Clorofila Magneziul este esenial pentru creterea plantelor i ca urmare, la plantele superioare se gsete ntr-o cantitate de 80 mol/g de mas

uscat. Este preluat n mod diferit de ctre plante din sol, prin intermediul sistemului de rdcini. Pentru plante, magneziul mediaz i activeaz multe reacii biochimice, fiind necesar pentru stabilizarea membranelor, utilizarea ATP-ului, este implicat n biochimia acizilor nucleici i este cofactor pentru multe enzime. Magneziul intr n compoziia clorofilei, compus indispensabil procesului de fotosintez care are loc n plantele verzi i alge, 6% din totalul de magneziu fiind legat la clorofil. Fotosinteza reprezint procesul de utilizare a energiei solare pentru activarea reaciei chimice ntre dioxid de carbon i hidrogenul din componena apei, pentru sinteza compuilor organici i eliberarea oxigenului. Rolul magneziului pentru acest proces a fost descoperit de R. M. Willsttter care n 1915 a primit premiul Nobel n chimie pentru purificarea i determinarea structurii clorofilei. n anul 1780, chimistul englez Joseph Priesley, a descoperit c plantele produc oxigen folosind ment pe care a introdus-o ntr-un borcan aezat cu gura n jos, ntr-un vas cu ap; concluzia sa: Aerul nici nu stinge lumnarea i nici n-a fost un inconvenient pentru oarecele introdus n borcan, plednd pentru formarea oxigenului n condiiile experimentale date. n clorofil, magneziul este coordinat la patru atomi de azot ai unul ligand macrociclic tetrapirolic. n timpul fotosintezei, acest compus particip la procese redox multielectronic, ns nu prin intermediul magneziului care are n principal un rol structural. Acest element asigur sistemului o rigiditate bidimensional care determin reducerea pierderilor de energie prin vibraii termice i astfel se mrete randamentul de conversie al luminii. Clorofilele sunt pigmeni naturali prezeni la toate organismele capabile de a realiza fotosinteza la algele verzi, cianobacterii i plantele superioare. Bacterioclorofilele se ntlnesc la bacteriile verzi i vineii. Ambele clase absorb intens lumina din vizibil i joac un rol cheie n captarea energiei luminoase n timpul fotosintezei. Dei rspndite n ntreg regnul vegetal, numrul clorofilelor este redus: Chl a, Chl b, Chl c1, Chl c2, Chl d, Proto-Chl, Bacterio-Chl i Chl-Chlorobium. Clorofilele c 1 i c2 conin mai degrab ciclul porfirinic i nu clorinic. De departe, cea mai rspndit i cel mai mult studiat este Chl a. Extracia, separarea i purificarea clorofilelor a fost realizat de Strain i Svec n 1966. n laborator s-au obinut piroclorofilele a i b (PChl a i PChl b). 5.1.1. Structura molecular a clorofilelor Clorofilele sunt tetrapiroli macrociclici ai Mg2+ din clasa. ntre clorofile i compuii de tip hem exist asemnri i deosebiri. Prezena magneziului este esenial pentru funcia clorofilelor. Magneziul se poate nlocui cu 2H+, Fe2+, Co2+, Ni2+, Cu2+ sau Zn2+. Dintre acestea, specia cu Zn2+ reproduce limitat comportarea clorofilei. n figura 1 este prezentat formula molecular a clorofilelor.

H2C H3C

CH I N Mg N

R' CH3 II N N V

H3C

IV

III

CH3

H3CO 2C O O

CH3 CH3 CH3 CH3 CH3

Figura 1. Formula molecular a clorofilelor Clorofilele prezint urmtoarele caracteristici: - R: CH3 pentru Chl a; R: CHO pentru Chl b; - R: C20H39 (radicalul fitil derivat de la alcoolul fitol); - ligandul este un macrociclu tetrapirolic de tip clorin; - ciclul IV este parial redus rezultnd macrociclul dihidroporfirin; - fa de planul celor patru atomi de azot, ciclurile I i II sunt situate deasupra n timp ce ciclurile III, IV i V sunt situate dedesubt; - ciclul V de tip ciclopentanon are ca substitueni o grupare ceto la C 9 i un hidrogen i o grupare carbometoxi la C10; - la C7 apar ca substitueni un atom de hidrogen i esterul acidului propanoic cu fitol (R: C20H39, fitil) care are rolul de a lega Chl de membrana celular a cloroplastelor; - magneziul se afl deasupra planului celor patru atomi de azot cu 0,3-0,5 ; - substituenii de la C1, C2, C3, C4, C5 i C8 sunt aproximativ aceiai (metil, vinil) ca la hem, probabil ca rezultat al cilor biosintetice similare; - n formula din figura 1 magneziul are numr de coordinaie patru dar deplasarea fa de planul celor patru atomi de azot indic un numr de coordinaie mai mare dect patru. Acest lucru a fost acceptat dup ce s-au studiat proprietile spectrale neobinuite ale Chl (1968). 5.1.2. Studii spectroscopice. Funcionarea Chl ca donor-acceptor Spectrul de absorbie la Chl a1, cromoforul din procesul de fotosintez, este prezentat n figura 2. Benzile de absorbie intense din vizibil (numit band Q) i cea de la limita vizibilultraviolet (banda Soret) sunt caracteristice pentru porfirine fiind atribuite tranziiilor *.

Figura 2. Spectrele de absorbie (a), de la alge (b) sau bacterii (c) (n dodecan)

ale

unor

clorofile

de

origine

vegetal

n aceton i ali solveni organici, soluiile clorofilei sunt de culoare albastr, fluorescente i au maximul de absorbie la aproximativ 662 nm. Soluiile apoase sunt galben-verzui, cu maximul de absorbie deplasat spre rou (aproximativ 740 nm) i nu sunt fluorescente. Din aspectul benzii de absorbie rezult c exist 26 forme diferite de clorofil n mediul apos. Interpretarea spectrelor s-a fcut pe baza proprietilor coordinative ale Mg 2+. n clorofile magneziul este nesaturat coordinativ cu numr de coordinaie patru i ca urmare, cel puin o poziie axial poate fi ocupat cu grupri donoare de electroni. n solveni polari, solventul poate ocupa una sau amndou poziiile coordinative vacante. n solveni nepolari, moleculele de clorofil se autoagreg cu formare de dimeri sau oligomeri, deoarece Chl este o molecul cu proprieti unice, respectiv are un centru donor, gruparea C=O de la C9 i un centru acceptor, Mg2+. n funcie de natura solventului se pot observa interacii Chl-Chl (endogame), interacii ChlL (exogame, cu nucleofili) sau echilibre ntre speciile Chl. n solveni nepolari molecula de clorofil se autoagreg (interacii endogame) formnd dimeri (echilibrul K1) sau oligomeri (echilibrul K2):

2 Chl n ( Chl2)

Chl2 ( K1 ) ( Chl2 )n ( K2 )

.
O

.
O

. .
O O

.
O

Dimer

O Oligomer

n solveni polari (nucleofili, baze Lewis puternice) dimerul clorofilei interacioneaz cu acetia (interacii exogame), formnd aduci cu magneziul pentacoordinat (echilibrul K3) sau hexacoordinat (echilibrul K4):

Chl2 + 2L Chl.L + L

2 Chl.L ( K3 ) Chl.L2 ( K4 )

.
L O O

.
L L

Valoarea constantei de echilibru K3 fiind de aproximativ 100 de ori mai mare comparativ cu K4 rezult c a asea poziie de coordinaie se ocup mai greu, numai cu solveni net polari. Interacia clorofilei cu ap a fost elucidat prin cromatografie n faz de vapori. Apa este un nucleofil unic pentru clorofil, poate forma simultan dou legturi de hidrogen, are un atom de oxigen care poate funciona ca atom donor i are volum mic. Specia hidratat prezint n IR benzi n regiunea 3240-3590 cm 1, caracteristice modului de vibraie (OH). Interaciile endogame se desfac i se coordineaz apa n raportul 1Chl : 1H2O. Molecula de ap se leag simultan prin dou puni de hidrogen la gruparea carbonilic C=O de la C9 i la gruparea esteric C=O de la C10. Ca urmare, apa funcioneaz n acelai timp ca acid i baz Lewis.

( Chl )n + 2n H2O

.
O O H O

2 ( Chl.OH2 )n

H3C O

.
O H O H

H3C O

C O

Atomul de oxigen al moleculei de ap se leag la alt molecul de clorofil, n felul acesta aprnd aduci cu greuti moleculare mari (ChlH2O)n, cu dimensiuni coloidale n hidrocarburi alifatice. Absorbia maxim de la aproximativ 740 nm este responsabil de culoarea galben-verzuie a soluiilor apoase. Antena clorofilei const din lanuri (Chl)n care se termin cu o unitate (ChlH2OChl).

.
O

.
O

"antena clorofilei"

.
H O centrul activ in procesul redox care sta la baza fotosintezei

.
O H

H3C O

C O

Aceast unitate reprezint centrul activ n procesul redox care st la baza fotosintezei. Detaliile fotosintezei nu sunt nc total cunoscute; se accept urmtoarea interpretare: clorofila absoarbe lumina de energie joas din domeniul rou al spectrului (aprox. 700nm) frecvena exact depinznd de natura substituenilor la porfirin; n fotosintez sunt implicai i ali pigmeni (carotenoide, citocromi) care absorb lumina de energie nalt. Absorbia luminii are o funcie dubl: (1) energia poate fi transmis de-a lungul sistemului Chl i utilizat n fotosintez, (2) protejeaz sistemul biologic de efectele biologice negative.

Se tie c o molecul de pigment excitat este un reductor mai bun i un oxidant mai bun dect n stare fundamental; Chl excitat poate iniia o serie de reacii redox (demonstrate cu frunza artificial). Procesul fotosintetic din plantele verzi const n scindare n elemente a apei, urmat de reducerea dioxidului de carbon. 2H2O [2H2] + O2 CO2 + [2H2] 1/x (CH2O)x +H2O Demonstrarea faptului c clorofila este un transportor de electroni implicat n procesul redox care st la baza fotosintezei, s-a fcut cu ajutorul experimentului frunza artificial. Experimentul s-a realizat ntr-o celul fotovoltaic din material transparent, ce conine la mijloc o membran sau o folie metalic pe care se depune sau n care se impregneaz; se separ dou compartimente, unul cu soluie apoas de agent oxidant i unul cu agent reductor. Fiecare compartiment este conectat prin electrozi la un circuit extern care conine un microvoltmetru/ampermetru.
sursa de lumina rosie h

agent reducator

agent oxidant

membrana de plastic semipermeabila care contine ( Chl.H2O )n

S-a observat c celula rspunde la lumina roie prin generarea unei diferene de potenial de 422 mV i a unui curent de 24 A; acest experiment demonstreaz funcia redox (transportor de electroni) a aductului (ChlH2O)n Bibliografie : Elemente de chimie bioanorganica Conf. Univ. Elena Mihaela Badea .