Metabolismul azotului

Rolul proteinelor structurale n procesele metabolice implic

dou concepte a) rezerva de aminoacizi i b) turnover-ul
proteinelor
Rezerva de aminoacizi. Aminoacizii liberi sunt prezeni n
celule, snge i lichidul extracelular, formnd rezerva de
aminoacizi. Aceast rezerv este alimentat din: 1) aminoacizii
provenii din degradarea proteinelor mbatrnite biologic, 2)
aminoacizii provenii din degradarea proteinelor alimentare, 3)
aminoacizii neeseniali sintetizai de novo
Aceast rezerv poate fi folosit la: 1) sinteza proteinelor proprii,
2) sinteza de molecule azotate esniale mici, 3) conversia n
glucoz, glicogen, acizi grai
Rezerva de aminoacizi este de 90-100g ( 70 Kg ). Rezerva
este constant respectiv viteza de degradare= viteza de sintez
 Metabolismul azotului
Turnover-ul proteinelor. La unele proteine concentraia
celular este reglat de controlul sintezei acestor proteine,
pentru altele rata de sintez este relativ constant iar nivelul
proteinelor intracelulare este controlat de degradarea selectiv
a acestora.
Exist dou ci majore de degradare a proteinelor mbtrnite,
defecte sau inutile: 1) mecanismul ubiquitin-proteazomi
dependent de energie (degradarea mai ales a proteinelor
endogene) 2) enzimele lizozomale independent de energie
Cilindru gol
(degradarea proteinelor extracelulare, proteine plasmatice,din enzime
proteinele din membranele celulare proteolitice
cu proteine
reglatoare
la capete
Mecanismul ubiquitin-proteazomi
 Digestia proteinelor alimentare
Boala celiac
Ingerarea alimentelor care conin gluten
declaneaz o reaciei imun, ce Aminoacizii liberi sunt
cauzeaza leziunile intestinale prelauai de enterocite
caracteristice bolii. Aceste leziuni ale prin intermediul unui
intestinului subtire, determina tulburari sistem de trasport
de digestie si absorbtie. dependent de Na+. Di i
tripeptidele sunt absorbite
printr-un sistem de
transport dependent de
H+. n citoplasma
enterocitelor are loc
hidroliza peptidelor pna
la aminoacizi, care sunt
preluai de circulaia
sanguin. n ficat
aminoacizii sunt fie
degradai, fie sunt
eliberai n circulaia
general
 Digestia proteinelor alimentare
Boala celiac
Ingerarea alimentelor care conin gluten
declaneaz o reaciei imun, ce aminoacizilor n celule.
cauzeaza leziunile intestinale
caracteristice bolii. Aceste leziuni ale
intestinului subtire, determina tulburari
de digestie si absorbtie.
Exist cel puin apte
sisteme de transport a
Unul dintre sistemele de
trasport este responsabil
pentru transportul
cisteinei, ornitinei,
argininei i lizin. Acest
sistem de transport poate
fi afectat (boal genetic)
ceea ce duce la apariia
aminoacizilor n urin.
Clinic se manifest prin
precipitarea cisteinei sub
form de calculi care
produce n cele din urm
blocarea tractului urinar.
Defectul de transport al
Trp provoc boala Hartnup
si simptome neurologice si
dermatologice.
 Dezaminarea oxidativ a
a-aminoacizilor PLP
amino
R1 CH COOH + R2 C COOH
transferaze R1 C COOH + R2 CH COOH
NH2 O O NH2

PLP
CH3 C COOH + R CH COOH CH3 CH COOH + R C COOH
Alanin pyruvat
NH2 transaminaza NH2 O
O

COOH COOH
H2O NH3
CH2 Glutamat DH CH2 Lys, Thr
CH2 CH2

CH NH2 NAD + + C O
NADH+H
COOH COOH
+
+ NADPH+H aCG
Glu NADP
 Dezaminarea oxidativ a
a-aminoacizilor
COOH COOH
COOH COOH
CH2 CH2
CH2 CH2
CH2 CH2
CH2 CH2
CH NH2 C O
CH NH2 C O
COOH COOH
COOH COOH
Glu aCG
Glu aCG GPT
GOT
COOH COOH ALT
AS T
CH2 CH2 CH3 C COOH CH3 CH COOH

C O CH NH2 O NH2
Pyr Ala
COOH COOH
OA Asp
 Generarea de energie prin
catabolizarea amino acizilor
10-15% din
Pyr + aAAc Ala + aCAc energia
Pyr total

aCG GluDH
Glu aCG
H2O
NH 3
Asp
OA NADH+H
+

LOB
Detoxifierea amoniacului
MITOCONDRIE Carbamil fosfat

NH3+CO2 Carbamil fosfat

sintetaza
NH2

O
O
P
Ciclul ureogenetic
2ATP
2ADP+Pi

MITOCONDRIE
Orn
NH2 NH CH2
Ornitin trans
C O carbamilaza (OCT) C O CH2

O P NH2 CH2
Citrulina CH
Pi COOH
NH CH2 NH2 CH2
NH2 NH2
H2O
NH C CH2 CH2
NH2 Arginaza C O+
HOOC CH NH2 CH2 CH2
NH2
CH2
CITOSOL NH CH2 CH COOH UREE CH COOH
COOH
NH CH2 NH C CH2 NH2 NH2
Arginin succinat sange
C O CH sintetaza NH Orn
2 CH2
NH2 urina
CH2 HOOC CH CH COOH reintra in
mitocondrie
CH COOH CH2 NH2

NH2 COOH
ATP Ac. arginin succinic
AMP+PPi

Arg
NH CH2 Ac.Fumaric NH CH2
NH C CH2 NH C CH2
HOOC H
Arginin succinat
NH liaza C NH2
CH2 + CH2

HOOC CH CH COOH C
CH COOH
H COOH
CH2 NH2 NH2
COOH
 Reglarea ureogenezei i relaia
dintre ciclul ureogenetic si ciclul
ac.citric
Malat Arg
CK Fumarat UREE

Orn NH3
GluDH
aCG Glu
N-a cetil-gluta ma t Carbamil
+ + OA fosfat
NADH+H NAD
NH 3 Ac.Arg.Succ
CO2
aCG Citrulina
O+
alo Carbamil fosfat LOB Asp
sintetaza Glu
Gln
ATP
UREE
GluDH
aCG Glu

NH 3

CK ATP
 Tulburri ale echipamentului
enzimatic al ciclului ureogenetic
Nivelul normal al NH3 din snge este de 5-50 mmol/l. n
situaii patologice valoarea poate s creasc pn la 1000
mmol/l, n acest caz se instaleaz hiper azotemia ce
reprezint o urgen medical.
Simptomele sunt cele specifice intoxicaiei cu NH3 :
tremurturi,
vorbire dificil (disartrie),
somnole,
vrsturi,
edem cerebral,
vedere neclar
com
deces
 Tulburri ale echipamentului
enzimatic al ciclului ureogenetic
Se cunosc dou tipuri de hiperazotemii:
1. Hiperazotemia dobndit. Afectarea ficatului (hepatit
viral sau toxic, ischemie, ciroz) este o cauz
frecvent de hiperazotemie la aduli. Ca rezultat a
acestor afeciuni, sgele portal este untat direct n
circulaia general, far a mai trece prin ficat pentru
detoxifiere, ca urmare amoniacul NU mai este
transformat n uree.
2. Hiperazotemia ereditar. Au fost identificate deficiene
genetice pentru fiecare dintre cele cinci enzime
implicate n ciclul ureogenetic. Simptomele sunt retard
mintal, AVC, moarte timpurie....com.
 Tulburri ale echipamentului
enzimatic al ciclului ureogenetic
Hiperazotemia ereditar.
1. Deficiena de carbamoilfosfat sintetaz (hiperamonemia
de tip I). Terapie, diet srac n proteine, dar totui
apare retardul mintal.
2. Deficiena de ornitin transcarbamoilaz (hiperamonemia
de tip II). Este cea mai frecvent, 1:30 000 de nou
nascui, boal de deficit a unei enzime ureeogenetice.
Gena deficitar este localizat pe cromozomul X. Deci
brbaii sunt mai puternic afectai dect femeile, care
deseori sunt asimptomatice. Acestea menifest o
aversiune fa de alimente bogate n proteine.
 Tulburri ale echipamentului
enzimatic al ciclului ureogenetic
Hiperazotemia ereditar.
3. Deficiena de argininosuccinat sintetaz. Incapacitatea
metabolizrii citrulinei, determin difuzia acesteia n
snge i excreia n urin (citrulinotelie).
4. Deficiena de argininosuccinat liaz. (n acesat situaie
se excret n urin argininosuccinat.
5. Deficiena de arginaz. Se acumuleaz i se excret
arginin, alturi de cantiti reduse de uree datorit
activitii arginazei renale care are activitate redus.
 Utilizarea scheletelor de carbon
Decarboxilarea aminoacizilor
GluGABA HisHistamin OrnPutrescein
LysCadaverin SerEtanolamin Aspb Ala
GABA este un neurotransmitor inhibitor care acioneaz
asupra neuronilor post-sinaptici printr-un mecanism care
implic deschiderea unui canal pentru ionii Cl-. Urmarea este
o hiperpolarizare a membranei, care micoreaz
excitabilitatea neuronului post-sinaptic
Histamina produs n special de mastocite este responsabil
de reaciile alegice cnd este eliberat n caniti excesive.
Cea mai dramatic reacie alergic este anafilaxia. Efectul
histaminei la nivelul tubului digestiv, depide de legarea ei de
recetori. De receptorii H2 crete secreia gastic, iar
asocierea de H1 o reduce.
Utilizarea scheletelor de carbon
Glucoza Glu
Ala Gln
Gly His
Ser Citrat aCG Pro
Cys Pyr Arg
Thr

CH3COSCoA Met
Val
Ile SuccinilCoA
Leu Asp
Lys Asn
OA
Trp

AcetoacetilCoA Fumarat
Phe
Tyr
 AMINOACIZI CARE SE
DESCOMPUN N ACID PIRUVIC
COO- COO- COO-
transaminare transsulfurare
H C CH2 SH H C CH2 SH H C CH3
NH3+ O O
2H H2S

COO- COO- COO- COO-

O O
GPT
H C CH3 + H C CH2 CH2 C H C CH3 + H C CH2 CH2 C
O -
O-
NH3+ O O NH3+
 COO- COO-
H H
Threonin
H C C CH 3 H C H+ C CH 3
aldolaz O
Thr NH3+ OH NH3+

COO- PLP COO-

S erin hidroximetilen
H C H +H2O H C C H2 OH
transferaz
Gly NH3+ NH3+
5 10
N N metilen-FH4 FH4

COO- COO-
PLP
S erin dehidrataz
H C C H2 OH C C H3
- NH 3
S er NH3+ O
H Aldehid
C CH 3 +H2O HOO C CH 3
dehidrogenaz
O
FAD FADH2
Acetat S C oA
HOO C CH 3 + C oAS H + ATP CH 3 C + AMP + PPi
tiokinaza
O
 Aspecte patologice
Glicinuria, excreie excesiv de Gly n urin asociat cu
tendina de formare
-
a calculilor renali pe baz de oxalat de Ca
COO
COO- LDH COO-
Glicin oxidaz
H C H -
H C O + COO
Gly NH3+ glioxilat NAD
+ oxalat
O2 NH 3+ H2O2 NADH+H

Hiperoxaluria, excereie continu i intens a acidului

oxalic. Consecine, urolitiaz, nefrocalcinoz infecii ale
tractului urinar.
Hiperglicinemie necetonic, principalul simptom, retard
mintal datorit acumulrii Gly
Cistinurie excreia excesiv a cystinei cu formarea de
calculi
Cistinoz cristale de cistin se depoziteaz n mai multe
esuturi i organe, insuficien renal
AMINOACIZI CARE SE DESCOMPUN N
OXALOACETAT SAU a-CETOGLUTARAT
COO- COO-
O
Asparaginaza
H C CH2 C H C CH2 C OOH
+ NH2 +
NH3 NH3

NH3
H H
N+H3 C COO - COO -
O C COO- COO-
O O
GOT
CH2 + H C CH2 CH2 C CH2 +H C CH2 CH2 C
O -
NH3+ O-
C O C
O- O O- O

COO- COO-
O H2O
Glutaminaza
H C CH2 CH 2 C H C CH2 CH 2 COOH
NH3+ NH2 NH3+
NH3

COOH COOH
H2O NH3
CH2 Glutamat DH CH2

CH2 CH2

CH NH2 NAD + + C O
NADH+H
COOH COOH
+
NADP
+ NADPH+H aCG
Glu
 AMINOACIZI CARE SE DESCOMPUN N
a-CETOGLUTARAT SAU OXALOACETAT
COO- COO-
COO- O
N Histidin N Urocanat
H C CH2 H C CH
+
amonioliaza hidrataza CH2 CH2
N
NH3 N N
H H H2O 4-imidazolonNH
NH3 Ac.urocanic
5-propionat

COO- O COO- COO-

N Imidazolon CH Formimino
CH2 CH2 CH2 C H C OOH CH2 CH2 C H C OOH
transferaza
2
propionaza
N N
H H2O HN H 5-formimino-FH4
N H2
Ac.N-formiminoglutamicFH 4

- H2 - H2
OOC C OOC C -
C H2 C H2 OOC C H ( C H 2)2 C HO
C prolinoxidaza C +H2O
H N
C H2 H N
CH NH2
H 1/2O2 H2 O H
Pirolin 5-carboxilat S emialdehida Ac.glutamic

H2O
- - -
OOC C H ( C H 2)2 C HO OOC C H ( C H 2)2 C OO
+ +
NH2 NAD NADH+H NH2
 AMINOACIZI CARE SE DESCOMPUN N
a-CETOGLUTARAT SAU OXALOACETAT COOH
NH2 NH2 CH2
COOH H
COOH CH COOH CH CH HOOC
C
CH2 NH2 + Arginin succinat CH2 NH
C
liaza
CH2 H HOOC CH2 C NH
C NH
CH2 NH Ac.Fumaric CH2 NH
Arg Ac. arginin succinic

NH2

CH COOH

CH2
CH2 NH
COOH

CH2 C NH CH2 NH
Arginin succinat
sintetaza
CH2 NH CH2 C O -
OOC C H ( C H 2)2 NH2 aC G
COOH CH CH COOH CH2 NH2
NH2
NH2 CH2 COOH CH
Ornitina
COOH NH2
-
ATP Citrulina OOC C H ( C H 2)2 C HO Glu
AMP+PPi
Orn NH2
CH2 NH NH3 S emialdehida Ac.glutamic
Ornitin trans NH2
carbamilaza (OCT)
CH2 C O C O
C O2
CH2 NH2 O P

COOH CH
Pi
NH2
 Aspecte patologice
Hiperprolinemia de tip I, apare n cazul deficitului de prolin
oxidaz, care duce la acumularea de prolin, uneori este
asimptomatic, iar la unele persone pot s apar convulsii,
retard mintal, sau alte probleme neurologice
Hiperprolinemia de tip II apare n cazul deficitului de
glutamat semialdehid dehidrogenaza, are drept rezultat
acumulare de prolina i de pirolin 5-carboxilat, uneori este
benign, dar implic de multe ori convulsii i retard mintal.
Histidinemie boal genetic la care la jumtate din cei
afectai de retard mintal i defecte de vorbire, datorat
deficitului de histidin liaz
Hiperagininemie deficit de arginaz hepatic
 AMINOACIZI CARE SE DESCOMPUN N
COO- SUCCINIL CoA
H C CH2 CH 2 S CH 3 Homocisteina
Deficitul de a cetoacid DH,
S er
provoac boala urinei cu
+
NH3 ATP

-
Pi+PPi
miros de sirop de arar,
COO COO- COO-
NH2
boal genetic cu inciden
HC NH2 C N H C CH2 S CH 2 C H2 CH
CH2
N C
CH NH3+ NH3+ relativ mare. n urina i
HC C
N C istationina
CH2 N sngele nou nascutului se
H2 O
H 3C S
+
CH2 O
C ys gsesc cantiti mari de Val,
NH3
Ile, i Leu ct i cetoacizii
H H
H H COO-
OH OH CH 3 C H2 C O corespunztori. Dac se
Acceptor Ac. a - cetobutiric
+
depisteaz precoce, nou
Acceptor C oA-S H NAD
metilat +
nscuii sunt hrnii cu
C O2 NADH+H
S -adenozil homocisteina
S C oA
amestec de aminoacizi din
H2 O

Adenozina CH 3 C H2 C O
care lipsesc cei trei
aminoacizi. Dup revenirea la
COO-

H C CH2
normal a valorilor sanguine,
CH2 SH
NH3 + se poate relua alimentaia
S uccinil C oA

COO- a-cetoacid DH
normal
CH3
transaminare/oxidare/decarboxilare/
H C CH HOOC C H2 C H2 CO S C oA
oxidare/hidratare/oxidare/izomerzare
NH3+ CH3
 AMINOACIZI CARE SE DESCOMPUN N
SUCCINIL CoA
COO- CH3
C H3 C O S C oA
transaminare/oxidare/decarboxilare/ +
H C C* CH 2 CH 3
oxidare/hidratare/oxidare/izomerzareC H3 C H2 C O S C oA
NH3+ H

ATP+CO2 ADP+Pi
O O O

CH3 CH2 C
propionil CoA -OOC
SCoA carboxilaza CH C SCoA metil malonilCoA CH3 CH C SCoA
racemaza
CH3 COO-
(S)metil malonilCoA (R)metil malonilCoA
Propionil CoA

metil malonilCoA
O mutaza
-
OOC CH2 CH2 C SCoA B12
Succinil CoA

Deficitul de propionil-CoA carboxilaz produce acidemia propionic,

tratament diet srac n proteine
Aciduria metil-malonic,de dou tipuri 1. rspunde la administrarea de
doze mari de Vitamina B12 intramuscular, cauza de lipsa prii prostetice
(Vit.B12) a enzimei metil-malonil-CoA mutazei. 2. rspunde la administrare
parenteral de doze relativ mici de Vit.B12. Terapia, dificil se elimin Met,
Val i Ile din alimentaie
AMINOACIZI CARE SE DESCOMPUN N ACETIL
CoA SAU ACETOACETIL CoA
C OOH

C H2
a -ceto-
COO- glutarat COO- S accharopina C H2 Deficitul de
H C CH2 CH 2 CH 2 CH 2 NH 3+ H C CH2 CH 2 CH 2 CH 2 NH C H saccharopin DH
+ +
NH3 +
NADPH+H NH3 +
H2O+NAD C OOH
NADP
+
+
hiperlizinemie i
NADH+H C OOH
NADH+H
+
+
urie, simptome
COO- NAD COO- C H2

H C
Ac.a -aminoadipic
CH2 CH 2 CH 2 COOH H C CH2 CH 2 CH 2 CHO + C H2
retard mintal i
NH3+ a -ceto- NH3+ S emialdehida
H2N CH fizic. Se poate sau
glutarat ac. a -aminoadipic

- Glu C O2
C OOH nu s fie asociat
COO C oAS H
H C CH2 CH 2 CH 2 COOH C oAS C CH2 CH 2 CH 2 COOH
cu hiperamonemie.
O Ac.a -cetoadipic +
NAD NADH+H
+ O Glutaril C oA
Hiperamonemia se
FAD
datoreaz inhibiiei
C O2
FADH2
competitive a Lys
C oAS C CH CH CH 3 C oAS C CH CH CH 2 COOH
O O
la arginaza
C rotonil C oA Glutaconil C oA
H2O hepatic, ceea ce
OH NAD
+
NADH+H
+
O
duce la ncetinirea
C oAS C CH2 CH CH 3 C oAS C CH2 C CH 3 ureogenezei
O b -hidroxi-butiril C oA O Acetoacetil C oA
 AMINOACIZI CARE SE DESCOMPUN N ACETIL
CoA SAU ACETOACETIL CoA
COO- COO- reducere MELANINA
transaminare H Ac.fenil lactic
H C CH2 C CH2
Ac.fenil acetic ALBINISM
NH3 +
O decarboxilare
O2 H4biopterin
Fenilalanin hidroxilaza
H2biopterin FENILCETONURIE
COO-

H C CH2 OH
NH3+
transaminare

COO-

C CH2 OH
4-Hidroxifenil piruvat
O
COO-

C CH2 OH
4-Hidroxifenil piruvat
O
O2
4-Hidroxifenilpiruvat hidtoxilaza
ALCAPTONURIE
C C O2 CH2 COO-
CH2 COO-
OC C H3
Acetoacetat
HO OH
Homogenitizat H
-
C OO
O2 Hidrolaz
Homogenitizat oxidaza -
OOC H
CH2 COO -
CH2 COO - Fumarat
COO-
- OC Izomeraz OC CH3 transaminare/oxidare/decarboxilare/ C H3 C O S CoA
OOC O H O
H C CH2 CH +
-
oxidare/hidratare/oxidare/izomerzare O
H H OOC H CH3
NH3+
4-Malonilacetoacetat Fumaril acetoacetat C H3 C C H2 C O S CoA
AMINOACIZI CARE SE DESCOMPUN N ACETIL
CoA SAU ACETOACETIL CoA
COO-
HOOC
H C CH2
NH3+
N H2N Ac. 3-hidroxiantranilic
O2 OH
O2
COO -
O O
OH HOOC CH
NH3+ CH2 CH2 H C CH2 C
+
NH3
S erotonina N H2N C OOH
H OHC HN
N-formil kinurenina
H2 O
C O2
Formiat
H O C H3 COO- HOOC C CH CH CH CH
N CH2 CH2 O
H C CH2 C NH2 O
C O
N +
H NH3
C H3
Melatonina H2N
Kinurenina +
+
O2 NADPH+H H2O NAD
+ +
H2O NADP NADH+H
COO- O HOOC C CH CH CH C OOH
H C CH2 C NH2
+
NH3+ H2O NADH+H
H2N NAD
+
NH3
H2O OH
3-hidroxi-
Ala kinurenina HOOC C C H2 C H2 C H2 C OOH
HOOC O
C O2
H2N Ac. 3-hidroxiantranilic C O2
OH
Acetoaceti-C oA

Vitamina PP
 ALTE ASPECTE ALE DEGRADARII
N NH
AMINOACIZILOR C H NH
NH 2 2 2
C H2 NH C NH C
FICAT NH2 N C H2 C OOH + C H2
C H2
H C H2
C H2 Ac.guanidinacetic
+ NH2 C H2 C OOH CH NH2
CH NH2
C OOH
C OOH

S -adenozil S -adenozil
metionina homocisteina
NH2 NH2
NH C NH C
N C H2 C OOH N C H2 C OOH
H C H3 C reatina
N MUCHI I
CREIER NH2 NH PO3H2
NH C C PK NH C
N C H2 C OOH +ATP N C H2 C OOH +ADP
C H3 C H3

NH PO3H2 NH C O
NH C NH C
N C H2 C OOH N C H2
C H3 Pi C H3 C reatinina