Familia Enterobacteriaceae

LP 1
 Familia Enterobacteriaceae

 Manualul de Bacteriologie sistematica Bergey

(editia III / 2004)
 Reuneste in prezent 44 genuri, dintre care 25
au fost implicate semnificativ in patologia
umana
 Familia Enterobacteriaceae
Genul Numar de specii Specii cu importanta
medicala
I. ESCHERICHIA 7 E. coli, E.
fergusonii, E.
hermanii, E.
vulneris
X. CITROBACTER 12 C. freundii, C.
amalonaticus, C.
diversus
XII. 16 E. cloacae, E.
ENTEROBACTER aerogenes, E.
agglomerans, E.
sakazakii
XV. HAFNIA 1 H. alvei
 Familia Enterobacteriaceae
Genul Numar de specii Specii cu importanta
medicala

XXI. 1 M. morganii
MORGANELLA
XXIX. PROTEUS 8 P. vulgaris, P.
mirabilis, P. penneri
XXX. 6 P. alcalifaciens, P.
PROVIDENCIA rettgeri, P.stuartii
 Familia Enterobacteriaceae
Genul Numar de specii Specii cu importanta
medicala
XXXIV. 8 S. enterica, S.
SALMONELLA choleraesuis, S.
arizonae, S.
enteritidis, S.
paratyphi, S. typhi,
S. typhimurium
XXXVI. 12 S. marcescens, S.
SERRATIA liquefaciens
XXXVII. 4 S. dysenteriae, S.
SHIGELLA boydii, S. flexneri, S.
sonnei
XLIII. YERSINIA 12 Y. pestis, Y.
 Caractere morfo-tinctoriale:

• Bacili Gram-negativ
• Mobili prin flageli peritrichi / imobili
• Unii au capsulă: genul Klebsiella (K.
pneumoniae)
• Nu formează endospori (nesporulati)
 Caractere de cultură:

• Aerob - facultativ anaerobe

• Nepretentiosi nutritiv – cresc pe medii cu
peptona in prezenta bilei
• Fermenteaza glucoza
• Oxidazo – (-)
• Produc catalaza
• Reduc nitratii la nitriti
 Caractere de cultură:
• Tulbură uniform mediul de cultură lichid
• Colonii tip S, dar si R
• Uneori, colonii mucoase (tip M): Klebsiella
pneumoniae
• Medii selective, majoritatea au lactoză:
• Drigalski, Levin, MacConkey,
• Leifson (ADCL), Istrate-Meitert, Hektoen, SS,
• Wilson - Blair
 Mediul Levin (EMB)
 Categoria: Mediu slab
selectiv si diferenţial
 Contine: Eozina Y si
albastru de metilen, care
inhiba bacteriile Gram
(+)
 Utilizare: cultivarea
enterobacteriilor (E. coli)
 Mediul ADCL (Leifson)
 Categoria: Mediu moderat
- selectiv si diferenţial
 Contine: agar –
dezoxicholat – citrat –
lactoza
 Inhiba bacteriile Gram (+)
si o parte din bacteriile
Gram (-)
 Utilizare: cultivarea
shigellelor si
salmonellelor, Yersiniei
 Familia Enterobacteriaceae
Categoria Gruparea taxonomica Semnificatia etiologica
I. Patogene Salmonella, Shigella – certa
Escherichia (fenotipuri
diareigene si
uropatogene de E. coli),
Yersinia
II. Conditionat - Citrobacter, Izolate semnificativ in
patogene Enterobacter, prelevate necontaminate
Escherichia, Klebsiella, (LCR, prelevate din
Morganella, Proteus, cavitati inchise,
Providencia, Serratia hemoculturi, colectii
neabcedate
III. Ocazional - patogene Cedecea, Hafnia,
Kluyvera, Pantoea,
Tatumella, Yokenella
 Genul Shigella
 patogen intestinal
Caracteristicile speciilor de Shigella:
 imobile

 nu fermentează lactoza pe mediile cu lactoza –

lactozo (-)
 determină dizenterie bacilară – boala
specific umana:
• febră,
• colici abdominale,
• scaune diareice muco - sangvinolente
 Clasificarea Shigella

In functie de antigenul somatic O:

• Shigella dysenteriae: 13 tipuri: 1 – S. shigae, 2 – S.
schmitzii, 3 – 7 S. Large Sachs, 8 – 13
• Shigella flexneri: 6 tipuri (1 – 6), 10 subtipuri (1a, 1b,
2a, 2b, …, 5a, 5b), 2 variante (x, y)
• Shigella boydii: 18 tipuri (1 – 18)
• Shigella sonnei (2 tipuri: S, R)
 Recoltarea produselor patologice

 Produs patologic: Materii fecale (emisie

spontana, sondaj recto – sigmoidian cu sonda
Nélaton
 cât mai aproape de debutul bolii
 inaintea instituirii tratamentului antimicrobian
 Coprorecoltor steril cu mediu de transport:
- Cary - Blair
 Examenul microscopic din produs
patologic

- oferă informatii importante pentru

diagnosticul diferential al enterocolitei
- preparatul nativ între lamă si lamelă →
polimorfonucleare, eritrocite
- poate evidentia chiste sau trofozoiti de
Entamoeba histolytica (exclude dizenteria
bacilara)
 Coprocultura
Izolarea:
- Medii de cultură selective si diferentiale
pentru enterobacterii:
* Drigalski
* Levin
* MacConkey
* Leifson (ADCL)
* Istrate-Meitert
* Hektoen
 Caractere morfo-tinctoriale

Bacili Gram-negativ
 Proprietăţi de cultură

 Colonii S sau R
 Lactozo - negative
 Identificarea preliminara
 caracteristicile biochimice: TSI, MIU, MILF,
Citrat: lactozo (-), nu produce gaz din
fermentarea glucozei, nu produce H2S, imobil,
ureaza (-), indol (+/-), lizindecarboxilaza (-),
fenilalanindezaminaza (-), citrat (-).
 caracteristicile antigenice (tiparea serologica):

permit clasificarea de grup, de tip (ex.: S.

disenteriae, S.flexneri etc.).
 Patogenie
 Shigella este agentul dizenteriei bacilare (shigelloză)
 Ag. de suprafata permit atasarea non – receptor
specifica, modificarea citoscheletului, endocitarea
bacteriei, apoi diseminarea in submucoasa unde
produc necroze – patogenitate de tip invaziv.
 Exotoxinele – sunt, de asemenea implicate (ex.:
toxina Shiga, produsa de S. dysenteriae blocheaza
sinteza proteica, prin efect citotoxic asupra
endoteliului capilar determina complicatiile vasculare
si producerea Sdr. hemolitic – uremic din shigeloze).
 Manifestări clinice
 se manifestă prin: colici abdominale
severe, varsături, tenesme si scaune
caracteristice muco - sanguinolente.
 rareori, caracter invaziv
 complicatii extraintestinale: tulburari
neurologice, sdr. hemolitic – uremic,
artrita reactiva. Aparitia lor depinde de
virulenta tulpinilor.
 Epidemiologie:
 Shigella este un patogen specific uman
 se transmite pe cale fecal - orală, asociata
intotdeauna cu un nivel igienico – sanitar scazut
 insectele (mustele) sporesc potentialul
epidemigen estival
 transmisia hidrica este importanta
 dezastrele naturale si razboaiele au fost frecvent
asociate cu izbucniri epidemice de dizenterie.
 Teste de patogenitate

Testul Sérèny (testul

keratoconjunctivitei):
- poate confirma caracterul de

invazivitate al Shigellelor izolate;

- acest test nu se foloseste în mod uzual.
- o picătură cu Shigelle invazive izolate

depusă în corneea unui cobai (porc de

Guineea), va produce kerato-
conjunctivite severe în câteva zile,
prin invazie la cornee, care se vindecă
complet în 2 - 3 săptămâni.
 Tratament

 se face în functie de sensibilitatea la antibiotice,

conform antibiogramei difuzimetrice Kirby –
Bauer, efectuata dupa standardul CLSI.
 Genul Salmonella
peste 2200 serotipuri

Infecţii (salmoneloze):
• Febra tifoidă – S. typhi
• Febra paratifoidă – S. paratyphi A, B
• Toxiinfecţii alimentare şi enterite (copii)
S. typhymurium
S. enteritidis
S. paratyphi B
S. panama
• Stări septico - piemice
S. paratyphi C
S. choleraesuis
 Caractere generale:
• bacili Gram – negativ
• mobili (flageli peritrichi)
• lactozo – negativi
• identificarea antigenelor O, H, Vi →
reacţii de aglutinare
 Salmoneloze majore
 febra tifoidă si paratifoidă determinate de bacilul tific si paratific
- afectează exclusiv omul,
 omul si animalele sunt responsabile de poluarea solului, a apelor
reziduale, apelor de suprafata, in care pot supravietui luni si
chiar ani (in sol)
 se transmit pe cale fecal - orală, apă contaminată,
 intensificarea comertului si a calatoriilor la mari distante,
migratiile populationale, industrializarea alimentatiei si a
cresterii animalelor de consum (porci, pasari) in mari
colectivitati consumatoare de hrana cu adaosuri proteice deseori
contaminate (fainuri furajere de carne, oase, sange) au contribuit
esential la raspandirea larga a serovarurilor si totodata la
cresterea morbiditatii prin salmoneloze.
 factori sezonieri si clima calda favorizeza, in conditii precare de
igiena, nivelul morbiditatii
 Manifestari clinice
Febra tifoida

 S1: letargie, febră, dureri, constipatie;

 S2: febră mare, abdomen dureros, rozeole
tifice, diaree, hepatosplenomegalie.
 Salmoneloze minore

 au o incidentă crescută în ultimul timp,

manifestându-se prin toxiinfectii alimentare
 I loc in etiologia toxiinfectiilor alimentare
 Cauze: ingerarea de carne, lapte, ouă
infestate cu specii de Salmonelle: S.
typhimurium, S. anatum, S. enteritidis.
 TABLOU CLINIC
Simptomele (Dg. diferential cu infectiile
alimentare stafilococice) sunt:
• incubatie mai lungă de 12 – 48 de ore,

• febră,

• sindrom diareic

• stari septico - piemice

 Recoltarea produselor patologice

Febre tifo – paratifoide:

 S1: hemocultură
 S2: urocultură, coprocultură
Gastroenterite:
 coprocultură
 lichid de vărsătură
 alimente
Examenul microscopic din produs
patologic

Nu oferă informatii relevante!

 Coprocultura
Izolarea:
- Medii de imbogătire:
- Bulion cu selenit acid de sodiu
- Medii moderat – selective, inalt - selective si
diferentiale:
- Leifson (ADCL)
- Istrate-Meitert
- SS
- Hektoen
- Wilson - Blair
 Caractere morfo-tinctoriale

Bacili Gram -
negativ
 Proprietati de cultura

Colonii S
 Proprietati de cultura

Mediul Drigalski
Colonii lactozo - negative
 Proprietati de cultura

Lactozo - negativ
Mediul Levin
 Proprietati de cultura

Agar Mac Conkey

 Identificarea
se bazează pe:
 caracteristicile morfologice: bacili gram - negativi,
mobili
 caracteristicile de cultură: colonii S, lactozo – negative,
transparente sau in culoarea mediului, cu centrul negru
(“ochi de pisica”)
 caracteristicile biochimice: Lactoza (-), H2S (+), produc
gaz in cantitate mica sau deloc din fermentarea glucozei,
mobile, ureaza – (-), Indol (-), lizindecarboxilaza (+),
fenilalanindezaminaza(-), Citrat (+), rosu-metil (+).
 Diagnostic serologic indirect
reacţia Widal

 Sunt colectate 2 probe de sânge în prima si a –

3 – a săptămână de boala.
 se identifică anticorpii specifici anti - S. typhi,
S. paratyphi A si B in serul pacientilor, separat
pentru antigenul O (somatic) si H (flagelar) –
prin reactii de aglutinare directa in tuburi.
 se stabileste dinamica titrului de ac. anti – O si
anti – H.
 Tratament

 în functie de testul de sensibilitate la antibiotice

(antibiograma difuzimetrica Kirby – Bauer, conform
standardelor CLSI).
 este recomandat: Cloramfenicolul.
 Ampicilina si Trimethoprim -sulfamethoxazolul sunt
alternative cu efecte secundare mai puţin severe.
 in ultima vreme, se descriu tot mai mult tulpini de
Salmonella spp. cu fenotipuri de rezistenta de tip ESBL!
 Tema pentru studenti
 Cautati pe net imagini cu culturi de
Enterobacterii (Salmonella, Shigella).
 Incercati sa descrieti caracterele de cultura
particulare, metodele de identificare
biochimica si antigenica pentru fiecare gen
descris in aceasta lucrare.
 Desenati in caietul de lucrari practice coloniile
si algoritmul de identificare!
 Tema va fi evaluata si punctata!