2014

Page 1 of 12
INSTRUCTIUNE PROPRIE DE SECURITATE SI SANATATE IN MUNCA PENTRU
AGENTI BIOLOGICI IN LABORATOARE
Elaborate n conformitate cu:
prevederile art. 41 alin. (2) din Constituia din 21 noiembrie 1991, republicat;
prevederile art. 13 lit. e) din Legea nr. 319/2006 Legea securitii i sntii n munc;
Hotrrea Guvernului nr. 1425/2006, cu modificrile ulterioare.
Art. 1 - Realizarea efectiv a msurilor dispuse revine att lucrtorilor, ct i persoanelor cu atribuii n organizarea i conducerea
procesului de munc, n baza prevederilor art. 22 i 23 din Legea nr. 319/2006, pentru a nu expune la pericol de accidentare
propria persoan, ali lucrtori sau ali participani la procesul de munc care pot fi afectai de aciunile sau omisiunile
lucrtorului n timpul procesului de munc.
Art. 2 - Informarea lucrtorilor se realizeaz prin procedura de informare care cuprinde: informarea iniial, materialele necesare
de informare din domeniul securitii i sntii n munc i comunicrile fcute de conducerea societii.
Art. 3 - Consultarea lucrtorilor se realizeaz prin intermediul procedurii de consultare stabilite la nivelul societii, conform
creia orice lucrtor, reprezentant al acestuia sau, dup caz, membru n Comitetul de securitate i sntate n munc i poate
aduce contribuia la mbuntirea condiiilor de munc i la creterea gradului de asigurare a securitatii si sanatatii in munca,
prin propuneri concrete formulate n scris, adresate conducerii societii, aplicabile condiiilor specifice de desfurare a
activitii n cadrul societii.
Art. 4 - Agenii biologici sunt clasificati n 4 grupe de risc, n funcie de importana riscului de infecie pe care l prezint:
a) grupa 1 (risc infecios individual sau comunitar sczut sau absent)- ageni biologici care nu sunt susceptibili s provoace o
boal la om; microorganisme cu probabilitate minim de a provoca mbolnvire la om sau animal.
b) grupa 2 (risc individual moderat, risc comunitar sczut) - ageni biologici care pot provoca o boal omului i constituie un
pericol pentru lucrtori; propagarea lor n colectivitate este improbabil; exist, n general, o profilaxie sau un tratament eficace;
Ageni patogeni care pot provoca mbolnvire la om sau animal, dar este puin probabil s reprezinte un pericol sever pentru
personalul de laborator, comunitate, faun sau mediu. Expunerile n laborator pot cauza infecii severe dar pentru care exist
tratament eficace i msuri profilactice, iar riscul de rspndire al infeciei este limitat.
c) grupa 3(risc individual ridicat, risc comunitar sczut) - ageni biologici care pot provoca mbolnviri grave la om i constituie un
pericol serios pentru lucrtori; ei pot prezenta un risc de propagare n colectivitate, dar exist n general o profilaxie sau un
tratament eficace. Ageni patogeni care n mod obinuit provoac mbolnvire sever la om sau animal, dar, de regul, nu se
rspndesc de la un individ infectat la altul. Exist tratament eficace i msuri profilactice.
d) grupa 4 (risc individual i comunitar ridicat)- ageni biologici care pot provoca boli grave omului i constituie un pericol serios
pentru lucrtori; ei pot sa prezinte un risc ridicat de propagare n colectivitate i nu exista n general o profilaxie sau un
tratament eficace. Ageni patogeni care provoac, de regul, mbolnvire sever la om sau animal i care se pot transmite
spontan de la un individ la altul, direct sau indirect. Nu exist, n general, tratament eficace i msuri profilactice.
2014
Page 2 of 12
Art. 5 - Pentru orice activitate susceptibil s prezinte un risc de expunere la ageni biologici, angajatorul trebuie s determine
natura, nivelul i durata de expunere, pentru a se putea evalua orice risc pentru sntatea i securitatea lucrtorilor i pentru a
se putea stabili msurile ce trebuie luate.
Art. 6 - Pentru toate activitile susceptibile de a prezenta un risc de expunere la ageni biologici aparinnd mai multor grupe,
riscurile sunt evaluate pe baza pericolelor reprezentate de ctre toi agenii biologici periculoi prezeni.
Art. 7 - Angajatorul trebuie sa rennoiasc periodic evaluarea riscurilor i, n orice caz, la orice modificare a condiiilor de lucru
care pot s determine expunerea lucrtorilor la ageni biologici, precum i atunci cnd crete numrul bolilor profesionale pe
care le-a nregistrat.
Art. 8 - Evaluarea riscurilor profesionale se efectueaz pe baza tuturor informaiilor existente i, mai ales, pe baza:
a) clasificarii agenilor biologici care constituie sau pot constitui un pericol pentru sntate;
b) recomandrilor emise de inspectorii de munc i/sau de inspectorii autoritilor de sntate public, ce indic necesitatea ca
agentul biologic sa fie controlat n scopul de a proteja sntatea lucrtorilor care sunt sau pot fi expui acestui agent biologic, n
cursul activitii lor;
c) informaiilor asupra bolilor ce pot fi contractate datorit unei activiti profesionale a lucrtorilor;
d) efectelor alergice i toxicogene ce pot s rezulte ca urmare a activitii lucrtorilor;
e) faptului c un lucrator sufer de o boal legat direct de munca sa.
Art. 9 - Unul din cele mai utile instrumente pentru evaluarea riscului biologic este listarea grupurilor de risc pentru agenii
biologici, dar simpla referire la grupurile de risc este insuficient pentru evaluarea riscului.
Pentru realizarea unei evaluri a riscului biologic trebuie luai n considerare urmtorii factori:
Patogenitatea agentului infecios i doza infectant
Consecinele posibile ale expunerii
Calea natural de infectare
Alte ci de transmitere, rezultate n urma manipulrii n laborator (parenteral, aerian, ingerare)
Stabilitatea agentului infecios n mediul extern
Concentraia agentului infecios i volumul de material concentrat ce se manipuleaz
Disponibilitatea unei gazde adecvate/susceptibile (umane sau animale)
Informaii disponibile din studii pe animale, raportri privind infecii dobndite n laborator (profesionale) sau
raportri de cazuri clinice
Intenia de a utiliza anumite tehnici n laborator (ultrasonarea, aerosolizarea, centrifugarea etc.)
Orice manipulare genetic a microorganismului care poate duce la extinderea gamei de gazde susceptibile sau
poate modifica sensibilitatea acestuia la terapiile considerate eficace
Accesul efectiv la msuri profilactice sau terapeutice eficace.
Art. 10 - Pe baza informaiilor obinute prin evaluarea riscului, se stabilete nivelul de siguran biologic necesar desfurrii
activitii planificate, se selecteaz echipamentul corespunztor proteciei personalului i procedurile operaionale standard
(POS) ce vor include aspecte de siguran a muncii, cu scopul desfurrii activitii n modul cel mai sigur posibil.
Reguli pentru laboratoarele de baz
Art. 11 - Fiecare laborator trebuie s aib o list a celor mai importante practici i proceduri de laborator care stau la baza
practicilor microbiologice corecte (good microbiological techniques = GMT) s adopte un manual de siguran sau de operaiuni
care s identifice pericolele cunoscute sau poteniale precum i procedurile i practicile specifice pentru eliminarea sau
reducerea la minimum a acestor pericole. GMT sunt fundamentale pentru sigurana activitilor de laborator. Echipamentul
special de laborator este un element suplimentar, care nu va putea ns niciodat s nlocuiasc aplicarea procedurilor corecte.
Art. 12 - 1. Sigla internaional de avertizare i inscripia Pericol biologic trebuie s fie afiate pe uile ncperilor unde sunt
manipulate microorganisme aparinnd grupului de risc 2 sau mai mare.
Art. 13 - Numai persoanele autorizate vor fi lsate s intre n zonele de lucru ale laboratorului.
Art. 14 - Uile laboratorului trebuie s stea nchise.
Art. 15 - Copiii nu trebuie autorizai sau lsai s intre n zonele de lucru ale laboratorului.
2014
Page 3 of 12
Art. 16 - Accesul n biobaze trebuie s se fac numai pe baza unei autorizaii speciale.
Art. 17 - Nu se admite accesul altor animale n afara celor folosite pentru activitile de laborator
Art. 18 - Protecia individual a personalului:
Salopetele de laborator, halatele sau uniformele trebuie purtate tot timpul ct se lucreaz n laborator.
Mnui corespunztoare de protecie trebuie purtate n timpul tuturor procedurilor care pot implica contactul direct sau
accidental cu snge, cu alte umori sau fluide ale organismului, cu alte materiale potenial infecioase sau cu animale infectate.
Dup utilizare, mnuile se scot aseptic i se spal minile.
Personalul trebuie s se spele pe mini dup manipularea materialelor infecioase i a animalelor infectate i nainte de
prsirea zonei de lucru a laboratorului.
Ochelarii de protecie, ecranele de protecie facial sau alte dispozitive de protecie trebuie purtate ori de cte ori este
necesar protecia ochilor i a feei de stropi, obiecte impactante i surse artificiale de radiaii ultraviolete.
Este interzis purtarea mbrcminii protectoare de laborator n afara laboratorului, de exemplu n cantine, camere de
oficiu, biblioteci, toalete etc.
nclmintea decupat n partea din fa (sandale) este improprie purtrii n laborator.
Consumul de alimente, buturi, machiajul i manipularea lentilelor de contact sunt interzise n zonele de lucru ale
laboratorului.
Depozitarea de alimente sau buturi oriunde n zona de lucru a laboratorului este interzis.
mbrcmintea i nclmintea de protecie ce a fost utilizat n laborator nu trebuie s fie depozitat n aceleai dulapuri
cu mbrcmintea i nclmintea de strad.
Art. 19 - Procedurile
Pipetarea cu gura este strict interzis.
Nici un material nu trebuie dus la gur. Etichetele nu trebuie umectate cu limba nainte de lipire.
Toate procedurile tehnice trebuie efectuate ntr-un mod care s reduc la minimum formarea de aerosoli i picturi.
Folosirea acelor i seringilor hipodermice trebuie limitat. Ele nu trebuie folosite ca substituente ale dispozitivelor de
pipetare sau pentru oricare alt manoper ce nu reprezint injecii parenterale sau aspirarea de fluide de la animalele
de laborator.
Toate stropirile accidentale i expunerile evidente sau posibile cu material infecios trebuie raportate responsabilului
laboratorului. Se va pstra o eviden scris a acestor accidente i incidente.
Se va elabora i aplica o procedur scris pentru curarea-inactivarea substanelor vrsate.
Lichidele contaminate trebuie decontaminate (chimic sau fizic) naintea evacurii lor n reeaua de canalizare. n funcie de
riscul evaluat se poate dezvolta un sistem de tratare a acestor lichide.
Documentele ce urmeaz a fi scoase din laborator trebuie s fie protejate pe toat perioada ct se afl n laborator, pentru a
nu fi contaminate.
Art. 20 - Zonele de lucru ale laboratorului
n laborator trebuie pstrat curenia i ordinea, eliminndu-se toate materialele care nu sunt necesare
pentru munca desfurat n laborator.
Suprafeele de lucru trebuie decontaminate dup fiecare vrsare de materiale potenial periculoase precum i
la sfritul zilei de lucru.
Toate materialele contaminate, probele i culturile, trebuie decontaminate nainte de a fi ndeprtate sau
curate pentru refolosire.
Ambalarea i transportul trebuie s respecte reglementrile naionale i/sau internaionale n vigoare.
Ferestrele ce pot fi deschise trebuie prevzute cu plase/ecrane pentru insecte.
Art. 21 - Caracteristici de proiectare:
Trebuie asigurat un spaiu suficient pentru desfurarea n siguran a muncii de laborator i pentru curenie i ntreinere.
Pereii, tavanele i pavimentele trebuie s fie netede, uor de curat, impermeabile la lichide i rezistente la substanele
chimice i dezinfectantele folosite uzual n laborator.
Pavimentele nu trebuie s fie alunecoase.
Suprafaa meselor de lucru trebuie s fie impermeabil la ap, rezistent la dezinfectante, acizi, baze, solveni organici i la
cldur.
Iluminatul trebuie s fie adecvat pentru desfurarea tuturor activitilor. Reflexiile i strlucirile nedorite trebuie evitate.
Mobilierul de laborator trebuie s fie rezistent. Spaiile deschise ntre i sub mese, hote i echipamente trebuie s fie
accesibile pentru curenie.
Trebuie prevzute spaii de depozitare adecvate pentru materialele de folosin imediat, prevenind astfel aglomerarea
acestora pe mesele de lucru i n spaiile libere dintre acestea.
2014
Page 4 of 12
Trebuie, deasemenea, prevzute spaii suplimentare pentru depozitarea pe termen lung, localizate corespunztor n afara
zonelor de lucru.
Trebuie asigurate spaii i faciliti adecvate pentru manipularea i depozitarea n siguran a solvenilor, materialelor
radioactive, a gazelor comprimate i lichefiate.
Procedurile care genereaz aerosoli se execut n hota de siguran biologic. Uile sunt meninute nchise i marcate cu
semne de pericol adecvate. Deeurile potenial contaminate sunt colectate separat de restul deeurilor.
Spaiile pentru pstrarea mbrcminii i nclmintei de strad i a obiectelor personale trebuie asigurate n afara zonelor
de lucru.
Spaiile pentru mncat, but i odihn trebuie asigurate n afara zonelor de lucru. Chiuvete cu ap curent pentru splarea
minilor trebuie s existe n fiecare ncpere a laboratorului, preferabil lng ua de ieire.
Uile trebuie s aib geamuri sau vizoare, s fie conforme cu normele de protecie contra incendiilor i, de preferat, s se
nchid singure.
Pentru nivelul de biosiguran 2 trebuie ca un autoclav sau alte mijloace de decontaminare s fie accesibile n imediata
apropiere a laboratorului.
Sistemele de securitate trebuie s cuprind protecia mpotriva focului, urgenelor electrice, s prevad duuri de urgen i
faciliti pentru splarea ochilor.
Trebuie s existe zone sau camere de prim ajutor echipate adecvat i accesibile.
La proiectarea de faciliti noi, trebuie luat n considerare asigurarea de sisteme mecanice de ventilaie, care s asigure un
flux de aer direcionat spre interior, fr recirculare. Dac nu exist ventilaie mecanic, ferestrele trebuie s se poat
deschide i trebuie prevzute cu plase mpotriva ptrunderii insectelor.
Trebuie s existe o surs sigur i adecvat de curent electric i un sistem de iluminare pentru situaiile de urgen care s
faciliteze ieirea din laborator. Un generator de rezerv este de dorit pentru susinerea echipamentelor eseniale
(incubatoare, hote de biosiguran, congelatoare etc.) i pentru ventilarea cutilor cu animale.
Trebuie s existe o surs sigur i adecvat de gaz. Buna ntreinere a instalaiei este obligatorie.
Art. 22 - Echipamentele de laborator
mpreun cu procedurile i practicile corecte, utilizarea echipamentelor contribuie la reducerea riscului. n continuare
prezentm principiile de baz legate de echipamentele utilizate n laboratoare.
Echipamentul trebuie:
S fie conceput astfel nct s previn sau s limiteze contactul dintre operator i materialul infecios.
S fie confecionat din materiale impermeabile la lichide, rezistente la coroziune i corespunztoare ca structur.
S fie confecionat astfel nct s nu aib asperiti, margini ascuite i pri mobile neprotejate.
S fie proiectat, construit i instalat pentru a facilita operarea simpl i ntreinerea, curarea, decontaminarea i testarea n
vederea certificrii; ori de cte ori este posibil, se va evita utilizarea sticlriei i a altor materiale casante.
Art. 23 - Echipamente eseniale pentru asigurarea securitii i sntii lucrtorilor
Dispozitive de pipetare, pentru a evita pipetarea cu gura. Sunt disponibile diverse modele.
Hotele de biosiguran, ce trebuie folosite ori de cte ori:
se manipuleaz materiale infecioase; aceste materiale pot fi centrifugate n spaiul deschis al laboratorului
dac se folosesc cupe de centrifug cu dispozitiv de securizare i dac sunt introduse i descrcate ntr-o hot
de biosiguran
exist risc crescut de infecii aerogene
se folosesc proceduri cu potenial ridicat de producere de aerosoli: centrifugarea, mojararea, secionarea,
agitarea sau mixarea viguroas, dezintegrarea sonic, deschiderea containerelor cu material infecios cu
presiune intern diferit de presiunea ambiant, inocularea intranazal a animalelor i recoltarea de esuturi
infectate de la animale i ou etc.
Anse de transfer de unic folosin din plastic. Alternativ, n scopul reducerii producerii de aerosoli, n interiorul hotei de
biosiguran se pot folosi incineratoare electrice pentru anse de transfer.
Tuburi i flacoane cu capace prevzute cu filet.
Autoclave sau alte mijloace folosite pentru decontaminarea materialului infecios.
Pipete Pasteur de unic folosin din plastic, ori de cte ori este posibil, evitnd utilizarea celor din sticl.
Echipamentele precum autoclavele i hotele de biosiguran trebuie validate cu metode adecvate nainte de a fi introduse n
uz. Acestea trebuie recertificate la intervale regulate de timp, n acord cu instruciunile productorului.
Art. 24 - Supravegherea strii de sntate a personalului.
Fiecare lucrtor s fie supravegheat medical corespunztor nainte de expunere profesional i, n continuare, periodic,
fcnd astfel posibil aplicarea direct a msurilor de medicin general i de medicina muncii.
2014
Page 5 of 12
Angajatorul este responsabil de asigurarea unei supravegheri adecvate a strii de sntate a personalului laboratorului.
Obiectivul acestei supravegheri este monitorizarea strii de sntate n relaie cu factorul ocupaional. Activitile ce trebuie
desfurate pentru ndeplinirea acestor obiective sunt:
Imunizarea activ i pasiv ori de cte ori acest lucru este indicat (vezi Anexa 4 din HG 1092/2006).
Facilitarea depistrii precoce a infeciilor dobndite n laborator.
Excluderea indivizilor cu susceptibilitate crescut, ca de exemplu femeile nsrcinate sau persoanele imunodeprimate, din
locurile sau activitile de laborator cu periculozitate crescut.
Asigurarea personalului cu echipamente de protecie i proceduri eficace.
Art. 25 - Informarea i instruirea lucrtorilor
Erorile umane i tehnica deficitar pot compromite i cele mai bune reguli i bariere de siguran menite a proteja
personalul laboratorului. Pe de alt parte, un personal contient de exigenele impuse de regulile de protecie, bine informat
pentru recunoaterea i stpnirea pericolelor din laborator, este cheia prevenirii producerii acestor infecii, a incidentelor i
accidentelor. n acest scop, instruirea continu la locul de munc privind msurile de prevenire i protecie este esenial.
Un program eficace de siguran ncepe cu conducerea laboratorului, care trebuie s se asigure c practicile i procedurile
de protecie sunt integrate n instruirea de baz a salariailor. Instructajul n ceea ce privete msurile de prevenire i
protecie trebuie s fie parte integrant a instruirii noilor lucrtori din laborator.
Instruirea lucrtorilor ar trebui s cuprind ntotdeauna informaii despre metodele sigure n cazul procedurilor cu risc
crescut, cu care ntreg personalul laboratorului se ntlnete n mod curent i care implic :
Riscul de inhalare (ex. producerea de aerosoli) cu ocazia folosirii anselor, nsmnrii plcilor, pipetrii cu gura, etalrii
frotiurilor, deschiderii recipientelor ce conin culturi, recoltrii de probe de snge / ser, centrifugrii etc.
Riscul de ingerare, cu ocazia manipulrii probelor, frotiurilor i culturilor.
Riscul de expunere percutan, prin folosirea seringilor i acelor.
Mucturi i zgrieturi n cazul manipulrii animalelor.
Manipularea sngelui i a altor produse patologice potenial periculoase.
Decontaminarea i eliminarea materialelor infecioase.
Art. 26 - Manipularea deeurilor
Se consider deeuri toate materialele care se arunc.
n laboratoare, n desfurarea activitii cotidiene, decontaminarea deeurilor i eliminarea final a acestora sunt strns
legate. Un numr foarte mic de materiale contaminate necesit ndeprtarea efectiv din laborator sau distrugerea.
Majoritatea sticlriei, instrumentelor i articolelor de mbrcminte sunt refolosite sau reciclate. Principiul general ce
trebuie s funcioneze este c toate materialele infecioase vor fi decontaminate, autoclavate sau incinerate n laborator.
Principalele probleme care se pun, nainte de eliminarea oricriu obiect sau material din laboratoarele ce lucreaz cu
microorganisme potenial infecioase sau esuturi de la animale sunt:
Au fost obiectele sau materialele respective eficient decontaminate sau dezinfectate printr-o procedur autorizat?
Dac nu, au fost ele ambalate ntr-un mod autorizat pentru incinerare imediat la faa locului sau pentru transfer ntr-o alt
locaie cu posibiliti de incinerare?
Aruncarea obiectelor sau materialelor decontaminate implic eventual alte pericole adiionale, biologice sau de alt tip,
pentru cei care ndeplinesc procedurile de eliminare sau care ar putea veni n contact cu obiectele eliminate n afara
perimetrului respectiv?
Art. 27 - Decontaminarea
Autoclavarea cu abur este metoda de elecie pentru toate procesele de decontaminare.
Materialele care urmeaz s fie decontaminate i eliminate vor fi puse n containere adecvate (ex. saci din plastic
autoclavabil, cu coduri de culori care indic destinatia coninutului acestora pentru autoclavarei/sau incinerare). Pot fi luate
n consideraie i metode alternative doar dac acestea ndeprteaz i/sau omoar microorganismele.
Procedurile de manipulare i eliminare a materialelor contaminate i a deeurilor
Trebuie adoptat un sistem de identificare i de separare a materialelor infecioase i a containerelor respective. Vor fi
obligatoriu respectate reglementrile naionale i internaionale n domeniu. Categoriile care se includ sunt urmtoarele:
Deeurile necontaminate (neinfecioase) care pot fi refolosite, reciclate sau eliminate ca deeuri generale sau menajere
Obiectele ascuite (tietoare-neptoare) contaminate (ex. ace hipodermice, bisturie, cuite i cioburi de sticl); acestea
vor fi ntotdeauna colectate n containere rezistente la nepare-tiere, prevzute cu capace i vor fi tratate ca
infecioase.
Materialul contaminat destinat decontaminrii prin autoclavare urmat de splare i refolosire sau reciclare.
Materialul contaminat destinat autoclavrii i eliminrii.
2014
Page 6 of 12
Materialul contaminat destinat incinerrii directe.
Obiectele ascuite
Dup utilizare, acele hipodermice nu trebuie reacoperite, tiate sau detaate din seringile de unic folosin. ntregul
ansamblu trebuie plasat n containerul pentru obiecte ascuite. Seringile de unic folosin, folosite separat sau cu ace,
trebuie plasate n containere i incinerate, cu autoclavare prealabil dac este necesar.
Containerele pentru obiecte ascuite (tietoare-neptoare) trebuie s fie rezistente la nepare-tiere i nu trebuie
umplute la capacitatea maxim. Cnd sunt umplute pe , aceste containere trebuie plasate n containere pentru deeuri
infecioase i incinerate, cu autoclavare prealabil dac practica laboratorului o necesit. Containerele pentru obiecte
tietoare-neptoare nu trebuie aruncate n mediul nconjurtor.
Materiale contaminate (potenial infecioase) destinate autoclavrii i refolosirii
Se interzice curarea prealabil a oricrui material contaminat (potenial infecios) destinat autoclavrii i refolosirii. Orice
curare sau reparaie trebuie fcut doar dup autoclavare sau dezinfecie.
Materiale contaminate (potenial infecioase) destinate eliminrii
n afar de obiectele tietoare-neptoare, care au fost tratate mai sus, toate materialele contaminate (potenial
infecioase) trebuie autoclavate n containere etane, de exemplu saci de plastic autoclavabil, colorai conform codurilor de
culori, nainte de a fi eliminate. Dup autoclavare, materialul poate fi plasat n containere de transfer ctre incinerator. Dac
este posibil, materialele rezultate din activitile de asisten medical nu trebuie eliminate n mediul extern, la rampele de
depozitare a deeurilor, nici dup decontaminare. Dac exist un incinerator disponibil la nivelul laboratorului, autoclavarea
se
poate omite: deeurile contaminate trebuie plasate n containere speciale (de exemplu, saci cu culori corespunztoare unui
cod) i transportate direct la incinerator. Containerele de transfer refolosibile trebuie s nu prezinte scurgeri i s aib
capace etane.
Recipiente de colectare, preferabil incasabile, trebuie plasate la fiecare punct de lucru. Cnd se folosete un dezinfectant,
deeurile materiale trebuie s rmn n contact direct cu acesta (ex. neprotejate de bule de aer) un interval de timp
corespunztor, n conformitate cu instruciunile de folosire a dezinfectantului utilizat. Containerele de colectare i transport
vor fi decontaminate i splate nainte de refolosire.
Incinerarea deeurilor contaminate trebuie s se fac n conformitate cu prevederile autoritilor de sntate public i de
protecie a mediului.
Art. 28 - Echipamente de munc i echipamente individuale de protecie la locul de munc.
Potrivit art. 3 din HG 1146/2006 angajatorul este obligat sa ia msurile necesare pentru ca echipamentul de munc pus la
dispoziia lucrtorilor s corespund lucrului prestat ori s fie adaptat acestui scop i s poat fi utilizat de ctre lucrtori,
fr a pune n pericol securitatea sau sntatea lor.
Art. 29 - La alegerea echipamentelor de munc pentru asigurarea securitii i sntii lucrtorilor, angajatorul este obligat
s acorde o atenie deosebit tuturor condiiilor de munc, caracteristicilor specifice acestora, precum i riscurilor existente,
n special la locurile de munc din cadrul unitii, i/sau riscurilor care sunt susceptibile s apar la utilizarea echipamentelor
de munc.
Deoarece aerosolii reprezint o important surs de infecie, trebuie luate msuri pentru a reduce formarea i rspndirea
acestora. Aerosoli periculoi pot aprea n cursul unor variate operaiuni de laborator, de ex: amestecare, triturare, agitare,
ultrasonare, centrifugare de material infecios.
Tabelul de mai jos conine o list a echipamentelor destinate eliminrii sau reducerii unor pericole i definete succint
caracteristicile lor de siguran.
Echipament Pericole vizate Caracteristici care confer siguran
Hot de securitate
biologic
Aerosoli i stropi Flux minim de aer orientat spre interiorul
hotei
de la nivelul fantei de acces pentru lucru
(vitez
redus de acces frontal al aerului)
Filtrare adecvat a aerului eliminat
Izolator din folie
flexibil cu presiune
negativ
Aerosoli i stropi Nivel maxim de securizare
Ecran de protecie Stropi de substane chimice Ecran ntre operator i aria de lucru
Dispozitive de pipetare Pipetarea cu gura, (ingestia de
patogeni, inhalarea de aerosoli
uor de folosit.
Controlul contaminrii captului de suciune
2014
Page 7 of 12
produi prin aspirarea cu
pipeta, picurarea de
lichid, contaminarea
captului de suciune al
pipetei )
al pipetei, protejnd utilizatorul, dispozitivul
de pipetare i instalaia de vacuum.
Se poate steriliza.
Evit scurgerile din pipet.
Microarztoare
pentru anse
Anse de unic
folosin
Stropi din ansele de transfer Arztorul cu gaz sau electric este introdus ntr-
un tub de sticl sau ceramic, deschis la gur
Ansele de unic folosin nu impun tratament
termic
Recipient impermeabil nchis cu capac
Recipiente sigure
pentru colectarea i
transportul materialelor
infecioase n vederea
sterilizrii
Aerosoli, mprtiere i scurgere Robustee mecanic Autoclavabil
Containere pentru
obiecte
tietoare/neptoare
Rni prin nepare. Autoclavabil.
Robust, rezistent la nepare/tiere
Containere de transport
ntre
laboratoare sau instituii.
Contaminare accidental cu
microorganisme
Robust.
Containere primare i secundare
impermeabile pentru lichide ce conin
materiale absorbante pentru reinerea
lichidelor vrsate.
Autoclave manuale sau
automate
Materiale infecioase
(decontaminare n vederea
eliminrii sau reutilizrii)
Sterilizare eficace prin cldur
Recipiente cu capac
nurubat
Aerosoli i scurgeri Securizare eficace
Dispozitiv de protecie a
instalaiei de vid
Contaminarea cu aerosoli sau
lichide a
sistemului de vacuum al
laboratorului
Filtre tip cartu pentru a mpiedica trecerea de
aerosoli (mrimea particulelor cu dimensiunea de
0,45 m).
Recipiente cu dezinfectante adecvate, utilizate
drept capcane de vid .
Dispozitiv de cauciuc (supap) pentru a nchide
automat vacuumul cnd recipientul este plin.
ntreg dispozitivul este Autoclavabil
Art. 30 - Hotele de siguran biologic.
Hotele de siguran biologic (HSB) sunt destinate a proteja operatorul, mediul din laborator i materialele de lucru fa de
expunerea la aerosoli i picturi care se pot produce n cursul manipulrii materialelor coninnd ageni infecioi, cum ar fi
culturile primare, tulpinile de colecie i probele de diagnostic. Aerosolii sunt produi de orice activitate care
determin apariia de miniparticule sau stropi de material lichid sau semilichid, cum ar fi agitarea, turnarea,
amestecarea sau picurarea unui lichid pe o suprafa sau ntr-un alt lichid.
Activitile de laborator precum nsmnarea plcilor de agar prin efectuarea de striuri paralele, inocularea flacoanelor de
culturi de celule cu o pipet, folosirea unei pipete monosau multicanal pentru a distribui suspensii de ageni infecioi n
plci de microcultur, efectuarea de diluii n tuburi sau plci, omogenizarea i agitarea prin producerea de vrtej a
materialelor infecioase, centrifugarea lichidelor contaminate sau manipularea animalelor, pot genera aerosoli infecioi.
Particulele de aerosoli cu diametrul sub 5 m i picturile mici, cu diametrul de 5-100 m nu sunt vizibile cu ochiul liber.
Tehnicianul de laborator nu este, n general, avertizat asupra formrii acestor particulei asupra faptului c ele pot fi
inhalate sau pot contamina suprafee i materiale. HSB, folosite corect, sunt foarte eficiente n reducerea frecvenei
infeciilor dobndite n laborator, evit contaminarea ncruciat a culturilor prin expunere la aerosoli i protejeaz mediul.
Art. 31 - Dispozitive de pipetare
Dispozitivul de pipetare trebuie folosit ntotdeauna atunci cnd se pipeteaz. Este strict interzis pipetarea cu gura.
Importana dispozitivelor de pipetare nu trebuie subapreciat. Cele mai frecvente pericole asociate cu pipetarea sunt
rezultatul aspirrii cu gura. Aspirarea i ingestia de materiale sunt cunoscute a fi cauza a numeroase infecii de laborator.
2014
Page 8 of 12
Germeni patogeni mai pot fi transferai i prin degete contaminate puse pe captul de suciune al pipetei.
Un risc mai puin cunoscut este inhalarea de aerosoli rezultai prin aspirare. Un dop de vat nu constituie un filtru microbian
eficace la presiune negativ sau pozitiv, iar anumite particule pot trece prin el. Un dop de vat prea dens poate determina
o pipetare violent, urmat de aspirarea dopului, a unor aerosoli i chiar a lichidului. Ingestia de patogeni este evitat prin
folosirea dispozitivelor de pipetare. Aerosoli se mai pot forma i prin picurarea unui lichid din pipet pe suprafaa de lucru,
prin aspirare i barbotare sau cnd se sufl ultima pictur din pipet. Inhalarea aerosolilor a cror producere nu poate fi
evitat n cursul operaiunilor de pipetare poate fi ns prevenit prin lucrul ntr-o HSB.
Dispozitivele pentru pipetare trebuie alese cu grij. Tipul utilizat nu trebuie s genereze riscuri suplimentare i trebuie s fie
uor de sterilizat i curat. Conuri de prelevare prevzute cu filtru trebuie folosite ori de cte ori se manipuleaz
microorganisme I culturi celulare.
Pipetele cu capetele de suciune ciobite sau rupte nu trebuie folosite deoarece deterioreaz capacul dispozitivelor de
pipetare i prin aceasta genereaz pericole.
Art. 32 - Omogenizatoare, agitatoare, mixere i aparate de ultrasonare
Se vor folosi doar cele special concepute pentru uzul n laboratoare, care prin construcie reduc sau evit eliberarea de
aerosoli.
Omogenizatoarele nchise de tip stomacher disponibile n prezent pentru prelucrarea de volume mici sau mari, pot genera
i ele aerosoli.
Omogenizatoarele folosite pentru microorganisme din Grupul de Risc 3 vor fi ncrcate i deschise numai n HSB. Aparatele
de ultrasonare pot genera, de asemenea, aerosoli. Ele trebuie manipulate n HSB sau acoperite/ecranate n timpul folosirii.
Capacele i exteriorul aparatelor de ultrasonare trebuie decontaminate dup folosire.
Art. 33 - Anse de unic folosin
Avantajul anselor de unic folosin este c nu trebuie sterilizate i pot fi folosite n HSB unde becurile Bunsen i
microarztoarele perturb fluxul de aer.
Dup folosire, ansele trebuie plasate n dezinfectant i evacuate ca orice material contaminat
Art. 34 - Microarztoare
Microarztoarele cu gaz sau electrice sunt prevzute cu ecrane de sticl borosilicat sau ceramice, ceea ce reduce formarea
stropilor i dispersia materialului infecios n momentul sterilizrii anselor. Microarztoarele modific totui circuitul aerului
i de aceea trebuie plasate n HSB ct mai n spate.
Art. 35 - mbrcminte i echipament de protecie individual
mbrcmintea i echipamentul de protecie individual constituie o barier care reduce riscul de expunere la aerosoli,
stropiri i inoculri accidentale i vor fi alese n funcie de specificul activitii desfurate. mbrcmintea de protecie
trebuie purtat ori de cte ori se lucreaz n laborator. La prsirea laboratorului, mbrcmintea de protecie se
ndeprteaz i se spal minile.
mbrcminte de laborator, halate, oruri
Halatele de laborator ar trebui sse ncheie pn sus. Modelele de halate cu mneci lungi,nchise la spate i salopetele
confer o protecie mai bun dect halatele i bluzele obinuite i sunt de preferat n laboratoarele de microbiologie sau
pentru lucrul la HSB. orurile purtate peste halate ofer o protecie suplimentar fa de stropirea cu substane chimice sau
materiale biologice, cum ar fi snge sau culturi n mediu lichid. Trebuie prevzut o spltorie
pentru echipamentul de lucru, situat n laborator sau n vecintatea acestuia.
Ochelari de protecie, ochelari de lucru i ecrane protectoare pentru fa
Alegerea echipamentului de protejare a ochilor sau a feei depinde de activitatea desfurat.
Ochelarii de lucru cu sau fr dioptrii vor fi confecionai cu rame speciale n care lentilele se monteaz numai dinspre
partea anterioar; lentilele sunt confecionate din material incasabil fiind curbate sau cu aprtori laterale. Ochelarii de
protecie ar trebui purtai peste ochelarii de vedere sau peste lentilele de contact, care nu confer protecie mpotriva
pericolelor biologice sau chimice. Ecranele pentru fa (vizoare) sunt confecionate din material plastic incasabil, protejeaz
ntreaga fa i se fixeaz pe cap cu o band sau bonet.
Dispozitive de protecie respiratorie
Protecia respiratorie este necesar cnd se execut proceduri cu mare periculozitate (ex. curarea unei deversri de
material infecios).
Alegerea tipului de dispozitiv depinde de tipul de pericol. Exist dispozitive la care se pot monta diferite tipuri de filtre :
pentru protecie mpotriva diferitelor gaze, vapori, particule sau microorganisme.
Este absolut necesar ca filtrul s fie montat la dispozitivul de protecie respiratorie potrivit.
Pentru a obine o protecie maxim, dispozitivul ar trebui adaptat pentru faa fiecrei persoane i testat pentru eficacitate.
Aparatele de asisten respiratorie cu containere proprii, cu butelie de aer, ofer protecie total. Mtile de tip chirurgical
2014
Page 9 of 12
sunt utile numai pentru protecia pacientului, dar nu ofer protecie operatorului. Pentru protecia mpotriva agenilor
biologici au fost concepute i dispozitive de unic folosin (ISO 13.340.30).
Dispozitivele de protecie respiratorie nu trebuie purtate n afara spaiului laboratorului.
Mnui
Minile pot fi contaminate n timpul lucrului n laborator. De asemenea pot fi tiate de obiecte ascuite. Pentru munca
obinuit de laborator precum i pentru manipularea de agenI infecioi, snge i fluide biologice, se folosesc mnui
chirurgicale de unic folosin, avizate pentru uz microbiologic, confecionate din latex, vinil sau nitril. Pot fi folosite i
mnui reutilizabile, dar trebuie acordat atenie splrii, scoaterii, currii i dezinfeciei lor corecte.
Mnuile se scot i minile se spal bine dup manipularea de material infecios, dup lucrul la o HSB sau nainte de
prsirea laboratorului. Mnuile de unic folosin utilizate se ndeprteaz odat cu deeurile infecioase.
Au fost semnalate reacii alergice de tip dermatit i de hipersensibilitate imediat la personalul din laborator i la ali
lucrtori care au purtat mnui din latex, mai ales din cele cu pudr. De aceea ar trebui s fie disponibile i alte tipuri de
mnui dect cele din latex cu pudr.
Mnuile din plas de oel inoxidabil ar trebui folosite cnd exist o expunere potenial la instrumente tioase, ex.
examinri postmortem. Astfel de mnui protejeaz mpotriva tierii, dar nu i a neprii.
Mnuile nu trebuie purtate n afara spaiului laboratorului.
Tehnici de laborator
Art. 36 - Eroarea uman, tehnicile defectuoase de laborator i folosirea incorect a echipamentelor sunt cauzele majoritii
accidentelor de laborator i infeciilor aprute la locul de munc. Acest capitol ofer cteva metode care sunt indicate
pentru a evita sau minimaliza riscurile biologice.
Art. 37 - Manipularea n siguran a probelor n laborator
Recoltarea, transportul i manipularea necorespunztoare a probelor n laborator prezint risc de infecie pentru personalul
implicat.
Containerele pentru probe
Containerele pentru probe pot fi din sticl sau preferabil din plastic. Ele trebuie s fie rezistente i nu trebuie s permit
scurgerea materialului din ele cnd capacul sau dopul este corect aplicat. Nimic din materialul recoltat nu trebuie s rmn
n afara containerului.
Containerele trebuie corect etichetate pentru o identificare uoar. Documentele de nsoire nu trebuie nfurate n jurul
containerului, ci plasate separat, preferabil ntr-un nveli impermeabil.
Transportul probelor n laborator
Pentru evitarea scurgerilor accidentale sau a vrsrii probelor, trebuie utilizate containere secundare, cum sunt cutiile cu
stative, astfel nct recipientele cu probe s rmn n picioare atunci cnd containerele sunt manipulate corect.
Containerele secundare pot fi din metal sau plastic, trebuie s fie autoclavabile sau s fie rezistente la aciunea
dezinfectanilor chimici, iar capacul ar trebui s fie prevzut cu o garnitur. Ele trebuie decontaminate regulat.
Primirea probelor
Laboratorul care primete un mare numr de probe trebuie s aib o ncpere separat sau un spaiu special pentru acest
scop.
Deschiderea pachetelor
Personalul care primete i despacheteaz probele trebuie s fie contient de potenalul pericol asupra strii de sntate i
trebuie instruit s adopte precauiile standard n special cnd se confrunt cu spargerea sau vrsarea containerelor.
Containerele primare cu probe ar trebui deschise ntr-o HSB.
Trebuie s existe dezinfectante la ndemna.
Art. 38 - Utilizarea pipetelor i a dispozitivelor de pipetare
Dispozitivul de pipetare trebuie utilizat ntotdeauna. Pipetarea cu gura este interzis.
Toate pipetele trebuie s aib filtru de vat pentru a reduce contaminarea dispozitivului de pipetare.
Nu trebuie suflat niciodat ntr-un lichid care conine ageni infecioi.
Materialul infecios nu trebuie niciodat amestecat prin aspirare i expulzare alternant, prin pipet
Lichidele nu trebuie niciodat expulzate forat din pipete.
Pipetele gradate neterminal sunt preferabile altor tipuri de pipete deoarece nu necesit expulzarea ultimei picturi.
Pipetele contaminate vor fi imersate complet ntr-un dezinfectant adecvat, aflat ntr-un container incasabil.
Ele trebuie lsate n dezinfectant atta timp ct este necesar nainte de a fi scoase din laborator.
Containerul pentru pipete folosite trebuie plasat n interiorul HSB, nu n afara ei.
Seringile cu ace hipodermice nu trebuie utilizate pentru pipetare.
Trebuie utilizate dispozitive speciale pentru deschiderea flacoanelor prevzute cu capsule cu septuri de cauciuc care s
permit apoi utilizarea pipetelor, evitndu-se utilizarea n acest scop a acelor hipodermice i a seringilor.
2014
Page 10 of 12
Pentru a evita dispersia picturilor de material infecios din pipet, pe suprafaa de lucru va fi aezat un material absorbant ;
dup utilizare acesta va fi evacuat ca material infecios.
Art. 39 - Evitarea dispersiei materialului infecios
Pentru evitarea pierderii premature a ncrcturii sale, inelul ansei bacteriologice trebuie s aib un diametru de 2-3 mm i
trebuie s fie complet nchis. Firul ansei nu trebuie s fie mai lung de 6 cm pentru a reduce vibraia.
Riscul stropirii cu material infecios cu ocazia sterilizrii ansei la flacra becului Bunsen poate fi evitat prin utilizarea pentru
sterilizare a unui microarztor electric. Sunt de preferat ansele de unic folosin, care nu au nevoie de sterilizare.
Trebuie luate msuri de precauie atunci cnd se usuc probele de sput pentru a evita formarea de aerosoli.
Probele i culturile a cror utilizare s-a ncheiat i care trebuie autoclavate i / sau evacuate, trebuie plasate n containere
impermeabile, ex. saci speciali pentru deeuri de laborator. Partea de sus a sacilor trebuie nchis etan (ex. cu band
adeziv martor de autoclavare) nainte de plasarea lor n containerele pentru deeuri infecioase.
Locul de munc trebuie decontaminat cu dezinfectante corespunztoare la sfritul fiecrei etape i zile de lucru.
Art. 40 - Utilizarea Hotelor de Siguran Biologic
Modul de utilizare i limitele de siguran ale HSB trebuie aduse la cunotina tuturor utilizatorilor poteniali pe baza
standardelor naionale i a literaturii de specialitate. Protocoale scrise sau ghiduri de operare/de siguran trebuie puse la
dispoziia personalului. Trebuie s fie clar, n mod particular, c HSB nu protejeaz pe cel ce lucreaz n caz de spargere,
vrsare sau tehnici greite de manipulare.
HSB trebuie utilizat numai dac funcioneaz corect.
Panoul frontal transparent de sticl nu trebuie deschis n timpul lucrului.
Aparatele i volumele de materiale utilizate n HSB trebuie s fie reduse la minimum.
Circulaia aerului n partea din spate a incintei HSB nu trebuie blocat.
Becurile Bunsen nu trebuie utilizate n hot. Cldura produs perturb fluxul de aer i poate avaria filtrele.
Microarztoarele electrice sunt permise, dar ansele de unic ntrebuinare utilizare sunt de preferat.
ntreaga activitate din HSB trebuie s se desfoare n centrul sau n partea posterioar a ariei de lucru, bine vizibil prin
panoul frontal de sticl.
Traficul n spatele operatorului trebuie s fie minim.
Operatorul nu trebuie s perturbe fluxul de aer prin micri repetate de du-te vino ale braelor.
Grilele frontale de admisie a aerului nu trebuie blocate cu foi, caiete, pipete sau alte materiale deoarece aceste ntreruperi
ale fluxului de aer pot determina contaminarea materialului i expunerea operatorului.
Suprafaa HSB trebuie tears cu dezinfectante adecvate dup fiecare etap de lucru i la sfritul programului de lucru.
Ventilarea HSB trebuie pornit cu minimum 5 minute nainte de nceperea lucrului i oprit dup minimum acelai interval
de la terminarea lucrului n HSB.
Documentele de lucru nu trebuie puse niciodat n interiorul HSB
Art. 41 - Evitarea ingestiei de material infecios i a contactului cu pielea i ochii
Particulele mari i picturile cu diametrul mai mare de 5 m, aprute n timpul manipulrii materialului microbiologic,
trebuie ndeprtate rapid de pe suprafaa de lucru i de pe minile operatorului. Trebuie purtate mnui de unic folosin.
Lucrtorii din laborator trebuie s evite atingerea gurii, ochilor i a feei.
Este interzisdepozitarea i consumul de alimente i butur n laborator.
Este interzis introducerea n gur a oricror obiecte (creioane, pixuri, gum de mestecat)
Este interzis aplicarea cosmeticelor n laborator;
Faa, ochii i gura trebuie protejate cu un ecran sau prin alte modaliti, n timpul oricrei operaii care se poate solda cu
mprocarea de material infecios.
Art. 42 - Evitarea injectrii de material infecios
Inocularea accidental ca urmare a rnilor provocate de sticla spart sau ciobit, poate fi evitat prin creterea ateniei n
timpul procedurilor de lucru. Obiectele din sticl ar trebui nlocuite cu cele din material plastic, ori de cte ori este posibil.
Injectarea se poate produce accidental prin nepare cu ace de sering, pipete Pasteur din sticl i cioburi de sticl.
Accidentele prin nepare cu acul pot fi reduse prin:
reducerea utilizrii seringilor i acelor (exist dispozitive simple pentru deschiderea flacoanelor nchise cu capsul i dop de
cauciuc, astfel nct pot fi folosite pipete n locul seringilor cu ac) ;
utilizarea unor dispozitive de siguran mpotriva neprii atunci cnd seringile i acele sunt absolut necesare.
Acele nu trebuie niciodat reacoperite cu capacul de protecie. Ele nu se desprind de sering ci se arunc mpreuncu
seringa ntr-un container special, rezistent la nepare, prevzut cu capac.
Pipetele Pasteur de plastic ar trebui s nlocuiasc pipetele de sticl.
Art. 43 - Separarea serului
Aceast operaiune trebuie efectuat numai de personal bine instruit / calificat.
2014
Page 11 of 12
Trebuie folosite mnui i trebuie protejai ochii i mucoasele.
Aerosolii i stropirile pot fi evitate sau reduse la minim numai printr-o bun tehnic de laborator.
Sngele i serul trebuie pipetate cu atenie. Este interzis pipetarea cu gura.
Dup utilizare, pipetele trebuie imersate complet n dezinfectantul corespunztor i meninute ct este necesar, nainte de
evacuare sau splare i sterilizare pentru reutilizare.
Tuburile (vacutainerele) care au coninut probele utilizate, coninnd cheaguri de snge, etc trebuie introduse (cu dopul pus)
ntr-un container impermeabil n vederea autoclavrii i/sau incinerrii.
Trebuie s existe la ndemn dezinfectante adecvate pentru curarea stropilor i lichidelor vrsate
Art. 44 - Utilizarea centrifugii
Performanele mecanice bune sunt o condiie primordial pentru utilizarea centrifugilor n condiii de siguran
microbiologic.
Centrifuga trebuie utilizat cu respectarea instruciunilor productorului.
Centrifuga trebuie plasat astfel nct lucrtorii s poat vedea n interiorul cuvei acesteia pentru a putea fixa corect
suporturile pentru cupe i cupele cu probe.
Tuburile de centrifug i containerele cu probe care urmeaz a fi centrifugate trebuie s fie confecionate din sticl groas
sau preferabil din plastic i trebuie verificate pentru absena defectelor nainte de utilizare.
Cupele de centrifug i containerele cu probe trebuie bine astupate/acoperite (de preferat cu capace cu filet).
Cupele trebuie ncrcate, echilibrate, nchise i deschise ntr-o HSB.
Suporii pentru cupele de centrifug trebuie grupai cte doi, dup greutate i echilibrai corect cu cupele n poziie.
Trebuie respectat (conform instruciunilor din manualul de utilizare) spaiul dintre nivelul lichidului centrifugat i gura cupei.
Apa distilat sau alcoolul (propanol 70%) pot fi utilizate pentru echilibrarea cupelor goale.
Soluiile saline (ser fiziologic) sau de hipoclorit nu pot fi utilizate deoarece sunt corozive.
Numai tuburile de centrifug sau supori pentru cupe cu nchidere etan (cupe de siguran) trebuie utilizate cnd se
lucreaz cu microorganisme din grupele de risc 3 i 4.
La folosirea rotoarelor de centrifug angulare trebuie avut grij ca tuburile s nu fie suprancrcate pentru a evita scurgerile.
Cuva centrifugii trebuie controlat zilnic, pentru a verifica eventuala apariie de urme de culoare sau murdrie la nivelul
corespunznd rotorului. n caz de murdrie evident, trebuie reevaluate protocoalele de centrifugare.
Rotorul centrifugii i suporii pentru cupe trebuie examinate zilnic pentru a depista eventualele corodri sau fisuri.
Rotorul, suporturile pentru cupe i cuva centrifugii trebuie decontaminate dup fiecare utilizare.
Dup utilizarea centrifugii, suporii pentru cupe trebuie pstrai (cu deschiderea n jos) pentru scurgerea lichidului de
echilibrare.
n timpul funcionrii unei centrifugi pot fi ejectai din aceasta aerosoli infecioi. Aceste particule circul cu vitez prea mare
pentru a putea fi reinute de fluxul de aer al HSB dac centrifuga este plasat ntr-o hot tradiional cu deschidere frontal
de Clasa I sau de Clasa II. Izolarea centrifugilor n HSB de Clasa III previne dispersarea n afara hotei a aerosolilor produi.
Totui, o tehnic corect de centrifugare i folosirea cupelor sau suporilor cu capace etane asigur o protecie adecvat
mpotriva aerosolilor i particulelor infecioase dispersate.
Art. 45 - Utilizarea omogenizatoarelor, agitatoarelor, mixerelor/blenderelor i aparatelor de ultrasonare
Omogenizatoarele obinuite (mixere de buctrie) nu pot fi utilizate n laborator deoarece pot genera scurgeri i aerosoli.
Blenderele i dispozitivele de tiere special concepute pentru laborator sunt mai sigure.
Cupele si capacele sau sticlele trebuie pstrate n bune condiii, fr defecte. Capacele trebuie s aib garnitura bun i s
poat fi bine nfiletate.
Presiunea n vas crete n timpul operaiilor de omogenizare, amestecare i ultrasonare.
Aerosolii coninnd material infecios se pot strecura ntre capac i vas. Vasele din plastic, n special cele din
politetrafluoroetilen (PTFE), sunt recomandate deoarece sticla se poate sparge, elibernd material infecios i poate rni
operatorul.
n timpul funcionrii, omogenizatoarele, agitatoarele i aparatele de ultrasonare trebuie acoperite cu un ecran/clopot
rezistent, din plastic transparent, ce se dezinfecteaz dup utilizare. Atunci cnd este posibil, aceste aparate trebuie utilizate
sub ecranele lor de plastic, n HSB.
La sfritul operaiilor, containerele trebuie deschise ntr-o HSB.
Cei ce lucreaz cu aparate de ultrasonare vor utiliza cti de protecie.
Art. 46 - Utilizarea mojarelor i a omogenizatoarelor de esuturi
Dac se utilizeaz mojare/omogenizatoare din porelan/sticl, mna cu care se in trebuie protejat cu mnui i un tampon
de vat sau orice alt material absorbant. Mojarele din plastic (PTFE) sunt mai sigure.
Mojararea i deschiderea omogenizatoarelor trebuie efectuat n HSB.
Art. 47 - Utilizarea i ntreinerea frigiderelor i congelatoarelor
2014
Page 12 of 12
Frigiderele, congelatoarele i lzile cu ghea carbonic trebuie dezgheate i curate periodic, iar fiolele, eprubetele etc.
care s-au spart n timpul stocrii trebuie ndeprtate. n timpul currii se vor folosi mti de protecie i mnui groase de
cauciuc. Dup curare, suprafeele interioare trebuie dezinfectate.
Toate containerele pstrate n frigider trebuie inscripionate clar cu denumirea tiinific a materialului coninut, data
stocrii i numele celui care a fcut stocarea. Materialele nvechite i neinscripionate vor fi autoclavate i ndeprtate.
Trebuie inut un inventar al tuturor materialelor pstrate n congelator.
Soluiile inflamabile nu trebuie stocate n frigider, dac acesta nu este rezistent la explozie. Notie de avertizare n acest sens
trebuie afiate pe ua frigiderului
Art. 48 - Deschiderea fiolelor coninnd material infecios liofilizat
Fiolele care conin material infecios liofilizat trebuie deschise cu precauie deoarece coninutul poate s fie la o presiune
sczut i deschiderea poate provoca o ptrundere brusc de aer n interiorul fiolei, cu dispersia unei pri din coninut n
atmosfera nconjurtoare. Fiolele trebuie deschise ntotdeauna ntr-o HSB.
Sunt recomandate urmtoarele proceduri pentru deschiderea fiolelor:
nti se decontamineaz suprafaa exterioar a fiolei.
Se pilete gtul fiolei la nivelul mijlocului dopului de bumbac sau celuloz dac fiola e prevzut cu un astfel de dop.
Fiola se ine n vat mbibat cu alcool pentru a proteja mna de rnire, n momentul deschiderii fiolei.
Vrful fiolei (cu eventualul dop) se ndeprteaz cu atenie i se consider a fi material contaminat.
Dac dopul rmne n interior se ndeprteaz cu o pens steril.
Se adaug lichidul de reconstituire ncet pentru a mpiedica formarea spumei n fiol.
Art. 49 - Colectarea, etichetarea i transportul probelor
Precauiile universale trebuie respectate ntotdeauna: se va lucra de fiecare dat cu mnui de protecie.
Sngele trebuie recoltat de la pacieni i animale de ctre personal instruit.
Pentru flebotomie, acele clasice i sistemele cu sering trebuie nlocuite cu dispozitive de unic folosin cu vid, care permit
recoltarea direct a sngelui n recipiente nchise de transport sau de cultur i care fac imposibil reutilizarea acului.
Tuburile trebuie plasate n containere speciale pentru transportul ctre laborator i n cadrul laboratorului. Formularele de
solicitare a prestaiilor de laborator trebuie plasate separat n containerul de transport (n plicuri sau pungi impermeabile).
Personalul care face recepia probelor NU trebuie s deschid aceste plicuri
Art. 50 - Deschiderea tuburilor cu probe i repartizarea coninutului
Tuburile cu probe trebuie deschise ntr-o HSB .
Este obligatoriu s se foloseasc mnui. De asemenea, este recomandat protecia ochilor i a mucoaselor (ochelari de
protecie sau ecrane de protejare a feii).
mbrcmintea de protecie trebuie completat cu un or de plastic.
Dopul trebuie apucat printr-o bucat de hrtie sau tifon pentru a preveni mprocarea (stropirea).
Art. 51 - Sticlria i obiectele tietoare/neptoare (acele, seringile, acele hipodermice, pipetele Pasteur)
Ori de cte ori este posibil, plasticul trebuie s nlocuiasc sticla. Vor fi folosite numai obiectele din sticl special de
laborator (borosilicat) i orice articol ciobit sau crpat trebuie nlturat.
Nu vor fi utilizate pentru pipetare acele de sering
Art. 52 - Lamele i frotiurile pentru microscopie
Fixarea i colorarea frotiurilor de snge, sput, materii fecale pentru microscopie nu omoar obligatoriu toate organismele
sau virusurile de pe frotiu. Aceste obiecte trebuie manipulate cu pensa, depozitate corespunztor i decontaminate i/sau
autoclavate naintea evacurii.
Art. 53 - Echipamentul automatizat (aparate de ultrasonare, mixere, vortex-uri)
Echipamentul trebuie s fie de tip nchis, pentru a preveni dispersia picturilor mici i a aerosolilor.
Reziduurile trebuie colectate n vase nchise n vederea autoclavrii i/sau evacurii.
Echipamentul trebuie dezinfectat dup fiecare utilizare, urmnd instruciunile productorului.
Art. 54 - esuturile
Formolul trebuie folosit ca fixator.
Secionarea probelor congelate trebuie evitat. Dac este necesar, criostatul trebuie s fie ecranat, iar operatorul s poarte
un ecran de protecie facial. Pentru decontaminare, temperatura instrumentului trebuie s fie ridicat la cel puin 20
Celsius.