Curs 8.

Familia Mycobacteriaceae si alte bacterii patogene

Universitatea de Vest Vasile Goldis Facultatea de Medicina, Farmacie Medicina Dentara Dr. Biol Sergiu Fendrihan

Genul Mycobacterium

aparin familiei Mycobacteriaceae, genul Mycobacterium sunt bacili acido-rezisteni (AAR), adic au proprietatea de a se colora la cald cu fuxin i de a rezista decolorrii cu o soluie de acid sau alcool. Nu se coloreaz prin tehnica Gram. sunt aerobi, necapsulai, imobili i cresc lent pe medii speciale; pereii celulari conin un strat bogat n lipide. -genul include numeroase specii dintre care de interes medical sunt - M. tuberculosis sau bacilul Koch (BK), cu cele dou tipuri hominis i bovis, - M. leprae, agentul etiologic al leprei -i unele mycobacterii atipice ca M. avium-intracellulare, M. kansasii i M. marinum.

Habitat: M.tuberculosis este un patogen specific omului. Principala surs de infecie o reprezint bolnavul care elimin bacili tuberculoi pe cale respiratorie, mai rar pe alte ci, n funcie de localizare. Animalele bolnave pot excreta germeni prin lapte. Celelalte specii pot fi izolate la unele animale i psri. Mycobacteriile sunt foarte rezistente la condiiile de mediu (rezist la frig, la uscciune, putnd supravieui timp ndelungat n sput i alte produse patologice). Sunt distruse rapid prin tratare cu ageni chimici, alcool, sau baze diluate, detergeni. Sunt sensibile la agenii fizici: cldur, lumina solar, radiaiile X i UV. Caractere morfologice i culturale: Mycobacteriile se

coloreaz slab prin coloraia Gram datorit prezenei acidului micolic (ceara D) n peretele celular. n coloraia Ziehl-Neelsen (ZN) apar ca bacili subiri, ramificai, de culoare roie pe fondul albastru al preparatului. Mycobacteriile cresc foarte lent. Mycobacterium hominis apare dup 4-6 sptmni pe medii speciale (Lwenstein-Jensen). Coloniile sunt rugoase, conopidiforme.

Patogenitate
M. tuberculosis, ca i alte mycobacterii, este un patogen intracelular; supravieuirea n interiorul macrofagelor este legat de abilitatea sa de a mpiedica fuziunea lizozomului cu fagozomul. Cel mai des produce TBC pulmonar, dar poate produce i TBC renal, ganglionar, genital, osoas etc.

n ceea ce privete infecia tuberculoas, trebuie fcut o difereniere precis ntre tuberculoza primar i cea de reactivare.
1. Tuberculoza primar. De regul, la individul nevaccinat, bacilii tuberculoi ptrund pe cale aerogen n plmni i vor fi fagocitai aici de ctre macrofage. n macrofagele neactivate bacilii tuberculoi se vor nmuli, deoarece mpiedic fuziunea fagozomilor cu lizozomii. Afectul primar este focarul primar de infecie i apare la proximativ 2 sptmni de la contaminare. Complexul primar este afectul primar la care se adaug hipertrofierea ganglionilor regionali (de regul hilari).

Evoluia infeciei primare este dat de rezultatul competiiei dintre multiplicarea bacililor tuberculoi i de activarea macrofagelor, care sunt capabile s elimine bacilii tuberculoi.

n peste 90% din cazuri evoluia se indreapt ctre vindecare. Focarul se infecie se fibrozeaz i se calcific. n unele cazuri, foarte rare, cnd aprarea antiinfecioas este grav compromis bacilii tuberculoi se nmulesc nestingherii, disemineaz pe cale limfatic i sanguin cu formarea de granuloame n diverse organe producnd tuberculoza miliar cu evoluie fatal. 2. Tuberculoza de reactivare. La 10% din cei infectai, tuberculoza primar evolueaz imediat (5%) sau dup ani de zile (5%) spre tuberculoza de reactivare. Condiii favorizante: scderea imunitii, alcoolismul, subnutriia, diabetul etc. Reactivarea ncepe cu o necroz cazeoas a granuloamului tuberculos care evolueaz pn la cavern i se datoreaz unei stri de hipersensibilitate de tip ntrziat (deci unei reacii imunopatologice) fa de bacilul Koch. La apariia leziunilor particip macrofagele hiperactivate care secret tumor-necrosis factor, care este responsabil i de caexia din tuberculoz.

Imunitate

Omul are o rezisten crescut fa de BK, determinat genetic. Din acest motiv, organismul dobndete dup primoinfecie:
o imunitate specific, dar incomplet (dependent exclusiv de limfocitele T, deci de imunitatea celular), indus de tuberculoproteina prezent n peretele celular al BK. Aceast imunitate se manifest prin faptul c BK rmne localizat n focarul iniial, sau rezultat n urma unei alte infecii. Aceast imunitate este Reacia la tuberculin. Odat cu instalarea imunitii specifice apare n organism i o stare de reactivitate modificat fa de tuberculin care este desemnat ca alergie (reacie de hipersensibilitate de tip IV) la tuberculin. Imunitatea specific i alergia la tuberculina sunt expresia cantitativ ale aceleiai reacii celulare. Reacia la tuberculin se pozitiveaz la 6-8 sptmni de la infecie. Se injecteaz 5 U de tuberculin subcutanat: a trecut prin primoinfecie sau a fost vaccinat eficient: dac nu apare nici o reacie la 72 de ore reacia este negativ i individul trebuie revaccinat, -dac apare un eritem cu un diametru de 10mm, aceast reacie arat c individul,-o reacie mai puternic denot o stare de hipersensibilitate i n aceast situaie, individul trebuie investigat pentru o eventual TBC de reactivare.

Diagnostic de laborator Examinarea microscopic a frotiului din sput, urin sau fragmente de esut prin coloraie ZN arat prezena unor bacili subiri de culoare roie. Poate fi utilizat i colorarea cu rhodamin-auramin fluorescent i examinarea la microscopul cu UV. Cultura se face pe medii speciale (m. Lowenstein-Jensen care conine glbenu de ou, glicerol i acizi minerali cu inhibitori - verde malachit pentru a mpiedica creterea altor bacterii). Datorit creterii lor lente, concomitent cu cultivarea se va proceda i la testarea sensibilitii lor la chimioterapicele antituberculoase. Produsele patologice ca sputa, contaminate cu flor normal sunt pretratate cu acid pentru a reduce contaminarea.

Tratament i prevenie

Tratamentul se face cu medicamente antituberculostatice (rifampicina, izoniazida sau pirazinamida) pentru o perioad lung de timp (>6 luni). Pentru evitarea seleciei de mutante rezistente este necesar asocierea a cel puin 3 chimioterapice antituberculoase. Eficacitatea tratamentului este indicat de negativarea culturilor i a examenului microscopic. n ultimii ani au fost izolate unele tulpini multirezistente la chimioterapicele antituberculoase, ca urmare a unui tratament incorect. Pentru prevenirea infeciei cu M. tuberculosis se impune: imunizarea cu vaccinul viu atenuat (Bacil Calmette-Guerin (BCG), izolarea i tratamentul prompt al bolnavului, combinat cu chemoprofilaxia contacilor.
Infecia cu M. bovis poate fi prevenit prin nimicirea cornutelor tuberculino-pozitive i prin pasteurizarea laptelui.

M. leprae (bacilul lui Hansen)

produce lepra. Epidemiologie. Exist mai mult de 10 milioane de cazuri de lepr n lume, mai ales n Asia, Africa i America de Sud. Nu exist rezervoare animale. Transmiterea se face pe cale respiratorie. Perioada de incubaie este de 2-10 ani; n lipsa profilaxiei, la mai mult de 10% din cazuri se instaleaz boala. Morfologie i identificare. M. leprae este un bacil acido-rezistent care nu se cultiv.

Infecii asociate. Exist dou forme majore de lepr: lepra lepromatoas i lepra tuberculoid, cu stadii intermediare variate.

Lepra lepromatoas se caracterizeaz printr-o infecie progresiv, cu leziuni nodulare tegumentare i cu prinderea nervilor; prognosticul este rezervat.
Lepra tuberculoid, frecvent benign, este forma non-progresiv, cu leziuni maculare tegumentare i cu prinderea masiv, asimptomatic, a nervilor. Vindecarea spontan urmeaz distrugerii tisulare i nervoase. Diagnostic de laborator Se face prin examinarea microscopic a resturilor tegumentare, mucoas nazal, sau fragment de esut obinut prin biopsie dup colorare ZiehlNeelsen. Tratament i control Dapsona este utilizat n tratamentul leprei dar rezistena la acest preparat este n cretere; se asociaz tratamentul cu rifampicin.

Chemoprofilaxia este necesar pentru izolarea contacilor de persoanele contagioase; acest aspect este important pentru copiii care vin n contact cu adulii cu lepr.

Ordinul Spirochetales

Bacteriile din ordinul Spirochetales, sunt bacterii gram negative, subiri (0,1-0,5x5,020,0 m), helicoidale, mobile. Doar cteva dintre spirochete pot fi cultivate in vitro, identificarea i diagnosticul bazndu-se pe testele serologice. Ordinul Spirochetales este divizat n dou familii i cinci genuri

Spirochete i infecii asociate Treponema: T. pallidum-Sifilis T. pertenue-Pianul T. carateum-Pinta Borrelia: B. recurrentis-Febra de recdere B. burgdorferi-Boala Lyme Leptospira:Boala asemntoare gripei Meningit Boala Weil

Treponema

Definiie, caractere generale: Bacterii gram negative subiri (0,5x10,0 m), spiralate (formate din 6-12 spire regulate), mobile, (efectueaz micri caracteristice de rotaie, sau flexiuni sinusoidale) necapsulate, nesporulate. Clasificare. Acest gen cuprinde mai multe specii din care o parte se gsesc n mod normal pe mucoasa tractului respirator superior, pe mucoasa genital la om i care sunt cultivabile in vitro. O parte sunt nalt patogene pentru om: T. pallidum este strict parazita pentru om, prezente numai la omul bolnav i sunt necultivabile. Sunt bacterii spiralate, necultivabile in vitro, care nu se coloreaz prin tehnica Gram. n produsele patologice, formele mobile pot fi vizualizate la microscopul cu fond ntunecat sau prin metode speciale de colorare. Epidemiologie. T. pallidum este agent patogen stric uman, responsabil de apariia sifilisului, maladie cu transmitere sexual (este posibil ns i infecia congenital Factori de patogenitate sunt antigenul lipidic (Wasermann) antigenul proteic (Reiter) si antigene glicopeptidice.

Infecii asociate Sifilisul: este rspndit n lumea ntreag, fiind a treia boal cu transmitere sexual n rile dezvoltate. Spirochetele ptrund n organism prin tegumentul sau membranele mucoase lezate. Survine multiplicarea local cu infiltat celular inflamator urmat de endarterit. Infecia parcurge trei faze: primar (sancrul sifilitic ulceratii specifice), secundar (leziuni polimorfe pe mucoase si piele) i teriara (leziuni cardio-vasculare, osoase, ale SNC, tegumentare, etc), intre ultimele doua fiind o faza latenta ce poate dura ani de zile.

Diagnostic de laborator. T. pallidum nu poate fi cultivat in vitro n laboratoarele obinuite, diagnosticul bazndu-se pe microscopie i pe serologie (teste specifice si nespecifice). Epidemiologie i profilaxie: Transmiterea bolii se face aproape exclusiv pe cale sexual (ancrul sifilitic genital i anal reprezint 99% din cazurile de sifilis primar). Tratamentul: Antibioticul de elecie este penicilina G. Eficacitatea sa a fost demonstrat prin dispariia treponemelor de la nivelul leziunilor contagioase, dup 24-48 de ore i negativarea testelor serologice.

Leptospira

Definiie, morfologie i identificare : -sunt bacterii spiralate, aerobe, gram negative, cu o lungime de 6-20m i un diametru de 0,1m, foarte fine, terminate printr-un croet terminal, necapsulate, nesporulate, foarte mobile avand doi flageli periplasmatici, fiecare ancorat la captul opus microorganismului, avnd capetele libere dispuse n jurul celulei). -cresc lent, n medii mbogite cu ser, incubarea este necesar pentru mai mult de 2 sptmni.Se pot evidenia prin coloraia Giemsa, prin impregnare argentic, sau prin preparate native la microscopul cu fond ntunecat. L. interrogans -produce boala la om avand peste 200 de serotipuri de L. interrogans ns doar cteva sunt asociate cu afeciuni umane.

Epidemiologie. -Leptospirozele sunt rspndite n lumea ntreag, rezervorul este infeciei umane este obolanul cinele , porcul ele eliminand germenii pe cale urinar sau fecale, contaminnd mediul exterior (ruri, lacuri, sol, etc).Transmiterea la om se face pe cale direct sau indirect. Grupe de risc:muncitorii de la canalizri, fermierii i cei care practic sporturile de ap, medicii veterinari, muncitorii din abatoare, agricultorii, lucrtorii din plantaii de cauciuc, orezrii). -Infeciile variaz ca gravitate i form clinic, de la forme de boal atipice, asemntoare gripei, forme anicterice, la meningit i pn la boala Weil, produs de L. interrogans serovar. icterohemoragiae -Incubaia este de aproximativ 10 zile, dup care infecia debuteaz brutal cu febr, frisoane, sindrom meningeal. Dup prima sptmn de boal apare icterul, care se intensific n urmtoarea sptmn, n timp ce febra scade.

Diagnostic de laborator: Este bacteriologic i const n examen microscopic (preparat nativ i examinare la microscopul cu fond ntunecat)i efectuarea de culturi din snge, urin, LCR, materii fecale pe medii speciale si serologic (prin reacii de aglutinare, fixare a complementului) cu determinarea titrului de anticorpi anti-leptospira. Examenul serologic se pozitiveaz ncepnd cu ziua a 6-a de boal i ating un titru maxim n sptmnile 3-4. Tratament i prevenie: -Tratamentul se face cu penicilin, tetraciclin, sau cloramfenicol, dar este eficient doar cu condiia de a fi instituit ntr-un stadiu incipient de boal, naintea constituirii leziunilor hepatice i renale. Studii mai recente demonstreaz eficiena tratamentului cu ampicilin, doxiciclin, precum i ineficiena celui cu cefalexin, cefamandol, la animalele de experien. -Fiind o maladie mai ales profesional, profilaxia se refer la aplicarea msurilor de igien individual i colectiv la locul de munc (purtarea de cizme, mnui, etc). Lupta mpotriva roztoarelor, deratizararea ajut la prevenirea infeciei.

Borrelia

Definiie. Sunt bacterii spiralate gram negative, mari, de 4-30m lungime, formate din 4-30 spire largi i foarte regulate, flexibile, mobile(prezentnd micri de flexie, rotaie i nurubare), necapsulate, nesporulate, necesit medii speciale de cultur, au o cretere lent, sunt anaerobe sau microaerofile. Habitat: gazda principal este reprezentat de animale (mamifere, psri, artropode). Principalele specii cu rol n patologia uman sunt:

B. recurrentis, B. burgdorferi i B. duttonii.

Patogenie: Borrelia sp. sunt asociate cu dou importante afeciuni umane: febra de recdere (n special B. recurrentis) i boala Lyme (B. burgdorferi). B. burgdorferi este cauza maladiei Lyme specia este gzduit de variate psri slbatice i mamifere (cai, cini, cerbi, cprioare), iar transmiterea se face prin cpue Ixodidae (Ixodes dammini n nord-estul i vestul SUA, Ixodes pacificus n vestul SUA i Ixodes ricinus n Europa)i probabil prin nari. Este o infecie multisistemic. Infecia apare n special n zonele forestiere i se caracterizeaz iniial prin leziuni ale tegumentului la nivelul nepturii produs de cpu, apoi prinde articulaiile, cordul i sistemul nervos central iar simptomatologia curpine mai multe stadii eritrem cefalee, nevralgii, miocardita, etc.

Epidemiologie: Maladia Lyme este cunoscut n nteaga lume i rspndit n numeroase ri din Europa si apare mai frecvent in perioada mai-octombrie, sursa de infecie este reprezentat de mamifere, psri, animale domestice sau slbatice. Diagnosticul este bacteriologic (germenii au putut fi izolai din snge, LCR, leziuni cutanate, articulare, etc) i serologic imunofluorescena indirect. Tratament: Aminopenicilinele (ampicilina, amoxicilina) i ciclinele (doxiciclina, tetraciclina) sunt antibiotice eficiente. Rezultatul terapeutic este spectaculos cu condiia s fie instituit ntr-un stadiu precoce. n faza teriar, artropatia i semnele nervoase odat instalate regreseaz mult mai lent sau chiar deloc. Prevenia se face prin evitarea nepturii de cpu.

Fam Rickettsiaceae

Genul Rickettsia Cuprinde bacterii cu habitat obligatoriu intracelular, fiind cultivabile pe animale de laborator, sacul vitelin al oulor embrionate i culturi celulare. Cu excepia speciilor R. prowazeki i R. quintana, toate rickettsiile au un ciclu natural, n care rezervorul este reprezentat de diverse vertebrate, altele dect omul, iar vectorii, de artropode (acarieni i cpue). Rickettsiile sunt bacili pleomorfi, care mbrac forme de coci, cocobacili sau bacili 1,5-2 m/0,30,7m, nconjurate de un perete celular de 70100m. ce se dispun i n perechi, pe frotiurile efectuate din celulele infectate.

Semnificaia clinic
Infeciile umane produse de rickettsii se mpart n 4 grupe: tifosul, febrele ptate, febra de tranee i febra Q. Rickettsiozele sunt infecii acute cu debut brusc. Se caracterizeaz prin febr, cefalee puternic, mialgii, frisoane i pneumonie.

Specia Grupul tifos R. prowazeki R. typhi R. prowazeki

Boala

Rezervor natural

Vector

Zona geografic

tifos exantematic tifos exantematic boala Brill Zinser

obolan purice este o recrudescen a tifosului epidemic dup muli ani de la primul atac

pduche purice

n toat lumea n toat lumea n toat lumea

Grupul febrelor ptate R.rickettsii R.connori febra ptat a munilor stncoi febra butonoas roztoare slbatice cinele cpue cpue emisfera vestic n jurul Mrii Mediterane, Negre, Caspice, Orientul Mijlociu, India

R.acari R.sibirica

Rickettsioz variceliform Tifosul de Siberia

oarece de cas roztoare

acarian cpue

Afganistan, America de Nord, Rusia Africa de Sud, Coreea, Armenia, Asia central, Siberia, Mongolia, Europa central

Grupul febrei de tranee Rochalimaea quintana R.tsutsugamushi febra de tranee tifosul de lstri omul roztoare pduche acarian Europa, Africa, America de Nord Asia, subcontinentul indian, Australia, Insulele pacifice n toat lumea avnd caracter profesional la ngrijitorii de animale

Coxiella burnetti

febra Q

roztoare, caprine

bovine,

aerosoli

Tifosul exantematic epidemic Este o boal infecioas acut epidemic, cauzat de R. prowazeki. Vectorul este pduchele de corp i cap, iar rezervorul de infecie omul bolnav cu boal aparent sau inaparent. Rickettsiile se gsesc n sngele bolnavului. Incubatie 10-14 zile, debutul brusc, cu febr (39-40C) i frison, cefalee, mialgii. Dup 4-6 zile apare exantemul (macule, apoi peteii) respectnd palmele i plantele, tulburrile circulatorii (hipotensiune arterial, tahicardie), neuropsihice (stare confuzional, agitaie, delir, com

Diagnosticul de laborator

Este bacteriologic i serologic, n cadrul celui de-al doilea amintim :reacii de aglutinare n tuburi (reacia Weil Felix) sau pe lam (reacia Kudicke Stauer) -RFC -reacii de hemaglutinare pasiv

Tratament, profilaxie

Tratamentul se efectueaz cu: tetraciclin, vibramicin, cloramfenicol. Profilactic, se recomand: depistarea bolnavilor, deparazitarea, educaie sanitar i vaccinarea.

Chlamydia

Familia Chlamydiaceae a re doua genuri Chlamydia si Chlamydophila

Chlamydia trachomatis produce infectii urogenitale, transmisibila sexual , trachoma, pneumonie si conjunctivita si lymphogranuloma venereum (LGV) Produse de C. trachomatis (biovar: trachoma) care se gaseste mai

ales in tarile in curs de dezvoltare circa 500 million de persoane infectate si 7 - 9 millioane de persoane sunt orbi avand ca cauza acesta infectie. Chlamydophila pneumoniae produce bronsita, sinuzita, pneumonia si ateroscleroza Chlamydophila psittaci produce pneumonia (psittacosis) si se poate transmite de la pasarile de casa cum sunt papagalii. Membrii familiei Chlamydiaceae sunt paraziti obligati intracelulari. Au membrana externa si interna ca germenii gram-negativi si lipopolysaccharide dar nu au stratul de ptidoglycan. Sintetizeaza majoritatea compusilor metabolici intermediari dar nu pot sa isi sintetizeze ATP ul.

Se observa formele infectioase sub forma unor corpuculi in tesuturile infectate

Diagnostic de laborator Testele de diagnostic C. trachomatis sunt examenul citologic pentru prezenta corpilor de incluziune, cultura pe celule si detectia antigenilor cu imunofluorescenta si tehnica ELISA, precum si cu sonde ADN. Tratament si profilaxie Tetraciclina, eritromicina si sulfonamide sunt utilizate ca tratement dar uneori reinfectia poate sa apara in caz ca nu se respecta regulile de prevenire si igiena sexuala.

Genul Mycoplasma

Micoplasme, n general, sunt bacterii care nu dispun de un perete celular, astfel nct au nevoie de edere ntr-un organism gazd, cum ar fi un om sau animal pentru supravieuire. Aceste bacterii sunt rspndite prin respiratie si provoaca infectii, cum ar fi traheobronsita si pneumonie atipica primara.

Mycoplasma pneumoniae este o bacterie parazit care ocup suprafaa

celulelor epiteliale n tract respirator de gazdele sale i de foarte multe ori cauze de pneumonie. Se ataeaz de celulele epiteliale traheale de sialoglycoproteins sau receptori sialoglycolipid care sunt situate pe suprafeele de celule folosind organele de fixare, sau proteine de adeziune. Au fost descoperite mai multe proteine de adeziune pe suprafetele bacteriene, printre cele mai importante sunt: P1 si P30. Simptomele care apar dupa infectia cu M. pneumoniae sunt: tuse, dureri n gt, febra, disconfort urechii medii. Diagnostic prin teste de aglutinine la rece, imunoenzimatic, hemogramei complete, ratele de sedimentare eritrocitari, i radiografii toracice, printre altele. Tratament,Mycoplasma pneumoniae sunt bacterii sensibile la compui, ca tetraciclinele i macrolidele.

Mycoplasma genitalium este o bacterie parazit

acu cel mai mic genomului cunoscut de orice bacterie de via gratuite de la 580,070 pb mult timp. Ipoteza este ca ele evoluat de la bacterii gram-pozitive. M. genitalium are o forma de balon i nu au un perete celular ca toate speciile de Mycoplasma. Toate lipide acestei specii , cum ar fi fosfolipide, glicolipidelor, si lipide neutre, sunt situate n membrana celulelor si poseda si lipoproteine cu rol puternic antigenic.

M. genitalium se gaseste in principal in tractul urogenital de

oameni, cu toate acestea ele au fost izolate n tractul respirator, de asemenea. La barbati, M. genitalium este un agent important n bolile tractului urogenital. n 10-45% din barbatii cu caractere non-gonococica uretrita.Rolul patogen a M. genitalium la femei este mai puin neles, dar se crede a fi capabil de a provoca cervicita si boala inflamatorie pelvina (BIP). vaginita bacteriana (BV) si sarcina adverse la femei care nu au fost pe deplin stabilite. M. genitalium are o transmitere sexuala, cu rate similare cu Chlamydia trachomatis, un alt agent patogen care poate provoca uretrita. Grupa macrolidelor antibiotic pare a fi cea mai eficient form de tratament de M. genitalium.