Curs 5

S.L. Dr.Ing. ANTONIAC Iulian

Influena mediului biologic asupra
biomaterialelor
Universitatea Politehnica Bucureti
Coroziunea este unul din procesele majore ce se desfoar atunci cnd un material
metalic este n contact intim, prin implantare, cu cel puin un esut al organismului
uman, avnd drept rezultat continua degradare a acestora cu formarea unor diveri
produi de reacie. De asemenea, prin coroziune se formeaz ioni metalici ce pot
avea efecte locale sau sistemice nocive.

Mediul fiziologic normal al organismului uman este un mediu apos, ce conine ap,
oxigen dizolvat, sruri, proteine, carbohidrai, lipide. Materialul metalic implantat
este, n mod continuu, n contact cu diverse lichide biologice, cum ar fi: sngele,
fluidul extracelular i fluidul sinovial.

Fluidul extracelular, care este cel mai adesea n contact cu implanturile, conine
cantiti mari de ioni, cum ar fi: Na, Cl HCO
3
, OH, avnd un pH n jurul valorii de
7,4 ( 7,27,4), meninut la o temperatur constant de 37
0
C. Drept rezultat,
mediul fiziologic este foarte agresiv i, n consecin, rezistena la coroziune a
materialelor metalice implantate este un important aspect al biocompatibilitii
acestora.


Dou aspecte controleaz corozivitatea acestui mediu:
- solutia salin este un electrolit excelent, facilitnd mecanismele
electrochimice ale coroziunii,
- exist multe specii moleculare i celulare n esuturi care au capacitalea de
a cataliza anumite reacii chimice sau de a distruge anumiti componeni
identificai ca strini organismului.

Valoarea normal pentru pH se modific imediat dup operaia chirurgical de
implantare i este variabila n timpul perioadei de vindecare.

n momentul implantrii, valoarea pH se modific spre valori acide de circa 5,2 n
zonele afectate ale esutusrilor i revine la normal n cteva zile. De asemenea,
valoarea pH depinde i de existena sau nu a infeciilor.
Deoarece mediul fiziologic este unul apos, procesul de coroziune este de tip electrolitic,
agresivitatea acestuia fiind modificat de prezena diferiilor ioni, n special cei de clor, precum i
de prezena diverselor specii moleculare i celulare, cum ar fi: proteinele, fagocitele,
osteoblastele.

Moleculele biologice pot schimba echilibrul reaciei de coroziune prin consumarea unuia dintre
produii reaciilor anodice sau catodice.
Proteinele au adesea rol de purttor de electroni i pot astfel influena potenialul de electrod,
iar bacteriile pot schimba pH mediului local prin generarea de produi metabolici acizi.

Exist dovezi suficiente pentru a susine premisa ca prezena proteinelor influeneaz gradul de
coroziune al unora dintre metale.

A fost demonstrat faptul c proteinele interacioneaz cu suprafaa metalului iar cantitatea
absorbit este diferit la fiecare metal. n acelai mod, s-a observat c proteinele ader la proteine
i c sunt dislocate de la locul respectiv sub forma unui complex protein-metal care se
raspndete n restul corpului.

n concluzie, se poate spune c proteinele influeneaz reacia de coroziune care apare cnd se
implanteaz un metal, dar nu poate explica acest mecanism.

Modul n care se propag coroziunea are o importan deosebit pentru
caracterizarea unui metal sau aliaj.

Distribuia zonelor de atac este tot att de important ca i viteza de
coroziune n stabilirea rezistenei la coroziune a metalelor i aliajelor.

Dup aspectul distrugerii, se pot clasifica diferitele tipuri de coroziune n cel
puin dou mari grupe:
coroziune uniform;
coroziune localizat.

Aceast clasificare nu exclude ns posibilitatea ca un anumit proces de
coroziune s aib la nceput un aspect uniform i apoi localizat.

Coroziunea general este uor controlabil prin determinarea pierderilor n greutate
i are loc deoarece metalul se afl n stare activ,

Coroziunea general depinde de compoziia chimic a biomaterialelor metalice, de
natura i concentraia mediului i de temperatura corpului uman. Coroziunea general
poate fi uniform sau aproape uniform cnd ntreaga suprafa metalic se corodeaz
cu aceeai vitez sau cu viteze apropiate.

Coroziunea localizat este prezent n cazurile n care anumite zone de pe suprafaa
biomaterialului metalic se corodeaz cu viteze mai mari dect alte zone, datorit
existenei unor neomogeniti prezente n material sau n mediu. Acest tip de
coroziune se bazeaz pe frecvena i distribuia zonelor anodice. Atacul localizat
presupune n general existena unei celule de coroziune format dintr-o zon catodic
ntins i o zon anodic mult mai mic i, efectul va fi cu att mai pronunat, cu ct
diferena dintre cele dou arii va fi mai mare.

A. La biomaterialele metalice, dar n special la oelurile inoxidabile, formele de coroziunea localizat
n absena tensiunilor mecanice sunt coroziunea intercristalin, coroziunea n puncte (denumit i
pitting) i coroziune n crevas.

Coroziunea intercristalin reprezint tipul de coroziune preferenial i progresiv a limitelor de gruni
cristalini, provocnd o dezagregare a aliajelor metalice. n cazul coroziunii intercristaline nu este semnificativ
pierderea de mas, ci modificarea caracteristicilor mecanice. Este frecvent ntlnit n oelurile inoxidabile
austenitice (Cr-Ni, Cr-Mn, Cr-Mn-Ni). Biomaterialele metalice a cror rezisten bun la coroziune se
datoreaz prezenei unui film subire pasiv sau unui film protector pe suprafa pot fi susceptibile la atacul de
tip pitting, atunci cnd filmul se rupe local i nu se mai reface.

Pitting-ul poate fi definit ca un caz limit de coroziune localizat, n care o zon mic este atacat n timp ce
suprafaa metalic rmne neafectat. Coroziunea de tip pitting prezint dou stadii, unul de iniiere i unul
de propagare. n timpul iniierii pitting-ului, filmul pasiv se rupe i nu se mai reface. n timpul propagrii
pitting-ului, locurile mici active formate n timpul stadiului de iniiere se propag foarte rapid.

Coroziunea n crevas este un proces de coroziune intens localizat (variind de la mici puncte de atac pn
la coroziunea ntregii suprafee) i se poate forma, n principal, la: mbinri metalice (plci, mbinri prin
filet); contactul dintre un metal cu un nemetal de tipul plasticului, cauciucului, sticlei; produi de coroziune
pe suprafaa metalului.

Formele de coroziune localizat, n prezena tensiunilor mecanice, sunt: coroziunea la oboseal,
eroziune coroziune, coroziunea fisurant.

Coroziunea sub tensiune apare atunci cnd mediul de lucru are aciune specific, existnd o
anumit sensibilitate a oelului cnd acesta este supus solicitrilor mecanice de traciune. Tensiunile
de traciune provocate de fore exterioare sau de natura rezidual n urma prelucrrii
termomecanice sunt cele mai periculoase n acest caz.

Mecanismul coroziunii sub tensiune cuprinde dou stadii principale. Primul stadiu const n
apariia adnciturilor de coroziune localizat ca o consecin a ruperii filmului protector al
metalului n anumite puncte, precum i n dezvoltarea fisurilor, ca o consecin a aciunii simultane
a coroziunii i a tensiunii ciclice. Stadiul al doilea, considerat drept stadiu al oboselii, const n
propagarea fisurii care este determinat de concentrarea tensiunii ciclice i de proprietile
mecanice ale metalelor. Fisura are o direcie normal pe planul de aplicare a tensiunii ciclice.

n urma unor solicitri periodice ciclice, se instaleaz fenomenul de oboseal. Microscopic, acest
fenomen const n deplasarea cristalelor dup anumite plane de alunecare, cu modificri plastice
importante.

Influena vitezei de deplasare a soluiei sau a materialului metalic asupra formrii i cineticii reaciei de
eroziune-coroziune este complex. O vitez destul de mare poate avea ca rezultat o alt form de
atac care ia natere prin aciunea conjugat a celor dou mecanisme de coroziune i de eroziune.

Termenul de eroziunecoroziune include toate acele forme de atac accelerat, n care filmele
protectoare i chiar suprafaa metalic nsi, sunt ndeprtate sub aciunea fluidului n micare (gaz
sau lichid) cu vitez mare.
Efectul procesului de eroziune coroziune este deci o ndeprtare constant a filmului protector de
pe suprafaa materialului metalic, avnd ca rezultat un atac localizat pe suprafaa de pe care filmul a
fost ndeprtat.

Biomaterialele metalice supuse aciunii simultane a unor tensiuni de ntindere provocat de fore
exterioare sau unor tensiuni rezultate n urma prelucrrilor mecanotermice n mediu coroziv specific
pot prezenta o coroziune fisurant sub tensiune.

Susceptibilitatea la coroziune sub tensiune este determinat nu doar de tensiune i mediu, ci i de
structura materialului metalic. Fenomenul complex al coroziunii fisurante sub tensiune are loc dup
un mecanism n care acioneaz trei factori eseniali: electrochimic, mecanic i de absorbie.
n industria medical aceste biomateriale sunt eseniale nu doar pentru realizarea
implantelor sau protezelor, ci i pentru lentile, instrumente de diagnosticare,
substane chimice, termometre, rame de formare de culturi de esuturi i fibre
optice pentru endoscopii.

Biomaterialele ceramice sunt de asemenea folosite n mare msur n stomatologie
ca materiale de recondiionare, la realizarea coroanelor de porelan aurit sau a
ionomerilor cementai de fibr de sticl.

Viteza de degradare a ceramicelor n interiorul corpului poate varia considerabil
comparativ cu cea a metalelor putnd fi foarte rezistente la coroziune sau foarte
solubile.

Ca o regul general, trebuie s ne ateptm s vedem o rezisten foarte mare la
coroziune n cazul ceramicelor i sticlelor
n general, vitezele de dizolvare ale acestor ceramice in vivo pot fi prezise din comportamentul n
soluie simpl apoas. Oricum, vor fi unele diferene n detaliile din corp, mai ales cu variaiile
vitezei de degradare vzute la diferite amplasamente de implanturi. Este posibil, ca activitatea
celular, iniiat de fagocitostate sau de eliberarea radicalilor, s fie responsabil de aceste variaii.

ntre extremele stabilitii i degradrii intenionate a unui grup mic de materiale n care poate fi o
activitate limitat. Aceasta s-a observat la sticlele ceramice i la sticle, pe baz de Ca, Si, Na, P i O,
n care se produce o disociere selectiv pe suprafa implicnd eliberarea de Ca i P, dar n care
reacia nceteaz deoarece stratul SiO
2
rmne la suprafa. Aceasta este deosebit de interesanta, din
cauza abilitii acestor suprafee de a se lega de os.

Pe baza acestui comportament, bioceramicele se clasific n:
Inerte sau aproape inerte;
Ceramice resorbabile;
Ceramice ale suprafeei controlate reactiv.

Mecanismul atarii esuturilor este raportat direct la tipul de rspuns al esutului la interfaa
implant esut. Acestea au 4 tipuri de rspunsuri ale esutului i 4 scopuri diferite la ataarea
protezelor la sistemul scheletic.

Degradarea biopolimerilor este distrugerea chimic a materialelor polimerice prin aciunea
organismelor vii care conduc la schimbri ale proprietilor fizice.

Descris de unii autori ca biodegradarea polimerilor, acesta este un concept vast, ce se ntinde de la
descompunerea pierderilor mediului mplicnd microorganisme la deteriorarea biomaterialelor din
implanturile medicale.

Exist mai multe moduri n care mediul biologic nconjurtor sporete rata ruperii mecanice a
polimerilor, cum ar fi:
uzura;
inflamarea;
efectele mecanice asupra compatibilitii sngelui i calcifierii.

n general, frecarea este redus, dar uzura poate fi sporit datorit uzurii prin alunecare. Alte
mecanisme care conduc la creterea uzurii in vivo sunt: presiunea de crpare, imperfeciunile
structurale i dilatarea polimerilor. Deci, un important criteriu de selecie a materialelor pentru
implanturi medicale este cantitatea, mrimea, forma i compoziia uzurii prin sfrmare care poate
i realizat in vivo.

Componentele polimerice ale dispozitivelor implantabile sunt n general garantate pe durata propus
de via. Se impune ns o selecie atent i o testare preclinic intens a acestora. Nici un polimer nu
este total impenetrabil pentru complexul de procese chimice i solicitri mecanice propriu corpului
omenesc.

n general, materialele polimerice se degradeaz deoarece constituienii corpului atac biomaterialul
direct, prin intermediul altor componente ale dispozitivului sau prin intervenia unor factori externi.
Trebuie menionat c pe durata de timp dintre sintez i utilizarea sa n corp, asupra unui polimer se
aplic numeroase procese.

Mecanismele ce conduc la degradarea proprietilor polimerilor pot fi fizice sau chimice i ele pot
apare n diferitele stadii ale existenei polimerului.

Astfel, unele procese de degradare pot implica interacia a dou sau mai multe mecanisme individuale,
ba mai mult, un tratament al materialului nainte de implantare l poate predispune la un
comportament final stabil sau instabil.

Mecanismele fizice care conduc la degradarea proprietilor polimerilor sunt:
Mecanismele chimice care conduc la degradarea proprietilor polimerilor sunt:
Absorpia Creterea nmuierea
Extracia Cristalizarea Ruperea la oboseal
Mineralizarea Decristalizarea Ruperea la lovire
Fisurarea sub tensiune
Termoliz Vizibil Depolimerizare Ruperea radicalilor
Hidroliz Raze X Raze gama Oxidare chimic
Alcoliz Radioliz Ultraviolet Oxidare termic
Aminoliz Fotoliz Solvoliz Bombardare cu fascicul de electroni
Un exemplu semnificativ al degradrii biomaterialului, datorit prelucrrii
preimplantului, l constituie sterilizarea prin iradiere cu unde a polietilenei de nalt
densitate, utilizat pentru execuia componentelor endoprotezelor.

Procesul genereaz radicali liberi n interiorul materialului care reacioneaz cu
oxigenul formand produi de oxidare.

Dup ce un dispozitiv a fost implantat, apar fenomenele de adsorpie i absorpie.
Suprafeele polimerice, n contact cu lichidele din corp, adsorb imediat componentele
proteinice, i volumul ncepe s adsoarb componentele solubile cum ar fi apa,
proteinele i lipidele. Elementele celulare se ataaz suprafeelor i iniiaz procese
chimice.

Hidroliza este ruperea grupurilor moleculare susceptibile prin reacia cu apa. Pot fi catalize,
baze, sruri sau enzime. Este un proces cu un singur pas n viteza ruperii lanurilor direct
proporional cu iniierea reaciei.

Este o categorie de hidrolizare a biomaterialelor foarte utilizat, grupurile funcionale
constnd n carbonili ce se regsesc n elementele heterolanurilor (O, N, S). Exemplele
includ esterii, amidele i carburile. Si ali polimeri conin grupari cum ar fi eter, acetal,
nitril, fosfat sau metilen activ ce hidrolizeaz n condiii precise.

Viteza de hidroliz tinde s creasc cu o proporie mare de grupuri hidrolizabile n lanul
principal sau lateral, alte grupari polare, care implic cristalinitate sczut, densitate sczut
sau neglijabil.

Structurile poroase hidrolizabile i pierd repede proprietile speciale datorit suprafeei
lor mari. n timp ce greutatea moleculelor polimerilor lineari e posibil s nu aib un mare
efect asupra vitezei de deteriorare, pierderile proprietilor fizice pot fi ntrziate pentru un
numr dat de reacii de rupere n lan cu polimerii cu molecule mari. Pierderea
proprietilor cauzat de clivajul lanurilor este mai pronunat la polimerii cu fore de
atracie intermoleculare, slabe.

Biodegradarea hidrolitic
Procese hidrolitice induse de corpul uman
Corpul este un mediu cu reacii foarte bine controlate. Prin intermediul homeostazei, mediul
normal al multor implanturi este meninut la izoterm (37 C), neutru (pH 7,4), aseptic, i
protejat apoi la fotografiere. Dup standardele in vitro, aceste condiii par a fi blnde.
Interaciunile complexe ale componenilor umorali i celulari ai fluidelor din corp implic
activatori, receptori, inhibatori, produce rspunsuri agresive la oricare corpuri strine prin
intermediul proceselor de adeziune, reacie chimic i transport particular.

Cteva scenarii ce conduc la hidroliza n gazd, trebuiesc luate n consideraie. Mai nti, esenial
este ca apa neutr s poat hidroliza cu singuran polimerii, cu o vitez semnificativ. Oricum,
acest simplu mecanism nu este semnificativ n compoziiile polimerilor selectate pentru o
biostabilitate in vivo, pe termen lung.

Apoi, hidroliza ionilor catalizai ofer un scenariu plcut n fluidele corpului. Fluidele
extracelulare conin ioni cum ar fi: H
+
, OH
-
, Na
+
, Cl
-
, HCO , PO , K
+
Mg
2+
, Ca
2+
i SO .

S-a artat c unii ioni (PO ) sunt efectiv catalizai hidrolitic, sporind, de exemplu, vitezele de
reacie ale poliesterilor cu cteva grade de mrire. Cataliza ionilor poate fi un efect de suprafa
sau un efect combinat suprafa volum, depinznd de hidrofilicitatea polimerului.

Biodegradarea hidrolitic
Procese hidrolitice induse de corpul uman
Schimbrile localizate de pH n vecintatea dispozitivelor implantate, care apar de obicei
pe durata inflamaiilor i infeciilor acute, pot produce o cretere a vitezei catalitice a
hidrolizei.

Componenii organici, cum ar fi lipoproteinele, circulnd n snge sau n fluidul
extracelular, pare s fie capabili s transporte ionii catalitici inorganici n volumul
polimerului de mecanisme puin definite.

Enzimele furnizeaz n general o funcie catalitic clasic, alertnd viteza de reacie (prin
transferul de ncrcare sau ioni) fr a fi consumat, prin modificarea energiei de
activare dar nu i a echilibrului termodinamic.

Aparent enzimele pot interaciona cu segmentele structurale ale polimerilor acoperite cu
ser, iniiaz aciunea ei catalitic in vivo. Enzimele cu efect demonstrat n viteza de
hidroliz pot fi selective n prezena ctorva grupuri funcionale hidrolizabile.


Biodegradarea hidrolitic
Procese hidrolitice induse de corpul uman

De exemplu, polieter-uretan-ureea i poliester-uretan-ureea, supuse enzimelor
hidrolitice au fost observate pentru viteza i locul hidrolizei. Catalizele enzimatice au fost
monitorizate n mod evident pentru gruprile esterice, n timp ce ureea, uretanul, i
grupurile eterice nu au prezentat hidrolize semnificative.

Majoritatea enzimelor exercit n mod predominant efecte de suprafa (superficiale) din
cauza mrimii moleculare mari, care mpiedic absorbia, chiar i hidrogenurile, care
sunt capabile de absorpia proteinelor.

Oricum, cnd suprafaa de degradare devine aspr i fragmentat, aciunea enzimatic
poate fi sporit ca rezultat al creterii ariei de suprafa dac substraturile rmn
accesibile la celulele fagocite care conin enzime active. Dispozitivele implantate care au
o micare relativ, continu cu esutul nvecinat pot provoca inflamaii, stimulnd
activitatea enzimelor.

Biodegradarea hidrolitic
Polimeri susceptibili la biodegradare hidrolitic
n continuare vor fi abordate unele aspecte cu privire la reacia in vivo a unor polimeri
cunoscui ca susceptibili la hidroliz.

Poliesterii
Teraftalatul polietilenic (PET) rmne o alegere primar n operaiile cardiovasculare pentru
protezele vasculare de diametru mare, pansamente articulare, inele pentru valve, etc. Este un
polimer cu o mare flexibilitate datorit cristalinitii mari i a orientrii reelei de atomi.
Studii sistematice a implanturilor PET (teraftalat polietilenic) arat o vitez de degradare redus.
Pentru bandajele de esut implantate subcutanat, absorpia, n timp, de ctre corp se face n 30 7
ani, cu 50% deteriorare a fibrei n 10 2 ani, dup cum a fost proiectat.
n cazul implantelor efectuate pe cini ce prezentau infecii, unde pH-ul era de 4,8 , degradarea s-a
intensificat exponenial, cu pierderea complet a proprietilor n doar cteva luni.
Studiile asupra implantelor umane au artat grefe de o eviden semnificativ. n plus, consecinele
patologice evidente ale infeciei i riscul mrit al degradrii polimerului este o cauz a
preocuprilor.
Poliesterii alifatici sunt de cele mai multe ori utilizai ca polimeri biodegradabili, inducnd o scdere
semnificativ a volumului molecular cu 8090% a vscozitii relative n doar 120 sptmni de la
implant.

Biodegradarea hidrolitic
Uretanele din poliester
Implantele din poliuretan sunt folosite nc din 1950. Utilizarea lor n chirurgia plastic
reconstructiv sau ortopedic a prezentat, iniial, rezultate pozitive. Inflamaia acut era
mic, esutul n cretere fiind ajutat de capsulele fibroase subiri. Oricum, n cteva luni, ele
au fost degradate i fragmentate, producnd efecte cronice.

Cauza iniial a degradrii este considerat ca fiind segmentele fine poliadipate care induc
hidroliza. Prin comparaie, uretanele din poliester sunt foarte rezistente la hidroliz, n ciuda
faptului c sunt mai susceptibile la oxidare. Este bine tiut c implanturile mamale din
uretan poliesteric acoperite cu spum siliconic au rezistat ca produse comerciale pn n
prezent, n ciuda tendinei lor cunoscute de degradare.

Aparent tipul de capsule fibroase formate pe dispozitive ce conin spum degradabil sunt
favorizate de unii clinicieni n ciuda implanturilor acoperite cu silicon. La dispozitivele mari,
instabile pe esuturile n cretere, efectele friciunii la alunecare pot duce la creterea
grosimii capsulei i a concentraiei mpreun cu o inflamaie cronic extensiv.

Biodegradarea hidrolitic
Poliamidele

Nylon-ul 6 i 6,6 conin un grup de amide hidrolizabile, la fel ca i proteinele. Aceti
polimeri sintetici pot absorbi 911% ap, n greutate, la saturaie. Este previzibil, apoi
se degradeaz datorit suprafeei catalizate de ioni i hidroliza volumului. n plus,
hidroliza se datoreaz catalizei enzimatice conducnd la eroziunea suprafeei. Cantitativ,
Nylon 6,6 pierde 25% din fora de tensiune dup 89 de zile, i 83% dup 726 de zile la
implanturile pe cini.

Degradarea poliarilamidelor destinate pentru uz ortopedic a relevat o reacie a corpului
fa de implant, apariia coroziunii pitting fiind observat, dup 4 sptmni, dup 12
sptmni devenind mai pronunat. Acest rezultat nu a fost prevzut deoarece
poliarilamidele sunt foarte rezistente la solveni i cldur.

Poliamidele cu segmente lungi de lan din hidrocarbon alifatic sunt mult mai stabile
hidrolitic dect lanurile mai scurte de Nylon i corespunztor gradului mai sczut in
vivo.
Biodegradarea hidrolitic
Polialchil-ciano-acrilatele

Aceast clas de polimeri, utilizat ca adezivi pentru esut, este remarcabil, fiind un caz
rar n care legturile carbon carbon sunt desfcute de hidroliz. Aceasta se petrece
deoarece metilena (-CH
2
-) n polimer este activat inductiv de electronii gruparilor
vecine.

Formarea polimerului adeziv din monomeri este mai nti catalizat, cu apa adsorbit
pentru ca aderena s fie suficient pentru a iniia reacia.

Aadar, apa asociat cu esutul poate induce hidroliza reversibil Knoevenager.

Multe condiii de baz i procese enzimatice sunt mult mai eficiente. n mediul
embrionar (o surs bogat n varietate de enzime), metilcianoacrilul a fost extensiv
degradat n doar 4 6 luni.

Biodegradarea hidrolitic
Se cunosc multe despre structurile i produii de reacie ai polimerilor susceptibili la biodegradare
oxidativ, confirmarea pailor reaciei individuale nu au fost nc demonstrai analitic. Deduciile
mecanice sunt posibile din cunoaterea proceselor fiziologice de oxidare i oxidarea polimerului in
vitro.

Procesele de oxidare ale polimerului pot consta ntr-o reacie homolitic n lan sau un mecanism
heterolitic. Specii precum carbonilii, hidroxilii i produii rezultai din ruperea lanului sunt
detectabili.

Exceptnd natura grupurilor funcionale susceptibile, principiile rezistenei situate n sectorul
structurilor polimerilor hidrolizabili sunt adevrate pentru prezicerea rezistenei relative a oxidrii
polimerilor. Prile favorabile pentru atacul oxidativ iniial, consistent cu o platform homolitic
sau heterolitic, sunt acelea care permit abstracia unui atom sau ion i s asigure stabilizarea
rezonanei radicalului sau ionului rezultat. Peroxizii, carbonilii i ali radicali intermediari sunt
stabilizai prin rezonan similar de dezlocalizarea electronilor din elementele C, O, H sau N.

Dou categorii generale de biodegradare oxidativ, bazate pe sursa iniializatoare a procesului,
sunt oxidarea direct dintre gazd i dispozitiv sau mediul exterior - oxidare mediat.
Biodegradarea oxidativ
Tipuri de biodegradare oxidativ

a) Oxidarea direct de ctre gazd. n aceste circumstane, efectele speciilor moleculare
generate de ctre gazd sau procesul oxidativ direct poteniat pe polimer.
Pe baza unei evidene analitice solide, unii specialiti presupun c astfel de molecule reactive sunt
derivate din celule activate rspunznd leziunilor i proprietilor corpurilor strine la implant.
Aceste celule, care iau natere n os i populeaz sistemul circulator i esuturile conective, se
manifest n dou feluri: neutrofile i monocite. Mai trziu se difereniaz n celule macrofage i
celule mari din corpuri strine fenotipuri.

Este nevoie de multe cercetri pentru a elucida evoluia evenimentelor ce conduc la oxidarea
fagocitic a biomaterialelor. Cu siguran, analiza proceselor importante cum ar fi prezena
corpurilor strine derivate biologic (bacterii i parazii) prezint impotan fa de implanturile cu
biomateriale.

Biomaterialele sensibile chimic pot fi afectate dac se afl n imediata apropiere a zonei de
interaciune implant esut. Produsele lor de fuziune pot supravieui de la cteva luni pn la
civa ani pe suprafaa implantului. Celulele macrofage rmn n capsulele colagenoase pentru
perioade ndelungate.

Biodegradarea oxidativ
b) Oxidare mediat de mediu.

Oxidarea provocat de ionii metalici.
Un astfel de proces de degradare oxidativ s-a raportat clinic n cazul uretanului polimeric folosit
la regulatoarele cardiace, care necesit condiii foarte speciale de execuie. Condiiile i morfologia
de rupere sunt diferite de cele de la ruperea sub tensiune, chiar dac produii oxidrii sunt
similari. Biodegradarea dispozitivelor implantate prin fisurare sub tensiune apare ntotdeauna la
polimeri, pe suprafaa expus celulelor, rezultand fisuri caracteristice orientate perpendicular pe
vectorul tensiune. Oxidarea provocat de ionii metalici ia locul suprafeelor din imediata
vecintate a componenilor metalici corodai i a produselor lor de coroziune. Pereii fisurii i
fisurile microscopice orientate aleatoric sunt indicii care evideniaz o fisur fragil. Produii de
degradare care pot fi gsii mai adnc n structur dect fisura datorat tensiunii, sunt i ei indicii
ai fisurii fragile.

Acest fenomen, numit oxidare indus de ioni metalici, a fost confirmata prin studii in vitro, n
care uretanii poliesterici au mbtrnit n soluie de ioni metalici la poteniale de oxidare diferite.
La un potenial de oxidare de aproape + 0,77 , degradarea chimic a fost sever. Sub potenialul
de oxidare, schimbrile n polimer prezinta caracteristicile unei simple plasticizri. Aceast tehnic
arat i faptul c oxidarea indus de ionii metalici a fost proporional cu coninutul de eter al
poliuretanului.

Biodegradarea oxidativ
Efectul diferitelor metale asupra oxidrii, in vitro i in vivo, au fost de asemenea studiate. Ambele
tehnici constau n corodarea metalelor i degradarea suprafeelor tuburilor de lumen, n condiii
speciale, n doar 30 de zile. In vivo, interaciunea fluidelor corpului cu cobaltul i aliajele sale, n
particular, rezult din fisura oxidant a polimerului. Procesul oxidrii induse de ionii metalici implic
coroziunea elementelor metalice i ionilor lor precum i ulterior oxidarea polimerului.

n dispozitivele de operare, ionii metalici se pot forma prin solvabilitate, coroziune galvanic, sau
oxidare chimic sau biochimic. n schimb, aceti ioni metalici dezvolt poteniale de oxidare care pot
fi mult mrite de fluidele corpului la peste jumtate din potenialele standard ale celulelor.

Oxidarea indus de ionii metalici trebuie s fie o posibilitate ntr-un dispozitiv implantat, cteva
apropieri sunt disponibile pentru a controla aceast problem. Ele nu sunt aplicabile universal i trebuiesc
incluse doar dac funcionalitatea i biocompatibilitatea sunt reinute. Potenialetehnici de utilizare includ folosirea
metalelor rezistente la coroziune, nlturnd ionii corozivi din polimerul susceptibil, izolnd metalele i
polimerul de soliiile electrolitice, ncorpornd antioxidanii apropiai, i utiliznd polimerii rezisteni la oxidare
dac sunt disponibili.


Biodegradarea oxidativ
Degradare oxidativ indus de mediul exterior.

n anumite circumstanele corpul poate transmite radiaii electromagnetice care pot afecta
integritatea polimerilor implantai.

De exemplu, corneea i umoarea vitroas a ochiului la fel ca i stratul superficial al feei
permit trecerea radiaiei ultraviolete. Absorpia radiaei ultraviolete produce excitarea
electronilor care poate duce la degradarea foto-oxidativ. Acest proces a fost sugerat pentru
ruperea componenilor polipropilenei n lentilele intraoculare.

La endoprotezele i exoprotezele maxilofaciale, elastomerii pot suferi schimbri nedorite ale
culorii i ale proprietilor fizice ca o consecin a expunerii la radiaia solar natural.
Antioxidanii i absorbanii de ultraviolete asigur o protecie limitat pentru aceste materiale.



Biodegradarea oxidativ
Testarea proprietilor biologice
a) Dac se pregatesc extracte din dispozitive, se convine ca solvenii i condiiile de
extracie utilizate s fie corespunztoare naturii i utilizrii produsului finit;


b) pregatirea martorilor pozitivi i negativi atunci cnd sunt necesari.


Dat fiind c nici un rezultat nu poate asigura contrarul unui potenial de risc
biologic, se convine ca, n investigaiile biologice efectuate, s fie observate cu
atenie, reaciile adverse neateptate sau incidente, constatate la pacientul uman, n
timpul utilizrii clinice a dispozitivului.

Metode de testare a caracteristicilor de biocompatibilitate
Procedeele experimentale recomandate, avnd ca scop evaluarea biocompatibilitii
unui material, in cont de tendina lui degradare, de interaciunea lui cu mediul
nconjurator n condiiile reale de expunere care duc la deteriorarea celor dou
componente.

Din pcate, msurtorile experimentale sunt limitate pentru c, dei exist metode
puternice pentru examinri in vitro, realizarea condiiilor modelului de experimentare
in vitro, astfel nct s fie ct mai aproape de condiiile in vivo reale este foarte greu i
uneori chiar imposibil datorit compoziiei extrem de complexe a mediului real.
Substanele prezente n concentraii foarte mici joac un rol important n
comportarea degradrii biomaterialului metalic. Acest lucru se aplic urmtoarelor
specii :
speciilor care formeaz compleci puternici cu ionii metalici;
speciilor care influeneaz proprietile redox ale sistemului;
speciilor care modific comportarea la frecare i uzur.

Metode de testare a caracteristicilor de biocompatibilitate
Analizarea tendinei de degradare a biomaterialelor metalice ar trebui s conin
urmtoarele etape de examinare, care sunt caracterizate de o scdere a cantitii de
materiale utilizate:
analizarea coroziunii in vitro i a uzurii ntr-un mediu anorganic;
analizarea coroziunii in vitro i a uzurii ntr-un mediu mixt organic-anorganic;
analizarea folosind culturi de celule i de organe;
analizarea in vivo bazat pe implantare n organisme animale.

n timpul ultimilor ani multe activiti au avut ca scop combinarea avantajelor metodelor
de msurare electrochimic n timp real, concomitent cu observaiile biologice celulare
(Schade i Liefeith, 1995). Prin urmare, Liefeith (1994) i Hildebrand (1995) au
dezvoltat un sistem de msurare cu ajutorul crora testele de coroziune in vitro pot fi
efectuate n electrolii biologici. O extensie a acestui sistem ca un bioreactor ofer
informaii despre adeziunea celulelor folosind microscopie fluorescent. Cu ajutorul
spectroscopiei fluorescente induse de laser, este posibil s se evalueze condiiile
fiziologice ale organismelor testate.


TESTAREA BIOLOGIC A BIOMATERIALELOR

(A). Teste de evaluare iniial
1. Citotoxicitate
Prin utilizarea tehnicilor de cultur celular, aceste teste determin liza (moartea) celular, inhibiia
creterii celulare i alte efecte asupra celulelor provocate de dispozitivele, materialele i/sau
extractele lor.

2. Sensibilizare
Aceste teste evalueaza pe un model corespunztor, probabilitatea sensibilizrii la contactul cu
materialele, dispozitivele i/sau extractele lor. Aceste teste sunt adecvate, cci o expunere sau un
contact chiar i n cantiti minime de substan potenial extractibil, poate s conduc la reacii de
sensibilizare sau alergie.

3. Potenial iritant
Aceste teste evalueaz potenialul iritant al dispozitivelor, materialelor i/sau extractele lor, utiliznd
zone corespunztoare sau esuturi de implantare ca pielea, ochiul i mucoasele, pe un model adecvat.
Testul (testele) realizat(e) trebuie s adapteze zona de aplicare (piele, ochi, mucoas) i durata
expunerii cu scopul de a determin efectele iritante ale dispozitivelor, materialelor i substanelor
potenial extractibile.


TESTAREA BIOLOGIC A BIOMATERIALELOR

(A). Teste de evaluare iniial
4. Reactivitate intracutanat
Aceste teste evalueaz reacia local a esutului la extracte cu dispozitiv. Ele sunt aplicabile atunci
cnd determinarea potenialului iritant prin testri cutanate sau pe mucoase sunt neadecvate (de
exemplu, pentru dispozitivele cu acces la circuitul sanguin). De asemenea, aceste teste pot fi utile
atunci cnd substanele extractibile sunt hidrofobe.

5. Toxicitate sistemic (acut)
Aceste teste evalueaz pe un model animal potenialele efecte duntoare datorate expunerii
unice sau multiple, ntr-un timp mai mic de 24 h, a dispozitivelor, materialelor i/sau al
extractelor lor. Ele sunt adecvate atunci cnd contactul antreneaz o absorbie posibil de
substan extractibila toxic i produsele de degradare. Testele de pirogeniticitate sunt incluse
pentru a detecta pirogeniticitatea extractelor, dispozitivelor sau materialelor. O singur testare nu
poate diferenia pirogeniticitatea indus de ctre material, datorit contaminrii cu endotoxine.




TESTAREA BIOLOGIC A BIOMATERIALELOR


(A). Teste de evaluare iniial

6. Toxicitate subcronic (subacut)
Aceste teste determin efectele unei expuneri simple sau multiple a dispozitivelor, materialelor
i/sau extractelor lor pe o perioad de timp de cel puin 24 h, la cel mult 10% din durata de
via a animalului de experien (de exemplu, pn la 90 zile).


7. Genotoxicitate
Aceste teste utilizeaz culturi de celule de mamifere sau nemamifere, sau altfel de tehnici pentru
a deternima mutaiile genetice, modificri ale numrului i structurii cromozomiale precum i
alte efecte toxice asupra ADN-ului sau genelor, provocate de ctre dispozitivele, materialelor
i/sau extractele lor.




TESTAREA BIOLOGIC A BIOMATERIALELOR


(A). Teste de evaluare iniial
8. Implantare
Aceste teste evalueaz efectele patologice locale asupra esuturilor vii, att la nivel macroscopic
ct i microscopic, ale unui eantion de material sau produs finit plasat sau implantat ntr-o zon
de implantare sau un esut corespunztor pentru aplicaia prevazut. Se convine ca aceste teste s
fie adaptate zonei i duratei de implantare. Pentru un material, aceste teste sunt echivalente celor
de toxicitate subacut, dac se studiaz i efectele sistemice.

9. Hemocompatibilitate
Aceste teste evalueaz, pe un model sau sistem corespunztor, efectele dispozitivelor sau
materialelor n contact cu sngele, asupra sngelui sau componentelor sanguine. Testele specifice
de hemocompatibilitate pot fi, de asemenea, imaginate pentru a simula geometria, condiiile de
contact i dinamica fluidelor, n dispozitivul sau materialul supus aplicaiilor clinice. Testele de
hemoliz determin gradul de liz a globulelor roii i eliberarea hemoglobinei provocat de
ctre dispozitiv, materiale i/sau extractele lor in vitro.




TESTAREA BIOLOGIC A BIOMATERIALELOR


(B). Teste de evaluare complementar







1. TOXICITATE CRONIC
Aceste teste determin efectele unei sau mai multor expuneri ale dispozitivelor, materialelor
i/sau extractelor lor pe durata unei perioade de cel puin 10% din durata de via a animalului de
experien (de exemplu, peste 90 de zile pentru obolan). Se convine ca aceste teste s fie
adaptate zonei de aplicare i duratei de expunere.




TESTAREA BIOLOGIC A BIOMATERIALELOR


(B). Teste de evaluare complementar







2. CARCINOGENITATE
Aceste teste determin potenialul onconogen al dispozitivelor, materialelor i/sau extractele lor,
n urma unei sau mai multor expuneri sau contacte pe o perioad de timp acoperind toat viaa
animalului supus testrii. Aceste teste pot fi concepute n scopul examinrii toxicitii cronice i
caracterului oncogen n cursul unui experiment. Testele de carginogenitate nu sunt n general
efectuate dect dac exist rezultate care converg i care provin din alte surse. Se convine ca aceste
teste s fie adaptate zonei de aplicare i duratei de expunere.



TESTAREA BIOLOGIC A BIOMATERIALELOR


(B). Teste de evaluare complementar







3.TOXICITATEA ASUPRA REPRODUCERII I DEZVOLTRII (CRETERII)
Aceste teste evalueaz efectele poteniale ale dispozitivelor, materialelor i/sau extractele lor
asupra funciei de reproducere, dezvoltrii embrionare (teratogenitate) i dezvoltarea prenatal
i postnatal precoce. Testele de toxicitate sau testele biologice asupra reproducerii i creterii
nu sunt n general efectuate dect n cazul unde dispozitivul are o posibilitate de impact asupra
capacitii de reproducere a subiectului. Trebuie s se in seama de locul de aplicare a
dispozitivului.



TESTAREA BIOLOGIC A BIOMATERIALELOR


(B). Teste de evaluare complementar









4. BIODEGRADARE
Atunci cnd exist posibilitatea de degradare i/sau resorbie, aceste teste pot pune n
eviden procesele de absorbie, distribuie, biotransformare i eliminare a substanelor
extractibile i produsele de degradare a dispozitivelor, materialelor i/sau extractelor
lor.



TESTAREA BIOLOGIC A BIOMATERIALELOR


Medii de testare utilizate pentru simularea mediului uman
Medii anorganice
Cercetrile folosind medii de testare pur anorganice reprezint cele mai simple teste i ajut cel puin la nelegerea
comportamentului degradrii a biomaterialelor metalice. Totui, poate fi fcut o evaluare preliminar cu privire la
rezistena la coroziune pitting, urmat de o selecie a materialelor.
Mediile anorganice uzuale sunt urmtoarele:
soluie izotonic de NaCl: 9 g l
-1
NaCl;
soluie fiziologic Ringer, pH 6,7 (Roche, 1993):
8,00 g l
-1
NaCl
0,20 g l
-1
CaCl
2

0,20 g l
-1
KCl
1,00 g l
-1
NaHCO
3

soluia fiziologic Ringer este adesea folosit n versiunea acid (pH mai mic de 2,5 prin adugarea de HCl) pentru a simula
scderea pH-ului cauzat de procesele inflamatorii.
soluie salin echilibrat Hanks, pH 7,4 (Hanks i Wallace, 1949):
0,185 g l
-1
CaCl
2

0,40 g l
-1
KCl
0,06 g l
-1
KH
2
PO
4

0,10 g l
-1
MgCl
2
6H
2
O
0,10 g l
-1
MgSO
4
7H
2
O
8,00 g l
-1
NaCl
0,35 g l
-1
NaHCO
3

0,48 g l
-1
Na
2
HPO
4

1,00 g l
-1
D-glucoza
o soluie similar cu concetraii reduse de ioni Ca i HPO a fost propus de asemenea de Hanawa i Ota (1991).



TESTAREA BIOLOGIC A BIOMATERIALELOR


Medii anorganice-organice
Saliv artificial (Elagli, 1993);
Ser bovin (Browne i Gregson, 1994; Good, 1996);
Mediul Eagle modificat (MEM) (Lacy, 1996);
Mediul Eagle modificat de Dulbecco (DMEM) (Lacy, 1996).

Linii de celule i culturi de organe
Cercetrile pe linii de celule i culturi de organe sunt situate la grania dintre testele de degradare i cele de
biocompatibilitate. Experimentele de acest tip reprezint o legtura important ntre analizele clasice in vitro i
cele in vivo. S-a ajuns la concluzia c analizele pe culturi de organe sunt mai relevante dect analizele pe linii de
celule.

Relevana rezultatelor acestor tipuri de teste este puternic influenat de tipul liniilor de celule folosite. Liniile
permanente au avantajul comparrii rezultatelor din diferite laboratoare fr nici o dificultate .

Culturile de celule primare au avantajul proprietilor mult mai aproapiate de cele ale biosistemului complet. De
aceea, rezultatele sunt i mai elocvente. Recent, a fost observat o deschidere mai mare spre folosirea culturilor de
celule primare. Tabelul 3.3 arat o imagine sumar a acestor studii recente. Totui, aceste cercetri arat cteva
dezavantaje, cum ar fi acela c potenialul redox al biosistemului complet nu este acelai cu cel din culturi.

Evalurile experimentelor pe linii celulare pot fi fcute n moduri diferite. n timp ce n anumite cazuri sunt
analizate doar forma i adeziunea celulelor, n alte cazuri se studiaz i comportamentul de proliferare i
modificare a structurii organelor, dar i evaluarea sintezei proteinelor.


TESTAREA BIOLOGIC A BIOMATERIALELOR


Culturi de celule
permanente
Caracteristici
MG 63 Asemntoare celulelor osteoblastice umane (Martin, 1995)
Balb/c 3T3 Celule fibroblaste (Wataha, 1993; Richards, 1995; Grant 1996)
MOLT 4 Asemntoare celulelor fibroblaste umane (Berstein, 1992)
X3T3 F10 Keratinocite (Lacy, 1996)
Vedere generala a liniilor de celule permanente folosite frecvent

TESTAREA BIOLOGIC A BIOMATERIALELOR


Culturi de celule primare Aplicare
Celule umane de mduv osoas
Rspunsul la produii de coroziune Co-Cr
Fixare i adeziune
Celule umane derivate din os Fixarea iniial a celulelor pe diferite materiale
Celule umane fibroblaste gingivale
Structura i chimia suprafeelor de titan
Topografia suprafeei de titan
Efecte comparative ale Ninitolului, Ni i Ti
Rspunsul la diferii cationi metalici
Celule osteoblaste din partea de sus a
craniului de obolan
Expresia genelor pentru fenotipul celular indus de
proteine pe Ti6Al4V, hidroxiapatit i polistiren
Caracterizarea suprafetelor implanturilor de titan
Celule epiteliale gingivale de obolan Efectele procedurii de scalare pe titan
Celule fibroblaste de obolan
Distrugerea celulelor cauzat de contactul direct cu
aliaje
Celule de mduva osoas de obolan
Interaciunea cu titanul
Potenialul osteogenic al acoperirilor Ca/P
Vedere general a liniilor de celule primare folosite frecvent