Însămânţare: punerea în contact a unei culturi

bacteriene sau a unui produs patologic cu mediile

de cultură.
Izolarea unui agent patogen infectios este
hotaratoare in diagnosticul bacteriologic.

Insamantarea se face pe medii adecvate

lichide sau solide.
Prin insamantare urmarim:
Obtinerea unei populatii microbiene suficiente
cantitativ pentru scopul propus
Prevenirea contaminarii produsului cercetat cu
alte microorganisme
Izolarea fiecarei tulpini microbiene urmarite in
cazul unui produs plurimicrobian in culturi
microbiene denumite culturi pure
Obtinerea de colonii izolate.
O colonie este o populatie bacteriana omogena
provenind dintr-o singura celula.

aglomerare de bacterii vizibilă cu ochiul liber,

formată din multiplicarea unei singure bacterii de
pe mediul de cultură .
genetic acasta populatie reprezinta o clona.
Trecerea unei singure colonii de pe un mediu de
cultura pe un alt mediu adecvat se numeste
repicare.

Prin repicare se obtine cultura pura care poate fi

studiata asupra caracterelor morfotinctoriale,
biochimice, antigenice si de patogenitate si astfel
poate fi identificata.
Tehnica insamantarii prin epuizarea
inoculului pe suprafata unui mediu solid
turnat in placi Petri este metoda de electie
pentru obtinerea de colonii izolate.
Inoculul se depune pe un sector limitat al
placii= sector A, apoi cu ansa se disperseaza
pe un sector B in striuri paralele. Se
sterilizeaza ansa si se repeta operatiunea
pana la epuizarea intregii suprafete a placii.
Tehnica pentagonului deschis:
Pe prima latura se va obtine cea
mai importanta cantitate de
cultura (cultura microbiana
confluenta), pe urmatoarele
laturi se va remarca scaderea
cantitativa a culturii iar cel
putin pe ultima latura a
pentagonului deschis se vor
obtine colonii izolate.
 Se replică o singură colonie din
cultura primară pe un mediu de
cultură proaspăt,fie prin
epuizare, fie prin însămânţare în
sector
 Însămânţarea în sector
 Pe o placă pot fi însămânţate mai
multe specii bacteriene
 Prin însămânţare în sector nu se
obţin colonii izolate !
 Se încarcă ansa de platină
sterilizată cu produs patologic
 Se descarcă ansa pe mediu de
cultură sub forma unui sector de
cerc.
Se folosesc tuburi cu bulion in care se fac dilutii
succesive din produsul patologic. Din ele se fac
treceri pe mediul solid .

Din dilutiile cele mai mari vom obtine colonii

izolate.(concentratiile cele mai mici).
Se face prin -inteparea mediului
- incorporare in toata masa mediului.
 Se practică pentru
însămânţarea mediilor
solide turnate în coloană
dreaptă
· Se încarcă acul de
inoculare cu produs
· Se înţeapă mediul în
direcţie verticală pe o
distanţă de ¾ din
înălţimea coloanei