Obiective:

1.Sa cunosc notiune de sterilizare si dezinfectie

2. Sa cunosc actiunea agentilor fizici asupra microorganismelor.
3. Sa cunosc Factorii chimici asupra microorganismelor
4.Sa cunosc factorii biologici asupra microorganismelor.

Descrierea factorilor mediului ambient și influența lor asupra

microorganismului.

Activitatea vitală a microorganismelor se află în legătură strînsă cu

condițiile mediului înconjurător. Toți factorii mediului ambient , care
acționează asupra microorganismelor , pot fi împărțite in trei grupe:
fizici, chimici și biologici.
Factorii fizici:
Cea mai mare influneță asupra microrganismelor au temperature,
uscarea , radiația și ultrasunetul.
Temperatura: de regulă se exprimă cu ajutorul a trei puncte:
minimum-temperatura mai jos de care reproducerea mi/o se stopează,
optimum- cea mai favorabilă temperature pentru creșterea și înmulțirea
mi/o , maximum- temperature mai sus de care activitatea vitală a mi/o se
reduce considerabil.
Uscarea: Pentru activitatea normal a mi/o este necesară apa. Uscarea
condiționează dehidratarea citoplasmei, distrugerea integrității
membrane citoplasmatice, în consecință se dereglează nutriția celulelor
bacteriene și moartea timpurie a acestora. Termenele de peire a diferitor
specii de mi/o se deosebesc considerabil. Vibrionul holerei rezistă
lauscarea în decurs de 48 ore, salmonelele fibrei tifoide – 70 de zile, iar
microbacteriile tuberculozei – 90 de zile. Însă după uscarea a bolnavilor
de tuberculoză, în care agentul pathogen est eprotejat de husă proteică,
rămîne contaginoasă timp de 10 zile.
Radiația: În natură mi/o sunt supuse permanent actiunii radiației
solare. Razele solare directe condiționează moartea multor
microorganism în decurs de cîteva ore, cu exepția bacteriilor
tofosintezatoare. Ele inactivează fermenții celulelor și afectează
moleculele de AND. Bacteriile patogene sînt mai sensibile la acțiunea
razelor ultraviolet decăt cele saprofite. Din această cauză culturile
microbiene, în condițiile de laborator, e necesar să fie păstrate la
intuneric. În acest caz este demonstrative experiența efectuață de
Buchner. Ultrasunetul conditionează considerabil in celula bacteriana .
sub actiunea ultrasuentului gazelle , aflate in mediu licid al citoplasmei ,
se activează și in interiorul cellule apare presiunea inalta (circa 10000
atm.). În consecință se livrează anvelopa celulară și celula moarta.
Ultasunetul se întrebuințează la sterilizarea produselor alimentare
(laptelui, sucurilor de fructe0 apei potabile.

Factorii chimici
Actiunea substantelor chimice asupra microorganismelor variză
puternic in funtie de originea compusului chimic , concetratia si durata
actiunii acestuia asupra celulei bacteriene. În deppendență de
concentrația , substanța chimicapoate fi sursa nutritive sau sa exercite
influnta negative asupra mi/o. Substantele chimice , folosite , pentru
efectuarea dezinfectiei , se numesc deezinfectanti. Antisepticele
reprezinta subsntaemice care pot conditiona moartea microorganismelor
sau sa retina cresterea si reproducerea lor.
Factorii biologici
În conditiile natural de viata mi/o nu exista in mod izolat, ci se află in
relatii complexe, care tin in special de simbioză, metabioza si
antagonism.
Simbioza reprezinta convietuirea speciilor , care le crează avantaje
reciproce. In acest caz existentain comun a organismelor simbolice
asigura dezvolatrea mai buna a acestora decit a fiecarui microorganism
in parte.
Metabioza reprezinta un asa tip de relatii in care produsele metabilice
ale unei specii de mi/o crează conditii favorabile necesare penrtu
dezvoltarea altor microorganism. Relatiile metabiolice sint raspindite
larg printer mi/o solului si formeaza baza circuitului substantelor in
natura.
Antagonismul reprezinta un tip de relatii intre mi/o , in care o specie
de mi/o inhibă dezvoltarea altei specii sau poate conditiona moartea ei.

2. Caracterizarea metodelor de dezinfecție și sterilizare utilizate

în microbiologie.

Sterilizarea reprezinta eliberarea complexa a obiectelor mediului

exterior de mi/o . sterilizarea se efectuează prin mai multe metode:
Fizică (actiunea temperaturii inalte, razelor ultraviolet, aplicarea filtrelor
bacteriene) chimice( folosirea diferitilor dezinfectanti, antiseplticelor),
biologice( aplicarea antibioticelor).

Metodele fizice de sterilizarea

Flambarea sau calirea la flacara arzatporului reprezinta sterilizarea ,
care asigura distrugerea complexa a mi/o de pe obiectele sterilizate: aici
sint inactive atit formele vegetative , cit si sporifere ale mi/o.
Sterilizarea cu aer fierbinte se efctuează in cuptoarele Pastreur
(dulapuri cu caldura uscata). Dulapul se incalzeste cu ajutorul lampilor
de gaz sau al incazitoarelor electrice. Dulapurile cu incalzire electrica
sint inzestrate cu regulatoare, care asigura temperatra necesară.

Sterilizarea prin fierbere

Fierberea reprezinta modul de sterilizarea , care asigura excluderea
mi/o in cazul absentei sporilor in materialul de sterilizat. Se foloseste
pentru prelucrarea seringelor , instrumentelor , veselei din sticla si din
metal, tuburilor dien metal, etc. Ea se efectueaza prin 2 metode : cu
vapori saturati sub presiune si cu vapori fluizi.
Sterilizarea cu vapori saturati sub presiune se efctueaza in autoclave.
Se baseaza pe actiunea asupra materialelor de sterilizat a vaporilor de
apa asaturati la presiunea mai mare decit cea atmosferica.
Sterilizarea cu vapori fluizi se efcetueaza in aparatul Koch. Aceasta
metoda se aplica in cazurile cind obiectul destinat sterilizarii se schimba
la temperature mai maare ecit 100gradeC . Cu vaporia fluizi se
sterilizeaza mediile de cultura , care cintin urina , glucida, lapte , cartofi,
gelatin etc.
 Metodele chimice de sterilizare
Metodele chimice de sterilizarea se aplica limitat si serveste in
special pentru prevenirea poluarii bacteriene a mediilor de cultura si
preparatelor umunobiologice(vaccinuri, seruri)
Cel mai frecvent la mediile de cultura se aduga chloroform , tolual,
eter. La necesitatea de a elibera mediile de cultura acesti conservanti ,
elel se incalzesc pe baia de apa la temperature de 50 grade C.
Autoclava reprezinta un cazan masiv acoperit cu un invelis metallic
care se inchide ermetic cu un capac mare inzestrat cu suruburi mobile.
Camera de sterilizarea e inzestrata cu robinet de evacuarea si supapă de
sigurantă, destinate penrtu evacuarea vaporilor la depasirea presiunii .
Pentru determinarea presiunii in caera de sterilizarea se utilizeaza
maometrul.
Aparatul Koch reprezinta un cilindru metallic, acoperit la exterior
(pnetru reducerea cedarii de caldura) cu pislă sau azbest. Începutul
sterilizarii este considera momentul eliminadurii enrgiei a vaporilor prin
orifice si la marginile capacului. Materialul se tserilizeaza timp de 30-60
min . După terminarea sterilizarii incalzirea se inrerupe .
Din apparat se scoate caldaria cu material si se lasa la
temperaturacamerei pina in ziua urmatoare. Icalzirea se repeta 3 zile la
rind pina in ziua următoare da 100 dgrade C cite 3- 60 min . O astfel de
metoa poarta adenumirea de sterilizarea fractionara.
 Coagulatorul Kock reprezinta o lada metalica plata cu pereti dubli ,
acoperita la exterior cu material isolator pentru a reduce cedarea de
caldura.
Orificiul se stupa cu un dop, in care este montat termometrul.
Coagulatorul Koch se astupă cu doua capace: din sticla si metallic.
Încalzirea coagulatorului se efecteaza cu ajutorul gazului sau al
elementelor electrice. Mediile se sterilizeaza la temperature de 90
graddeC in decursul de o ora sau fractionar pe parcrsul a 3 zile la rind ,
la temperature de 80 grade C, in decurs de o ora.

Sterilizarea reprezinta actiunea prin care se obtine suprimarea

oricarei flore microbacteriene

Dezinfectia este procesul de inactivare a microorganismelor de pe

suprafete