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13 Optica Curs Biochimie
13 Optica Curs Biochimie
Metode spectrometrice
de analiza
Radiaia electromagnetic
hc
E h
h c
E energia (J)
h constanta lui Planck (6,625 x 10-34J s
frecvena (Hz)
lungimea de und (m)
c viteza luminii
numr de unde (cm1).
Interval de
lungime de
und ()
Interval de
frecven, (Hz)
< 0,05
> 6,01019
0,05100
3,010166,01019
Ultraviolet
ndeprtat
(de vacuum)
10180 nm
1,710153,01016
Ultraviolet
apropiat
180360 nm
8,610141,71015
Vizibil
360780 nm
3,910148,61014
Infrarou apropiat
0,782,5 m
1,210143,91014
2,550 m
6,010121,21014
501000 m
3,010116,01012
Microunde
1300 mm
1,01093,01011
Rotaia moleculelor.
Spin electronic n cmp magnetic
Unde
radio
> 300 mm
< 1,0109
Domeniu
spectral
Subdomenii
spectrale
Raze gama
Raze X
Ultraviolet
i vizibil
Infrarou
Infrarou
fundamental
Infrarou
ndeprtat
Tip de
tranziie energetic
Nuclear
a)
Po
Proba
PT
Radiaie
emergent
Radiaie
incident
E2 = h 2
E1 = h 1
b)
E21 = h 21
Proba
E2 = h 2
E1 = h 1
Energie
termic
c)
Radiaie de
excitare
2
1
E2 = h 2
Proba
E1 = h 1
Luminiscen
0
Radiaie
transmis
E21 = h 21
Absorb
ie
Surs
de
radiai
e
Selector
de lungime
de und
Prob
Fotodetector
Sistem de
msurare
i afiaj
Fluorescen, Fosforescen,
Difuzie, mprtiere
Compartime
nt prob
Selector de
lungime de
und
Fotodetector
Sistem de
msurare
i afiaj
Sursa
de
radiaie
Emisie,
Chemiluminiscen
Surs i
prob
Selector de
lungime de
und
Fotodetector
Sistem de
msurare
i afiaj
Legea Lambert-Beer
PT
T%
100
PO
A log T log
A lc
PO
PT
PO
PT
C
obturator
Monocromator
Sursa
Monocromator
Sursa de
de
sau
radiaii
sau filtru
filtru
radiaii
Soluia
Soluia de
de
analizat
analizat
Soluia
Soluia de
de
referin
referin
Sistem
Sistem de
de
detecie
detecie i
i msur
msur
Afiaj
Afiaj
Monocromator
Monocromator
disc
selector
Proba
Proba
Sistem
Sistem de
de detecie
detecie
i
i msur
msur
Referina
Referina
Afiaj
Afiaj
Aplicatii
Cromofor
Grupare auxocroma
Dozare glucoza, proteine totale
Studii cinetice enzimatice
.
INSTRUMENTE OPTICE