Sunteți pe pagina 1din 10
Caiet de lucrari practice pentru “Biologia gi patologia reproductiei” INSTRUMENTARUL FOLOSIT PENTRU INSAMANTARL ARTIFICIALE fn cadrul biotehnologiei ins&ménfiirilor artificiale fluxul tehnologic are urmatoarele etape: - recoltarea spermei; - examenul spermei; - diluarea gi conservarea spermei; - transportul si pistrarea spermei; - inocularea spermei. A. Recoltarea spermei Instrumentarul folosit variaz& in functie de metoda de recoltare aplicaté (manuala, vagin artificial, electroejaculator, masarea ampulelor canalelor deferente). La majoritatea speciilor cea mai folosit’ metoda este metoda cu vaginul artificial. Ca elemente componente ale vaginului artificial apar diferentieri majore care variaz4 in functie de specie. Pentru rumegatoare si pentru cabaline parfile componente ale vaginului artificial sunt: - corpul vaginului: - la rumegittoare: este format din cauciuc dur; - la cabaline: este format din tabla zincata. Indiferent de specie acest corp este prevazut cu un orificiu ce se inchide cu un robinet. ~ elimasa vaginalA - este dintr-un cauciuc foarte fin care trebuie sii fie lipsit de porozitafi; lungimea ei depaseste lungimea corpului vaginal cu 10-20em deoarece capetele vor trebui rasfrante peste capetele tubului vaginal, astfel incat intre c&masa si corp s& se formeze o camera virtuala. ~ dous inele de cauciue cu ajutorul c&rora capetele cAmasii vaginale se fixeazii pe tubul vaginal.; - recipientul colector (paharul colector) este acoperit de un manson iama pentru protectie termica. La taurine la vaginul de tip danez mai exist un con colector ce face leg&tura intre vaginul artificial si recipientul colector. Figura 34. Vagine artificiale pentru recoltarea spermei la taur vn Caiet de lucratri practice pentru “Biologia gi patologia reproductiei” Ansamblarea vaginului artificial. ‘Camasa vaginala se introduce prin tubul vaginal, capetele se risfrang peste capetele tubului vaginal gi sunt fixate cu ajutorul celor doua inele. in spafiul format se introduce apa si aer. La unul din capete se atageaza recipientul colector. Atunei cénd se monteazA cimaga vaginal trebuie si nu se formeze cute transversale pentru cd acestea ingusteazi lumenul gi° pot s& producd leziuni la nivelul mucoasei peniene, leziuni care prin senzatia de durere ar putea favoriza formarea unor reflexe condiionate negative. ‘Vaginul artificial trebuie si indeplineasc& anumite conditii, pentru a imita caracteristicile vaginului unei femele in c&lduri si anume: temperatura, presiunea silubrifierea. ratura. La femelele in calduri temperatura la nivelul vaginului jcat& decat temperatura corporala datoritA congestiei existente la vaginul artificial pentru a realiza acest deziderat se introduce apa 50°C; pana in momentul recoltarii spermei desi temperatura scade cu _o depaseste pe cea corporala, mentinandu-se la 40-42°C. iv La femelele in cilduri ea este realizati de musculatura ginal sub influenta hormonilor estrogeni si ocitocinei. Presiunea in vaginul ial se realizeaz4 cu ajutorul apei calde introduse in camera creati intre gi cimasa vaginal dar si prin intermediul insuflarii de aer. Perefii yaginale apar apropiafi formfnd o cut& in forma literei “H” cand este realizata la nivelul necesar. Pentru vier exist& un tip special de ite realizarea presiunii asupra glandului vierului, care imit’ or existenti la nivelul cervixului scroafei. Figura 36 Vagine artificiale pentru recoltarea spermei la vier. Lubrifierea. Peretii vaginului femelei in calduri sunt lubrifiati de catre mucusul de clduri. In mod artificial acest deziderat se asigura prin lubrifierea vaginului artificial cu ajutorul unei vaseline neutre. Figura 37. Recoltarea spermeé la taur prin masaj transrectal al ampulelor canalelor., deferente si al vezioulelor seminale Figura 38. Recoltarea spermei la vier prin metoda manuala B. Transportul si pastrarea spermei Recipientele folosite pentru transportul si pastrarea spermei variaza in functie de metoda de conservare. Astfel, in cazul in care conservarea spermei se face prin refrigerare (1a temperatura de 0-4°C), depozitarea acesteia se face fie In 78 7 Buzesti 61, DI. AG, ap. 47, sector Twoucuresu; Ter MztZzr- ter eww us ee; ran rere eee Caiet de lucrari practice peiitru “Biologia gi patologia reproductiei” termose cu ghiati, fie lazi izoterme, in care de asemenea, se pune ghiata. Fiolele sau flacoanele cu sperma trebuiese protejate pentru a nu veni in contact direct cu ghiata si pentru aceasta se pun in cutii de bachelita, Figura 39, Conteiner pentru sperma congelata Dac& sperma se conserva prin congelare, transportul si depozitarea acesteia pana in momentul utilizarii se fac in containere de mic& capacitate, in care se afl azot fichid. Astfel, se asiguri menfinerea constant a temperaturii spermei congelate, la nivel de~ 196°C. C. Aparatura gi tehnica folositi pentru inocularea spermei Acestea diferd in raport cu specia si cu metoda de inagulare. Astfel, la vacd se pot folosi dou’ metode de inoculare a spermei: vaginala si rectovaginal’. Metoda vaginal necesiti ca instrumentar: speculum vaginal, lamp& - frontal si pipet de instimAnfare. Se foloseste cu precidere speculum trivaly (de tip Polanski), care in prealabil a fost sterilizat. Lampa frontalA se aplic& pe capul operatorului insiményétor gi ugureazi observarea orificiului vaginal al cervixului. Pipeta de insimanfare este din sticlé si are atasatA Ja un capat 0 suzeti (para de dimensiuni mici) de cauciue; pipeta trebuie sterilizati dup’ fiecare utilizare, pentru a se impiedica vehicularea unor germeni microbieni de Ia o femela la alta, Ca mod de lucru se procedeazi astfel: - se apasi pe suzeta de cauciuc, se introduce varful pipetei de ins&ménfare in recipientul cu sperma si se d& drumul suzetei; fn felul acesta sperma este aspirat4 in pipet; se face toaleta organelor genitale exteme ale vacii de insaménjat si apoi se introduce speculum vaginal prin fanta vulvar, avand brajele apropiate; apoi cu ajutorul surubului fluture se depirteazi brafele 719 ..Caiet de lucrdri practice pentru “Biologia si patologia reproductiei” (valvele) speculumului, iar prin migcirile capului insiménfitorul dirijeazi fascicolul luminos al !mpii frontale spre fundul vaginului; - se introduce varful pipetei de insdménjare prin orificiul cervical in lumenul cervixului pe o distanji de 3-4 cm si apoi se apas& pe suzeta de cauciuc, depundnd astfel sperma din interior; ~ se fine suzeta de cauciuc compresata i se scoate pipeta de insiméntare (se eviti astfel reabsorbfia spermei in pipet); ~ se scoate speculum vaginal preferabil dupa ce s-au apropiat bratele lui cu ajutorul surubului fluture rotit in sens invers; - se noteaz data insiménfarii in registrul de ins&ménf&ri si fatari. C&nd inocularea spermei se face prin metoda rectovaginalii este necesara ménusa obstetrical gi pistoletul de insimantare. Pistoletul de insimAntare este alc&tuit din: - corpul pistoletului — din inox si prevzut pe toat’i lungimea lui cu un canal central; ~ tija pistoletului —cu rol de piston; - ghend din metal plastic ce se aplica peste corpul pistoletului dupa ce s-a introdus paieta cu sperma; rondel& de plastic, mai dur, pentru fixarea ghenei. == Figura 40. Ansamblarea pistoletului de inoculare a spermei 80 Figura 41. Explicati figura 41. Tehnica de inoculare a spermei const& in urmatoarele: ~ dupa decongelarea paietei cu sperma aceasta se introduce in corpul pistoletului, se taie capitul exterior la distanfé de 1 cm. de vérful pistoletuliti, se ataseaza ghena)si se fixeazA cu rondela; operatorul insiméntitor, avand mana protejati cu manuga de plastic, 0 introduce in rect si repereaz cervixul pe care il imobilizeaza intre degete si podul palmei, avand un deget liber (cel mare sau cel mic) pentru a sesiza orificiul vaginal al cervixului; cy-ména cealalfé introduce pistoletul in vagin si apoi in cervix rijandu-l cu ajutorul méinii aflate in rect si apasa pe tija pistoletului care prin intermediul dopului din paieti impinge sperma si o depune in cervix; se scoate pistoletul si mAna din rect si se noteazi data efectuarii insiméngarii. Figura 42. Inocularea spermei la vacd prin metoda rectovaginal& 81 Caiet de lucrari practice pentru “Biologia si patologia reproductiei” sere Pentru inocularea spermei la scroafai se poate folosi cateterul englezesc sau semineta romaneascl. Cateterul este confectionat din cauciuc consistent si are un capt spiralat, care imit& conformatia glandului vierului. La capatul opus se adapteaza flaconul cu sperma. In vederea insAmantarii, dupa ce s-a facut o ugoari igiend a vulvei scroafei, se introduce varful cateterului prin fanta vulvara si pe msur& ce acesta inainteazi in vagin se rasuceste spre dreapta pentru a putea strabate printre cuzinefii din cervixul scroafei. Se verificd acd a ajuns in cervix trigand usor spre fnapoi. Figura 43. Inocularea spermei la scroafa, Apoi se adapteazé flaconul cu sperma, care este din cauciuc sau material plastic, se apasi pe el si se depune astfel sperma in corpul uterin. Cateterul se scoate apoi prin rasucire inversa (spre sténga). Semineta este confectionaté din material plastic avand o tij& terminat& printr-o ogivi de mérimea unei misline, iar la capitul, opus se ataseazi Caiet de lucrati practice pentru “Biologia si patologia reproductiei” recipientul cu sperma, Pentru introducerea in cervix se manevreazi prin impingere si migcari de lateralitate — stanga-dreapta. Laden Pipeta de inoculare sau seringa de inoculare este din sticla si ofel inoxidabil. Doza este reglabil existind un surub pe tijd. Se recomanda fie metoda recto-vaginald, fie metoda vaginala. In acest din urm& caz se introduce mana sténga in vagin, arititorul se introduce in cervix si se conduce seringa pe palma pana in cervix unde se face inocularea, Aa Figura 43. Inocularea spermei la iap& Laoaie Doza este de 0,1 ml Ia adulte si 0,2 ml la primipare. Se foloseste o sering’ semiautomat cu umplere manuala si inoculare automaté. Oile sunt mult mai rezistente si nu se pune problema sterilizarii, acest lucru este posibil si datorit& Jocului de inoculare. Adultele sunt inoculate in cervix iar primiparele fn vagin. Figura 44. Inocularea spermei la oaie Caiet de lucrari practice pentru “Biologia si patologia reproductiei” La iepuroaicd Inocularea spermei se face cu o sering& semiautomata; doza este de 1,00 ml. Are prevazut la capat un tub de cauciuc si un tub de sticla indoit sub un unghi de 30°. Acest tub se introduce in vaginul femelei pana se intampina o rezisten{a si apoi se rasuceste 180° asa cum se observa din figura 45.

S-ar putea să vă placă și