DIAGNOSTICUL GESTATIEI PRIN

METODE DE LABORATOR
Metode fizice
Metode chimice
Metode histologice
Metode biologice
Metode imunologice
 Metode fizice

1. Radiografia si radioscopia:
- La animalele de talie mica si mijlocie
- Permit diagn. gestatiei tardiv, dupa initierea
osificarii scheletului fetal
 Avantaje: precizeaza nr. produsilor, asezarea
si dispunerea lor in uter, diagn. malformatiilor si
monstruozitatilor fetale. Riscuri: aproape nule,
deoarece organogeneza este terminata
Golden Retriever, gestatie 49 zile- Rx lateral si ventro-
dorsal
 2. Electrocardiografia

 Inregistrarea grafica a activitatii cardiace materne

(secusele mari), peste care se suprapun secusele mici
(activitatea cardiaca fetala)
 Martor al viabilitatii fetale- clinica animalelor mici
3. Metoda Sokolovskaia
 Vaca - fidelitate 80%: cresterea densitatii mucusului
cervical la vacile gestante, evidentiata printr-o reactie
cu sulfat de cupru
 Cu(SO4)2 sol.+ 1 pic mucus ; in 5-6 sec. mucusul
cade la fundul paharului (react.+,femela gestanta)
 4. Cristalizarea mucusului cervical la vaca
 Metoda de diagn. a starii de negestatie (estrus),
fidelitate ridicata.
 Se realizeaza un frotiu din mucusul cervical- se
examineaza la microscop:
 In proestru si estru: mucusul cristalizeaza sub forma unei
frunze de feriga, excluzandu-se astfel gestatia

Frotiu din mucus cervical- imagine de “feriga”

 5. Ecografia (Ultrasonografia)
Diagnosticul ecografic reprezintă o metodă neinvazivă şi
nedureroasă de vizualizare a diferitelor tesuturi moi ale
organismului. Folosita la toate speciile.
 Ultrasunetele- se propaga liniar (f. bine in mediu lichid, nu si
in aer sau mediu solid) si genereaza un ecou la suprafata de
separare intre doua medii cu impedanta acustica diferita.
 Efectul Doppler: la limita de separare intre cele doua medii
exista particule in miscare (circulatie fetala, placentara, cord
fetal, circ. materna) ce det. modificarea frecventei undei
ultrasonice
 Efectul puls-ecou: ecoul este captat si convertit in semnal
acustic/luminos
 Frecventa sondei mare = imagine mai clara =
penetrabilitate mai redusa
Diagnosticul ecografic al gestatiei la catea
Aspect ecografic Doppler
Diagnosticul ecografic al gestatiei la catea

MĂSURAREA DSG MĂSURAREA LCP

MĂSURAREA DBP MĂSURAREA DT

 Diagnosticul ecografic al gestatiei la catea

Gestaţie, 24 zile: se observă ecoul hiperecogen dat de embrion

Gestaţie la catea- 35 de zile: se Gestaţie la catea- 35 de zile:
observă capul şi corpul fetal, secţiune transversală la nivelul
precum şi brâul placentar fetusului, vezicula vitelină,
brâul placentar şi ampula fetală
GESTAŢIE LA CATEA-31 ZILE – GESTAŢIE LA CATEA- 32 ZILE
SE POT DECELA BCF, SEMN – SAC GESTAŢIONAL ÎN
CONTACT CU APEXUL VEZICII
AL VIABILITĂŢII FETALE URINARE
GESTAŢIE LA CATEA- 35 ZILE – BRÂUL PLACENTAR UŞOR DE
EVIDENŢIAT
Modul B/M – evidenţierea cordului fetal şi a BCF
 CALENDARUL GESTAŢIONAL AL
CĂŢELELOR ÎNTRE ZILELE 20 ŞI 34

Ampule anecogene (fără ecou embrionar)

Z20
Masă embrionară de formă ovalară
Z26
Z26 Evidenţierea capului şi a trunchiului

Z27 Evidenţierea veziculei viteline

Z29 Embrion în formă de 8

Z30 Primele osificări ale craniului

Z33 Mobilitatea embrionului

Z33 Evidenţierea membrelor

Z34 Aspect specific al craniului fetal de cap de

insectă
CALENDARUL GESTAŢIONAL AL CĂŢELELOR
ÎNTRE ZILELE 36 ŞI 50 DE GESTAŢIE

Z36 Evidenţierea stomacului

Z37 Evidenţierea rahisului

Z38 Distingerea ariei hepato-pulmonare

Z38 Evidenţierea vezicii urinare

Z39 Evidenţierea venei ombilicale

Z41 Evidenţierea coastelor

Z46 Evidenţierea sternului

Z50 Evidenţierea vezicii biliare

Diagnosticul ecografic al gestatiei la iapa
Diagnosticul ecografic al gestatiei la iapa

Gestatie iapa, 57 zile Gestatie gemelara iapa, 15 zile

Diagnosticul ecografic al gestatiei la iapa
Diagnosticul ecografic al gestatiei la scroafa

Gestatie scroafa, 28 zile Embrioni 28 zile

Ghiciti ce e?
 Metode chimice

 Reactia Cuboni
-evidentierea calitativa a hormonilor estrogeni, printr-o
reactie de fluorescenta a acestora, in prezenta acidului
sulfuric
-folosita la iapa intre lunile 4-9 de gestatie (estrogeni la
nivel urinar), fidelitate 98%
-15 ml urina+ 3 ml H2SO4 – (incalzire, filtrare, decantare,
racire)- examinare la UV-fluorescenta verde= reactie+
 Metode histologice

1.Metoda Benesch-Kurasava, folosita la iapa

- Evidentierea in frotiul efectuat din mucusul cervical a
celulelor epiteliate ciliate,in mici conglomerate, fara
leucocite
2. Metoda Ciurea - la scroafa si oaie, fidelitate precoce- 95%
-aprecierea modificarilor histologice ale epiteliului vaginal
anterior (recoltare biopsica, includere in gheata, sectiuni,
colorare)
-la scroafa: in estru epiteliul =20-25 straturi, in metestru 4-
5 straturi, in gestatie 2-3 straturi
-la oaie: 10-12 straturi la negestante, la gestante 3-4
straturi, cu celule cubice (dupa ziua a 40-a de gestatie)
 Metode biologice
Principiu: evidentierea modificarilor specifice induse de
gonadotropinele extrahipofizare (eCG/PMSG, hCG) asupra
aparatului genital la animalele de laborator. Folosite la iapa.
-gonadotropina corionica ecvina = h. glicoproteic secretat de
cel. trofoblastului fetal ce invadeaza cupele endometriale in
intervalul 36-120 de zile de gestatie, cu un maxim intre 55-75
Metoda Animal de experienta Reactie pozitiva= femela de testat
gestanta

1. Ascheim –Zondeck Soricele impubere 3-4 Ovare cu foliculi maturi, edem tract
saptamani genital

2. Friedmann- Schneider Iepuroiace impubere Foliculi numerosi, hipertrofie uterina

3. Brouha-Hinglais Simonnet Soareci masculi impuberi Hipertrofia vez.sem. & testiculelor

4.Zavadovschi-Nesmeianova Cocosi impuberi Hipertrofia crestei si a testiculelor

5. Galli- Mainini Broscoi ex.microsc.al urinii: spermatozoizi

6. Allen-Doisy Soricele Frotiu din fluidul vaginal:cel Schollen

impubere/castrate
 Metode imunologice
1. Inhibarea reactiei de hemaglutinare (IHA) dintre
eritrocitele de oaie si un ser antiPMSG, daca
aceste eritrocite sunt puse in prealabil in contact cu
serul provenit de la iapa de testat, cand aceasta
este gestanta
ERITROCITE Ser anti PMSG Aglutinare (martor)

ERITROCITE Ser iapa de testat Fara reactii vizibile

ERITROCITE Ser iapa de testat Aglutinare=reactie -

Ser anti PMSG Lipsa aglutinarii=reactie+

(iapa gestanta)
2.Imunoelectroforeza in gel de geloza
-serul antiPMSG concentrat si specific se introduce
intr-un godeu central, intr-o placa Petri, seruri de la
iepele de testat introduse in godeuri periferice
-camp electroforetic - proteinele vor migra specific in
functie de masa lor moleculara, intensitatea liniilor
de precipitare ce se formeaza este direct
proportionala cu cant. de PMSG din serul de
analizat ser 1

ser 6
ser 2

Ser
antiPMSG

ser 5
ser 3

ser 4
 3.Determinarea factorului de gestatie timpurie
-complex proteic dependent de gestatie, produs de
ovar si oviduct, care impiedica rejectia embrionului
de catre mama (EPF- Early Pregnancy Factor)
-se identifica la 24 de ore dupa fecundatie la oaie si
dupa numai 4 ore la scroafa
4. Radio Immuno Assay (RIA)- Ac.antiP monoclonali
Folosita la iapa, scroafa, RM si rm
Ac.antiP+ Ag(P din ser,lapte) Ac-Ag+Ac.antiP (excesul)
Ac.antiP + Ag (P marcat cu tritiu) Ac - Ag + Ag (excesul)
-cu ajutorul unui spectrometru de scintilatie se determina numarul
dezintegrarilor radioactive- se raporteaza la o curba etalon si se
precizeaza astfel cantitatea de P (ng/ml) din ser sau lapte.
 5. ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay)
Acelasi principiu ca RIA, doar Ag este marcat cu o
enzima.
Ag+enzima - determina degradarea unui substrat,
apare o reactie de culoare, a carei intensitate se
determina spectrofotometric sau vizual
Diverse valori ale progesteronemiei la cateva specii domestice

P ng/ml IAPA VACA SCROAFA OAIE

NIVEL BAZAL 0.5 0.5 0.3 0.2-0.3
Faza luteala >2 >2 >2 2
In gestatie > 5-6 >5 9 7-8
Mom.recoltarii 18-23 zile 23-24 zile 17-24 zile >50 zile
dupa monta
1. Godeurile sunt captusite cu un anticorp specific (Ac).
2. Se adauga proba (Ac capteaza Ag din proba) = reactie de
culoare.
3. Se adauga un Ag secundar de detectie, care se fixeaza
pe Ac ramasi liberi, blocandu-i.
4. Se adauga substratul enzimatic, care se fixeaza pe
complexul Ag-Ac, producand decolorarea acestuia.
5. Intensitatea culorii complexului format este invers
proportionala cu cant. de Ag din proba de analizat.
6. Intensitatea se apreciaza spectrofotometric sau vizual.

P4 sub 1ng/ml P4 intre 2,5 si 8 ng/ml P4 peste 8ng/ml

TEST RAPID PT. DOZAREA PROGESTERONULUI PLASMATIC
 IN LOC DE CONCLUZII :
 IAPA – ecografia TR, dozarea P4, evid.
PMSG/eCG, ETR, evid. E urinari
 VACA – dozarea P4, ecografiaTR, ETR
 OAIE,CAPRA – dozarea P4, ecografia TR,
ecografia TA, palpatia TA
 SCROAFA – dozarea P4, ecografia TR,
ecografia TA, palpatia TA +/-
 CARNIVORE – ecografia TA= det. relaxinei
serice= palpatia TA