, titina
proteina care ajut la contracia muchilor, are ntre 27000 35000 aminoacizi i o mas
molecular aprox. 3000000 Da.
O parte din proteine sunt formate dintr-un singur lan polipeptidic, iar altele au dou sau
mai multe polipeptide asociate necovalent, care pot fi similare ntre ele sau diferite i se numesc
oligomere iar unitile identice se numesc protomeri. Un exemplu n acest sens, este
hemoglobina, format din patru subuniti polipeptidice, legate necovalent ntre ele: dou lanuri
identice i dou lanuri identice. Fiecare subunitate este mpachetat ntr-o form identic
cu subunitatea ; astfel, ea poate fi considerat fie o protein tetrameric format din patru
subuniti, fie o protein dimeric format din protomerii .
ntr-un numr mai mic sunt proteinele care conin dou sau mai multe lanuri
polipeptidice legate covalent. Un exemplu este insulina, o protein secretat de pancreas, care
regleaz concentraia glucozei n snge. Molecula insulinei este alctuit din dou lanuri
polipeptidice liniare (A i B) legate ntre ele prin puni disulfurice (legturi sulf-sulf ntre dou
cisteine).
Comparnd structurile primare ale proteinelor se pot identifica proteine omoloage
(proteine nrudite de-a lungul evoluiei, care deriv din acelai strmo; au structuri similare
formeaz familii i superfamilii, i sunt considerate proteine diferite).
Compoziia aminoacizilor n structura proteinelor variaz n mare msur. n majoritatea
proteinelor se gsesc cei 20 de aminoacizi comuni, prezeni de obicei, n cantiti similare;
excepii sunt His, Cys, Met, Tyr i Trp care se gsesc n cantiti mai mici. Unele proteine
specializate, au o compoziie neobinuit: colagenul conine 33% glicina i 21% prolin+resturi
de hidroxiprolin, majoritatea proteinelor din saliv conin 22% glutamat + glutamin i 20-45%
prolin.
Structura secundar reprezint aranjamentul spaial a catenelor polipeptidice, organizare
generat i stabilizat datorit legturilor de hidrogen care se stabilesc intracatenar ntre gruprile
NH- i gruprile >C=O ale legturii peptidice. Formarea acestor legturi de hidrogen este
posibil datorit distribuiei diferite a electronilor la nivelul legturii peptidice, care devine parial
ionizat deoarece atomul de O prezint un exces de electroni, iar protonul de la atomul de N un
deficit de electroni. Chiar dac legturile de hidrogen sunt legturi slabe, stuctrura secundar este
stabil datorit numrului mare de legturi de hidrogen i de repartizarea lor uniform de-a lungul
catenelor polipeptidice. Structura secundar este prezentat de cele mai multe ori prin dou
modele: -helix i foi -pliate.
Modelul -helix este cea mai comun form de structur secundar i rezult din
spiralarea catenei polipeptidice ntr-o elice orientat de la stnga la dreapta, unde toate gruprile
R ale aminoacizilor sunt orientate spre exteriorul elicei; fiecare spiral conine 3,6 aminoacizi.
n modelul -pliat catena polipeptidic are un aspect de zig-zag pliat n dreptul atomului
de C care poart gruprile COOH i HN2 unde se realizeaz legturile de hidrogen: acestea se
realizeaz intre dou poriuni de caten diferite, aliniate una fa de cealalt fie paralel fie
antiparalel. Proteinele cu structura -pliat sunt flexibile, dar nu elastice.
Structura teriar se refer la aranjamentul catenelor polipeptidice n spaiul
tridimensional i se datoreaz stabilirii unor fore de legtur ntre lanurile laterale ale catenei
polimere. Legturile care se stabilesc sunt: legturi de hidrogen (ntre gruparea carbonil C=O i
gruparea NH- sau ntre gruparea hidroxil OH i azotul iminic =NH), legturi disulfurice
(covalente, se stabilesc ntre gruprile de sulf de la resturile de cistein), legturi ionice (n

56

O scurt introducere n biochimie


special ntre gruprile amino de la lizine i arginine i gruprile carboxil de la acizii aspartic i
glutamic), legturi coordinative (n cazul metaloproteinelor) i interaciuni hidrofofe (ntre
resturile hidrofobe ale aminoacizilor).
Structura cuaternar este un mod superior de structurare al proteinelor i se refer la
aranjamentul n spaiu al proteinelor care conin dou sau mai multe polipeptide cu participarea
acelorai fore care determin structura teriar dar ntre catene diferite.
Avnd n vedere aceste nivele de structurare a proteinelor se clasific n dou mari clase:
fibrilare i globulare.
1. Proteinele fibrilare sunt formate din lanuri polipeptidice liniare, paralele care formeaz
filamente sau foi; sunt insolubile n ap (proprietate datorat aminoacizilor hidrofobi prezeni
ntr-un numr foarte mare) i intr n structura esuturilor conjuctiv. Exemple de astfel de proteine
sunt: -keratina (n piele, pr, unghii, coarne, copite, ln), colagenul (n tendoane, oase, piele,
pereii vaselor de snge, n esutul conjunctiv alturi de elastin i are o structur deosebit fa
de celelalte proteine: conine trei catene, fiecare urmnd un model de helix care se rotete de la
dreapta la stnga) i fibroina (produs de insecte i paianjeni, se gsete n mtasea natural i n
pnza de paianjen, iar n stuctura ei predomin conformaia antiparalel).
2. Proteinele globulare au o structur mult mai complex dect a proteinelor fibroase, iar
forma lor este, ntr-o oarecare msur sferic, globular. Prima protein globular a crei
structur tridimensional a fost determinat exact a fost mioglobina. Prezent n muchii
scheletici i cardiaci, ea are rolul de a stoca oxigenul. Este o metaloprotein relativ mic, format
dintr-un singur lan polipeptidic n interiorul creia se afl componenta neprotein pe baz de fier,
hemul. Aceeai grupare heminic o nglobeaz i cele patru catene polipeptidice ale
hemoglobinei: dou catene de tip i dou de tip . Rolul hemoglobinei este de a transporta
oxigenul de la plmni la esuturi.
Denaturarea proteinelor
Proteinele i exercit funciile specifice n organism, n anumite condiii (temperatur,
pH, concentraia de sruri). Schimbarea acestor parametri poate cauza, ntr-o oarecare msur,
modificarea activitii lor, modificare datorat de obicei unor schimbri n structura proteinelor.
Pierderea n structura tridimensional suficient nct s cauzeze pierderea funciei proteinei se
numete denaturare. Printre factorii care contribuie la denaturarea proteinelor sunt: cldura, pHurile extreme (modific sarcina net a proteinei cauznd repulsii electrostatice i distrugerea unor
legturi de hidrogen), unii solveni organici (ex., alcooli sau aceton), concentraii mari din unii
compui chimici (guanidina, ureea), sau detergenii. De cele mai multe ori, denaturarea este
ireversibil, un exemplu bun n acest sens fiind coagularea albuminei din albuul de ou prin
fierbere.
Funciile proteinelor:
Cataliza enzimatic. Cele mai multe reacii din organism sunt catalizate de proteine specializate,
numite enzime.
Rol regulator. Proteinele cu aceasta funie sunt hormonii. Ei controleaz ci metabolice prin
reglarea nivelului unor anume metabolii, procese sau stri. Astfel, insulina are rolul de a scdea
concentraia de glucoz din snge, tirotropina stimuleaz secreia glandei tiroide, etc.
Transport i stocare. Hemoglobina i mioglobina, sunt dou proteine care au nglobate n partea
proteic i o component neproteic, hemul, n centrul creia se afl Fe2+ legat la patru atomi de
azoi. Atomul de Fe face posibil legarea oxigenului de ctre aceste proteine: Hb are rolul de a-l

57

O scurt introducere n biochimie


transporta la esuturi, iar Mb de a-l stoca n muchi. Pe lng aceasta, Hb mai transport produsul
final al respiraiei, CO2, de la esuturi la plmni. Albumina este o alt protein transportoare; se
gsete n cantiti mari n plasma sangvin i transport hormoni, vitamine, medicamente, ioni
de calciu i ajut la coagularea sngelui. Aquaporina este o protein membranar care are rol de
canal selectiv de ap; prin aceasta, aquaporina intervine n reglarea transferului de ap la nivelul
rinichiului, tubului digestiv, creierului, glandelor salivare, vaselor de snge, hematiilor,
plmnilor i cristalinului.
Rol de depozitare. Exemple de proteine cu acest rol sunt cazeina, component proteic major
din lapte, ovalbumina se gsete n ou, zeina este proteina de rezerv din boabele de porumb,
feritina uureaz acumularea ionilor de fier n splin.
Rol n coordonarea micrilor. Fie c vorbim de micarea macromoleculelor din interiorul
celulelor, fie c vorbim de micarea organismului, oricare din aceste aciuni sunt posibile prin
activitatea unor proteine ca: miozina i actina. Aceste dou proteine intr n componena
muchilor i determin contracia lor.
Rol structural. Proteinele structurale sunt reprezentate de proteinele care intr n structura
membranelor biologice, a esuturilor i organelor: -keratina face parte din structura pielii,
prului, unghilor; coafarea prului se datoreaz proprietii keratinei de a se contracta. Colagenul
se afl n tendoane, oase, piele, pereii vaselor de snge, n esutul conjunctiv alturi de elastina,
iar fibroina, se gsete n mtasea natural i n pnza de paianjen.
Rol de Aprare. Proteinele cu rol de aprare sunt implicate n diferite procese de aprare a
organismului de anumii factori externi. Cele mai studiate proteine sunt: anticorpii - proteine care
formeaz compleci cu corpurile strine organismului, neutraliznd materialul exogen; trombina
particip la procesul de coagulare a sngelui; fibrinogenul este precursorul fibrinei, implicat tot
n coagularea sngelui
Proteine exotice. O parte din ele se gsesc n diferite plante: monelina, brazeina, filodulcina au
gust dulce i putere de ndulcire foarte ridicat, altele n animale (picioarele puricilor): resillina
protein cu proprieti elastice. Teste efectuate pe fii de rezilin artificiale au demonstrat c
materialul poate fi ntins pn la de trei ori lungimea sa original fr a se rupe.
Enzime
n funcie de reaciile pe care le catalizeaz, enzimele au fost clasificate n 6 clase. Fiecare
enzim este nregistrat ntr-un catalog oficial cu un anumit numr, format din patru cifre i un
nume sistematic ce include gruprile implicate n reacia catalizat de enzima respectiv (spre
exemplu lactat dehidrogenaza are numrul 1.1.1.27: face parte din clasa 1-clasa
oxidoreductazelor, sub-clasa 1.1-grupa CH-OH ca i donor de electron, sub-sub-clasa1.1.1NaD(P)+ ca i acceptor de electron).
1. Oxidoreductaze - catalizeaz reacii cu transfer de electroni;
2. Transferaze - catalizeaz transferul de diferite grupri dintr-o molecul;
3. Hidrolaze asigur ruperea unor legturi chimice folosind ca reactant apa;
4. Liaze catalizez reacii de eliminare i adiie;
5. Izomeraze - transfer grupri la dublele legturi n vederea formrii obinerii de
compui izomeri;
6. Ligaze (sintetaze) catalizeaz reacii de condensare a dou molecule.
Unele enzime folosesc la centrii activi/catalitici resturi de aminoacizi, altele folosesc un
component chimic adiional. Partea proteic din enzim se numete apoenzim sau apoprotein,
iar dac coenzima, sau ionii metalici sunt legai covalent, partea neproteic se numete grupare

58

O scurt introducere n biochimie


prostetic. Exemple de enzime care folosesc aminoacizi ca i grupare funcional sunt
chimotripsina, pepsina, lizozimul, sau alcool dehidrogenaza; enzime care folosesc ioni metalici
ca i cofactori sunt citocrom oxidaza, catalaza (Fe2+ sau Fe3+), ceruloplasmina (Cu2+), piruvat
kinaza (K+), ADN polimeraza, anhidraza carbonic, alcool dehidrogenaza (Zn2+), glutation
peroxidaza (Se); enzime care folosesc ca i grupare funcional coenzime: piruvat dehidrogenaza
(tiamin pirofosfat), alcool dehidrogenaza (nicotin adenin dinucleotid), acetil-CoA carboxilaza
(coenzima A), metilmalonil-CoA mutaza (vitamina B12)
Inhibiia enzimatic
Multe substane pot afecta procesele metabolice prin faptul c influeneaz activitatea
enzimelor, micornd activitatea lor. Inhibiia este un fenomen prin care un compus cu o structur
asemntoare substratului interacioneaz cu enzima, iar compusul rezultat nu poate genera
produsul dorit. Inhibiia st adeseori la baza funcionrii a multor produse farmaceutice, i este
normal aceasta, deoarece enzimele catalizeaz toate procesele celulare. Un exemplu este aspirina,
care inhib enzima ce catalizeaz primul pas n sinteza prostaglandinelor, compui implicai n
multe procese, inclusiv cel care produce durerea.
Exist dou tipuri de inhibitori: reversibili i ireversibili. Cei reversibili se leag
necovalent i nu cauzeaz schimbri permanente activitii enzimei, pe cnd cei ireversibili se
leag covalent i modific n totalitate inta enzimei. Cel mai comun tip de inhibiie reversibil
este cea competitiv; are loc atunci cnd un inhibitor competitiv, concureaz cu substratul pentru
situsul activ al enzimei. Acest tip de inhibiie are semnificaie i aplicaie deosebit n controlul
metabolic i efectul medicamentelor. Un exemplu de inhibiie competitiv, folosit n medicin
este cazul pacienilor care au nghiit metanol, un solvent folosit, spre exemplu n antigel. Enzima
din ficat, alcool dehidrogenaza convertete metanolul ntr-o alt substan (formaldehida) care
provoac probleme la vedere. Soluia este infuzia intravenoas cu etanol, acesta devenind substrat
pentru enzima respectiv.
Dac inhibitorii nu concureaz cu substratul pentru situsul activ al enzimei sunt fie pur
noncompetitivi, fie noncompetitivi micti, iar n practic se ntlnesc numai pentru enzimele care
au mai mult de dou substraturi iar efectele lor nu pot fi nlturate prin creterea concentraiei
celuilalt substrat. Inhibitorii pur noncompetitivi se leag de enzime, ntr-un situs diferit de cel la
care se leag substratul.
Inhibiia ireversibil are loc atunci cnd inhibitorii se leag covalent la enzim,
distrugndu-i gruparea funcional necesar pentru activitatea ei. Un exemplu este cel al enzimei
care acioneaz asupra dopaminei i serotoninei, micornd nivelul lor n creier. Nivelul lor
sczut este asociat n medicin cu Parkinson-ul i depresia, iar pentru a le combate este folosit un
medicament care acioneaz ca distrugtor pentru enzima respectiv.
De asemenea mai putem vorbi de inhibiie atunci cnd produsul rezultat interacioneaz
cu enzima, caz n care se numete inhibiie de produs sau cnd, n amestecul de reacie este
introdus o concentraie prea mare de substrat, astfel nct are loc o scdere a vitezei de reacie,
caz n care se numete inhibiie de substrat.
Activitatea catalitic a enzimelor poate fi modificat de anumii compui, care se leag
necovalent ntr-un situs diferit de cel activ, numit situs alosteric.
Precum s-a menionat, n reacia catalitic pot participa i grupri neproteice, numite
cofactori. O parte mare din aceti cofactori sunt formai prin modificarea unor substane eseniale,
numite vitamine. Vitaminele nu pot fi sintetizate de ctre organism, ns prezena lor n corpul
uman este necesar pentru realizarea unor funcii eseniale ale acestuia. n funcie de solubilitatea

59

O scurt introducere n biochimie


lor n ap, vitaminele se clasific n dou categorii: hidrosolubile i liposolubile. Din prima
categorie fac parte: vitamina B1 (tiamina, implicat n metabolismul glucidelor iar carena ei
provoac boala numit beri-beri), riboflavina (B2, particip la reacii care servesc la prelucrarea
glucidelor, lipidelor i proteinelor), acidul nicotinic (vitamina B3), vitamina B5 (coenzima A, pe
baz de acid pantotenic, particip n toate cile metabolice ale organismului), vitamina B6
(piridoxina, implicat n multiple reacii din organism), vitamina B12 (cobalamina, cu rol
important n funcionarea sistemului nervos, n sinteza ADN-ului i fierului n procesul de
maturizare a globulelor roii, etc. iar deficiena conduce la anemia pernicioas), vitamina C
(antioxidant iar lipsa acesteia conduce la scorbut), acidul folic (particip la formarea hemului),
biotina, acidul lipoic. n categoria vitaminelor liposolubile intr vitamina A (cu rol n vedere,
cretere i dezvoltare), vitamina D (rol n reglarea circuitului calciului i fosforului), vitamina E
(rol antioxidant), vitamina K (factor de coagulare).
Vitamina B1 particip la reacii cheie ale cilor de transformare a glucidelor, prin faptul c
intr n constituia enzimelor care catalizeaz decarboxilarea acidului piruvic i a cetoglutaratului
n degradarea aerob a glucidelor i n constituia unor enzime numite transcetolaze care particip
la degradarea glucozei.
Vitamina B2 odat absorbit n intestin este supus unei reacii (de fosforilare) cu
producerea formelor coenzimatice flavinmononucleotid (FMN) i flavinadenindinucleotid (FAD)
care intr n componena unor enzime din clasa oxidoreductazelor i realizeaz transportul
hidrogenului n procesul de respiraie celular.
Vitamina B6 este prezent n natur sub trei forme i intr n compoziia unor enzime care
catalizeaz reacii de transformare a aminoacizilor, cele mai importante fiind cele de
decarboxilare i dezaminare.
Vitamina B12 particip la dou categorii de reacii biochimice: reacii de transmetilare prin
intermediul crora se sintetizeaz metionina i reacii de transformare care constau n transportul
hidrogenului i formarea unei noi legturi C-H. Foarte important este i participarea vitaminei
B12 la sinteza acizilor nucleici.

60

O scurt introducere n biochimie


Anexa 5 Acizi nucleici
CH2
OH
n ADN i ARN gruparea 5-fosfat a unei uniti nucleotidice HO
se poate lega de gruparea 3-OH a urmtoarei nucleotide, formnd o
O
caten liniar orientat n direcia 5-3. Captul 5 se termin cu un
fosfat, iar captul 3 cu un OH liber. n acest mod, se formeaz toate
OH
OH
dinucleotidele, trinucleoteidele i polinucleotidele. ADN-ul poate
conine sute de milioane de astfel de nucleotide legate prin puni
D-riboza
fosfodieste
NH2
O
a
rice.Toate
HO
CH2
OH
legturile
N
N
N
NH
fosfodieste
O
rice
au
N
N
aceeai
N
N
NH2
H
H
guanina
OH
H
orientare
adenina
de-a
O
O
NH2
D-2'-deoxiriboza
lungul
H3C
lanului, dndu-i, astfel, fiecrei
NH
NH
N
catene liniare o anumit polaritate.
O secven de aminoacizi,
N
O
N
O
din
orice
protein, corespunde unei
N
O
H
H
H
secvene nucleotidice specifice din
citozina
timina
ADN. Secvena din ADN care
uracil
conine informaia necesar pentru
sinteza
unei
proteine se numete
NH2
NH2
gen. O celul are
N
N
N
N
mii de gene, toate
coninute
n
N
N
O
N
N
molecula de ADN.
HO
O P O
O serie de
O
O
H
H
macrocicluri
OH
H
H
H
aromatice,
H
H
OH
OH
OH
OH
molecule hidrofobe
NH2
NH2
de
grsime
i
adenozina
adenozin-5' monofosfat
N
nuclee heterociclice
N
N
N
ca bromura de
N
etidiu,
acridina
N
N
O
O
O
N
portocalie
i
O
O P O P O P O
O
O
atomicina D se pot
H
H
H
H
OOOinsera ntre bazele
H
H
H
O P
O
H
azotate ale ADNOH
OH
ului, deformndu-l.
O
Aceti ageni sunt
adenozin-5'-trifosfat (ATP)
adenozin monofafatul ciclic
cunoscui
sub
denumirea de ageni de intercalare.

61

O scurt introducere n biochimie


ADN-ul uman apare sub forma cromozomilor, structuri bine mpachetate cu ajutorul
proteinelor histonice i non-histonice. Astfel, structura liniar a ADN-ului celular, de aproximativ
2 m n lungime, se nfoar n jurul unui octamer proteic format din histonele H1, H2A, H2B, H3
i H4. Nucleozomii, la rndul lor, se grupeaz ntr-o structur de organizare superioar,
solenoidul. Aceasta apare sub forma unui lan de mrgele, avnd 6 nucleozomi/tur. Aceste
filamente formeaz bucle, 18 bucle aranjndu-se radiar sub forma unei minibenzi.
Capetele cromozomilor eucarioi prezint secvene de nucleotide repetate n tandem (n
cazul cromozomului uman: TTAGGG repetat de 1000-1700 de ori) denumite telomeri. Rolul lor
este de a pstra integritatea cromozomial i de a proteja ADN-ul mpotriva rearanjrii i
degradrii. Dup ficare ciclu celular, aceste structuri se scurteaz datorit pierderii de nucleotide,
astfel, ADN-ul devine din ce n ce mai scurt, pierzndu-i integritatea, acest fapt fiind o parte a
procesului de mbtrnire.
ARN-ul celular difer mult n structur, mrime i durat de via. Marea majoritate este
reprezentat de ARN-ul ribozomal, component al ribozomului. Acesta este compus din dou
subuniti diferite ca mrime, alctuite din ARN i proteine, n a cror asociere, un rol important
l are concentraia ionilor de Mg.
ARNm este sintetizat n timpul fazei de tranziie pe baza unei catene de ADN nuclear i
servete la transportul informaiei genetice, din nucleu n citoplasm acolo unde ea este citit de
ribozom. i cellate forme de ARN sunt sintetizate n aceeai manier pe baza ADN-ului, dar
numai secvenele din ADN care codific proteine sunt transcrise n molecula de ARN. La
procariote, o singur molecul de ARN conine informaia pentru sinteza a mai multe lanuri
polipeptidice. n schimb, ARNm eucariot codific numai o protein, dar procesul este mult mai
complex,pentru c prezint i segmente crora le lipsete capacitatea de a codifica proteine,
denumite introni, n alternan cu exonii, segmentele care conin informaie. De obicei, durata
timpului de via este scurt, el fiind distrus imediat dup ndeplinirea rolului su.
ARNt funcioneaz n timpul translaiei, ca un liant ntre acizii nucleici i proteine.
Conine aproximativ 70-90 de nucleotide, recunoate codonii (trei baze succesive formaz un
codon) specifici din ARNm cu anticodonii lui i transport aminoacizii corespunztori fiecrui
codon, din citosol pn la locul sintezei catenei polipetidice (ribozom). Fiecare din cei 20 de
aminoacizi care intr n alctuirea proteinelor are cel puin o specie de ARNt care l aduce la
ribozom, unde va fi adugat lanului polipeptidic n formare. Unii aminoacizi pot fi condui n
acest fel de ctre mai muli ARNt. De exemplu, n cazul leucinei, 5 molecule diferite de ARNt
servesc acestui scop.
Stabilitatea acizilor nucleici este afectat de o serie de factori care conduc la alterarea sa.
Aceste modificri pot fi att pozitive, cum este separarea catenelor naintea fazei de replicare i
transcripie ct i negative, asociate cu apariia bolii i a cancerului.
Separarea catenelor ADN-ului poate fi determinat de creterea temperaturii,
modificarea pH-ului i a triei ionice. Dac aceti factori sunt ndeprtai, acizii nucleici se pot
renatura, formnd structura dublucatenar. Aceast proprietate st la baza formrii hibrizilor
ADN-ADN, ADN-ARN, ARN-ARN. Tehnica hibridizrii este folosit n genetica molecular
modern, pentru detectarea secvenelor similare de ADN de la diverse specii sau din genomul
aceleeai specii. Aplicarea acestei tehnologii poate face posibil identificarea unui individ pe
baza unui singur fir de pr rmas la locul crimei sau pe baza ei se poate prezice cu cteva decenii
nainte, apariia unei boli. Asocierea ADN-ARN are ns i aplicaii n medicin.
Modificarea structurii covalente ale bazelor purinice i pirimidinice este o alt
modalitate prin care structura ADN-ului este alterat. Acest fapt produce schimbri permanente

62

O scurt introducere n biochimie


n informaia genetic codificat, acestea sunt cunoscute sub numele de mutaii, iar acumularea
lor este asociat cu apariia bolii i a cancerului.
Unele nucleotide pierd, n mod spontan, gruprile amino exociclice (dezaminare),
transformndu-se n alte baze. De exemplu, n anumite condiii celulare, citozina se poate
tranforma n uracil sau adenina n guanin. n cazul ADN-ului, uracilul este privit ca strin i este
ndeprtat de ctre sistemul reparator. Dac ADN-ul ar conine uracil n loc de timin,
recunoaterea uracilului produs ca urmare a dezaminrii citozinei ar fi mult mai dificil, acest
fapt ducnd la schimbri permanente i n secvena catenei nou sintetizate.
Toate formele de via sunt expuse energiei bogat n radiaii, capabil s cauzeze
schimbri chimice n ADN. Radiaiile UV, de exemplu, pot produce dimeri pirimidinici i alte
modificri chimice ale ADN-ului bacterian sau al celui din pielea omului.
O serie de reactivi chimici, rezultai n urma activitilor industriale pot, de asemenea,
produce distrugeri ale ADN-ului. Un potenial accelerator al dezaminrii bazelor este HNO2 sau
bisulfitul. Datorit acestei caracteristici, aceti compui chimici sunt folosii n conservarea
alimentelor. O alt categorie este cea a
agenilor alchilani, capabili de a metila bazele
H3C
O
O
purinice.CH2 CH2 Cl
H C
3

S
O

N
O

H3C

H3C

dimetilsulfat

dimetil nitrosamina

H3C

Cea CH
mai important
surs a alterrii
Cl
2
mutagenetice este stresul oxidativ. Speciile
reactive
de oxigen
nitrogen
mustard cum sunt (apa oxigenat,
ionul hidroxil i superoxidul) sunt responsabili
CH2

pentru cele mai multe oxidri ale ADN-ului.


Principala funcie a replicrii ADN-ului este asigurarea unui transfer fidel al informaiei
genetice de la celula parental la celulele fiice. Acest proces este complex i implic multe funcii
celulare i mecanisme de reparare. In celula de E. coli sunt implicate n jur de 30 de proteine, iar
n cazul celulei eucariote, complexitatea procesului este mult mai mare. Replicarea este
semiconservativ, n sensul c fiecare caten a ADN-ului servete drept matri pentru formarea
unei noi catene. Astfel, la sfritul acestei faze, cromozomii vor conine o caten veche, provenit
de la celula parental i una nou sintetizat pe baza acesteia.
Molecula de ARNm nu are n ea nsi o afinitate fa de aminoacizi, prin urmare,
traducerea informaiei genetice de pe o molecul de ARNm ntr-o secven de aminoacizi
necesit prezena unei molecule adaptor. Aceast molecul trebuie s recunoasc o secven
specific de ARN pe de o parte, iar pe de alt parte, trebuie s recunoasc un aminoacid specific.
Cu ajutorul unei astfel de molecule, celula poate sa-i direcioneze aminoacizii n poziia potrivit
din secvena unei proteine, n condiiile n care gruprile funcionale ale aminoacizilor nu vin de
fapt n contact cu matria de ARNm.
Pentru sinteza celor 20 de aminoacizi care intr n alctuirea proteinelor este nevoie de
cel puin 20 de codoni care s alctuiasc codul genetic. Fiecare aminoacid este codificat de cte
o unitate format din trei nucelotide, numit codon; avnd la dispoziie patru nucleotide, codul
genetic conine 64 de codoni. Unii codoni au funcii specifice. Codonul iniial AUG este cel mai
comun semnal pentru nceperea lanului polipeptidic n celul, pe lng faptul c el codific i
aminoacidul metionin aflat ntr-o poziie intern a lanului. Codonii terminali, denumii adesea
codonii stop sau non-sens, sunt semnale pentru ntreruperea sintezei lanului polipeptidic i nu

63

O scurt introducere n biochimie


codific nici un aminoacid. Odat ce citirea ARN de ctre ribozom a nceput la un anumit codon
specific, mesajul este citit fr punctuaie, ntr-o secven continu de triplete nucleotidice, pn
cnd se ajunge la codonii stop.
U
C
A
G
UUU
Phe
UCU
Ser
UAU
Tyr
UGU
Cys
UUC
Phe
UCC
Ser
UAC
Tyr
UGC
Cys
U
UUA
Leu
UCA
Ser
UAA
Stop UGA
Stop
UUG
Leu
UCG
Ser
UAG
Stop UGG
Stop
CUU
Leu
CCU
Pro
CAU
His
CGU
Arg
CUC
Leu
CCC
Pro
CAC
His
CGC
Arg
C
CUA
Leu
CCA
Pro
CAA
Gln
CGA
Arg
CUG
Leu
CCG
Pro
CAG
Gln
CGG
Arg
AUU
Ile
ACU
Thr
AAU
Asn AGU
Ser
AUC
Ile
ACC
Thr
AAC
Asn AGC
Ser
A
AUA
Ile
ACA
Thr
AAA
Lys AGA
Arg
AUG
Met
ACG
Thr
AAG
Lys AGG
Arg
GUU
Val
GCU
Ala
GAU
Asp GGU
Gly
GUC
Val
GCC
Ala
GAC
Asp GGC
Gly
G
GUA
Val
GCA
Ala
GAA
Glu GGA
Gly
GUG
Val
GCG
Ala
GAG
Glu GGG
Gly
O alt trstur a codului genetic este dat de faptul c un aminoacid poate fi specificat
de mai muli codoni, deci, codul genetic, este degenerat. Totodat, el este neambiguu, fiecare
codon codific numai un singur aminoacid. Aceast trstur nu este uniform; n timp ce
metionina i triptofanul au un singur codon, de exemplu, trei aminoacizi (Arg, Leu, Ser) au ase
codoni, cinci aminoacizi au patru, izoleucina are trei, i nou aminoacizi au doi codoni.
Codul genetic este universal. Cu cteva excepii (unele variaii minore la nivelul
mitocondriei, bacteriilor i unele eucariote unicelulare), codonii sunt identici la toate speciile.
Datorit faptului c sinteza proteinelor este o funcie central n fiziologia celular, ea
reprezint o int principal a multor antibiotice i toxine. Puromicina din mucegaiul
Streptomyces alboniger are o structur similar cu captul unui aminoacid-tARN, ceea ce i
permite s interfereze cu activitatea ribozomului. Tetraciclina inhib sinteza proteinelor la
bacterii prin blocarea accesului aminoacil-ARNt la ribozom. Cloramfenicolul blocheaz formarea
de legturi ntre aminoacizi numai n cazul bacteriilor, nu i a eucariotelor, iar streptomicina
cauzeaz o citire defectuas a codului genetic (la bacterii) la concentraii mici, n timp ce la
concentraii mari inhib iniierea procesului.
Organismele se adapteaz la schimbrile mediului prin reglarea activitii genetice. Din
totalul de gene (aproximativ 4000 la bacterii i 29000 la om), numai o fracie se exprim n
celul, la un moment dat. Unii produi ai genelor se gsesc, n celule, ntr-o concentraie foarte
mare (de exemplu, factorul de elongare necesar sintezei proteinelor sau ribulozo-1,5-bifosfat
carboxilaza de la plante i de la bacteriile fotosintetice), n timp ce altele, se gsesc n cantiti
foarte mici. Necesarul de produi ai genelor (proteine, enzime) se schimb, n timp, n funcie de
nevoile metabolice ale organismelor, n funcie de etapa dezvoltrii, etc.
Reglarea exprimrii genelor este influenat de hormoni, metale grele i diferite
substane chimice. Molecula care va induce creterea exprimrii genetice se numete activator, n
timp ce un efector care va inhiba exprimarea, se numete represor.

64

O scurt introducere n biochimie


Genele reacioneaz n trei moduri la un semnal inductor. n unele situaii, cum sunt cele
induse la eucariote de un hormon, un nutrient sau un factor de cretere, exprimarea este
dependent de prezena stimulului. n alte cazuri, rspunsul este tranzitoriu, chiar dac stimulul
persist; n altele poate s mai apar chiar dac acesta este ndeprtat, i se poate chiar transmite
ca atare celulelor fiice.
mpreun
Adesea pe ADN sunt codificate, adiacent una fa de alta, proteine ale cror funcii sunt
interdependente; mai mult, naintea lor exist i poriuni numite promotori, care anun nceputul
unei regiuni care necesit citirea, i operatori poriuni de ADN a cror funcie este s
interacioneze cu proteine-regulator (inductori, represori). Ansamblul format din una sau mai
multe gene, i
promotorii
i
operatorii dedicai
lor, alctuiete un
operon.
Operonul
lac de la bacterii
include
gene
necesare
pentru
introducrea
n
celul a lactozei i pentru transformarea ei n glucide mai comune. Dac n mediul bacteriei
respective se gsete att glucoz, ct i lactoz, exprimarea operatorului lac este inhibat.
Suplimentar, n lipsa lactozei operonul lac este inhibat de un represor lac, o molecul produs al
unei gene din cadrul aceluiai operon. Cnd n celul ptrunde lactoza, o molecul semnal
inductoare se leag de un situs specific al represorului, cauzndu-i schimbri conformaionale,
care vor determina disocierea acestuia de pe operator.
Un alt exemplu bine-cunoscut de reglare genic este cel al operonului trp, implicat n
sinteza triptofanului. Cnd triptofanul se afl n cantitate abundent n celul, el se leag de o
molecul represor, cruia i va modifica starea conformaional i o va face capabil s se lege de
reaperatorul trp i s blocheze ataal ARN polimerazei de acesta.

65

O scurt introducere n biochimie


Anexa 6- Metabolism

Ciclul Krebs const ntr-o serie de reacii de oxido-reducere, care rezult n


transformarea
unei
grupri acetil n dou
NADH+H+
NAD
COOH
molecule de CO2. Un
CO2
H2C
OH
compus cu patru atomi
HC O
CH
2
de
carbon
CH3
(oxaloacetatul)
este
CH3
piruvat decarboxilaza
CH3
condensat cu o grupare
etanol
acetil,
formnd
o
aldehida acetica
acid piruvic
unitate
de
acid
carboxilic cu ase
atomi de carbon (citratul). Un izomer al acestuia este mai apoi, decarboxilat, obinndu-se un
compus cu 5 atomi de carbon (-cetoglutarat), care va fi la rndul su decarboxilat, obinndu-se
un compus cu patru atomi de carbon (succinatul). Oxaloacetatul este apoi regenerat din succinat.
Oxaloacetatul funcioneaz ca o molecul catalitic. El particip la oxidarea gruprii acetil, dar

66

O scurt introducere n biochimie


este regenerat. O singur molecul de oxaloacetat este capabil s participe la oxidarea a multor
molecule acetil.
n acest mod,
n ciclul Krebs, intr
doi atomi de carbon sub
forma gruprii acetil i
ies dou molecule de
CO2; ase electroni sunt
transferai
la
trei
molecule de NAD+ iar o
pereche de atomi de
hidrogen (doi electroni)
sunt
transferai
moleculei de FAD+. De
reinut este faptul c
ciclul Krebs, n sine, nu
genereaz o cantitate
mare de ATP i nici nu
conine
folosete
oxigenul din aer ca
reactant. De fapt, ciclul
Krebs
ndeprteaz
electronii
de
pe
molecula de acetil CoA,
cu formarea agenilor reductori FADH2 i NADH. n continuare, prin fosforilarea oxidativ,
electronii eliberai prin reoxidarea NADH i FADH2 strbat o serie de proteine membranare
(lanul
OH
CH2COOH
COOO
transportor de
COOH2C
C
electroni),
COOC
H
COOHO
COOC
C
genernd un
H2C
COOC
H2C
COOH2C
COOCH2COOOOC
H
gradient de
protoni
n
oxaloacetat
malat
citrat
fumarat
succinat
membrana
mitocondrial, care st la baza funcionrii ATP sintazei i a producerii ATP-ului.
Astfel, cuplarea celor dou procese (ciclul Kreb i fosforilarea oxidativ) ofer marea
majoritate de energie folosit de organismele aerobe-n organismul uman, mai mult de 95%.
n urma glicolizei, a ciclului Krebs i a oxidrii acizilor grai, rezult NADH i FADH2,
molecule bogate n energie, care conin cte o pereche de electroni cu un potenial ridicat.
Cantitatea ridicat de energie eliberat prin reducerea, cu ajutorul acestor electroni, a O2 la ap,
servete la generarea ATP-ului. Fosforilarea oxidativ este un proces prin care se genereaz ATP,
ca rezultat al transferului de electroni de la NADH sau FADH2 la O2, printr-o serie de purttori de
electroni. Acest proces se desfoar n mitocondrie i reprezint sursa majoritar de energie la
organismele aerobe.
Pe parcursul proceselor de oxido-reducere care se desfoar de-a lungul lanului
transportor de electroni, se produc, inevitabil, specii reactive de oxigen (superoxid, peroxid,

67

O scurt introducere n biochimie


hidroxil), a cror aciune este contracarat de existena unor enzime specializate pentru
descompunerea acestora (superoxid dismutaza, catalaza, peroxidaza).
Sinteza ATP-ului este catalizat de un complex enzimatic, ATP-sintaza, care n
prezena ADP-ului i a Pi, formeaz ATP. Acest complex este format din mai multe subuniti
proteice, grupate n unitatea F1, care se proiecteaz n matrixul mitocondrial i care conine
mecanismul fosforilrii. Acest subunitate este ataat de un alt complex proteic, cunoscut sub
numele de F0, care este ancorat n membran i care prezint un canal pentru protoni. Scurgerea
protonilor prin F0 cauzeaz rotaia acestuia, conducnd la producerea ATP-ului n complexul F1.
Este estimat c pentru oxidarea fiecrui NADH oxidat, se vor forma trei molecule de ATP, iar
pentru fiecare FADH2 oxidat, se vor forma dou molecule de ATP.
Aceast consideraie permite calculul energiei rezultate sub forma moleculei de ATP,
prin oxidarea unei molecule de glucoz:
Din glicoliz rezult dou molecule de ATP i 2 NADH
Din dou cicluri Krebs (pentru cele dou molecule de acid piruvic formate din glucoz) se
formeaz 8 NADH, 2 FADH2 i 2 GTP (corespunde ATP-ului)
Prin nsumare:
3 ATP 10 NADH + 2 ATP FADH2 + 2 ATP + 2 GTP = 38 ATP/glucoz consumat
Comparnd aceast energie cu cea inmagazinat n urma glicolizei (dou molecule de
ATP) se pot, cu uurin, constata avantajele enorme ale metabolismului aerobic, desfurat n
medii bine oxigenate.

68

O scurt introducere n biochimie


O alt cale oxidativ a glucozei este reprezentat de cea a acidului uronic, care se
produce la nivelul ficatului, dar care la fel ca n cazul celei descrise mai sus, nu produce ATP, ci
glucoronat, precursorul direct al ascorbatului, n cazul animalelor capabile s sintetizeze aceast
vitamin. La om, acidul ascorbic nu poate fi sintetizat, datorita lipsei unei enzime importante n
biosinteza acestuia (L-gulonolactone oxidase).
Fructoza este metabolizat prin glicoliz la nivelul ficatului mult mai rapid dect
glucoza, deoarece ea ocolete pasul reglator catalizat de fosfofructokinaz. Metabolizarea
glucozei conduce la accentuarea sintezei acizilor grai i a esterificrii acestora, creterea
secreiei de VLDL, urmat implicit de creterea colesterolulul LDL i a triacilglicerolilor . n
cellalte esuturi, glucoza inhib metabolizarea fructozei, atta timp ct ea reprezint un substrat
mai bun pentru hexokinaze.
NADPH i ATP obinut n timpul fazei iniiale a fotosintezei (faza de lumin) sunt
utilizai, mai apoi, pentru fixarea CO2 ntr-un compus organic, n faza de ntuneric, cunoscut sub
denumirea de ciclul Calvin. Rubisco (ribulozo bifosfat carboxilaza/oxigenaza), cea mai
abundent enzim de pe Pamnt, transform ribulozo 1,5-bifosfat, CO2 i apa n dou molecule
de 3-fosfoglicerat.

Pentru obinerea energiei, lipidele trebuie s fie, mai nti, mobilizate din depozitele
esuturilor adipoase. n acest proces, triacilglicerolii sunt degradai la acizi grai i glicerol, n
procesul de lipoliz, catalizat enzimatic de ctre lipaze, enzime aflate sub control hormonal
(adrenalina, glucagonul, insulina, etc). Mai apoi, moleculele de acil CoA rezultate prin activarea
acizilor grai, prin legarea coenzimei, trebuie s fie transportate n mitocondrie cu ajutorul unui
69

O scurt introducere n biochimie


sistem transportor(carnitina). Degradarea acizilor grai se desfoar n matrixul mitocondrial,
printr-un proces oxidativ ciclic, n care uniti de cte doi atomi de carbon sunt n mod succesiv
clivate pn la acetil CoA. naintea eliberrii gruprii acetil, fiecare grupare CH2 de la C3 al acil
CoA este oxidat, rezultnd o grupare cetonic, de aici denumirea procesului, de -oxidare.
Acetil CoA produs poate s fie oxidat la CO2 n ciclul Krebs sau poate s fie transformat,
la nivelul ficatului, n corpi cetonici (acetoacetat, 3-hidroxibutirat, aceton) care servesc ca surse
de energie majoritar, pentru unele esuturi. Acest ultim traseu este urmat n momentul n care
exist un dezechilibru ntre cantitatea ridicat de acetil CoA produs prin -oxidare i cantitatea
insuficient de oxaloacetat necesar introducerii acestuia n ciclul Krebs, pentru formarea de
citrat.
Cnd procesul oxidativ a ajuns la final, o molecul de acid palmitic(C 16), de exemplu,
produce aproximativ 106 molecule de ATP, corespunztoare unei energii de 3300 kJ/mol.
Aceast cantitate ridicat de energie face din grsimi un depozit ideal pentru energia metabolic.
Animalele hiberante, cum sunt urii polari, i asigur rezervele energetice necesare pentru 6 luni,
numai prin degradarea lipidelor.
Oxidarea acizilor grai nesaturai necesit unele etape suplimentare (catalizate de o
izomeraz i o reductaz). De asemenea, n cazul acizilor grai cu un numr impar de atomi de
carbon produsul final el oxidrii este propionil CoA, care necesit transformarea ntr-o form
utilizabil, printr-o serie de reacii enzimatice adiionale.
Biosinteza acizilor grai are loc n citoplasm sub cataliza a dou enzime cheie: acetilCoA carboxilaza i acid gras-sintetaza. Primul pas const n obinerea malonil CoA prin
carboxilarea acetil CoA, sub aciunea carboxilazei. La rndul su, acid gras-sintetaza un complex
multienzimatic al unui singur lan polipeptidic cu apte activiti enzimatice, ncepe sinteza cu o
singur molecul de acetil i adaug rnd pe rnd cte o grupare malonil, n apte reacii ciclice,
pn cnd se formeaz palmitatul (16:0). n fiecare ciclu este eliminat o molecul de CO2.
Astfel, lanul acizilor grai crete prin adugarea unei uniti de cte doi atomi de carbon, la
fiecare ciclu. NADPH+H+ este utilizat ca agent reductor i provine n principal din calea
pentozo-fosfailor. Acizii grai nesaturai i cei cu un numr mai mare de atomi de carbon se
sintetizeaz din palmitat n etapele urmtoare.
n final, grsimile sunt sintetizate din acizi grai activai (acil CoA) i glicerol 3-fosfat.
Pentru a ajunge la esuturile periferice, grsimile sunt mpachetate de ctre hepatocite n
complexe lipoproteice, de tipul VLDL, care vor fi eliberate n snge.
Lipogeneza este reglat n pasul catalizat de acetil-CoA carboxilaz, prin modificri
alosterice, fosforilare, defosforilare sau inducere i represie a sintezei enzimei. Citratul activeaz
aceast enzim iar un lan lung de acil-CoA i inhib activitatea. Insulina activeaz acetil-CoA
carboxilaza, pe cnd glucagonul i adrenalina au o aciune opus.
Colesterolul este un component important al membranei celulare i, totodat, prescursorul
hormonilor steroizi (glucocorticoizi, mineralocorticoizi i hormoni sexuali) i ai acizilor biliari.
Necesarul organismului animal provine prin biosintez endogen, cealalt jumtate provine din
diet. Cei 27 atomi de carbon ai colesterolului se adaug prin mai multe etape, din acetil CoA
(acetat). Ultimul pas const n ciclizarea squalenelor, izoprenoide liniare cu 30 de atomi de
carbon. Sinteza colesterolului are loc sub control hormonal i este inhibat de concentraii
ridicate ale colesterolului intracelular.

70

O scurt introducere n biochimie


Scheletul carbonic (cetoacid) rezultat n urma
dezaminrii
va
suferi
modificri ulterioare care vor
duce la obinerea unor
precursori ai glucozei i
intermediari ai acidului citric.
Cinci dintre aceti metabolii
(2-oxo-glutarat, succinil CoA,
fumarat, oxaloacetat i piruvat)
sunt
precursori
ai
gluconeogenezei, primi patru
fiind intermediari ai ciclului
Krebs. Cu dou excepii (lizina
i leucina) toi aminoacizii sunt
glucogenici.
Doi
produi
adiionali
ai
degradrii
(acetoacetatul i acetil CoA),
nu pot intra n calea
gluconeogenetic, dar pot fi
folosii pentru sinteza corpilor
cetonici, ai acizilor grai i ai
izoprenoidelor.
Unii
aminoacizi
(fenilalanina,
triptofanul, izoleucina) sunt
att glucogenici, ct i
cetogenici.

COO-

COO+

H3N

CH2

cetoacid

L-aminoacid

aminotransferaze

COOC

COO+

H3N

CH2

CH2

CH2

CH2

COO-

COO-

cetoglutarat

L-glutamat

NH4+

HN

O
H2N

H
N
O

NH2

N
H

N
H

acid uric

uree
CH3
CH3
-

OOC

H2
C

H
(CH2)12 CH
CH2

OH

CH

CHOH

HN

CH

OH
R

H
O

mevalonat

ceramid

squalena

71

CH2OH

O scurt introducere n biochimie

NH3 este o baz tare, care se prezint la pH fiziologic sub forma ionului NH4+. Ambele
forme sunt toxice, provocnd la concentraii ridicate afeciuni, n special, ale creierului. Din acest
motiv, organismul prezint mecanisme prin care amoniacul este inactivat i excretat. Astfel,
amoniacul este transformat n uree, n ciclul uric, care se desfoar numai la nivelul ficatului, cu

72

O scurt introducere n biochimie


debut n mitocondrie i finalizare
n citosol. Fumaratul produs n
etapa citosolic este transformat
n ciclul Krebs n oxaloacetat,
care prin transaminare se
transform n aspartat, un
intermediar al ciclului acidului
uric i, totodad, un precursor al
ureei. Astfel, cele dou cicluri
sunt interconectate.

73

O scurt introducere n biochimie


Anexa 7 - Nutriie
Vitamina A. Retinoide i carotenoide.
CH
CH
Formele fiziologic active ale vitaminei A sunt
H C
CH
COOH
retinalul i acidul retinoic ambii compui derivai din
acid retinoic
retinol. Retinaldehida este grupare prostetic a opsinei o
CH
protein membranar cu rol n traducerea luminii
CH
CH
HC
CH
receptate de pigmenii vizuali i iniierea unui impuls
CHO
nervos. Acidul retinoic moduleaz expresia genelor i
retinaldehida
CH
diferenierea esuturilor fiind esenial pentru creterea i
CH3
CH3
meninerea normal a epiteliilor i mucoaselor.
H3C
CH3
CH2OH
Deasemenea Vitamina A are rolul de transportor al
retinol
unitilor manozil n sinetza glicoproteinelor hidrofobe i
CH3
retinolarea proteinelor. Termenul de vitamina A include
i retinolul sau carotenoidele din care se sintetizeaz.
CH3
CH3
CH3
n esuturi sau alimente, deoarece este puin stabil, H3C
CH2OH
retinolul liber se gsete n cantiti reduse, fiind n
dehidroretinol
esterificat majoritatea cazurilor cu acidul palmitic. n peti
CH3
i amfibieni se gsete dehidroretinolul (Vitamina A2) care
are activitatea biolologic de
H C
dou ori mai mic dect
CH
CH
H C
CH
retinolul.
H C
CH
CH
CH
Unele
carotenoide
CH
O2
caroten
precum -carotenul, luteina,
zeaxantina, licopenul sau caroten dioxigenaza
criptoxantina au o important
HC
CH
CH
nutriional
deosebit
HC
CH
deoarece spre deosebire de
O
H C
CH
O
CH
CH
retinol sunt prezeni n
CH
alimente n cantiti mari.
Intoxicaiile acute cu
CH
CH
H C
CH
CHO
vitamina A produc grea,
+
retinaldehida
ameeli, dureri de cap,
NAD(P)
CH
somnolen i exfolierea pielii,
NAD(P)H
aldehid oxidaza
simptome care dispar dup
retinol dehidrogenaza
cteva
zile.
Intoxicaiile
CH
CH
CH
CH
H C
CH
cronice afecteaz sistemul H C CH
CH OH
COOH
nervos
central,
ficatul
retinol
acid retinoic
CH
CH
(hiperlipidimii,
hepatomegalii), oasele (hipercalcemii, dureri, calcefierea esuturilor moi, osteoporoza).
3

Vitamina E
Vitamina E este localizat n principal n
membrane avnd funcie principal de agent
antioxidant. Independent de activitatea antioxidant tocoferolul este implicat n semnalizarea celular,

74

CH3
HO
CH3
H3C

O
CH3

CH3

CH3

CH3

O scurt introducere n biochimie


inhibiia sau inactivarea protein chinazei C, modularea expresiei genelor i inhibiia proliferrii
celulelor.
n reacie cu radicalii liberi vitamina E este oxidat pn la chinon care este ulterior
redus i conjugat cu acid gluconic pentru a fi excretat n bil.
ROO

CH3

ROH

HO

CH3

CH3

O
R

H3C

O
CH3

tocoferol

CH3

CH3

HO

ascorbat
ubichinona

H3C

CH3

H3C

CH3

O
CH3

radical tocoferoxil

CH3
OH

H3C
CH3

OH CH3
OH

tocoferol hodrochinona

tocoferol chinona

Acizii grai polinesaturai sunt supui atacurilor speciilor foarte reactive ale oxigenului
(peroxid, superoxid) formnd specii radicalice capabile la rndul lor de reacii de oxidare
declannd un lan de reacii de oxidare cu consecine grave asupra celulelor. Vitamina E
capteaz electronii formnd radicalul tocoferoxil care este stabilizat prin rezonan i ntrerupe
lanul de reacii. Prin proprietile antioxidante vitamina E are activitate hipolipemiant,
antiateriosclerotic.
n
cazul
CH3
CH2
CH3
O
HO
O
prematurilor rezervele
R
R
R
de vitamina E n
H3C
O
CH3
H3C
O
CH3
H3C
O
CH3
esuturi
este
CH3
CH3
CH3
insuficient, lipsa de
tocoferol poate progresa spre hemoliz sau anemie hemolitic datorit scderii timpului de via
al eritrocoitelor.
Vitamina K
Vitamina K este disponibil n trei forme - filochinona (din plante), menachinonele
(sintetizate de bacteriile din intestin) i menadoilul (obinut prin sintez chimic).
Pincipala
O
OH
O
funcie
a
CH3
CH3
CH3
vitaminei
K
este
O
OH
O
carboxilarea n
menadiol K3
menachinona K2
filochinona K1
poziie gama a
resturilor de glutamat din proteine precum protrombina i factorii de coagulare VII, IX i X; rolul
-carboxiglutamatului proteinele implicate n coagulare este de a chelata ionii de calciu, inducnd
n acest mod o schimbare conformational a acestora care va permite legarea lor de fosfolipidele
membranare. Proteine care conin -carboxiglutamat se afl i n spaiul intermembranar al
mitocondriilor unde au rol n acumularea calciului, n oase sau n sistemul nervos. Vitamina K
activeaz deasemenea serin palmitoiltransferaza o enzim implicat n sinteza
fosfosfingolipidelor.
3

Vitamina B1 Tiamina
Tiamin-pirofosfatul
(TPP)
este
forma
metabolic activ a tiaminei avnd rol de coenzim n
reaciile de decarboxilare oxidativ a oxoacizilor n
metabolismul glucidelor i a unor aminoacizi (ex.
75

H3C

CH3

NH2

OH

N
S

O scurt introducere n biochimie


leucin, izoleucin, valin). Deasemenea TPP- H C
CH
N
NH
O
O
ul este implicat n reaciile catalizate de
O
P
P
O
transcetolaze (pe calea pentozofosfailor) i
N
N
transmiterea impulsului nervos prin activarea
O
O
S
acetilcolinei.
Tiamin-trifosfatul este implicat n reglarea transportului transmembranar al clorurii prin
activeaz canalelor ionice din membranele celulelor esutului nervos.
3

Vitamina B2 - riboflavina
O
N
OH

OH
OH

OH

OH
OH

CH2OH
H3C

CH2O P

H3C

Flavina O

ATP

ADP

H3C

FMN

H3C

ATP
O

PPi

O
O

H3C

O-

CH2

H
H
OH

OH

FAD

Vitamina PP - Niacina
Termenul de niacin se refer att la
nicotinamid ct i la acidul nicotinic, ambele
substane avnd aceeai activitate biologic.

NH2

NH

NH

NH

CH2O P

FAD sintaza

NH

OH
OH

O-

flavokinaza
H3C

OH

O-

NH2

O-

nicotinaminda

Vitamina B6 Piridoxalul
Termenul de vitamina B6 se refer la 6 vitameri interconveribili ntre ei piridoxina,
piridoxalul, piridoxinamina
CH2NH3
CHO
CH2OH
i derivaii lor fosfatai n
HOH2C
OH
HOH2C
poziie 5 dintre care forma HOH2C
OH
OH
metabolic
activ
este
piridoxal-fosfatul.
N

CH3

CH3

piridoxal

piridoxina

Vitamina B9 - Acidul folic


Acidul folic este esenial n sinteza
purinei i pirimidinei i implicit n sinteza
ADN-ului, intervine n maturarea celulelor
stem din mduva osoas fiind important n
formarea eritrocitelor. Rolul acidului folic
este trasferul gruparilor coninnd un atom de
carbon (ex. formil, metil) att n reacii
catabolice ct i de biosintez.

acid nicotinic

O
COO-

N
HN

H2N

N
H

CH3

piridoxinamina

HN

COO-

Vitamina B12
Vitamina B12 are cinci vitameri biologic activi: cianocobalamina, hidroxicobalamina,
aquacobalamina, metilcobalamina i adenozilcobalamina. Starea de oxidare a cobaltului n
vitameri este 3+, exceptie adenozilcobalamina unde este 1+.

76

O scurt introducere n biochimie


CONH2

R=
CONH2

CHONH2

CH3
H3C
H3C
H

H2NCo

N
CONH2 1.

3+
Co

CH3

H
O

OH

OH

CH3

H
N

2. -CH3

CH3

NH2

3. -OH2(-OH)

CH3
CH3

4. -CN
CoNH2
CH3

NH
N

Vitamina B12 este coenzim


pentru
metilmalonil-CoA
mutaza
(catalizeaz reacia de izomerizare a
metilmalonil-CoA la succinil-CoA),
metioninsintaza (realizeaz trasferul unei
grupri metil de la metil-tetrahidrofolat
la homocistein) i leucin aminomutaza
(cataliezaz izomerizarea leuceinei la leucin).

H
HO
CH3
O

HO
-O

CH3

P
O

O
OH

Biotina (Vitamina H)

H
N

HN

OH
S

Acidul pantotenic (Vitamina B5)

H3C

CH3

OH

O
H
N
COOH

HOH2C

Vitamina C (Acidul ascorbic)


Acidul ascorbic are rol bine definit n dou clase de hidroxilaze i anume hidroxilazele cu
cupru i cele care conin fier legat de 2-ceto-glutarat. Pe lng funcia de cofactor, vitamina C
este implicat n reglarea expresiei genelor care codific proteine ale esutului conjuctiv,
citocromul P450 i ubichinona, n absorbia intestinal a fierului nonheminic acionnd ca agent
antioxidant i chelatant pentru ionul Fe2+.
Ascorbatul reduce ionii de Fe3+, Cu2+ i reacioneaz specii reactive ale oxigenului ca
superoxidul i radicalul hidroxil formnd radicalul monohidroascorbat care disproporioneaz
rapid la ascorbat i dehidroscorbat.
HOH2C
O

HO

HO

+e-

HO

HO

HO

HO

OH

HOH2C

HOH2C

HOH2C
O

HO

OH

Ascorbatul reacioneaz cu azotitul mpiedicnd formarea nitrozaminelor, compui cu


potenial cancerigen.
Doze ridicate de vitamina C este consumate n perioadele reci cu scopul de a preveni
raceala, ns studiile arat c acidul ascorbic nu are effect n prevenirea infeciilor ci doar n
reducerea duratei simptomelor prin stimularea activitii fagocgitelor, deci scderea rspunsului
inflamator.
CH3

Carnitina

H3C

OH

COOH

H3C

77

O scurt introducere n biochimie


Fierul
n organism se afl 50-70 mmoli de fier, din care intr n constituia hemului
(pigmentul din hemoglobin, dar i din alte proteine mai puin abundente), restul fiind stocat n
esuturi legat de proteine de stocare precum ferritina i hemosiderina; din totalul fierului mai
puin de 1% este afl n plasm legat de tranferrina. Metabolismul fierului este reglat la nivel
hormonal prin intermediul hepcidinei, un hormon alcatuit dintr-un lan de 25 de aminoacizi,
sintetizat n ficat.
Explorarea metabolismului fierului se realizeaza prin urmatoarele analize:
Determinarea fierului seric - valorile normale pentru un adult sunt 18-45 mol/l la brbai
i 14-32 mol/l la femei.
Capacitatea total de legare a fierului este o metod indirecta de msurare a concentraiei
transferinei. La o pesoan sntoas transferina este saturat cu fier in procent de 30%, ns n
cazuri de deficien de fier saturaia scade sub 15 %. Capacitatea de legare a fierului crete n
cazul deficienelor de fier (sarcin, anemie), hemoragiilor, policitemiei i scade la exesul de fier,
bolilor inflamatorii cornice, talasemiei, cancerului, artitei reumatoide, sindromului nefrotic.
Ferritina seric este cel mai bun indicator al rezervelor de fier din organism. Valorile
normale sunt cuprinse ntre 15-200 g/l la brbai i 12-150 g/l, fiind mai ridicate n fazele acute
ale infeciilor, leziunilor sau bolilor maligne, cazuri n care dianosticarea deficienei de fier pe
acesta cale devine problematic. Valorile < 20 g/l indic deficiena de fier nanite ca anemia
feripriv sa fie instalat. Concentraiile > 500 g/l sunt indicatori ai talesemiei i leucemiei
Concentratia protoporfirinei eritrocitare libere este in general mai mic de 1mol per
litru de celule roii.
Legate de fier sunt si hematosideroza, hematocromatoza, i porfiria.

78

O scurt introducere n biochimie


Anexa 8 - Sistemul imunitar
Aprarea nespecific a organismului este ereditar i include bariere mecanice (ex.
mucoasele, epiderma), fizico-chimice (ex.aciditatea sucului gastric), celulare, substane
antibacteriene (lizozimul, imunoglobulinele) sau tranzitul intestinal (prin eliminarea agenilor
patogeni).
Aprarea specific sau adaptativ este devoltat pe parcursul vieii unui individ ca urmare
a rspunsului imun al organismului expus la diferite substane strine, fiind susinut de
complexe celulare.
Sistemul celular este alctuit din diferite tipuri de leucocite (ex. macrofage, limfocite)
provenite din celulele stem ale maduvei osoase hematogene, care sunt difereniate i maturate n
diferite esuturi.
Limfocitele sunt celule care recunosc specific antigenul n cadrul rspunsului imun
reprezintnd 20-40 % din totalul leucocitelor. Din puct de vedere morfologic limfocitele sunt
clasificate n limfocite mici, din care fac parte limfocitele B (maturate n timus) i limfocitele T
(maturate n mduva hematogen), i limfocite mari din care fac parte celulele NK (natural killer)
i LAK (lymphokine-activated killer).
Limfocitele B reprezint aproximativ 20% din limfocitele circulante. Acestea prezint la
suprafaa celulelor receptori cu rol n recunoatrea antigenelor, activarea limfocitelor B i
receptori de adeziune intercelular.
Limfocitele T ndeplinesc mai multe funcii printre care recunoaterea celulelor infectate
i liza acestora (realizat de limfocitele citotoxice, Tc), interaciunea cu macrofagele i reglarea
rspunsului imun prin secreia citochinelor (realizat de limfocitele Th (helper)).
Citochinele sunt substane care stimuleaz proliferarea celulelor B i activitatea
limfocitelor Tc i Th. Interferonii sunt o clas de citochine, a cror sintez este indus de diferii
ageni chimici sau biologici i ale cror rol principal este inducerea strii antivirale; inteferonii
intervin n activiti nespecifice precum inhibiia multiplicrii celulelor normale i tumorale,
reglarea funciei imunitare i a proceselor de difereniere celular.
Celulele NK (natural killer) reprezint circa 15% din totalul limfocitelor sanguine.
Celulele NK au pe suprafaa unii markeri caracteristici limfocitelor ns nici unul din receptorii
de antigen caracteristici limfocitelor T sau B, ndeplinidu-i rolul immunologic prin
recunoaterea modificrilor complexelor de histocompatibilitate. Funcia celulelor NK este de a
liza anumite celule tumorale i celule infectate cu virusuri, fiind deasemenea active n respingerea
grefelor i a celulelor modificate.
Detectarea antigenilor este mediat de dou clase de complexe proteice de
histocompatibilitate (CMH I i CMH II) care leag fragmenetele peptidice ale proteinelor lizate
n celul i le expune la suprafaa acestora, astfel nct fragmentele strine (ex. provenite de la
virui) s poat fi recunoscute de receptorii antigenici.

79

O scurt introducere n biochimie


Proteinele aparinnd CMH I se afl la suprafa
majoritii celulelor organismului (exceptnd eritrocitele,
endoteliul corneean, celulele exocrine ale pancresului, neuronii,
endoteliile capilarelor ) i leag peptidele provenite din
degradarea proteolitic a orcrei proteine din celul, iar
complexele formate sunt intele receptorilor limfocitelor
citotoxice. Pentru a evita atacarea celulelor proprii organsmului n
timus sunt selectate i maturate doar acele limfocite care recunosc
complexul CMH I-peptid non-self. Aceast clas de proteine este
important n meninerea homeostaziei biochimice a organismului
fiind atacate de sistemul imunitar dac au suferit mutaii, s-au asociat cu antigene virale sau
tumorale sau aparin unor esuturi grefate care poart molecule incompatibile.
Complexele de histocompatibilitate din clasa II se
afl la suprafaa unor celule specializate implicate n
rspunsul imun precum limfocitele B, eozine, celule
dencrice i macrofage. Aceste proteine leag fragmente
peptidice derivate din proteine exogene ca cele ale capsidei
viruilor sau cele bacteriene. Complecii formai sunt
recunoscui de receptori ai limfocitelor Th.
Erorile de selecie ale lifocitelor n timus provoac
apariia bolilor autoimune precum diabetul zaharat de tip I,
artita reumatoid sau sleroza multipl.
Anticorpii
Anticorpii sau imunoglobulinele sunt proteine plasmatice sau membranare specializate n
recunoaterea i s inactivarea substanelor strine organismului numite antigene. Ele sunt
sintetizate n limfocitele B (pentru inseria n membrana) i plasmocite ca rspuns la stimuli
specifici ca urmare a ptruderii unor molecule exogene n organism. Exist o gam foarte variat
de
imunoglobulin
e n vedere c
pentru fiecare
epitop
(determinant
antigenic) este
sintetizat
o
protein
specific;
acestea
se
clasifica
n
cinci clase: IgG, IgA, IgM, IgD i IgE.

80

O scurt introducere n biochimie


Anticorpii
sunt
alctuii
din
subuniti identice coninnd fiecare cte o
caten polipeptidic H (heavy=greu) , , ,
, ) i una L (light=uor (, )) legate ntre
ele prin puni disulfurice. Pentru fiecare
anticorp la nivelul structurii primare se
disting dou regiuni: constant (C) i
variabil (V). Regiunea C, localizat spre
captul C-teminal, conine aceeai secven
de
aminoacizi
pentru
toate
imunoglobulinele, asigurnd integritatea
structural i funcional a acestora.
Regiunea V cuprinde aprox. 110 aminoacizi din captul N-terminal care variaz complementar cu
antigenul determinnd specificitatea imunoglobulinelor. n cadul acestei regiuni variabile exist
secvene n care variabilitatea este maxim numite regiuni
hipervariabile sau regiuni determinante de complemetaritate
(RDC) fa de configuraia epitopului.
Imunoglobulinele conin i o regiune flexibil, bogat n
cisten, localizat n apropierea mijlocului catenei H, numit
regiunea balama, care permite ajustarea geometriei acestora.
Aceast regiune este susceptibila atacului proteazelor (ex.
papaina).
Antigenul este o substan de origine endogen sau
exogen care nu este recunoscut ca component proprie i
determin apariia unui rspuns imun. Un antigen este alctuit
dintr-o component cu mas mare numit purttor sau carrier
i una cu masa mic localizat pe suprafaa purttorului care se
combin cu situsul activ al anticorpului, determin specificitatea
antigenic i individualitatea moleculei strine denumite epitopi sau determinante de
specificitate.
Exist substane cu mas molecular mic,
care ataate o molecul purttor, de obicei de o
protein, dobndesc proprieti antigenice putnd
provoca apariia unui rspuns imun. Aceste molecule
se numesc haptene.
Imunogenul este o molecul n stare nativ
care are capacitatea de a stimula un rspuns imun,
fr a fi necesar combinarea acesteia cu o alt
molecul.
Legtura ntre anticorpi i antigen este de
natur non-covalent, tria acesteia fiind dependent de de gradul i tipurile de interaciune
realizate, complexul format fiind n echilibru cu componentele libere. Specificitatea legturii
anticorp-antigen este determinat de resturile de aminoacizi din domeniile variabile ale
anticorpului i este realizat prin complementaritatea ntre situsul de legare al anticorpului i
antigen n ceea ce privete aranjamentul spaial, sarcinile totale pariale, polaritatea i
posibilitatea formrii legturilor de hidrogen. Att n structura anticorpului ct i a antigenului

81

O scurt introducere n biochimie


pot avea loc schimbri conformaionale care s faciliteze o interaciune ct mai bun ntre cele
dou componente.
Testele ELISA (enzyme-linked imunosorbent assay) sunt utilizate pentru screening-ul i
cuantificarea prezenei unui antigen n probe. Proteinele din prob sunt fixate pe o suprafa
inert care este ulterior splat cu soluia unei proteine nespecifice (ex. cazein) i tratat cu
anticorpul de interes. Anticorpii nelegai sunt ndeprtai, iar proba este tratat cu un complex
enzim-anticorp care recunoate anticorpul de interes i este capabil de a cataliza reacii din care
rezult produi colorai. Se adaug substatul pentru enzima legat de anticorpul secundar i se
monitorizeaz cantitatea de produi format.

82