CERCETAREA I DEZVOLTAREA UNUI NOU

MEDICAMENT

I. CREAREA, PRODUCIA, COMERCIALIZAREA

cercetarea i dezvoltarea unei noi entiti moleculare n scopul
obinerii unui nou candidat terapeutic;
realizarea n faz pilot a noului medicament;
producia industrial a noului medicament;
condiionarea;
comercializarea.

II. ADMINISTRAREA PROPRIU-ZIS

administrarea la bolnavi;
exercitarea efectului terapeutic.

DEZVOLTAREA UNUI NOU MEDICAMENT

Noi entitati moleculare

- descoperire
- purificare

Optimizare moleculara
- stabilitate fizico-chimica
- afinitate maxima pentru receptori

Studii Preclinice
- Preformulare
* caracterizare fizico-chimica
* caracterizare farmaceutica
* caracterizare toxicologica
- Formulare
* obtinerea de forme farmaceutice
- Optimizare
* optimizarea propietatilor farmacologice
* optimizarea formei farmaceutice

Analiza dosarelor preclinice de catre

Comisia Medicamentului
pentru avizul studiilor clinice

Studii Clinice
* faza I
* faza II
* faza III

Autorizarea si Inregistrarea noului Medicament

de catre
Ministerul Sanatatii

Studii de Postmarketing
- farmacovigilenta

ROLUL FARMACISTULUI N INDUSTRIA DE

MEDICAMENTE

Dirijeaz serviciile de producie

9 seciile de fabricare
9 seciile de condiionare
9 seciile de ambalare
Dirijeaz serviciile de Cercetare-Dezvoltare
9 crearea de noi substane medicamentoase
9 elaborarea i mbuntirea formelor farmaceutice
9 elaborarea de noi metode de fabricare
9 elaborarea de noi metode de control
9 realizarea de studii farmacologice
9 realizarea de studii toxicologice
Dirijeaz serviciile de aprovizionare i depozitare
9 documentare bibliografic
9 documentare statistic
9 documentare informatic
Dirijeaz serviciul de distribuie
Dirijeaz i particip la campania publicitar a unui
medicament

STUDIILE PRECLINICE
I. PREFORMULAREA
9 controlul fizico-chimic al noii entiti moleculare
proprieti fizice solubilitate, dimensiuni ale particulelor,
starea cristalin, forme polimorfice,
proprieti chimice stabilitate, influena factorilor externi
(lumin, oxigen, temperatur, umiditate, microorganisme, etc).
9 proprieti farmacologice
farmacocinetic (absorbie, distribuie, metabolizare,
eliminare),
activitate terapeutic (loc de aciune, mecanism de aciune),
biodisponibilitate.
9 proprieti toxicologice
toxicitate acut, cronic,
efecte secundare,
teratogenitate,
mutagenitate,
cancerogenitate,
incompatibiliti.

STUDIILE PRECLINICE
II. FORMULAREA
9

formularea farmaceutic
compoziia calitativ i cantitativ a componenilor inclui n
forma farmaceutic,
stabilirea substanelor auxiliare ce intr n componena formei
farmaceutice,
cantitile exacte ale componenilor.

alegerea recipientului de condiionare primar i secundar

tipul de recipient, calitile acestuia, rezistena,
modul de ambalare, inscripionarea, identificarea.

procesul tehnologic de obinere a forme farmaceutice

etapa I domeniul experimental iniial (1 kg) realizarea la
scar de laborator,
etapa II domeniul redus selecionat (1 kg) fabricarea la
scar industrial a 3 loturi de produse,
etapa III domeniul selecionat la scara de 1 kg stabilete
formulele cantitative,
etapa IV domeniul selecionat la scara de 7 kg formula
obinut anterior este reprodus la scar mai mare,
etapa V domeniul selecionat la scara pilot de 50 kg
reproducerea la scar mult mai mare.

controlul de calitate
controlul materiilor prime,
norma de calitate pentru produsul finit.

STUDIILE PRECLINICE
III. OPTIMIZAREA
9 optimizarea formulrii
modularea proprietilor bio-fizico-farmaceutice ale
substanei active,
adaptarea formulrii i a formei farmaceutice realizate.
9 optimizarea biodisponibilitii
modularea profilului de eliberare optim a substanei active,
modularea compartimentelor organismului

REZULTATELE CERCETRILOR PRECLINICE SE

CONCRETIZEAZ N 3 DOSARE
1.
2.
3.

DOSARUL FARMACEUTIC
DOSARUL FARMACOLOGIC PRECLINIC
DOSARUL TOXICOLOGIC PRECLINIC

STUDIILE CLINICE
FAZA I
9 se realizeaz pe voluntari sntoi, 20-80 persoane
9 urmrete stabilirea factorilor farmacologici la nivelul
organismului uman
FAZA II
9 se realizeaz pe sute de bolnavi atent selectai,
9 stabilesc eficacitatea candidatului terapeutic,
9 precizeaz schema de posologie,
9 evideniaz eficacitatea candidatului terapeutic.
FAZA III
9 studiile se realizeaz prin participarea mai multor centre medicale,
pe 500-5000 de bolnavi.
9 urmresc eficacitatea i acceptabilitatea noului candidat
terapeutic.
FAZELE CERCETRII CLINICE ALE CANDIDAILOR
TERAPEUTICI
Fazele
cercetrii
clinice
Faza I
Faza II
Faza III

Scopul

Numr de
pacieni

Durata studiilor

Sigurana
Eficacitatea i sigurana
pe termen scurt
Sigurana i eficacitatea global,
Evaluarea risc-beneficiu

20 100
cteva sute

cteva luni
cteva luni 2 ani

Rata de
succes
(%)
70 75
28 33

sute mii

1 4 ani

~ 25

COMISIA MEDICAMENTULUI SE PRONUN

ASUPRA AUTORIZAIEI DE FABRICARE
MINISTERULUI SNTII DECIDE ELIBERAREA
AUTORIZAIEI DE FABRICARE I
CERTIFICATUL DE NREGISTRARE

FAZA IV
9 continuarea studiilor clinice dup introducerea pe pia a noului
medicament, realizndu-se pe un numr foarte mare de pacieni.
9 Sunt studii de farmacovigilen ce urmresc:
eventuale interaciuni cu alte medicamente i alimente,
neevideniate n studiile clinice,

apariia altor reacii adverse, a unor efecte toxice,

neevideniate n studiile clinice.

REALIZAREA N FAZA PILOT A MEDICAMENTELOR

9
9
9
9
9
9

Serviciul pilot urmrete:

realizarea unui medicament cu aceleai norme de calitate;
detecteaz i elimin cauzele de eroare;
descoper operaiile inaplicabile pentru acel medicament;
optimizeaz procesul n vederea creterii randamentului;
optimizeaz procesul n vederea reducerii preului de cost;
amelioreaz condiiile de lucru i cele de calitate, dac produsul
este deja n fabricaie.
REALIZAREA PRIMELOR LOTURI (ARJE)
DE MEDICAMENTE

Se realizeaz la nivelul studiului pilot

Lotul 1
Se corecteaz formula obinut n centrul de cercetare, realizndu-se o
formul optim pentru scara pilot;
Lotul 2 i 3
Se obine formula industrial i se stabilete procedeul industrial de
obinere al acelui medicament;
Lotul 4 i 5
Se aplic formula i procedeul industrial de fabricare al
medicamentului respectiv.
ROLUL SERVICIULUI PILOT
INTRODUCEREA N PRODUCIA INDUSTRIAL A UNUI
NOU PRODUS FARMACEUTIC;
MBUNTIREA UNOR PROCESE TEHNOLOGICE DEJA
EXISTENTE;
EVALUAREA INFLUENEI UNUI ECHIPAMENT
(INSTALAII) DE PRODUCIE.

ELEMENTE ALE CALITII MEDICAMENTELOR

4M
MEN (PERSONAL)
MATERIALS (MATERIALE)
MACHINERY (ECHIPAMENTE, UTILAJE,

INSTALAII)

METHODS (TEHNOLOGIA DE FABRICARE)

STRUCTURAREA NTREPRINDERILOR
FARMACEUTICE

ntreprinderi productoare de materii prime

prin sinteze i semisinteze chimice;

prin procese fermentative;
prin transformarea substanelor naturale;
prin tehnici de inginerie genetic.

ntreprinderi productoare de substane auxiliare

ntreprinderi ce realizeaz condiionarea i ambalarea
produselor farmaceutice plecnd de la substanele vrac.

ORGANIGRAMA UNEI NTREPRINDERI DE

MEDICAMENTE

PREZENTAREA GENERAL A PROCESELOR

FERMENTATIVE

ETAPELE UNUI PROCES BIOTEHNOLOGIC

pregtirea inoculului,
pregtirea mediilor de cultur i sterilizarea lor,
fermentaia biochimic,
filtrarea soluiei native (biomasa),
separarea i purificarea produsului de biosintez.

REPREZENTAREA SCHEMATIC A UNUI PROCES DE BIOSINTEZ

TREAPTA I

Materii
prime

Prelucrare fizic
TREAPTA II

Prelucrare biochimic

TREAPTA III

Prelucrare fizic

Produs de
biosintez

TIPURI DE MICROORGANISME

PROCARIOTE

Bacterii

EUCARIOTE

Drojdii

Fungi

Alge

VIRUSURI

Protozoare

Actinomicete

PROCEDEE DE FERMENTAIE
n funcie de modul de realizare a culturilor microbiene:
fermentaii n suprafa,
fermentaii n profunzime.
n funcie de modul de funcionare a instalaiei de fermentaie:
fermentaii discontinue,
fermentaii continue.
n funcie de necesarul de oxigen:
fermentaii aerobe,
fermentaii anaerobe.

FACTORI CE INFLUENEAZ EFICIENA PROCESELOR

DE FERMENTAIE
conformaia genetic a tulpinii productoare de principiu activ,
folosirea unui echilibru raional ntre componenii mediului de
cultur dozarea corect a raportului de glucoz/lactoz, asigurarea
necesarului optim de sruri minerale, de azot, etc,
dozarea corect a precursorilor,
asigurarea necesarului de oxigen,
meninerea temperaturii i a pH-ului la valorile prescrise.

COMPOZIIA MEDIULUI DE CULTUR

1. apa,
2. aerul oxigenul dizolvat n mediul de cultur,
3. surse de carbon i energie:
- monozaharide,
- dizaharide,
- polizaharide,
- alcooli,
- acizi carboxilici,
- grsimi i acizi grai,
- hidrocarburi.
4. surse de azot organic,
5. surse de azot anorganic,
6. surse de sruri minerale,
7. surse de oligoelemente i microelemente,
8. precursori,
9. vitamine.

BIOREACTOARELE N CARE AU LOC

FERMENTAIILE BIOCHIMICE
inoculator capacitate de cteva sute de litri
aici are loc inocularea mediului de cultur cu inocul
intermediar capacitate de mii de litri (1500-2000 l)
aici are loc creterea i dezvoltarea microorganismului
regim capacitate de 50-100 m3
aici are loc elaborarea de principiu activ.

TIPURI DE RINI SCHIMBTOARE DE IONI

cationii slab acizi (Amberlit IRC-50, KB-4, KB-4P-2)
conin grupri carboxilice obinute prin copolimerizarea
acidului metacrilic cu divinilbenzen;
cationii puternic acizi (Amberlit IR-124, Dowex 50, SBS-1)
au grupri sulfonice obinute prin copolimerizarea stirenului cu divinilbenzen;
anionii slab bazici (Amberlit IR-2V, EDE-10, AN-2F)
au grupri aminice i se obin din condensarea aminelor aromatice cu
formaldehida;
anionii puternic bazici (Amberlit IRA-400, IRA-410, PEK)
au grupri cuaternare de amoniu i se obin prin copolimerizarea stirenului cu
divinilbenzenul, n care se introduce o grupare aminic teriar.

ETAPELE PURIFICRII I SEPARRII CU SCHIMBTORI

DE IONI
1.
2.
3.
4.
5.

sorbia pe schimbtori de ioni;

eluia streptomicinei sub form de sulfat;
purificarea soluiei de sulfat de streptomicin;
concentrarea eluatului de streptomicin la 350C i 40 mm col Hg;
atomizarea soluiei concentrate i ambalarea produsului.
MECANISMUL SCHIMBULUI IONIC

1.
2.
3.

Str NH2 + HOH Str N+H3] HO

K COO-Na+ + Str N+H3] HO K COO-N+H3 Str + NaOH
K COO-N+H3 Str + H2SO4 K COO-H+ + Str N+H3] HSO4A NH2 + Str N+H3] HSO4- A N+H3] HSO4- + Str NH2

REGENERAREA COLOANELOR

K COO-H+ + NaOH K COO-Na+ (parial)

A N+H3] HSO4- + NaOH A NH2 + Na2SO4 + H2O

APARATURA UTILIZAT N BIOTEHNOLOGIE

FERMENTATOR VERTICAL CU AMESTECARE MECANIC

SCHEMA PROCESULUI DE FERMENTATIE N CELE 3

TREPTE

INSTALAIA DE STERILIZARE A MEDIULUI DE CULTUR

LA 1200C

INSTALAIE DE STERILIZARE A MEDIULUI DE CULTUR

LA 1400C

INSTALAIE DE PURIFICARE A AERULUI

FILTRUL MILLIPORE

FILTRUL LUMNARE

NSMNAREA ASEPTIC A SUSPENSIEI DE SPORI

abur

aer steril

vas suspensie de spori

vas de condens
fermentator

FILTRUL CELULAR ROTATIV

FILTRUL PRES CU RAME I PLCI

COLOANE CU SCHIMBTORI DE IONI

EXTRACTOR CENTRIFUGAL LUWESTA

EXTRACTOR CENTRIFUGAL PODBIELNIAK

ANTIBIOTICE DE BIOSINTEZ
ANTIBIOTICE OBINUTE PRIN BIOSINTEZ
Nr.
crt.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.

Microrganismul
productor
Fungi
Fungi
Fungi
Bacterii
Bacterii
Bacterii
Actinomicete
Actinomicete
Actinomicete
Actinomicete
Actinomicete
Actinomicete
Actinomicete
Actinomicete
Actinomicete
Actinomicete

Denumirea
antibioticului
Peniciline
Cefalosporine
Griseofulvina
Bacitracina
Gramicidina
Polimixine
Aminoglicozide
Cloramfenicolul
Macrolide
Rifamicine
Tetracicline
Antifungice polienice
Novobiocina
Lincomicina
Cicloserina
Carbapeneme

PENICILINE PRODUSE PRIN BIOSINTEZ

Nr.
crt.

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.

Denumirea
Benzilpenicilin
2-Pentenilpenicilin
n-Heptilpenicilin
Fenoximetilpenicilin
p-Hidroxibenzilpenicilin
Aliltiometilpenicilin
p-Aminobenzilpenicilin
D(-)4-amino-4carboxibutipenicilin

Penicilina
G
F
K
V
X
O
T
N

Catena lateral
C6H5CH2
CH3CH2CH=CHCH2
CH3(CH2)5CH2
C6H5OCH2
p HOC6H4CH2
CH2=CHCH2SCH2
p NH2C6H4CH2
COO
|
CH(CH2)3
|
NH3+

COMPOZIIA MEDIULUI DE CULTUR PENTRU

BIOSINTEZA PENICILINEI G
1. glucoza surs de carbon i energie, necesar creterii
microorganismului Penicillium crysogenum;
2. lactozasurs de carbon i energie, pentru formarea penicilinei G;
3. extract de porumb surs de aminoacizi necesar creterii
celulare;
4. ulei de floarea soarelui surs de carbon i efect antispumant;
5. carbonat de calciunecesar meninerii pH-ului mediului;
6. microelemente necesare creterii microorganismului
Penicillium crysogenum;
7. acid fenilacetic precursor n sinteza penicilinei G.
PARAMETRII PROCESULUI DE FERMENTAIE
BIOCHIMIC A PENICILINEI G
Nr.
crt.
1.
2.
3.

Etapa de
fermentaie

Temp.
(0C)

Agitarea
(rot/min)

Debit aer
(l aer/lmediumin)

Presiunea
(atm)

Durata
procesului
(h)

Inoculator
Intermediar
Regim

261
261
261

270
170
120

1,0
1 1,2
0,6 1,0

1,2-1,3
1,2-1,3
1,2-1,3

30 - 40
20 - 40
90 - 120

SCHEMA DE PRINCIPIU LA EXTRACIA PENICILINELOR

NaH2PO4/H2 O

Sol.nativ
BuOAc
H2 SO4

pH=7-7,2
Sol. de Pen.

BuOAc (pH=2-2,5)

II

H2 SO4 5%

Sol.org.

Sol. de Pen.

III

Conc. de Pen.

(pH=2)

Sol.mum (apoas)

Sol.mum (organic)

epuizat

epuizat

Sol.mum (apoas)
epuizat

METODE DE OBINERE A ACIDULUI

6-AMINOPENICILANIC (A6AP)

sinteza total a acidului 6-aminopenicilanic;

biosinteza direct, folosind culturi de Penicillium chrysogenum;
hidroliza chimic a penicilinelor naturale;
hidroliza enzimatic a penicilinelor naturale.

PRODUCTORI DE PENICILINACILAZE
fungi: genul Aspergillus, Cephalosporium;
drojdii;
actinomicete;
bacterii: E. coli, Acetobacter aerogenes, Proteus, Pseudomonas.

PARAMETRII DE FERMENTAIE LA E. COLI

Faza de
fermentaie
Inoculator
Intermediar
Regim

Temp. pH Presiunea
(atm)
(0C)
301
8
1,8
301
8
1,5
301
8
1,5

Aeraia
(l aer/l mediumin)
1
1
1-1,2

Agitarea
(rot/min)
210
140
110

Conc masei
(mg/l)
3,05
3,1
4,1

Timp
(h)
18-20
18-20
20

Penicilinacilazele se utilizeaz la obinerea A6AP astfel:

1. tratarea unei soluii de penicilin natural cu celule vii de E. coli
(ca mas bacterian);
productivitate: 0,5 kg A6AP/kg celule vii, = 60%
2. trecerea soluiei de penicilin natural peste o matrice solid n care
sunt imobilizate celule vii de E. coli;
productivitate: 50 kg A6AP/kg celule imobilizate, = 80%
3. prepararea unor enzime purificate i imobilizate pe suport, ce sunt
utilizate ca atare la hidroliza unei soluii de penicilin natural;
productivitate: 250 kg A6AP/kg enzim, conversie > 98%,
puritate > 95%, 85%.

DATE TEHNOLOGICE PRIVIND HIDROLIZA ENZIMATIC

A BENZILPENICILINEI
Productor
de enzim
E. coli

Tip de
enzim
Celule
imobilizate
Enzim pur
imobilizat

pH optim
8,5

Temperatur
( 0C)
40

7-7,5

35

Substrat
Penicilin G
Penicilin G
sare K/Na

Randament
(%)
80
82-86

Fluxul tehnologic la hidroliza enzimatic a

penicilinei G sare de potasiu

ANTIBIOTICE MACROLIDE DE BIOSINTEZ

Nr.
crt.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.

Denumire
antibiotic
Josamicina
Spiramicina
Oleandomicina
Carbomicina
Leucomicina
Virginamicina
Metimicina
Neometimicina
Picromicina

Microorganism productor
Streptomyces narbonensis var. josamyceticus
Streptomyces amfobaciens
Streptomyces antibioticus
Streptomyces halstedii
Streptomyces kitasatoensis Hata
Streptomyces virginiae
Streptomyces venezuelae
Streptomyces venezuelae
Actinomyces spp.

ANTIBIOTICE MACROLIDE DE SEMISINTEZ

Nr.
crt.
1.
2.
3.
4.
5.

Denumire antibiotic
Azitromicina
Claritromicina
Diritromicina
Roxitromicina
Troleandomicina, etc

PROPIONAT DE ERITROMICINA
CH3

CH3

HO
H3C
HO

O
O
C2 H 5

CH3

OH
O
CH3

CH3
O

O
H3 C
H3 CO

OH

CH3

1.
2.
3.

Eritronolid format din:

macrociclu lactonic,
cladinoza o glucid,
D-dezoxamina o glucid

H3C

CO CH2 CH3
CH3
CH3

CLASIFICAREA ANTIBIOTICELOR AMINOGLICOZIDICE

Generaia

Denumire antibiotic
Streptomicina
Dihidrostreptomicina
Neomicinele
Paromomicina
Kanamicina
Spectinomicina
Gentamicina
Ribostamicin
Micronomicina
Tobramicina
Fortimicina
Sisomicina
Dibekacina
Isepamicina
Netilmicina
Amikacina
Trospectomicina

Generaia I
(de biosintez)

Generaia II
(de biosintez)

Generaia III
(de semisintez)

Anul descoperirii
1942 1946
1946 1946
1949 1956
1956
1957
1959
1963
1970
1973
1975
1976
1977
1972
1975
1976
1977
1983

SULFAT DE STREPTOMICIN
NH2
C NH
HO
HN C HN
NH2
HO
Streptidina

NH
O

CH
H C

OH
O

O HC C OH

HN C H
H3C H C OH

CH
CH3
Streptoza

CH

HO C H

. 3 H SO
2

CH
CH2 OH
2

N-metil-L-glucozamina

Componente bazice:
1.streptidina 1,3 diguanidino-tetrahidroxi-ciclohexan,
2.streptobiozamina dizaharid nenatural format din: a) streptoz
b) N-metil-L-glucozamina

PARAMETRII PROCESULUI DE BIOSINTEZ A

STREPTOMICINEI
Faza de
fermentaie
Inoculator
Intermediar
Regim

pH
6,24 7,78
7,78 8,1
8,1 8,5
8,89

Coninutul
n zahr
(%)
17,7 13,7
13,7 3,9
3,9 0

Producerea
de antibiotic

Timpul
(h)

nu se produce
ncepe
nceteaz

48-50
50-90
Total : 130
(6 zile)

RIFAMICINE

Nr.
crt
1.
2.
3.
4.
5.

Denumire

Rifamicina B
Rifamicina O
Rifamicina S
Rifamicina X
Rifamicina SV

-OCH2-COOH
-(1,3-dioxolan-4-on)-2-yl
=O
=N+=N-OH

-OH
=O
=O
=O
-OH

ANTIBIOTICE POLIPEPTIDICE NATURALE

Nr.
crt.
1.
2.
3.
4.
5.
6.

Denumire
antibiotic
Actinomicina
Bacitracina
Bleomicina
Capreomicina
Enduracidina
Enviomycina

7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.

Fusafungina
Gramicidinele
Polimixinele
Ristocetina
Teicoplanina
Tirotricina
Tyrocidina
Vancomicina
Viomicina

Microorganism productor
Streptomyces spp.
Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis
Streptomyces verticillus
Streptomyces capreolus
Streptomyces fungicidicus
Streptomyces griseoverticillatus var.
tuberacticus
Fusarium spp.
Bacillus brevis
Bacillus polymyxa
Nocardia lurida
Actinoplanes teichomyceticus
Bacillus brevis
Bacillus brevis
Streptomyces orientalis
Streptomyces vinaceus, Streptomyces
floridae, Streptomyces puniceus

BACITRACINA A

POLIMIXINA E1 (COLISTIN)

POLIMIXINA B1

ANTIBIOTICE ANTIMICOTICE DE
BIOSINTEZ
NISTATINA A1

micozamin

NATAMICINA

macrociclu lactonic (25 at.C)

micozamin

AMFOTERICINA B

macrociclu lactonic (37 at.C)

micozamina

GRISEOFULVINA

ANTIBIOTICE ANTICANCEROASE DE
BIOSINTEZ

CLASIFICAREA ANTIBOTCELOR ANTICANCEROASE DE

BIOSINTEZ
Nr.
crt.
1.

2.

Clasa
Actinomicine

Denumirea
antibioticului
Actinomicina C3

Microorganismul
productor
Streptomyces spp.
Streptomyces parvullus

Antracicline

Dactinomicina
(actinomicina C1)
Daunorubicina
Doxorubicina
Carminomicina
Nogalamicina

3.

Grupul acidului
aureolic

4.
5.

Bleomicine
Mitomicine

6.

Diverse

Aclacinomicinele
Plicamicina

Streptomyces peucetius
Streptomyces
caeruleorubidis
Streptomyces peucetius var.
caesius
Actinomadura carminata
Streptomyces nogalater

Streptozocina
Acivicina

Streptomyces galilaeus
Streptomyces plicatus;
Streptomyces argillaceus
Streptomyces olivoreticuli
Streptomyces griseus
Streptomyces verticillus
Streptomyces caespitosus
Streptomyces ardus;
Streptomyces verticillatus
Streptomyces achromogenus
Streptomyces svicens

Neocarzinostatina

Streptomyces carzinostaticus

Olivomicinele
Cromomicinele
Bleomicina
Mitomicina
Porfiromicina

Observaii
P.f.
(Germania)
P.f.
(SUA)
P.f.
P.f.
n studiu
clinic
n studiu
clinic
P.f.
P.f.
(SUA)
P.f. (Rusia)
P.f. (Japonia)
P.f.
P.f.
n studiu
clinic
P.f.
n studiu
clinic
n studiu
clinic

DACTINOMICINA
(ACTINOMICINA D; ACTINOMICINA C1)

ANTRACICLINE

Antraciclina
Daunorubicina
Doxorubicina
Carminomicina

R1
OCH3
OCH3
OH

R2
H
OH
H

MITOMICINE

Mitomicine
Mitomicina A
Mitomicina B
Mitomicina C
Mitomicina D
Porfiromicina

X
CH3O
CH3O
NH2
NH2
NH2

Y
H
CH3
H
CH3
CH3

R
CH3
H
CH3
H
CH3

PLICAMICINA
(sin: MITRAMICINA, ACIDUL AUREOLIC)

olivoz

olivoz

aglicon

micaroz

BLEOMICINA

Bleomicina
Bleomicina A2

R
NH(CH2)3S+(CH3)2

Bleomicina B2

NH(CH2)4NHCNH2
||
NH

ANTITUBERCULOASE DE BIOSINTEZ
CICLOSERINA

CAPREOMICINA

Capreomicina
Capreomicina I A
Capreomicina I B

R
OH
H

AMINOACIZI DE UZ FARMACEUTIC DE
BIOSINTEZ
METODE DE OBINERE A UNOR AMINOACIZI
Nr.
crt.

Aminoacidul
produs

1.
2.
3.
4.
5.
6.

Acid aspartic
Alanin
l-DOPA
Izoleucin
Triptofan
Serin

7.

Acid glutamic

8.

Lizin

9.

Valin

Microorganismul
productor

Tipul de
fermentaie

E. coli
Pseudomonas dacunhae
Erwinia herbicola
Bacillus subtilis
Hansenulla anomala
Corynebacterium
glyciniphilum
Corynebacterium
glutamicum, Micrococcus
glutamicus
Corynebacterium
glutamicum
Corynebacterium
glutamicum

Proces
enzimatic
simplu
Fermentaie
cu precursori

Fermentaie
direct

CANTITILE DE ACID L-GLUTAMIC OBINUTE

PRIN FERMENTAIA UNOR MICROORGANISME
Nr
Crt

Tulpina productoare

1.
2.
3.
4.

Corynebacterium glutamicum
Brevibacterium spp.
Corynebacterium alkanolyticum
Brevibacterium lactofermentum

Cantitatea de acid
L-glutamic
g/l
5060
60
40
6070

Sursa de carbon
utilizat
glucoz 100 g/l
etanol
nparafine
glucoz 1012%

ACIDUL L-GLUTAMIC

MICROORGANISME PRODUCTOARE DE ACID

GLUTAMIC
Nr.
crt.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.

Tulpina productoare
Corynebacterium glutamicum
Brevibacterium fluorum
Brevibacterium lactofermentum
Brevibacterium divaricatum
Brevibacterium amoniogenes
Brevibacterium thiogenitalis
Microbacterium amoniophilum
Corynebacterium lilium
Corynebacterium callunae
Corynebacterium herculis
Corynebacterium melassecola
Corynebacterium alkanolyticum

HORMONI STEROIZI DE BIOSINTEZ

STRUCTURA HORMONILOR STEROIZI

18
11

19
2
3

A
4

10
5

B
6

12

13
14

R
17

16
15

8
7

LOCURI DE BIOCONVERSIE A MOLECULELOR

STEROIDICE

PREPARAREA CORTIZONULUI DIN PROGESTERON

21

CH3

CH3

CH3

hidroxilare
microbian

cteva etape
chimice

progesteron

11--hidroxi-progesterona

CH2OH
CH3

OH

11

CH3

cortizon

PREPARAREA HIDROCORTIZONULUI DIN

CORTEXOLON

CH2OH

CH2OH
CH3
CH3

OH

HO
CH3

hidroxilare
microbian

CH3

OH

SINTEZA PROGESTERONULUI DIN DIOSGENIN

(SINTEZA MARKER)

SCHEMA GENERAL DE SINTEZ A HORMONILOR

STEROIZI DIN COLESTEROL I STIGMASTEROL

OBINEREA ESTRONEI DIN COLESTEROL

CH3

CH3
CH3

CH3

Agrobacter
simplex

colesterol

androstendion

CH3

estrona

H2
Pd

HO

HO

PREPARAREA ESTRADIOLULUI

CH3

CH3

O
reducere
fermentativ

HO

HO
estrona

estradiol

PREPARAREA TESTOSTERONULUI DIN

PROGESTERON

OH

METANDROSTENOLON

CH3
CH3

OH

CH3

CH3

oxidare biochimic
-2H

OH

CH3

O
metiltestosteron

metandrostenolon

FLUOROSTEROIZI

CH3

VITAMINE DE BIOSINTEZ
METODE DE OBINERE A VITAMINELOR
Nr.
crt.
1.
2.
3.

Vitamina
-caroten
(provitamina A)

4.

Vitamina A
Ergosterol
(provitamina D2)
Vitamina D

5.

Vitamina E

6.

Vitamina F

7.
8.
9.

Vitamina K
Vitamina B1
Vitamina B2

10.

Vitamina B6

11.
12.
13.

Vitamina B12
Vitamina PP
Vitamina C

14.

Acid pantotenic

15.
16.

Acid folic
Biotin

Metoda de
obinere
Extracie
Sintez chimic
Biotehnologie
Sintez chimic
Sintez chimic
Biotehnologie
Sintez chimic
Biotehnologie
Extracie
Sintez chimic
Biotehnologie
Extracie
Sintez chimic
Biotehnologie
Sintez chimic
Sintez chimic
Sintez chimic
Biotehnologie
Sintez chimic
Biotehnologie
Biotehnologie
Sintez chimic
Sintez chimic i
biotehnologie
(mecanism mixt)
Sintez chimic
Biotehnologie
Sintez chimic
Sintez chimic
Biotehnologie

Cantitile de vitamine din grupul B obinute prin

cultivarea bacteriilor propionice pe medii sintetice

Nr.
crt

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.

Vitamina

Tiamin
Riboflavin
Piridoxin
Vitamina B12
Acid
pantotenic
Acid nicotinic
Acid folic

Coninutul
iniial al
mediului n
vitamine
g/l

Coninutul de vitamine dup dezvoltarea

bacteriilor
Propionibacterium
Propionibacterium
shermanii
tehnicum
g/g
g/l
g/g
g/l
biomas mediu de
biomas mediu de
uscat
cultur
uscat
cultur

200
500

11,3
241
4,5
181
25,8

250
180
125
0
235

12,9
210
4,9
230
25

562
420
25
0
227

230,5
76,8

230
155

524
35,4

522
72,5

Cantitile de vitamine din grupul B obinute prin

cultivarea Propionibacterium technicum pe medii naturale
Nr
crt

Vitamina

Coninutul iniial
al mediului n
vitamine
g/l

1.
2.
3.
4.
5.

Tiamina
Riboflavina
Piridoxina
Vitamina B12
Acid
pantotenic
Acid nicotinic

168,4
0
87

11,8
50
180
4,3

53
124
0
30,5

804

140

627

6.

Coninutul de vitamine dup

dezvoltarea bacteriilor
biomas uscat
mediu de cultur
g/g
g/l

VITAMINA B2
CH2OH
HO

HO

HO

H3C

H3C

O
N
H

Coninutul n vitamin B2 al unor surse naturale

Nr.crt.

Surse de vitamin B2

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.

Lapte de vac
Ou de gin
Unt
Carne de vit
Carne de pui
Carne de porc
Ficat
Pete
Mazre uscat
Fasole verde
Salat verde
Cererale integrale
Drojdia de bere
Penicillium crysogenum
Clostridium butilycum
Mycobacterium smegmatis

Cantitatea de vitamin
mg%
0,2
0,36
0,4
0,3
0,16
0,19
3,5
0,16
0,3
0,2
0,12
0,2
4-5
4-4,8
13-20
860

DEGRADAREA VITAMINEI B2

CH2OH
HO

HO

HO

H3C

H3C

H3C

H3C

N
H

Lumicrom

N
H
O

CH3

HO

Riboflavin

H3C

H3C

N
H
O

Lumiflavin

Microorganisme utilizate n biosinteza vitaminei B2

Nr.crt.
1.
2.
3.
4.

Microorganisme utilizate
Eremothecium ashbyi
Ashbya gossypii
Candida flareri
Clostridium acetobutilicum

Productivitate
> 2000 g/ml
> 2000 g/ml
700-800 g/ml
80-100 g/ml

BIOTEHNOLOGIA VITAMINEI B2
- prima faz dureaz 20-25 ore, timp n care se acumuleaz biomasa iar
microorganismul ajunge la maturitate, fr a elabora vitamina;
- n a doua faz (20-25 ore) se formeaz spori n biomas care
declaneaz flavinogeneza;
- n faza a treia (100 de ore) se formeaz cantiti mari de vitamin,
iniial ca metabolit intracelular dup care se reapartizeaz ntre miceliu
i mediu, iar la sfritul biosintezei se gsete preponderent n mediul
de cultur;
- faza a patra este caracterizat de ncetarea biosintezei, nceperea unui
proces de autoliz a miceliului i creterea brusc a pH-ului. Etapa
trebuie evitat ntruct ncepe i degradarea vitaminei B2.

SEPARAREA VITAMINEI

reducere chimic la dihidroriboflavin i reoxidare la riboflavin;

reducere i reoxidare biochimic;
extracie cu solveni selectivi;
adsorbie pe schimbtori de ioni.

VITAMINA B12

Structura vitaminei B12 cuprinde:

1. macrociclu porfirinic (corinic) format din 4 inele pirolice (A D), cu
6 duble legturi conjugate, substituit cu resturi metilice,
propionamidice i acetamidice, ce are un atom de cobalt central legat
covalent i coordinativ;
2. rest de 5,6 dimetilbenzimidazol, ce se leag de nucleul corinic n
unghi drept prin intermediul ionului de cobalt i riboz;
3. riboza esterificat cu acid fosforic.

CONINUTUL N VITAMIN B12 AL UNOR SURSE

NATURALE
Nr.crt.

Surse de vitamin B12

1.
2.
3.
4.
5.

Lapte de vac
Ou
Carne de vit
Carne de oaie
Carne de porc

Cantitatea de vitamin
g%
500
0,4
2,0-2,7
2,5
0,9

CANTITILE DE VITAMIN B12 OBINUTE,

UTILIZND DIVERSE TULPINI PRODUCTOARE

Tulpina
productoare

Compoziia
mediului de
cultur

melas, sruri
minerale, cobalt
extract de
porumb,
trietanolamin,
acid citric,
cobalt
glucoz,
Propionibacterium
extract de
shermanii
porumb,
amoniac(pH=7),
precursor, cobalt
Glucoz, fin
Streptomyces
de soia, sruri
olivaceus
minerale, cobalt
betain, acid
Pseudomonas
oxalic, sruri
denitrificans
minerale, cobalt

Bacillus
megatherium
Bacillus coagulans

Aerarea
mediului

Temperatura
(0C)

Durata
fermentaiei
(ore)

Cantitatea
de vitamin
(mg/l)

Aerobioz

30

18

0,45

Aerobioz

55

18

6,0

aerobioz
3 zile
+
anaerobioz
4 zile
Aerobioz

30

150

23

28

96

5,7

Aerobioz

10,0

VITAMINA C
CH2OH
H

OH
O
O

HO

OH

CONINUTUL N VITAMIN C AL UNOR SURSE

NATURALE
Nr.crt.

Surse de vitamin C

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.

Ardei rou
Ptrunjel frunze
Mrar
Varz verde
Spanac
Varz alb, roie
Urzic
Ceap verde
Cartofi
Fasole
Mazre
Tomate
Morcovi
Castravei
Lmie suc
Lmie coaj
Portocale suc
Portocale coaj
Mandarine
Ciree
Fragi
Cpuni
Mere

Cantitatea de vitamin
mg%
>200
151-200
100-200
75-100
60-75
45-60
30-45
30-45
15-30
15-30
15-30
15-30
<15
<15
50
65
50
200
30
3,5
60-85
35-40
5-50

OBINEREA VITAMINEI C PRIN METODA REICHSTEIN

CH2OH

CH2OH
HO

HO

OH

HO

+ H2

HO

HO

OH

HO

D- glucoz

+ O2
sorbitol
dehidrozenaz

HO

OH

HO

CH2OH

D- sorbitol

L - sorboz

+ O2

COONa

COOH

ONa

ONa

HO

OH

OH

HO

HO

C
C

CH2OH

CHO

CH2OH

OH

O
C
H

HO

OH

CH2OH
acid L - ascorbic

+
+H

CH2OH
sarea de sodiu a acidului
2 - ceto- L- gluconic
(forma enolic)

- H2

CH2OH
acid 2 -ceto - L- gluconic

OBINEREA VITAMINEI C PRIN METODE

FERMENTATIVE

COOH

Erwinia sp.

HO

OH

CH2OH

Corynebacterium sp.

acid 2,5 - diceto - D - gluconic

COOH

CHO
H

OH

HO

OH

OH

CH2OH
D- glucoz

Erwinia sp.
modificate genetic

HO

OH

HO

CH2OH
acid 2 - ceto - L- gluconic

ERGOSTEROLUL
28

CH3

21

26

22

H3C
18CH3

24

20

23

17
12

19

11

CH3

CH3

9
14

25
27

16

13

CH3

10

15

HO

5
4

ergosterol lumisterol tahisterol ergocalciferol

CH3
H3C
CH3

CH3

H3C

CH2

==

HO
Ergosterol

CH3
CH3

CH3

HO

CH3

H3C

CH3

HO
Vitamina D2

CH3

CH2

-CAROTENUL

17`
18

4
3

19

CH3
5
2

6
1

20

CH3

7
16

10

H3C

CH3

11

12

13

14

16`

H3C
15

CH3

15`

13`

14`
20`

12`

CH3

17

CH3

11`
10`

9`

8`

1`
6`

2`
3`
5`

7`

19`

CH3

4`

18`

CH3

CONINUTUL N CAROTENI AL UNOR ALIMENTE

Nr.
crt.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.

Surse de caroteni
Ardei
Gogoari
Morcovi
Salat
Mazre
Fasole
Roii
Spanac
Pepene verde
Banane
Caise
Citrice
Ciree
Mere, pere, struguri
Ficat bovine
Lapte de vac
Ou de psri

Cantitatea de caroteni
mg%
25-35
25
7-18
3-6
0,2-0,4
0,1-0,2
6,5-12
13-14
3-4
7-8,5
1,2-4,5
0,1-0,5
0,1-0,5
0,1-0,5
2 mg/kg
0,07
1-4

Alga Dunaliella salina

Lagune de cretere a algei Dunaliella salina

FLUXUL TEHNOLOGIC LA OBINEREA CAROTENULUI DIN ALGA DUNALIELLA SALINA

inocul

nutrieni

NaCl
saramur

Bioreactor tip eleteu (50 Ha)

Filtrare

Mediu de cultur
(saramur)

Biomas

Uscare

Pulbere de alg
(3% -caroten)

Extracia -carotenului

Concentrare

Purificare
Condiionare
Mrunire

Formulare

Condiionare

STATINE DE BIOSINTEZ
TIPURI DE HIPERLIPOPROTEINEMII
Nr
crt
1.
2.
3.
4.
5.
6.

Tipul de
Fracii
hiperlipoproteinemie lipoproteice Trigliceride Colesterol total
crescute
I
chilomicroni
crescute
uor crescut
Iia
LDL
normale
foarte crescut
Iib
LDL, VLDL
uor
foarte crescut
crescute
III
VLDL/LDL
crescute
crescut
compoziie
anormal
IV
VLDL
moderat
normalcrescut
crescute
V
VLDL,
foarte
uor crescut
chilomicroni
crescute
TEHNOLOGIA DE BIOSINTEZ A MEVASTATINEI
9 tulpina productoare este Penicillium citrinum
9 se realizeaz o fermentaie n cele 3 trepte, la 250C, la pH =
66,5, timp de 10 zile
9 biomasa se separ prin filtrare, iar din filtrat se izoleaz
ulterior mevastatina
9 mevastatina se transform n sare de sodiu, prin adugarea n
mediu a unei soluii de NaOH, utilizndu-se n continuare la
obinerea altor statine

TEHNOLOGIA DE BIOSINTEZ A PRAVASTATINEI

obinerea mevastatinei prin cultivarea tulpinilor de Penicillium citrinum
-hidroxilarea mevastatinei cu tulpini de Streptomyces carbophilus
Schema sistemului automat de alimentare cu mevastatin sodic

HPLC

Calculator

8
soluie
mevastatin Na

TEHNOLOGIA DE BIOSINTEZ A LOVASTATINEI

9 tulpina productoare este Aspergillus terreus
9 fermentaia trebuie urmrit strict pentru obinerea unei productiviti
maxime
9 forma lactonic a lovastatinei nu este solubil n ap i este localizat n
miceliu, n timp ce forma de -hidroxi acid este prezent n mediul de
cultur sub form de sare de sodiu, solubil n ap
9 biomasa se supune extraciei cu solveni organici, n faza organic se
extrag ambele forme ale lovastatinei, iar sub influena temperaturii,
ntreaga cantitate de lovastatin trece n forma lactonic

TEHNOLOGIILE DE INGINERIE GENETIC

DOGMA CENTRAL A BIOLOGIEI MOLECULARE

STRUCTURA ADN i ARN

REPLICAREA SEMICONSERVATIV A ADN

TRANSCRIPIA ADN

SCHEMA GENERAL A BIOSINTEZEI PROTEICE

CODUL GENETIC

SCHEMA GENERAL A TEHNOLOGIEI

ADN RECOMBINANT

CLONAREA ADN-ului DE INTERES CU PLASMIDE

ENZIME FOLOSITE N TEHNOLOGIA

ADN RECOMBINAT

SITUSURILE DE RECUNOATERE I CLIVARE A UNOR

ENZIME DE RESTRICIE
Enzima de
restricie

Alu I
Bam H I
Bgl I
Bgl II
Eco R I
Eco R II
Fnu D I
Hae II
Hae III
Hind III
Hpa II
Msp I
Pst I
Sal I
Taq I
Xho I

Secvena recunoscut
Locul de clivare

Microorganismul din care

provine

(5) AGCT (3)

(5) GGATCC (3)
(5) GCCNNNNNGCC
(3)
(5) AGATCT (3)
(5) GAATTC (3)
(5) CC(A/T)GG (3)
(5) GGCC (3)
(5) PuGCGCPy (3)
(5) GGCC (3)
(5) AAGCTT (3)
(5) CCGG (3)
(5) CCGG (3)
(5) CTGCAG (3)
(5) GTCGAC (3)
(5) TCGA (3)
(5) CTCGAG (3)

Arthrobacter luteus
Bacillus amyloliquefaciens H
Bacillus globigii
Bacillus globigii
Escherichia coli RY 13
Escherichia coli R 245
Fusobacterium nucleatum D
Haemophilus aegyptus
Haemophilus aegyptus
Haemophilus influenzae Rd
Haemophilus parainfluenzae
Moraxella species
Providencia stuartii
Streptomyces albus G
Thermus aquaticus
Xanthomonas holcicola

STRUCTURA UNUI PALINDROM

STRUCTURA PRIMAR A INSULINEI

OBINEREA INSULINEI UMANE CU AJUTORUL

BACTERIILOR MODIFICATE PRIN TEHNOLOGIA
ADN-RECOMBINANT

OBINEREA INSULINEI UMANE CU AJUTORUL

REVERSTRANSCRIPTAZEI

PRODUSE FARMACEUTICE CU INSULIN UMAN

Tip
insulin

Denumirea comercial

Aspectul
produsului

Compoziie

Durata de
aciune

INSULINA
REGULAR
INSULINA NPH
(INSULINA
ISOPHANE)

Soluie
clar
Suspensie

6-8 ore

INSULINA LENTE
INSULINA-ZINC

Suspensie

INSULINA
ULTRALENTE
INSULINA-ZINC
INSULINA
REGULAR +
INSULINA NPH

Suspensie

Zn (0,01-0,04 mg/100 U)
m-crezol, glycerol
Zn (0,01-0,04 mg/100 U)
tampon fosfat, m-crezol i
fenol, glicerol,
protamin (0,32-0,44
mg/100 U)
Zn (0,12-0,25 mg/100 U)
tampon acetat, metilparaben, glicerol
Zn (0,12-0,25 mg/100 U)
tampon acetat, metilparaben, glicerol
Zn (0,01-0,04 mg/100 U)
tampon fosfat, m-crezol i
fenol, glicerol,
protamin (0,32-0,44
mg/100 U)
Zn (0,01-0,04 mg/100 U)
tampon fosfat, m-crezol i
fenol, glicerol,
protamin (0,32-0,44
mg/100 U)

30/70

50/50

INSULINA
REGULAR +
INSULINA NPH

Suspensie

Suspensie

18-24 ore

18-24 ore
24-28 ore
14-24 ore

14-24 ore

STRUCTURA TRIDIMENSIONAL A HORMONULUI DE

CRETERE UMAN (hGH)

OBINEREA ADN RECOMBINANT CE CONINE GENA

HCU NECESAR SINTEZEI hGH CU AJUTORUL
CELULELOR TRANSFORMATE DE E. coli

PRODUSE FARMACEUTICE EXISTENTE PE PIA CU

HORMON DE CRETERE (hGH)

Tip de hormon de
cretere

Surs i
tehnologie

Denumire comercial

Firma
productoare

Hormon de cretere
derivat din glanda
pituitar (pit-GH)
Metionil-hormon de
cretere uman
(met-rhGh)
Secvena natural
proteic a hormonului
de cretere uman
(rhGH)

Extracie din
glande pituitare de
la cadavre
Tehnologia ADN
recombinat prin
bacteria E. coli
Tehnologia ADN
recombinat prin
bacteria E. coli

CRESCORMON
NANORMON

Kabi Vetrum AB
Novo Nordisk

SOMATONORM
PROTROPIN

Kabi Vetrum AB
Genentech Inc.

GENOTROPIN
NORDITROPIN
NUTROPIN
HIMATROPE
BIO-TROPIN

Kabi Vetrum AB
Novo Nordisk
Genentech Inc.
Eli Lilly
Bio-Technology
General
Ares
Serono

Protein
recombinat
produs n celule
animale

SEROSTIM
SAIZEN

OBINEREA INTERFERONULUI (IFN)

PRIN INGINERIE GENETIC

COAGULAREA I FIBRINOLIZA

ACTIVAREA LOCAL A PLASMINOGENULUI

SCHEMA OBINERII
ACTIVATORULUI TISULAR AL PLASMINOGENULUI
UMAN PRIN RECOMBINARE GENETIC

FACTORUL VIII DE COAGULARE ENDOGEN (FAH)

glicoprotein plasmatic cu rol n coagularea sngelui;
deficitul FAH din organism duce la hemofilia de tip A, genopatie ce se
transmite de ctre mam i se manifest la biei (transmiterea unei tare
purtat de cromozomul X);
este o protein care se scindeaz uor prin proteoliz i care are o
durat de via de 812 ore;
forma activ a factorului VIII are 2332 de aminoacizi legai de
carbohidrai la nivelul a 25 locuri de legare;
factorul VIII este asociat covalent cu factorul von Willebrand (carrier
pentru factorul VIII), ce are 2 roluri: de a proteja factorul VIII
mpotriva scindrii sale proteolitice i de a susine asocierea ntre
lanurile grele i uoare;

OBINEREA FAH
1.

EXTRACIE DIN PLASMA UMAN

2.

se obin cantiti mici, iar produsul este scump;

expune pacienii la aloantigeni;
pot aprea anticorpi circulani antiA sau antiB,
expune pacienii la maladii virale (ex: hepatita viral B, hepatite nonA
i nonB, SIDA);
OBINEREA PRIN INGINERIE GENETIC A rFAH

a nceput n 1984 odat cu izolarea genei care codific producerea

factorului VIII de coagulare;
se realizeaz prin:
introducerea genei n culturi de bacterii;
introducerea genei n culturi de celule animale,
introducerea genei n animale transgenice,
obinerea primei generaii de rFAH const n producerea moleculei
ntregi de factor VIII cu 2332 aminoacizi;
ncepnd cu anul 2000 se comercializeaz a doua generaie a factorului
VIII (cu numr mai mic de aminoacizi)

INTERLEUKINE
(IL)
clasa interleukinelor este format din 33 de membri
(IL-1IL-33);
sunt polipeptide glicozilate (glicoproteine) cu mas
molecular cuprins ntre valorile 1540 kDa;
sunt produse de diverse tipuri de celule non-leucocitare i
leucocitare;
regleaz diverse procese fiziologice i patologie: creterea
celulelor normale i maligne, modelarea rspunsului imun,
reglarea proceselor inflamatorii;
doar 2 interleukine, obinute prin inginerie genetic, au
produse farmaceutice aprobate pe piaa terapeutic:

rIL-2 cu produsele PROLEUKIN, ALDESLEUKIN

rIL-11 cu produsele NEUMEGA, OPRELVEKIN.

TIPURI DE INTERLEUKINE
IL

IL-1/
IL-1

Masa
molec.
(kDa)
17

IL-2

15,5

IL-3
IL-4
IL-5

28
20
50-60

IL-6

25

IL-7
IL-8

25
8

IL-9

30-40

IL-10

18

IL-11

23

IL-12

70

IL-13
IL-14
IL-15

10

IL-16

17

IL-17
IL-18

14

Celulele
productoare

Aciunea

macrofage,
celule NK,
celule B, T
celule T
celule NK activate
celule T activate
celule T
celule T activate

pro-inflamatoare,
stimuleaz hematopoieza,
Induce rezistena la infecii
activarea celulelor T
induce sinteza de IL-1
factor de cretere hematopoietic
creterea celulelor B
creterea celulelor B i creterea
eosinofilelor
pro-inflamatoare
aciune antiviral
creterea celulelor B i T
chemoatractant pentru neutrofile

celule T, B
fibroblati
celule stem
macrofage,
fibroblati
celule T activate
celule B, T
macrofage,
timocite
celule stem din
mduva osas
macrofage,
celule B
celule T
celule epiteliale,
macrofage
CD8 + celule T
CD4 + celule T

creterea celulelor T i creterea

eritroidelor
creterea celulelor B/
inhibiia sintezei citokinelor
de ctre celulele T
co-factor hematopoietic,
creterea plasmocitelor
inducerea imunitii mediate celular
creterea celulelor B
creterea celulelor NK i creterea
celulelor T
chemoatractant pentru celulele CD4
+T
stimularea fibroblatilor
inducerea imunitii mediate celular,
inducerea activitii IFN

Produse
comerciale

Aldesleukin
Proleukin

Oprelvekin,
Neumega

TIPURI DE LEUCOCITE

LEUCO CITE

Fagocite
mononucleare

Monocite

Granulocite

Limfocite

Bazofile

Macrofage

Eozinofile
Neutrofile
(leucocite PMN)

Limfocite-B

Celule T-helper

Limfocite-T

Celule NK

Celule T -citotoxice

Celule T-supresoare