METODE MICROSCOPICE

DE DIAGNOSTIC


Diagnosticul histopatologic;
Citodiagnosticul.













DIAGNOSTICUL HISTOPATOLOGIC


Definiie : Este diagnosticul stabilit pe baza examinrii microscopice a seciunilor
histologice.
Se efectueaz pe produse recoltate prin:
1. BIOPSIE (recoltarea unor fragmente de esuturi / organe n timpul vieii);

a. Microbiopsia:
Puncia biopsie (pentru organele profunde: ficat, splin, rinichi, mduv
osoas);
Chiuretajul (pentru mucoase: endometru, col uterin, cavitatea bucal sau leziuni
superficiale: piele);
Endobiopsia (mucoasa gastric, rectal, laringian, bronic).
b. Biopsia chirurgical:
Incizional (n scop diagnostic);
Excizional (n scop diagnostic i terapeutic).
2. EXEREZ CHIRURGICAL piese de exerez chirurgical.
3. PRELEVARE DE FRAGMENTE DE ESUTURI / ORGANE N
TIMPULNECROPSIEI
prelevate necropsice.


DIAGNOSTICUL HISTOPATOLOGIC


Endoscop Endobiopsie colonic






Puncia biopsie hepatic



Produs de chiuretaj uterin


Hiperplazie endometrial Viloziti coriale (placentare)












BILET DE TRIMITERE CTRE
LABORATORUL DE ANATOMIE PATOLOGIC



Timpii de prelucrare a prelevatului tisular:
Recoltarea:
leziuni ntinse biopsii multiple
leziuni ulcerate recoltare din margine
Fixarea: formol 10% tamponat, lichid Carnoy, Bouin
Includerea la parafin
Secionarea blocurilor tisulare la microtom (3 5)
Colorarea seciunilor histologice.

Tehnici de colorare:
Tehnici uzuale:
Hematoxilin-Eozin,
Tricromice (van Gieson, Simionescu, Masson);

Tehnici histochimice:
PAS (MPZ neutre, glicogen, membrane bazale, fungi);
Fontana/Grimelius (granule neurosecretorii);
Gordon-Sweets, Gomori (fibre de reticulin, membrane bazale);
Perls (hemosiderina Fe
3+
);
Fontana (melanina);
von Kossa (calciu);
Negru Sudan, Sudan 3, Scharlach (lipide neutre);
Rou Congo (amiloid);
Albastru Alcian (mucine acide).


BULETIN DE ANALIZE
ANATOMO-PATOLOGIC



CITODIAGNOSTICUL

Definiie: Este diagnosticul stabilit pe baza examinrii microscopice a modificrilor
morfologice ale celulelor (izolate) coninute de diferite produse biologice etalate pe
lame (frotiu).
Avantaje:
Ofer un diagnostic rapid;
Este ieftin;
Puin traumatizant;
Uor de repetat;
Util n aciunile de screening.

Tehnici de recoltare a produselor patologice
1. Exfoliere (sput, secreie prostatic, mamar, vaginal, cervical);
2. Puncie-aspiraie din revrsate seroase (lichid pleural, peritoneal, articular),
coninut structuri chistice;
3. Grataj/periaj (col uterin, tract respirator);
4. Lavaj organe cavitare (ci respiratorii, vezic urinar);
5. Amprentare (leziuni cutanate, ganglioni limfatici);
6. Puncie aspiraie cu ac fin (tiroid, prostat, gland mamar, pancreas), tumori
solide profunde, mduv osoas.







BILET DE TRIMITERE CTRE LABORATORUL DE
ANATOMIE-PATOLOGIC



Timpii de execuie a frotiurilor
1. Etalarea
Direct: secreii naturale, puroi, produse obinute prin puncie-aspiraie din organe
solide, amprentare;
Dup centrifugare 5-10 minute, apoi etalarea sedimentului: lichide din revrsatele
seroase, structuri chistice, lavaje i urin.
2. Fixarea
Agitare n aer cteva secunde i uscare (pentru coloraia May-Grunwald-
Giemsa);
Alcool 96% (pentru coloraia Papanicolau);
3. Colorarea
MGG - foarte simpl
Papanicolau - pentru citologia cervico-vaginal, bronic
Speciale pentru a evidenia lipidele, glicogenul, mucinele
Imunocitochimie

Frotiu de snge


Frotiu lavaj bronic


Frotiu inflamator Frotiu tumoral

Frotiu cervical



Amprent tumoral ganglionar






Tehnici speciale de diagnostic

Imunohistochimia
Imunofluorescena (prin marcare cu colorani fluoresceni) pentru
detectarea autoanticorpilor, antigenelor, complexelor antigen-anticorp sau
fraciunilor complementului.
Imunoperoxidaza (prin metoda peroxidaz-antiperoxidaz sau/i complex
Avidin-Biotin) utilizeaz anticorpi monoclonali/policlonali pentru detectarea:
Originii celulelor neoplazice (diagnosticul diferenial ntre carcinom-
sarcom-limfom):
o Citokeratin - carcinom;
o Antigen comun leucocitar - limfom;
o Mioglobin - rabdiomiosarcom;
o Vimentin - tumori conjunctive;
o Antigenul factor VIII-tumori vasculare.
Antigenelor oncofetale n tumori (-feto-proteina, antigenul
carcinoembrionar);
Hormonilor /receptorilor hormonali;
Oncogenelor, genelor supresoare tumorale (p53);
Tiparea imunofenotipic a limfoamelor maligne.

Histoenzimologia - detectarea enzimelor;
Microscopia electronic pentru diferenierea ntre:
Carcinom-melanom-sarcom;
Adenocarcinom-mezoteliom;
Timom-limfom-seminom;
Tumori cu celule mici, tumori cu celule fusiforme;
Tumori endocrine i non-endocrine;
Nefropatii glomerulare cu mecanism imun.
Tehnici de biologie molecular:
PCR (Polymerase Chain Reaction);
Citometria n flux pentru analiza ADN (ploidia);
Hibridizarea in situ pentru identificarea fragmentelor de ADN
Analiza rearanjrii genelor.