Biotehnologii de obinere a enzimelor

furajere i utilizarea acestora n hrana

animalelor

Nume: Cernat Alexandra-Andreea

Specializare: Biotehnologii Medical-Veterinare
An: III

Cuprins

Introducere. Generaliti........................................................................................ 3
Importana enzimelor............................................................................................. 4
Roluri................................................................................................................... 4
Fluxul tehnologic de obinere................................................................................. 4
Obinerea enzimelor furajere prin intermediul microorganismelor......................4
Procedee folosite pentru producerea enzimelor..................................................5
Condiii pe care trebuie s le ndeplineasc mediul de cultur...........................6
Avantajele utilizrii microorganismelor pentru obinerea enzimelor......................6
Utilizarea produselor enzimatice n hrana animalelor............................................7
Obiectivele urmrite folosind enzimele furajere..................................................7
Exemple de produse enzimatice i multienzimatice:..............................................8

Introducere. Generaliti

Termenul de enzim (gr. zymosis= ferment) a fost folosit pentru prima

dat de ctre Kuhne (1887) pentru a denumi o substan catalitic obinut din
drojdii. Mai trziu s-a stabilit faptul c enzimele sunt de fapt proteine cu
activitate catalitic. Acestea sunt sintetizate de ctre toate organismele vii
(microorganisme, plante i animale) i produc ansamblul reaciilor biochimice
care determin metabolismul.
Enzimele sunt proteine cu rol de biocatalizatori care catalizeaz reac ia
de conversie a unui substrat ntr-un produs de reacie.
Aceti biocatalizatori se gsesc rspndite n toate organismele vii i sunt
capabile s-i exercite efectele independent de celulele vii. n organismele vii,
enzimele nu se gsesc izolate ci sunt prezente n toate organitele celulare:
nucleu celular, citoplasm, mitocondrii, membran celular, lizozomi.
n organismele animale, enzimele se gsesc n cantiti mari n organe
precum: ficat, rinichi, splin, creier, iar n organismele vegetale sunt prezente
n special n: semine n stare de germinare, fructe, frunze tinere.
Microorganismele reprezint de asemenea o surs foarte importante de
enzime. [Bunea, A 2013]
Este cunoscut faptul c importana enzimelor este dat de cele 2 proprieti:
1. accelerarea reaciilor catalizare enzimatic;
2. nalta lor stereo-specificitate.
Hidrolazele s-au dovedit a fi enzimele cu utilizare exclusiv n
alimentaia animalelor. Acestea au capacitatea de a degrada substane n
prezena apei, factor important i absolut necesar n desfurarea activitii
enzimatice a organismelor. La sfritul fiecrui ciclu, enzima nu se consum ci
apare lng produii de reacie.

Importana enzimelor
Roluri

nc din cele mai vechi timpuri s-a descoperit faptul c enzimele au

un rol important att n procesul de digestie ct i n func ionarea
normal a celulelor dintr-un organism. Datorit faptului c enzimele sunt
implicate n fiecare proces din organism, ncepnd de la digestie pn la
meninerea n parametri normali ai sistemului imunitar, partea de
cercetare a dus la descoperirea numeroaselor roluri ale acestora.
1. Diger hrana noastr, aducnd-o la principii alimentare care
sunt absorbii prin porii mucoasei intestinale n snge, de unde
alte enzime preiau hrana preparat, digerat i o transport
pentru a fi folosit ca elemente de construcie pentru nervi,
muchi, snge i glande endocrine;
2. Transporta oxigenul n toate celulele organismului i a combate
anemia printr-o mai bun procesare a fierului.
3. Intervin i n depozitarea glucozei n ficat i esutul muscular i
transformarea grsimii n esut adipos.
4. Ajut la formarea ureei (care este eliminat sub form de urin)
i ajut la eliminarea bioxidului de carbon din plmni.
5. Ajut la fixarea fosforului n oase i n esutul nervos reglnd
funcionarea creierului.
6. Ajut la dizolvarea cheagurilor de snge.

Fluxul tehnologic de obinere

Obinerea enzimelor furajere prin intermediul microorganismelor

Enzimele pot fi produse din culturi de microorganisme, culturi de celule

i extracte de esuturi animale sau vegetale.
n momentul de fa cea mai mare parte a enzimelor sunt obinute cu
ajutorul microorganismelor, n special ciuperci i bacterii.
Doar anumite ciuperci i bacterii au capacitatea de a se multiplica rapid i de a
produce o cantitate mare de enzime. Aceste microorganisme sunt selecionate
din populaiile slbatice sau sunt obinute prin tehnici de inginerie genetic n

cazul crora informaia genetic a unei enzime este transferat la alt

microorganism.
Pentru a gsi microorganismele adecvate sintezei enzimatice au fost
testate sute de genuri i specii microbiene.
Microorganismele implicate n producia de enzime aparin fungilor
(Aspergillus, Penicillium, Humicola i Trichoderma), bacteriilor (genurile
Bacillus licheniformis i Bacillus subtilis) i chiar unor drojdii.

Procedee folosite pentru producerea enzimelor

Principalele metode folosite pentru producerea enzimelor la scar
industrial sunt:
Procedeul la suprafa .
Const n utilizarea unui mediu solid sau semisolid care conine cantiti
mici de ap i este foarte bine aerat. Dup terminarea fermentaiei, mediul
este omogenizat, uscat pn la 10- 12% ap i apoi mcinat sub form de
pudr. Metoda este laborioas i foarte costisitoare. Totui prin acest
procedeu se obin unele enzime cum sunt proteazele i pectinazele din genul
Aspergillus.
Procedeul submers
Prin acest procedeu se obin majoritatea enzimelor microbiene. Mediile
nutritive sunt lichide, iar cultivarea microorganismelor este submers.
Metoda permite asigurarea unui control riguros asupra compoziiei
chimice a mediului, pH-ului, temperaturii i aerrii.
Bioreactoarele folosite pentru producerea enzimelor sunt nchise (se
reduce riscul contaminrii cu microorganisme strine), avnd capaciti
cuprinse ntre 10- 50 m3. Fermentaia dureaz ntre 30- 150 ore.
Produsele de fermentaie obinute prin aceast metod sunt purificate,
standardizate i supuse unui control de calitate.
Enzimele eliminate de microorganisme n spaiul extracelular (n stare
liber) pot fi izolate uor prin ndeprtarea masei celulare, centrifugare i
filtrarea lichidului. Enzimele intracelulare sunt izolate prin dezintegrarea
mecanic a membranelor celulare i mitocondriale cu ajutorul morilor cu bile,
omogenizatoarelor sub presiune etc.
Pentru meninerea stabilitii enzimelor o period mai lung de timp,
fr a fi influenat negativ activitatea lor catalitic se folosete metoda
imobilizrii enzimelor. Imobilizarea se poate face folosind metode fizice i
chimice. Metodele fizice mai des utilizate sunt: adsorbia enzimelor n interiorul

unei matrici insolubile, acoperirea enzimelor cu gel sau ncapsularea

enzimelor ntr-o membran semi- permeabil. Din punct de vedere chimic
enzimele pot fi legate covalent la un suport insolubil de natur anorganic sau
organic (ceramic, sticl, celuloz, nylon, polistiren).
Condiii pe care trebuie s le ndeplineasc mediul de cultur
Compoziia mediului are de asemenea un rol foarte important n
procesele de biosintez enzimatic. Acesta trebuie s conin zaharuri,
proteine i sruri minerale asigurate prin: hidrolizate de amidon, zaharoz,
melas, fin de cereale, rot de soia etc.
Mediul de cultur trebuie s ndeplineasc cteva condiii importante:
s fie accesibil n cantiti mari;
s nu conin substane toxice;
s aib o compoziie constant;
s se obin la un pre de cost sczut;

Avantajele utilizrii microorganismelor pentru obinerea

enzimelor
Avantajele utilizrii microorganismelor pentru obinerea produselor
enzimatice sunt:
Microorganismele pot sintetiza o gam larg de enzime dintre care o
parte nu pot fi produse de organismul animal;
Deoarece microorganismele sunt capabile s se adapteze unor condiii
foarte variate de mediu (temperatur, pH, etc) enzimele microbiene sunt
deseori mai stabile n medii mai puin favorabile fa de enzimele
provenite din plante sau animale;
Datorit multiplicrii mai rapide a microorganismelor se pot obine
cantiti mai mari de enzime;
Separarea enzimelor bacteriene se face relativ uor, mai ales cnd au o
localizare extracelular;
Mediul de cultur este mai uor de sterilizat i pot fi evitate uor
contaminrile;
Preul de cost este mai mic comparativ enzimelor obinute din culturi
celulare sau extracte tisulare.

Utilizarea produselor enzimatice n hrana animalelor

Utilizarea produselor enzimatice n hrana animalelor este strict
reglementat de Comisia European care testeaz i certific utilizarea
enzimelor n rile Uniunii Europene.
Administrarea acestor produse n alimentaia animalelor a fost necesar
n urma unor constatri efectuate asupra proceselor de digestie ale animalelor
cum ar fi: enzimele digestive ale animalelor monogastrice pot digera numai o
parte din substanele nutritive coninute de materiile prime furajere.
Porcii i psrile nu sintetizeaz unele enzime cum sunt: glucanazele,
celulazele, fitazele i prin urmare nu pot valorifica eficient o serie de substane
prezente n cantiti mari n nutreurile de origine vegetal etc.
Totodat animalele tinere au un echipament enzimatic incomplet dezvoltat,
de aceea utilizarea substanelor nutritive din hran este mai redus dect la
adulte.
Obiectivele urmrite folosind enzimele furajere
n funcie de tipul enzimelor i modul de aciune al acestora produsele
enzimatice administrate ca aditivi furajeri urmresc urmtoarele obiective:
a) Suplimentarea enzimelor endogene. Se folosesc cu precdere
amilazele i proteazele n cazul animalelor tinere cum sunt puii, purceii i vieii
care au echipamentul enzimatic insuficient dezvoltat n primele sptmni de
via. Enzimele exogene particip alturi de cele endogene la digerarea mai
bun a hranei n cazul speciilor i categoriilor amintite de animale.
Prin adugarea n hran a lipazelor microbiene sunt valorificate
eficient grsimile adugate n nutreul combinat pentru creterea nivelului
energetic al hranei care atrage dup sine sporuri mai mari de cretere i
micorarea consumurilor specifice.
b) Asigurarea unor enzime care nu sunt produse de organismul animal.
n acest scop se folosesc: celulaza, hemicelulaza, pentanaza, glucanaza,
Xilanaza, - galactozidaza, fitaza. Aceste enzime hidrolizeaz anumite
substraturi pentru care organismul nu are capacitatea de a sintetiza enzime
specifice.
Alegerea preparatului enzimatic trebuie fcut n funcie de indicaiile
din prospect, pentru structura de nutre combinat n care efectul este maxim,
avnd n vedere i condiia de economicitate.

Exemple de produse enzimatice i multienzimatice:

Natuphos 5000 conine tulpini de Aspergillus niger -administrat n hrana

porcinelor a mbuntit calitatea carcaselor acestora n urma eliberrii
fosforului fitic iar la pui a determinat creterea greutii corporale i
reducerea indicelui de conversie al hranei;
Biofeed Phytase conine tulpini de Aspergillus oryzae i poate fi utilizat n
alimentaia porcinelor, puilor de carne, ginilor outoare i a curcanilor.
Energex- are n componen tulpini de Aspergillus aceleatus i poate fi
utilizat la purcei i pui de carne. La aceste specii s-a observant creterea
digestibilitii substanelor organice;
Allzyme SSF tulpini de Aspergillus niger. Produsul comercial conine 7
tipuri de enzime: proteaze, amilaze, xilanaze, beta- glucanaze, pectinaze,
celulaze i fitaze. Se poate introduce n hrana tuturor speciilor de animale,
dar n special la porcine i pasri;
Biofeed Plus- produs bienzimatic, conine tulpini de Humicola insolens fiind
recomandat n alimentaia porcinelor i a psrilor.
Rovabio Excel- produs bienzimatic, conine tulpini de Penicilium i se poate
utiliza la porcine, gini outoare, pui broiler de gin i curc.
Roxazyme G- produs trienzimatic, conine tulpini de Trichoderma viride. Se
utilizeaz n alimentaia ginilor outoare i a puilor broiler de gin i
curc.
Fibrozyme -administrat determin creterea produciei de lapte i creterea
sporului mediu zilnic.
Preparatele enzimatice de uz furajer se utilizeaz pentru completarea i
echilibrarea echipamentului enzimatic alanimalelor atunci cnd:
Digestibilitatea hranei este limitat (fie animalele sunt bolnave, fie este
cazul animalelor tinere sau animale de mare productivitate);
Nutreurile folosite n alimentaia animalelor ridic unele probleme (prin
coninutul nutritiv al acestora sau prin digestibilitatea redus).
Se dorete reducerea cantitii de dejecii i prin aceasta reducerea
polurii mediului..
Folosirea preparatelor enzimatice de uz furajer duce la obinerea unor sporuri
mai mari cu 5-8% i la obinerea unor consumuri specifice mai mici cu
aproximativ 6-7%.
Adugarea enzimelor furajere n hrana porcilor, psrilor i mai recent a
rumegtoarelor, contribuie la creterea digestibilitii substanelor nutritive din
nutreuri, mbuntirea performanelor productive a animalelor, utilizarea n

proporii mai mari a materiilor prime cu digestibilitate mai sczut i cu un pre

de cost mai mic, reducerea costurilor pe unitate de produs i reducerea
polurii mediului.

Bibliografie:

1. Lujerdean, A. (2003) Biochimie. Metabolism. Editura Academic

Press- Cluj.
2. Bunea, A., Enzimele i aplicaiile lor biotehnologice, Editura
Academic Press-Cluj Napoca, (2013).
3.