Universitatea de Stat de Medicină şi Farmacie ''Nicolae Testemiţanu''

Catedra de Biologie Moleculară şi Genetică Umană

      
           ISPD
                                           

                                                                                     Coordonator : Galbur Viorica, asistent

universitar
                                                                                      A elaborat: Rujina Iana, gr. M1810
 CUPRINS
 Localizarea citogenetică
 Structura genei
 Funcţiile genei
 Expresia genei
 Etapele expresiei
 Reglarea expresiei
 Proteina
 Structura proteinei
 Localizarea proteinei; Locul sintezei; Locul maturizării
 Interacţiuni
 Rol medical
 Bibliografie
ISPD isoprenoid synthase domain containing
 este o genă structurală de clasa II,  ce codifică proteina  2-C-metil-D-eritritol-4-
fosfat citidililtransferază. Mutațiile acestei gene provoacă sindromului Walker-Warburg. 

Localizarea citogenetică
7p21.2  ;
Cromozomul – 7
Braţul proximal
Regiunea 2
Banda 1
Subbanda 2 16,087,527 până la 16,502,500  pb.
Structura
  

 Willer (2012) a stabilit că gena

ISPD conține 10 exoni de
codificare, 9 introni și
cuprinde aproximativ 334 kb.
16,087,527 până la
16,502,500  pb.
Gena ISPD furnizează instrucțiuni pentru realizarea proteinei care este
implicată în procesul de glicozilare. Prin acest proces chimic, se adaugă
molecule de zahăr la anumite proteine. În special, proteina ISPD ajută la
producerea unei molecule de ribitol 5-fosfat, care este o componentă
importantă a lanțului de molecule de zahăr ce se adăugă la  proteina alfa (a)
-distroglican. Glicozilarea este critică pentru funcția normală a α-
dystroglicanului.

Proteina α-dystroglican ajută la ancorarea cadrului structural în interiorul

fiecărei celule (citoschelet) la rețeaua de proteine și alte molecule din afara
celulei (matricea extracelulară). În mușchii scheletici, a-dystroglicanul
glicozilat ajută la stabilizarea și protejarea fibrelor musculare. În creier,
reglează direcția mișcării (migrației) celulelor nervoase (neuronilor) în timpul
dezvoltării timpurii.
 organism
• asigură locomoţia, respiraţia, simţul de
tactil La nivel
• asigură interacţiunea intercelulară, stabilitatea fibrelor musculare,
deoarece glicozilarea are importanţă sporită pentru funcţionarea
dystroglicanului, care leagă matricea extracelulară de cablurile
actinei intracelulare, asigură integritate structurală în țesuturile

celular
musculare. Complexul dystroglican servește ca receptor de agrin în
mușchi, unde poate regla gruparea receptorilor de acetilcolină
indusă de agrină la joncțiunea neuromusculară. Dystroglycanul este

La nivel
o parte a căii de transducție a semnalului 
• codifică pentru sinteza
molecular
polipeptidului 2-C-metil-D-eritritol-
4-fosfat citidililtransferazei 
La nivel
Funcţii
Expresia genei

Folosind un test de complementare fibroblast, analiza legăturii și

secvențierea exonului pentru a identifica gene noi mutate la
indivizi cu sindrom Walker-Warburg s-a identificat gena ISPD şi
proteina dedusă de 451 aminoacizi, care are un domeniu catalitic
central. RT-PCR cantitativ a detectat expresia ISPD în toate
țesuturile examinate, cu cea mai mare expresie în creier, urmată
de placentă. Cea mai mică exprimare a fost în pancreas și splină.

Modelele de splicing alternativ au ca rezultat variante multiple de

transcriptomi, din care şi rezultă sindromul Walker-Warburg
Expresia în
diferite ţesuturi
-Inima
-Muşchii
scheletici
-Intestinul
subţire
-Glanda tiroidă
-Piele
-Pancreasul
-Glande salivare
-Ovarele
-Uterul
-Stomacul
etc.
 Etapele expresiei
Transcripţia genei ISPD cu sinteza 
preARNm- responsabil: ARN-
polimeraza II, gena de clasa II ISPD

Processing-ul  ARNm 
            CAParea – guanilat-
transferaza (7MeG5'ppp5'
Maturizarea preARNm) 
polipeptidului cu     Poliadenilarea – PolyA-
polimeraza
formarea proteinei 2-
C-metil-D-eritritol-4-  Splicing  -
splicesome(ARNsn+proteine)
fosfat citidililtransferaz U1,U2,U4,U5,U6   (ARNm
a matur) 

Translaţia ARNm cu sinteza Exportul ARNm asociat cu

polipeptidului – ARNm, proteine din nucleu în citoplasmă
ribozom, ARNt, aminoacil- prin porul nuclear cu ajutorul
ARNt-sintetaza, peptidil- exportinelor 
transferaza 
Reglarea expresiei
TAFs pot fi hormoni sau alte substante biologic active, ele pot
ajunge in nucleu din citosol, iar in citosol din matricea
intercelulară.
TAFs:
SMARCE1
MEIS2
PKNOX1
SOX6
TEAD4
CBFA2T3
KLF4
E4F1
MEF2D
IKZF1
NFE2
MLLT1
NR2C2
Proteina 2-C-metil-D-eritritol-4-
fosfat citidililtransferaza
 ISPD-
PROTEIN
Structura
451 aminoacizi; 49873 Da
Homodimer.
Funcţia
Cytidyltransferaza necesară pentru manozilare cu proteină O.
Catalizează formarea zahărului nucleotidic CDP-ribitol din 5-
fosfat de D-ribitol . CDP-ribitolul este un substrat al FKTN în
timpul biosintezei trisacaridei O-manozil fosforilate (manoză
N-acetilgalactozamină-beta-3-N-acetilglucozamină-beta-4-
(fosfat-6) (DAG1), care este necesar pentru legarea
proteinelor extracelulare cu domeniu de tip laminină G, cu
afinitate ridicată . Afișează activitatea față de alte zaharuri
de fosfat de pentoză și mediază formarea de CDP-ribuloză
sau CDP-riboză folosind CTP și respectiv 5-fosfat de ribuloză
sau 5-fosfat de riboză . Nu este implicat în producția de
dolichol.
LOCALIZAREA

Compartment Confidence
cytosol 5
plasma membrane 2
extracellular 1
mitochondrion 1
peroxisome 1
nucleus 1
golgi apparatus 1
Interacţiuni
. PAPSS1 3'-fosfoadenozin 5'-fosfosulfat sintaza 1; Enzima bifuncțională atât cu
activitatea ATP sulfurilază, cât și cu activitatea APS kinazei, care mediază două
etape în calea activării sulfatului. Prima etapă este transferul unei grupări sulfat la
ATP pentru a se obține 5'-fosfosulfat de adenozină (APS), iar a doua etapă este
transferul unei grupări fosfat de la ATP la APS producând 3'-fosfoadenililsulfat
(donator sulfat activat PAPS utilizat prin sulfotransferază). La mamifere, PAPS este
singura sursă de sulfat; APS pare să fie doar un intermediar în calea de activare a
sulfatului. ( 924 aa) 

. ELAC1 Zinc fosfodiesterază, care afișează o activitate de endonuclează de

prelucrare a 3'-ARNt. Probabil implicat în maturarea ARNt, prin îndepărtarea unei
remorci 3 'de la ARNt precursor. (363 aa)

. ELAC2   Zinc fosfodiesterază, care afișează activitatea endonucleazică a 3'-

ARNt  mitocondrial. Implicată în maturizarea ARNt, prin îndepărtarea unui trailer 3'-
ARNt precursor. (826 aa)
.ISPD codificator de proteină; Necesar pentru manozilarea cu proteină O.
Acționează ca o nucleotidiltransferază implicată în sinteza unui 
zahăr de nucleotide. Necesar pentru O-
mannosilarea dystroglicanului (451 aa)

. PAPSS2    3'-fosfoadenozin 5'-

fosfosulfat sintază 2; Enzima bifuncțională atât cu activitatea ATP 
sulfurilază, cât și cu activitatea APS kinazei, care mediază două etape în 
calea activării sulfatului. Prima etapă este transferul unei grupări sulfat la 
ATP pentru a se obține 5'-
fosfosulfat de adenozin (APS), iar a doua etapă este transferul unei grupăr
i fosfat de la ATP la APS producând 3'-fosfoadenililsulfat
(donator sulfat activat PAPS utilizat prin sulfotransferază). 619 aa 

. ENSG00000267699 Proteină necaracterizată (86 aa)
 Rol medical
Mutațiile în ISPD cauzează sindromul Walker-Warburg și glicozilarea
defectată a a-dystroglycanului. Sindromul Walker-Warburg (WWS)
este o tulburare multisistemă recesivă autosomală caracterizată prin
anomalii complexe ale ochilor și ale creierului, cu distrofie musculară
congenitală (CMD) și glicozilarea a-dystroglycan aberantă.  Mutații în
gena ISPD sunt considerate drept a doua cauză comună a WWS.
Fenotipul WWS uman se recapitulează cu hidrocefalie, dimensiunea
redusă a ochilor, degenerarea musculară și a-dystroglicanul
hipoglicozilat. Aceste rezultate implică ISPD în glicozilarea a-
dystroglicanului în menținerea integrității sarcolemului la vertebrate.
(a) axial T1  și (b)parasagital T2
 prezintă hidrocefalie.
Mulţumesc pentru atenţie!!!
Bibliografie

 Suport de curs la Biologie Moleculară

 https://ghr.nlm.nih.gov/gene/ISPD
 https://www.genecards.org/Search/Keyword?queryString=I
SPD
 https://www.uniprot.org/uniprot/A4D126