Nivelele energetice ale starilor electronice ale moleculelor organice se situeaza la diferente energetice

care corespund ordinului de marime al energiei transportate de radiatia UV sau vizibila.

In conditii de rezonanta, moleculele pot absorbi o cantitate cuantificata de energie transportata de

radiatia electromagnetica, efectul constand in promovarea electronilor din orbitali moleculari de energie
joasa (stare fundamentala) in orbitali moleculari de energie mai inalta (stare excitata). Din acest motiv,
spectroscopia UV-Viz a fost denumita si spectroscopie electronica.

Spre deosebire de starile energetice ale electronilor din invelisul electronic al unui atom, diferitele stari
energetice ale unei molecule se situeaza pe domenii mult mai largi datorita aditivitatii

• nivelelor energetice corespunzatoare starilor electronice

• nivelelor energetice de vibratie ale legaturilor

• nivelelor energetice de rotatie ale atomilor.

Astfel, un nivel energetic determinat al unei molecule (Etotal) corespunde sumei dintre: energia starii
electronice, energia de vibratie a legaturilor si energia de rotatie a atomilor, prima dintre acestea fiind
caracterizata de valorile cele mai mari.

Etotal= Eelectroni+ Evibratie + Erotatie

În practică se prepară trei soluţii ale substanţei studiate cu aceeaşi concentraţie, dar la trei nivele de pH:
un pH la care să predomine forma HA, un altul la care să existe practic numai forma ionizată A - şi un pH
intermediar între aceştia. Lungimea de undă se alege astfel încât să existe cea mai mare diferenţă între
absorbţiile celor două specii. Este important de menţionat şi următoarele aspecte:

- trebuie să se cunoască aproximativ domeniul în care se află valoarea pKa pentru a alege corect
pH-ul intermediar la care se măsoară A şi care trebuie să fie în domeniul ± 1 al valorii pKa

- pentru determinări de acurateţe, experimentul se măsoară la mai multe valori de pH apropiate

- dacă prin creşterea pH-ului spectrul acidului sau bazei slabe studiate suferă o deplasare hipso- şi
hipocromă, termenul cu logaritm se elimină; această situaţie este puţin comună substanţelor
medicamentoase