Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Bacterio Fag Ul 09
Bacterio Fag Ul 09
Bacteriofagul. Caractere
morfobiologice. Utilizarea
practic a bacteriofagilor
Structura bacteriofagului
Structura fagilor corespunde regulilor
generale ce se refer la structura virusurilor.
1. Acid nucleic (ADN sau ARN, mai frecvent
dublucatenar, linear sau circular).
2. Inveli proteic numit capsid, cu rol de
protecie a materialului genetic. Prin
receptorii de la suprafa contribuie la
infecia gazdei.
3. Unii fagi pot conine i enzime (ex.: lizozim,
endolizina).
(fag vegetativ)
vegetativ)
2/15/2010
2/15/2010
2/15/2010
2/15/2010
2/15/2010
2/15/2010
INDICAREA BACTERIOFAGILOR
1. Metoda OTTO. Pe placa de geloz din cutia
Petri se nsmneaz n gazon suspensia de
bacterii omologe fagului. n continuare se
aplic o pictur de filtrat care conine fag
(cutia poate fi nclinat ca pictura s se
preling). Cutia se incubeaz la 37 C timp de
24 ore.
Aprecierea: dac n filtrat se aflau fagi omologi
culturii bacteriene, n locul aplicrii filtratului
se observ o zon de liz (colonie negativ de
fag).
2. Metoda FURT
Filtratul ce conine fagi se amestec cu geloz
topit i se toarn n cutia Petri. Suprafaa
cutiei se mparte n 4 sectoare. n fiecare
sector se nsmneaz n striuri culturi
cunoscute de diferite bacterii. Incubare la
37 C 24 ore.
Aprecierea: lipsa creterii bacteriilor ntr-un
sector indic prezena fagului omolog.
3. Metoda FISHER
Similar cu metoda Furt, doar c suprafaa cutiei
se mparte n 10 cadrane, astfel pot fi
nsmnate 10 culturi bacteriene i pot fi
indicai concomitent mai muli fagi.
TITRAREA BACTERIOFAGILOR
Este utilizat pentru determinarea numrului de
fagi viruleni n prelevat sau cultur.
I.
II.
2/15/2010
Genetica bacterian.
Variabilitatea genetic la bacterii
Materialul genetic al celulei bacteriene:
1. Cromosomul
2. Plasmidele
Modificarea patrimoniului genetic al bacteriilor
are importan major n bacteriologia
medical, deoarece ea poate cauza
modificri n potenialul patogen al
bacteriilor sau sensibilitatea lor la
antibiotice.
2/15/2010
II. RECOMBINAREA
1.
Recombinarea generalizat (schimb de ADN ntre 2 secvene
corespunztoare)
2.
Recombinarea specific (integrarea sau excizia unei secvene
de ADN, ex: plasmid, bacteriofag)
3.
Transpoziia
Elementele transpozabile reprezint secvene de ADN cu lungime
variabil, flancate de secvene repetate inversate.
mperecherea acestor secvene permite excizia lor i
renserarea n alt loc al cromosomului sau plasmidei. Unele
elemente, numite transpozoni, conin gene suplimentare
(frecvent gene de rezisten la AB)
Transpoziia duce la rearanjamente genomice. Unii transpozoni,
numii conjugativi, au capacitatea de a trece de la o bacterie
la alta.
Importana practic: numeroase gene de rezisten la AB sunt
situate pe transpozoni, ce perimite rspndirea lor.
Transpozonii pot trece de la cromosom la plasmid i ulterior
la alte bacterii prin conjugare. Transpozonii conjugativi pot
trece direct la alt bacterie
2/15/2010
B. Transducia
Transferul de material genetic se realizeaz prin
intermediul bacteriofagilor moderai. n momentul
exciziei profagului din cromosomul bacterian el
devine virulent, multiplicndu-se i liznd bacteria
gazd. n cursul acestui proces fragmente de ADN
bacterian pot fi ntroduse din eroare n particulele
virale, care la rndul lor se pot integra prin
recombinare n cromosomul altei bacterii acest
proces reprezint transducia.
Transducia poate fi specializat i generalizat
C. Conjugarea
Mecanismul cel mai frecvent n natur. Este un transfer
de ADN (plasmide conjugative) de la o bacterie donor
ctre o bacterie receptor. Bacteria donor exprim pe
suprafaa sa structuri ce permit contactul dintre celule
(pili F). n timpul conjugrii plasmida se replic i o
copie trece prin intermediului pilului F n bacteria
receptor. Transferul se efectueaz ntre bacteriile de
aceeai specie, dar i ntre specii diferite. Multiple gene
de rezisten la AB sunt localizate n plasmide i prin
conjugare se asigur caracterul epidemic al rezistenei
la AB.
Plasmida conjugativ poate asigura transferul unei
plasmide neconjugative sau al unor gene cromosomale
(prin integrarea plasmidei n cromosom)
10