NUTRIIA BACTERIAN

Necesiti nutritive Difuzia i transportul substanelor prin membranele celulare

Xanthobacter autotrophicus

NECESITI NUTRITIVE
Pentru cretere i multiplicare microorganismele necesit prezena n mediul nconjurtor a unor substane nutritive necesare sintezei constituenilor celulari, activitii enzimatice i producerii de energie. Elementele biogene pot fi mprite n dou categorii: - bioelemente majore (macroelemente sau macronutrieni) - bioelemente minore (microelemente sau micronutrieni).

Macroelemente (macronutrieni)
Bacteriile au nevoie de toate elementele care intr n compoziia chimic a celulei: O, H, C (sub form de CO2 sau compui organici), N (sub form mai mult sau mai puin oxidat sau redus), P (sub form de fosfai), S (n stare oxidat sau redus) i o serie de elemente minerale (K, Mg, Na, Cl, Fe, Ca), indispensabile meninerii strii fizico-chimice a celulei. Macroelementele sunt necesare n concentraii mari i ndeplinesc funcii eseniale n metabolismul microbian.

Carbonul
Reprezint aproximativ 50 % din greutatea uscat a bacteriilor, fiind elementul major dintre macroelemente. Bacteriile pot asimila compui organici cu un numr variat de atomi de C. Microorganismele pot utiliza aminoacizii, acizii organici, acizii grai, glucidele, bazele azotate, compuii aromatici i n cantiti mici i ali compui organici.

Unele procariote sunt autotrofe, capabile s foloseasc CO2 ca unic sau principal surs de carbon celular, n timp ce altele sunt heterotrofe, la care substanele organice servesc ca surs de C pentru biosinteze i producerea de energie. Nutriia heterotrof poate fi simpl, ca la Escherichia coli, care poate fi cultivat pe medii de cultur ce conin numai glucoz i sruri minerale, sau complex, ca la Lactobacillus sp., care are nevoie de o serie de compui organici, inclusiv de vitamine.

Spre deosebire de autotrofe, capabile s sintetizeze constituenii organici, pornind de la compui anorganici simpli, heterotrofia implic incapacitatea de sintez a unor metabolii eseniali care obligatoriu trebuie s se regseasc n mediu ca substane preformate. Unele microorganisme heterotrofe au nevoi specifice i nu se pot dezvolta dect n prezena unui singur compus organic, care le acoper att nevoile energetice ct i pe cele biosintetice.

De exemplu, microorganismele celulozolitice utilizeaz numai celuloza, bacteriile metilotrofe folosesc numai metanul, metanolul, metilamina. Bacteriile din genul Pseudomonas folosesc peste 200 compui organici cu C (carbohidrai, polialcooli, acizi aminici, acizi grai, compui aromatici etc.), care pot fi folosii ca precursori ai unor compui organici, pe care nu sunt capabili s-i sintetizeze.

Azotul
Dup carbon, azotul reprezint un element important, fiind necesar n cantiti mari, deoarece reprezint aproximativ 12 % din greutatea uscat a celulei bacteriene. Azotul este elementul major din proteine, acizi nucleici i ali constitueni celulari. Este prezent n mod natural att n compuii organici ct i cei anorganici.

Cea mai mare cantitate de azot din natur se gsete n compuii anorganici ca NO2 sau n diferite combinaii ca NH3, nitrai sau nitrii. Sursa preferat de azot, utilizabil de majoritatea microorganismelor este NH3. La microorganismele fixatoare de azot reduc iniial N la NH3, nainte de a fi ncorporat n produi organici.

Fosforul este prezent n natur att sub form organic ct i sub form de fosfai anorganici. Intr n structura acizilor nucleici, a fosfolipidelor, a acizilor teichoici, a coenzimelor i a nucleotidelor (ATP, GTP, NAD+, FAD).

Sulful este necesar pentru sinteza unor aminoacizi (cistein, metionin), a unor vitamine (tiamina, biotina), a acidului lipoic i coenzimei A. Sulful sufer transformri chimice n natur, realizate n exclusivitate cu ajutorul microorganismelor. De exemplu, multe microorganisme utilizeaz sulful sub form anorganic de sulfai (SO42-) sau sulfii (HS-).

Potasiul este necesar tuturor microorganismelor, fiind un principal cation anorganic (K+) celular. Reprezint cofactor al unor enzime implicate n sinteza proteinelor.

Magneziul reprezint un cation celular (Mg2+) important, cofactor al multor enzime (ex. kinazele). Este prezent la nivelul pereilor celulari i a membranelor plasmatice. Are un rol important n legarea enzimelor de substraturi. Intr n constituia clorofilelor.

Calciul este un important cation celular (Ca2+), reprezentnd i un cofactor al enzimelor. Intr n structura unor exoenzime (amilaze, proteaze etc.) i a dipicolinatului de calciu (care ndeplinete un rol important n termorezistena sporilor).

Fierul joac un rol major n respiraia celular. Ionii feros i feric fac parte din structura unor purttori redox, cum sunt citocromii, ferodoxinele i proteinele FeS, care sunt implicate n transportul electronilor. Cu toate c, cei mai muli compui anorganici ai fierului sunt insolubili, numeroase microorganisme produc factori specifici de legare ai fierului numii siderofori, care solubilizeaz fierul i l transport n interiorul celulei.

Un grup important de siderofori l reprezint derivatele acidului hidroxamic. La nceput, complexul Fe-hidroxamat ajunge n interiorul celulei, apoi Fe este eliberat iar hidroxamatul este eliminat din celul i utilizat din nou pentru transportul fierului. Bacteriile cilindrice (Escherichia coli i Salmonella typhimurium) produc siderofori fenolici, cu o structur complex numii enterobactine.

Microelemente (micronutrieni)
Rolul micronutrienilor n funcionarea celulei nu este chiar att de important ca i n cazul macronutrienilor. Micronutrienii (Zn, Mn, Na, Cl, Mo, Se, Co, Cu, W i Ni) sunt necesari n cantiti foarte mici; unii (Zn i Mn) sunt bioelemente eseniale pentru toate microorganismele, n timp ce alii (Se, Mo, Co, Cu, W) joac un rol important n activitile metabolice.

Deoarece necesitile microorganismelor n microelemente sunt mici, pentru cultivarea lor n laborator nu este ntotdeauna necesar s se adauge aceste microelemente la mediile de cultur. Chiar dac mediul de cultur conine substane chimice cu o mare puritate, poate aprea deficiena n microelemente. n aceste cazuri, adugarea unei cantiti mici dintr-o soluie cu microelemente poate satisface necesarul n metale al microorganismului respectiv.

Factori de cretere
Sunt substane pe care microorganismele sunt incapabile s le sintetizeze n cursul metabolismului lor i n absena crora multiplicarea lor este imposibil. Nu sunt numai substane indispensabile vieii unor microorganisme (care nu se pot dezvolta n lipsa lor), ci reprezint metabolii eseniali necesari tuturor microorganismelor

La unele microorganisme, factorii de cretere sunt de origine endogen, astfel nct prezena lor n mediu ca substane preformate nu este necesar (microorganisme prototrofe). Microorganismele care nu au capacitatea de a sintetiza aceti metabolii eseniali nu pot tri dect dac mediul lor este suplimentat cu factorul de cretere (microorganisme auxotrofe).

Factorii de cretere sunt necesari bacteriilor n concentraii infime i se comport ca vitaminele pentru organismul animal. Aceti factori exist, n general, n mediile obinuite pe baz de extract de carne sau extract de levuri, dar trebuie adugai n mediile sintetice sau semisintetice.

n funcie de natura lor chimic, factorii de cretere pot fi grupai n trei categorii: - vitamine - aminoacizi - purine i pirimidine.

Vitaminele reprezint factorii de cretere cei mai ntlnii, necesari microorganismelor n cantiti foarte mici, funcionnd ca precursori ai unor coenzime cu rol catalitic. Aminoacizii sunt necesari n cantiti mai mari pentru a asigura creterea microorganismelor, fiind folosii n biosinteza proteinelor. Purinele i pirimidinele sunt utilizate pentru sinteza ARN-ului i ADN-ului, precum i a unor coenzime.

Bacteriile lactice (Streptococcus, Lactobacillus, Leuconostoc etc.), sunt renumite pentru necesitile lor n vitamine. n general, vitaminele care sunt cel mai frecvent utilizate pentru necesitile nutritive ale microorganismelor sunt: tiamina (vitamina B1), biotina (vitamina H sau B8), piridoxina (vitamina B6) i ciancobalamina (vitamina B12).

DIFUZIA I TRANSPORTUL SUBSTANELOR PRIN MEMBRANELE CELULARE

Substanele nutritive nu pot fi asimilate de ctre microorganisme dect dup ce au ptruns n citoplasm, traversnd peretele celular i membrana citoplasmatic. Cele mai multe dintre substanele nutritive au molecul mare i pentru a ptrunde n celul trebuie, n prealabil, s fie descompuse n molecule cu greutate molecular mic.

Aceast funcie de descompunere este ndeplinit de enzimele hidrolitice (hidrolaze) elaborate de microorganisme. n urma hidrolizei substanelor nutritive rezult molecule mai mici, cum ar fi: monoi dizaharidele (n cazul hidrailor de carbon), peptidele i acizi aminici (n cazul proteinelor), acizi grai i glicerolul (n cazul lipidelor) etc.

Principalele mecanisme de transport ale substanelor prin membrana citoplasmatic sunt: Difuzia pasiv Transportul cu ajutorul unor transportori realizat prin: - difuzia facilitat - transportul activ - translocarea de grup

Difuzia pasiv
Produii rezultai n urma hidrolizei pot ptrunde prin peretele celular i membrana citoplasmatic n mod pasiv, traversarea fiind lent i singur nu poate asigura metabolismul celular. Transportul se oprete cnd concentraia unei substane este aceeai de o parte i de alta a membranei.

Difuzia pasiv este limitat la ap i un grup mic de substane ca O2, CO2, acizii grai i substanele liposolubile precum i unii ioni.

membran plasmatic

Difuzie pasiva

Transportul cu ajutorul unor transportori

Se realizeaz prin participarea unui transportor specific proteine carrier, aflate n membrana plasmatic, care fixeaz substana i o transport de cealalt parte a membranei. Exist trei tipuri de procese de transport mediate de proteine.

Difuzia facilitat
Se realizeaz ca i difuzia pasiv, fr consum de energie, asigurndu-se pe aceast cale transferul unor substane din exteriorul spre interiorul celulei. Spre deosebire de difuzia pasiv, procesul este favorizat de implicarea unor proteine prezente n membrana citoplasmatic numite proteine carrier. Difuzia are loc atta timp ct ntre cele dou suprafee ale membranei citoplasmatice, concentraia substanelor transportate este diferit, reuind astfel s le concentreze n interiorul celulei

exteriorul celulei substrat membran plasmatic

interiorul celulei

Transportul activ
Microorganismele i-au structurat la nivelul membranei citoplasmatice ageni transportori specializai (proteine transportor sau permeaze), prin intermediul crora substanele rezultate din hidroliz sunt introduse rapid i activ n celul. n acest proces se realizeaz o acumulare a substanelor n celul, de sute sau chiar mii de ori mai mare fa de mediul exterior. La bacterii transportul activ se realizeaz predominant pentru: glucide, aminoacizi i sruri minerale.

exteriorul celulei substrat membran plasmatic

interiorul celulei

Translocarea de grup
Substanele transferate n celul sufer o modificare chimic n timpul strbaterii membranei. Procesul se realizeaz cu consum de energie i cu participarea sistemului enzimatic fosfotransferazic. Astfel, n celul are loc o acumulare de substan modificat.

Translocarea de grup este ntlnit numai la procariote i este implicat n transportul glucidelor simple (glucoz, fructoz), care la bacterii, cu ajutorul proteinelor carrier, primesc un grup fosfat i se transform n glucozo-6-fosfat (respectiv, fructozo-1-fosfat). Energia necesar pentru adiionarea fosfatului este preluat de la sistemul fosfotransferaz. Glucoza fosforilat (glucozo-6-fosfat) nu mai poate prsi celula i intr n ciclul metabolic celular. Procesul se petrece n dou etape: prima etap are loc n citoplasm iar cea de a doua n membrana plasmatic.

exteriorul celulei zahr membran plasmatic

piruvat interiorul celulei

Transport activ si pasiv