Aprarea antibacteriana Structura de suprafat a bacteriilor - Gram + => fagocitoza - Gram - => sensibili la liza prin complement sau

citotoxicitate extracelulara - mycobacterii, spirochete => fagocitoza Mecanisme patogene ale bacteriilor: - toxicitate fara invazivitate streptococi de grup A, Corynebacterium diphtheriae, Clostridium tetani (Ac specifici) - toxicitate cu invazivitate Stafilococcus aureus (RIC si RIU) - cu invazivitate orice bacterie cuhabitat intracelular mycobacteriile leprei (RIC) Prima linie de aparare = barierele organismului - celulele epiteliale fac peptide cu actiune antibacteriana o ex: defensinele prin Cys si Arg fac canale permeabile pentru fier in structurile dublu-lipidice determina eliberare de macrofage si PMN elimina stafilococi, Pseuodomonas, E coli A doua linie de aparare = reactia inflamatorie acuta (aparare innascuta) recunoasterea imunologic nespecifica - se face recunoasterea directa a: o PAMPs (pathogen associated molecular patterns) pot fi lipopolizaharide (endotoxine), lipoproteine, polianioni, manoza, ac lipoteichoic, glicolipide o IgG - receptori: o PRM pattern recognition molecules o Toll-like receptors pe celulele epiteliale ale mucoaselor, pe mastocite, neutrofile, macrofage, celule dendritice, unele limfocite recunosc LPZ, lipoproteine, proteine din invelisul bacterian, acizi nucleici microbieni, factori ai gazdei produsi de celula distrusa (cromatina, matrix) o receptor pentru complement recunosc C3b o receptori scavangers pe macrofage o FcR 1, 2 Etape (ale liniei 2 de aparare, deci ale reactiei inflamatorii acute) 1. modificari vasculare 2. modificari celulare 3. activarea mediatorilor solubili: - proteine plasmatice - molecule chemotactice 1. modificarile vasculare vasoconstrictie in vasul lezat vasodiltatie in colaterale capilare, artterioe => aflux crescut de sange si staza prin Ag bacterian de suprafata si prin proteine plasmatice retractie endoteliala si crestere a permeabilitatii 2. modificari celulare - PMN, macrofage, celula endoteliala, mastrocite - coagulare+ fibrinoliza - sistemul kininelor kalicreina -> bradikinina => vasodilatatie - sistemul complement o anafilatoxine proinflamatorii care fac vasodilatatie, activare de mastocite si crestere a permeabilitatii o C5a are efect chemoatractiv pentru neutrofile - macrofagele migreaza pe traiectul fibrinei Mastocitele sunt activate prin PRM PAMPS o se elibereaza mediatori solubili (histamina) => are loc o activare reciproca cu celula endoteliala o stimuli : mecanici, fizici, chimici enzime, imunologici (anafilartoxine, IgE) o raspuns: imediat mediatori din granule histamina, IL4 (care stimuleaza LB), TNFa (care creste permeabilitatea si favorizeaza diapedeza neutrofilelor) tardiv mediatori din granule care sunt sintetizati de novo acid arahidonic => COX prostaglandine, leucotriene citokine si factori de crestere VEGF (vascular endothelial growth fact), PDGF (plateletderived growth factor), PAF, TNFa, ILB PMN - exudat inflamator

- 1. rolling leucocitar - 2. aderare ferma - 3. emigrarea leucocitelor in tesut prin chemotactism - 4. activarea leucocitelor => fagocitoza 1. Rolling-ul leucocitar fenomen permanent reprezinta aderarea reversibila a leucocitelor de la periferia fluxului sangvin (prin stres de forfecare) se face prin intermediul selectinelor o selectina L (aflata in mod constitutiv pe leucocite) o selectina E (aflata neconstittiv, deci apare doar uneori, pe endoteliu) o selectina P (aflata in mod constitutiv pe plachete) glicanii (?) de pe endoteliu leaga selectina L o E selectina este exprimata cand se activeaza endoteliul si secupleaza cu E selectina-ligand: N-acetillactozamine, Louise oligozaharide ? 2. Aderarea ferma incepe cu E selectina continua cu o 2 intergine (LFA1, IMAC) de pe membrana leucocitelor o ICAM incepe activarea leucocitului 3. Emigrarea leucocitelor in tesut prin 1 integrine, VLA(very late) au loc inteactiuni cu matricea celulara prin fibronectina, RGD, RGDs cascada fosfatidil inozitolilor => creste Ca, NADPH oxidaza leucocitele isi modifica forma o emit pseudopode si fac diapedeza si endocitare chemotaxis = migrare strict directionata in functie de gradientul chimic al factorilor chemotactici din vas spre centrul focarului o receptorii de pe membrana leucocitelor percep ariile cu concentratie crescuta de factori chemotactici o acesti factori, pe langa faptul ca le atrag, le si activeaza metabolic factori chemotactici o endogeni C3a, C5a, C5, C6, C7 TNFa, IL1, IL8 chemokine 40 de citokine cu 2 situsuri unul pentru leucocit, unul pentur GAG-ul de pe enditeliu o sunt produse de endoteliul tisular? si sunt transportate transendotelial in functie de reactiile imune o recetorii pentru citokine sun serpine legate la proteinele G; se exprima selectiv o dupa diapedeza, leucocitele rapsund la alt tip de chemokine leucotriena B4 kalicreina fibrinopeptidele A, B PAR o exogeni N-formil metionina 4. activarea leucocitelor fagocitoza neutrofilele apar primele monocitele se transf in macrofage = curatitori ai focarului Etape fagocitoza i. atasarea si recunoasterea particulei ii. ingerarea iii. distrugerea = citotoxicitate 1. recunoasterea nu a scris-o FcR1 nr mare pe neutrofile si macrofage - prin secventa activatoare se activeaza matbolic PLC si NADPH oxidaza FcR2 prin fragmentul intracitoplasmatic lung -> se activeaza metabolic PLC si NADPH oxidaza se initiaza fagocitoza si mecanismele microbicide

o o o

turn-over lipidic -> PLC si PLA formarea de radicali liberi de O2 prin NADPH oxidaza + mileoperoxidaza + produsi azotati eliberare de enzime consumul de glucoza si de O2 dau glicoliza anaeroba in hipoxie.

2. ingerarea - are loc invaginarea portiunii de membrana unde s-a atasat particula - apoi, capetele se strang prin fibrele elastice si musculare (?!) si prin hiperclacitie - invaginarea se inchide => fagozom o anaerobioza e din ce in ce mai avansata => scade pH-ul o endozom + lizozom = endolizozom cu enzime Granulele neutrofilului sunt - primare = lizozomi cu hidrolaze acide, elastaze, mieloperoxidaza, lizozim, fagocitina, leuchina - secundare = cu lizozim, lactoferine, rezervoare de receptori neasamblati - daca particula de fagocitat este prea mare sau imobila, neutrofilul isi deverseaza continutul si lezeaza tesutul inconjurator 3. citotoxicitatea citotoxicitatea O2- dependenta o NADPH oxidaza o mieloperoxidaza o derivati oxidati ai azotului NADPH oxidaza - pe membrana externa si pe membrana endosomala si lizozmala o membranar citocromul B205 alfa beta pentru FAS, NADPH (?) o submembranar ...47 (pt alfa?) GP 67 ...pt beta Rac ? - componentele se asambleaza dupa activare - primele asamblate vor fi alfa si beta care sunt transportate din grnaulele secundare prin atasarea lor de reverscina activata prin PLC - cele submembranare vor fi asamblate ulterior => modificari conformationale => isi exteriorizeaza situsuri pentru NADPH si NADPH2 - FAD cu beta => electronii ajunge la NADPH2 si apoi pe O2 => radicali liberi de oxigen = anionul superoxid => apa oxigenata in fagozom o superoxidul si apa oxigenata ucid bacteriile si catabolitii formati de celelalte microbicide - ionul superoxid + halogeni ----mieloperoxidaza-----> specii reactive de O2 halogenate = mult mai toxice - apa oxigenata (H2O2) este toxica pt celula => aceatsa trebuie sa aiba un mecanism de protectie care e reprezentat de catalaza si glutation peroxidaza care transforma H2O2 in H2O si O2 Mieloperoxidaza - in endolizozom - actioneaza pe peroxizi si,,, - in prezenta halogenilor => acid hipocloros - e cel mai important microbicid Speciile reactive de oxigen - sunt toxice pentru bacterii, virusuri, fibroblasti, eritrocite, tumori, celule parenchimatoase - realizeaza o lipid-peroxidare => distruge stabilitatea mebranara - fac activare de enzimecelulare - oxideaza proteine, ADN - intretin procesele inflamatorii semnalizare, degradeaza celulele endoteliale, matrixul - activeaza proteoliza latenta prin colagenaza - inactiveaza antiproteazele - stimuleaza activarea caii acidului arahidonic si a complementului Derivati oxidati ai azotului - nitric-oxid sintetaza indusa de citokine citotoxicitatea O2-independenta - devine activa la pH acid, in anaerobioza

Lizozimul ataca prin hidroliza Proteinele cationice din granulele neutrofilului pH-ul enzimele lizozomale

Proteina C reactiva (opsonina nespecifica) si proteina de faza acuta antiproteaze (alfa1-antitripsina etc) Ceruloplasmina neutralizeaza radicalii liberi de O2. Fibroplazia induce activarea si migrarea fibroblastelor si producerea de proteine repratorii centrifug Migrarea cel endoteliale de-a lungul filamentelor de fibrina centripet => vase de neoformatie Activarea complementului pe cale alterna, apoi pe cale clasica. Activarea cel NK -> favorizeaza selectarea unui raspuns adecvta al limfocitelor RIU/RIC Anticorpii = punte de legatura o intre imunitatea innascuta si activarea complementului o cu RIC - sunt neutralizanti o leaga toxina bacteriana si blocheaza posibilitatile de atasare o leaga enzime care degradeaza matrixul - scad mobilitatea flagelilor - IgA opersc legarea bacteriilor de celulele epiteliale mucoase - exista Ac care leaga componentele chelatoare de fier