UNIVERSITATEA DE TIINE AGRICOLE I MEDICIN VETERINAR A BANATULUI DIN TIMIOARA

FACULTATEA DE AGRICULTUR

Doctorand inginer ALIN SEBASTIAN JIVAN

STUDII I CERCETRI PRIVIND INFLUENA PESTICIDELOR ASUPRA ALBINELOR (APIS MELLIFERA L.)

Coordonator tiinific:
prof. dr. dipl. univ. prot. pl. GHEORGHE POPESCU

Timioara 2009

REZUMAT
Viaa omeneasc i viaa social a albinelor i furnicilor, mai mult dect a viespilor, se poate spune c sunt apropiate. Albinele, taxonomic fac parte din Ordinul Himenoptera n care sunt descrise peste 80 000 de specii; numele ordinului provine din cuvintele greceti ,,himen membran i ,,pteros arip. Se recunosc dup nfiarea celor 4 aripi, transparente, cu nervuri rare, care formeaz o reea de ochiuri largi ct i prin faptul c prile principale din trup abia se in una de alta, att este de subire gtul ct i mijlocul. Pe cap, pe lng cei doi ochi compuii, proemineni, lucioi, se mai afl ochii simpli sau ocelii (n numr de trei), n regiunea frontal (M. BURA i colab., 2005). Neamul albinelor este mare i rspndit pe faa ntreag a pmntului. Este un neam vechi pentru c s-au gsit insecte asemenea albinelor n chihlimbarul din vremea teriar. Toate specile de albine sunt legate de flori. E o reciprocitate strns ntre cele dou specii. Floarea d albinei mncarea ce-i place, nectarul i polenul. Albina ajut floriile la fecundaia ncruciat, aducnd polen de la unele de acelai neam, pe pistilul alteia. Numai aa se pot cpta semine sntoase (I. SIMIONESCU, 1983). Albinele au un rol de nenlocuit n polenizarea culturiilor agricole entomofile. Produciile ridicate pot fi obinute numai prin folosirea unei protecii chimice adecvate. n ultimii ani au fost observate mai multe cazuri de intoxicaie la albine dup tratamentul rapiei mpotriva duntorilor. Tratamentul acestei plante de cultur este bazat pe aplicarea de dou preparate toxice pentru albine Regent 800 WG si Nurelle D. Dac productorul nu respect toate detaliile metodelor tratamentului, sau sub unele circumstane speciale, albinele sunt otrvite. Apicultorul dorete compensaii, dar productorul nu le accept fr dovada legturii dintre protecia plantelor i intoxicaia albinelor. Dei simptomele vizuale ale albinelor muribunde sunt tipice pentru intoxicaie, analizele obinuite de laborator sunt de cele mai multe ori negative. Apicultorul nu primete compensaie i productorul nu are nici un interes s mbunateasc metodele de protecie a plantelor. Cele mai grave intoxicaii sunt determinate de pesticide ca urmare a efecturii unor tratamente fitosanitare la culturile din plante melifere sau alte culturi aflate n apropierea vetrei de cules. Trebuie subliniat faptul c intoxicaiile albinelor nu se trateaz ci se previn (M. BURA i colab., 2005).

II

Dup cum s-a menionat anterior, intoxicaiile albinelor nu pot fi combtute actualmente, moartea petrecndu-se n scurt timp. Intoxicaiile albinelor sunt determinate de contactul sau ingestia de substane organice sau anorganice, care afecteaz profund metabolismul celular i funciile vitale ale acestora. Intoxicaiile acute i cronice creeaz un teren de minim rezistent n faa agresivitii agenilor infecioi i parazitari (R. WOLFGANG, 1996). Unele substane chimice se acumuleaz n esutul adipos al albinelor odat cu consumarea de ctre acestea a polenului i al psturei adus de albinele culegtoare i depozitat n faguri. Aceste substane aflate n polen i consumate odat cu acesta nu le influeneaz cu nimic viaa, pn n momentul n care, aceste albine ajung s consume din rezerva de grsime n timpul ierni pentru a menine temparatura ghemului de iernare constant (T. ROULSTON i J. CANE, 2000). La hrnirea larvelor cu lptior prin in termediul hranei produse de doici reziduurile de pesticide ajung n corpul acestora producndu-le moartea. n cazul n care stupii ajung s ierneze cu astfel de albine, se poate ntmpla ca ntreaga familie de albine s dispar (D. GUEZ, 1992). Poluarea spaiului de zbor al albinelor cu pesticide, metale grele, pulberi ale metalelor grele provoac toxicoze cronice ce polueaz i reduc populaiile de albine (C. FLCH, 1995; D. BADENDREIER; N. KALBERER, 2004). Fungicidele, substane toxice care distrug ciupercile vtmtoare plantelor, acaricidele care distrug acarienii unor arbuti fructiferi, insecticidele care distrug insectele vtmtoare i erbicidele care distrug buruienile din culturi, conin metale grele, singulare sau combinate, toxice att pentru albine ct i pentru om (GH. POPESCU, 2005; C. FLCH, 1995). n astfel de situaii, familiile cele mai puternice au pierderile cele mai mari. S-a calculat c din cele puternice pier pn la 68%; din cele mijlocii 22%, iar din cele slabe doar 10% (M. WINSTON, 1993). Albinele sunt considerate indicatori ecologici ce se bazeaz pe mai multe caracteristici biologice i etiologice cum ar fi nivel mare de reproducie, mobilitate mare, capacitate de a zbura pe distane mari i de a vizita numeroase flori ntr-o singur zi (M. TISSEUR, 1996). Mai mult, coloniile de albine acoper ntregul ansamblu teritorial al rii i starea lor este atent supravegheat de apicultori. Din punct de vedere tiinific, putem cita studiile care au utilizat albinele pentru determinarea prezenei n mediu a elementelor radioactive sau a metalelor grele (J. N. TASEI, 1995). Un studiu italian a demonstrat c specia Apis mellifera poate fi utilizat cu succes pentru detectarea prezenei microorganismelor patogene pentru plante (C. PORRINI i colab., III

2002). Examenul produselor apicole: miere, cear, albine i polen, etc., poate furniza date utile despre prezena poluanilor n mediu. Mierea fiind un produs de consum uman, contaminarea sa cu diveri compui este frecvent studiat. n Frana un plan de evaluare naionala evalueaz n fiecare an contaminarea mierii cu diferite molecule de sintez i metale grele (C. FLCH, 1995). n 2003, din 117 probe de miere analizate, reziduuri care depeau doza maxim admis au fost gsite n 2,8% din probe. Mierea este un produs realizat de albine n exclusivitate din nectarul florilor sau din sucurile dulci de pe alte pri ale plantelor verzi, pe care acestea le culeg, le mbogesc cu substane proprii i le prelucreaz ntr-un mod specific obinnd n final produsul astfel denumit, pe care l depoziteaz n celulele fagurilor din stup pentru a constitui hrana lor energetic (N. POPESCU, 1997). Metalele n cantiti foarte mici sunt necesare tuturor formelor vitale (Fe, Co, Cu, Mn, Cr7+, Mo, Se, Zn), divizarea metalelor n necesare, neutre i toxice poate fi inexact i deseori induce n eroare, deoarece toate elementele necesare n doze mici devin toxice i foarte toxice n doze mari. De exemplu Cadmiul i Cromul hexavalent dei n unele situai i pot fi benefice pentru om, sunt considerate, alturi de ali factori ,,metale grele productoare de cancer (J. DECRET, 2005; A. K. SHANKER i colab. 2005). Diferena ntre concentraiile n care ele sunt folositoare i n care sunt dunatoare poate fi uneori foarte mic. n prezent, n condiiile impactului antropogen intens asupra naturii, este foarte important de a controla nivelul coninutului metalelor n produsele alimentare, n mediul ambiant, deoarece sunt cunoscute cazuri de intoxicare a oamenilor cu compusii metalelor grele. Metalele grele odat asimilate sunt greu de eliminat din organismul uman. Este o sintez a relaiilor din tandemul ,,metale grele-vieuitoarerealizat de T.W. LANE i F. M. MOREL (2000); T.W. LANE i colab. (2005); OTILIA COTUNA i GH. POPESCU (2009) i totodat un semnal de alarm pentru factorul antropic care trebuie s contientizeze luarea unor msuri de prevenire de ctre ,,Autoritatea Naional pentru Protecia Consumatorilor; ,,Autoritiile Naionale Sanitar Veterinare i pentru Sigurana Alimentelor; ,,Patronatul Romn din industria de morrit i panificaie; ,,Compartimentul de Igien a Alimentaiei i Nutriiei al Institutului de Sntate Public; ,,Ministerul Mediului. Numeroase personaliti au evocat, de-a lungul timpului, importana albinelor i a apiculturii. Astfel, Albert Einstein aprecia c dac albinele ar dispare de pe Terra, omenirea ar avea aceeai soart n patru ani; cu ct exist mai mult polenizare, cu att iarba este mai mult, sunt mai multe animale, mai muli oameni", referindu-se la importana albinelor ca

IV

polenizator al culturilor entomofile i n consecin, la obinerea produciilor agricole, proces care nu ar fi posibil n absena polenizatorilor. Specia Apis mellifera cunoscut popular sub denumirea de albina melifer, prezint importan economic major i de un real interes, n mod indirect prin foloasele pe care le aduce n urma polenizrii culturiilor agricole de cmp entomofile (rapi, mutar, floarea soarelui, etc.), polenizarea i legarea fructelor n liveziile cu pomi fructiferi (mr, pr, prun, cais, piersic, cire) i n plantaiile cu vi-de-vie. Albinele au un rol foarte important n polenizarea majoritii culturiilor destinate producerii de smn, fcnd referire la culturiile cu plante legumicole (varz, ceap, morcov, ptrunjel, mrar, ridiche, conopid, etc.); culturiile cu plante medicinale i aromate (ment, cimbru, busuioc, anghinarie, rozmarin, masul de grdin, chimen, coriandru, etc.); a culturiilor semincere cu plante furajere (lucerna albastr, trifoiul alb, trifoiul rou, sparceta, ghizdeiul, etc.). Deasemenea un interes major prezint i polenizarea cu ajutorul albinelor a pajitilor i puniilor naturale situate n zone de dealuri i alpine. Albinele fac parte din ecosistem. Ele reacioneaz adecvat la efectele benefice sau duntoare, reacii pe care apicultorul le poate observa lrgindu-i atenia astfel pe o suprafa imens. Apicultorul poate observa ceea ce colecteaz albinele: nectar, polen, propolis. Din miere proaspt, din culoarea propolisului i a polenului, eventual i din mrimea polenului poate deduce de unde au colectat albinele. Din producia realizat poate evalua calitatea, valoarea economic a teritoriului. Dac din albinele ieite la cules nu se mai ntorc dect cteva, atunci apar unele semne de ntrebare, iar explicaia cea mai plauzibil este c, contrar regulamentelor se stropesc plantele nflorite fr a se ntiina apicultorii, cu diferite substane chimice. Dac intoxicarea este subletal i albinele reuesc s ajung n stup, ele sunt nconjurate de celelalte albine care le miros i le pipie cu antenele, cele bolnave elimin nectarul infectat, iar cele sntoase le hrnesc cu miere curat. Dac se face bine, victima omului mai adun nectar cteva zile, dar va avea o via mai scurt dect albinele care nu au fost intoxicate. n agricultur sunt folosite din ce n ce mai multe substane chimice deosebit de toxice pentru combaterea bolilor i duntorilor plantelor de cultur sau a celor din zona forestier. Aceast metod chimic de combatere a duntorilor duce la scderea numrului polenizatorilor naturali ai plantelor i la necesitatea protejrii i folosirii dirijate a albinelor ca insecte polenizatoare, n scopul sporirii produciei vegetale. Acest lucru se poate realiza prin

utilizarea unor substane chimice mai puin toxice pentru albine i prin aplicarea lor n momente n care nu vin n contact cu acestea. Insecticidele, indiferent de natura lor, de ingestie, de contact sau de respiraie, sunt nocive atunci cnd penetreaz organismul albinei i provoac un dezechilibru fiziologic la cteva procese biologice fundamentale. Deoarece, evoluia toxicozei este de obicei fulgertoare, n cursul unei zile pot fi distruse mai multe stupine, iar aceast evoluie depinde de distana i suprafaa tratat, precum i de natura i remanena substanelor aplicate. Gradul de toxicitate al unui pesticid este influenat de mai muli factori ca de exemplu: forma corolei florii stropite care poate reine cantiti diferite din picturile de produs chimic, natura insecticidului (substana activ din componena chimic a acestuia), concentraia de utilizare, numrul de tratamente efectuate, tehnologia de aplicare a produsului, gradul de selectivitate a produsului, condiiile meteorologice din timpul aplicrii i din perioada imediat urmtoare efecturii tratamentului chimic (temperatura sczut i umiditatea atmosferic ridicat determin o aciune prelungit a reziduurilor produselor chimice, fapt care va avea repercursiuni negative asupra albinelor polenizatoare care viziteaz florile stropite dup ore i chiar zile de la aplicarea tratamentului). Dac insecticidul utilizat este nociv, sau distana dintre stupin i cultura tratat este mai m are, familiile de albine intoxicate au o activitate mai redus i prezint un mare numr de albine moarte pe fundul stupului, n faa urdiniului i n direcia zborului. O parte din albinele care supravieuiesc cad de pe faguri, se trsc n faa urdiniului, iar alt parte ncearc s prseasc stupul mpreun cu matca. Puietul de albine intoxicat i schimb poziia, culoarea, se atrofiaz i piere.Pn la utilizarea unor insecticide netoxice pentru albine, dar cu acelai efect pentru distrugerea duntorilor agricoli, singura posibilitate de prevenire a intoxicaiilor la albine const n respectarea legislaiei n vigoare privitoare la interzicerea stropirilor cnd plantele melifere sunt n perioada de nflorire. n cazul cnd sunt tratate anumite suprafee agricole sau forestiere cu substane insecticide n perioada cnd sunt cercetate de ctre albine, familiile de albine trebuie transportate la cel puin 5 km de zona n care se aplic combaterea, sau se nchid pe ntreaga perioad de tratare i de remanent a substanei insecticide pe plante. Dac o singur albin lucrtoare aduce polen contaminat n stup poate perturba viaa familiei i moartea unui numr mare de albine. Albinele doici nu mai pot secreta suficient lptior pentru a hrni matca care i ncetinete ritmul ouatului. Familiile rmase fr matc sau slbite nu supravieuiesc peste iarn. VI

Momentul ales pentru aplicarea insecticidelor, cu privire la intoxicarea albinelor, este influenat de condiiile nefavorabile de mediu. Dac temperaturile sunt foarte sczute dup aplicarea tratamentelor, reziduurile de pesticide pe plante rmn toxice pentru albine pe o perioad dubl de timp comparativ cu aplicarea n condiii prielnice de mediu. Nu se aplic pe culturi sau buruieni nflorite. Obiectivele propuse au fost: - stabilirea gradului de dezvoltare la familiile de albine n condiiile n care au fost fcute tratamente cu pesticide la culturile agricole entomofile; - identificarea i determinarea coninutului de metale grele din mierea de albine provenit de la culturile agricole melifere (rapi i floarea soarelui) care au fost protejate mpotriva bolilor i duntorilor cu pesticide din grupe chimice diferite; - observarea de aproape a comportamnetului albinelor care au fost intoxicate cu miere contaminat cu pesticide din grupe chimice diferite; - stabilirea celui mai nociv, precum i a celui mai puin nociv pesticid pentru albine, dintre cele propuse a fi studiate; - interpretarea rezultatelor obinute n urma cercetrilor prin intermediul ANOVA (Analysis of Variance) i a corelaiei multifactoriale cu ajutorul programului SPSS (Statistical Package for the Social Science). Teza de doctorat este structurat n 7 capitole, din care partea general Studiu bibiografic cuprinde 2 capitole, iar partea experimental Cercetri proprii, 5 capitole, la care s-au adugat concluzii generale i bibliografia. n capitolul I ,,Cercertri pe plan naional i internaional privind specia Apis mellifera se prezint la modul general specia Apis mellifera, de la importana acesteia, produsele apicole, descrierea morfologic pn la factorii abiotici i cei biotici care influeneaz dezvoltarea albinelor. Capitolul 2 se intituleaz ,,Cercetri pe plan naional i internaional privind influena pesticidelor asupra speciei Apis mellifera . n acest capitol sunt prezentate pesticidele, rolul acestora n agricultur i efectele nedorite pe care le au asupra albinelor. Capitolul 3 se intituleaz ,, Condiiile climatice i edafice ale zonei n care s-au efectuat cercetrile i face referire la condiiile naturale de care au beneficiat albinele n anii de cercetare. Capitolul 4 intitulat ,,Material i metod de lucru, prezint materialele i toate metodele de lucru care s-au folosit n cercetriile ntreprinse pentru finalizarea lucrri de doctorat. VII

Capitolul 5 se numete ,,Determinarea unor microelemente metalice din mierea de albine. n acest capitol sunt prezentate metalele grele identificate n mierea de albine produs de stupina studiat, precum i presupusele cauze ale prezenei acestora. Capitolul 6 intitulat ,, Cercetri privind gradul de intoxicare al albinelor cu unele substane chimice din grupa pesticidelor face referire la unele insecticide folosite frecvent n practica agricol pentru combatera insectelor duntoare. n acest capitol s-a ncercat demonstrarea gradului de toxicitate, al unor pesticide frecvent utilizate n agricultur, asupra albinelor. n capitolul 7 intitulat ,, Cercetri proprii asupra comportamentului albinelor n perioada de nflorire a culturilor de plante tehnice melifere este prezentat efectul nedorit al pesticidelor n cazul n care acestea se aplic pe culturile de plante nflorite, culturi care sunt vizitate de ctre albine. Concluziile i recomandrile, bibliografia. Scopul lucrrii este agricole entomofile, dovedirea impactului tratamentelor cu pesticide, la culturile precum i msurile de asupra albinelor pricipalul lor polenizator,

protejare a familiilor de albine i a omului contra intoxicaiilor cu pesticide. Originalitatea lucrrii rezid din urmtoarele argumente: - primul argument este acela c datele obinute n urma cercetrilor privind influena pesticidelor asupra albinelor au fost interpretate cu un program statistic de actualitate (SPSS), program care a avut o garantare mare a rezultatelor obinute prin calcularea coeficienilor de regresie (Pearson) i determinaie (R Square), Stdandard Error of the Estimate, Change Statistics (R Square Change, F. Change, Sig. F. Change), Durbin Watson (DW) ; - mediul de cercetare i zona n care s-au desfurat cercetrile sunt originale pentru acest studiu; - modul de colectare a datelor a fost cu totul original deoarece au fost identificate albinele la urdiniul stupului care veneau cu polen de la cultura melifer nflorit, iar albinele care aduceau polen de la flora spontan au fost excluse din numerotare; - la stabilirea suprafeei de puiet crescut de ctre familiile de albine cercetate msurtorile au fost fcute n aceai perioad n care au fost numrate i albinele la urdini, iar msurarea suparfeei de puiet crescut de ctre familiile de albine a fost fcut cu ruleta i a fost exprimat n cm2, i nu cu rama Ne aa cum este precizat n literatura de specialitate unde valoarea este exprimat n dm2; - au fost testate un numr de patru pesticide din dou grupe chimice diferite, iar pentru fiecare pesticid au fost urmrite trei concentraii; n condiii de laborator s-a urmrit modul de aciune al acestora asupra albinelor care au consumat miere contaminat i care a fost VIII

analizat apoi prin metoda gaz cromatografiei pentru determinarea coninutului de substan activ. Cercetrile s-au desfurat pe perioada 2006- 2008 n localitiile Bulgru i Graba din judeul Timi. Ca material biologic s-au folosit familii de albine din Specia Apis mellifera var. Carpatica i culturi anuale cu plante melifere de rapi (Brasica napus) i floarea soarelui (Helianthus annus). Pentru cercetarea experimental s-au folosit cinci familii de albine din stupina proprie, acestea au fost alese n funcie de tipul lzii n care se afl familiile de albine i de puterea de populare cu albine a acestora. Stupina din care am ales familiile de albine se afl amplasat pe vatr stabil, la marginea localitii Bulgru, n zona Cmpiei de Vest. Forma stupinei este cea staionar, toi stupii beneficiaz de aceleai condiii de macroclimat. Coloniile de albine sunt de putere aproximativ egal (aproximativ 3kg greutate vie), adpostii n stupi verticali modelul Dadant i magazin de recolt de tip multietajat. Corpul Dadant este situat n partea de jos a lzii, are capacitatea de 10 rame dispuse n pat rece i fund fix. Scndura de zbor din dreptul urdiniului este detaabil pentru a permite instalarea colectorului de polen. Corpul multietajat est e situat n partea de sus a lzii n care este adpostit stupul i constituie magazinul pentru recoltarea mierii, are de asemenea o capacitate de 10 rame. ntreaga stupin este deparazitat anual pentru combaterea acarianului Varoua destructor cu produsele existente n prezent te pia, au fost folosite n fiecare an dou produse Mavrirol substan activ mavrix(1 tratament/an) i Varachet forte substan activ amitraz (6 tratamente/an). Din stupin s-au ales familii nvecinate pentru a nu pierde timp la numratul albinelor, trecnd uor de la un stup la altul. Astfel, au fost observat albinele care intrau n stup ncrcate cu polen pe picioarele posterioare, timp de 15 minute la fiecare familie n parte, de trei ori pe zi n doua zile diferite. n anul 2006 tratamentul culturii rapi s-a fcut n data de 21 aprilie i a fost folosit insecticidul (Decis 25CE, substan activ deltametrin) foarte toxic pentru albine. n anul 2007 tratamentul culturii rapi s-a fcut n data de 17 aprilie i a fost folosit insecticidul (Karate zeon substan activ lambda cihalotrin) este un insecticid uor tolerant de ctre albine. n anul 2008 tratamentul culturii rapi s-a fcut n data de 22 aprilie i a fost folosit insecticidul (Faster 10 CE substan activ cipermetrin) foarte toxic pentru albine. Cercetrile s-au desfurat timp de 4 sptmni. IX

Smna acestui hibrid a fost tratat mpotriva duntorilor (Tanymecus dilaticollis risoara porumbului; Agriotes sp. - Viermi srm) i ai bolilor (Botrytis cinerea - putregaiul cenuiu; Sclerotinia sclerotiorum putregaiul alb; Phomopsis helianthi frngerea tulpinilor; Phoma macdonaldi negrirea tulpinilor) din sol cu substana procloraz (Mirage). Pe lng macroelemente, nutrieni proteici, glucidici i lipidici, vitamine, corpul omenesc i cel animal au nevoie i de o serie de elemente metalice care se gsesc n cantitate foarte mic, aa numite microelemente sau ,,elemente n urme. Acestea sunt n general metale tranziionale (Fe, Cu, Zn, Mn, Co, Ni, Cr, Mo), componente a numeroase sisteme enzimatice. Pe lng efectul lor benefic, chiar indispensabil vieii, aceste ,,elemente n urme aflate n cantiti mari pot fi duntoare sau chiar puternic toxice pentru organismele vii. Lor li se mai adaug i unele ,,metale grele cu pronunat efect toxic asupra organismului (Hg, Cd, Pb, Bi) care pot contamina produsele alimentare i a cror depistare este necesar (I. GERGEN, 2004). Comparativ cu limitele maximile admise de ctre (F.A.O. / O.M.S. Codex Alimentarius Standard), referitor la cantitatea de metale grele ce se regsete n mierea de rapi se poate observa faptul c cel mai mult este afectat mierea din localitatea Bulgru n toi anii inclui n studiul dat. Limita superior admis a fost depit cu 2,3 mg/kg de miere, n anul 2007. n localitatea Graba cuprul a depait limita superior admis cu 0,3 m g/kg. Referitor la cadmiu cea mai mare depire a fost nregistrat n anul 2006 n localitatea Bulgrus o depire cu 0,29 mg/kg. n anul 2008 excepie au fcut cuprul i zincul care au depit valorile admise respectiv cupru a avut valoarea de 0,56 mg/kg n localitatea Bulgru, iar zincul 0,20mg/kg n Bulgru i 0,17mg/kg n Graba. Din aceste date putem afirma c administrarea pesticidelor pe baz de cupru (sulfat de cupru, oxiclorur de cupru), zinc i mangan (ditiocarbamai), lipsa precipitaiilor i temperaturiile ridicate din luniile aprilie i mai au avut urmare creterea concentraiei n metale a soluiei solului i acestea au fost identificare i n miere ntr-o concentraie mai mare. Un alt experiment a fost realizat n cadrul cercetri pentru doctorat, acesta se refer la stabilirea gradului de toxicitate al unor substane chimice folosite frecvent n practica agricol asupra comportamentul albinelor n condiiile n care acestea sunt hrnite cu miere contaminat n condiii de laborator. insecticidul sistemic pe baz de folosit imidacloprid (Gaucho), iar pentru combaterea agenilor patogeni din sol a fost

Acest ghid al testrii este desemnat s evalueze toxicitatea acut a pesticidelor sau a altor chimicale la contact pe albinele lucrtoare. n principal are la baz Ghidul Organizaiei Europene i Mediteraneene pentru Protecia Plantelor (EPPO) pentru evaluarea efectelor secundare a PPP-urilor la albine (Apis Melifera). Au fost luate n consideraie i sugestiile de mbuntire a testului EPPO, conceput de Comisia Internaional a Relaiei Plant-Albin (ICPBR) la al cincilea Simpozion Internaional privind Riscul pesticidelor la Albinele din Wageningen Olanda din 1993. n vederea depistrii gradului de intoxicare al albinelor s-a analizat, cu ajutorul cromatografului HPLC (High performance liquid chromatography cromatografia cu lichid de nalt performan), probele de miere contaminate cu pesticide pregtite i administrate ca i hran albinelor din experiene. Au fost supuse spre analiz proba martor sau control precm i cele contaminate cu pesticidele Decis 2,5 EC, Faster 10 CE, Karate Zeon i Lider 70 WG. n urma observaiilor realizate asupra mortalitii induse de ingurgitarea mierii contaminate cu deltametrin putem spune c, la 5 minute dup hrnirea cu miere contaminat cu deltametrin 1,25% au murit 6 indivizi, la concentraia de 1% au murit 4 indivizi, iar n cazul concentraiei de 0,5% au murit 3 indivizi. Mortalitatea tuturor indivizilor a survenit la 90 de minute de la hrnire n cazul concentraiei de 1,25% respectiv 1%, ns la concentraia de 0,5% moartea tuturor albinelor a fost nregistrat la 120 minute. La concentraii mai mici 0,25 respectiv 0,12% mortalitatea a aprut la 10 respectiv 15 minute (7 respectiv 6 indivizi), toi indivizii din experiment au murit la 300 de minute la concentraia de 0,12%. S-a constatat c, dup primele 5 minute de la preluarea ngurgitarea hranei de ctre albine, au murit 20 de indivizi la o concentraie de 1,25% a cipermetrinului, 16 indivizi la concentraia de 1% respectiv 5 indivizi la concentraia de 0,5%. Mai departe, dup 30 minute a fost semnalat moartea tuturor indivizilor n experien la concentraii de 1,25 respectiv 1% a cipermerinului. La consumarea mierii contaminat cu cipermetrin 0,5%, moartea tuturor albinelor a survenit dup 60 minute. La concentraia cea mai mic (0.12%) toi indivizii au murit dup 300 de minute. Mortalitatea nregistrat la administrarea mierii contaminate cu lambda cihalotrin este prezentat n tabelul 6.3.5. Astfel moartea primilor indivizi (2) a survenit la 15 minute la concentraii de 1.25 respectiv 1%. La concentraia de 1,25% moartea tuturor indivizilor a survenit la 720 de minute. n cazul concentraiilor de 1 i 0,5% moartea tuturor indivizilor a fost semnalat la 1440 minute. n aceste condiii putem afirma c substana lambda cihalotrin poate fii tolerat ntr-o concentraie mai mic de ctre albine.

XI

Mortalitatea nregistrat n rndul albinelor a fost de 7 indivizi la 5 minute dup ngurgitarea mierii contaminate cu imidacloprid 1,25%, 5 indivizi respectiv 3 indivizi la concentraii de1 i 0,5%. La un interval de 45 minute au murit 95, 92 i 87 indivizi la concentraiile de 1.25, 1 respectiv 0.5%. Dup 60 de minute toi indivizii din experien au murit indiferent de concentraia substanei active. La administrarea mierii contaminate cu Calypso moartea primilor 6 indivizi a survenit la 10 minute, la concentraia de 1,25%, pe cnd la o concentraie de 0,25% au murit doar 2 indivizi. Dup 75 de minute, la concentraiile de 1.25% i 1% au murit toi indivizii din experiment. La concentraii mai mici (0.5%, 0.25% i 0.12%), mortalitatea de 100% a survenit la 100, 300 respectiv 720 de minute. La contaminarea mierii cu produsul Mospilan 20 SP, n concentraii diferite, primii indivizi mori au fost semnalai la 20 de minute i anume 4 indivizi la concentraia de 1,25%, 3 indivizi la concentraia de 1%. Primii indivizi mori (21) la concentraia de 0,5% au fost semnalai la 120 de minute de la administrarea mierii contaminate. Mortalitatea de 100% s -a instalat la 720 min, 2880 minute i 4320 minute la concentraiile 1, 25% , 1% respectiv 0,50,12 % . La contaminarea mierii cu produsul Regent, n concentraii diferite, primii indivizi mori au fost semnalai la 5 de minute i anume 18 indivizi, la concentraia de 1,25%, 16 indivizi la concentraia de 1% i la fel 16 indivizi mori la concentraia de 0,5%. La concentraia de 0,25 au fost nregistrat un numr de 13 indivizi mori dup 5 minute, iar la concentraie de 0,12 dup 5 minute au fost semnalai 10 indivizi mori. Mortalitatea de 100% s-a instalat la 15 minute, n cazul concentraiilor de 1,25% i 1%, la concentraiile de 0,5 i 0,25 toi indivizi au fost semnalai mori dup 20 minute, iar la concentraia de 0,12 toi indivizi au fost semnalai mori dup 30 minute. Din cercetarea efectuat cu privire la stabilirea gradului de toxicitate a unor pesticide utilizate n protecia plantelor melifere contra duntorilor, cu ajutorul regresiei polinomiale, rezid urmtoarle concluzii: - ,,extrem de toxic s-a dovedit pesticidul Regent care a provocat moartea a 100 de albine n intervalul de timp de 15 minute. - ,,moderat toxice s-au manifestat pesticidele Lider Kalypsos 480 SC, care au provocat n 60-90 minute. - cu ,,toxicitate redus s-au nscris pesticidele Karate Zeon 1440 minute i Mospilan 720 minute, care de altfel sunt recomandate n practica agricol. 70 WG, Decis 2,5 CE i

XII

Conform datelor nregistrate pe cei trei ani n care au fost fcute msurtori asupra puietului la familiile de albine, scderea cantitilor de puiet este destul de accentuat n a treia sptmn de msurtoare pentru c atunci s-au observat multe albine culegtoare moarte n cmp. n aceste condiii matca nu a mai depus ou cteva zile i dup aproximativ 10 zile datorit condiiilor climatice favorabile i datorit culesului bogat existent n natur din acel moment familiile de albine au reuit s se refac pentru c pesticidul folosit n combaterea duntorilor din cmp a omort numai albinele culegtoare, iar acestea au fost nlocuite dup cteva zile. Cel mai afectat an dintre toi anii experimentai a fost anul 2008 pentru c familiile de albine s-au dezvoltat mai slab n primvar, datorit condiiilor climatice, respectiv luna aprilie a anului 2008 a fost mai rcoroas fa de aceeai lun a anilor 2006 i 2007. De asemeni se observ faptul c n anul 2008 cantitatea de puiet crescut de familiile de albine a sczut mult dup efectuarea tratamentului n cmp cu insecticidul Faster (cipermetrin). Anul 2008 a prezentat n luna aprilie o medie a temperaturiilor de 12,0 oC , fiind mai rcoros fa de ceilali doi ani, dar cu precipitaii mai sczute fa de anul 2006 (21,9 l/m 2). Numarul de albine a sczut foarte mult n anul 2008, atingnd un minim de 8 albine n ziua a treia dup tratament, comparativ cu anul 2006 unde s-a nregistrat un maxim de 382 albine n a patra sptmn de observaie. Scderea cantitii de puiet, a numrului de albine lucrtoare, ct i ncetarea activitii de depunere a oulor, difer n funcie de fenofaza aplicrii insecticidelor, de natura pesticidului i anul climatic. Ca urmare a datelor obinute n urma calculrii intervalului de variaie pentru anul 2006 putem spune c numrul mare de albine observate la urdiniele stupiilor analizai nu a determinat o cretere exagerat de puiet la familiile de albine analizate, deasemenea n primele dou sptmni s-a observat o dezvoltare normal, iar n a treia sptmn lucrurile au nceput s se schimbe pentru c pesticidul a omort albinele culegtoare, iar acest lucru s-a resimit i asupra puietului, dup care n a patra sptmn se observ o revenire la normal. n anul 2007 exist un echilibru considerabil ntre numrul de albine i cantitatea de puiet pentru familiile de albine analizate, cu ct numrul de albine observate la urdini est mai mare, cu att mai mult puiet a fost msurat, n cea de a treia sptmn se observ o uoar descretere a cantitii de puiet msurat la familiile de albine analizate, dar i albinele au sczut uor ca numr, iar apoi au crescut treptat n cea de a patra sptmn. Referitor la anul 2008 s-a observ faptul c ntre familiile de albine studiate au existat variaii mari n ceea ce privete cantitatea de puiet crescut, diferenele au nceput nc din XIII

prima sptmn, n cea de a doua sptmn valoriile msurate au fost oarecum apropiate unele de altele, urmnd ca din sptmna a treia de msurtori i observaii lucrurile s fie schimbate, pentru c familiile de albine au crescut puiet mai puin, iar numrul de albine observate cu polen la urdini a fost mai mic. Aceastea sunt urmare a unei perturbaii produse de un pesticid pentru c n mod normal suprafaa de puiet obinut n urma msurtoriilor trebuia s fie din ce n ce mai mare, iar numrul albinelor observate la urdini cu couleele ncrcate cu polen s creasc uor pe tot parcursul de nflorire al unei culturi de plante polenifere i Albinele reprezint un material biologic valoros, datorit faptului c ele permit studiul unor fenomene sociale, fiziologice i senzoriale, pretndu-se foarte bine la analize de laborator, astfel fiind posibil obinerea unor rezultate destul de exacte. Datorit schimburilor intense de hran ce se realizeaz ntre indivizi unei familii de albine i atingerii reciproce a antenelor acestora, care sunt n continu micare, alb inele preiau unele particule nocive care se pot gsi n polenul i nectarul cules i le transmit cu fidelitate n produsele lor, sau sunt stocate n organismul lor. Albinele melifere intoxicate au prezentat simptome specifice cum ar fi: stare marcat de agitaie, micri nelinitite, dezordonate, dezorientate, stri convulsive caracterizate prin micri vibratorii ale aripilor, pesticidele exercitnd asupra albinelor efecte paralizante. Dup eforturi de a ncerca s zboare, corpul albinei se contract i aceasta moare direct pe florile de floarea-soarelui stropite sau cznd pe frunze i sol, cu proboscisul n afar, picioarele adunate i rsucite ntre ele, aripile ntinse. Corpul albinei moarte datorit intoxicaiei cu pesticid este foarte nchis la culoare. Remanena ndelungat a pesticidelor, precum i toxicititatea deosebit fa de albine a acestora, impune aplicarea unor msuri drastice, rapide, susinute i coordonate n vederea limitrii pierderilor i refacerea stupinelor contaminate. Prima msut care trebuie luat n astfel de situaii este mutarea stupinei la o distan de minim 10 km de locul contaminat i identificarea cauzelor pierderilor. n funcie de timpul scurs de la contaminare pn la aplicarea msurilor de limitarea pierderilor i de refacere a familiilor de albine perioadele pot fi variabile, iar n stupinele n care nu se aplic coordonat un set de metode de limitare a pierderilor i de refacere a famiililor de albine se poate ajunge pn la distrugerea stupinelor. Din analiza corelativ a prezenei metalelor grele n mierea de albine i factorii climatici rezult urmtoarele concluzii:

XIV

Cu privire la prezena metalelor grele n mierea de rapia, planta melifer cultivat n perioada 2006-2008 n localitile Bulgaru i Graba (Jude Timi) se concluzioneaz urmtoarele: - metalele grele prezente n miere au fost: Cu, Zn, Fe, Cd, Ni, Mn ; - Cu, Fe i Cd au fost metalele grele care au depit limita maxim admis (L.M.A.) de OMS (Organizaia Mondial a Sntii), FAO (Organizaia Naiunilor Unite Pentru Alimentaie i Agricultur) i Codex Alimentarius Standard; - Zn atinge limita maxim admisibil i anume 1,0 mg/kg de miere; - Ni i Cr nu au depit valoarea de 0,003 mg/kg, iar Mn a oscilat ntre 0,02 i 0,05 mg/kg miere; - metalele grele cu valori peste L.M.A. i anume Cu, Fe i Cd ct i Zn i care se nscriu ca factori de risc pentru sigurana vieii albinelor i omului, la valoarea limit au fost favorizate de factorii climatici, i anume umiditate (precipitaiile i umiditatea relativ a aerului) i vnt din fenofaza de nflorire a rapiei i de pesticidele aplicate altor plante melifere, aplicate pentru combaterea bolilor, duntorilor i buruienilor (n privina Cd este implicat poluarea industrial, iar Fe este cu izor mixt). Cu privire la prezena metalelor grele n mierea recoltat de la floarea soarelui, concluziile sunt similare cu cele obinute de la mierea de rapi, adic Cu, Fe Cd i Zn, depesc L.M.A. dar n cantiti mai reduse; Ni, Mn i Cr sunt prezente tot n cantiti reduse i n plus este Co, identificat n mierea de la floarea soarelui cultivat la Bulgaru; Pb este absent ca i n cazul cnd sursa pentru miere a fost cultura de rapi. Din modelele de regresie care demonstreaz existena legturile dintre variabilele studiate unde cuprul este considerat factor reprezentativ, iar factorii climatici i metalele grele Cd, Zn, Fe, Mn ca factori independeni rezult c o influen relevant asupra prezenei cuprului n mierea recoltat din florile de rapi i de floarea soarelui a avut-o umiditatea, vntul, Cd, Ni i Zn, iar temperatura se implic negativ (to=1,18). Concluziile sunt susinute de: coeficienii de corelaie R-Pearson cu valori apropiate de limita superioar, adic de la 0,783 la ,985; coeficienii de determinaie R Square, cu valori admisibile, adic cuprinse ntre 0,613 i 0,669; coeficienii de testare a autocorelaiei erorilor Durbin-Watson (DW) care depesc valoarea 2, cu un cmp de variaie de la 2,383 pn la 2,918, care demonstreaz corectitudinea cu care au fost realizate observaiile. Cu privire la ,, Cercetri privind gradul de intoxicare al albinelor cu unele substane chimice din grupa pesticidelor prin analiza regresiei polinomiale i a coeficienilor de corelaie (S) i de determinaie (R-Sq), concluziile formulate sunt: XV

- ,,extrem de toxic s-a dovedit pesticidul Regent care a provocat moartea a 100 de albine n intervalul de timp de 15 minute. - ,,moderat toxice s-au manifestat pesticidele Lider Kalypsos 480 SC, care au provocat n 60-90 minute. - cu ,,toxicitate redus s-au nscris pesticidele Karate Zeon 1440 minute i Mospilan 720 minute, care de altfel sunt recomandate n practica agricol. Softul SPSS cu privire la intensitatea legturii dintre ,,cantitate de puiet de albine i numrul de albine care intr n stup, cnd plantele melifere au fost rapia i floarea soarelui relev urmtoarele concluzii: - legtura dintre cele dou variabile nregistrat n anii 2006-2008 este ,,slab, fiind atestat de valoarea sczut a coeficienilor de corelaie Pearson (0,598-0,646) i de determinaie R-Square (0,358-0,391), n condiiile de garantare a rezultatelor experimentale n limita admisibil de pn la 5% dat de coeficientul de Sig. F Change i an ume de 2,0% (floarea soarelui) i 4% (rapi). Recomandri: pentru protejarea familiilor de albine contra intoxicaiilor, trebuie s se cunoasc din timp de ctre apicultori substanele cu care se vor face tratamentele de combatere ale duntoriilor din culturiile melifere nflorite; n cazul n care se fac tratamente de combatere cu unele substane nocive, pentru albine se recomand nchiderea albinelor n stupi 1-2 zile n funcie de temperatura medie nregistrat, dac este mai cald se in nchise mai puin (1 zi), dac este mai rece (2 zile), n ambele cazuri trebuie administrat ap n stupi; se recomand folosirea culturiilor de rapi i floarea-soarelui transgenice deoarece nu mai trebuie fcute tratamente de combatere a duntoriilor specifici acestora. 70 WG, Decis 2,5 CE i

XVI