CURS DE BIOFIZIC MEDICAL 1

Autor: Prof. C.Ganea

BIOFIZICA CONTRACIEI MUSCULARE

1. Elemente de structur a muchiului striat

2. Contracia muscular
3. Manifestrile mecanice ale contraciei musculare
4. Aplicarea principiului I al termodinamicii n cazul contraciei musculare
5. Motoare moleculare

Sistemul muscular reprezint un element activ implicat n deplasarea structurilor osoase

i n micrile altor structuri. Fibrele musculare au capacitatea de a utiliza energia chimic
procurat n procesele metabolice, de a se scurta i de a reveni la dimensiunile iniiale. Exist
dou tipuri principale de muchi: muchiul striat i muchiul neted. O categorie special este cea
a muchiului cardiac n care fibrele nu sunt separate ci sunt interconectate prin jonciuni
aderente. n cele ce urmeaz ne vom referi la mecanismele biofizice ale contraciei muchiului
striat.

1. Elemente de structur a muchiului striat

Muchiul striat este alctuit dintr-un mnunchi (sute, chiar mii) de fibre musculare. n
Fig. 1 este prezentat un manunchi de fibre musculare. Fibrele musculare sunt celule polinucleate
mrginite de o membran plasmatic - sarcolema, care nvelete fascicule de miofibrile separate
ntre ele de un sistem de tubuli i cisterne membranoase care aparin reticulului sarcoplasmic.

Fig. .1 Grup de fibre musculare (adaptat dup http://people.eku.edu/ritchisong/musclecell)

n fibra muscular exist un mare numr de nuclee i organite celulare ca mitocondrii,

ribozomi etc. Unitatea morfofuncional a miofibrilei este sarcomerul (la homeoterme - lungime
2,2 m) (Fig. 2). Sarcomerele sunt separate prin aa-numitele linii Z. Filamentele aparatului
contractil sunt de dou feluri: filamente subiri (50) care se inser pe linia Z i filamentele
groase (100) (Fig. 2). La microscop se observ o succesiune de benzi luminoase i ntunecate
care corespund unor filamente longitudinale care se ntreptrund - aceste filamente formeaz
aparatul contractil (Fig. 3). Banda luminoas I conine filamentele subiri; banda ntunecata A
conine filamente groase care se ntreptrund cu cele subiri, iar n centru se afl banda H
format numai din filamente groase (Fig. 3). n seciune transversal se observ urmtoarea
imagine: fiecare filament gros este nconjurat de 6 filamente subiri i fiecare filament subire de
3 filamente groase (Fig. 3).
CURS DE BIOFIZIC MEDICAL 2

Fig. 2 Elementul morfofuncional al muchiului - dintr-o fibr muscular

(1) se selecteaz o miofibril (2) alctuit din sarcomere (3), separate prin
liniile Z (5) ce conin miofilamentele (4, 6)(adaptat dup
viarevision.wikia.com/wiki)

Filamentele subiri sunt alctuite din trei tipuri de proteine:

actina globular (actina G) (42.000 D), tropomiozina i
troponina. Filamentul propriu-zis este format din dou iruri paralele alipite formate din actina
G, ca dou lanuri torsionate (-helixuri) (150-200 molecule) care dau forma fibrilar (F-actina)
(Fig 4 sus).

Fig. 3 Imaginea sarcomerului n microscopie (sus); seciune

transversal prin sarcomer (jos) (adaptat dup
https://en.wikipedia.org/wiki/Myofilament)

Aceste filamente sunt nsoite de cte dou filamente

de tropomiozin (70000 D) situate n anurile
formate de moleculele de actin. Din loc n loc, la
capetele moleculelor de tropomiozin se gsesc
moleculele de troponin (50.000 D)(formate din trei
proteine). n general, o tropomiozin nsoete 7
molecule de actin.

Fig. 4 Filamentul gros (jos) i

filamentul subire (sus) (adaptat
dup http://people.eku.edu/
ritchisong/301notes3)

Filamentele groase sunt alctuite din molecule de miozin (500.000 D) care conin n
jur de 300-400 molecule. Miozina este o protein fibrilar, asemntoare cu o baghet subire,
terminat prin dou capete globulare (aspect de cros de hochei) (Fig. 4 jos, Fig. 5). Partea
fibrilar este numit meromiozin uoar (MMU) i cea globular - meromiozin grea (MMG).
Aceasta din urm are dou componente: S1 (solubil n ap) i S2 - legtura cu cea uoar; ntre
ele se poate face ndoirea moleculei (Fig. 5). Filamentul de miozin este format din poriunea
liniar, iar capetele globulare sunt orientate lateral, la exteriorul filamentului (Fig. 4), formnd
aa-numitele puni transversale miozinice (expansiuni laterale). S1 are mare afinitate pentru
CURS DE BIOFIZIC MEDICAL 3

actin i are, n prezena Mg++, activitate ATP-azic. La rndul ei, actina are o mare afinitate
pentru miozin. Prin legarea celor dou (actina i miozina) se formeaz complexul actomiozinic
care amplific activitatea ATP-azic a miozinei de cca. 250 de ori.

Fig.5 Structura schematic a unei molecule de miozin

Fibra muscular este strbtut de 2 reele de canalicule: 1)

un sistem de canalicule dispuse longitudinal care strbat
ntreaga sarcoplasm i sunt n contact strns cu miofibrilele: reticulul sarcoplasmic. Aceste
canalicule se dilat la nivelul liniei Z formnd cisternele terminale (Fig. 1); 2) canalicule
transversale (tubulii T) de la nivelul miofibrilelor pna la suprafaa celulei, unde se deschid
printr-un por. Acetia se afl n vecintatea liniei Z. Cisternele reprezint rezervoare de ioni de
Ca++ (concentraia de 1000 ori mai mare dect n exteriorul lor )(conin vezicule n care
concentraia ionilor de calciu este de cteva ori mai mare dect n structurile vecine) i acetia
se elibereaz n cursul contraciei musculare.

Fig. 6 Locurile de legare a miozinei pe actin sunt mascate de ctre

tropomiozin (adaptat dup http://www.nature.com/scitable/topicpage/
the-sliding-filament-theory-of-muscle-contraction

Muchiul relaxat. n repaus, concentraia sarcoplasmic a ionilor

de Ca++ este foarte mic (10-7 M). n aceast situaie locurile de
legare ale actinei cu miozina sunt mascate prin interpunerea
moleculelor de tropomiozin (Fig.6). Punile transversale MMG
nu sunt legate de actin (Fig. 7). Deoarece miozina are activitate
ATP-azic, ea poate s scindeze ATP n ADP i Pi, cu un turnover foarte sczut ( 25 s sau 2-
3/min.) i produii de scindare sunt eliberai n sarcoplasm.

Fig.7 Muchiul relaxat (adaptat dup

http://www.ptdirect.com/training-design/anatomy-and-
physiology)

2. Contracia muscular

Contracia fibrei musculare implic trei etape succesive:

1. excitaia fibrei;
2. cuplajul excitaie contracie;
3. contracia propriu-zis a fibrei.
CURS DE BIOFIZIC MEDICAL 4

1. Excitaia. Nervul motor mielinizat are ramuri terminale nemielinizate. Acestea parcurg o
formaiune specializat a sarcolemei formnd sinapse neuro-musculare (placa motorie)(Fig. 8).
La nivelul acestor sinapse ncepe excitaia fibrei musculare prin eliberarea moleculelor de
mediator chimic (acetilcolina) din terminaia nervoas n urma unui impuls nervos.

Fig.8. Propagarea potenialului de aciune pn la nivelul plcii motorii i eliberarea ACh n fanta sinaptic, urmat
de deschiderea canalelor ionice din membrana postsinaptic (adaptat dup
https://en.wikipedia.org/wiki/Muscle_contraction)

Moleculele de acetilcolin se fixeaz pe moleculele receptoare ale membranei

postsinaptice, determinnd deschiderea unor canale cationice ale acesteia. Cationii intr n fibr,
interiorul acesteia devine local pozitiv i n felul acesta se produce potenialul de aciune (Fig.
9). Acesta se deplaseaz prin sarcolem n lungul fibrei, iar prin membrana tubulilor transversali
n profunzime.

2. Cuplajul excitaie- contracie. Tubulii transversali sunt n legtur cu cisternele reticulului

sarcoplasmic. Depolarizarea tubulilor duce, n momentul n care potenialul de aciune ajunge n
dreptul cisternelor, la deschiderea canalelor de Ca++ (Fig. 10 ).
CURS DE BIOFIZIC MEDICAL 5

Fig. 9. Potenialul plcii motorii(adaptat dup https://commons.wikimedia.org/wiki)

Ionii de Ca++ sunt eliberai din cisterne, iar concentraia lor n sarcoplasm crete de la cca 0,1
M la 10 M (crete de 100 de ori). Troponina fixeaz ionii de Ca++ i n urma unei modificri
conformaionale deplaseaz moleculele de tropomiozin din anurile filamentului subire astfel
nct locurile de legare ale actinei cu miozina nu mai sunt mascate (Fig. 6 jos ).

Fig.10. Deschiderea canalului de calciu n urma depolarizrii membranei tubulilor T (RS - reticul sarcoplasmic)
(adaptat dup www.wikipedia.org)

3. Contracia. Din acest moment se poate forma complexul actomiozinic i contracia

ncepe. Contracia implic eliberarea energiei chimice necesare i fenomenele mecanice care
stau la baza producerii forei, respectiv scurtrii fibrei. Aceasta se realizeaz n urmtoarele
etape (Fig. 11)(Alberts et al., 2002):
n urma rearanjrii troponinei i tropomiozinei extremitatea globular S1 a miozinei care
dispune de 2 locuri de legare, unul pentru actin, altul pentru ATP, se fixeaz pe locul de legare
actinic. Complexul ATP- miozin are mare afinitate pentru G-actin.
- Prin formarea complexului actomiozinic activitatea ATP-azic crete de 250 ori. ATP-
ul este scindat n ADP i Pi i se elibereaz energia legturii macroergice. Produii de scindare
sunt eliberai rapid (dup cum s-a menionat anterior, miozina scindeaz i n stare de repaus
ATP n ADP i Pi dar eliberarea acestora este foarte lent). nainte de eliberarea produilor de
scindare a ATP captul miozinic se afl n poziie perpendicular pe filamentul subire.
Eliberarea Pi induce o modificare conformaional a S2, iar puntea se nclin cu 450 fa de
CURS DE BIOFIZIC MEDICAL 6

filament (Fig. 11), captul miozinic rmnnd legat de filamentul subire. Prin aceast nclinare
ea antreneaz filamentul subire, deplasndu-l axial cu 7,5 nm n direcia zonei mediane i
sarcomerul este scurtat. Se dezvolt for.
- Locul de legare rmnnd liber, o nou molecul de ATP este ataat (dup 10-3 s) i
aceasta comand desprinderea punii de filamentul subire. ATP este din nou scindat, puntea se
leag din nou de filament ntr-o poziie apropiat de linia Z i procesul se repet.

Fig. 11. Etapele contraciei musculare (adaptare dup Alberts & al., Molecular Biology of the Cell, 2002)

Astfel, punile transversale se comport ca vslele unei brci i sarcomerul se scurteaz

(Fig. 12). Deoarece procesul este mai rapid dect n repaus, turnoverul crete la cca. 10/s. n
felul acesta ciclul biochimic al miozinei este continuat, cnd ncepe contracia, de cel
actomiozinic.

Fig. 12. Glisarea filamentelor (adaptat dup cecs.wright.edu, Muscle)

CURS DE BIOFIZIC MEDICAL 7

Observaie: deci, n timpul scurtrii sarcomerelor filamentele nu se scurteaz - ele se

ntreptrund - gliseaz. Teoria glisrii a fost elaborat n mod independent de ctre A. F. Huxley
i H.E. Huxley n 1954. n lips ATP, cum se ntmpl dup moarte, ciclul se ntrerupe n faza n
care puntea este legat de filamentul subire, fiind nclinat la 450, legtura actomiozinic
devenind permanent. Apare rigor mortis (rigiditatea cadaveric).

Relaxarea

Dup ncetarea excitaiei se produce relaxarea. Canalele de Ca++ din cisterne se nchid i
se reface concentraia de 103 ori mai mare n cisterne dect n sarcoplasma, datorit pompei de
Ca++. Prin scderea concentraiei calciului, troponina si reia conformaia i tropomiozina
mascheaz din nou locurile de legare ale actinei cu miozina. Att contracia ct i meninerea
strii de repaus se fac cu consum de energie. Exist muchi ale cror sisteme contractile pot fi
reglate de ionii de Ca++ prin aciunea acestora asupra miozinei i nu prin intermediul sistemului
troponin- tropomiozin precum i muchi care pot apela la ambele sisteme de reglare a funciei
contractile.

Mecanismele de refacere a rezervei de ATP

Rezervele de ATP din muchi se pot reface pe cteva ci:

- Glicoliz anaerob
- Fosforilare oxidativ
- Reacia creatin-chinazei (reacia Lohmann):
ADP + CP ATP + C
- Reacia miochinazei:
ADP + ADP ATP + AMP

Muchiul glicerinat

Fibra muscular tratat cu soluie de glicerin - devine parial (sau chiar total) lipsit de
sarcolem, tubuli transversali i reticul sarcoplasmic (o asemenea stare poate fi creat i prin
tratare cu detergeni sau prin microdisecie). Se constat c i n asemenea fibre se pot desfura
ciclurile relaxare - contracie - rigor dac se modific concentraia de ioni de Ca++ i ATP n
soluia n care se afl fibra. n soluie lipsit de ATP se produce rigor mortis. La adugare de
ATP are loc relaxarea. La adugarea ionilor de Ca++ se produce contracia. La ndeprtarea
ionilor de Ca++ (cu ajutorul chelatorilor EDTA, EGTA) se produce ori relaxarea, ori rigor mortis
(depinznd de prezena, respectiv absena ATP).

3. Manifestrile mecanice ale contraciei musculare

Tipuri de contracie
Muchiul dezvolt o for de contracie egal i de sens contrar forei creia i se opune.
n funcie de mrimea acestei fore muchiul se poate scurta, alungi sau poate pstra aceeai
lungime. Se pot meniona urmtoarele tipuri de contracie:
- Contracie izotonic - muchiul se contract contra unei fore exterioare constante
(ridicarea unei greuti).
- Contracie neizotonic - fora variaz ca mrime - ntinderea sau comprimarea unui
resort; n acest caz fora care se opune muchiului depinde de alungirea/comprimarea resortului
(conform expresiei forei elastice: F = -kl).
CURS DE BIOFIZIC MEDICAL 8

- Contracie izometric - contracie n care lungimea muchiului nu se modific, dar

tensiunea n el crete. Fora dezvoltat este egal cu cea care trebuie nvins (contracia postural
sau pentru susinerea unui obiect). Muchiul nu efectueaz lucru mecanic (L = Fx, cu x = 0).

Fig. 13. Contracia tetanic (adaptat dup D. Eremia, 1993)

- Contracia tetanic - Prin stimulare cu un impuls unic muchiul se contract sub forma
unei secuse unice (intervalul ntre stimuli trebuie s fie mai lung dect timpul necesar contraciei
i relaxrii); la stimulare repetitiv cu o anumit frecven, peste o limit dat, contraciile
individuale fuzioneaz ntr-o contracie unic - contracie tetanic (Fig. 13). Frecvena la care se
produce tetanusul depinde de tipul de muchi (este mai mare la muchii rapizi). De exemplu,
pentru musculatura ocular este necesar o frecven de 350 stimuli/secund, iar pentru
muchiul solear o frecven de 30 stimuli/secund.
- Alungirea muchiului - dac fora exterioar este mai mare dect valoarea maxim a
forei pe care o poate dezvolta muchiul, acesta se alungete cu toate c se contract activ.

Relaia for-lungime
Fora generat ntr-o contracie muscular depinde de distana dintre extremitaile sale -
deci de lungimea sarcomerelor sale. Ea are valoarea maxim pentru o lungime iniial a fibrei
(n repaus). Dac este ntins peste aceast lungime i determinat s se contracte, sau contracia
pornete de la o lungime mai mic, fora de contracie descrete (Fig. 14, dreapta). Pentru a
explica aceast dependen trebuie s se in cont de numrul de puni transversale implicate n
contracie (Fig 14, stnga). Dac un muchi este ntins peste o lungime a sarcomerelor de 3,6
m, nu mai are loc ntreptrunderea filamentelor groase i subiri, deci nu se poate forma
complexul actomiozinic i fora va fi nul. Fora maxim va fi generat atunci cnd toate punile
sunt implicate n interaciunea actomiozinic. La muchiul scurtat apare o interptrundere
suplimentar a filamentelor subiri aparinnd aceluiai sarcomer.

Fig. 14. Dependena de lungimea sarcomerului a forei dezvoltate de fibr (adaptat dup Gordon, Huxley,
i Julian, 1966)
CURS DE BIOFIZIC MEDICAL 9

Aceasta va repezenta un obstacol n interaciunea actomiozinic. Atunci cnd filamentul

subire atinge linia Z din partea opus, fora dezvoltat va fi nul (F =0).

Relaia fora-vitez de scurtare (A.V.Hill)

Viteza de scurtare a unui muchi depinde de fora exterioar ce trebuie nvins (deci de
fora de contracie la un moment dat). Astfel, un obiect uor este ridicat mai rapid, unul mai
greu, mai lent. Ecuaia care reprezint acest proces, ecuaia Hill:
(F+a)(v+b) = (Fmax +a)b
Aceasta este ecuaia unei hiperbole (Fig. 15). F- fora de contracie, v-viteza de
contracie, a,b, -constante (a-dimensiune de for, b de vitez). Fmax - fora maxim dezvoltat de
muchi pentru o anumit lungime iniial la care se declaneaz contracia (izometric).

Fig. 15. Relaia dintre for i viteza de scurtare conform ecuaiei Hill

De aici, viteza de contracie va fi:

v = (Fmax -F)b/(F+a)
Se obine viteza maxim, vmax, pentru F=0.
La fore mari muchiul se alungete i nu mai respect relaia Hill.

Puterea dezvoltat de muchi:

P = Fv = F(Fmax -F)b/(F+a)

Puterea este nul pentru F = 0 i F = Fmax (izometric) (Fig. 16). Ecuaia Hill corespunde
unei curgeri vscoase (frecarea la nivelul punilor n glisare).

Fig. 16. Puterea dezvoltat de muchi (dup D. Eremia, 1993)

4. Aplicarea principiului I al termodinamicii n cazul contraciei musculare

La scurtarea unui muchi cu x, mpotriva unei fore F, se efectueaz un lucru mecanic L

= Fx.
CURS DE BIOFIZIC MEDICAL 10

Att n repaus, ct i n contracie, muchiul degaj cldur. Cldura disipat (Fig. 17) de
muchi este :

Fig. 17. Cldura dezvoltat de muchi (dup D. Eremia, 1993)

- Q1 - cldura de repaus;
- cldura de contracie, care la rndul ei este cldura de meninere a forei de contracie
Q2 i cldura de scurtare Q3 (proporional cu gradul scurtrii);
- cldura de relaxare Q4, care se produce imediat dup ncetarea stimulrii;
- cldura de restabilire Q5, care se produce n urma reaciilor chimice de regenerare a
ATP. ntruct pentru acest din urm proces este necesar un timp mult mai lung, el nu apare
reprezentat n grafic.
Cldura degajat de muchi este rezultatul reaciilor chimice i proceselor mecanice
(ntinderea unor structuri elastice din muchi, frecri interne). Energia intern a muchiului este
rezultatul unor reacii chimice (hidroliza ATP, reacia creatinchinazei, a miochinazei etc.)
Variaia energiei chimice se calculeaz pentru fiecare reacie:
U = iUmol i = Q - Fx
unde: i - numrul de moli de reactani consumai (gradul de avansare a reaciei)
Umol i - energia molar a reaciei respective, luat din tabele.

5. Motoare biologice moleculare

Miozina, care alctuiete filamentul gros al sarcomerului, face parte din clasa motoarelor
biologice moleculare. Acestea sunt structuri proteice implicate n micrile active ale unor
organite celulare sau ale unor celule (locomoie). Asemenea micri active se efectueaz cu
consum de energie metabolic (hidroliza ATP, GTP; gradiente transmembranare de potenial
electrochimic). n cele ce urmeaz se face o prezentare introductiv a unor tipuri de motoare
moleculare. Dintre acestea fac parte:

1. Simple proteine contractile

2. Motoare moleculare lineare
3. Motoare moleculare rotative

1. Din prima categorie se pot meniona filamentele contractile cum ar fi spasmonema din
piciorul de fixare al coloniilor unicelulare de Vorticella sau proteina motoare prestin din
membrana bazolateral a celulelor ciliate externe. Aceste proteine se pot contracta i relaxa n
funcie de compoziia ionic a mediului.

2. Motoarele moleculare lineare sunt macromolecule proteice capabile s remorcheze organitele

celulare i s le transporte de-a lungul unor structuri fibrilare citoscheletale de tipul
microfilamentelor si microtubulilor. Acestea dispun de dou (sau, n cazul dineinelor, mai
multe) capete globulare identice (sau cvasi-identice) legate prin dou lanuri peptidice la un
dublu lan de forma unui bastona, numit adesea "coad) (Fig. 18). Se pot meniona mai multe
clase de motoare moleculare lineare, cum ar fi:
CURS DE BIOFIZIC MEDICAL 11

Familia miozinelor (muchi i structuri ne-musculare)

Familia dineinelor (cili, flageli)
Familia kinezinelor (transportul organitelor)

Miozinele se gsesc att n muchi ct i n alte structuri, de exemplu n rdcinile stereocililor

celulelor ciliate din organul lui Corti.

Dineinele se leag de microtubuli i utilizeaz energia moleculelor de ATP pentru a se mica

dinspre captul pozitiv al tubulului spre cel negativ. Fiecare pas necesit hidroliza unei molecule
de ATP. Dineina trage materialele subcelulare nspre centrul celulei (Fig. 18) sau, n cazul
mitozei, spre polii fusului.

Fig. 18. Dineina trage o vezicul sau un organit nspre captul negativ (nspre centrul celulei) iar kinezina trage
nspre captul pozitiv (nspre marginea celulei)(adaptat dup
https://cellbiology.med.unsw.edu.au/cellbiology/index.php/2014_Group_4_Project#Motor_Proteins)

Kinezinele parcurg distane de ordinul mm de-a lungul microtubulilor n sensul invers dineinei -
spre marginile celulei (Fig. 18, 19). Un exemplu l constituie transportul veziculelor cu
neurotransmitori de-a lungul fibrei nervoase nspre terminaiile acesteia. La fiecare pas, de
aproximativ 8 nm, este hidrolizat o molecul de ATP.

Fig. 19. Transportul unei vezicule de ctre kinezin dinspre centrul nspre marginea celulei (ex. n terminaiile
nervoase)(adaptat dup http://www.wikilectures.eu/index.php/Molecular_motors

n figura 20 este prezentat cuplajul ntre hidroliza ATP i modificrile conformaionale

ale kinezinei (Alberts et al., 2002).
CURS DE BIOFIZIC MEDICAL 12

Fig. 20. Cuplajul ntre hidroliza ATP i modificrile conformaionale ale kinezinei (adaptat dup Alberts et al.,
Molecular Biology of the Cell, 2002)

La nceputul ciclului captul anterior al kinezinei este legat de microtubul iar cel
posterior este desprins. La legarea ATP de captul anterior se produce o modificare
conformaional n urma creia captul posterior ajunge naintea celui care fusese anterior.
Eliberarea ADP din noul capt anterior i hidroliza ATP de pe fostul capt anterior au ca rezultat
o configuraie identic cu cea de la nceputul ciclului, ns captul care fusese iniial posterior a
devenit anterior astfel nct kinezina a naintat cu un pas.

Fig. 21. ATP-sintetaza (adaptat dup http://en.wikipedia.org/wiki/File:Atp_synthase.PNG )

3. Motoarele moleculare rotative sunt actualmente intens studiate ns mecanismul lor de

funcionare nu este elucidat complet. Un exemplu de motor molecular rotativ este cel al ATP-
sintetazei. Aceasta se prezint ca un motor n care subunitatea alctuiete rotorul, statorul fiind
confecionat din 3 subuniti i 3 subuniti (Fig. 21). La trecerea protonilor se rotete partea
globular i prin rotire se stabilete o conformaie favorabil sintezei de ATP. Invers, cnd exist
ATP n exces, acesta este hidrolizat i se elibereaz energie care duce la rotaia subunitilor C
(care formeaz rotorul). Astfel este favorizat transportul de protoni. Mecanismul transportului de
protoni n subunitile C nu este complet elucidat.