LP. 13. DIAGNOSTICUL DE LABORATOR ÎN CANDIDOZE ORALE.
IDENTIFICAREA LEVURILOR DIN GENUL CANDIDA.
I. OBIECTIVE
Să cunoască etapele diagnosticului de laborator în candidozele orale.
Să cunoască etapele identificării levurilor din genul Candida.
II. DIAGNOSTICUL DE LABORATOR ÎN CANDIDOZE ORALE se realizează
prin metode directe – presupune examenul microbiologic al raclatului din leziune.
Candidoza – infecție fungică (micoză) determinată de levuri din genul Candida.
Specii: Candida albicans, Candida tropicalis, Candida krusei, Candida glabrata, etc. Genul Candida include levuri ovalare/poligonale gram-pozitive, cu dimensiuni de 5-10 μm, care se înmulțesc prin înmugurire, celula fiică purtând numele de blastoconidie. Habitat: fac parte (in numar redus) din microbiota cavităţii orale, colonului, vaginului, tegumentului. Speciile din genul Candida sunt condițonat patogene, în anumite condiții favorabile (după antibioticoterapie cu spectru larg, la pacienți cu imunitate scăzută, pacienți cu proteze dentare) devin patogene, deteminând leziuni superficiale la nivelul mucoaselor. La pacienţii cu imunitate sever afectată (SIDA) pot determina infecţii sistemice.
Produs patologic: raclat din leziune
1. Examen microscopic – frotiu colorat albastru de metilen – alaturi de celule epiteliale
scuamoase şi de bacteriile prezente în mod normal în numar mare, putem observa în numar mare celulele levurice 5-10 μm, înmugurite sau cu pseudohife, în prezenţa unei reacţie inflamatorie (dovada patogenităţii levurii). 2. Cultivarea – permite izolarea levurilor in scopul identificării speciei şi testării sensibilităţii la antifungice. →pe mediu Sabouraud –24-48 de ore de incubare aeroba la 37°C, formează colonii de tip S, rotunde, bombate, strălucitoare, de culoare alb-crem, consistență untoasă; cultura degajă un miros caracteristic de aluat proaspăt (drojdie); →mediu cu extract de porumb → levurile din genul Candida vor crește submers formând pseudohife cu blastoconidii și chlamidoconidii.
III. IDENTIFICAREA LEVURILOR DIN GENUL CANDIDA.
1. Caractere microscopice – frotiu colorat Gram
→ din cultură pe mediul Sabouraud – observam celule levurice înmugurite (celulele fiice = blastoconidii) → din cultură pe mediul cu extract de porumb –celule levurice cu blastoconidii (celule fiice), chlamidoconidii (forme de rezistenţă), pseudohife (levuri alungite sub forma de filamente) 2. Caractere de cultură –colonii caracteristice de tip S, rotunde, bombate, strălucitoare, de culoare alb-crem, consistență untoasă; cultura degajă un miros caracteristic de aluat proaspăt (drojdie); mediu cu extract de porumb → levurile din genul Candida vor crește submers. 3. Testul de filamentare în ser (testul de blasteză sau germ-tube test) – identifică specia Candida albicans; aceasta este singura levură care formează după 2-4 ore de incubare în ser sanguin nişte prelungiri „în deget de mănuşă” numite tubi germinativi. 4. Caractere biochimice – pentru identificarea speciilor Candida non-albicans.
Antifungigrama – metoda diluţiilor, metoda punctelor de ruptură.