Bacili gram negativi

de interes medical
Familia
Enterobacteriaceae
 Habitat

Enterobacteriile sunt germeni ubicuitari - se izoleaz din

sol, ap, plante, intestinul omului i animalelor.
Majoritatea (Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus
mirabilis etc.) fac parte din flora normal a organismului i
pot produce infecii oportuniste.
Unele specii ca, de pild Salmonella typhi - au habitat
exclusiv uman (bolnav sau purttor sntos).
 Din punct de vedere al patogenitii, se mpart n:
nalt patogeni (Salmonella, Shigella, Yersinia),
condiionat patogeni (E.coli, Klebsiella, Enterobacter,
Proteus, Serratia, Citrobacter)
sau lipsii de importan n patologia uman.
Rezistena la factori fizici, chimici
Sunt rezisteni n mediul extern.
Rezist 5-6 luni n apele poluate cu materii
fecale.
Supravieuiesc i se multiplic la temperatura
camerei n medii umede, n alimente, n soluii
perfuzabile.
De aici decurg posibilitile largi de rspndire a
lor n colectiviti i n spitale (enterobacteriile se
izoleaz frecvent din infecii nosocomiale).
Sunt distrui de cldur (n 30' la 55-60C i
instantaneu la fierbere), antiseptice i dezinfectante.
Din ce n ce mai multe specii sunt rezistente la
numeroase antibiotice, n special prin transfer de
plasmide.
Morfologie, caractere culturale

BGN de dimensiuni medii cu capetele rotunjite, cu

dispoziie n general necaracteristic.

Pot fi mobili (cili peritrichi) sau imobili.

Facultativ anaerobe,nu sporuleaz.

Majoritatea enterobacteriilor sunt necapsulate. Unele pot

avea o capsul proeminent (Klebsiella), iar altele
(Salmonella, E.coli) pot fi nvelite de un material capsular.
ENTEROBACTERIILE SUNT NEPRETENIOASE
NUTRITIV.
Se dezvolt cu uurin att pe mediile uzuale (bulion,
geloz, geloz-snge),

ct i pe mediile selective lactozate (Mac Conkey,

AABTL, ADCL, XLD, Istrati-Meitert), pe care putem
diferenia enterobacteriile lactozo-pozitive de cele lactozo-
negative.

Tulbur uniform mediile lichide (bulionul).

Pe medii solide se dezvolt sub form de colonii S sau R.

ntre cele dou tipuri pot exista i forme intermediare sau
uneori colonii mucoase de tip M (Klebsiella, E.coli).

Proteusul prezint pe unele medii solide (geloz, geloz-

snge) fenomenul de invazie.
 Clasificarea lor se bazeaz pe studiul
caracterelor biochimice, - criterii importante
de identificare a genului i a speciei.

-caractere biochimice comune le permit ncadrarea

n familia Enterobacteriaceae:
fermenteaz glucoza
reduc nitraii la nitrii
sunt catalazo-pozitivi
sunt oxidazo-negativi (testul oxidazei permite
diferenierea enterobacteriilor de ali bacili gram-
negativi).
Unii germeni fermenteaz lactoza (lactozo-pozitivi,
iar alii nu (lactozo-negativi), fermentarea fiind un
criteriu practic de difereniere preliminar.
Structura antigenic

a) Antigenul somatic O (polizaharidul O) face parte din

structura lipopolizaharidului (LPZ) din peretele celular.
Sunt antigene cu specificitate de grup - mpart genul n
grupe.

b) Antigenele flagelare H, prezente la bacteriile mobile

sunt de natur proteic, pot prezenta variaii.
-Sunt antigene cu specificitate de tip care mpart grupele
n tipuri. Cu anticorpii omologi formeaz aglutinate
floconoase, care dispar la agitare.

c) Antigenul capsular K este de natura polozaharidica sau

proteica si este prezent numai la unele
enterobacterii(Klebsiella)
Tipizarea serologic se efectueaz n mod obinuit
n reacia de aglutinare pe lam. n prima etap se
execut reacia de aglutinare cu seruri polivalente,
apoi cu seruri monovalente.
Genul Escherichia
 Este genul tip al familiei Enterobacteriaceae.
Denumirea genului a fost dat dup numele cercettorului
Th. Escherich care a izolat specia tip E.coli, singura de
interes medical dintre cele cinci specii ale genului.

Habitat:

Numrul acestor germeni pe unitatea de volum - n ap i

alimente - reprezint indicele coli care este un criteriu de
apreciere a gradului de poluare a apei, mediului i a
alimentelor cu materii fecale.

E.coli face parte din flora normal a intestinului la om i

animale. Formeaz aproximativ 80 din flora rezident a
colonului cu rol n sinteza unor vitamine din grupul B i K
i contribuie la meninerea unui echilibru al biocenozei.
Nou-nscutul va fi infectat n timpul naterii, prin contact
cu flora perineal matern (dar i n urma contactului cu
personalul medical).
Morfologie, Caractere culturale i biochimice
Sunt bacili gram-negativi,
scuri, cu capetele rotunjite, nesporulai, necapsulai (rar
unele tulpini pot avea o pseudocapsul),
n general mobili (cu cili peritrichi).
Sunt germeni aerobi, facultativ anaerobi, nepretenioi
nutritivi.
Se dezvolt pe mediile uzuale i pe mediile selective
lactozate pe care formeaz colonii lactozo-pozitive (n
proporie de 95%)-de tip S, iar tulpinile pseudocapsulate
formeaz colonii cu aspect mucos.
Prezint caracterele comune enterobacteriilor. Caracterele
biochimice se cerceteaz pe setul de teste biochimice care
permit identificarea genului.
 CARACTERE BIOCHIMICE

TSI,MIU,UREE,CITRAT MEDIU LACTOZAT

 Factori de virulen
Secret diverse substane biologic active, de tipul:
enterotoxine, hemolizine, enzime care asigur
rezistena la antibiotice,
LPS sau endotoxina, responsabil de creterea sintezei
de macrofagelor, aflat la originea ocului septic; rol n
lupta contra mecanismelor de aprare nespecifice,
pseudocapsula(antigenul K1) -de natur polizaharidic,
are rol antifagocitar, realiznd un veritabil camuflaj
imunologic al bacteriei.
Structura antigenic
Structura antigenic la E.coli este complex, fiind descrise
aproximativ 165 antigene O (pe baza crora bacilii sunt
mprii n grupe serologice), 54 H (grupele sunt mprite
n tipuri) i 103 K1.
a) Infeciile enterale sunt produse de 5 grupe de
E.coli:

E.coli enterotoxigen (ETEC) - secret enterotoxine

termolabile sau termostabile. ETEC produce forme
uoare de enterit sau un sindrom diareic holeriform.

E.coli enteroinvaziv (EIEC) - determina un sindrom

diareic dizenteriform, cu scaune mucopurulente,
sangvinolente.

E.coli enteropatogen (EPEC) - este principalul agent

etiologic al sindromului diareic la copii mici, la care
determin o imunizare precoce. De aceea,
mbolnvirile prin EPEC la vrste mai mari de 2 ani
sunt rar semnalate. Factorii de patogenitate sunt pili
de aderen i o toxin Shiga-like produs prin
conversie lizogen.
E.coli enterohemoragic (EHEC) - produce dou
toxine Shiga-like, denumite verotoxine cu efect
citopatic pe linia celular Vero. Iniial apare o diaree
apoas care devine hemoragic. Febra este mic sau
absent. Boala se declaneaz predominant n
sezonul cald i la copii sub 5 ani, prin consum de
carne de vit insuficient preparat termic i de lapte
nepasteurizat. Aproximativ jumtate din EHEC
aparin serotipului O157 : H7.

E.coli enteroaderent, denumit n prezent

"Enteroaggregative E.coli" (EAggEC), este considerat o
cauz a diareei persistente la copiii din rile
subdezvoltate.
Rezervorul de infecie al tulpinilor de EIEC, ETEC,
EPEC este uman, iar al celor EHEC este bovin.
b) Infeciile extraenterale:
infecii ale tractului urinar (ITU) - produce 50-90 din
ITU.
Cel mai frecvent se izoleaz serotipurile O4, O6 i
O75.
Sursa infeciei este cel mai frecvent cea enteral (n
infeciile ascendente), fapt favorizat de anatomia
tractului genital feminin (uretra scurt), precum i de
prezena raporturilor sexuale.

Calea descendent, este mai rar i se datoreaz

unor diseminri septice secundare.
O alt posibilitate de contaminare frecvent ntlnit
n mediul spitalicesc este cea iatrogen (prin
intermediul unor sonde, catetere, etc.). De obicei
germenii de spital achiziionai sunt deosebit de
rezisteni la agenii antimicrobieni.
 septicemii - E.coli este bacilul gram-negativ cel
mai frecvent izolat din septicemii. Diseminarea
hematogen se produce de obicei de la un focar
infecios urinar sau gastrointestinal.
meningite neonatale - 75 din tulpinile de
E.coli izolate posed antigenul capsular K1.
infecii biliare
infecii respiratorii
infecii O.R.L.
suprainfecii ale plagilor i arsurilor
infecii genitale
infecii nosocomiale (deseori infeciile enumerate:
urinare, ale plgilor chirurgicale, etc. pot lua caracter
nosocomial
 Epidemiologie
Infeciile extraenterale sunt de obicei endogene, cu
tulpini aparinnd florei intestinale normale.
n infeciile enterale, izolarea i cuantificarea prezenei
lui E.coli n alimente, ap, reprezint principalul test de
evideniere a contaminrii fecale. Profilaxia acestora se
refer la respectarea msurilor de igien.
Transmiterea iatrogen din infeciile nosocomiale se
realizeaz prin contact direct cu mini sau instrumente
contaminate, iar profilaxia se refer la mbuntirea
calitii actului de ngrijire medical din spitale.
Rspunsul imun, profilaxie i tratament
Rspunsul imun este n general slab, nesemnificativ.
Profilaxia este nespecific.
Tratamentul se face n funcie de rezultatul
antibiogramei i de localizarea antigenului patogen.
n acest sens deosebim:
un fenotip sensibil (slbatic), caracterizat printr-o
relativ sensibilitate la beta-lactamine (aprox. 2/3 din
tulpini),
un fenotip productor de penicilinaz (PAZA),
caracterizat prin rezisten la amino i carboxipeniciline
(aprox. 10% din tulpini),
un fenotip productor de cefalosporinaz(CAZA) (2-
6%), presupune rezistena la asociaia
amoxicilin/clavulanat, precum i la cefalosporinele I,
asocierea ultimelor dou fenotipuri (PACA)presupune
doar sensibilitatea la cefalosporinele III,
fenotipul productor de beta -lactamaze cu spectru
extins (ESBL) este ntlnit printre tulpinile de spital,
presupune rezistena inclusiv la cefalosporinele III, cu o
relativ sensibilitate la fluoroquinolone.
Genul Proteus
Genul Proteus cuprinde 4 specii:
P.vulgaris, P.mirabilis, P.penneri. n patologia uman
se ntlnesc doar primele dou.
Habitat
Germenii din genul Proteus sunt foarte rspndii n
natur (gunoaie, sol, ape reziduale, carne alterat)el
particip la procesele de putrefacie. La om i animale -
face parte din flora normal a tubului digestiv.
Morfologia: Sunt bacili gram-negativi scuri, cu
capetele rotunjite, cu polimorfism accentuat, foarte
mobili (au cili peritrichi), nesporulai, necapsulai.
Caractere biochimice: definesc genul i
difereniaz speciile de Proteus ntre ele. Sunt
germeni lactozo-negativi, produc H2S, ureaz.
Elaboreaz enzime cu caracter proteolitic (particip
la procesul de putrefacie).
 CARACTERE BIOCHIMICE

TSI,MIU,UREE,CITRAT DEMARCATIE DIENEZ

 Caractere de cultura
Sunt germeni aerobi, condiionat anaerobi, nepretenioi
- cresc uor pe mediile de cultur.
Pe bulion tulbur uniform mediul, formeaz o pelicul
la suprafa i degaj un miros de putrefacie.
Pe geloz, geloz-snge crete chiar i pe poriunile
nensmnate sub forma unor valuri concentrice ce
invadeaz toat suprafaa mediului de cultur
(fenomenul de invazie).
Pe geloz nclinat apare fenomenul de crare -
datorit mobilitii accentuate a germenilor.
Tulpinile diferite nsmnate pe acelai mediu nu se
amestec; la locul de ntlnire a valurilor de expansiune
apare o linie de demarcaie de 2-3 mm (fenomenul liniei
de demarcaie a lui Dienes). Dac tulpinile aparin
aceluiai serotip, valurile de invazie se suprapun.
Fenomenul de invazie poate fi inhibat prin
incorporarea n mediul de cultur a unor substane
inhibante (medii selective)
Pe mediile selective lactozate se dezvolt sub forma
unor colonii lactozo-negative de culoarea mediului cu
centrul negru datorat producerii de H2S.
Structura antigenic
Antigenele determinante ale proteusului sunt
antigenele somatice O i antigenele flagelare H.
 Semnificaie clinic i patogenitate
Proteusul este condiionat patogen. Caracterele de
patogenitate se manifest prin multiplicare i
endotoxin.
Infeciile urinare sunt cele mai frecvente afeciuni
determinate de acest gen-majoritatea produse de
P.mirabilis i mai rar de P.vulgaris. Deoarece produce o
mare cantitate de ureaz ce descompune ureea n CO2 i
NH3 care cresc pH-ul urinar(toxic pentru uroepiteliu -
efect necrozant).
Germenii din genul Proteus se pot izola i din infecii
O.R.L, infecii respiratorii, infecii ale plgilor i arsurilor,
septicemii i meningite la nou-nscui i sugari, mai rar
din infecii digestive.
Proteusul este unul dintre cei mai importani germeni
de spital producnd infecii nosocomiale greu de tratat
datorit multirezistenei la antibiotice.
 Rspunsul imun, profilaxie i tratament
Rspunsul imun umoral este slab. Deoarece
numeroase tulpini prezint multirezisten la
antibiotice i mai ales cele izolate din infeciile
nosocomiale, tratamentul intit este rareori posibil
n absena antibiogramei.
Genul Klebsiella
Din cele 7 specii ale genului, 4 sunt importante n patologia
uman: K.pneumoniae, K.oxytoca.
Habitat
Sunt germeni condiionat patogeni. Sunt componeni ai
florei intestinale la om i animale, iar n numr redus se
gsesc la nivelul mucoasei tractului respirator. Se pot izola
din ap, sol, plante.
Morfologie, Caractere culturale, Caractere
biochimice
Sunt bacili gram-negativi, scuri, cu capetele
rotunjite, imobili, nesporulai, capsulai, dispui n
diplo n sensul lungimii (mai rar izolai, sau n lanuri
scurte 2-3 bacili nconjurai de o capsul comun).
Sunt germeni aerobi, facultativ anaerobi,
nepretenioi nutritiv.
CARACTERE BIOCHIMICE-
TSI,MIU,UREE,CITRAT
Klebsiella oxytoca
Pe medii solide formeaz colonii mari, mucoase,
confluente.
Pe mediile selective lactozate coloniile sunt iniial lactozo-
pozitive, care dup 24 de ore devin "lactozo-negative" prin
alcalinizarea mediului.
Prezint caracterele biochimice comune enterobacteriilor.
Fermenteaz lactoza. Pe baza testelor biochimice se
evideniaz genul i specia.
Structura antigenic
Structura antigenic cuprinde antigene somatice O i
antigene capsulare K. n funcie de antigenele K au fost
descrise peste 80 de serotipuri.
Tulpinile patogene aparin de regul tipurilor 1, 2 i 3.
 Semnificaie clinic i patogenitate
Sunt germeni condiionat patogeni. Puterea patogen este
dat de:
prezena capsulei care asigur rezistena la fagocitoz,
endotoxinei
enterotoxine termostabile evideniate la unele tulpini izolate din
scaunul copiilor cu enterit.
Infeciile cu Klebsiella apar n cazul scderii rezistenei
antiinfecioase a organismului. Se izoleaz din infecii
urinare, respiratorii, septicemii, meningite (n special
neonatale).
Klebsiella este agentul etiologic important al unor infecii
nosocomiale.
K.rhinosleromatis este asociat cu rinoscleromul - rinit cronic
hipertrofic cu leziuni granulomatoase.
K.ozenae este asociat ozenei - o afeciune inflamatorie cronic cu
supuraii mucoase i fetide nsoit cu atrofia mucoasei nazale ce poate
duce la pierderea simului olfactiv. Ambele infecii sunt mai frecvente n
zonele tropicale.
 Rspunsul imun, profilaxie i tratament
Rspunsul imun umoral este slab i profilaxia nespecific.
Fenotipul slbatic se caracterizeaz printr-un nivel
sczut de rezisten la amino i carboxipeniciline,
(activitate restaurat prin inhibitorii de beta-lactamaz),
cloramfenicol, tetraciclin, streptomicin, biseptol.
Mecanismele dobndirii acestei rezistene pot fi multiple.
Deosebim astfel un fenotip PAZA (aprox. 12% dintre
tulpinile de spital), caracterizat prin: rezisten crescut
la amino, carboxipeniciline (inclusiv la asocierea cu
inhibitorii de beta-lactamaz), cefalosporinele I.
Fenotipul productor ESBL a fost pentru prima dat
descris n 1985 n mediul spitalicesc i se caracterizeaz
printr-un nivel crescut de rezisten la:
amino,carboxipeniciline,cefalosporine I, II, cu o
sensibilitate diminuat la cefalosporinele III i
aztreonam i conservarea sensibilitii la cefoxitin, cefotetan,
latamoxef (test de sinergie-buon de ampanie).
Genul Morganella i
Providencia
Mult vreme clasificarea germenilor din genul Proteus a
fost controversat, apoi genul a fost scindat pe baza
proprietilor biochimice n 3 genuri:
genul Proteus,
genul Morganella cu o specie (Morganella morganii)
i genul Providencia cu 5 specii. Germenii din
ambele genuri sunt condiionat patogeni i pot fi
izolai din materiile fecale de la om i animale
precum i din apa sau alimentele contaminate.
Dup ce mult timp au fost considerai nepatogeni s-a
constatat implicarea lor n infecii urinare, mai ales la
pacienii cateterizai, precum i n alte infecii
nosocomiale.
Tratamentul este dificil, deoarece tulpinile au dobndit
un grad nalt de rezisten.
Genurile Enterobacter,
Citrobacter, Serratia i
Arizona
 Cuprind germeni care fac parte din flora normal
intestinal a omului i animalelor i pot contamina
solul, apa, plantele odat cu eliminarea materiilor
fecale.
Genul Enterobacter cuprinde 5 specii care se
difereniaz pe baza testelor biochimice: E.aerogenes,
E.agglomerans, E.cloacae, E.intermedius i
E.sakazakii. specia tip a genului, secret o enterotoxin
care determin potenialul su patogen. (determin mai
ales infecii ale tractului urinar la pacienii cateterizai).
Genul Citrobacter cuprinde 3 specii: C.amalonaticus,
C.diversus, C.freundii care se difereniaz prin
caracterele biochimice. Numele genului este dat de
proprietatea acestor bacterii de a utiliza citratul de
amoniu ca unic surs de carbon.
Genul Serratia a suferit multe modificri taxonomice.
Iniial, n cadrul genului a fost recunoscut o singur
specie - S.marcescens, ca n prezent s cuprind 10
specii care se deosebesc biochimic.
-Pe mediile de cultur, dup o incubare de 3-5 zile
la 25-30C, apar colonii caracteristice palid roietice
deoarece specia este pigmentogen (produce un pigment
de culoare roie nedifuzibil n mediu).
Germenii din aceste genuri sunt rareori cauza unor
infecii primare la persoanele cu o imunitate normal.
Sunt frecvent implicai n etiologia unor infecii
nosocomiale la pacieni cu imunitatea deprimat.
Genul Arizona reprezint de fapt fostul grup
Salmonela-Arizona, care a suferit modificri de
taxonomie i a fost separat ntr-un gen aparte.
Tratamentul antibiotic se face conform antibiogramei
datorit multirezistenei la chimioterapice a acestor
germeni i mai ales a speciilor de Enterobacter.