Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
rezistena n bloc la mai multe antibiotice. Acest transfer de la o tulpin bacterian donatoare
la alta receptoare, prin mecanismul principal de ctigare a rezistenei, este nepenit la
bacteriile Gram negative.
Utiliznd o tulpin test cunoscut, receptoare de plasmide R, care are markeri de
rezisten cromozomial, se poate urmri rezistena la antibiotice a unei bacterii izolate de la
bolnav, datorate unei plasmide R conjugate.
Pentru efectuarea transferului prin conjugare, se utilizeaz:
- Tulpina donatoare A Shigella izolat de la bolnav, care este rezistent la
sulfamid, streptomicin i cloramfenicol;
- Tulpina receptoare B E. coli care are markerul de rezisten cromozomial la
acid nalidixic, dar este sensibil la alte antibiotice.
Din fiecare tulpin, se face o inoculare cu ansa a cte 5 ml, n bulion nutritiv special, i
ambele culturi se incubeaz 18-20 ore la 37C, dup care se va rensmna n bulion,
obinndu-se culturi tinere pentru produsul de conjugare. Dup aducerea ambelor culturi la o
densitate bacterian bine determinat, se amestec o parte din tulpina donatoare (A), cu
patru pri din tulpina receptoare (B). Se incubeaz amestecul de conjugare la 37C timp de 4
ore, dup care se nsmneaz cte 0,1ml pe urmtoarele medii de selecie:
- geloz simpl, n care s-a inclus: sulfamid, streptomicin i cloramfenicol;
- geloz simpl, n care s-a introdus acid nalidixic;
- geloz simpl cu sulfamid, streptomicin, cloramfenicol i acid nalidixic.
Dup incubare la 37C, 24 de ore, se remarc dezvoltarea tulpinii donatoare A, numai
pe mediul cu primele trei antibiotice, a tulpinii receptoare B, numai pe mediul cu acid nalidixic
i a transconjugaiilor pe toate trei mediile. Explicaia fenomenului este posibil prin transferul
plasmidelor R de la tulpina donatoare la cea receptoare, demonstrnd posibilitatea
transmiterii plasmidelor R ntr-o populaie bacterian, i permind nelegerea modului de
ctigare a rezistenei la antibiotice a unor bacterii.
4 minute). Pentru comparaie, se poate folosi o suspensie din aceeai cultur n ser fiziologic
(fr ser aglutinant) (fig.38).
Aglutinarea n tuburi
Se practic atunci cnd este necesar o confirmare a unei aglutinri pozitive pe lam
sau n cazul cnd aglutinarea pe lam este incert.
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
1/40
0,5
1/8
0
0,5
1/16
0
0,5
1/320
0,5
1/64
0
0,5
martor
antigen de natur proteic, termolabil, apare sub forma unor flocoane care formeaz un
sediment abundent, lax, care dispare la agitare energic.
Reacia de aglutinare se utilizeaz n identificarea diferitelor genuri, specii i tipuri de
bacterii.