§ 1. Procesele biochimice ce decurg în must și boștină pînă la fermentația alcoolică Perioada de la prelucrarea strugurilor pînă la începerea fermentației alcoolice a mustului și a boștinei este legată de un șir de procese biochimice. Distrugerea celulelor strugurilor înlesnește transformările componenților mustului datorită intensificării activității fermentalive. Caracterul acestor transformări depinde de activitatea enzimelor de oxidare, de prezența catalizatorilor neorganici, de temperatură, de accesul aerului și de alți factori. Dintre enzimele de oxidare în această perioadă cea mai mare însemnătate o au catecoloxidaza și peroxidaza. În prezența catecoloxidazei decurge oxidarea polifenolilor, care e însoțită de absorbția de oxigen și de formarea unor substanțe colorante. În urma oxidării polifenolilor se formează chinone, care dehidratează substanțele mustului ușor oxidabile. Tabelul 1 Schimbarea cantității substanțelor tanante șl a acidului ascorbic în sucul de struguri sub influența polifenoloxidazei (struguri de soiul Cinuri)
Procesele secundare de oxidare contribuie la oxidarea acizilor ascorbic și dihidroxifumaric,
aminoacizilor și hidroxiacizilor prin intermediul dehidratării lor cu chinone. În urma păstrării mustului în condiții aerobe timp de 12 ore el capătă culoare brună intensivă din cauza oxidării polifenolilor. Oxidarea polifenolilor poate fi prevenită în urma adăugării acidului ascorbic, care se oxidează ușor în acid dehidroascorbic și joacă rolul de antioxidant (tabelul 1). Viteza de absorbție a oxigenului în mustul aerat e de 2—3 ml/1 pe oră. Boștina, în comparație cu mustul, absoarbe mult mai mult oxigen. Aceasta se explică prin faptul că componentele dure ale bobiței sînt purtătoare a enzimelor de oxidare mai active față de cele din must. Viteza de oxidare a diferiților polifenoli e diversă. Spre exemplu, antocianii și antocianidele în comparație cu catechinele se oxidează mai puțin. Intensitatea oxidării compușilor fenolici depinde de temperatură. Mărind temperatura cu 10°C, oxidarea fermentativă sporește mai mult de 2 ori. În afară de enzimele de oxidare strugurii mai conțin și enzyme hidrolitice. Acestea-s enzimele pectolitice și proteolitice, β — fructofuranozidaza, esterazele etc. Enzimele pectolitice catalizează hidroliza substanțelor pectice. Acestea sînt protopectinaza, pectinmetilesteraza și poligalacturonaza. Protopectinaza scindează arabanul și galactanul de la protopectinâ, formînd acidul poligalacturonic metoxilat (pectina solubilă). Sub influența pectinmetilesterazei are loc scindarea alcoolului metilic de la acidul poligalacturonic metoxilat. Apoi poligalacturonaza provoacă hidroliza acidului poligalacturonic pînă la acid d-galacturonic. Din cauza ei enzimele pectilotice din must-.sînt puțin active, de aceea în ultimul timp se folosesc preparate fermentative, produse de ciuperci. Întrebuințarea lor are un șir de privilegii: - cantitatea mustului se mărește cu 5—6%; - se accelerează limpezirea mustului; - se îmbunătățește filtrarea vinului. Enzimele proteolitice catalizează hidroliza proteinelor și polipeptidelor pînă la aminoacizi. Acest proces are o importanță deosebită în vinificație, deoarece vinurile care conțin proteine sînt predispuse la tulburări. Scindarea proteinelor pînă la aminoacizi solubili preîntîmpină tulburarea. § 2. Prelucrarea fermentativă a boștinei Prelucrarea fermentativă a boștinei înainte de presare se folosește pe larg în vinificație, deoarece are un șir de privilegii: - preparatele fermentative înlesnesc presarea boștinei; - măresc cantitatea mustului; - accelerează limpezirea mustului; - reduc gradul predispunerii la tulburările coloidale. În urma introducerii preparatului fermentativ purificat în boștină are loc hidroliza mai rapidă a proteinelor, a pectinei strugurilor și a altor polizaharide, ceea ce mărește cantitatea mustului răvac cu 10—20% și viteza de filtrare a mustului. Calitățile organoleptice ale sucului și vinurilor nu se înrăutățesc. Preparatele fermentative se folosesc în doze de la 0,0005 pînă la 0,03% față de masa strugurilor, boștinei sau mustului (în dependență de activitatea preparatului). Prelucrarea fermentativă a boștinei (puțin sulfitată în scopul prevenirii oxidării fenolilor) soiurilor roșii timp de 4 ore la temperatura de 45—50°C dă posibilitatea de a căpăta vinuri roșii calitative fără procedeul de fermentare pe boștină. După prelucrarea mustului cu preparate pectolitice sporește cantitatea alcoolului metilic, de aceea acest procedeu e inaplicabil în producerea vinurilor brute pentru fabricarea coniacului. Preparatele fermentative citolitice scindează celuloza, hemiceluloza etc., contribuind la sporirea cantității mustului.
§ 3. Procesele de oxidoreducere la prelucrarea fermentativă a mustului și mijloacele
reglării lor Procesele de oxidoreducere, care decurg în must și boștină, determină direcția și caracterul transformărilor substanțelor viitorului vin. Viteza acestor procese atît din vin cît și din must depinde de prezența catalizatorilor biologici. Procesele de oxidare, care au loc în must, depind de gradul de distrugere al pulpei, pieliței, ciorchinilor. În condiții obișnuite pulpa se distruge mai ușor ca pielița și ciorchinii. Substanțele tanante și cele colorante trec în must și sînt oxidate de enzimele, absorbite din pulpă și pieliță. Astfel procesele de oxidare în timpul fermentării mustului și boștinei depind de gradul de distrugere a ciorchinilor și de înnobilarea mustului cu enzime de oxidare. La prepararea vinurilor roșii în unele cazuri boștina constă din struguri striviți, inclusiv ciorchini, pieliță și semințe, în altele — ciorchinii sînt înlăturați parțial sau complet. În timpul macerației are loc înnobilarea mustului cu substanțe tanante și colorante. Pulpa și pielița conțin cele mai active enzime de oxidare. Datorită acestui fapt se intensifică procesele de oxidare — se oxidează compușii fenolici, acizii ascorbinic și organici în urma acțiunii fermenților catecoloxidaza, peroxidaza, ascorbatoxidaza, dehidrogenaza etc. La prepararea vinurilor de Kahetia pentru intensificarea proceselor de oxidare în must înainte de fermentație se adaugă boștină prelucrată fermentativ. În urma proceselor de oxidare substanțele tanante și colorante se transformă în chinone. În timpul oxidării fermentative a boștinei are loc înnobilarea mustului cu compuși micromoleculari și cu compuși macromoleculari condensați, căpătați în urma oxidării compușilor fenolici. Simultan boștina își schimbă culoarea. în timpul preparării vinurilor roșii boștina se sulfitează pentru inhibarea enzimelor de oxidare și prevenirea proceselor de oxidare intensă nedorite. La început sub influența SO2 culoarea devine pală, apoi, după ce începe fermentația alcoolică și anhidrida sulfuroasă este fixată de aldehide, se restabilește. Dioxidul de carbon, ce se degajă în timpul fermentației, inhibează enzimele de oxidare și împiedică apariția nuanței brune- gălbui a culorii. Pentru a preveni procesele de oxidare în unele cazuri boștina se încălzește pînă la 70°C. Ca urmare are loc extragerea intensivă a substanțelor tanante și colorante. În timpul contactului cu boștina și fermentației pe boștină au loc și procese de autoliză a celulelor vegetale și levuriale moarte, care duc la înnobilarea mustului cu substanțe azotate și cu alte substanțe. În producerea vinurilor de masă și de șampanie e necesară separarea rapidă a mustului de boștină în scopul prevenirii înnobilării lui cu substanțe tanante, colorante și azotate și cu fermenți de oxidare. Pentru producerea acestor vinuri se folosește mustul răvac și mustul căpătat în urma primei presiuni de presare. Activitatea catecoloxidazei în mustul diferitelor fracții de presare treptat sporește. Același lucru se petrece și cu peroxidaza. Aceasta se explică prin faptul că în urma fărîmițării strugurilor și a presării lor, în must nimeresc particule în suspensie—celule ale pulpei, purtătoare de enzime. Activitatea enzimelor de oxidare depinde de concentrația ionilor de hidrogen din soluție (pH). Acțiunea optimă a catecoloxidazei are loc la pH-ul 5,3—6,8. Culesul strugurilor pentru vinurile de șampanie se efectuează la pH-ul 2,7—3,2, ceea ce contribuie 1a reducerea activității enzimelor de oxidare. Aceasta permite căpătarea vinurilor puțin oxidate. Trecerea de la o fracție la alta contribuie și la sporirea cantității substanțelor tanante, colorante și azotate. Conținutul redus de substanțe tanante și oxidaze, aciditatea înaltă protejază vinul de supraoxidare, care e condiționată de oxidarea substanțelor tanante, iar conținutul redus de azot împiedică dezvoltarea bacteriilor lactice. În fracțiile presiunii II și III cantitatea substanțelor tanante și a enzimelor de oxidare e mărită, și procesele de oxidare se intensifică datorită adiției oxigenului. Oxidarea polifenolilor duce la formarea chinonelor care provoacă schimbări chimice considerabile în must. Ele oxidează substanțele ușor oxidabile — acizii ascorbic și dihidroxifumaric, hidroxiacizii, aminoacizii și alți compuși, fapt ce duce la înrăutățirea calității mustului. După consumarea acizilor ascorbic și dihidroxifumaric începe condensarea chinonilor, produsele căreia colorează mustul în brun-cenușiu (procese de oxidare secundare). Prin urmare, pentru preparaea vinurilor de masă puțin oxidate și a celor de șampanie e necesară prelucrarea rapidă a strugurilor și separarea imediată a mustului de boștină. Fracția I se pompează în rezervoare separate și se adaugă cantități mici de anhidridă sulfuroasă (40—50 mg/1) pentru inhibarea enzimelor de oxidare. Mustul predat se sedimentează timp de 24 de ore pentru înlăturarea părticelelor în suspensie, a prafului și microorganismelor, în această perioadă sulfitarea puternică e inadmisibilă. Conform datelor unor autori (Pauli), doza de SO2 nu trebuie să depășească 100 mg/1. Folosirea temperaturilor joase permite de a micșora doza de sulfitare. Procesele de limpezire sînt accelerate cu ajutorul bentonitei, care formează un sediment ce se depune repede. Însă cantitățile mari de bentonită duc la reducerea .enzimelor și vitaminelor din must, care sînt absorbite de bentonită. Rezultate bune pot fi căpătate în urma limpezirii mustului prin centrifugare. În acest caz mustul se sulfitează numai pentru a inactiva fermenții dc oxidare.