PROTEINE

Reprezint cca 15% din greutatea corpului omenesc i 50% din masa
uscat a acestuia
Prezente n piele! muc"i! tendoane! ner#i! s$nge etc% dar i ca enzime!
"ormoni! anticorpi
&on'in o(ligatoriu &! O! ) i N! dar i P! *! metale ca +e! &u! ,g etc%
-istri(u'ia procentual medie a principalelor elemente.
C. 50 / 55% N. 15 / 10% S. 0 1 2%
O. 30/ 34% H. 5 1 6%
&on'inutul mediu de azot 7 16%
8lctuite din aminoacizi uni'i prin legturi peptidice
-up compozitie.
- proteine simple 1 alcatuite numai din aminoacizi
- proteine conjugate 1 con'in si o grupare prostetic. acid ri(onucleic
79 nucleoproteine :ri(ozomii;< lipide ca =os=olipide! colesterol! lipide neutre
79 lipoproteine :lipoproteinele plasmatice;< glucide ca manoza! galactoza!
"e>ozamine simple sau acetilate 79 glicoproteine :?/glo(ulinele;< =os=or 79
fosfoproteine :cazeina din lapte;< metale sau combinatii metalice ca +e!
+e:O);
4
! &a! @n! ,g etc 79 metaloproteine< hem 79 "emoproteine
:"emoglo(ina;
-upa =orm.
/ =i(rilare :=i(roase; sau scleroproteine 1 =orm alungit< insolu(ile in
ap< con=er 'esuturilor rezisten' mecanic. Aeratinele! colagenul! elastina!
=i(rinogenul
/ glo(ulare 1 au =orm s=eric sau elipsoidal< sunt solu(ile n ap.
al(umine! glo(uline! "istone! protamine
)
3
N &)
R
1
&
O
N) &)
R
3
&
O
N) &)
R
4
&
O
N) &)
Rn
&OO)
legaturi peptidice
ROBCB PROTEINEBOR IN ORD8NI*,
1% componente stucturale primordiale ale organismelor #ii / realizarea si
mentinerea structurii celulelor! a =ormatiunilor in=racelulare si a
(iomem(ranelor
/se gasesc n in#elisul si peretele celular :glicoproteine;! in piele! pene!
ung"ii! copite :E/Aeratina;! in e>osc"eletul insectelor :sclerotina;! in gogosile
#iermilor de matase! pinza de paianFen :=i(roina;! in tendoane! oase! cartilaFe
:colagenul;! in ligamente :elastina;! in secretii mucoase :mucoproteine;
3% proteinele din "rana sunt sursa primara de aminoacizi pentru
(iosinteza proteinelor celulare
4% catalizatori. enzime
2% reglarea reactiilor (ioc"imice 1 "ormoni. insulina! #asopresina!
o>itocina! somatotropina! "ormonul adrenocorticotrop etc%
5% protectie in s$ngele #erte(ratelor 1 anticorpi :imunoglo(uline;!
inter=eroni
5% inter#in in procesul de coagulare a s$ngelui. =i(rinogenul! trom(ina
0% componente ale sistemelor contractile. actina! miosina
6% transportori ai unor su(stante. o>igen! acizi grai! lipide! metale!
su(stan'e >eno(iotice
G% su(stante nutriti#e de rezer#a. o#al(umina! cazeina! =eritina
:depoziteaza =ierul in splina;! gliadina :in semintele de griu;! zeina :in
(oa(ele de porum(;%
10% di=erite roluri =izico/c"imice / inter#in in procesele de
permea(ilitate selecti#a a (iomem(ranelor! in transportul apei! al ionilor si al
di=eritelor molecule organice! in mentinerea ec"ili(rului acido/(azic etc%
AMINOACIZI
In =unc'ie de structura chimic.
1% aminoacizi monoamino/monocar(o>ilici
3% aminoacizi monoamino/dicar(o>ilici i deri#a'i
4% aminoacizi diamino/monocar(o>ilici i deri#a'i
2% "idro>iaminoacizi
5% tioaminoacizi
5% aminoacizi "eterociclici
In =unc'ie de polaritatea catenei.
1% aminoacizi nepolari :"idro=o(i; / radicali ali=atici :Gly! Ala! Val!
Leu! Ile! Val! Pro;! radicali aromatici :Phe! Trp;! grup cu sul= :Met;
2% aminoacizi polari cu catene neutre :neioniza(ile;. Ser! Thr! Tyr!
Asn! Gln! Cys! :Gly! Ala! Trp;
% aminoacizi polari cu sarcini electrice :cu grupe ioniza(ile;.
/ aminoacizii (azici :catene ncrcate poziti#;. Lys! Ar!! :"#s;
/ aminoacizi acizi :catene cu sarcin negati#;. Asp! Glu! :Tyr$ Cys;
*tructura aminoacizilor< punct izoelectric
&
R
&OO
) )
4
N
H
I
A
&
R
&OO)
) )
4
N
&
R
&OO
) )
3
N
)
H
)O
I
H
I
%
C
H
H
J
1
H
)
3
N &)
R
&OO )
4
O
H

H
J
3
I
&)
R
&OO
)
4
N
&)
R
&OO) )
3
O )
4
N
&)
R
&OO )
3
O )
4
N
H
H
H
II
I
)
4
O
H
I
pI 7 K :pJ
i
H pJ
F
;
Stereo&h#'#a a'#noa&#(#lor
&
&)O
&)
3
O)
) )O
L-!l#&er#nal)eh#)a
&
&)
3
R
&OO)
) )
3
N
L--a'#noa&#)
&
&)
3
O)
&OO)
) )
3
N
L-ser#na
&
&OO)
)
3
N
)
&)
3
R
&
&OO)
R)
3
&
N)
3
)
3
2
*
Propr#et*+#le a'#noa&#(#lor
a; decar(o>ilarea
)
3
N:&)
3
;
4
&)&OO)
N)
3
/ &O
3
)
3
N:&)
3
;
2
N)
3
ornitina putresceina
(; dezaminarea o>idati#
&
&OO
)
4
N
R
1
)
H
I
I
B/aminoacid o>idaza
+,N
+,N)
3
O
3
)
3
O
3
catalaza
1L3 O
3
H )
3
O
&
&OO
)
3
N
R
1
H
I
H )
3
O
N)
4
&
&OO)
R
1
O
c; transaminarea
&
&OO
)
4
N
R
1
) &
&OO)
R
3
O &
&OO
R
1
O &
&OO
)
4
N
R
3
)
H
H
I
I
H
H
transaminaze
I
d; esteri=icarea
e; acilarea grupei N)
3

=; reducerea grupei &OO) cu "idruri comple>e :BiM)
2
;
g; reac'ia grupei N)
3
cu alde"ide
"; reac'ia de recunoatereLdozare cu nin"idrin
i; reac'ia de dozare cu acidul azotos
F; acti#itate (iologic. acidul ?/amino(utiric :D8M8! deri#at de acid
glutamic; i dopamina :deri#at al tirosinei; / neurotransmi'tori< "istamina /
mediator local al reac'iilor alergice< tiro>ina :deri#at de tirosin; / "ormon
tiroidian< glutationul :Dlu/&Ns/DlN; proteFeaz celula de atacurile o>idati#e!
de ac'iunea to>ic a >eno(ioticelor i a radia'iilor
OO& &)
3
&)
3
&)
3
)
4
N
I
H
D8M8
)O
)O
&)
3
&)
3
N)
3
-opamina
N
N
&)
3
&)
3
N)
4
)
H
)istamina
I
O )O
I
I
I
I
&)
3
&)
)
4
N
&OO
H
I
Tiro>ina
I
Dlutation
Dlu
&Ns
DlN
legatura izopeptidica
&)
&OO
&)
3
&)
3
&
O
N) &) &)
3
*)
& O N) &)
3
&OO
N)
4
H
Stru&tura prote#nelor
1. Structura primar / numarul si =elul aminoacizilor componenti si
inlantuirea lor sec#entiala
O8tomii &E! &! O! N! )! &EP implica'i n legtura peptidic sunt
coplanari< resturile de aminoacizi R sunt dispusi alternati# deasupra si su(
planurile legaturilor peptidice! ntr/un aranFament trans repeta(il%
&
&
N
&
&
N
&
&
N
&
&
O
O
)
)
O )
O
) R
R )
) R
O) N
)
)
) R
A'#no-a&#) N-ter'#nal A'#no-a&#) C-ter'#nal
Le!*tur*
pept#)#&*
O Elucidarea structurii primare a proteinelor
I% Izolarea :separarea; proteinei in stare pur
II% 8naliza calitati#a si cantitati#a :separarea i puri=icarea lanturilor
polipeptidice< ruperea pun'ilor de sul= i acilarea *)! "idroliza
total! identi=icarea aminoacizilor terminali! "idrolize par'iale
pentru determinarea sec#en'ei aminoacizilor;
Determinarea aminoacidului N-terminal
/ 3!2/dinitro=luoro(enzenul :-N+M! reacti#ul lui *anger;
O
3
N
NO
3
+ H
)
3
N &)
R
1
&O O
3
N
NO
3
N) &)
R
1
&O N) &)
R
3
&O
)
3
O
)
H
O
3
N
NO
3
N) &)
R
1
&OO) )
3
N &)
R
3
&O H H amestec de aminoacizi
si oligopeptide
/ =enilizotiocianatul :metoda Pe"r Edman;
N & *
,en#l #(o-t#o&#anat
)
3
N &)
R
&O N) &)
RQ
&O
H
N) & N)
*
&)
R
&O N) &) &O
RQ
O
*
R
N)
&) &
&
N
H )
3
N &)
RQ
&O N) &)
RQQ
&O
,en#l-t#oh#)anto#na
p) 7 G
T+8
/ clorura de 5/)imetilaminona=talinsul=on#l :clorura de dansil; si clorura
de )imetilaminoazo-enzensul=on#l :clorura de da(sil;! metodele respecti#e
=iind =oarte sensi(ile
N
*O
3
&l
&)
4
)
4
&
&lorura )e )ans#l
./#'et#lA'#noNa,talenSul,on#l0
N N
)
4
&
)
4
&
N *O
3
&l
&lorura )e )a-s#l
./#'et#lA'#noA(o%en(enSul,on#l0
Determinarea aminoacidului C-terminal
/ exo-carboxipeptidaze :&OO) li(er;
/ esteri=icarea cu &)
4
O) i reducere cu BiM)
2
! apoi "idroliza totala 79
aminoalcoolul corespunzator H ceilalti aminoacizi li(eri
/ "idrazinoliza 79 aminoacidul &/terminal li(er H aminoacil/"idrazide
Scindri selectie
/ endopeptidaze.
O tripsina :p) R 6; /&OO) ale !"s! #rg
$ pepsina :p) R 3; / N)
3
ale !eu! %he! &rp i &"r etc%
$ chimotripsina! /&OO) ale &"r! %he! &rp< mai lent! ale ,et! 8sn! Beu
/ bromcianul :Mr/&N; /&OO) a 'et
/ N-bromosuccinimida / legaturi peptidice #ecine cu &"r