Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Unele proteine, numite heteroproteide conin n afar de aminoacizi i ali atomi sau grupe de atomi numite grupri prostetice. Toate proteinele din organism sunt supuse unui proces permanent de nlocuire. Durata de via a unei specii moleculare proteice difer n funcie de starea nutriional a organismului i de vrsta acestuia Ex: enzimele din ficatul de obolan sunt nlocuite dup aproximativ 5 zile de la momentul biosintezei, hemoglobina dup 120 de zile iar colagenul dup cteva luni de zile. Viteza de nlocuire a proteinelor scade odat cu naintarea n vrst. Digestia i absorbia proteinelor din hran Digestia (hidroliza) proteinelor din hran se petrece sub aciunea unor enzime care hidrolizeaz legturile peptidice dintre aminoacizi. Aceste enzime sunt: endopeptidaze (cele care scindeaz legturile din interiorul catenelor polipeptidice); exopeptidaze (cele care acioneaz la extremitile catenelor polipeptidice). Toate enzimele proteolitice sunt biosintetizate sub forma unor precursori inactivi (proenzime, zimogen). Digestia (hidroliza) proteinelor din hran se petrece sub aciunea unor enzime care hidrolizeaz legturile peptidice dintre aminoacizi. Aceste enzime sunt: endopeptidaze (cele care scindeaz legturile din interiorul catenelor polipeptidice); exopeptidaze (cele care acioneaz la extremitile catenelor polipeptidice). Toate enzimele proteolitice sunt biosintetizate sub forma unor precursori inactivi (proenzime, zimogene).
Digestia ncepe n cavitatea gastric, unde, sub aciunea HCl, proteinele sufer un proces de denaturare, i pierd conformaia tridimensional, catenele polipeptidice se despacheteaz, fcnd posibil accesul proteazelor la legturile dintre aminoacizi.
n stomac acioneaz pepsina care transform macromoleculele proteice n polipeptide mari (proteaze i peptone). n continuare, digestia acestora continu n duoden, sub aciunea enzimelor aduse de sucul pancreatic: tripsina, chimotripsina, elastaza i carboxipeptidaza. n final, rezult polipeptide mici, formate din 4-5 aminoacizi, care sunt atacate la captul amino-terminal de ctre aminopeptidaze, produse de celulele mucoasei intestinale.
Di- i tripeptidele care intr n celulele mucoasei intestinale, sunt hidrolizate pn la aminoacizi, sub aciunea unor proteaze (di- i tripeptidaze), aflate n lizozomi.
De la nivelul mucoasei intestinale, aminoacizii sunt transferai ctre snge. La animalele sugare, n stomac mai exist o enzim (renina) precipit cazeina din lapte, mrind timpul de staionare n stomac i timpul de aciune al pepsinei, astfel nct n duoden ajung direct polipeptide medii i mici. n primele zile de via, anticorpii prezeni n laptele matern pot s fie direct absorbii la nivelul mucoasei intestinale, prin endocitoz. Astfel se realizeaz protecia imun a nou-nscutului.
Activarea zimogenelor
HCl Pepsinogen enteropeptidaza Tripsinogen mucoasa intestinala Chimotripsinogen Proelastaza Procarboxipeptidaza Chimotripsina Elastaza Carboxipeptidaza Tripsina Pepsina
Proaminopeptidaza
Aminopeptidaza
HIDROLIZA INTRACELULAR APROTEINELOR PROPRII Localizare intracelular -lizozomi i n proteasomi Rol - permite ndeprtarea proteinelor uzate, a acelora care au suferit accidente n cursul procesului de biosintez, prin nlocuirea unuia sau mai multor aminoacizi sau prin adoptarea unei conformaii tridimensionale inadecvate funciei biologice. Lizozomi -sunt degradate proteinele extracelulare, proteinele membranare i proteinele intracelulare, care au timp de via lung (proteinele din citoschelet proteine structurale). Acest proces de proteoliz lizozomal are loc cu consum de ATP. Proteasomi - proteinele uzate sau cu defecte din interiorul celulelor se cupleaz de o molecul specializat (ubiquitin). Proteasomul este un ansamblu supramolecular format din aproximativ 25 de molecule proteice individuale, care adopt o form cilindric. Proteinele marcate cu ubiquitin intr n interiorul cilindrului, unde sunt degradate pn la aminoacizi, care vor prsi proteasomul pe la captul opus intrrii. Tot acest proces de marcare a proteinelor defecte i de hidroliz a lor se desfoar cu cosum de ATP.
UREE
deaminare hidrolitica R-CH-COOH NH2 decarboxilare + NH3
+ CO2
transaminare
uree
proteine exogene
AMINOACIZI
NH3 -cetoacizi
Ciclul ATC
Amoniacul rezultat din catabolismul aminoacizilor este toxic pentru celule. La cele mai multe specii, este transportat de snge la ficat, unde este tranformat ntr-un compus mai puin toxic ureea, care ulterior ca fi eliminat pe cale renal. La rumegtoare, circa 50% din ureea produs de ficat i tranferat n snge este preluat de glandele salivare, eliminat prin saliv i apoi ajunge n rumen, unde servete ca surs de azot pentru microorganismele locale. Ele reprezint principalii productori de aminoacizi pentru organismul rumegtoarelor. Procesul de ureogenez, care se desfoar n ficat, este, de asemenea, un proces consumator de energie. Atunci cnd n snge se gsete o cantitate redus de uree, alturi de un nivel sczut al transaminazelor i albuminelor serice, se poate diagnostica insuficiena hepatic. Un nivel ridicat al ureei n snge, nsoit de valori crescute ale creatininei i ale acidului uric, denot insuficiena renal. Transaminarea este att o reacie catabolic ct i anabolic pentru c permite conversia unor aminoacizi concomitent cu biosinteza altora. Prin transaminare, din aminoacizi rezult cetoacizi, care pot intra n ciclul ATC, constituind un substrat energetic. Trasaminarea este n strns corelaie i cu procesul de ureogenez.
O OPO32
C NH CH2
NH2
Enzimele ciclului ureogenetic: Enzime mitocondriale: 1. Ornitin Transcarbamoilaza Enzime citosolice: 2. ArgininoSuccinat Sintaza 3. Argininosuccinaza 4. Arginaza.
H2N
carbamoyl phosphate 1
Pi
CH2 CH2 HC
citrulline
COO CH2 HC NH2
COO
Urea Cycle
4
NH3+
ornithine
O H2N C NH2 H2N C NH CH2 H2O NH2+
2
COO
COO
aspartate
C NH CH2 CH2 CH2 HC NH3+ NH2+
urea
CH2
3
COO HC CH NH3+ COO
HC
H N
COO
arginine
CH2 CH2
argininosuccinate
HC
COO
fumarate
COO
ornitina
ornitina uree
citrulina
citrulina aspartat
arginina
fumarat
argininosuccinat
Pentru fiecare ciclu, citrulina trebuie sa paraseasca mitocondria, iar ornitina trebuie sa intre in matrixul mitocondrial. Acest transfer este mediat de un transportor de ornitina/citrulina localizat in membrana mitocondiala interna.
CICLUL UREOGENETIC
ornitina
ornitina uree
citrulina
citrulina aspartat
arginina
fumarat
argininosuccinat
Un ciclu complet al acizilor tricarboxilici (KREBS) se desfasoara numai in interiorul mitocondiilor. Exista insa izoenzime citosolice ale unor enzime din acest ciclu care sunt implicate in regenerarea aspartatului din fumarat.
COO
COO
COO CH2
HC
CH2 CH2
COO CH2
O
CH2 CH2
NH3+
HC
NH3+
COO
COO
COO
COO
aspartat
a-cetoglutarat oxaloacetate
glutamat
Fumaratul este convertit la oxaloacetat prin intermediul enzimelor ciclului ATC fumaraza si malat dehidrogenaza. Oxaloacetatul este transformat in aspartat prin transaminare si apoi reintra in ciclul ureei.
Deficienta ereditara in oricare dintre enzimele cicului ureogenetic conduce la hiperamonemie - concentratie crescuta de amoniac in sange
Lipsa totala a oricareia dintre enzimele ciclului ureogenetic este letala. Concentratiile crescute de amoniac sunt toxice in special pentru creier, si daca hiperamonemia nu este tratata imediat dupa nastere conduce la retardare mentala severa.
Mecanisme care explica toxicitatea amoniacului: 1.Concentratii crescute de NH3 vor bloca acidul glutamic, un neurotransmitator si precursor al acidului gama-aminobutiric (GABA), alt neurotransmitator sub forma de glutamina, reactie catalizata de glutamin sintaza: glutamat + ATP + NH3 glutamine + ADP + Pi 2. Blocarea glutamatului concomitent cu concentratii crescute de amoniac vor activa glutamat dehidrogenaza care va incerca sa refaca glutamatul: glutamat + NAD(P)+ a-cetoglutarat + NAD(P)H + NH4+ Aceasta va avea ca rezultat scaderea concentratiei de acetoglutarat, un metabolit intermediar esential pentru ciclul ATC (KREBS), deregland metabolismul energetic in creier.
Limitarea aportului proteic la o cantittae adecvata pentru a asigura aminoacizii necesari cresterii si adaugarea unor suplimente de cetoacizi care sa permita obtinerea aminoacizilor esentiali analogi prin transaminare
Transplantul hepatic
arginina (Arg)
H H3N+ C C OO
C H2 C H2
C H2 NH
+
O O
NH2+
creatina
C N H2
N H2
Arginina, in afara rolului de constituent al proteinelor si de intermediar al ciclului ureogenetic este si precursor pentru sinteza creatinei si reprezinta molecula semnal pentru sinteza oxidului nitric.
NO este o molecula semnal cu durata de viata foarte scurta care exercita roluri diferite in celule, in functie de tipul acestora, precum reglarea contractiei muschilor netezi, transcriptia genelor, metabolismul, si neurotransmiterea. Efectele citotoxice ale NO observate in anumite situatii sunt atribuite reactiei spontane non-enzimatice cu anionul superoxid (O2) prin care se formeaza un puternic oxidant, peroxinitritul (ONOO).
H 3N C H 2 CH 2
C H2 CH 2
C H2
C H2 NH
N H3 + C H2
putresceina
C H2 C H2 C H2 N H 3+
H3N
CH 2
spermidina
Poliaminele, rezultate din decarboxilarea aminoacizilor includ putresceina, spermidina, spermina. Ornitina este precursorul major al sintezei poliaminelor. Transformarea of ornitinei in putresceina este catalizeata de Ornitin decarboxilaza. Poliaminele, care sunt cationi, au roluri importante in celulele vii. Perturbarea metabolismului lor conduce la aparitia unor stari patologice la om si animale
H H3N+ C CH2 CH2 COO
CH2
+ NH
ornitina
H COO
Pentru citrulina, un alt intermediar al ciclului ureei, nu exista ARNt, deci nu ar trebui sa intre in structura proteinelor Totusi, post-translational poate avea loc inlocuirea argininei cu citrulina, ceea ce conduce la alterarea conformatiei proteinelor si daca sunt enzime, la alterarea afinitatii pentru substrat. Un exemplu il constituie citrulinarea keratinei, care este esentiala pentru diferentierea celulelor epidermale. O citrulinare excesiva a proteinelor conduce la aparitia anticorpilor fata de aceste proteine, iar acestia par a fi implicati in aparitia unor boli autoimune precum artrita reumatoida si scleroza multipla.
H3N+
C
CH2 CH2 CH2 NH C O
COO
NH2
NH2
arginina
citrulina
Hemul reprezint gruparea prostetic a unor heteroproteide precum hemoglobina, mioglobina, citocromii, catalazele, peroxidazele.
Din punct de vedere structural, hemul este alctuit din patru nuclee pirolice, legate ntre ele i avnd n centru un ion de Fe.
Hemul din hemoglobin se sintetizeaz n mduva roie (85%) i n eritrocite (15%). Precursorii hemului sunt aminoacidul glicocol (glicina) i succinilCoA (din ciclul ATC).
Biosinteza hemului are loc i n alte celule, dar cu un ritm mai lent, ntruct i proteinele care intr n structura sa citocromii, catalazele i peroxidazele se gsesc n cantiti mai mici dect hemoglobina. Sintetizarea hemoglobinei ca macromolecul (procesul de cuplare al hemului cu monomerii de globin) are loc n hematiile imature (nucleate). Una dintre consecinele intoxicaiei cu Pb o reprezint blocarea biosintezei hemului. Degradarea hemoglobinei are loc concomitent cu nlturarea din circulaie a hematiilor mbtrnite (la om, la aproximativ 120 zile). Acest proces are loc n splin, mai puin n ficat.
Degradarea hemoglobinei
Hemoglobina
Proteoliza intracelular
aminoacizi
Fe2+
Ficat
Acid beta glucuronic
Intenstin gros
UROBILINOGEN
fecale
Corelaii clinice Icterul este o stare patologic caracterizat prin faptul c n snge se acumuleaz o cantitatea crescut de bilirubin, uneori nsoit de biliverdin i de urobilirogen, care se acumuleaz n esuturi i mucoase, modificnd culorile acestora. Se disting mai multe tipuri de icter, n funcie de cauza care determin acumularea bilirubinei n snge: icterul nou-nscuilor se datoreaz insuficienei enzimei glucuronattransferaza n hepatocite, ceea ce impiedic cuplarea bilirubinei de ac glucuronic; astfel, bilirubina rmne n snge, se depune n piele i mucoase. cauz: n primele zile de via are loc adaptarea funciei hepatocitului la viaa extrauterin i, pe de alt parte, distrugerii masive a eritrocitelor i, implicit, a hemoglobinei fetale pentru a fi nlocuite cu eritrocite care conin hemoglobina adult icterul prehepatic se datoreaz unei cantiti ridicate de bilirubin n snge, peste limitele normale de conjugare. cauz: ingerarea substanelor care induc hemoliza intravascular, infectarea cu parazii care distrug eritrocitele sau administrarea unor doze mari de medicamente care, n mod normal, sunt sunt trasnportate de snge prin legarea de albumine i acestea nu mai pot prelua i bilirubina (sulfamide, preparate hormonale colesterol). icterul de origine hepatic se datoreaz acumulrii de bilirubin n snge afectrii funcionale a hepatocitelor (virusuri hepatite, complicaii ulterioare ciroze). Unele substane, fie medicamente, fie din hran, toxice pentru ficat, mai ales dac sunt i insolubile, pentru a fi eliminate este necesar conjugarea cu ac glucuronic; va rezulta o competiie ntre bilirubin i ali compui pentru procesul de conjugare i eliminare. Icterul hepatic se stabilete prin corelarea valorilor bilirubinei cu valorile crescute ale transaminazelor serice i ale enzimei glutamiltranspeptidaza GGT(valoarea acesteia crete n mod special n intoxicaii cu substane chimice glicol). icterul posthepatic (mecanic) cauz: obstrucia cilor biliare extrahepatice, prin apariia unor calculi sau tumori, care blocheaz drumul bilei ctre vezica biliar i intestin, de aceea refluxeaz, inund hepatocile i trece n snge. icterul posthepatic (mecanic) cauz: obstrucia cilor biliare extrahepatice, calculi sau tumori, care blocheaz drumul bilei ctre vezica biliar i intestin, de aceea refluxeaz, inund hepatocile i trece n snge.
DNA
Deoxiribonucleaze
ARN
Ribonucleaze
A G C T
A G C U
NH 3 + betaaminoacizi
Pirimidinice
HO
XANTINA
PRPP
2 A T P + H C O 3 + G l u t a m in e + H 2 O
C O PO3-2
ATP Asp
O
HN C N H Orotate
CH C COO
Carbamoyl Phosphate
CTP
O
O
C HN CH CH N
2-
C HN C O
O3P O CH2 H H O H H OH OH
CH C N COO
ATP
O
2-
O3P
CH2 H H
O H H OH
TTP
OH
Orotidine-5'-monophosphate (OMP)
O3P O CH2 H H
O H
H a
ATP
2-
O3P O CH2 H H OH
O H OH
H a O
O P O O
O P O O
OH
OH OH a-D-Ribose-5-Phosphate (R5P)
5-Phosphoribosyl-a-pyrophosphate (PRPP)
O C HN HC N
2-
N
4
CH N
H H OH
C5
O
O3P O CH2 H H OH
ADENOZINMONOFOSFAT GUANOZINMONOFOSFAT
Particulariti ale metabolismului energetic n anumite organe Creierul n condiii normale creierul folosete ca unic surs de energie glucoza Creierul nu poate folosi ca resurs energetic ac grai, n schimb, poate utiliza molecule mai mici reprezentate de corpii cetonici (ac hidroxibutiric i ac acetilacetic). SNGE
glut 1*
CREIER
Glucoz
Glu6P
glicoliz
Piruvat
oxidare ATP
AcetilCoA
FO
RC
ATC
CO2 + H2O
Ficatul in conditii de satietate SNGE glut 2* Glucoz Glucoz Glu6P glicoliz Piruvat Acizi grai ATP FO
Trigliceride RC
FICAT
glicogen
AcetilCoA ATC
VLDL
Alte esuturi esut adipos
VLDL
CO2
-preia glucoza adus de la intestinul subire (din hran)i o transformn glicogen, dar realizeaz i biosinteza de triaciligliceroli proprii pe care i transfer n snge sub form de complexe lipoproteice (VLDL = very low density lipoprotein) si chilomicroni, distribuiti catre alte esuturi, mai ales de ctre esutul adipos;
SNGE Glucoz
FICAT
Glucoz Glicerol
Alanina
Glicerol (trigliceride)
Alanina (din proteinele musculare) Acizi grai (gliceride) Corpi cetonici
Acizi grai
- oxidare
AcetilCo A
ATC
Corpi cetonici
n stare de nfometare glicogenul hepatic servete ca surs de glucoz, astfel glicogenoliza asigur realizarea homeostaziei glucozei din snge; la meninerea glicemiei contribuie i procesul de gluconeogenez, localizat tot n ficat; la nivelul hepatocitelor se desfoar cu intensitate crescut i oxidarea ac grai, care furnizeaz cantiti mari de ATP necesar pentru gluconeogenez i pentru alte biosinteze i procese care se petrec numai n aceste celule (ureogeneza, uricogeneza, etc).
gluconeogene z
ficat, m. scheletici, . cardiac ac grai legai de albumine
Trigliceride
Ac grai
esutul adipos Depoziteaz triacilgliceroli (trigliceride) n stare de saietate i elibereaz fie trigliceride integrale, fie direct gliceroli i acizi grai n stare de inaniie sau n timpul efortului. n timpul efortului, ca i n stare de inaniie, nivelul insulinei din snge, ceea ce constituie un semnal pt esutul adipos s elibereze trigliceridele att integrale ct i hidrolizate n glicerol i ac grai. Glicerolul, fiind solubil, se gsete liber n plasm, iar ac grai sunt legai de albuminele serice, de unde sunt preluai de ficat, muchii scheletici i esutul cardiac.Glicerolul este preluat numai de ficat, care-l introduce n procesul de gluconeogenez.
SNGE
Ficat
glicerol3P
Ac. grai
Glucoz
glut 4*
glucoz
Piruvat
ATP
AcetilCoA ATC
esutul muscular -Depoziteaz glucoza sub form de glicogen, n stare de saietate. -In stare de nfometare, n afara rezervei de glucoz din glicogenul propriu poate utiliza i acizii grai. Utilizeaz acizii grai i n timpul nopii. -n timpul nfometrii, sau n timpul unui efort fizic intens i de lung durat, n afar de glucoz i acizi grai, esutul muscular realizeaz i un proces de proteoliz, o parte din aminoacizii rezultai, n special alanina, sunt trecui n snge, transportai la ficat, unde sunt retransformai n glucoz, contribuind astfel la meninerea glicemiei n limite constante. -Muchiul cardiac, care se afl n activitate permanent, utilizeaz toate tipurile de molecule combustibil, dar n special acizii grai. De asemenea utilizeaz i corpii cetonici. Exerciiul fizic moderat favorizeaz eliberarea acizilor grai din esutul adipos i utilizarea lor de ctre muchiul cardiac. -Spre deosebire de alte esuturi, cu excepia celui hepatic, muchiul cardiac este capabil s utilizeze i acidul lactic pe care-l transform n acid piruvic, care apoi continu degradarea mitocondrial.Aceasta se datoreaz faptului c n esutul cardiac exista izoenzima lactadehidrogenaza 1 (LDH1), care este de tipul H4 i care favorizeaz reacia de transformare a acidului lactic n piruvic, spre deosebire de izoenzima muscular LDH4 de tip M4, care n primele nivele de efort fizic favorizeaz transformarea piruvatului n lactat.
Rinichiul Are n zona cortical un metabolism energetic care poate utiliza att glucoza ct i acizii grai i corpii cetonici. n zona medular, celulele utilizeaz exclusiv glucoza. Intestinele Intestinul subire i colonul au preferine energetice diferite. Intestinul subire. Enterocitele utilizeaz preponderent glucoza dar i aminoacizii i derivaii lor care se pot cupla cu ciclul acizilor tricarboxilici: acidul glutamic, glutamina, asparagina i aspartatul. n stare critic aceste celule mai pot utiliza i corpii cetonici. Intestinul gros. Bacteriile din lumenul colonului utilizeaz poliglucidele nedigerate, att amidonul ct cele coninute de fibrele din alimente. Unul dintre produii cei mai importani ai fermentaiei bacteriilor din colon este acidul butiric, care devine combusibilul major al colonocitelor. Butiratul intr n -oxidare. Butiratul nu este produs de nicio alt celul (cu exceptia rumegtoarelor), de aceea tratamentele cu antibiotice determin leziuni la nivelul mucoasei intestinului gros. Pielea Glicoliza anaerob este calea preferat de piele pentru a obine energie, de aceea lactatul este unul dintre constituenii importani ai transpiraiei. Utilizarea acestei ci metabolice pare a fi o metod de aprare a integritii pielii, deoarece acidul lactic are proprieti bactericide.
ROLUL BIOCHIMIC AL FICATULUI Metabolismul glucidelor (carbohidrailor) n ficat Cale metabolic Rol Meninerea glicemiei Glicogenoliz, gluconeogenez Stocare de combustibil metabolic Glicogenogenez, biosintez de acizi grai Raport crescut glucagon /insulin Raport crescut insulin/glucagon
Reglare
Biosinteza de ribozo- Calea pentozofosfailor 5-fosfat i NADPH(H+) Utilizarea altor oze Metabolismul fructozei i galactozei
Biosinteza lipoproteinelor
Formarea 25-hidroxi-vitaminei D Biosinteza colesterolului Sinteza din vitamina D
Stocarea vitaminei A
Metabolizarea aminoacizilor in ficat Activitate Metabolism energetic Cale metabolic Cile metabolice individuale, urmate de ciclul acidului citric i fosforilare oxidativ Ureogeneza este localizat exclusiv n ficat Gluconeogenez cu uilizarea aminoacizilor glucoformatori (alanina)
Metabolismul xenobioticelor in ficat Metabolizarea celor mai muli compui biologic activi endogeni ( de ex. hormoni), dar i a celor mai multe medicamente are loc n ficat. Enzimele implicate sunt localizate n reticulul endoplasmic neted. Scopul prelucrrii hepatice a medicamentelor este de a le inactiva i de a le crete solubilitatea n mediu apos pentru a facilita epurarea lor din organism prin bil sau rinichi. Etapele metabolizri medicamentelor: 1.sub aciunea enzimelor citocromului P450, are loc oxidarea i demetilarea compuilor lipofilici; citocromul P450 reprezint un complex supramolecular multienzimatic, iar oxidazele complexului utilizeaz NADPH(H+); 2.n aceast etap produii rezultai n faza anterioar sunt cuplai cu compui polari, pentru a putea genera structuri hidrofile care s poat fi eleiminate prin rinichi i bil ( acidul benzoic este conjugat cu glicina, steroizii i fenolii cu acidul glucuronic, compuii aromatici cu glutamina).
Inactivarea hormonilor in ficat -metabolizarea i inactivarea adrenalinei (epinefrinei) i noradrenalinei (norepinefrinei) sub aciunea monoaminoxidazei i catecho-O-metiltransferazei i conjugarea poduilor rezultai cu acidul beta-glucuronic -deiodinarea tiroxinei i triiodotironinei -reducerea insulinei i separarea celor dou catene A i B sub aciunea enzimei insulin-glutation transhidrogenazei; catenele polipeptidice separate sunt apoi hidrolizate -metabolizarea i inactivarea hormonilor steroidici prin reducerea dubelor legturi, urmat de conjugarea gruprilor hidroxil cu acid beta-glucuronic sau cu acizi care conin radicali sulfurici (ex taurina), pentru a forma compui uor solubili n ap care vor fi eliminai prin urin.