I.

PROPRIETILE GENERALE ALE

LICHIDELOR
1. DETERMINAREA COEFICIENTULUI DE TENSIUNE
SUPERFICIAL A LICHIDELOR
Noiuni teoretice
Stratul de la suprafaa unui lichid care are grosimea razei sferei de aciune
molecular, 5.10
-9
m, se numete strat superficial. oate moleculele cuprinse !n acest
strat "or fi atrase spre interiorul lichidului datorit faptului c forele de atracie
#coeziune$ e%ercitate de moleculele din interior #din lichid$ sunt mai mari dec&t cele
e%ercitate de moleculele de gaz !n contact cu suprafaa lichidului. 'in cauz c
moleculele acestui strat sunt atrase spre interior, stratul superficial "a e%ercita asupra
lichidului o presiune. (oleculele din stratul superficial au o energie potenial mai
mare dec&t cele din interior. )e de alt parte, se tie c !n general, sistemele se gsesc
!n echili*ru c&nd energia lor potenial de"ine minim. 'e aici rezult c starea de
echili*ru se realizeaz c&nd e%ist cele mai puine molecule la suprafa, de unde
rezult tendina de micorare a suprafeei li*ere a lichidului.
+orele tangeniale care iau natere !n stratul superficial i care micoreaz
suprafaa li*er a lichidului poart numele de tensiune superficial. 'in cauza
e%istenei tensiunii superficiale suprafaa li*er a unui lichid !ntr-un "as este plan,
iar picturile de lichid !n cdere adopt forma sferic. +ora de tensiune superficial
este dat de relaia,
F = l , unde

este o constant ce depinde de natura lichidului i se numete

coeficientul de tensiune superficial, iar l este lungimea conturului pe suprafaa
lichidului. Se e%prim cu a-utorul relaiei = F/1 i are unitatea de masur N/m !n
sistemul internaional de uniti.
.oeficientul de tensiune superficial este deci egal cu fora ce se e%ercit !n
planul suprafeei #sau tangent la aceasta pentru suprafeele cur*e$, perpendicular pe
1
unitatea de lungime. /l scade cu creterea temperaturii datorit creterii energiei
cinetice a moleculelor lichidului.
)entru coeficientul de tensiune superficial se poate utiliza i definiia ce rezult
din amplificarea cu distana #d$, pe care se deplaseaz fora, conform formulei,

rafata
energie
d l
d F
sup
=

=
[N/m; J/m
2
]
Se o*ser" c "aloarea coeficientului de tensiune superficial reprezint, de fapt,
energia li*er a unitii de suprafa a stratului superficial.
0ntr-un sistem izolat care e"olueaz izoterm se produc numai acele procese ce duc
la scderea energiei li*ere a sistemului. 0n consecin, energia li*er a stratului
superficial poate scdea at&t prin reducerea suprafeei li*ere c&t i prin diminuarea
coeficientului de tensiune superficial. )entru o soluie, la echili*ru, stratul ei
superficial "a a"ea suprafaa minim posi*il, iar pe aceast suprafa se "or fi%a
acele molecule din soluie care reduc coeficientul de tensiune superficial, el lu&nd
"aloarea minim posi*il.
Su*stanele organice conin&nd !n molecule at&t grupuri polare, hidrofile, c&t i
lanuri hidrocar*onate, hidrofo*e, au tendina de a se acumula la suprafaa soluiei,
prin aceast energie li*er a sistemului reduc&ndu-se. /%plicaia rezid !n aceea c
lanurile hidrofo*e "or fi e%cluse din faza apoas pe c&nd gruprile hidrofile "or
rm&ne incluse !n stratul superficial al fazei apoase. 1re loc, deci, un fenomen de
a*sor*ie, moleculele rm&n&nd fi%ate la suprafaa soluiei. 1stfel, coninutul de
molecule de acest tip este mai mare !n stratul superficial dec&t !n straturile profunde
ale soluiei. Scderea energiei li*ere a sistemului prin acest fenomen se traduce prin
reducerea energiei li*ere pe unitatea de suprafa a stratului superficial, adic a
coeficientului de tensiune superficial. 1stfel de su*stane, care se a*sor* !n stratul
superficial al soluiilor i duc la scderea coeficientului de tensiune superficial, se
numesc tensioactive. .antitatea de su*stan tensioacti" a*sor*it pe stratul
superficial este o funcie cresctoare de concentraia soluiei. (rind progresi"
concetraia soluiei,cantitatea de su*stan a*sor*it "a crete la r&ndul ei,
determin&nd scderea progresi" a coeficientului de tensiune superficial. 1ceast
scdere continu p&n !nc se mai pot a*sor*i noi molecule i !nceteaz !n momentul
2
!n care suprafaa este 3saturat4, adic este !n !ntregime ocupat. .reterea !n
continuare a concentraiei soluiei nu mai duce la scderea tensiunii superficiale,
aceasta a"&nd "aloarea minim posi*il pentru soluia dat, !ntruc&t i cantitatea de
su*stan a*sor*it pe unitatea de suprafa este ma%im posi*il.
Su*stanele hidrofile, #electroliii sau su*stanele puternic polare$ au molecule
care interacioneaz cu apa mai puternic dec&t moleculele de ap !ntre ele. 'atorit
acestui fapt, la dizol"area unei astfel de su*stane !n ap starea de energie minim a
sistemului se realizeaz dac moleculele sol"ite sunt !ncon-urate din toate prile de
molecule de ap. .a urmare, ele au tendina de a se acumula !n interiorul soluiei
apoase i nu se "or fi%a pe stratul superficial. .oeficientul de tensiune superficial a
unei astfel de soluii "a fi egal sau cu puin crescut !n raport cu cel al apei pure.
Su*stanele care la dizol"area lor nu modific sau cresc foarte puin coeficientul
de tensiune superficial se numesc tensioinactive.
.reterea uoar a coeficientului de tensiune superficial ce se o*ser" uneori la
astfel de soluii se e%plic prin atracia mai mare la care sunt supuse moleculele
stratului superficial de ap prin prezena !n interiorul soluiei a moleculelor puternic
hidrofile. 5i !n acest caz energia li*er a sistemului este minim, creterea discret a
energiei li*ere a stratului superficial fiind !nsoit de o scdere foarte e%primat a
energiei li*ere a soluiei prin interaciunea dintre moleculele hidrofile i ap.
)entru serul sanguin normal coeficientul de tensiune superficial este de 67 8
69.10
-:
N;m, iar pentru urin 70.10
-:
N;m. 1ceste "alori sunt numai cu puin mai mici
dec&t coeficientul de tensiune superficial al apei la 20
<
., care este 72.10
-:
N;m. /le
se reduc considera*il ori de c&te ori se acumuleaz !n s&nge i se elimin prin urin
su*stane tensioacti"e #de e%emplu, sruri *iliare 8 !n caz de icter mecanic$.
)rincipiul msurtorii
=n lichid lsat s curg li*er printr-un orificiu foarte str&mt aflat la captul
inferior al unui tu* capilar aezat !n poziie "ertical curge su* form de picturi.
+iecare pictur se desprinde de captul tu*ului !n momentul c&nd greutatea i >
de"ine egal cu forele de tensiune superficial + e%ercitate pe circumferina care
formeaz linia de contact dintre marginea tu*ului i *aza picturii. ?om a"ea deci, >
@ +.
:
'eoarece > @ mg i + @ 2 r atunci,
m g @ 2 r , unde m @ masa picturii, g @ acceleraia gra"itaional.
0n momentul desprinderii, greutatea picturii este proporional cu constanta de
tensiune superficial a lichidului #legea lui ate$. 0n locul masei unei picturi putem
lua produsul dintre "olumul ei #"$ i densitatea lichidului #d$, deoarece m @ " d.
vdg = 2 r #1$
?olumul unei picturi e greu de msurat direct, !ns !l putem determina indirect,
msur&nd e%act un "olum ? de lichid #"olumul stalagmometrului$, determin&nd
numrul de picturi #n$ pe care !l d acest "olum la curgerea spontan prin orificiul
capilar i fc&nd raportul,
V
n
"
=
Antroduc&nd aceasta "aloare a lui v !n #1$ a"em,
= g d
n
"
2 r #2$
Bu&nd un al doilea lichid, de e%emplu apa, "om a"ea o relaie asemntoare ,
a
"
n
d
a
g = 2 r
a
#:$
0mprind relaia #2$ cu #:$ o*inem,
a
a
n
n
d
d

=
s
#C$
de unde coeficientul de tensiune superficial a lichidului respecti",
a
a
a
d
d
n
n
=
#5$
Delaia #5$ ne permite s calculm coeficientul de tensiune superficial a unui lichid
determin&nd numrul de picturi dat de un "olum anumit de lichid i numrul de
picturi dat de acelai "olum de ap.
1paratur ,
C
Stalagmometrul rau*e se compune dintr-un tu* de sticl care prezint un rezer"or
pre"zut cu dou repere circulare a i . u*ul !n poriunea lui inferioar se continu
cu un capilar !, care se termin cu o suprafa lrgit i lefuit orizontal ". 'easupra
i dedesu*tul reperelor a i sunt gra"ate pe tu* mai multe di"iziuni care ser"esc la
determinarea fraciunilor de pictur.
Se spal stalagmometrul cu alcool i se usuc la trompa de "id. Se aspir !n
stalagmometru lichidul i se numr picturile desprinse !ntre aceleai repere. +ie n
numrul lor i d densitatea lichidului la temperatura de lucru. Se repet operaia de
mai multe ori i se face media determinrilor.
Dezultatele se trec !ntr-un ta*el de felul celui ilustrat mai -os.
0n funcie de su*stana tensioacti" utilizat se "or face determinri la mai multe
concentraii urm&rindu-se scderea tensiunii superficiale cu concentraia. Dezultatele
se "or reprezenta grafic.

@ f#c$
(od de lucru
Stalagmometrul, dup ce a fost splat
i uscat la trompa de "id, se prinde
"ertical cu a-utorul unei cleme pe un
stati" i su* el se aeaz un "as !n care
s cad picturile #"ezi figura
alturat$. Se aspir apa distilat p&n
deasupra reperului a, cu a-utorul unui
tu* de cauciuc ataat la partea
superioar a stalagmometrului, cu
precauia s nu se formeze *ule de aer.
Se numr picturile care se desprind !n
timpul c&nd se scurge "olumul
lichidului de la reperul a p&n la reperul
. +ie n
a
numrul lor i d
a
densitatea
apei la temperatura de lucru.
Fig1.1.Stalagmometrul Traube
5
2. DETERMINAREA COEFICIENTULUI DE #$SCO%ITATE
Noiuni teoretice
(ediile interne ale organismului, s&ngele, lichidul interstiial, citoplasma etc., sunt
sisteme disperse care posed proprietile fizice generale ale fluidelor. ?&scozitatea
este o proprietate a fluidelor determinat de frecarea intern ce ia natere !n masa
fluidului ca urmare a micrii straturilor care se deplaseaz unele fa de altele cu
"iteze diferite. S considerm c e%emplu de fluid un lichid aderent, apa, care curge
cu "iteza mic printr-un tu*. Se constat c "iteza de curgere este mai mic !n
apropierea pereilor tu*ului i mai mare de-a lungul a%ului. /%plicaia fenomenului
este urmtoarea, un strat de ap ader de pereii tu*ului i rm&ne !n repaus, de acesta
se freac stratul urmtor, care se "a mica cu o "itez relati" mic. Straturile
urmtoare se "or mica cu o "itez din ce !n ce mai mare p&n ce se atinge o "itez
constant, dependent de presiunea de curgere i de "&scozitate. E astfel de curgere la
care deplasarea lichidului se face prin straturi paralele cu direcia de curgere se
numete curgere laminar. Dezult c !n masa lichidului care curge prin tu* e%ist
un gradient de "itez perpendicular pe direcia de curgere. =n fluid la care deplasarea
reciproc a straturilor s-ar face fr frecare se numete fluid perfect.
+orele de frecare intern care apar la curgerea unui fluid determin "&scozitatea
fluidelor. /a depinde de natura lichidului ca i de concentraia, mrimea i forma
moleculelor dizol"ate. )entru definirea coeficientului lui de "&scozitatea s
considrm !n interiorul unui fluid un strat de molecule aezate !ntr-un plan orizontal,
de suprafaa S, care se deplaseaz prin masa lichidului !n planul propriu cu "iteza v.
'in cauza frecrii interne straturile "ecine "or fi antrenate cu o for F, a crei
"aloare depinde de mrimea suprafaei de contact S , de "ariaia "itezei " , de
Nr.
soluie
.oncentraie d
Fg;c
m
:
G
#%10
:
Hg;
m
:
$
Nr
de
pic
tu
ri
&
Nr.medi
u de
picturi

FdIn;cmG
#%10
-:
N;m
:
$
6
distana l dintre straturi i de o constant care depinde de natura lichidului. Delaia
care leag toate aceste mrimi este urmtoarea,
S

=
l
"
+
Fig.2.1. a) Curgerea laminar b) !pari"ia for"elor de v#sco$itate
'in relaia de mai sus, "aloarea constantei

"a fi,
" S
+

=
l

1ceasta constant se numete coeficient de v#sco$itate i este o mrime caracteristic

pentru fiecare lichid.
(surarea coeficientului de "&scozitate are importan at&t pentru cercetarea
medical, unde poate fi utilizat pentru determinarea formei i mrimii moleculelor
dizol"ate, c&t i pentru aprecierea modului de desfurare a fenomenelor
hidrodinamice din organism. 1stfel creterea coeficientului de "&scozitate a s&ngelui
duce conform legii lui )oiseuille, la scderea de*itului sanguin dac fora de
contracie a inimii rm&ne constant. 0n acest caz meninerea constant a de*itului
sanguin nu se poate realiza dec&t prin creterea forei de contracie a muchiului
cardiac, deci i a tensiunii arteriale.
)rincipiul determinrii
)entru calcularea coeficientului de "&scozitate se utilizeaz trei categorii de metode,
1) metode ba$ate pe curgerea lic%idelor prin tuburi capilare conform legii lui
&oiseuille; 2) metode ba$ate pe re$isten"a opus de ctre fluide la cderea unei
sfere' conform legii lui Sto(es; 3) metode de antrenare' ba$ate pe antrenarea )n
7
mi*carea de rota"ie a unui cilindru suspendat )n masa lic%idului. 0n cadrul lucrrilor
de la*orator noi "om utiliza numai metode *azate pe legea lui )oiseuille. Delaia
sta*ilit de )oiseuille pentru cantitatea de lichid ce trece printr-un tu* cilindric, dac
curgerea se face laminar, este urmtoarea,
l J 9
t ) r K
L
C
=
unde ' este "olumul de lichid care se scurge !n timpul (, ) este raza tu*ului capilar, *
este lungimea capilarului i P presiunea de curgere. 'ac tu*ul capilar se gsete !n
poziie "ertical presiunea de curgere P este egal cu presiunea hidrostatic a
coloanei de lichid !n tu*. Not&nd !nlimea coloanei de lichid cu +, densitatea
lichidului, , i acceleraia gra"itaional ,, "om a"ea urmtoarea relaie,
) @ g h
0ntroduc&nd !n relaia de mai sus, a"em
l 9
t M g h r K
C

= +
'in aceast relaie se poate calcula coeficientul de "&scozitate al lichidului dac
msurm mrimile cuprinse !n relaie. Daza unui tu* capilar este greu de msurat cu
precizie, !n practic utilizm un procedeu care elimin din calcul aceast mrime.
1stfel se fac determinri comparati"e ls&nd s curg prin acelai tu* capilar lichidul
al crui coeficient de "&scozitate "rem s-l aflm i apoi un "olum egal de ap
distilat al crui coeficient de "&scozitate este cunoscut. ?om a"ea pentru lichid i
ap distilat urmatoarele relaii,
+ l
gt % r

=
9
C

i
+ l
gt r a
a
a

=
9
C

0mprind aceste relaii o*inem,

a a a
t
t

i
a
=

a a
t
t

=ltima relaie se "a folosi la calculul coeficientului de "&scozitate, in&nd cont de

"alorile constantelor J
a
@ 1 .p @ 10
-:
Ns;m
2
si M
a
@ 0,997 g;cm
:
.
1paratur
9
)entru determinarea coeficientului de "&scozitate "om utiliza "&scozimetrul EstNald
#figura de mai -os$.
Fig.2.2 . ,#sco$imetrul -st.ald.

(od de lucru
1paratul se spal *ine i se usuc la trompa de "id. Se introduce cu o pipet o
cantitate determinat de lichid !n rezer"orul "&scozimetrului, aceeai cantitate pentru
toate soluiile. Se aspir !ncet lichidul !n rezer"orul situat la partea superioar a
tu*ului capilar. Se las lichidul s se scurg determin&ndu-se cu a-utorul unui
cronometru timpul necesar scurgerii lichidului !ntre cele dou repere. )entru aceeai
soluie se efectueaz mai multe determinri, i se "a face media rezultatelor care se
trec !n ta*elul urmtor,
Nr.
Solu
ie

Fg;cm
:
G
imp
de
scurg
ere
imp
medi
u de
scurg
ere

c)#%10
-:
Ns;m
2
$
1.
2.
9
/l se compune dintr-un tu* capilar #c$, a
crui e%tremitate se continu cu un tu*
!n form de = i cu un rezer"or #D$,
prelungit cu un tu* "ertical #?$.
/%tremitatea superioar a capilarului se
continu cu o *ul #O$ care la poriunea
superioar are un tu* pre"zut cu o
g&tuitur.)e g&tuitura superioar este
trasat un reper a, la fel i pe cea
inferioar a *ulei, *. )entru a menine
constant temperatur, !n determinrile
de precizie "&scozimetrul se introduce
!ntr-un termostat.
?&scozimetrul EsNald
'etreminarea "scozitii s&ngelui are o deose*it importan medical deoarece
"&scozitatea s&ngelui "ariaz dup cum urmeaz ,
- s&nge total, de la :,5 p&na la 5,C P10
-:
N- ./m/
- "alori medii ,- femei C,5P10QR NPs; mS
-*r*ai , 5,0P10QR N P s; mS
- plasm sanguin, de la 1,9 8 2,: P10QR N Ps ;mS
- serul sanguin, de la 1,6-2,2 P 10QR NP s ;mS
?&scozitatea s&ngelui total este mai crescut la *r*at fa de femeie, la adult
fa de copil, mai mare la s&ngele "enos dec&t cel arterial, depinz&nd de concentraia
de .E
2
din s&nge. 'in punct de "edere patologic "&scozitatea s&ngelui crete !n
cazul poliglo*uliei i leucemiei, scade !n cazul anemiei depinz&nd de "olumul i
forma hematiilor, precum i !n hipoproteinemie.

10
0. DENSIMETRIE
N1234&3 (51)5(3!5
'ensitatea este o caracteristic fizic proprie fiecrei su*stane. Se definete
densitatea absolut ca fiind masa unitii de "olum, adic raportul d @ m;" e%primat
!n Tg;m
:
. 'ac !n locul masei din formula de mai sus se introduce greutatea
su*stanei, care "ariaz !n raport cu acceleraia gra"itaional #> @ mg $, atunci se
poate defini noiunea de greutate specific # U @ mg;?$.
Se mai definete densitate relativ ca fiind raportul dintre densitatea a*solut a
unei su*stane i densitatea a*solut a apei distilate la V C
o
. #c&nd este ma%im $ sau
la o alt temperatur dat,
d
r
@
a
d
d
@
,
m
.
a
m
,
@
a
m
m
, care este o mrime adimensional. (enionm c
masa unui metru cu* de ap distilat la,
0
o
. este 999,9 Tg
V C
o
. este 999,9 Tg W 1000 Tg
V 25
o
. este 997,0 Tg
ceea ce demonstreaz c densitatea "ariaz odat cu modificarea temperaturii, astfel
c pentru msurarea riguroas a densitii a*solute se face !ntotdeauna corecia de
temperatur necesar # d
corectat
@ d
r
P

d
a

to.
,
unde densitatea apei distilate la t
o
. se
cunoate din ta*ele $.
'ac se afl direct prin c&ntrire "alorile m i m
a
, se poate calcula densitatea
oricrei su*stane dorite. 'ensitile diferitelor materiale e%primate !n 10
:
Tg;m
:
,
platin 21,C0 E
2
lichid 1,1C
aur 19,:0 ghea 0,92
mercur 1:,59 potasiu 0,96
fier 7,96 petrol 0,90
11
aluminiu 2,71 alcool 0,79
sulf 2,00 lemn ste-ar 0,70
.E
2
solid 1,5: X
2
lichid 0,07
.onform principiului lui 1rhimede, un corp scufundat !ntr-un lichid este !mpins
de sus !n -os cu o for egal cu greutatea "olumului de lichid dezlocuit. .um fiecare
lichid are o anumit densitate !nseamn c prin scufundarea aceluiai corp !n diferite
lichide, dei se dislocuiesc "olume egale, acestea "or a"ea greuti diferite, ceea ce
genereaz fore de !mpingere diferite. )e acest raionament se *azeaz determinarea
densitii lichidelor cu a-utorul densimetrelor #areometrelor$, *alanei (ohr-
Yestphal, metoda ?an SlITe pentru densitatea s&ngelui etc.
0.1 DETERMINAREA DENSITII LICHIDELOR 6I SOLIDELOR CU
AJUTORUL PICNOMETRULUI 6I A 7ALANEI DIGITALE
a) La lichide: 'eoarece se lucreaz cu unul i acelai picnometru, "olumul apei i
a lichidului studiat sunt aceleai, urm&nd doar s msurm masele cu a-utorul unei
*alane electronice. ?om introduce notaiile,
m
0
@ masa picnometruluiZ
m
a
@ masa picnometrului umplut cu ap distilatZ
m
l
@ masa picnometrului umplut cu lichidul studiatZ
m @ masa lichidului studiatZ
" @ "olumul picnometrului, egal cu al apei sau al lichidului studiatZ
d
a
@ densitatea apei la temperatura de lucru # se ia din ta*ele $Z
d @ densitatea lichidului studiat.
deci m @ m
1
8 m
0

" @ #m
a
8 m
0
$; d
a
d @ m;" @# m
l
8 m
0
$; #m
a
8 m
0
$P d
a
b) La solide :
?olumul unui corp solid se poate afla indirect prin msurarea masei de ap
dislocuite de ctre acel corp. 1stfel "om introduce i notaiile,
m
s
@ masa corpului studiatZ
12
m
as
@ masa picnometrului care conine corpul studiat i !n rest este umplut cu ap
distilatZ
"
s
@ "olumul corpului studiat # egal cu "olumul apei dislocuite de ctre corpul
studiat, la introducerea !n picnometru $Z
d
s
@ densitatea corpului studiat.
deci "
s
@ #m
a
V m
s
8 m
as
$; d
a
d
s
@ m
s
;"
s
@ m
s
; #m
a
V m
s
8 m
as
$P d
a

D3.8193(3v5: )icnometrele sunt "ase de sticl de diferite capaciti pre"zute cu
dopuri str*tute de o capilar fin. .ele mai pretenioase sunt pre"zute cu
termometre iar capilarele sunt marcate cu un reper #D$. =nele picnometre pentru
corpuri solide nu au dop iar pe g&tul lor este trasat reperul D
#fig. :.1.$. 1lte instrumente necesare sunt *alana digital i termometrul digital.








1:
Fig./.2. 0alan"a digital
Fig. /.1. Tipuri de picnometre.
(od de lucru
'up ce se spal *ine picnometrul i se usuc, se c&ntrete cu precizie masa sa
!mpreun cu dopul #m
0
$. Se umple apoi cu ap distilat astfel !nc&t la punerea dopului
apa s refuleze prin capilara acestuia iar !n interior s nu rm&n *ule de aer. Se
terge e%teriorul picnometrului i dopul astfel !nc&t capilara acestuia s rm&n plin
cu lichid. .&ntrind acum picnometrul cu ap o*inem "aloarea m
a
. Se procedeaz
identic i pentru aflarea celorlalte "alori necesar calculului #masa picnometrului cu
lichidul de studiat-de e%emplu soluie hidro-alcoolic- i masa picnometrului care
conine corpul solid -de e%emplu c&te"a *ile de plum*$.
)entru o*inerea unor rezultate precise se "a a"ea !n "edere totdeauna gri- ca,
- lichidul din interior s nu conin *ule de aerZ
- corpul solid s-l c&ntrim numai c&nd este perfect uscatZ
- s lum !n lucru o cantitate c&t mai mare de su*stan solidZ
'ensitatea apei #d
a
$ necesar calculelor se afl din ta*ele, corespunztor
temperaturii de lucru # temperatura se "a msura cu termometrul digital$.
.alculele i prezentarea rezultatelor
'up aflarea tuturor maselor prin c&ntrire, facem !nlocuirile !n formulele respecti"e
i calculm densitile su*stanelor studiate #plum*, alia-e$.
Dezultatele le "om trece !ntr-un ta*el,
Nr. Su*stan m
0
m
a
m
l
m
s
m
as
d
l
d
s
g g g g g 10
:
Tg;m
:
10
:
Tg;m
:
1. lichid - - -
2. solid - - -
1C
0.2 DETERMINAREA DENSITII LICHIDELOR CU AREOMETRELE
'up cum am artat !n introducere, un corp scufundat !ntr-un lichid "a rm&ne !n
echili*ru numai c&nd greutatea "a fi egal cu cea a "olumului de lichid dislocuit. )e
acest principiu sunt construite areometrele, formate !n principal dintr-o ti- de sticl
cu gradaii
g
, o contragreutate > i un termometru .

Fig././ 1tili$area densimetrelor.
Se o*ser" uor dac d
2
[

d
1
, atunci "
2
\ "
1
, masa ( areometrului rm&n&nd aceeai
adic, d
1
@ (;?
1
si

d
2
@ (;?
2,
deci d
1
;d
2
@ ?
1
;?
2
adic "olumul poriunii din
aerometru cufundat !ntr-un lichid este in"ers proporional cu densitatea lichidului.
1reometrele utilizate !n la*orator au diferite destinaii fiind etalonate corespunztor
#etalonarea se face cu a-utorul unor soluii de densitate cunoscut $.
.ele mai utilizate tipuri de areometre sunt,
; D5&.3m5()4*, un areometru care prin scufundare ne d direct densitatea
lichidului prin citirea gradaiei de pe ti-
g
!n dreptul ni"elului lichidului. )recizia
densimetrelor poate fi 10
-:
8 10
-C
# adic 0,001 8 0,0001 $. 'eoarece aceasta comport
15
o lungime a ti-ei mare # respecti", distane mari !ntre gradaii $ se utilizeaz cu succes
o trus de densimetrie, fiecare dintre ele acoperind cu suficient precizie un domeniu
!ngust de densiti. 'e o*icei, fiecare densimetru este marcat cu un sim*ol care ne
permite s transformm densitatea msurat la o anumit temperatur, pentru o alt
temperatur, de e%emplu sim*olul d
C
15
ne arat c temperatura de lucru este de
V15
o
., iar densitatea indicat este densitatea relati" !n raport cu densitatea apei la
VC
o
.. +ormula cu a-utorul creia putem con"erti densitatea relati" este,
t
1
t
1
t
1

d
t
@ d

V ] P d

unde,
t
1
d
t
- densitatea cutat !n *aza t i la temperatura de lucru t
1.
t
1

d

8 densitatea msurat !n *aza

# !nscris pe densimetru $ i la
temperatura de lucru t
1,
] 8 factor de corecie.

/%emplu de corecie, cu un densimetru ce are sim*ol d
15

15
gsim d
15
15
@ 1,67C0 i
dorim s o con"ertim !n *aza d
C
20
, deci d
C
20
@ 1,67C0 8 0,000999 P 1,67C0 @ 1,672C.
0n practica la*oratorului medical se utilizeaz !n mod frec"ent truse de densimetrie
care permit determinri de densitate !n inter"ale destul de largi.

;A*!11*m5()4*, este un densimetru etalonat !n *aza d
15
15
i ale crui gradaii indic
concentraia !n procente de "olum # ^ ? $ a soluiei alcoolice respecti"e, care se mai
numete i 3trie real4. .um !ns nu se lucreaz !ntotdeauna la temperatura 15
o
.
!nseamn ca "om citi !n realitate o 3trie aparent4 corespunztoare temperaturii la
care lucrm. 'eci "a tre*ui s trecem de la tria aparent la tria real, lucru
realiza*il cu a-utorul ta*elelor. .unosc&nd tria real care nu este altce"a dec&t
concentraia corectat !n procente de "olum # ^ ? $, cu a-utorul ta*elelor o putem
con"erti !n procente de greutate # ^ > $ sau !n g;l sau putem pur i simplu aflm
densitatea d
15
15
a soluiei alcoolice .
; U)1"5&.3m5()4* este un areometru special cu scala mult redus, ti-a fiind
gradat doar !ntre 1,000 8 1,050. /ste utilizat frec"ent !n clinic pentru determinarea
densitii urinei !n cadrul e%plorrilor funciunii aparatului renal. 'esigur, dac este
16
ne"oie se fac coreciile de temperatur necesare # se adaug o unitate densimetric
pentru o "ariaie a temperaturii cu :,:
o
. dac temperatura depete V15
o
. $.
(od de lucru
Andiferent cu care tip de areometru "om lucra,
"om proceda !n acelai fel. 0ntr-un cilindru de sticl ., se
introduce soluia de cercetat ,S , !n suficient cantitate pentru
ca areometrul s poat pluti li*er # acesta se introduce !n
soluie cu mult atenie pentru a nu-i sparge partea inferioar
prin lo"ire de fundul "asului, unde pentru orice
e"entualitate se pune si "at $. 0n momentul c&nd areometrul
se afl !n echili*ru perfect, fr ating fundul sau pereii
cilindrului ., se citete gradaia 3g4 p&n la care s-a cufundat
!n lichid precum i temperatura !nregistrat pe termometrul .
'up !ntre*uinare areometrele se terg i se !nchid !n cutiile
lor protectoare. .itirea gr gradaiei se face !n dreptul prii inferioare a meniscului.
.alcule i prezentarea rezultatelor
'up determinarea densitilor i a concentraiilor "om face coreciile de temperatur
corespunztoare, rezultatele trec&ndu-le !n ta*lelul urmtor,
'eterminri t
1
t
1
ria ria
d

t
o
1
. ] P 10
-6
d
t
apar. real. >^
mas. sau ^ ? g;l
densimetrie
alcoolmetrice

urodensimetrice


17
Fig /.2. 1rodensimetrul
<. METODE CALORIMETRICE
<.1. DETERMINAREA CLDURII SPECIFICE A UNUI CORP SOLID
P)3&!3834: .alorimetria este partea termodinamicii care se ocup cu msurarea
cantitilor de cldur. .ldura este o form de energie care se datorete agitaiei
termice i se msoar !n -ouli #_$ sau calorii. E calorie este cantitatea de cldur
necesar unui gram de ap distilat pentru a-i ridica temperatura cu un grad, de la
19,5
0
la 20,5
0
.. =nei calorii !i corespunde C.19 -ouli !n sistemul SA. .antitatea de
cldur primit de un corp, depinde de masa m a lui, de natura corpului, caracterizat
printr-o constant caracteristic, notat cu c, i de diferena de temperatur t
adic,
Q = m
.
c
.
t #1$
'e aici , c @
t m
+

Z dac m @ 1 i t @ 1
0
o*inem, c @ L.
'eci cldur specific este cantitatea de cldur necesar unitii de mas dintr-un
corp pentru a-i ridica temperatura cu un grad. 0n sistemul .>S ea se msoar !n

[ ] c
@
grd g
cal
.
iar !n sistemul internaional
[ ] c
@
3 3g
4
.
.
.ldura specific a apei este de 1 cal;g.grd @ C,19 _;HgH. /a este mult mai mare
dec&t a celor mai multe corpuri. )rodusul dintre cldura specific i masa corpului se
numete capacitate caloric i se notez cu C = m.c. )rodusul dintre cldura specific
i masa molar ( se numete cldur specific molar, .
(
@c.( sau cldur molar.
.ldura specific a unui corp poate fi determinat prin mai multe metode, cea mai
simpl are la *aza metoda amestecurilor. /a se *azeaz pe schim*ul de cldur care
se realizeaz prin punerea !n contact a dou sau mai multe corpuri cu temperaturi
diferite. 'e e%emplu dac introducem !ntr-un calorimetru cu ap un corp a crui
19
temperatur este mai ridicat dec&t cea a apei el "a ceda o anumit cantitate de
cldur. 0n momentul echili*rului termic, conform principiilor calorimetrului, este
"ala*il egalitatea,
L
1
@ L
2
8 L
: ,
unde L
1
reprezint cantitatea de cldur cedat de corpul mai cald, L
2
cantitatea de cldur a*sor*it de apa din calorimetru i L
:
cantitatea de cldur
a*sor*it de calorimetru, agitator i termometru.
L
1
@ m # t 8t
2
$, L
2
@ m
1
c
1
# t
2
8 t
1
$, L
:
@ m
2
c
2
# t
2
8 t
1
$
unde, m este masa corpului de analizat, m
1
este masa apei din calorimetru, m
2
este
masa calorimetrului, agitatorului i a termometrului, c este cldura specific a
corpului, c
1
este cldura specific a apei, c
2
este cldura specific a calorimetrului,
termometrului i agitatorului, t
2
este temperatura final a amestecului# de ehili*ru$ , t
este temperatura iniial a corpului, t
1
este temperatura iniial a apei din calorimetru,
agitator, termometru. 'eci t [ t
2
[ t
1.
0nlocuind "alorile pentru L
1
, L
2
i L
:
o*inem,
mc 5 t 6 t
1
) = 5 m
1
c
1
7 m
2
c
2
) 5 t
2
6 t
1
)
.apacitatea caloric a calorimetrului # m
2
c
2
$ se determin !n preala*il i poart
denumirea de echi"alent !n ap al calorimetrului #notat cu 1$.
1stfel se poate calcula cldura specific a unui corp in&nd cont de "aloarea
echi"alentului !n ap al calorimetrului i de faptul c pentru ap cldura specific este
egal cu 1 cal;g grad # sau C195 _;Tg grad $, a"em,
c

@
$ #
$ $# . #
2
1 2 1 1
t t m
t t ! c m

+

D3.8193(3v5: ?asul calorimetric este compus dintr-un "as cilindric O, introdus
!ntr-un "as mai mare . i izolat termic.
?asul O conine o cantitate precis msurat de ap, un termometru ' i un agitator /
# +ig. C.1 $.
Fig.2.1 &r"ile componente ale unui calorimetru.
19
(od de lucruZ
- Se introduce !n calorimetru o cantitate de ap precis msurat, m
1
.
- Se msoar temperatura apei din calorimetru t
1
# fie cu un termometru cu mercur, fie
cu un termometru electric $
- Se c&ntrete corpulZ apoi se introduce !ntr-un "as cu ap care fier*e, unde se las
c&te"a minute.
- Se msoar temperatura apei care fier*e i care reprezint temperatura iniial a
corpului t.
- Se introduce repede corpul !nclzit !n calorimetru, agit&nd lent apa din calorimetru.
- Se urmrete indicaia termometrului. 0n momentul !n care ea este staionar se
citete "aloarea. 1ceasta este temperatura final a amestecului, t
2
.
)entru a determina cldura specific a corpului se introduc datele !n relaia de mai
sus. (surtorile i calculele se "or efectua pentru diferite materiale, fier, plum*,
aluminiu, alia-e.
Dezultatele se trec !n ta*elul urmtor,
Nr. (aterialul 1 m m
1
t
2
t
1
t c
det. studiat _;Tg _;Tg grad
# cal;g$ g g
0
.
0
.
0
. #cal;g.grad$
1. )*
2. 1l

<.2. DETERMINAREA CALDURII SPECIFICE A UNUI LICHID
)entru a determina cldura specific a unui lichid se folosete un4purttor de cldur4
numit (5)m1=1). ermoforul este un *alon de sticl pre"zut cu un tu* su*ire, el
poate transporta aceeai cantitate de cldur at&t lichidului de referin # apa $ c&t i
lichidului de cercetat, deci este "ala*il ecuaia calorimetric L
termofor
@ L
apa
i
L
termofor
@ L
lichid
.
(od de lucru,
20
Se msoar masa m
va.
a "asului interior al calorimetrului, m
a
-masa apei ce se
introduce !n el i temperatura (
a
a sistemului ap-calorimetru.

ermofor

Se umple *alonul p&n la reperul a cu un lichid colorat i se !nclzete !ntr-un "as cu
ap cald p&n lichidul din tu* atinge ni"elul . 0n acest proces de !nclzire
termoforul primete cantitatea de cldur L. Se scoate termoforul din *aia cald i se
introduce !n apa din calorimetru., urmrind co*or&rea ni"elului de la la a. 0n
acest proces de rcire termoforul "a ceda apei e%act aceiai cantitate de cldur pe
care a primit-o. 'up sta*ilirea echili*rului termic se msoar temperatura final (
=.
Se repet aceleai operaii cu lichidul de cercetat. 'up golirea apei din calorimetru
se introduce o mas de lichid m
*
i se msoar temperatura lui (
*
. (asa lichidului se
poate afla din produsul "olumului de lichid i densitatea lui. Se !nclzete din nou
termoforul !n *aia cald p&n ce lichidul din tu* atinge ni"elul dup care se
introduce !n calorimetrul cu lichid i se ateapt atingerea ni"elului a> iar
temperatura de echili*ru "a fi (
5 .
.antitatea de cldur cedat lichidului !n aceste
condiii este egal cu cea cedat apei. .antitatea de cldur primit de ap i de "asul
interior al calorimetrului "a fi ,
+ = m
a
c
a
5 t
f
8 t
a
) 7 m
vas
.c
vas
5 t
f
6 t
a
)
21
.antitatea de cldur primit de lichidul de cercetat i de "asul interior al
calorimetrului "a fi,
+ = m
l
c
l
5 t
e
6 t
l
) 7 m
vas
c
vas
5 t
e
6 t
l
)
'ar m
"as
c
"as
@ . #capacitatea caloric a "asului $ care este de-a cunoscut.
m
a .
c
a
5 t
f
8 t
a
) 7 C 5 t
f
6 t
a
) = m
l
.c
l
5 t
e
8 t
l
) 7 C 5 t
e
6 t
l
) rezult
c
l
@
$ #
$ # $ # .
l e l
e l a f a f a a
t t m
t t t t C t t c m

+ +
Se "a determina cldura specific a dou lichide diferite #alcool etilic i soluie de
acid acetic$. Se tie c apa are c
a
@ 1 cal;gr.grd, iar !n general cldurile specifice ale
lichidelor o*inuite sunt mai mici dec&t a apei.
<.0. DETERMINAREA #ARIAIEI DE ENTALPIE LA DI%OL#ARE
0n sistemele *iologice "ii au loc o serie de transformri energetice !nsoite de
producere de cldur. 'esigur, rolul principal !n producerea cldurii !l au procesele
de o%idare ale su*stanelor nutriti"e, iar o parte mai mic o au i procesele de
hidroliz, de dizol"are etc., procese care au loc la presiune constant #1atmosfer $.
)entru a studia aceste procese s-a introdus o funcie de stare numit entalpie 59)' care
poate fi e%primat cu a-utorul relaiei,
= ! " #V #1$ =nde U
este energia intern a sistemului, 8 este presiunea la care se gsete sistemul iar ?
este "olumul lui. ?ariaia entalpiei X @ X
2
- X
1
reprezint cantitatea de cldur pe
care sistemul o schim* cu mediul e%terior !ntr-un proces izo*ar,
= Q
#
$ Q
#
= ! " # V #2$
)rocesul de dizol"are a su*stanelor este !nsoit de cldura de dizol"are, care depinde
de interaciunea ionilor sau moleculelor su*stanei cu moleculele dizol"antului. Ba
dizol"area unei su*stane cristaline !n ap au loc urmtoarele fenomene: a)
distrugerea re"elei cristaline de ctre moleculele de ap dipolare' care se interpun
22
)ntre ionii srii' energia ce trebuie c%eltuit )n acest proces se nume*te energie de
re"ea 9
r
*i b) solvatarea 5%idratarea) lor c#nd are loc o dega:are de cldur
datorit interac"iunilor ion8dipol' numit energie de solvatare 9
s
.
.onform legii lui Xess, suma cantitilor de cldur ce !nsoete un proces este
constant.

di%
=
r
"
s
#:$
/nergia de reea X
r
are "aloarea de cca 10
2
cal ;mol i este poziti" deoarece este
a*sor*it de sistem, iar energia de sol"atare X
s
are cam aceeai "aloare dar este
negati", deoarece ea este dega-at de ctre sistem. /ntalpia de dizol"are #cldura de
dizol"are$ poate fi poziti" #dizol"area endoterm $ sau negati"
#dizol"are e%oterm $ dup cum energia de reea este mai mare sau mai mic dec&t
energia de sol"atare. .ldura dega-at sau a*sor*it se msoar !n calorii ;mol sau !n
-ouli;mol. .antitatea de cldur L primit sau cedat de un corp de mas m i cldura
specific ! depinde de "ariaia temperaturii ( adic,
Q = m c t #C$
)rodusul dintre cldura specific i masa lui se numete capacitate caloric ,
C = m
.
c , 'eci,
Q = & t #5$
)entru determinarea cldurii de dizol"are se aplic ecuaia calorimetric conform
creia cantitatea de cldura a*sor*it de un sistem este egal cu cea dega-at de alt
sistem, cu care este !n contact. 0n cazul dizol"rii unor sruri, cldura primit pentru
dizol"are #L
p
$ este egal cu cea cedat de sistemul calorimetric #L
cal
$ i de cldura
cedat de sol"ent #L
sol
$. .ldura cedat de calorimetru este L
cal
@ . t , iar cea
cedat de sol"ent este L
sol.
@ m
s.
c
s
. t, deci cldura total este,
= Q
#
= Q
sol
" Q
cal
= m
s
c
s

t " & t = ' m

s
c
s
" & ) t #6$
unde m
.
este masa soluiei # masa apei V masa srii $, ! cldura specific a soluiei
care se poate egal cu cea a apei #1 cal;gr.grd.$. .onstanta calorimetrului C se poate
determina din calcul. /ntalpia de dizol"are se raporteaz la un mol de su*stan.
M1"4* "5 *4!)4:
2:
Se c&ntresc urmtoarele, "asul interior al calorimetrului i agitatorul, masa de ap
ce se "a introduce !n acest "as i sarea pe care "rem s-o dizol"m, !ntr-o epru*et. 'e
e%emplu, utilizai 200 moli ap #1(
ap
@ 19 g $ pentru 1mol sare. Se introduce
epru*eta cu sare !n apa din calorimetru i se msoar temperatura din minut !n minut,
p&n ce ea rm&ne constant. Se "a folosi termometrul digital. Se "ars coninutul
epru*etei !n ap, se agit p&n la dizol"area srii. Se msoar din nou temperatura,
timp de 5 minute, din minut !n minut. )entru a gsi "aloarea lui ( se reprezint
grafic temperatura !n funcie de timp. Se calculeaz apoi "ariaia entalpiei cu relaia
#6$.
Fig.2.2.,aria"ia temperaturii )n
procesul de di$olvare.

2C

II. MSURAREA PROPRIETILOR ELECTRICE ALE LICHIDELOR
7IOLOGICE
?. CONDUCTOMETRIE
'eterminarea concentraiei electroliilor din plasma sanguin este foarte util !n
practica clinic deoarece ofer indicaii asupra meta*olismului hidromineral, asupra
repartiiei apei !n organism !ntre cele trei compartimente, intracelular, interstiial i
"ascular. 0n diferite tul*urri ale echili*rului hidromineral aceast repartiie poate
suferi modificri importante. 'eterminarea concentraiei electrolitice a plasmei se
poate face prin mai multe metode, conducti"itate electric, crioscopie sau prin
dozarea separate a ionilor. )rin msurarea conducti*ilitii sau a rezisti"itii se poate
face o dozare destul de precis i rapid a electroliilor din plasm, su*stanele
neioniza*ile cum sunt urea sau glucoza nefiind implicate !n aceste determinri.
N1234&3 (51)5(3!5 "5 a9@:
Se numete conducti"itate electric > # conductan $, "aloarea in"ers a
rezistenei, a mediului respecti", > @
;
1
, unde D este rezistena electric i
se msoar !n ohmi # $. )entru conductorii de ordinul AA conducti*ilitatea este o
proprietate caracteristic i depinde de concentraia ionilor !n soluie #deci de gradul
de disociere electrolitic$, de numrul de purttori de sarcin i de "iteza cu care
acetia transport curentul !n soluie.
Dezistena electric este dat de relaia, D @

s
l
, !n care l este lungimea
conductorului, s seciunea,

rezistena specific sau rezisti"itatea # msurat !n

.cm $. /a depinde de mediului respecti". Dezistena specific,

, este rezistena
unui cu* din acel mediu care are lungimea i seciunea egal cu unitatea.
.onductana mediului > se msoar !n
-1
, numit i Siemens # S $ . ?aloarea
in"ers a rezistenei specifice se numete conducti"itate electric specific

,
25

1
@
s ;
l
.
#
-1
cm
-1
$ sau # S;cm $
.onducti"itatea electric specific depinde de natura su*stanei, de temperatur i de
concentraia soluiei. )entru a determina conducti"itatea electric specific a unui
electrolit este ne"oie de o celul de conducti*ilitate. 1ceasta e alctuit din doi
electrozi de platin cu suprafaa de cca 1 cm
2
i distanai la 1 cm, astfel !nc&t "olumul
de lichid s rm&n acelai pentru toate soluiile de msurat. .elula de
conducti*ilitate se caracterizeaz prin constanta celulei, care este dat de raportul
dintre distana dintre electrozi i suprafaa lor,
T @
S
l
# cm
-1
$
'eoarece raportul l;S apare i !n legea lui Ehm, constanta celulei se poate determina
prin msurtori de rezisten sau de conductan a unor soluii etalon de electrolit cu
conducti"itate cunoscut,
U @ >. T # S.cm
-1
$
'e o*icei "aloarea lui U este dat !n prospectul aparatului . Spre e%emplu,
conducti"itatea soluiilor de H.l la 25
0
. este dat !n ta*elul de mai -os.
.oncentraia molar 0,1 0,02 0,01
.onducti"itatea

;
-1
cm
-1
; 0,01299 0,002769 0,001C12
0n practic se utilizeaz conducti"itatea echi"alent sau cea molar adic
conducti"itatea raportat la numrul de echi"aleni-gram sau de molecule-gram de
electrolit !ntr-un cm
:
de soluie. 1cestea sunt sim*olizate prin `
e
i `
m
i pot fi
calculate cu relaia ,
`
e , m
@
m e
c
,

.?
unde c
e,m
@ concentraia echi"alent sau cea molar, iar ? este "olumul !n cm
:.
Spre e%emplu, fie o soluie molar a unei su*stane care disociaz !n n ioni. +iecare
mol din aceasta soluie conine 6,02
.
10
2:
molecule i posed o sarcin electric egal
cu n
.
6,02
.
10
2:

.
1,6
.
10
-19
coulom*i sau n +aradaI. )rin definiie o concentraie de 1
/chi"alent reprezint concentraia ionilor poziti"i sau negati"i care au o sarcin
26
electric de 1 +aradaI. 0n e%emplul de mai sus concentraia echi"alent a soluiei este
de n /chi"alent ; litru. /%perimental s-a putut demonstra c conducti"itatea
echi"alent scade dac concentraia crete i se pot o*ser"a dou tipuri de
comportamente care caracterizeaz electroliii tari, respecti" cei sla*i. Ba diluii mari
# 1; c 10
C
$ ea rm&ne apro%imati" constant i se numete conducti"itate
echi"alent la diluie infinit . /%trapol&nd la origine, la diluie infinit - unde
comportamentul tinde s fie ideal - se o*ine conducti"itatea echi"alent limita `
0
.
Fig.<.1. =ependen"a conductivit"ii electrice de concentra"ie pentru electroli"i tari respectiv slabi.
(surarea conducti"itii #rezisti"itii$ are mare importan !n determinarea
concentraiei ionilor din plasma sanguin. ?aloarea normal a rezisti"itii plasmei
sanguine la temperatura corpului este de 69-79 ohm.cm. E cretere a rezisti"itii a
plasmei sanguine, indic o scdere a concentraiei electroliilor din plasm.
.oncentraia total a electroliilor din plasma sanguin se poate determina cu
a-utorul relaiei,
` F
-1
cm
-1
G
.
e
Fea;lG

`
0
/lectroliti tari
/lectroliti sla*i
27
c @
$ . 25 , 0 100 #
10 . 6 . 1
6
&
F m/a ; litruG
unde

este rezisti"itatea electric, iar ) proteinemia !n g;l, care este dat !n funcie
de densitatea plasmei !n ta*elul de mai -os.
Ta5*4* ?
'ensitatea
g/cm
/
)roteinemia
g/l
'ensitatea g/
cm
/
)roteinemia
g/l
1,016 :0,9 1.026 65,2
1,017 :C,: 1,027 69,9
1,019 :7,7 1,029 72,0
1,019 C1,2 1,029 75,5
1,020 CC,6 1,0:0 79,9
1.021 C9,0 1,0:1 92,:
1,022 51,C 1,0:2 95,7
1,02: 5C.9 1,0:: 99,2
1,02C 59,9 1,0:C 92,6
1,025 61,7 1,0:5 96,:
?aloarea normal a concentraiei totale a electroliilor !n plasma este de :10 m/a;l.
(surtorile conductometrice efectuate !n legtur cu proprietile electrice ale
celulelor sanguine indic o "aloare a capacitii electrice de 1 b+; cm
2
i o
conductan de C9 mS;cm, iar conducti"itatea citoplasmei este de C mS;cm .
?.1. U(3*39a)5a m4*(3m5()4*43 5*5!()1!+3m3! ; 8H> m#> (5m85)a(4)a A3
!1&"4!(3v3(a(5 B&();4& .3&,4) 3&.()4m5&( ; CONSORT C C0D.
Ba acest instrument pot fi conectate simultan un electrod de pX, un electrod redo%, o
celul de conducti"itate i un senzor de temperatur. )arametrii tehnici,
'omeniu de masur, 081C pX, c 1000 m?, 08100d., 08100 mS;cm.
Dezoluie , 0.01 pX, 1 m?, 1d., 0.1 bS;cm
)recizie - pX;m? 8 0.5^ din "aloarea masurat.
- conducti"itate- 2^ pe toat scala.
.ompensarea temperaturii- automat sau manual !n inter"alul 0-100 d..
.ali*rare 8automat pX 2 puncte i conducti"itate 1 punct
29
Decunoatere tampon 8 pX, 9 "alori preprogramate.
1ccesorii- celul de conducti"itate SH10O
- electrod de pX S)10O
- senzor de temperatur S10N
- stati" fle%i*il cu *ra.
- Soluii tampon i pentru cali*rare.
)e cutia aparatului e%ist 5 taste. .u tasta (ode se poate selecta modul de lucru
#msurarea conducti"itii, pX, temperatura$ procedura de etalonare i re"enire la
modul iniial. Outonul .1B !ncepe sau continu etalonarea sau alegerea unei funcii ,
sgeile ef se folosesc pentru alegerea manual a unei "alori sau a unei funcii, iar
tasta EN;E++ pentru conectarea sau deconectarea aparatului . )e ecran pot aprea
c&te"a mesa-e sau coduri de eroare, ; or ; @ depirea scalei , ; cc ; @ constanta
celulei !n afara domeniului de msur, ; .1B; @ greeal de etalonare, ; (/(; @
eroare de memorare. Nu se "a introduce celula de conducti"itate i electrodul de pX
!n acelai timp !n soluie.

Fig.<.2. Conductometrul C-NS-;T >/?.
?.1.a. M1"4* "5 *4!)4 85&()4 m@.4)a)5a !1&"4!(3v3(@233 :
29
g Se selecioneaz gama de conducti*ilitate aps&nd pe *utonul (ode.
g 'up ce s-a splat electrodul cu ap distilat, pe urm cu soluia etalon de 0,01 (
H.l # 1C1:

S; cm $, se cufund apoi electrodul !n aceast soluie.emperatura

soluiei nu are importan, dar totui ea tre*uie s fie cuprins !ntre 0 i :0 grade
.elsius. 'ac temperatura este diferit, se compenseaz manual la "aloarea indicat .
1psai apoi tasta .al.
g 1paratul "a arta temperatura de referin ; r.20; sau ; r.25 ;.1legei "aloarea
dorit i apsai tasta .al.
g 1paratul "a indica constanta celulei de e%. ; 1.0C5 ; i se etaloneaz automat c&nd
afia-ul este sta*il # adic tasta .al !nceteaz clipirea $.
g 'up ce se cltete electrodul cu ap distilat, apoi cu soluia de msurat, se
introduce !n soluia de msurat i se citete "aloarea pe ecran.
g 'up utilizare, splai electrodul i introducei-l !n ap distilat # adugai puin
detergent pentru a conser"a mai *ine suprafaa electrozilor de platin$.
?.1.. M1"4* "5 *4!)4 85&()4 m@.4)a)5a 8H.
g Se "a selecta gama de pX cu a-utorul tastei (ode. 1fia-ul "a indica imediat
"aloarea msurat la etalonarea precedent. )entru o nou etalonare, se apas tasta
.1B.
g Se cltete electrodul cu ap distilat i se introduce !ntr-unul din tampoane.
g 1fia-ul "a indica unul dintre cele 9 tampoane din memorie, spre e%emplu C.01, !n
timp ce indicatorul pX de pe ecran clipete. Se alege cu a-utorul sgeilor tamponul
corespunztor i se apas tasta .al. 1paratul "a arta tamponul msurat i se "a
cali*ra automat atunci c&nd afia-ul este sta*il#indicaia .al de pe ecran nu mai
clipete$.
g Se "a clti electrodul cu ap distilat i se introduce !n cel de-al doilea tampon.
g 1fia-ul "a indica un nou tampon din memorie #de e%emplu 9.19$ !n timp ce
indicatorul pX de pe ecran clipete. Se alege tamponul corespunztor i se apas tasta
.al, etalonarea se face automat.
g Se cltete electrodul cu ap distilat i se introduce !n soluia de msurat, apoi se
citete direct "aloarea de pe ecran.
:0
g 'up folosire cltii totdeauna electrozii cu ap distilat i pstrai !n soluie de H.l
cu concentraie :...C (.
?.1.!. M1"4* "5 *4!)4 85&()4 m@.4)a)5a m#.
g Selecionai gama m? cu tasta (ode.
g 'up cltirea cu ap distilat se introduce electrodul !n soluia de msurat i se
citete "aloarea pe ecran.
g 'up folosire se cltete cu ap distilat i se pstreaz !n soluie H.l :...C (.
)entru toate modurile de lucru se poate folosi concomitent senzorul de temperatur.
A8*3!a235: 1$ Se pregtete o soluie de H.l 1 n i o soluie de .X
:
.EEX 1 n, !n ap
distilat. 1poi se "or prepara diluiile 0,1Z 0,01Z 0,001 i 0,0001 normal i se "a
determina conducti"itatea si pX-ul lor. 'atele se "or trece !n urmtorul ta*el. Se "a
reprezenta grafic conducti"itatea !n funcie de concentraie pentru fiecare soluie.
Soluie .oncentraia
F n G
>
F
-1
@
SiemensG
`
F mS;
cmG

pX
2$ Se "a calcula concentraia total de electrolii din plasm cunosc&nd "aloarea
normal a rezisti"itii electrice a plasmei, conform formulei de mai sus. )roteinemia
se determin din ta*elul 5 !n funcie de densitatea plasmei.
E. STUDIUL UNEI PILE DE CONCENTRAIE
:1
N1234&3 (51)5(3!5 :
=n electrod metalic introdus !n soluie apoas ce conine ionii si "a participa la o
reacie redo% de tipul ,
red z

e
8
V o@ ,
unde red - atomul neutru, z 8 "alena ionului, e 8 sarcina electronului, o@ 8ionul cu
sarcina Vz.
0ntruc&t electronii rm&n !n metal iar ionii trec !n soluie, datorit atraciei
electrostatice dintre ei, se formeaz la interfaa metal-soluie un strat du*lu electric.
'iferena de potenial datorit stratului du*lu electric se opune trecerii unei noi
cantiti de ioni !n soluie. Sistemul a-unge la echili*ru c&nd tendina de trecere a
ionilor !n soluie datorit diferenei de potenial chimic !ntre formele red i o% este
anulat de tendina trecerii !n sens opus datorit diferenei de potenial electric.
:2
Se poate demonstra #a"&nd !n "edere c potenialul chimic !n faza metalic este egal
cu potenialul standard$ c potenialul electric al electrodului metalic !n raport cu
soluia se poate calcula cu formula,
o@
. ln
z+
D
/ /
0
+ =
, unde .
o%
8 este concentraia molar a ionilor !n soluie, D 8
constanta uni"ersala a gazelor, - temperatura a*solut, z- "alena ionului, + 8
numrul lui +aradaI #96500 .;mol$ , /
0
8 potenialul electric normal al electrodului
#potenialul electric standard dac temperatura este 25
<
.$.
'oi electrozi identici introdui !n soluii de concentraii diferite, .
1o%
i .
2o%
, se "or
!ncrca la poteniale diferite, /
1
i /
2
.
::
Fig.A.1. Formarea stratului dublu
electric la suprafa"a electrodului
metalic
/
1
@ /
0
V
1o%
. ln
z+
D
/
2
@ /
0
V
2o%
. ln
z+
D
Ba punerea !n contact electric a celor dou soluii printr-o punte electrolitic
#conin&nd o sare ce disociaz !n ioni cu mo*iliti egale i deci nu produce potenial
de difuziune$ !ntre cei doi electrozi apare o diferen de potenial electric, /,
/ @ /
2
8 /
1
@
1o%
2o%
.
.
ln
z+
D

=n astfel de dispoziti" se numete #ila de concentra(ie datorit faptului c diferena

de potenial electric este o consecin a diferenei de concentraie a ionilor !n cele
dou soluii.
.azul discutat mai sus se refer la trecerea !n soluie a unor ioni poziti"i. 'ac
electrodul utilizat se comport re"ersi*il !n raport cu ionii negati"i din soluie
diferena de potenial se "a calcula cu aceeai formul doar semnul "a fi schim*at
datorit schim*rii polaritii stratului du*lu electric. 0n general se "a putea scrie,
/ @
1
2
.
.
ln
z+
D

Semnul 3V4 utiliz&ndu-se pentru ionii poziti"i, iar 3-3 pentru ionii negati"i.
rec&ndu-se la logaritmi zecimali se o*ine forma practic a formulei de mai sus,
/ @ ?$ "olti, # lg
z+
D
2,:02
1
2
C
C
, sau
/ @ m?$ , #mili"olti lg
z+
D
:02 2
1
2
C
C

0n cele ce urmeaz se "a studia potenialul electric generat de o pil de concentraie a

ionului .1
-
din soluiile de H.l, dispoziti" ce se apropie de comportamentul ideal.
/lectrozii utilizai sunt fire de argint pe care s-a depus electrolitic un strat de 1g.l
#notai pe scurt electrozi 1g;1g.l$ i care sunt re"ersi*ili !n raport cu .l
-
.
:C
/lectrodul introdus !n soluie mai diluat de H.l "a trimite !n faza apoas mai muli
ioni .l
-
, el !ncrc&ndu-se la un potenial poziti" !n raport cu cel aflat !n soluia mai
concentrat. 'iferena de potenial, masurat !n m?, "a fi,
/ @ - 2:02
1
2
.
.
lg
z+
D
sau, dup rsturnarea fraciei,
/ @ 2:02
2
1
.
.
lg
z+
D
#m?$.
(surarea diferenelor de potenial generate de pilele de concentraie nu poate fi
fcut cu instrumente o*inuite datorit faptului c acestea modific stratul du*lu
electric de la suprafaa electrozilor prin cantitatea mare de curent ce tre*uie s le
str*at. 'in acest moti" se folosesc gal"anometre sau mili"oltmetre electronice care
au rezistena de intrare suficient de mare.
Ma(5)3a*5 &5!5.a)5
(ili"oltmetrul cu afisa- digital, 2 electrozi 1g;1g.l montai pe supori ce se pot
deplasa "ertical pe stati"e, 2 pahare Oerzelius de 50 ml, f&ii de h&rtie de filtru #ca
puni electrolitice$, soluie de H.l cu concentraia 1h2 moli;litru, cilindru gradat de
50 ml, ap distilat.
D5.!)35)5a a8a)a(4)33
'ispoziti"ul e%perimental este realizat pe dou stati"e "erticale !n lungul crora pot fi
deplasate suporturile pe care sunt fi%ai cei doi electrozi i de care pot fi prinse cu
cleme paharele Oerzelius conin&nd soluiile de lucru. )rimul pahar Oerzelius "a
conine soluia de H.l nediluat, de referin, cu concentraia pe care o "om nota .
1
i care rm&ne nemodificat pe tot cursul e%perienei. 1l doilea pahar Oerzelius "a
conine soluii de concentraie "aria*il, .
2
, o*inute prin diluarea progresi" a
soluiei de referin. )rin co*or&rea suporilor, electrozii /l
1
i /l
2
pot fi introdui !n
soluiile respecti"e. )untea electrolitic, ), dintre cele dou soluii este realizat cu o
*and de h&rtie de filtru. .a*lurile electrozilor /l
1
si /l
2
"or fi cuplate la *ornele
ireferinj i respecti", imsurarej ale mili"oltmetrului sau pX-metrului. 0n cazul
utilizrii unui pX-metru *utonul de comutare m?-pX se "a pune !n poziia im?j.
:5
Fig.A.2. ;epre$entarea sc%ematic a dispo$itivului e@perimental pentru o pil de
concentra"ie.
M1"4* "5 *4!)4
Se cupleaz mili"oltmetrul la reea i se pornete urmrindu-se aprinderea
ecranului de afia-. Nu se "a da importan "alorilor indicate de aparat at&ta timp c&t
electrozii nu sunt introdui !n soluie iar puntea electrolitic nu este instalat !ntre
cele dou "ase cu soluie.
0n am*ele pahare, dup ce !n preala*il au fost splate cu ap distilat, se introduce
soluie de concentraie .
1
. )aharul nr1 se "a prinde cu o clema pe stati"ul din st&nga,
!n el "a fi introdus electrodul /l
1
i "a fi meninut astfel p&n la sf&ritul
:6
Fig.A./. Bultimetre digitale
utili$ate pentru )nregistrarea
diferen"ei de poten"ial
electric produs de o pil de
concentra"ie.
determinrilor. 0n paharul nr.2, prins de stati"ul din dreapta, "a fi introdus electrodul
/l
2
i cu o *anda de h&rtie de filtru se "a face legtura cu "asul nr.1. Andicaiile
aparatului se "or sta*iliza !ntr-un inter"al de timp 1-2 minute. 'ac !ntregul sistem
funcioneaz corect diferena de potenial afiat de aparatul de msur este nul, sau
difer cu cel mult 5 m?. ?om nota aceast "aloare /
1
.
0n continuare, se poate scoate electrodul /l
2
din "asul nr2 i din soluia ce o
conine se prepar, prin diluare k, 50 ml soluie de concentraie .
2
@ .
1
;2 #25 ml
soluie inial V 25 ml ap distilat$. 1ceasta se reintroduce !n "asul nr.2 dup cltirea
lui cu ap. Se repet msurarea diferenei de potenial o*in&ndu-se "aloarea /
2
.
Se procedeaz ca i mai sus, !n mai multe r&nduri, dilu&nd succesi" soluia din
"asul nr.2, astfel !nc&t s se o*in "alorile pentru potenialele /
C
, /
9,
/
16,
/
:2
...
corespunztoare unor soluii din "asul nr.2 de concentraii .
1
;C, .
1
;9, .
1
;16, .
1
;:2,...
/ste foarte important ca la fiecare msurtoare s se schim*e puntea de h&rtie de
filtru dintre "ase. 1ltfel e%ist riscul falsificrii rezultatelor prin modificarea
concentraiilor din acest "as.
)rezentarea rezultatelor i calcule,
.
2
.
1
;1 .
1
;2 .
1
;C .
1
;9 .
1
;16 .
1
;:2 .
1
;6C .
1
;129
.
1
;.
2
1 2 C 9 16 :2 6C 129
lg
2
1
C
C

0,00
0,:01 0,602 0,90: 1,20C 1,505 1,906 2,107
/
n
#m?$ E
Se "a reprezenta grafic dependena potenialului pilei de concentraie, /, !n funcie de
lg #.
1
;.
2
$ tras&ndu-se dreapta care apro%imeaz cel mai *ine punctele o*inute
e%perimental.
.u a-utorul graficului se sta*ilesc "alorile pentru panta e%perimental a dreptei T
e
,
T
e
@
$ ;. llg#.
/
2 1

/cuaia drepetei e%perimentale cu "alorile astfel gsite se "a scrie su* formula,
/ @ /
0
V T
e
lg #.
1
;.
2
$
1ceast ecuaie "a fi comparat cu cea teoretic,
:7
/ @ T
t

.

lg #.
1
;.
2
$ unde T
t
@
+
D :02 2
este panta teoretic pentru
msurtori fcute !n m?.
1stfel se poate aprecia c&t de aproape de comportamentul ideal este pila studiat.
1ceast apropiere este cu at&t mai mare cu c&t /
0
#potenialul datorit asimetriei !n
funcionarea electrozilor$ este mai redus i cu c&t panta e%perimental T
e
se apropie
mai mult de "aloarea calculat pentru panta teoretic T
t
.
:9
III. PROPRIETI OPTICE ALE LICHIDELOR 7IOLOGICE
F. DETERMINAREA INDICELUI DE REFRACIE AL UNEI SOLUII
CU AJUTORUL REFRACTOMETRULUI A77E
N1(34&3 (51)5(3!5. )e*rac(ia luminii reprezint fenomenul de trecere a undei
luminoase dintr-un mediu optic cu indicele de refracie n
1
!ntr-un alt mediu optic cu
indicele de refracie n
2
, cu schim*area direciei de propagare. Deprezent&nd raza de
inciden #1$, raza refractat #2$ i not&nd,
- iC unghiul de inciden, format de raza incident cu normala !n punctul de inciden
la suprafaa de separare dintre cele dou medii
- rC unghiul de refracie, format de raza refractat cu normala, putem afirma c raza
incident, raza refractat i normal la suprafa sunt coplanare i are loc relaia ,
n
1
sin i @ n
2
sin r
Fig. D.1. Fenomenul de refle@ie' refrac"ie *i refle@ie total a luminii.
D3.!4233:
1. dac n
2
[n
1
atunci r \ iZ raza refractat se apropie de normal
2. dac n
2
\n
1
atunci r[iZ raza refractat se deprteaz de normal
:. la suprafaa de separare dintre dou medii transparente au loc simultan fenomene
de refle%ie i de refracie a luminii.
:9
C. atunci c&nd n
2
\n
1
notm cu l unghiul limita @ unghiul format de raza incident
pentru care unghiul de refracie este r @ 90 d @[ n
1
sin l @ n
2
'ac lumina trece din mediul 1 !n mediul 2 i n
1
[n
2
atunci e%ist relaia
sin 1 @ n
2
; n
1
, relaie ce poate ser"i la aflarea unuia din cei doi indici de refracie
dac se cunoate cellalt i se msoar unghiul limit, 1. )e acest principiu este
construit refractometrul 1**e cu a-utorul cruia se poate citi direct indicele de
refracie al unui lichid #dup ce s-a adus !n dreptul unui reper fi% zona de delimitare
lumin 8 !ntuneric ce apare atunci c&nd radiaiile se propag !n condiiile refraciei la
unghiul limit$.
'eterminrile refractometrice ne dau informaii preioase i !n legtur cu
structura unor su*stane, cum ar fi de e%emplu cele organice. Defracia specific i
refracia molecular a unei su*stane sunt mrimi fizice importante care pot
caracteriza din punct de "edere optic un lichid *iologic. /a se poate calcula cu
a-utorul relaiei lui Borenz,
D
s
@
d n
n 1
2
1
2
2

i r
m
@ r
s
P(
!n care n este indicele de refracie iar d este densitatea.
)rodusul dintre refracia specific i greutatea molecular ( a unei su*stane se
numete refrac"ie molecular. 1ceast mrime este i ea o caracteristic molecular a
fiecrei su*stane, "aloare ei depinz&nd de starea de agregare a su*stanei respecti"e.
Defracia molecular !n cazul su*stanelor organice este egal cu suma refraciilor
atomice i a refraciilor legturilor, precum i a grupelor coninute de molecul.
Defractometria ca metod de lucru are urmtoarele a"anta-e, se lucreaz cu o
cantitate infim de su*stan #1-2 picturi$, este o metoda rapid i foarte precis #se
poate citi indicele de refracie cu o precizie de C zecimale$. .unosc&ndu-se indicele
de refracie, se poate determina concentraia soluiilor studiate# !n cazul la*oratorului
clinic -concentraia proteinelor !n lichidele *iologice$.
A8a)a(4)a, Defractometrul de tip 1OO/-.on"e% are urmtoarele pri componente,
1. Ecular, mrire optic :0m.
C0
2. 'ispoziti" de deschidere;!nchidere a prismei.
:. Eglinda reflectatoare.
C. Antrare pentru msurarea temperaturii apei de rcire #dac este cazul$.
5. Antrare pentru luminarea prismei.
6. Antrare pentru sistem de termostatare.
7. )risma superioar.
9. 'ispoziti" pentru controlul dispersiei.
9. 'ispoziti" de a-ustare 8msurare.
10. Outon pentru compensarea culorii.
11. Antrare pentru msurarea temperaturii pro*ei cu termometrul digital.
12. Outon de cali*rare.
1:. Degla-ul luminozitii scalei de msurare.
C1
Fig. D.2. ;efractometrul !00E' tip C-N,EF.
C2
)artea principal a refractometrului 1**e se compune din dou prisme, una pentru
msurare i cealalt pentru iluminare, care se pot *loca cu a-utorul unui uru*. )rin
intermediul unui tam*ur se poate deplasa *locul prismelor astfel ca !n c&mpul "izual
al lunetei s ne apar o imagine pe -umtate iluminat i a crei limit de separaie
!ntre zona iluminat i cea !ntunecat s fie plasat e%act la !ncruciarea celor dou
fire reticulare.
M1"4* "5 *4!)4
0nainte de msurtoarea propriu zis tre*uie fcute c&te"a teste de cali*rare. Se
deschide intrarea prismei superioare #5$ i se !nchide oglida reflectatoare #:$. Se
acioneaz tam*urul de compensare a culorii #10$ p&n c&nd culorile rou i al*astru
dispar complet.
(etoda de cali*rare utiliz&nd ap distilat, Se deschide prisma superioar, se
pipeteaz 2-: picturi de ap i apoi se !nchide. 'ac temperatura !nregistrat este de
20d., indicele de refracie ar tre*ui s fie 1,:::0. 0n caz contrar, se acioneaz
tam*urul #9$ p&n c&nd scala indic "aloarea menionat. 'e asemenea se acioneaz
*utonul de cali*rare p&n c&nd limita de separare lumin-um*r corespunde cu
intersecia firelor reticulare.
'eoarece se lucreaz cu lumina al* #lumina
policromatic$ pentru a se !nltura fenomenele
de dispersie ce pot aprea #i care ar determina
erori de msurare datorit imposi*ilitii
o*inerii unei limite de separaie nete$ se
utilizeaz o prism suplimentar care se poate
roti cu a-utorul unui dispoziti" situat lateral,
acest dispoziti" numindu-se icompensatorj. .u
a-utorul lunetei se poate citi direct indicele de
refracie al su*stanei studiate, dar i
concentraia procentual.
C:
Fig. D./. !spectele privind punerea la punct 5a) *i
citirea indicilor de refrac"ie 5b) pentru
refractometrul !bbe.
.ali*rarea odat fcut, se poate proceda la msurtorile propriu zise, determin&nd
pentru diferite lichide *iologice at&t indicele de refracie #cu precizie de patru
zecimale$ c&t i concentraia procentual. 'ac msurtoarea se face la temperaturi
mai mari sau mai mici de 20d. tre*uie fcut o corecie a rezultatului. 0n ta*elele
urmtoare sunt trecute coreciile care tre*uie fcute !n funcie de temperatur i
c&te"a "alori ale indicelui de refracie pentru unele su*stane de referin.
0n figura alturat sunt prezentate dou tipuri de
refractometre porta*ile care permit msurtori
rapide i uoare, ideale pentru determinarea
concentraiei procentuale !n scala Ori%. Scala de
msurare Ori% arat concentraia procentual a
unor su*stane solide dizol"ate !n ap, fiind
cali*rat la cantitatea de zahr #trestie de zahr$
!n grame, coninut !n 100g de ap. 'eci c&nd
se msoar o soluie care conine zahr, scala
Ori% indic e%act concentraia real.
CC
.alcule i prezentarea rezultatelor
Edat citite "alorile indicelui de refracie i ale concentraiei, cu a-utorul formulelor
anterioare se calculeaz refracia molecular i refracia specific pentru fiecare
pro*. 0n cazul soluiilor proteice, concentraia se "a determina din ta*elele puse la
dispoziie. Dezultatele se trec !n ta*elul urmtor,
Nr.
sol.
& .oncentraia
proteine serice
d #Tg;m
:
$ Defracia
specific )
.
Defracia
molecular )
m
C5
C. DETERMINAREA CONCENTRAIILOR SOLUIILOR OPTIC
ACTI#E CU POLARIMETRUL
N1234&3 (51)5(3!5
.onform legilor electro-magnetismului o pertur*aie electromagnetic aprut
!ntr-o regiune a spaiului de"ine iz"orul altor pertur*aii de aceeai natur !n
poriunile !n"ecinate !n spaiu - apare astfel o und electromagnetic care se "a
propaga cu "iteza luminii.
Begile generale ale micrii ondulatorii se refer !n aceeai msur at&t la undele
longitudinale c&t i la cele trans"ersale. ?i*raiile longitudinale sunt simetrice fa de
direcia de propagare, adic aciunea lor asupra unui aparat receptor oarecare nu se
schim* dac acest aparat este rotit !n -urul direciei de propagare. 0n cadrul undelor
trans"ersale condiiile de aciune ale undei asupra aparatului pot fi diferite, dup cum
"i*raiile trans"ersale sunt surprinse !ntr-un plan sau !ntr-altul, care trece prin
direcia de propagare.
'in teoria electromagnetic a luminii rezult ca undele luminoase sunt
trans"ersale. 0ntr-ade"r, toate legile electromagnetismului duc la concluzia c
"ariaia !n timp a intensitii c&mpului electric

/
este !nsoit de apariia unui c&mp
magnetic-alternati"

X
, orientate perpendicular unul !n raport cu cellalt.
=n asemenea c&mp electromagnetic alternati" nu rm&ne fi% !n spaiu, ci se
propag cu "iteza luminii de-a lungul unei linii perpendiculare pe "ectorii

/
i

X
,
gener&nd unde electromagnetice, unde de lumin. 0n felul acesta cei trei "ectori

X
,

/
i "iteza de propagare

"
, sunt perpendiculari !ntre ei, cu alte cu"inte direciile
"ectorilor

/
i

X
sunt perpediculare pe direcia de propagare, adic unda
electromagnetic este trans"ersal. 0n fiecare caz dat e%ist o anumit orientare i prin
urmare raza luminoas nu reprezint a%a de simetrie a undelor electromagnetice. E
asemenea simetrie este caracteristic undelor trans"ersale. ?om !nelege prin lumina
natural acea lumin !n care "om !nt&lni toate orientrile posi*ile ale "ectorului

/

# i prin urmare i ale lui

X
$.
C6
Bumina !n care

/
, la fel i

X
!i pstreaz o singur direcie, o "om numi lumina
polarizat. )lanul care trece prin direcia de propagare i care cuprinde "ectorul
electric, se numete plan de "i*raie al luminii polarizate, iar planul !n care se gsete
"ectorul magnetic i direcia de propagare se numete plan de polarizaie.
Fig. >.1. &lanurile de vibra"ie *i de polari$a"ie in ca$ul luminii polari$ate.
+enomenul de polarizare al luminii, adic selecionarea undelor de lumin cu o
anumit orientare a "ectorului electric /, are loc prin refle%ia sau refracia luminii la
suprafaa de separare a doi dielectrici izotropi sau prin du*la refracie c&nd lumina
trece printr-un cristal anizotrop. =n sistem este izotrop dac toate proprietile sale
sunt identice dup oricare din direciile spaiului, iar un sistem "a fi anizotrop dac
proprietile lui depind de direcia dup care are loc fenomenul.
Noi "om studia du*la refracie #sau *irefringena$ ce are loc la trecerea luminii
printr-un cristal de spat de Aslanda #.a.E
:
$ care cristalizeaz !n sistemul rom*oedric.
'ac pe un asemenea cristal cade un fascicul de lumin, dup refracie el "a da
natere la dou fascicule, a"&nd direcii diferite.
.hiar dac unghiul de inciden este nul, fascicolul refractat este du*lu. Daza care
se propag !n continuarea fascicolului incident se numete raza ordinar iar cea de a
doua, raza e%traordinar. 'ac studiem cele doua raze emergente constatm c
am*ele sunt polarizate, i anume !n planuri perpendiculare !ntre ele.
C7
C.1. M5(1"5 18(3!5 !a)5 4(3*395a9@ *4m3&a 81*a)39a(@
Ra"3a23a 8*a& A3 !3)!4*a) 81*a)39a(@
Dadiaia electromagnetic reprezint o und ai crei "ectori electric #E$ i
magnetic #H$ oscileaz perpendicular pe direcia de propagare i sunt orientai
reciproc perpendicular. +rec"ena oscilaiei, , reprezint numrul de oscilaii pe
secund. Gumina nepolari$at sau natural conine cuante ai cror "ectori au

H
v
E
v
E
+ig.,.2. -scila"iile vectorului electric )n ca$ul
luminii plan8polari$ate 5sus) *i circular
polari$ate 5:os)
C9
+ig.,.3 &olari$area luminii prin spat de HslandaC cele
dou prisme sunt lipite cu balsam de Canada' ansamblul
constituind un NHC-G ;-8;a$a ordinar ;E8;a$a
e@traordinar polari$at )n planul figurii.
orientrile distri*uite aleator, nee%ist&nd un mod pri"ilegiat de oscilaie. Gumina
plan8polari$at este cea !n care "ectorul electric, respecti" magnetic, oscileaz
fiecare doar !ntr-un singur plan.
Bumina circular polarizat are caracteristic faptul c "ectorul electric, respecti"
magnetic, rm&n constani !n modul dar descriu fiecare o traiectorie elicoidal
#+ig.5$, cu rotaii pe secund. 'up sensul !n care "&rful "ectorului parcurge elicea
#atunci c&nd pri"im spre surs$, lumina poate fi circular polarizat spre st&nga #sens
trigonometric sau antiorar$ ori spre dreapta #sens antitrigonometric sau orar$.
Bumina plan-polarizat poate fi considerat ca fiind rezultatul compunerii
"ectoriale a dou unde coerente, cu aceeai amplitudine, circular-polarizate una spre
st&nga i una spre dreapta.
Im81)(a&2a .(4"33*1) B& *4m3&@ 81*a)39a(@
Singura interac"iune fi$ic care depinde e@plicit de asimetria structurii moleculelor
este interac"iunea cu radia"ia polari$at. 1simetria structurii tre*uie !neleas !n sens
general, aici intr&nd, asimetria distribu"iei de sarcin #dipolii electrici permaneni$Z
asimetria )n dislocrile sarcinilor sub influen"a c#mpului electric e@terior
#polariza*ilitate asimetric$Z asimetria )n mi*carea electronilor pe orbitalii de
valen" #3atomi asimetrici4$Z etc.
0n plus, fa de studiile !n lumin nepolarizat, interac"iunea luminii polari$ate cu
moleculele ofer informa"ii de natur geometric #orientare, distribu"ie, ordonare,
suscesiune$ asupra unor legturi sau $one din molecule.
C.2. A.1)23a *4m3&33 81*a)39a(5
.a !n orice metod de spectroscopie de a*sor*ie, lungimile de und alese se afl
)n domeniile ben$ilor de absorb"ie ale legturilor.
0n cazul luminii polarizate, interaciunea "ectorului electric "a depinde de
orientarea dipolilor a*sor*ani i de geometria or*italilor pe care sunt distri*uii
electronii !n -urul atomilor. 1*sor*ia luminii polarizate are particulariti e%ploatate
C9
de tehnicile de dicroism linear 8 )n ca$ul utili$rii luminii plan polari$ate i dicroism
circular 8 )n ca$ul celui circular polari$ate.
C.2.1. D3!)13.m4* *3&5a) GDLH repre$int fenomenul prin care o prob strbtut
de o radia"ie policromatic linear polari$at )*i sc%imb culoarea odat cu rotirea
planului de polari$are. /l se datorete a*sor*iei unor radiaii cu lungimi de und
diferite, dac planul luminii polarizate !i schim* orientarea fa moleculele aezate
ordonat.
&entru punerea )n eviden" a DL este nevoie ca moleculele din prob s fie
aran:ate )n acela*i fel. 1ran-amentul ordonat este aproape perfect !n cristale, dar
o*inerea acestora, !n cazul macromoleculelor, nu este o sarcin uoar. 0n dielectrici,
o orientare *un poate fi o*inut cu a-utorul c&mpului electric, dac moleculele au
momente dipolare. Dezult o aran-are mulumitoare a macromoleculelor fi*rilare sau
alungite !n lichide !n curgere sau prin perierea !ntr-o singur direcie a unei soluii
"&scoase, p&n se usuc.
/%istena dicroismului linear, i mrimea lui, dac moleculele sunt orientate
preponderent cu dimensiunea mare !n lungul unei a%e, notate cu %, se e%prim prin
"aloarea raportului dicroic, d.
"
E E
E E
II
II
=

unde E
II
este e%tincia pro*ei c&nd planul luminii polarizate este paralel cu a%a %, iar
E

este e%tincia gsit c&nd planul luminii poalarizate este perpendicular pe a%a %.
?alorile diferite de zero ale raportului dicroic semnaleaz e@isten"a unor asimetrii
moleculare, iar graficului d#$ poate furniza date asupra naturii acestor asimetrii
#gruprile, legturile sau conformaiile ce o produc$.
DL este utili$at curent )n scopul stabilirii orientrilor diferitelor legturi din
structura moleculelor. 0n acest fel s-au putut descifra orientrile legturilor de
hidrogen !n structurile ; heli% #paralel cu a%ul lanului polipeptidic$ i ; foaie
plisat #perpendicular pe lan$.
50
DL poate fi o*ser"at i !n =?, pentru lumina polarizat a"&nd din *enzile de
a*sor*ie ale du*lelor legturi con-ugate ale aminoacizilor aromatici sau ale *azelor
azotate. 1stfel, poate fi determinat orientarea planurilor *azelor azotate fa de a%ele
elicilor du*le ale acizilor nucleici.
C.2.2. D3!)13.m4* !3)!4*a) GDCH este fenomenul prin care radia"iile
monocromatice, circular polari$ate )n sensuri opuse, sunt absorbite diferit de ctre
moleculele substan"ei.
DC, la o lungime de und dat, se e"alueaz, cel mai simplu, prin diferena dintre
e%tinciile unei pro*e msurate pentru lumina circular polarizat spre st&nga #E
L
$ i
spre dreapta #E
RH
,
EG$ J E
L
K E
R
/%primarea se poate face i pe *aze molare, !n funcie de coeficienii molari de
e%tincie,
#$ J
L
K
R
#(
81
cm
81
$
+enomenul de a*sor*ie !n =? - ?AS se datorete e%citrii electronilor. 0n cazul
structurilor asimetrice, ei oscileaz pe traiectorii elicoidale. 1*sor*ia !n "ecintatea
lungimii de und de rezonan #
1
$ "a fi alta dac sensul elicii traiectoriei este acelai

polimer
!nalt
dimer
AMP #monomer$
#nm$ 2CD 2ED 2<D
K1?
K1D
K?

1?
1D
?
D
F3,. C.<. 'icroismul circular la AMP.
51
cu cel al elicii radiaiei considerat !n sensul de propagare
1
, sau !n sens contrar. 'e
aceea =& se manifest intens )n domeniile ben$ilor tran$i"iilor electronice. 0n funcie
de lungimile de und la care II are "alori ma%ime se poate studia energetica
legturilor, iar graficul lui #$ d informaii asupra asimetriei distribu"iei
structurilor ce le conin.
+iecare *and de DC este sensi*il at&t la strucura macromoleculelor, c&t i la toi
factorii care interacioneaz cu tranziiile electronilor din legturi. #+ig. 6$
C.0. R1(3)5a 8*a&4*43 *4m3&33 81*a)39a(5 este rezultatul 3acti"itii optice4 a unor
su*stane care au molecule asimetrice.
!ctivitatea optic se studia$, de obicei, )n domenii spectrale )ndeprtate de
ben$ile de absor"ie ale substan"elor. =eci ea nu se datore*te absorb"iei luminii ci se
e@plic prin vite$ele de propagare diferit a radia"iilor circular polari$ate )n sensuri
opuse.
1simetria molecular cea mai rsp&ndit este cea datorit atomilor de car*on
asimetrici. 0n cazul macromoleculelor, asimetria se poate datora i structurilor
secundare #elici rotite spre dreapta sau st&nga$ sau teriare, c&nd radicali simetrici se
plaseaz !n medii asimetrice - cu c&mpuri locale intense.
;otirea planului luminii polari$ate apare ca urmare a faptului c, )n $onele
asimetrice, electronii e@ecut mi*cri pe traiectorii elicodale ce pot fi rsucite - fie
spre st#nga, fie spre dreapta. .onsider&nd c lumina plan-polarizat este compus
din dou componente circular polarizate !n sensuri opuse, propagarea uneia "a fi
fa"orizat fa de cealalt. ?itezele celor dou componente !ntr-un astfel de mediu
"or fi inegale i, la ieire, cei doi "ectori electrici "or a"ea !nt&rzieri diferite. 0n final,
rezultanta compunerii lor "a fi rotit fa de poziia ce o a"ea la intrarea !n mediu.
1cti"itatea optic a polimerilor difer de cea a monomerilor din care pro"in i
este posi*il ca un polimer, datorit structurii sale, s ai* acti"itate optic fr a
conine momomeri optic acti"i.
C.0.1. D3.85).3a 18(3!@ )1(a(1)35 GDORH este fenomenul de dependen" a
ung%iului de rota"ie specific []G$, de lungimea de und, , a radia"iei plan8
1
re*uie notat c sensul rotirii elicii luminii circular polarizate, luat !n sensul de propagare, este in"ers celui
considerat uzual, adic atunci c&nd pri"im spre surs.
52
polari$ate. .u alte cu"inte, dac un fascicol de lumin policromatic, polarizat,
str*ate o pro*, componentele monocromatice ale fascicolului le "om gsi rotite
fiecare cu un alt unghi #dispersate rotator$.
/fectele rotatorii se manifest p&n departe de lungimile de und

ale *enzilor
de a*sor*ie. 'eci acolo unde a*sor*ia luminii i DC sunt a*sente.
>raficele DOR, ca i cele DC> depind de asimetria local a $onelor )n care se
afl electronii ce pot e@ecuta tran$i"ii. Scopul trasrii lor este de a identifica i
e%plora astfel de zone, interaciunile dintre ele, sau suscepti*ilitatea lor la factorii de
mediu.
P)3&!3834* *4!)@)33:
5:
.u a-utorul luminii polarizate se pot determina rapid i destul de e%act, !n la*oratorul
clinic, concentraiile unor soluii ale cror su*stane au proprietatea de a roti planul de
polarizare al luminii. Su*stanele care au aceast proprietate se numesc optic8active i
se !mpart, !n fucie de sensul !n care rotesc planul luminii polarizate, !n, ile"ogirej,
cele care rotesc planul luminii polarizate !nspre st&nga, se noteaz cu semnul
minusZide%trogirej, cele care-l rotesc
!nspe dreapta, se noteaz cu semnul
plus.
)roprietatea aceasta de a roti planul luminii polarizate se datorete structurii
asimetrice a su*stanelor organice de o*icei, conin&nd unul sau mai muli atomi de
car*on aezai asimetric #un atom de car*on cu cele patru "alente satisfcute de patru
radicali diferii$.
0n cazul soluiilor preparate cu a-utorul unei su*stane optic acti"e, unghiul

cu
care "a fi rotit planul luminii polarizate "a depinde de urmtorii factori, de
concentraia soluiei,C deci de densitatea d a soluiei, de grosimea stratului de lichid
str*tut de lumina polarizat @#dm$, de lungimea de und a luminii utilizate, precum
i de temperatura soluiei. Bumina polarizat se o*ine cu a-utorul unui cristal
anizotrop care prezint fenomenul de *irefrigen.

ghem haotic
heli%
foaie plisata
#nm$ 2<D 22D 2DD
K
[]
L
D
F3,.C.<.1. 'ispersia optica rotatorie la poli8B8
li$ina.
5C
otodat, unghiul

cu care este rotit planul de polarizare mai depinde i de natura

su*stanei componente a soluiei, caracterizat cu a-utorul mrimii F

G care se mai
numete iunghi de rotaie specificj.
'eoarece rotaia specific "ariaz cu temperatura i cu lungimea de und a
luminii, s-a con"enit ca s se standardizeze pentru lumina gal*en a sodiului i pentru
temperatura V20
<
., aceast "aloare standard not&ndu-se cu F

G
20
Na
. 'eci o soluie
"a roti planul de polarizare al luminii cu unghiul

i care are "aloarea,

@
100
20
G F c @ d
Na

formula care permite aflarea concentraiei soluiei studiate.
A8a)a(4)@
1paratul cu a-utorul cruia se determin unghiul cu care este rotit planul luminii
polarizate se numete polarimetru i este compus, !n principiu, din urmtoarele pri,
o surs de lumin S, un nicol polarizator N), un tu* !n care se pune soluia de
analizat, un nicol analizator N1 mo*il, care se poate roti la dreapta sau la st&nga
#corespunztor su*stanelor de%trogire sau le"ogire$ i care este cuplat la un
dispoziti" mecanic de citire a unghiului

pre"zut cu un "ernier circular sau ocular

', !n care o*ser"atorului !i apare c&mpul ocular .E ce are o zon "ertical central
n.. Nicolii sunt astfel construii !nc&t raza ordinar DE care apare !n urma
fenomenului de *irefrigen s se reflecte total pe suprafaa ce separ prismele
nicolului.
F3,.C.E Sc%ema polarimetrului.
55
+ig. ,.-. .olarimetrul .olaris 8 pri componente,
1. Ecular
2. Bupa pentru citirea "alorii unghiului de rotaie
:. 5uru* de control
C. 5uru* pentru focalizare.
5. Scala i "ernierul pentru citirea unghiului de rotaie
6. .ompartiment !n care se introduce tu*ul cu pro*a
7. +iltru de sticl
9. Bampa de sodium
9. .omutator de pornire 8 oprire.
56
M1" "5 *4!)4:
0n lucrarea de fa "om studia concentraia !n glucoz a unor soluii dup formula
urmtoare,
.@
c @ d
Na

20
G F
100

!n ^
)entru msurarea unghiului J se procedez astfel,
Se umple tu*ul cu ap distilat astfel !nc&t s nu conin *ule de aer i se terg
ferestrele de sticl de la capetele tu*ului pentru ca imaginea s se "ad !n *une
condiii.
Se introduce apoi tu*ul !n polarimetru i se rotete nicolul analizor cu a-utorul
uru*ului micrometric p&n ce zona central n. apare egal !ntunecat cu cele dou
c&mpuri laterale. 'eci se lucreaz !n condiiile e%tinciei ma%ime ce se o*ine atunci
c&nd cei doi nicoli ai polarimetrului sunt aezai i!n crucej.
Se citete unghiul iniial, notat cu

, cu o precizie de 0,05
<
utiliz&nd "ernierul cu
care este pre"zut aparatul.
Se !nlocuiete apa din tu* cu soluia de analizat, se realizeaz prin rotirea uru*ului
micrometric o iluminare uniform a c&mpului .E. Se citete noul unghi indicat de
aparat, notat cu

.
E*ser"aie. Eperaiile de egalizare a c&mpului i de citire a unghiului se realizeaz
at&t pentru soluie c&t i pentru ap de cel puin 5ori, !n calcule lu&ndu-se media
"alorilor unghiurilor, notate

.
57
Fig.>.>.a) Bersul ra$elor de lumina prin polarimetru c#nd nicolii sunt a*e$a"i K)n cruceL.
b) !spectul c#mpului luminos observat prin polarimetru )n fuc"ie de po$i"ia nicolului anali$ator )n
raport cu cel polari$ator.
59
a.
*. Nicoli paraleli Nicoli !n cruce
@ + =

1
% @ 0,:0

@ 1,:0

Fig. >.M. Citirea ung%iului cu a:utorul

vernierului circular.
.alcule i prezentarea rezultatelor
.unosc&nd "alorile pentru unghiurile medii

, se calculeaz unghiul cu care

rotete soluia planul luminii polarizate astfel,
=
1poi, se calculeaz concentraia procentual a soluiei, care !n cazul de fa este
glucoza pentu care F

G
20
Na
@ 52.9
<
.
Ba efectuarea calculelor se "a ine cont c !n formula de mai sus, densitatea d este
msurat !n g;cm
:
iar lungimea stratului de soluie #a tu*ului ce o conine$ , @, este
e%primat !n decimetri #dm$.
Dezultatele o*inute se trec !n ta*elul urmtor,
Soluia
F

G
20
Na
@
#dm$
d
#g;cm
:
$

.
#g^$
>lucoza 52.9 1
M. MICROSCOPIA OPTIC
59
M.1. S(4"34* m3!)1.!184*43 18(3!.
(icroscopul optic este utilizat at&t !n domeniul cercetrilor medicale c&t i !n
analize uzuale de la*orator. 1cest instrument optic poate da imagini clare ale unor
formaiuni celulare cu dimensiuni p&n la apro%imati" 0,15 bm. 'eterminarea acestor
dimensiuni are o importan deose*it !n e%plorrile clinice i de la*orator. .u
a-utorul microscopului optic se pot face analize ale lichidului cefalorahidian #B.D$, a
urinii, a s&ngelui etc.
E@empluC 'eparta-&nd eritrocitele !n funcie de diametrul lor mediu, se o*ine cur*a
)rince-_ones pentru s&nge nomal, iar comparati" cu acesta se pot depista diferite
afeciuni.
Anstrumentele optice dau imagini clare, !n care se pot distinge amnunte ce nu
pot fi o*ser"ate cu ochiul li*er.
'in punct de "edere tehnic un instrument optic este un asam*lu de lentile,
oglinzi i diafragme, a%ele optice ale prismelor tre*uind s coincid cu a%ul
geometric al instrumentului. 0n funcie de natura imaginii, instrumentele optice se
!mpart !n,
-instrumente optice cu imagini reale cum sunt ochiul, aparatul fotografic,
aparatul de protecieZ
-instrumente optice care dau imagini virtuale i sunt folosite pentru
e%aminarea direct a o*iecti"elorZ astfel de instrumente sunt, luneta, microscopul
optic, lupa.
(icroscopul optic este destinat o*ser"rii unor pro*e #frotiuri$ a cror
dimensiuni pot atinge 0,15bm. 1cest instrument are trei pri principale, mecanic,
optic i dispoziti" de iluminare.
M.2. C1m81&5&(5*5 4&43 m3!)1.!18 !4 *4m3&@ ()a&.m3.@
)rincipiul care st la *aza construciei oricrui microscop !l constituie
proprietatea lentilelor optice de a produce refracia razelor luminoase care le
tra"erseaz, form&nd astfel o imagine real sau "irtual. Ba microscopul optic,
o*iecti"ul formeaz o imagine mrit, real i in"ersat specimenului. Ecularul preia
60
aceast imagine i o transform !ntr-o imagine mrit, "irtual i dreapt !n raport cu
prima. 1stfel, imaginea final dat de microscop este "irtual, rsturnat i mrit.
M.0.C1m81&5&(5*5 m5!a&3!5 a*5 m3!)1.!184*43
(icroscoapele optice moderne sunt alctuite dintr-o parte mecanic ce
cuprinde, piciorul microscopului, msua sau platina cu sistemele ei de deplasare a
preparatului i tu*ul microscopului, care poate fi deplasat !n plan "ertical cu a-utorul
unor angrena-e.
.iciorul sau tal#a microscopului, este o component care confer sta*ilitate
aparatului. Ba microscoapele moderne talpa microscopului se afl !ncorporat !n
sursa de lumin.
&oloana sau m/nerul0 microscopul se articuleaz fi% sau mo*il cu piciorul.
1su(a sau #latina, perpendicular pe coloan, ser"ete ca suport pentru
preparat. 1cesta din urm se imo*ilizeaz pe platin prin dou lame metalice numite
vale"i sau cavaleri. )latina este pre"zut cu un dispoziti" special numit car mo*il
care, acionat de dou uru*uri coa%iale, permite deplasarea fin a preparatului.
2ubul microsco#ului are la partea superioar ocularele, iar la partea
inferioar, re"ol"erul cu o*iecti"ele. Ba microscoapele moderne, !n tu*ul optic se afl
interpus lupa *inocular, care conine un sistem de prisme pentru distri*uirea
imaginii la cele dou oculare.
)evolverul, format din dou discuri metalice suprapuse, cel inferior mo*il,
aduce prin rotirea o*iecti"ului dorit !n a%ul optic.
3is#o%itivul de punere la punct a imaginii este alctuit din "iza macrometric
care se folosete pentru prinderea grosier a imaginiiZ iar "iza micrometric 8 prin
micri fine, permite clasificarea imaginii.
61
?izorul
E*iecti"e
Outon reglare fina imagine
Outon pornit; oprit
Suportul
'iafragma
Oaza de susinere
.orpul "izorului
E*iecti"e finale
Suport prindere cu lamele
'ispoziti" fi%are imagine
Outon reglare imagine
Erificiu # deschidere $
Ora
Sursa de lumina
Fig.M./. Bicroscopul optic
M.<.C1m81&5&(5*5 18(3!5
a*5 m3!)1.!184*43
1ceste componente
cuprind piese de calitatea
crora depind performanele ce pot fi o*inute !n e%aminarea unui preparat. 1ceast
component este alctuit din oculare, o*iecti"e i sistemul de iluminare.
4biectivele sunt constituite dintr-un sistem de lentile care sunt destinate s
funcioneze !n imediata "ecintate a preparatului. Singura lentil care formeaz
imaginea se afl la partea inferioar a o*iecti"ului i se numete lentila *rontal.
'istana dintre ea i suprafaa preparatului reprezint distana frontal i este cu at&t
mai mic cu c&t o*iecti"ul folosit are o putere mai mare de mrire. .elelalte lentile
din o*iecti" au rolul de a corecta a*eraiile optice produse de lentila frontal. 0n
general, o*iecti"ele care se folosesc cel mai frec"ent la microscoape au puterea de
mrire de, EN> 1DN> 2DN> <DN> EDN> MDN> 1DDN, aceasta fiind gra"at pe suprafaa
cilindrului. E*iecti"ele au putere de mrire mai mic #p&n la <DN$ se numesc
o*iecti"e 3uscate4 pentru ca mediul interpus !ntre lentila frontal i preparat este
aerul. E*iecti"ele cu putere mare de mrire #EDN> MDN> 1DDNH, cu care se lucreaz
foarte aproape de preparat, se numesc o*iecti"e cu 3imersie4 deoarece spaiul dintre
62
lentila frontal i preparat este ocupat de un lichid #ulei de cedru, glicerin, uleiul de
parafin$ !n care este imersat "&rful apropiat cu al sticlei port preparat i, prin
folosirea lor, se elimin !n mare masur refracia !n afara suprafeei lentilei frontale a
razelor de lumin care ilumineaz preparatul. .a urmare imaginea o*ser"at "a
c&tiga !n luminozitate i claritate.
Fig.M.2.
-biective *i
oculare.
4cularele se afl dispuse la partea superioar a lupei *inocular, fiind formate
fiecare, din dou lentile plan con"e%e ce formeaz o imagine mrit, dreapta i
"irtual. )entru o*ser"are se folosesc de o*icei oculare cu putere mic de mrire
#7%,10%$, deoarece rolul lor este de a distinge detaliile fine date de o*iecti" i mai
puin de a mri aceast imagine.
>radul de mrire a imaginii finale date de microscop poate fi modificat prin
schim*area o*iecti"elor i ocularelor i se calculeaz fc&nd produsul dintre puterea
de mrire a ocularului i a o*iecti"ului.
+ormula pentru grosisment i putere de separare
56em#lu: ocular 176; obiectiv 276; marire: 27 8 17=277.
6:
1ceast "aloare d puterea de mrire total sau grosismentul microscopului.
Sistemul de iluminare, la microscoapele moderne, se afl !ncorporat !n talp i
este reprezentat de un *ec de E# sau 12#. ot aici se afl i un sistem special pentru
controlul flu%ului !n a%ul flu%ului de lumin. Bumina este orientat !n a%ul optic al
microscopului de ctre o oglind plan dispus o*lic !n dreptul unui orificiu care se
afl su* platin. 0nclinaia oglinzii poate fi reglat cu dou uru*uri. Su* platin,
prins de coloana microscopului se afl condensorul, care are rolul de a concentra
razele de lumin !ntr-un focar ce coincide cu planul preparatului. =nghiul luminii
care intr !n condensor se regleaz cu a-utorul diafragmei iris, dispus !n montura
condensorului, su* lentile. .ondensorul poate fi ridicat sau co*or&t, cu a-utorul unei
"ize dispus su* platin.
M.?.C4m .5 8)3&"5 3ma,3&5a *a 4& m3!)1.!18 18(3! 13A&43( O
)rinderea imaginii i o*ser"area sa la un microscop optic o*inuit se face
relati" simplu i nu necesit cunotine speciale de mecanic fin sau de alt natur.
)entru e"itarea unor eecuri, inerente la un !nceptor, precum i a o*ine o imagine
corect i apropiat calitati" de performanele ma%ime ale aparatului, toate mane"rele
tre*uie s fie e%ecutate !ntr-o anumit ordine,
1. Se aeaz lama cu preparatul de cercetat pe platin i se prinde cu "aleii.
/ste foarte important ca lama s fie aezat !n aa fel !nc&t preparatul s fie orientat !n
sus. 0n caz contrar nu se "a putea prinde imaginea cu o*iecti"e mai mari de C0%.
2. )ri"ind lateral se aduce preparatul !n a%ul optic prin mane"ra carului mo*il.
1%ul optic coincide cu punctul de lumin dat de condensatorul ridicat !n preala*il !n
poziia ma%im. 'up efectuarea acestei operaii, condensatorul se co*oar la o
poziie intermediar.
0.Se aduce o*iecti"ul 10% !n a%ul optic al microscopului prin rotirea
re"ol"erului. .&nd o*iecti"ul a-unge !n a%, rotirea re"ol"erului !nt&mpin o uoar
rezisten. /ste *ine ca !ntotdeauna o*ser"area unui preparat s !nceap prin folosirea
o*iecti"ului 10%, deoarece acesta d o imagine de ansam*lu a preparatului, permi&nd
totodat selectarea unei zone din preparat care urmeaz a fi o*ser"at apoi de mriri
mai mari.
6C
<. 'ei imaginea nu a fost !nc prins, se poate sta*ili !n aceast etap, distana
pupilar prin mane"rarea lupei *inocular.
?. )ri"ind lateral, se co*oar o*iecti"ul p&n !n poziia inferioar. 1ceasta se afl
la c&i"a mm de suprafaa preparatului. )ri"ind apoi !n microscop, se ridic o*iecti"ul
cu "iza macrometric p&n se prinde imaginea. 1poi, claritatea imaginii se regleaz
prin mane"ra "izei micrometrice, iar gradul de luminozitate al c&mpului se regleaz
prin ridicarea sau co*or&rea condensorului.
E. )entru o*ser"area unor detalii ale preparatului, se introduce !n a%ul optic un
o*iecti" cu puterea de mrire mai mare. )entru fiecare o*iecti" imaginea se prinde
prin ridicarea acestuia fa de preparat pentru a e"ita lo"irea accidental a lentilei
frontale de lama port preparat.
0n cazul folosirii unui o*iecti" cu imersie, se pune pe lamela care acoper
preparatul o pictur de ulei de imersie i se co*oar apoi o*iecti"ul p&n ce "&rful
su atinge pictura. 1ceast operaie se face pri"ind lateral. Amaginea se prinde apoi,
pri"ind cu atenie !n microscop, prin co*or&rea foarte fin a o*iecti"ului cu "iza
macrometric. Edat o*inut imaginea, claritatea se menine prin mane"ra continu
a "izei micrometrice. )entru a a"ea o iluminare corespunztoare, condensorul "a fi
ridicat la ma%imum.
F. 'up !ncheierea o*ser"rii, microscopul se las !n repaus cu o*iecti"ul 10%
!n a%ul optic i se acoper pentru a fi ferit de praf. Se "erific dac s-a efectuat
deconectarea de la reeaua de curent electric.
0n cazul !ntre*uinrii o*iecti"ului cu imersie, acesta se terge cu uleiul de
imersie prin trecerea degetului deasupra lentilei frontale. )eriodic acest o*iecti" se
cur cu o *atist de finet umezit !ntr-o soluie de alcool etilic-aceton #1:1$. Se "a
e"ita folosirea !n acest scop a hidrocar*urilor #%ilen, *enzen, toluen$ pentru ca aceasta
"a dizol"a rina special !n care este montat lentila frontal a o*iecti"ului.
M1"4* "5 *4!)4:
9.:. a) E(a*1&a)5a )3,*53 ,)a"a(5 a 1!4*a)4*43. (icroscopul este dotat cu o reea
a-uttoare micrometric gradat astfel !nc&t pe poriunea "izi*il cu ochiul li*er
gradaiile reprezint 0,1 respecti" 0,5 mm. )e poriunea central rigla este di"izat !n
65
zecimi de mm. /talonarea riglei ocularului se face !n felul urmtor, se "izualizeaz
concomitent at&t reeaua micrometric de pe lam c&t i rigla micrometric a
ocularului astfel !nc&t s se poat numra c&te di"iziuni de pe reea corespund unei
singure di"iziuni de pe rigl. 1poi cu o regul de trei simpl se poate calcula care
este fraciunea dintr-un mm care corespunde unei di"iziuni de pe rigla ocularului.
9.:. b) D5(5)m3&a)5a "3m5&.34&33 4&1) 8)58a)a(5. Edat ce a fost fcut
etalonarea riglei, reeaua micrometric a-uttoare poate fi !nlturat. 0n locul ei se
fi%eaz pe msua microscopului di"erse preparate. )rima dat se !ncearc
"izualizarea unui fir de pr, fi%at cu o lamel pe o lam curat. Edat pus la punct
imaginea, rigla ocularului se suprapune peste grosimea firului de pr numr&ndu-se
c&te di"iziuni corespund acestei dimensiuni. 1poi, acest numr de di"iziuni se
!nmulete cu "aloarea aflat anterior prin regula de trei simpl, o*in&ndu-se
dimensiunea !n mm a grosimii firului de pr. 1poi se "izualizeaz alte preparate puse
la dispoziie, fi%ate pe lame, ou de parazit, preparate histologice.
/lementul
Studiat
'i"iziuni
coresp.element.
reelei
?aloarea unei
di"iziuni
microm.
mm.
'i"iziuni
coresp.dimensi.
preparatului.
'imensiunea
preparatului.

mm
'imensiunea
prepartului medie
mm
Eu de parazit 6,5 0,0:07 :,5
:
C,5
0,1075
0,0921
0,1:91
0,1129
G)1.3.m5&(4*- reprezint raportul dintre tangenta unghiului su* care se "ede
imaginea prin instrument i tangenta unghiului su* care se "ede o*iectul atunci c&nd
este pri"it cu ochiul li*er sau altfel spus, raportul dintre diametrul aparent al imaginii
i cel al o*iectului aezat la distana optim de "edere clar ]-care pentru un ochi
normal are "aloarea 25 cm.


C
.
1
2
&
&
tg
tg
N = = =

sau N= N
ob
N
oc
)uterea separatoare sau de rezoluie , este capacitatea microscopului de a
forma imagini distincte a dou puncte "ecine ale o*iectului. 1ceast mrime, depinde
66
de a*eraiile sferice i de fenomenul de difracie a luminii care tra"erseaz
instrumentul. )utem mri "aloarea l;o prin mrirea lui n' folosind o*ser"area prin
imersie, !n care !ntre E* #de 90m$ i pro* se pune o pictur de ulei de cedru.

u nsin 2
22 , 1
=
unde,
l;o @putere separatoare
p @ lungime de und a radiaiei folosite
n @ indicele de refracie al mediului dintre E* i Ec.
u @ unghiul de apertur, format de razele e%treme.
n
.
sin u @ apertur numeric, este !nscris pe o*iecti" alturi de mrirea sa.
M1"4* "5 *4!)4:
=eterminarea grosismentului *i a coeficientului micrometric.
Bicrometrul obiectiv 8 este o lam de sticl pe care sunt gra"ate 100 de di"iziuni pe
o distan de 1 mm, inter"alul !ntre dou di"iziuni succesi"e este de 0,01mm.
Bicrometrul ocular - are forma unui disc cu diametrul egal cu cel al tu*ului !n care
se introduce. /ste confecionat din sticl pe care sunt gra"ate 100 di"iziuni pe o
lungime de 1 cm, inter"alul dintre dou di"iziuni succesi"e este egal cu 0,1 mm.
)entru determinarea grosismetrului microscopic se procedeaz astfel,
se fi%eaz lama micrometrului o*iecti" pe msua de lucru Z
se introduce teTerul micoscopului !n *ornele transformatorului, iar teTerul
transformatorului !n priza de 220?Z
se regleaz iluminarea cu a-utorul diafragmeiZ
se introduce din mi-locul micrometrului ocular !n dreptul o*iecti"ului cu a-utorul
uru*urilor cu care este pre"zut msua microscopuluiZ
alegem i fi%m o*iecti"ul cel mai mic #10m$Z
se apropie o*iecti"ul de micrometru p&n la distan minim fr a pri"i !n
ocularZ
ridic&nd lent o*iecti"ul se caut imaginea di"iziunilor micrometruluiZ
67
microscopul se pune la punct astfel !nc&t !n c&mp s a"em imaginea am*elor
micrometreZ
se rotete ocularul p&n c&nd cele dou scri sunt paralele i parial suprapuseZ
se mrete contrastul prin ridicarea sau co*or&re condensatorului #cresc&nd
contrastul "a scdea puterea separatoare l;o$Z
se aduce scala gradat a micrometrului o*iecti" astfel !nc&t captul su s
coincid cu cel al micrometrului ocularZ
se compar imaginea micrometrului o*iecti" #mrit de
ob
N
ori$ cu micrometrul
ocular astfel !nc&t & di"iziuni ale micrometrului o*iecti" s corespund la m di"iziuni
ale micrometrului ocular.
0nlocuind "alorile lui m i & !n relaia,

n
m
N
ob
.
10
100
=
Se calculeaz > microscop cu relaia ,
> @
oc ob
N N .
Se efectueaz trei determinri pentru fiecare o*iecti" #10m, 20m , C0m$ rezultatele
trec&ndu-se !n ta*el,
a*elul 1
E*. Nr.deter
.
n m
ob
N
oc
N
Noc

N
>
10m
20m
C0m
)entru determinarea coeficientului micrometric se efectueaz urmtoarele ,
-se suprapune scala micrometrului ocular cea a o*iecti"ului i se citescZ

=
ob
n
numrul de di"iziuni ale micrometrului o*iecti" care se suprapun e%act
peste un numr !ntreg de di"iziuni ale micrometrului ocular.
=
oc
n
numrul de di"iziuni ale micrometrului o*iecti".
-se calculeaz coeficientul micrometric cu formula,
69

$ # 10 . m
n
n
C
oc
ob
B
=
;se mai fac multe com*inaii de oculare i o*iecti"e, iar rezultatele se trec !n ta*elul
2,
a*elul 2
E*iecti" Ecular 5m Ecular 7m Ecular 10m
10m
20m
C0m
M.E. O!+34* ; 4& .3.(5m 18(3! !1m8*5N.
Echiul este pentru organismul uman un analizator cu a-utorul cqruia analizqm
mediul !ncon-urtor. 1nalizatorul "izual este alcqtuit din trei segmente ,
segmentul periferic, reprezentat de ochiul propriu-zis i ane%ele sale, segmentul
intermediar, reprezentat de fi*rele ner"oase care conduc e%citaiile "izuale la creier i
segmentul cortical, situat !n regiunea occipitalq a scoarei creierului.
>lo*ul ocular #ochiul$ are forma unei sfere, care !n partea din faq are aplicatq o altq
poriune sfericq cu razq mai micq, reprezentatq de corneea transparentq. 0n faa
cristalinului se aflq irisul care are forma unei diafragme pre"zut cu o deschidere
numitq pupilq cu dimensiunea "aria*ilq !ntre : i 7mm. 0n calota posterioarq este
situatq retina, o mem*ranq ner"oasq, alctuitq din celule ner"oase, celule de susinere
i celule pigmentare.
69
.elulele ner"oase sunt de 6 tipuri ,
1. +otoreceptoare cu conuri
2. +otoreceptoare cu *astonae
:. Oipolare
C. (ultipolare
5. Erizontale 8 neuroni de asociaie cu dendrite i a%on
6. 1macrine 8 neuroni de asociaie fqrq dendrite cu un a%on lung i foarte ramificat .
.a urmare a suprapunerii acestor tipuri de celule i a sinapselor dintre ele, se pot
diferenia 10 straturi ale retinei. )rimul strat este cel al celulelor pigmentare alcqtuite
din celule care conin pigment melanic. .el de-al doilea este stratul celulelor
fotoreceptoare alctuit din celule ner"oase specializate, care nu se di"id, numite dupq
forma lor, *astonae i conuri. .onurile i *astonaele conin pigmeni "izuali diferii.
.onurile, !n numqr de 5-7 milioane, reprezintq receptorii "ederii diurne, colorate
#percep detalii i culori$. Se gqsesc !n special la ni"elul petei gal*ene #macula lutea$
la distana de 2r5 bm. /%istq : tipuri de conuri, unul pentru perceperea luminii roii,
altul pentru perceperea luminii "erzi i al treilea pentru lumina al*astrq. /le conin
rodopsinq care se descompune !n prezena luminii i se resintetizeazq !n prezena
"itaminei 1.
70
(em*rana limitant e%tern, cel de-al treilea strat, este o reea de prelungiri ale
celulelor gliale, ce !ncon-oar *aza celulelor fotoreceptoare. Stratul granular e%tern
cuprinde corpii neuronali i prelungirile celulelor fotoreceptoare. Stratul ple%iform
e%tern reprezint zona sinaptic dintre celulele fotoreceptoare i neuronii *ipolari.
Stratul granular intern este alctuit din corpii neuronilor *ipolari. Stratul ple%iform
intern este zona sinaptic dintre neuronii *ipolari i neuronii multipolari. Stratul
neuronilor multipolari cuprinde corpul neuronilor multipolari. Stratul fi*relor optice
este format din a%onii neuronilor multipolari. =ltimul strat al retinei, mem*rana
limitant intern delimiteaz retina spre faa sa e%tern. +iecare celul cu con face
sinaps cu un singur neuron *ipolar i acesta cu un singur neuron multipolar. (ai
multe celule cu *astona fac sinaps cu un singur neuron *ipolar, iar mai muli
neuroni *ipolari fac sinaps cu un singur neuron multipolar.
71

Fig.M.A.1.!r%itectura straturilor de celule fotoreceptoare.
Segmentul intermediar sau segmentul de conducere #calea optic$ este format din :
neuroni. )rimii 2 neuroni, senziti"i, sunt reprezentai de protoneuron #*ipolar$,
72
respecti" deutoneuronul #multipolar$ din retin. 1%onii deutoneuronului formeaz
ner"ul optic i tractul optic.
>lo*ul ocular este alctuit dintr-o serie de medii transparente ,
a$ umoarea apoas #n@1,::$, un lichid clar secretat de procesele ciliare fiind drenat
permanent de "enele scleroticii #tunica e%tern- partea posterioar$
*$ cristalinul este o lentil *icon"e% care este acionat de muchiul ciliar care !i
modific raza de cur*ur i odat cu aceasta con"ergena #n s F1,:: Z 1,C1G$
c$ umoarea sticloas #corpul "itros$ este o su*stan gelatinoas situat !n spatele
retinei #n@1,::$.
.apacitatea cristalinului de a-i modifica raza de cur*ur pentru ca s poat fi "zute
clar o*iectele aflate la distane diferite poart numele de acomodare la distan.
)entru acomodare este necesar i corectarea a%elor oculare prin contracia
musculaturii e%trinseci a glo*ului ocular. =n ochi standard #emetrop$ are distanele
o*iect i imagine diferite cu "alorile f
1
@15,7mm i f
2
@2C,Cmm. /%ist deci o
concordan perfect !ntre puterea de con"ergen a mediilor refringente i lungimea
a%ului antero-posterior, ceea ce permite "ederea clar, fr acomodare, a o*iectelor
situate la o distan mai mare de 6m.
Fig.M.A.2. Formarea imaginii in oc%iul emetrop.
7:
'istana minim de "edere clar pentru un ochi standard este de 25cm, iar rezoluia
ochiului #capacitatea de a distinge separat 2 puncte "ecine$ la aceast distan este de
75bm.)entru ca un ochi normal s poat "edea imaginea o*iectului fr efort de
acomodare aceasta tre*uie s se formeze la o distan mai mare de distana minim
de "edere clar de 0,25m- )unct )ro%imum. Adeal ar fi ca imaginea s se formeze la
distana ma%im de 6m- )unct Demotum. 0n cazul !n care puterea de con"ergen a
sistemului dioptric nu concord cu lungimea a%ului antero-posterior, ochiul este
ametrop prezent&nd di"erse defecte optice ,
-miopie
-hipermetropie
-prez*iie
-astigmatism
1. M3183a este un "iciu de refracie care const !n faptul c razele luminoase care "in
paralele de la infinit se !nt&lnesc !ntr-un focar situat !naintea retinei. 1cest "iciu de
refracie se corecteaz cu lentile di"ergente, care !ndeprteaz focarul p&n a-unge pe
retin.
2. H385)m5()183a este un "iciu de refracie caracterizat prin aceea c razele paralele
"enite de la infinit se reunesc !ntr-un focar situat !n spatele retinei. 1cest "iciu de
7C
refracie se corecteaz cu lentile con"ergente, care apropie focarul p&n a-unge pe
retin.
0. P)59323a este un "iciu datorat pierderii elasticitii cristalinului, deci a posi*ilitii
de acomodare a acestuia, care se instaleaz odat cu !naintarea !n "&rst. 1cest "iciu
se corecteaz cu lentile a cror con"ergen "ariaz continuu pe !nlimea lentilei
pentru acomodarea ochiului la diferite distane.
<. A.(3,ma(3.m4* este un defect optic ce se caracterizeaz prin faptul c raza de
cur*ur a cristalinului i mai ales a corneei nu este aceeai !n toate meridianele #nu
este omogen$.Dazele care "in de la infinit nu se !nt&lnesc !ntr-un focar unic, e%ist&nd
focare pentru razele care cad pe meridianele orizontale i focare pentru cele care cad
pe meridianele "erticale. 'efectul se corecteaz prin lentile cilindrice aezate !n aa
fel !nc&t s uniformizeze refracia !n toate meridianele corneei sau cristalinului.
75
)ierderea "ederii se numete cecitate i are cauze multiple. /a se poate datora unei
rupturi a corneei sau unei afeciuni a cristalinului, care de"ine opac i incapa*il s
lase s treac lumina. 0n alte cazuri cecitatea se datoreaz dezlipirii retinei, ca urmare
a unei lo"ituri sau faptului c celulele sale ner"oase nu mai funcioneaz corect.
=nele cazuri de cecitate se datoreaz unor factori e%terni. 'e e%emplu, dac ner"ii
optici sunt lezai, dei se formeaz o imagine corect pe retin, aceasta nu este
transmis la creier. =n traumatism cranian suferit de o persoan poate distruge aria
"izual a creierului, determin&nd or*irea persoanei respecti"e, !n ciuda faptului c
ochii acestuia funcioneaz perfect.
#5"5)5a !)1ma(3!@
Detina conine 2 tipuri de fotoreceptori #receptori "izuali$ , conurile i *astonaele.
Oastonaele sunt mult mai numeroase #1:0 milioane$ i sunt mai sensi*ile dec&t
conurile la intensitatea luminoas Z !ns nu sunt sensi*ile la culoare.
.ele 7 milioane de conuri confer ochiului sensi*ilitatea la culoare. 1cestea sunt
concentrate !n partea central a petei gal*ene, numit fo"ea centralis #diametru
0,:mm$. Se apreciaz c acestea sunt distri*uite ca sensi*ilitate pe culori !n felul
urmtor , 6C ^ sunt conuri 3roii4Z :2 ^ sunt conuri 3"erzi4Z 2 ^ sunt conuri
3al*astre4. .onurile 3"erzi4 i 3roii4 sunt concentrate !n fo"ea centralis, iar cele
3al*astre4 !n e%teriorul acestei regiuni. 'e aici rezult o deose*ire !n modul cum se
disting culorile. 1stfel, percepia o*iectelor al*astre cu intensitate mare este mai sla*
dec&t a celor roii sau "erzi. +aptul c "edem culorile cu un efort compara*il este
atri*uit unui iamplificator !n al*astruj aflat !n cicuitul de prelucrare din creier.
76
Specializarea celor dou tipuri de fotoreceptori din ochi conduce la o mulime de
fenomene aparent ciudate. 'e e%emplu, un cpitan de "as sau un pilot "d mai *ine
noaptea, !n !ntuneric, dac aparatele de pe *ord sunt luminate !n rou. /fortul lor de
acomodare este mai mic, ochiul utiliz&nd tipuri diferite de fotoreceptori pentru
culoarea roie #conurile$ i pentru lumina sla* #*astonaele$. 'in studiile efectuate
asupra percepiei imaginilor colorate !n comparaie cu cele al*-negru s-a e"idenat
faptul c !n imaginile colorate ochiul detecteaz mai uor marginile o*iectelor i
caracteristicile acestora. 0n imaginile al*-negru se pierde informaia coninut !n
lungimea de und a fiecrei culori. 'in numeroase e%perimente efectuate cu diferii
su*ieci, crora li se prezentau imagini colorate diferit i li se cerea s le recunoasc,
s-a a-uns la concluzia c ochiul omenesc poate distinge mii poate chiar milioane de
culori. E caracterisic important a "ederii cromatice este faptul c prin diminuarea
intensitii luminii care se reflect pe un o*iect colorat nu se modific i distri*uia
spectral, adic distri*uia lungimilor de und ale undelor reflectate de o*iect i apoi
percepute de ochi. .reierul primete pentru prelucrare aceleai informaii, care sunt
legate de lungimea de und a culorilor din imagine.
'ac o*iectul este cenuiu, atunci el reflect la fel toate lungimile de und, conurile
de pe pata gal*en sunt toate impresionate la fel i creierul nu reuete s disting
diferitele puncte de pe suprafaa o*iectului. 'ac o*iectul este colorat de e%emplu, in
rou i al*astru, el reflect din lumina incident cu predilecie componenta roie i pe
77
cea al*astr, ceea ce face s fie impresionate doar conurile specializate pentru aceste
culori i creierul reuete s prelucreze uor informaia primit.oate proprietile
"ederii cromatice sunt azi utilizate !n domeniul pu*licitii, !n tele"iziune,
cinematografie, mod etc.
F1(1m5()3a
+otometria se ocup cu msurarea energiei transportat de undele electromagnetice
din domeniul optic. Dadiaiile electromagnetice din domeniul "izi*il dau senzaia de
lumin i !n acelai timp transport energie. 0ntr-un sens mai !ngust, fotometria se
ocup cu msurarea efectului radiaiilor din domeniul "izi*il asupra ochiului
omenesc. 1stfel, se definesc dou categorii de mrimi i uniti de msur ,
fotometrice i energetice. )entru caracterizarea transportului de energie de ctre
lumin se definesc mrimile energetice ,
- flu% de energie radiant
- intensitate energetic
- iluminare energetic
)entru definirea mrimilor energetice tre*uie s definim sursa de lumin
punctiform, care este o surs ce emite !ntr-un mediu omogen i izotrop, cu suprafaa
de und sferic.
F*4N4* "5 5&5),35 )a"3a&(@ P
5
se definete ca energia care str*ate o suprafa
oarecare, normal pe direcia de propagare a razei de lumin, !n unitatea de timp,
adic , t
e
@ Y ; t care are unitatea de msur Nattul.
I&(5&.3(a(5a 5&5),5(3!@ a 4&53 .4).5 84&!(3=1)m5 este flu%ul de energie radiant
emis !n unitatea de unghi solid, adic ,
A
e
@ dte ; du , unde du@ unghiul solid elementar #1$
Antensitatea energetic se msoar !n O/steradian. =nghiul solid este o poriune din
spaiu coninut !ntr-o ca"itate a unei suprafee conice. /l se msoar ca raportul
dintre aria tiat de con pe suprafaa unei sfere cu centrul !n "&rful conului i ptratul
razei sferei. =nghiul solid elementar taie o arie elementar d1 pe suprafaa sferei,
astfel, du @ d1 ; r
2
.
79
=nitatea de msur este steradianul #sr$ definit ca fiind unghiul su* care se "ede din
centrul unei sfere o arie de pe suprafaa sferei egal cu raza la ptrat.
I*4m3&a)5a 5&5),5(3!@ a unei suprafee este egal cu flu%ul de energie radiant care
str*ate unitatea de arie a suprafeei trans"ersale, adic ,
/
e
@ dt
e
; d1
n
#2$
care are unitatea de msur Y ; m
2
.
'ac eliminm flu%ul de energie radiant !ntre relaiile 1$ i 2$ "om o*ine o relaie
!ntre iluminarea energetic a unei suprafee i intensitatea energetic a unei surse
punctiforme su* forma ,
/
e
@ A
e
; r
2
#:$
'ac fasciculul cade su* inciden o*lic, astfel !nc&t a%a conului care delimiteaz
unghiul solid este !nclinat fa de normala la suprafa cu unghiul J, !n relaia #:$
apare proiecia pe direcia normal la suprafa definit de "ersorul &, adic e%presia
se !nmulete cu !1. Q ,
/
e
@ # A
e
; r
2
$Pcos v
79
/fectul luminii din domeniul "izi*il asupra ochiului depinde !n afar de
caracteristicile fizice ale luminii #densitatea de energie, frec"ena$ i de sensi*ilitatea
diferit a ochiului la frec"ene diferite ale luminii. 'in msurtori fotometrice
efectuate s-a constat c ochiul omenesc are sensi*ilitatea ma%im la frec"enele din
mi-locul spectrului "izi*il, adic !n "erde. S-a con"enit s se considere c
sensi*ilitatea ochiului este ma%im pentru p @ 550nm. 1ceasta !nseamn c pentru a
o*ine un anumit efect luminos asupra ochiului, la aceast lungime de und este
necesar cel mai mic flu% de energie radiant. )entru a caracteriza sensi*ilitatea
ochiului la diferite culori se definete .5&.33*3(a(5a .85!()a*@ a 1!+34*43 #eficien
luminoas$ #
R
, care este egal cu raportul dintre flu%ul de energie radiant t
e0
care
produce o anumit senzaie luminoas la p @ 550nm i flu%ul de energie radiant t
e
care produce aceai senzaie luminoas la alt lungime de und p, adic ,

?
p
@ t
e0
; t
e
'ependena de lungimea de und a funciei ?
p
este diferit ziua i noaptea.
'ependena nocturn are un ma%im deplasat spre al*astru. .u a-utorul mrimii ?
p
se
poate trece de la definirea mrimilor fotometrice. /fectul radiaiilor asupra ochiului
se caracterizeaz prin urmtoarele mrimi fotometrice ,
; flu%ul luminos
; intensitatea luminoas
; iluminarea
90
F*4N4* *4m3&1. este mrimea fotometric corespunztoare mrimii energetice flu%ul
de energie radiant t
e
i se definete ca produsul ,
t @ TP?
p
Pt
e
, T @ constant numit echi"alent fotometric
al radiaiei.
=nitatea de msur pentru flu%ul luminos este lumenul # lm $. 1stfel, echi"alentul
fotometric al radiaiei are "aloarea T @ 69: lm;N.
I&(5&.3(a(5a *4m3&1a.@ a 4&53 .4).5 84&!(3=1)m5 este flu%ul de energie luminos
emis !n unitatea de unghi solid, adic ,
A @ dt ; du
Antensitatea luminoas este mrime fundamental pentru mrimile fotometrice !n
sistemul internaional de uniti #SA$. =nitatea de msur este candela #cd$, fiind egal
cu intensitatea luminoas !ntr-o direcie dat a unei surse care emite radiaie
electromagnetic monocromatic cu frec"ena de 5C0P10
12
Xz i cu intensitatea
energetic !n acea direcie egal cu 1;69: #Y;sr$. Suprafaa unei sfere se "ede din
centrul acesteia su* un unghi solid egal cu CK. 1stfel, =*4N4* *4m3&1. 5m3. "5 1
.4).@ !n toate direciile cu aceai intensitate luminoas este egal cu ,
t @ CKPA
Aluminarea unei suprafee este egal cu flu%ul luminos care str*ate unitatea de arie a
unei suprafee trans"ersale, adic ,
/ @ dt ; d1
n
@ # A ; r
2
$Pcos v
=nitatea de msur pentru iluminare este lu%ul #l%$. 1 l% @ 1 lm;m
2
. Se mai utilizeaz
i unitatea tolerat phot #ph$, care este egal cu 1 lm;cm
2
, astfel c 1 l% @ 10
C
ph.
91
1D. SPECTROFOTOMETRIE
A7SOR7IA 6I EMISIA RADIAIILOR DE CTRE MOLECULE
1D.1. E&5),3a m1*5!4*5*1) A3 81.33*3(@23*5 "5 m1"3=3!a)5 a 53
8)3& a.1)23a )a"3a233*1) 5*5!()1ma,&5(3!5
Spre deose*ire de atomi, la care mecanismul curent de a*sor*ie i de emisie a
radiaiilor este cel de tran$i"ie a electronilor )ntre diferitele nivele energetice,
moleculele !i pot schim*a energia i datorit, mi*crii de vibra"ie a atomilor la
capetele legturilor prin care sunt fi%ai, sau prin varia"ia energiei cinetice de rota"ie
a moleculei.
T)a&93233*5 5*5!()1&3!5, !n cazul moleculeleor i macromoleculelor, se fac
!ntre ni"ele energetice ale or*italilor moleculari de legtur i antilegtur.
'iferenele energetice #E
(5
$ dintre aceti or*itali corespund unor lungimi de und
plasate !n domeniile ultra"iolet #=?$ i "izi*il #?AS$. +iecare tip de legtur are
tranziii electronice !n domenii spectrale care permit identificarea ei.
#3)a23a se poate face !n dou feluri, !n lungul legturilor #c&nd are loc
!ntinderea i comprimarea lor$ sau perpendicular pe legturi #c&nd se produc
modificri ale unghiurilor dintre acestea$. .a i energia electronilor, energia cinetic
a fiecrui mod de "i*raie este cuantificat, cu a-utorul unui numr cuantic, v J
D>1>2>0.... 'iferena energetic #E
v
$ dintre dou ni"ele de "i*raie este constant, iar
cuantele a*sor*ite !n acest caz se afl !n domeniile de infrarou #AD$ - apropiat sau
mi-lociu.
0ntruc&t nu e%ist atom legat care s nu "i*reze, energia moleculei pe ni"elul de
"i*raie cel mai sczut, cu v J D, este totdeauna superioar unui ni"el energetic
electronic -+ig.10.1.
92
R1(a23a m1*5!4*5*1) poate produce acumulare de energie cinetic, de
asemenea cunatificat.
Numrul cuantic de rotaie, )
J D>1>2>0... cuantific
momentul cinetic de rotaie i
energia corespunztoare.
0ntruc&t e%ist molecule care
nu se rotesc, primul ni"el de
rotaie #) J D$ se suprapune
peste primul ni"el de "i*raie
- +ig.1. 'iferenele energetice
datorit rotaiei #E
)
$ sunt i
mai reduse, cuantele
corespunztoare fiind !n AD
!ndeprtat.
I&=*45&2a a,3(a2353 (5)m3!5.
0ntruc&t energia cinetic de agitaie termic, pe mol, este de ordinul RT #constanta
gazelor % temperatura a*solut$ adic 2>? Hcal;mol, o proporie mare dintre molecule
se "or afla pe unul din ni"elele energetice de rotaie, iar o fraciune redus pe unul
din ni"ele de "i*raie. Dezult c, !n echili*ru termodinamic, populaia de molecule
se "a afla distri*uit pe o multitudine de ni"ele energetice foarte apropiate !ntre ele.
1D.2. A.1)23a 5&5),353 "5 !@()5 m1*5!4*5> .85!()5 m1*5!4*a)5
(oleculele i macromoleculele pot a*sor*i radiaii electromagnetice, cuante de
energie +. /nergia primit modific prin unul sau mai multe din mecanismele de
mai sus energia moleculei a*sor*ante. )entru o cuant din domeniul =?-?AS "a fi
ade"rata egalitate,
+ = E
(5
L E
v
L E
)

<
0
2
1
D
?
<
0
2
1
D
D
5
1
0
5
1
0
5
1
0
5
1
0
5
1
0
5
1
0
5
1
0
5
1
0
5
1
0
5
1
0
1
0
C
7
A
Ni"ele
electronice
Ni"ele
de rotawie
) J D>1>2...
Ni"ele
de "i*rawie
v J D>1>2...
F3,.1D.1 'ispunerea ni"elelor energetice moleculare.
Sxgetile reprezintx c&te"a dintre tranzitiile permise !ntre
ni"elele electronice A si 7. Selectia tranzitiilor prmise
se face cu regulile: v
.48
K v
3&=
J 1 si )
.48
K )
3&=
J 1.
9:
0ntruc&t ni"elele !ntre care se face tranziia, pot a"ea stri de "i*raie i;sau de rotaie
diferite, rezult c, pentru o tranziie !ntre aceleai ni"ele electronice, cuantele
a*sor*ite pot a"ea energii diferite. #+ig.10.1$. Spectroscopic fenomenul se traduce
prin apariia unui numr corespunztor de linii, apropiate !ntre ele, grupate !n bande
sau ben$i spectrale.
Biniile care compun *enzile de a*sor*ie molecular pot fi distinse numai !n cazul
moleculelor izolate, aflate !n stare gazoas. )entru moleculele dizol"ate, cum sunt
macromoleculele *iologice, interaciunea cu sol"entul face ca liniile din *ezi s nu
mai pot fi distinse.
1D.0. Em3.3a )a"3a233*1) "5 !@()5 ma!)1m1*5!4*5> *4m3&5.!5&2a
P1.33*3(a(5a "5 a"4!5)5 a ma!)1m1*5!4*5*1) B& .(a)5 5N!3(a(@
)entru a emite radiaii, un atom sau molecul tre*uie s se gseasc pe un ni"el
energetic superior #!ntr-o stare e%citat$, radiaia fiind emis la trecerea pe un ni"el
energetic inferior.
/nergia necesar e%citrii poate fi termic #su*stane aduse la incandescen$,
electric #descrcri !n gaze$, c%imic sau radiant #e%citarea radiati"$. /%citarea
radiati", prin a*sor*ie de cuante, este modul curent de a aduce moleculele !n soluie
!ntr-o stare !n care sunt capa*ile s emit radiaii.
D595N!3(a)5a m1*5!4*5*1)
0n afar de deze%citarea prin emisie de radiaii #tran$i"ie radiativ$ o molecul
poate trece pe un ni"el energetic inferior prin tran$i"ii neradiative. ranziiile
neradiati"e se e%plic prin con"ertirea energiei !n alte forme, cum sunt energia
chimic, electric sau mecanic de agitaie termic. 0n acelai lan de procese ce
!nsoete re"enirea unei molecule la starea de energie -oas se !nt&lnesc am*ele tipuri
de dese%citri. #+ig.10.2.$
9C
L4m3&5.!5&2a este
fenomenul de emisie a unor
radia"ii de lungime de und mai
mare #frecven" *i energie mai
reduse$, )n compara"ie cu cele
ale radia"iilor pe care substan"a
le8a absorbit. /a reprezint
modalitatea curent de emisie a
radiaiilor de ctre moleculele
aflate !n soluie, la temperaturi
o*inuite.
+aptul poate fi uor e%plicat dac inem cont c !ntre e%citarea radiati" #!n care
molecula a*soar*e cuanta cu energia +
a.
$ i deze%citarea radiati" #!n care emite
cuanta +
5m3.
$ au loc una sau mai multe deze%citri neradiati"e, !n care molecula
comunic sistemului #de o*icei sol"entului$ o cantitate de energie termic, E
&
.
Begea conser"rii energiei se "a scrie,
+
a.
J +
5m3.
L E
&
/ste e"ident c energiile cuantelor emise sunt mai reduse dec&t cele ale celor
a*sor*ite.
'up natura strii intermediare de pe care se face deze%citarea radiati",
luminescena poate s se produc !n dou moduri, fluorescen" i fosforescen".
#+ig.10.2.$
F*41)5.!5&2a apare atunci c&nd, dup deze%citarea neradiati", electronul !i
pstreaz spinul de sens opus perechii sale, rmas pe ni"elul energetic inferior #stare
singlet$. impul de "ia, , al electronului !n aceast stare este e%trem de scurt, J
1D
KM
... 1D
K0
.. 'up acest inter"al de timp, toi electronii au re"enit pe ni"elele
inferioare. )ractic, fenomenul dureaz numai c&t timp dureaz e%citarea radiati".
/%citarea este realizat cu radiaii care corespund unei *enzi de a*sor*ie intens
a su*stanei. Andiferent de lungimea de und aleas pentru e%citare, datorit

(
.
emisie
a*sor*tie
=1.=1)5.!5&(S =*41)5.!5&(S
. ; stare singletZ ( ; stare tripletZ
; dese%citare neradiati"x

F3,. 1D.2. ranzitiile electronice la producerea
luminescenei
95
multitudinii ni"elelor de "i*ro-rotaie ale populaiei de molecule, lumina emis se
distri*uie !ntr-o *and.
+luorescena este produs de ma-oritatea macromoleculelor aflate !n soluie. 0n
cazul proteinelor, responsa*ili de producerea fluorescenei sunt radicalii aromatici ai
unor aminoacizi #)he, Ir, rp$, iar !n cazul acizilor nucleici toate *azele azotate.
F1.=1)5.!5&2a se produce dac pe ni"elul intermediar, de pe care re"ine,
electronul e%citat se afl cu spinul !n acelai sens cu cel al electronului rmas pe
ni"elul inferior #stare triplet$. impul de "ia al electronului !n aceast stare poate fi
mult mai lung, J 1D
K0
. ... 1)5. 0nseamn c su*stanele fosforescente, conin&nd o
multitudine de electroni e%citai, continu s emit lumin !nc mult timp dup ce a
!ncetat iluminarea care a produs e%citarea.
0ntruc&t fosforescena poate a"ea loc numai !n stare solid, ea nu i-a gsit
aplicaii !n studiul *iomacromoleculelor.
1D.<. S(4"34* ma!)1m1*5!4*5*1) 8)3& .85!()1.!1835 "5 a.1)235
M@.4)a)5a a.1)2353 )a"3a233*1) "5 !@()5 1 .4.(a&2@
1*sor*ia se e%prim cantitati" cu a-utorul e@tinc"iei #E$ numit i absorban"
#A$. /a e%prim gradul de atenuare a unui fascicol de luminos dup str*aterea unui
strat de su*stan ce conine molecule a*sor*ante.
Ba trecerea unui fascicol luminos de o anumit lungime de und R> printr-un strat de
su*stan cu grosimea "N> el "a fi a*sor*it conform legii ,
;"IJ T I "N, "IJ I K I
D>
=nde A este intensitatea fascicolului dup ce a str*tut stratul a*sor*ant, dA este
"ariaia elementar a intensitii, H este constanta de a*sor*ie a mediului pentru
lumina cu lungimea de und R.
96
/%tincia, datorat unui component din soluie, crete linear cu concentraia lui
molar, C, i cu grosimea stratului de soluie str*tut, 6 ,
E J C 6 Glegea Gambert *i 0eerH
se numete coeficient molar de e@tinc"ie i, pentru scopuri *iologice, unitatea
curent este de M
K1.
!m
K1
, e%primat uneori ca *3()3
/
m1*
.
!m

. ?aloarea lui nu depinde
dec&t de natura a*sor*antului i de lungimea de und la care a fost msurat. Se
poate demonstra c ,
E J *, I
D
/ I J *, T, unde T este gradul de transmisie al luminii, adic
T J I / I
D
sau TGUH J I /I
D
. 1DD.
Spre e%emplu, "aloarea e%tinciei unui fascicol luminos a crui intensitate scade de
10 ori fa de cel incident pe suprafa, "a fi /@1.
Se numete curb caracteristic de absorb"ie, sau spectrul de absorb"ie al
substan"ei, graficul dependenei coeficientului molar de e%tincie de lungimea de
und, J GH.
Anformaiile oferite de cur*a caracteristic de a*sor*ie pri"esc, a$ tipurile
legturilor *i energetica lor #prin lungimile de und la care se plasea$ ma@imele de
absorb"ie$ i *$ abunden"a gruprilor sau legturilor absorbante #prin valorile
coeficien"ilor de e@tinc"ie$. /a este determinat de natura moleculei #compoziie,
structur$ i depinde de interaciunile #intra- sau intermoleculare$ pe care le are
molecula sau pri ale ei.
Selectarea lungimilor de und potri"ite pentru determinarea concentraiilor prin
msurtori de e%tincie se face utiliz&nd monocromatoare. Gungimea de und la care
se fac determinrile se alege astfel !nc&t su*stana de determinat s prezinte
I
D
"N
N
I
97
Fig.1?./. Scderea
intensit"ii fascicolului
luminos la trecerea
printr8un strat de
substan" cu grosimea @
A @A
0
e
8T %
a*sor*anta ma%im iar ceilalti componeni ai amestecului s a*soar* c&t mai puin
#sau deloc$. re*uie menionat c toate corpurile apar colorate !n culoarea
complementar radiaiilor a*sor*ite, deci pentru a o*ine e%tincia ma%im pentru o
soluie de o anumit culoare, tre*uie ales un filtru de culoare complementar acesteia
#"ezi diagrama de mai -os$.
+ig.1?.2. =iagrama culorilor complementare
G)48@)3*5 !)1m1=1)5 repre$int grupri de atomi, legate prin interac"iuni c%imice
sau fi$ice, *i care au ben$i de absorb"ie caracteristice.
A.1)23a B& 4*()av31*5( A3 v3933* se datore*te gruprilor cromofore repre$entate de
legturile covalente. Cromo8for !nseamn 3purttor de culoare4. .uloarea o*ser"at
la o soluie str*tut de lumin al*, se datorete radiaiilor pe care moleculele ce o
compun le las s treac #nu le a*soar*e$.
Legtura sim#l> CKC, a*soar*e su* 160 nm, dar studiile la V 1CD nm sunt
imposi*ile !n soluie apoas, !ntruc&t i legturile co"alente ale apei a*sor* puternic
!n acest domeniu.
Legturile duble a*sor* !ntre 190 i :00 nm prin tranziiile electronice !ntre or*italii
i W.
99
=ublele legturi con;ugate ale ciclurilor aromatice #aminoacizi ca )he, Ir, rp$,
sau ale heterociclurilor *azelor
azotate #purinice i
pirimidinice$, au c&te o *and
de a*sor*ie intens !ntre 2:0
i :00 nm. 'eplasrile
lungimilor de und ale
ma%imelor, i "ariaiile
coeficienilor molari de
e%tincie ai radicalilor, ser"esc
la studiul structurii i a
interaciunilor cu agenii de
mediu, fora ionic, pX-ul, temperatura.
Legturile #e#etidice #a"&nd craracter de du*l legtur$ a*sor* !ntr-o *and cu
dou ma%ime, unul mai e%primat, la 200 nm, i altul mai redus, la 225 nm. Spectrele
lanurilor polipeptidice, dac acestea adopt o structur secundar definit, au
particulariti caracteristice ale spectrului de a*sor*ie #+ig.10.5$.

#nm$
(
81
cm
81
$


D
CDDD
<DDD
2DD 1CD 22D
g%em %aotic
F3,. 1D.? Spectrele de a*sor*ie !n =? ale
poli-B-lizinei !n conformawiile , ,
ghem haotic.

G&mH
2DDDDD
1DDDDD
?DDDD
1DDDD
?DDD
0DDD
EDD ?DD <DD 0DD

F3,. 1D.E Spectrele de a*sor*tie ale o@i%emoglobinei #XH>
deo@i%emoglobinei #y$ si met%emoglobinei #- -$
99
1etalo#roteinele> ca <i com#u<ii ce con(in radicali aromatici #oliciclici <i sisteme
de duble legturi con;ugate absorb )n domeniul vi%ibil.
)rima categorie include compuii metalelor tranziionale, iar pentru a doua se pot cita
fla"o-proteinele. )roteinele heminice #hemoglo*ina - F3,.1D.E. ; i citocromii$ au
spectre caracteristice datorate, pe de o parte, nucleului con-ugat tetrapirolic i, pe de
alt parte, prezenei ionilor de fier. .uprul, determin spectrele ceruloplasminei
plasmatice, citocrom-o%idazelor mitocondriale sau al hemocianinei #transportorul de
o%igen din s&ngele unor ne"erte*rate$.
A.1)23a B& 3&=)a)1A4> !n condiii apropiate de cele *iologice, are loc datorit
vibra"iilor moleculare, fiindc, aa cum s-a "zut, !n soluie strile rotaionale pure
nu pot e%ista. 'omeniul spectral !n care se lucreaz este AD apropiat i mediu.
0n cazul "i*raiilor longitudinale ale legturilor marginale, de e%emplu, se cunosc
lungimile de und ale ma%imelor de a*sor*ie. 'ac atomii acestora particip la puni
de hidrogen se produc deplasri caracteristice, !n sensul creterii lungimilor de und.
#a*elul. 1$
Ta5*4* 1 : P193233*5 maN3m5*1) "5 a.1)235 85&()4 v3)a233*5 *1&,3(4"3&a*5 a*5 4&1) *5,@(4)3
LEGATURA L4&,3m5a "5 4&"@ L4&,3m5a "5 4&"@
B& *38.a *5,@(4)33 "5 H B& 8)595&2a *5,@(4)33 "5 H
XOKH 2>F? m 0>DD m
XNKH 2>M? m 0>1D m
XSKH 0>MD m <>DD m
XCJO ?>MD m E>D? m
Soluiile apoase nu sunt propice studiilor !n infrarou datorit celor dou *enzi de
a*sor*ie intens ale apei #!n -urul a 0>1 m i E>1 mH. Begturile de hidrogen, care
90
de pot studia uor !n sol"eni neapoi, nu pot fi studiate !n ap.
1D.?. DESCRIEREA SPECTROFOTOMETRULUI U#;#IS
SP;CDD1 METERTECH
91
Parametrii tehnici
'omeniul de msurare, 200-1100 nm
Bime de *and, 2 nm
)recizia lungimii de und, 1 nm
(onocromator, split *eam #raz di"izat$
Deproducti*ilitate, 0.2 nm
'omeniul fotometric, - 0.:00-:.000 1*s
)recizia fotometric, 0.005 ^ la 1.000 1*s
Sta*ilitate #drift$, \ 0.000: 1*s ; or la 500 nm
#dup 1 or de !nclzire$
Sta*ilitate *aseline, 0.002 1*s #!ntre 210-1000 nm$
Bumina !mprtiat, \ 0.05^ la :C0 nm i 220 nm
Surs de lumin, lamp deuteriu #=?$ i lamp halogen #?AS$
Schim*are surs de lumin, automat
'etector, dou fotodiode
?itez de !nregistrare spectru, 100-5000 nm;min
'rum optic, schim*a*il !ntre 10-100 mm
1fia-, B.' cu iluminare din spate, contrast regla*il
Aeiri semnal, port serial i paralel
1limentare ; sigurane, 100;120;220;2C0 ? z 50;60 Xz
sigurane, 21 220;2C0 ?, C1 100;120 ?
1m*ient ; umiditate, temperatura camerei, 15-:0{., umiditate \ 90^
'imensiuni, 506 mm % C:0 mm % 220 mm. (asa, z19 Tg
M1"4)3 "5 m@.4)a)5, la lungime de und fi%, !nregistrare de spectru, msurare !n
timp la o lungime de und, msurare cantitati", cinetic simpl.
92
ELEMENTE DE COMAND
.omanda spectrofotometrului, introducerea parametrilor de msurare precum i
"izualizarea rezultatelor se face cu a-utorul *utoanelor tastaturii prote-ate cu folie. Se
pot o*ser"a urmtoarele grupuri,
aste funcii, +1-+5, selectarea unei funcii de pe afia-
aste
numerice,
cifre, punct zecimal, semnul minus
p , introducerea lungimii de und dorite
.B/1D, tergerea "alorilor nedorite
/S., !ntoarcere dintr-o fereastr !n cea precedent, sau !ntoarcere de la o
operaie la un ni"el superior de meniu
/N/D, "alidarea datelor sau operaiilor introduse
D/1', pornirea msurtorii conform parametrilor setai
1=E n/DE, corecie *lanc, seteaz "aloarea fotometric la 0 1OS #100^$
Sgei, deplasarea cursorului prin lista parametrilor
./BB | deplasare schim*torului de cu"e !nainte cu o poziie
./BB } deplasare schim*torului de cu"e !napoi cu o poziie
L=A.H D=N, la apsarea tastei apare lista tuturor fiierelor sal"ate cu parametrii
de msurare, indiferent de modulde lucruZ aleg&nd de aici, se
a-unge imediat !n modul de lucru corespunztor
PORNIRE 6I FUNCIONARE: Ne asigurm c !n incinta de lucru nu este nici o
cu". Se !nchide capacul incintei, se pornete aparatul. )e afia- "or aprea urmtoarele
mesa-e,
9:
12:00:00

Metertech
Metertech Inc. SP-
UV/VIS
All rights reserved
Version 1.0
Detect
Initial Syste.....
1paratul "a e%ecuta un autotest, "a aprinde lmpile i "a recunoate accesoriile
opionale, dac ele e%ist, toate acestea !n mod automat. 'up iniializare "a fi afiat
fereastra meniului principal. 'e aici se poate alege din apte #ase$ opiuni.
12:00:00
Syste Main Men!
1.Photoetric
2.S"ectr!
#.$iescan
%.&inetic
'.(!antitative
).Syste Set!"

Select *!+er:1
(!ic, Sa"le
-!n .ontrol
9C
1legerea se face prin tastarea numrului corespunztor sau prin deplasarea *enzii
luminoase #hightlight$ urmate de apsarea tastei /N/D. )e partea de -os a afia-ului
mai sunt dou opiuni, dintre care ~Sample .ontrol~ are sens doar !n cazul utilizrii
unui suport multicell #multicu"$, iar cu tasta +1 de su* ~LuicT Dun~ se poate intra !n
meniul de fiiere, ca i cu a-utorul tastei L=A.H D=N. )arametrii de *az ai
spectrofotometrului se pot seta din su*meniul 6, ~SIstem Setup~. Epiunile din acest
su*meniu se aleg prin tastarea numrului corespunztor urmat de apsarea tastei
/N/D.
1
.
Setup cloc(, pentru setarea datei i orei.
2
.
Setup lamp, aici putem "edea ni"elul de energie a lmpilor, putem opri
lmpile indi"idual, totodat aici putem reseta la zero orele de funcionare a
lmpilor, dup !nlocuirea cu una nou.
:
.
Setup printer, pentru alegerea tipului potri"it de imprimant.
C
.
Setup ;S82/2, pentru setarea portului serial.
5
.
Setup %ard.are, se pot seta trei parametri de *az,
lungimea de und la care se comut sursa de lumin la trecerea din ?AS !n
=?. 0n cazul !n care lungimea de und de msurare coincide cu cea de
comutare a sursei de lumin setat de productor #:6: nm$, se recomand
modificarea acestei "alori !n inter"alul ::0 i :65 nm.
SNitch to..... comutare !ntre accesorii i single cell.
Scan *ase line..... dac este setat pe EN, dup pornire, aparatul msoar
95
automat un *aseline.
6
.
Beasure band.idt%, )entru msurarea limii de *and se apas tasta
D/1'. ?a fi !nregistrat spectrul lmpii =?. 'ac aparatul este *ine cali*rat,
atunci "a rezulta un "&rf !n -urul "alorii de 656.1 nm, iar limea de *and "a
fi su* 2 nm. Dezultatul poate fi tiprit aps&nd tasta de su* ~)rint 'ata~.
7
.
Beasure baseline, aps&nd /N/D, se "a msura un *aseline.
9
.
Searc% $ero point, msurare !n poziia de zero, pentru test hardNare.
EFECTUAREA MSURTORILOR YN DIFERITE MODURI
aH (S=D1D/ B1 B=N>A(/ '/ =N' +Am
/ste un mod de msurare simplu, la lungime de und fi%. Se pornete din meniul
principal, aleg&nd punctul 1. 1pare fereastra )hotometric )arameter setup.
'eplas&ndu-ne cu a-utorul sgeilor, putem selecta parametrii dorii pentru setare sau
editare. 1"em posi*ilitatea de a !ncrca i seturi de parametri de la msurtori
anterioare, prin apsarea tastei funcie +1, de su* afia-. .u tasta +2 se sal"eaz, cu
+: se tipresc parametrii. )ot fi setai urmtorii parametri de msurare,
Hnput t%e Number of
P,
sta*ilirea numrului de lungimi de und de msurare
#1-5$Z dup apsarea tastei /N/D se dau "alorile lor.
Beasure BodeC alegerea modului de msurare, 1OS-a*sor*an, ^-
transmitan, .onc.-concentraie.
CQcle Number, specificarea numrului ciclurilor de msurare #1-999$
pe aceai pro*. =n ciclu !nseamn c&te o msurare la
fiecare lungime de und din list.
CQcle Hnterval 5sec)C timp de ateptare #1-999 sec$ !ntre cicluri
&rint EverQ CQcle, 'ac se seteaz pe es, rezultatele se tipresc dup
fiecare ciclu.
96
12:00:00 P/0$0M1$-I. '00.0n
Paraeter
Set!"
1.In"!t the *!+er o2 :1
1 :'00.0
2.Meas!re ode :A3S
/ave !nit45es/*o67 :5es
Unit :
8actor4de2a!lt916 :1.000
#..ycle n!+er :1
%..ycle interval4sec6 :0
'.Print every cycle :*o
*!+er 2ro 1 to '...
:oad Save Print Sa"le *e;t
Para Para Data .ontro Screen
97
'up setarea tuturor parametrilor, se recomand sal"area lor !ntr-un fiier. 'up
apsarea tastei +2, apare un careu cu litere. Selectarea unei litere are loc prin
deplasarea cu a-utorul sgeilor pe linia care o conine, urmat de apsarea numrului
corespunztoare coloanei !n care se gsete ea.
'up completarea numelui se apas tasta /N/D, apoi cu a-utorul sgeilor ne
deplasm pe o linie goal i se apas din nou /N/DZ fiierul este sal"at. Se pot
sal"a c&te 15 fiiere pentru fiecare mod de msurare.
A(5&235Z A8a)a(4* va .48)a.!)35 =@)@ B&()5a)5 =3A35)5*5 !4 a!5*aA3 &4m5ZZ
'up introducerea parametrilor se apas tasta +5, apare un ta*el gol, i fotometrul se
poziioneaz pe prima lungime de und din list.
! se urmri )ntotdeauna mesa:ele din partea de :os a afi*a:ului' opera"iile acelea
trebuie efectuate.
)entru a ine cont de "aloarea *lancului, se aeaz cu"a goal sau umplut cu sol"ent
!n suportul de cu"e i se apas tasta 1=E n/DE.
12:00:00 P/0$0M1$-I. ''0.0n

%00.0 %'0.0 '00.0 ''0.0

*
o
A3S1 A3S2 A3S# A3S%
1 0.<'' 1.22# 1.'01 1.<02
2 0.<'' 1.22% 1.'02 1.<0#
# 0.<'% 1.22# 1.'02 1.<01
% 0.<'' 1.22% 1.'0# 1.<0#
' 0.<'% 1.22# 1.'01 1.<02
Press -1AD =hen ready...
Print Prev
Data Screen
(surarea pornete dup apsarea tastei D/1'. Ba sf&rit se poate reporni msurarea
sau pot fi printate datele. /%ist i un mod foarte simplu de msurare pentru cazul !n
care se lucreaz la o singur lungime de und. 'in meniul principal se apas tasta R.
.u tasta ~(ode~ se alege modul fotometric de msurare #a*sor*an, transmitan,
concentraie$.
99
12:00:00 :AM3DA '00.0n
0.000A

: '00.0 n
Data: 0.000 A

Press > ,eyin
=avelength...

Vie= Save Mode Sa"le $oggle
Data Data A/./?$ .ontro
l
Digits
99
Se introduce lungimea de und i se "alideaz cu /N/D, dup care msurarea
pornete imediat i se afieaz rezultatul. Se poate i sal"a prin apsarea tastei +2. E
msurtoare nou se poate porni aps&nd din nou tastele p i /N/D. .u tasta +1
#?ieN 'ata$ se pot afia rezultatele msurtorilor i se pot i tipri. Dezultatele nu
sunt sal"ate definiti"Z dac se iese din acest mod de msurare, ele se pierd.
H 0ND/>ASD1D/ '/ S)/.D=
0n modul de !nregistrare de spectru a"em posi*ilitatea de a msura fie pe un domeniu
restr&ns, fie pe tot domeniul spectrofotometrului, cu specificarea "itezei de scanare.
Spectrul rezultat poate fi prelucrat !n di"erse moduri, poate fi printat, sal"at i deschis
mai t&rziu. Spectrele pot fi i suprapuse !n aceai fereastr #o"erlaI$. )entru pornirea
acestui mod, din meniul principal se alege punctul 2. Na"ig&nd cu tastele sgei,
putem seta sau edita parametrii.
100
.omenzile afiate !n partea inferioar a ferestrei se pot e%ecuta cu a-utorul tastelor de
su* ele. )utem seta urmtorii parametri de lucru,
12:00:00 SP1.$-UM '00.0n
Para
1.Start :%00.0
2.Sto" :<00.0
#.Meas!re ode :A3S
%.:o= val!e4A3S6 :-0.#0
'./igh val!e4A3S6 :#.00
).Scan :1000
@.0verlay screen :5es
*!+er 2ro 200
to 10A<...
:Save Print Sa"le *e;t
P
a
r
Para Data .ontrol Screen
101
Start Oavelengt%, Bungimea de und de start #200-1099 nm$
Stop Oavelengt%, Bungimea de und final #202-1100 nm$
Beasure BodeC (odul de msurare fotometric #a*sor*an,
transmitan$
Go. ,alueC

Bimita de -os a scalei grafice pe timpul msurrii
#-0.:-2.99 1 ; 0-119.9 ^$
9ig% ,alueC Bimita de sus a scalei grafice pe timpul msurrii
#-0.29-:.00 1 ; 0.1-120.0 ^$
Scan Speed
5nm/min)C
?iteza de scanare a spectrului #100-5000 nm;min$
-verlaQ ScreenC Res !nseamn c msurtorile succesi"e "or fi afiate
suprapuse !n fereastr. Numai ultima msurtoare se
poate analiza.
'up setarea tuturor parametrilor, este indicat sal"area lor !ntr-un fiier, similar
celor descrise la modul fi% de msurare. 1cestea pot fi rechemate oric&nd pentru
pornirea unei msurtori. )utem sal"a !n total 15 fiiere de parametri. 'up umplerea
memoriei, r&ndurile "or fi suprascrise. 'easemenea, la o sal"are aparatul nu "a cere
confirmarea suprascrierii r&ndului actual. 'in acest moti", se recomand deplasarea
cu a-utorul sgeilor pe un r&nd gol. 'up "alidarea parametrilor de msurare se
apas tasta +5 #Ne%t Screen$ i se "a intra !n fereastra grafic de msurare.
12:00:00 SP1.$-UM <00.0n
1
.
'
0
A
3
S
0
.
@
'
0
.
0
0
%
0
0
* )0' <00
Press -1AD =hen ready...
Access Mani- .lear Prev
Data "!late Bra"h Screen
102
)e partea de -os a ecranului apare mesa-ul ~)ress D/1' Nhen readI~. ! se urmri
)ntotdeauna mesa:ele din partea de :os a afi*a:ului' opera"iile acelea trebuie
efectuate.
'eoarece spectrofotometrul are un singur drum optic, un spectru msurat s-ar
compune din a*sor*anele ansam*lului cu" V sol"ent V pro* necunoscut. 'in
aceast cauz, pentru luarea !n consideraie a "alorii de *lanc, !nainte de msurarea
propriu zis, "om introduce !n suport cu"a sau cu"a cu sol"entul pur i "om apsa
tasta 1=E n/DE. 'up care aparatul "a msura un *aseline #*lanc$ pe domeniul de
lungimi de und definit prin parametri de lucruZ acesta "a fi sczut din msurtorile
de pro*e pornite cu tasta D/1'.
Se aeaz cu"a cu pro* !n locaul din incinta de lucru, se !nchide capacul incintei.
Se apas tasta D/1', msurtoarea pornete i spectrul "a fi trasat pe ecranul grafic.
)e partea de sus a ecranului sunt afiate lungimea de und i "aloarea fotometric,
actuale. (surtoarea poate fi oric&nd oprit prin apsarea tastei /S.. Ba sf&rit,
dac este ne"oie, cu tasta D/1' putem !nregistra din nou spectrul. )e partea de -os a
ecranului se "d ferestrele operaiilor posi*ile.
/le pot fi e%ecutate cu a-utorul tastelor funcii #+1-+5$, aflate dedesu*t.
.u tasta ~)re" Screen~ #+5$ ne !ntoarcem !n fereastra de parametri. .u tasta ~.lear
>raph~ #+:$ putem terge spectrul. 'ac am acti"at o"erlaI, "or fi terse toate
spectrele.
.u tasta ~1cces 'ata~ #+1$ acceptm msurtoarea. 0n ferestrele de -os "or aprea noi
mesa-e,
+ :~)rint 'ata~ printarea rezultatuluiZ
+ 2~Sa"e 'ata~ sal"area spectrului su* numele dat de noi #5 fiiere$Z
+ 1~Boad 'ata~ re!ncrcarea spectrelor sal"ate pentru analiz. .u *anda luminoas
ne poziionm pe r&ndul dorit i cu /N/D !l !ncrcm !n fereastra grafic de mai
!nainte. .u tasta /S. putem urca cu un ni"el mai sus, unde putem face analiza
spectrului.
10:
!H 1N1BAn '/ S)/.D=
)utem intra !n acest punct de meniu dup !nregistrarea unui spectru sau dup
reapelarea unui spectru sal"at !n preala*il. )entru acesta tre*uie s apsm tasta +2 de
su* fereastra ~(anipulate~.
?om a"ea urmtoarele posi*iliti,
8 F1 Smoot% =ata, netezirea automat a cur*ei
8 F2 Soom =ataC mrirea;micorarea cur*eiZ la a%a p&lp&ie cursorul, acolo
tre*uie introdus noua "aloare apoi se "alideaz cu /N/D. .ursorul "a sri la
poziia urmtoareZ prin repetarea operaiei precedente i termin&nd pe partea dreapt a
a%ei m, cur*a "a fi redesenat conform coordonatelor. 1ps&nd din nou tasta +2 se "a
repeta procesul, sau se poate re"eni la aspectul iniial cu tasta +5.
8 F/ S%o. Trac(, apare o linie "ertical, !n r&ndul de sus "a fi afiat poziia
ei actual i "aloarea fotometric corespunztoare. )oate fi deplasat cu tastele sgei,
astfel putem cuta orice "&rf sau "ale. 'ac !ntr-un loc apsm tasta ~Sa"e 'ata~,
datele "or fi sal"ate. .u ~?ieN 'ata~ se pot "izualiza, cu ~)rint 'ata~ se pot printa
datele "&rfurilor. Aeirea se face cu tasta /S..
8 F2 &ea( OalleQ, dup apsare, apare -os un meniu nou.
10C
1leg&nd ~Search )eaT~ se "a face o cutare de ma%ime. 'ac se alege ~Search
?alleI~ se "or cuta minime ale spectrului. +olosind tastele ~Bess )oint~, ~(ore
)oint~ se "a e%ecuta o cutare pentru mai puine, respecti" pentru mai multe puncte.
12:00:00 SP1.$-UM
1
.
'
0
A
3
S
0
.
@
'
0
.
0
0
%
0
0
* )0' <00
Press hot ,ey to
Vie= Search Search :ess More
Data Pea, Valley Point Point
105
'up cutare, datele pot fi afiate su* form ta*elar dac se apas tasta ~?ieN
'ata~, de aici pot fi i printate.
.u tasta +5 #)re" Screen$ ne !ntoarcem !n fereastra precedent, de analiz. .u tasta
/S. ne putem deplasa !napoi prin structura meniului.
"H (S=D1D/ 0N A() #A(/ S.1N$
0n acest mod de msurare putem !nregistra "ariaia !n timp a "alorii fotometrice alese,
la o lungime de und. Se utilizeaz pentru urmrirea reaciilor, pentru msurtori de
12:00:00 SP1.$-UM <00.0n
0.1#2A
Data 8ile :ist
-------------------------------
Data01 %1#.2n 0.#%%A
Data02 %A<.<n 1.%1'A
Data0# '<@.1n 0.#'2A
Data0% @1%.#n 1.0)'A
Data0' @<@.'n 0.'#%A
Prev *e;t Print Prev
Page Page Data Screen
106
cinetic. /ste posi*il !nt&rzierea msurtorii propriu-zise #'elaI ime$, astfel citirea
pornete numai dup e%pirarea timpului setat. 'in meniul principal putem a-unge !n
modul ime Scan aleg&nd punctul trei. 1pare fereastra 3)arameter Setup4.
'up ce am setat parametrii, putem porni msurtoarea sau !i putem sal"a !ntr-un
fiier. ot de aici, parametrii pot fi i printai. )utem seta urmtorii parametri,
12:00:00 $IM1S.A* '00.0n
0.000A
Paraeter
1.Cavelength4n6 :'00.0
2.Scan tie4sec6 :#0
#.Delay tie4sec6 :0
%.Meas!re ode :A3S
'.:o= val!e4A3S6 :-
)./igh val!e4A3S6 :#.00
@.0verlay screen :5es
*!+er 2ro 200 to
:oad Save Print Sa"le *e;t
Para Para Data .ontro Screen
107
Oavelengt%, Bungimea de und aleas #200-1100 nm$
Scan Time, 'urata msurtorii #5-9999 sec$
=elaQ Time, impul de !nt&rziereZ dup apsarea tastei D/1', msurtoarea
propriu zis "a porni dup acest timp #0-50 sec$
Beasure Bode, (odul de msurare fotometric #1OS sau ^$
Go. ,alueC Bimita de -os al ecranului grafic pe timpul msurtorii
#-0.:-2.99 1*s ; 0-119.9 ^$
9ig% ,alueC Bimita de sus al ecranului grafic pe timpul msurtorii
#-0.29-:.00 1*s ; 0.1-120.0 ^$
-verlaQ
ScreenC
Res !nseamn c msurtorile succesi"e "or fi afiate suprapuse
!n fereastr. Numai ultima msurtoare se poate analiza.
'up setarea parametrilor, dac este necesar, msurm "alorea de *lanc, apoi aezm
cu"a cu pro* !n incinta de lucru i !nchidem capacul.
1psm tasta D/1', dup trecerea timpului setat la delaQ time "a porni
msurtoarea i cur*a "a fi trasat pe ecranul grafic. 0n partea de sus al ecranului se
poate "edea timpul scurs i "aloarea fotometric actual. )utem opri msurtoarea cu
tasta /S..
12:00:00 $IM1S.A* '00.0n
0.000A
1
0
1
.
0
?
$
1
0
0
.
0
A
A
.
0
0 Sec 1'0 #00
Press -1AD =hen ready...
Access Mani- .lear Prev
109
Data "!late Bra"h Screen
Ba sf&rit putem repeta msurtoarea cu tasta D/1'.
)e partea de -os a ecranului sunt afiate ferestrele comenzilor ce pot fi e%ecutate.
1cestea pot fi lansate cu tasta aflat dedesu*tul lor #+1-+5$. 1naliza rezultatelor se
face similar celor descrise la analiza spectrelor.
5H (E'=B '/ (S=D1D/ .1NA1A?
0n acest mod de msurare a"em posi*ilitatea determinrii concentraiei unei pro*e
necunoscute, pe *aza unei cur*e de cali*rare !nregistrate !n preala*il de ctre
utilizator cu a-utorul unor soluii standard, a cror concentraie se cunoate. Se pot
!nregistra patru tipuri de cur* de cali*rare. 'in meniul principal putem a-unge !n
modul Luantitati"e aleg&nd punctul cinci. 1pare fereastra 3)arameter Setup4
.
12:00:00 (UA*$I$A$IV1 '00.0n
Paraeter
1.Cavelength4n6 :'00.0
2.Standard :#
S 1:0.0
S #:0.0



#./ave Unit45es/*o6 :*o

%.Method :
'.&eyin A3S :*o
).Print every cycle :*o

*!+er 2ro 200 to
:oad Save Print Sa"le *e;t
Para Para Data .ontro Screen
Na"ig&nd cu tastele sgei, putem seta sau edita parametrii. ?alidarea lor se face prin
apsarea tastei /N/D. )utem !ncrca i seturi de parametri sal"ai anterior.
Bista parametrilor de setat este urmtoarea,
Oavelengt%, Bungimea de und aleas #200-1100 nm$.
Standard Number, Numrul standardelor cu concentraia cunoscut #1-10$ .
9ave
1nit5Res/No)C
Se "rea asocierea "alorilor cu o unitate de msur 'ac
se alege Res, apare un ta*el din care putem alege una
dintre cele 12 u. m.
Bet%odC ipul cur*ei de cali*rare #a"em patru opiuni$,
1ord.#Erigin$, dreapt, care trece prin origineZ
1ord. #No Erg$, dreapt, care nu trece prin origineZ
2ord. #Erigin$,cur* de gradul doi, care trece prin origineZ
2ord. #No Erg$,cur* de gradul doi, care nu trece prin origine.
3eQin !0S, ~No~ !nseamn c soluiile standard tre*uie msurateZ
~es~ - a*sor*ana soluiilor standard se introduce manual.
&rint EverQ CQcle, S se printeze dup fiecare msurare sau nu.
109
'up "alidarea tuturor parametrilor, cu tasta +5 trecem !n fereastra Luantitati"e
Standard a*le. 1psm tasta D/1', pe r&ndul de sus apare concentraia introdus
mai !nainte, precum i un mesa- !n partea de -os, T&ress ;E!= for read stdsT. 'up
apsarea tastei apare un mesa- nou, THnsert stds and press ;E!=T. 1cum putem
introduce primul standard din seria de diluie. Se apas D/1', dup care "aloarea
a*sor*anei msurate "a fi !nscris !n r&ndul corespunztor. .elelalte soluii din seria
de standarde se msoar la fel. .u tasta +2 trecem !n fereastra TmanipulateT unde
T,ie. CurveT ne "a afia cur*a de cali*rare, iar T,ie. EUuatiT ecuaia pe *aza creia
aparatul "a calcula concentraia pro*elor necunoscute, dup ce le-a msurat
a*sor*ana. #1ps&nd T3eQin FactorT putem edita parametrii H1 i H0 ai ecuaiei,
corect&nd astfel "aloarea calculat$. 'ac nu dorim folosirea factorului, ne !ntoarcem
cu T&rev ScreenT.
.u tasta ~Sample (easure~ #+2$ a-ungem !n fereastra de msurare propriu zis.
Meas!re Sa"le
---------------------------------
Sa"le A3S
C1&!.G G/LH
1 0.'21 '.2100
2 1.1#@ 11.#@0
# 2.#2' 2#.2'0

Press -1AD =hen ready...
Print Sa"le Prev
Data .ontro Screen
1cum putem aeza cu"a cu pro*a de concentraie necunoscut !n incint. 'up
!nchiderea capacului se apas tasta D/1'Z msurtoarea "a fi e%ecutat. )e r&ndul de
sus "or fi !nregistrate numrul de ordine al pro*ei, a*sor*ana msurat precum i
concentraia calculat pe *aza cur*ei de dinainte. =rmtoarele pro*e necunoscute "or
fi msurate pe r&nd, la fel. Ba sf&rit putem printa rezultatele.
'up "alidarea tuturor parametrilor, cu tasta +5 trecem !n fereastra Luantitati"e
Standard a*le.
110
1psm tasta D/1', pe r&ndul de sus, l&ng concentraia introdus !n preala*il, "a
p&lp&i cursorul. 1ici tre*uie introdus cu tastele numerice "aloarea a*sor*anei, apoi
se "alideaz cu /N/D. Ba sf&rit cu tasta /sc "alidm cur*a de cali*rare. 1psm
+2 i intrm !n fereastra TBanipulateT, unde T,ie. CurveT ne afieaz cur*a de
cali*rare, iar T,ie. EUuatiT ne arat ecuaia pe *aza creia aparatul "a calcula
concentraia pro*elor necunoscute, dup ce le-a msurat a*sor*ana. 1ps&nd T3eQin
FactorT putem edita parametrii H1 i H0 ai ecuaiei. 'ac nu dorim folosirea
factorului, ne !ntoarcem cu T&rev ScreenT. .u tasta ~Sample (easure~ #+2$ a-ungem
!n fereastra de msurare propriu zis. 1cum putem aeza cu"a cu pro*a de
concentraie necunoscut !n incint. 'up !nchiderea capacului se apas tasta D/1',
12:00:00 (UA*$I$A$IV1 '00.0n
Standard $a+le
---------------------------------
Sa"le .onc.
A7S
1 1.0000 0.1
2 2.0000 0.2
# #.0000

*!+er 2ro D0.# to #.0...
Access Mani- Prev
Data P!late Screen
111
msurtoarea "a fi e%ecutat. )e r&ndul de sus "or fi !nregistrate numrul de ordine al
pro*ei, a*sor*ana msurat precum i concentraia calculat pe *aza cur*ei de
dinainte. =rmtoarele pro*e necunoscute "or fi msurate pe r&nd, la fel. Ba sf&rit
putem printa rezultatele.
=H CINETIC
0n acest mod de msurare !nregistrm "ariaia a*sor*anei !n timp la o lungime de
und fi%Z pe *aza cur*ei !nregistrate se poate calcula acti"itatea. E aplicaie tipic
este analiza acti"itii enzimatice. 1leg&nd punctul patru din meniul principal
SIstem, a-ungem !n acest mod de msurare. 1pare fereastra 3)arameter Setup4.
'e aici putem introduce sau edita parametrii de msurare. )utem !ncrca i parametri
sal"ai anterior. 1"em acces la urmtorii parametri,
Oavelengt%, Bungimea de und aleas #200-1100 nm$Z
12:00:00 &I*1$I. '00.0n
Paraeter
1.Cavelength4n6 :'00.0
2.Sa"ling *!+er :'
#.:ag $ie4sec6 :2
%.-ate $ie4sec6 :12
'.Delay $ie4sec6 :0
)./ave !nit45es/*o67 :*o

@.8actor4de2a!lt916 :1.0
<.:o= Val!e4A3S6 :-0.#0
A./igh Val!e4A3S6 :#.00
10.Meas!re $e"erat!re :*one
11.0verlay Screen :5es
12.Print every cycle :*o
*!+er 2ro 2 to AAE
:oad Save Print Sa"le *e;t
Para Para Data .ontro Screen
112
Sampling
number,
Numrul pro*elorZ "alorile care "or fi folosite la
calculul acti"itii #2-20$Z
Gag Time, =n inter"al de timp !n secunde, dup pornirea
msurtorii, pe durata cruia nu dorim s folosim
datele pentru calcul #2-9999$Z
;ate Time, Anter"alul de timp dup Bag ime, pe durata cruia
dorim s folosim datele pentru calcul #:-9999 sec$Z
=elaQ TimeC impul de !nt&rziere a msurtorii dup apsarea tastei
D/1' #0-50 sec$Z
9ave
1nit5Res/No)C
Set&nd Res, "om putea alege dintre 12 uniti de
msurZ
Factor
5default=1)C
)utem seta un factor de care s se in cont la
con"ertirea "ariaiei de a*sor*an !n acti"itate #0-
9999.9$Z
!(tivitate = Factor V W!0S/min 5panta de varia"ie a absorban"ei)
Go. ,alueC Bimita de -os al ecranului grafic la msurtoare #-0.:-
2.99 1$Z
9ig% ,alueC Bimita de sus al ecranului grafic la msurtoare #- 0.29-
:.001$. 1ceasta tre*uie s fie mai mare dec&t cea de
-os cu min. 0.1.
Beasure
Temperature,
)osi*ilitatea termostatrii, none, 25, :0, :7{.. 1re sens
doar !n cazul echiprii cu accesoriu de termostatareZ
-verlaQ
ScreenC
Res !nseamn c msurtorile succesi"e "or fi afiate
suprapuse !n fereastr. Numai ultima msurtoare se
poate analiza #Banipulate$Z
&rint EverQ
CQcle,
S se printeze dup fiecare msurare sau nu.
'up setarea lor, parametrii pot fi sal"ai pentru utilizri ulterioare. 'up "alidarea
parametrilor, intrm !n fereastra de msurare cu +5. 1ezm pro*a !n incinta de lucru,
apoi apsm tasta D/1'. (surtoarea "a porni, "or trece inter"alele delaQ time i
lag time, dup care cur*a "a fi trasat pe ecran. )utem opri oric&nd msurtoarea cu
tasta /S..
'up terminarea msurtorii se "a e%ecuta calcularea acti"itiiZ rezultatul "a fi afiat
!n partea de -os a ecranului. )trelele de pe cur* arat punctele de calculaie. l
arat parametrul rate time, l1OS;l rata de "ariaie a a*sor*anei, iar l.;l rata de
"ariaie a concentraiei !n cazul utilizrii unui factor.
11:
'e aici putem printa datele sau le putem afia su* form de ta*el #cu tasta =ata Gist$.
.u tasta +2 #(anipulate$ o*inem dou noi opiuni de analiz. 0n su*meniul S%o.
Trac( putem deplasa o dreapt "ertical cu a-utorul tastelor sgei, e"alu&nd cur*a
astfel. Ginear Fit aeaz peste cur* o dreapt de regresie. Epiunea -riginal "a
reafia cur*a iniial.
APLICATII : 1. T)a.a)5a 4&53 !4)5 "5 5(a*1&a)5
'ependenta coeficientului de e%tincie de concentraia su*stanei dizol"ate este
un indiciu asupra e%istenei unor interaciuni !ntre moleculele dizol"ate, deci este o
preioas surs de informaii. 0n cadrul acestei lucrri se "a trasa, pentru o anumit
su*stan etalon, a crei concentraie este cunoscut, graficul dependentei e%tinciei
12:00:00 &I*1$I. %0'.0n
1
.
0
0
A
3
S
0
.
#
'
-
0
.
#
0
)
0
A0 120 sec
$9)0.0 8actor9#2'#.000
A3S/$90.11#0<4 A3S/in6
. /$9#)@.<)%1%4 U/:/in6
A3S 90.001<<$ F 0.2@1A%
Press -1AD =hen readyE
Data Mani- .lear Print Prev
:ist "!late Bra"h Data Screen
11C
de concentraie, adic / @ / #c$. 1cest grafic "a putea fi utilizat pentru , a)
determinarea concentra"iilor unor solu"ii necunoscute #preparate pornind de la
etalon$ , b) stabilirea domeniului de concentra"ii pentru care este valabil legea
Gambet80eer' c) eviden"ierea unor eventuale interac"iuni )ntre moleculele de solvit
5de e%emplu, moleculele de al*astru de metilen a"&nd o structura aromatic planar,
tind s se agrege !n soluie apoas, datorit forelor hidrofo*e$.
)lec&nd de la soluia etalon care are o concentraie cunoscut, se prepar !n
epru*ete diferite diluii, cu ap distilat, 5^, 10^, :0^, C0^, 50^, 70^.
)entru cazul !n care se lucreaz la o singur lungime de und, din meniul principal al
spectrofotometrului se apas tasta R. .u tasta ~(ode~ se alege modul fotometric de
msurare #a*sor*an$. ?aloarea lungimii de und se alege corespunztor culorii
soluiei, urm&rind diagrama culorilor complementare #dac etalonul este al*astru de
metilen se "a selecta p @ C90 nm $. )rima msurtoare se "a efectua cu ap distilat,
pentru a ine cont de "aloarea *lancului, se aeaz cu"a umplut cu sol"ent #ap$ !n
suportul de cu"e i se apas tasta 1=E n/DE. 'up ce se sal"eaz rezultatul, se
!nlocuiete cu"a care conine *lancul #ap distilat$ cu o cu" care conine pe r&nd,
soluiile preparate din etalon, sal"&nd de fiecare dat rezultatul. 0n final, toate "alorile
e%tinciilor "or aprea !n ta*el, care poate fi printat ulterior.
Se "a trasa graficul / @/#c$, in&nd cont c pentru c @ 0 / @ 0 #graficul !ncepe
din origine$, o*ser"&nd creterea e%tinciei odat cu concentraia soluiei. 1poi se "a
determina spectrofotometric e%tincia soluiei #soluiilor$ necunoscute, iar pe *aza
graficului se "a sta*ili concentraia acesteia. 'e asemenea se "a o*ser"a c poriunea
liniar a graficului reprezint domeniul de concentraii pentru care legea Bam*ert 8
Oeer este strict "ala*il.
2. D5(5)m3&a)5a !1&!5&()a233*1) "3=5)3(5*1) =1)m5 a*5 +5m1,*13&53 B& .1*4233
A3 B& .[&,5
Xemoglo*ina se poate afla !n soluii su* trei forme diferite, o%ihemoglo*ina,
deo%ihemoglo*ina i methemoglo*ina # fig.10.6$ . +ormele o%i i deo%i trec re"ersi*il
una !n cealalt !n funcie de presiunea parial a o%igenului !n soluie, au fierul
heminic su* forma +e
2V
i sunt acti"e din punct de "edere fiziologic !n procesul de
115
transport al o%igenului. +orma met apare su* aciunea unor o%idanti puternici , are
fierul heminic su* forma +e
:V
i este inacti" din punct de "edere fiziologic.
.onform fig. C. spectrele de a*sor*ie ale acestor forme difer !ntre ele , iar
coeficienii de e%tincie molari au "alori diferite !n funcie de lungimea de und.
)unctele de intersecie a cur*elor coeficienilor de e%tincie se numesc puncte
isos*estice, adic au aceeai a*sor*ti"itate pentru lungimea de und corespunztoare
lor. 0n cazul hemoglo*inei, un interes deose*it !l reprezint concentraia total de
hemoglo*in !n s&nge #hemoglo*inemia $ dar i proporia de methemoglo*ina din
hemoglo*ina total. .oncentraia hemoglo*inei !n s&nge #hemoglo*inemia$ se poate
determina con"ertind toate formele de hemoglo*in la methemoglo*ina, cu a-utorul
unei soluii a-uttoare de ferocianur de potasiu, dup care se efectueaz msurarea
fotometric a concentraiei la lungimea de und 5C0 nm, unde a*sor*ti"itatea molar
#coeficientul molar de e%tincie$ are "aloarea ma%im o @ 11
.
10
:
(
-1
cm
-1
.
+ie pro*a de s&nge care conine soluia de methemoglo*in diluat de d ori ft
din s&ngele proaspt recoltat. /%tincia pro*ei !n cu"e de 1 cm grosime "a fi,
/
X*
5C0
@ o
met
5C0

.
c , de unde rezult concentraia c
X*
@ /
X*
5C0
; o
met
5C0
, dar concentraia
real !n s&nge "a fi de d ori mai mare, adic
c
X*
@ # d ; o
met
5C0
$
.
/
X*
5C0
.
)roporia de methemoglo*in se calculeaz dup determinarea e%tinciilor soluiei
de hemoglo*in rezultat din hemoliza la dou lungimi de und diferite, prima este
525 nm unde formele o%i i met au un punct isos*estic, iar a doua la 5C0 nm unde
diferena de a*sor*ti"itate ale celor dou forme este ma%im #"ezi fig.10.6.$ .
'eoarece se lucreaz cu soluii saturate cu aer, !n care se poate considera c toat
hemoglo*ina acti" este su* forma o%i, cantitatea aflat su* forma deo%i se
negli-eaz. Ba 525 nm cele dou forme au aceeai a*sor*ti"itate, deci e%tincia se
poate scrie su* forma,
/
525
@ o
525
.c
X*,
iar la 5C0 nm , unde a*sor*ti"itile difer ,
/
5C0
@ o
o%i

5C0
. c
o%i
V o
met

5C0
. c
met
.
1poi se ine cont de faptul c concentraia !n forma o%i reprezint de fapt diferena
c
o%i
@ c
X*
8 c
met .
116
'ac se calculeaz rapoartele coeficienilor de e%tincie pentru cele dou forme de
hemoglo*in la 5C0 i respecti" 525 nm se o*ine,
o
met

5C0
; o
525
@ 1.091, respecti" o
o%i

5C0
; o
525
@ 1.75:.
in&nd cont de aceste "alori, dup un ir de calcule simple, relaia pentru
procentul de methemoglo*ina din pro* se poate scrie su* forma urmtoare,
(etX* ^ @ #2.6C9-1,151. /
5C0
; /
525
$ ,100 #1$
P)58a)a)5a .1*4233*1)> !3(3)5a 5N(3&!233*1) A3 8)595&(a)5a )594*(a(5*1).
Se pregtesc dou epru*ete curate i uscate. 0n prima se pipeteaz 5 ml de soluie
methemoglo*inizant #conin&nd fericianur de potasiu$ iar !n cealalt 5 ml de
soluie hemolizant # conin&nd amoniac 0,1^$ . 0n fiecare se adaug c&te 0,02 ml de
s&nge proaspt recoltat, utiliz&nd pipeta automat. .ele dou epru*ete se agit i se
las !n repaus circa 5 minute.'up acest inter"al !n prima epru*et "a aprea o
coloraie *run, caracteristic methemoglo*inei, iar !n a doua coloraia "a fi roie-
ru*inie, caracteristic o%ihemoglo*inei. 1ceste pro*e se "or plasa !n cu"e standard de
1 cm. )entru determinarea hemoglo*inemiei se "a citi e%tincia soluiei din prima
epru*et #care conine !ntreaga cantitate de hemoglo*in con"ertit la hemoglo*ina$
la p @ 5C0 nm, fa de soluia methemoglo*inizant ca *lanc. ?aloarea o*inut se
noteaz /
X*
5C0
. )rocentul de methemoglo*in se determin folosind ca *lanc soluia
hemolizant i apoi citind e%tincile soluiei din epru*eta a doua la 525 i respecti"
5C0 nm. ?alorile se noteaz /
525
respecti" /
5C0
.
Xemoglo*inemia se "a calcula conform formulei prezentat anterior
in&ndu-se cont de factorul de diluie d @ 5; 0,02 @ 251 i de "aloarea o
met

5C0
@ 11
.
10
-:
(
-1
cm
-1
. 1stfel,
C
X*
@ 22,9 /
X*
5C0
m(. #2$
(asa molecular a hemoglo*inei este 16 000 'a, o soluie milimolar conine
deci 1,6 g X*;100ml, deci concentraia de hemoglo*in se mai poate e%prima i
astfel,
.
X*
@ :6,9

/
X*
5C0
g;100ml s&nge. #:$
)rocentul de methemoglo*in se "a calcula cu a-utorul formulei #1$ .
117
Anterpretarea rezultatelor se face in&nd cont c hemoglo*inemia normal are
urmtoarele "alori, raportat la "&rsta su*iecilor umani,

1duli

+emei
Oar*ai
g; 100 ml

12 - 16
1C 8 19
(m

7,5 - 10
9,7 - 11,2

.opii
Nou- nscui
Sugari
)recolari
5colari
16 - 25
10 - 15
11 8 1C
12 -16
10 8 15,5
6,2 8 9,:
6,9 - 9,7
7,5 - 10
0n mod normal mai puin 0,: ^ din hemoglo*ina total se afl su* forma de
methemoglo*in, aceast "aloare crete semnificati" !n cazul unor into%icaii cu
su*stane o%idante cum ar fi nitrii, nitrai, chinone, nitri*enzen, anilina, etc. )recizia
metodei se !ncadreaz !n limitele de c 1^, chiar dac precizia aparatului este mult
mai *un. ?alorile necunoscute se pot determina i folosind modul de msurare
cantitati" a spectrofotometrului, dup ce !n preala*il a fost sal"at !n memorie cur*a
de etalonare. /ste interesant de "erificat dac rezultatele coincid.
119
I#. INTERACIUNEA RADIAIILOR CU MATERIA
11.1 CLASIFICAREA RADIAIILOR> SURSE DE RADIAII
D5=3&3235: Numim radiaie fenomenul fi$ic de transmitere la distan" a energiei
fr a fi nevoie de un mediu purttor. Studiul complet al unui fenomen radiati"
presupune in"estigarea mecanismelor *i a legilor care guvernea$, a$ producerea
lorZ *$ propagarea #care, conform definiiei, poate a"ea loc !n "id$ i c$ absorb"ia
energiei pe care o transport.
C*a.3=3!a)5a )a"3a233*1)
D48@ &a(4)a *1)> radiaiile pot fi corpusculare i electromagnetice.
)adia(iile cor#usculare sunt compuse din particule de substan" av#nd o
anumit energie cinetic. /le pot fi su*di"izate !n funcie de sarcina i masa
particulelor transportoare ale energiei, conform schemei de mai -os,

Dadiaii
corpusculare
Neutre
Ancxrcate
electric
Neutroni,
0
1
& .
)articule elementare nucleare,
neutre, cu numxr de masx 1.
)rotoni,
1
1
8, care sunt nuclee de hidrogen.
)articule
+
#
+1
0
$
Sunt compuse din pozitroni
#antiparticula electronilor$ rezultx din
dezintegrarea radiaocti"x de tip *eta plus sau
prin generarea de perechi.
)articule #
1
0
$
1cestea sunt electroni, rezultx din
dezintegrarea radiaocti"x de tip *eta minus,
poartx o sarcinx elementarx negati"e, numxr
de masx zero, masa lor fiind egalx cu 1;19C0
unitxwi atomice de masx.
)articule #
2
C
$
/le sunt nuclee de heliu, rezultx din
dezintegrarea radiaocti"x de tip alfa, poartx
doux sarcini elementare poziti"e iar masa lor
este egalx cu patru unitxi atomice de masx.
119
)adia(iile electromagnetice sunt emise *i absorbite )n natur sub form de
cuante #fotoni$. +otonii sunt particule fr mas de repaus, ce transport, fiecare, o
cantitate de energie ce poate fi calculat cu e%presia E J +, unde + @ constanta lui
)lancT #6,625
.
10
8:C
_s$, iar @ frec"ena radiaiilor. (asa lor de micare, m, se leag
de energie prin formula lui /instein, E J m!
2
, ! fiind "iteza luminii !n "id. .urent,
energia lor se e%prim !n electron-?oli, 15# J 1>E
.
1D
K1M
J .
Spectrul radiaiilor electromagnetice este e%trem de e%tins. 0n funcie de lungimile
lor de und !n "id # J
!
/

$, acesta se poate reprezenta ca !n figura de mai -os,

Y& =4&!235 "5 5&5),3a ()a&.81)(a(@> radiaiile se clasific !n radia"ii neioni$ante
i radia"ii ioni$ante. 'istincia dintre aceste este con"enional, i este legat de
efectele asupra materiei. 'ac se iau !n considerare energiile de ionizare ale

GAMMA GH
R\NTGEN G]H
ULTRA#IOLET GU#H
#I%I7IL G#ISH
INFRAROSU GIRH
IR a8)183a(
IR m5"34
IR B&"58S)(a(
m3!)14&"5
4*()a.!4)(5
TEL. MO7ILA
SATELIT
CUPTOARE
RADIO
T#
.!4)(5
m5"33
*4&,3
1D
1D
K11

1D
K1D

1D
KM

1D
KC

1D
KF

1D
KE

1D
K?

1D
KC

1D
K0

1D
K2

1D
K1

1
1D
K12

1D
0

1D
2

GmH
D><
.
1D
KE

D>F
.
1D
KE

120
principalilor atomi ce compun materia "ie #H, C, N i O$, pot fi considerate ionizante
radiaiile ce transport energie mai mare de 1:,6 e? pe particul, ceea ce corespunde,
!n cazul radiaiilor electromagnetice, la o lungime de und V 1DD &m. )e de alt
parte, anumite macromolecule *iologice pot fi ionizate la energii ce depesc ? 5#,
lungimea de und corespunztoare fiind V 2DD &m.
)entru simplificare, c&nd este "or*a de radiaiile electromagnetice, se consider
ioni%ante radia"iile din domeniile ] i , neioni%ante cele din domeniile radio'
microunde' AD, ?AS i =?.
Dadiaiile corpusculare au importan *iologic numai prin efectele lor ionizante.
S4).5 "5 )a"3a233. 1cestea pot fi naturale i artificiale.
=ursele naturale au fost singurele la care a fost e%pus *iosfera #i populaia
uman$ p&n !n epoca modern. 1cestea sunt la r&ndul lor cosmice i telurice.
&rincipala surs cosmic de radia"ii este soarele. 1cesta emite tot spectrul de radiaii
electromagnetice i toate radiaiile corpusculare.
'intre cele electromagnetice, numai o mic parte a-ung la suprafaa solului, fiind
a*sor*ite de cromosfera solar i atmosfera terestr. 1stfel, "aporii de ap i *io%idul
de car*on atmosferice a*sor* !n AD, iar stratul de ozon a*soa*e =?. )roporia, !n
procente, a fotonilor neionizani care a-ung la ni"elul mrii este de 2^ =?, C5^ ?AS
i 5:^ AD. +otonii ionizani sunt a*sor*ii !n proporie co"&ritoare de moleculele
straturilor atmosferei !nalte, pe care le ionizeaz d&nd natere ionosferei.
;adia"iile corpusculare emise de soare, care formeaz v#ntul solar, sunt, de
asemenea !mpiedicate s atig straturile inferioare ale atmosferei. .ele !ncrcate
electric, datorit !nclinrii a%ei )m&tului, intr o*lic !n c&mpul magnetic al acestuia
i, fiind supuse forei Borentz, se mic pe traiectorii elicoidale ce le direcioneaz
spre poli. 1ici efectele lor ionizante asupra atmosferei !nalte se manifest prin
apariia aurorelor polare. Neutronii nu a-ung p&n la )m&nt, timpul lor mediu de
"ia !n stare li*er, de apro%imati" 1000 s, fiind mult mai scurt dec&t durata
cltoriei lor de la Soare i planeta noastr. /i se "or transforma, fiecare, !ntr-un
proton i un electron, care "or crete numrul particulelor ionizante, !ncrcate
electric.
121
!lte surse cosmice de radia"ii ioni$ante sunt furnizate de acti"itatea stelar. .ele
mai importante sunt ra$ele cosmice, formate din nuclee atomice #mai ales protoni$ de
mare energie care, prin coliziune cu nucleele gazului atmosferic produc -er*e de
particule secundare ionizante. 1cestea din urm sunt atenuate odat cu str*aterea
atmosferei su*-acente. 'in acest moti", efectele cresc cu altitudinea, du*l&ndu-se cu
fiecare cretere cu 1500 m a acesteia.
=ursele telurice, sunt reprezentate de izotopii radioacti"i din atmosfer i scoar.
Antensitatea radiaiilor emise de acestea depind de localizarea geografic. nonele
aflate !n "ecintatea unor zcminte de uraniu, de e%emplu, "or fi afectate de ni"ele
de radiaie mai mari.
=ursele arti*iciale sunt construite prin acti"itate uman. /%punerea la radiaiile
emise de acestea poate fi general #nedescriminatorie$, profesional, medical
#e@ploratorie *i terapeutic$, sau accidental.
E@punerea general include toate persoanele aflate !n "ecintatea unei surse de
radiaii neionizante #lmpi, emitore radio, cuptoare, etc.$ sau ionizante #generatoare
de raze m, sau centrale nucleare$.
E@punerea profesional afecteaz personalul care, prin natura meseriei,
manipuleaz dispoziti"e sau materiale emitoare de radiaii #operatorii staiilor de
radio, medicii radiologi, sau profesionitii industriei de e%tracie, prelucrare i
utilizare a materialelor radioacti"e$.
E@punerea e@ploratorie #diagnostic$ i terapeutic este consecina acti"itii
medicale i are importan !n cazul utilizarrii radiaiilor m i . Dadiografiile i
radioscopiile de orice tip reprezint e%puneri semnificati"e la radiaii ionizante.
/%puneri importante se produc !n Dentgenterapia sau co*altoterapia afeciunilor
tumorale.
E@punerea accidental are loc !n cazul e%ploatrii defectuoase a surselor
artificiale de radiaii. /a afecteaz, !n primul r&nd, personalul din "ecintate i apoi
restul populaiei.
11.2. E=5!(5 a*5 )a"3a233*1) &531&39a&(5: E=5!(5*5 !+3m3!5 a*5 )a"3a233*1)
&531&39a&(5
122
/nergia a*sor*it de ctre gruprile cromofore ale moleculelor poate antrena
modificri #reac"ii$ fotoc%imice ale acestora. +aptul este comun i !mpiedicarea lui
poate fi regsit !n pstrarea !n flacoane *rune sau opace a unor medicamente sau
*uturi #*ere, "in$. 0n lumea "ie, plantele i algele transform curent energia
luminoas !n energie chimic stocat !n compui organici de sintez.
/%ist dou legi ale fotoc%imieiC 1$ 1n foton interac"ionea$ cu o singur
molecul i 2$ Xn urma interac"iunii, energia fotonului este absorbit integral.
=e procese fotoc%imice sunt responsabile mai ales radia"iile =?, a*sor*ite de
du*lele legturi. recerea electronilor pe or*italii de antilegtur #$ este echi"alent
cu ruperea acesteia urmat de posi*ilitatea refacerii !n alte modaliti. .a urmare, pot
a"ea loc unul din fenomenele,
- Defacerea ei !n alt poziie #migrarea$Z
- Azomerizarea cis-transZ
- 1diia unui su*stituent, !n general 8EX sau 8XZ
- 'imerizareaZ
- .iclizarea intern.
!supra macromoleculelor proteice, transformrile fotochimice susmenionate se
manifest mai ales asupra aminoacizilor aromatici i a sec"enei legturilor peptidice.
/le au ca efect schim*area structurii primare #co"alente$ i, consecuti" a celor
secundare, teriare i cuaternare. Dezultatul este apariia unor compui denaturai,
lipsii de funcie *iologic sau cu funcia alterat.
Bacromoleculele de aci$i nucleici sufer efecte fotochimice importante datorit
a*sor*iei radiaiilor =? de ctre du*lele legturi ale *azelor azotate. 'imerizrile i
trimerizrile de *aze, ciclizrile sau adiiile la acestea !mpiedic adoptarea unei
geometrii corecte a heli%urilor de acizi nucleici. .onsecinele *iochimice rezid !n
imposi*iliatea de recunoatere a acestora de ctre enzimele implicate !n citirea,
utilizarea i transmiterea informaiei genetice.
E=5!(5*5 31*1,3!5 a*5 )a"3a233*1) &531&39a&(5
La &3v5* "5 1),a&3.m, procesele fotochimice pot fi implicate !n dou procese
fiziologice,
12:
a$ +otoconversia, prin care are loc tranformarea energiei luminoase !n energie
chimic. .el mai important este fotosinte$a, realizat de ma-oritatea plantelor "ezi i
de microorganismele plactonului oceanic.
*$ +otodetec(ia, !n timpul creia energia luminoas este tratat ca semnal
informatic i mi-locete orientarea i !ncadrarea organismelor !n mediu. /a este
!nt&lnit de la protozoare la plante i animale. 'intre acestea, numai animalele au
ochi - organe specializate !n o*inerea unor imagini 3fotografice4 ale mediului
!ncon-urtor.
E=5!(5*5 *1!a*5> (3.4*a)5> ale radiaiilor neionizante depind de domeniul spectral
!n care sunt plasate. oate, c&nd sunt a*sor*ite, produc !nclzirea esuturilor,
profunzimea de ptrundere scz&nd odat cu scderea lungimii de und.
1ndele utili$ate )n telecomunica"ii au efecte incerte. .ele cu lungimi de und
mari nu au fost incriminate !n producerea unor afeciuni specifice. =ndelor din
domeniul celor ultrascurte, utilizate !n telefonia mo*il, le-a fost atri*uit, fr a fi
indu*ita*il, creterea riscului de tumori cere*rale !n "ecintatea urechii la care este
folosit telefonul.
Bicroundele au efect caloric e%primat i de profunzime, prin punerea !n oscilaie
a dipolilor de ap, cea ce antreneaz creterea energiei de agitaie termic din mediu.
+aptul i-a gsit aplicaii practice at&t !n *alneofizioterapie #!n tratarea afeciunilor
degenerati"e, c&nd !nclzirea local i "asodilataia consecuti" au efecte *enefice$
c&t i gospodreti - cuptoarele cu microunde.
;adia"ia din domeniul AD produce !nclzirea local, profunzimea lor de
ptrundere !n esuturi fiind de c&i"a milimetri. 5i acestea sunt a*sor*ite mai ales de
apa tisular, dar i de macromolecule, prin e%citatrea micrilor de "i*raie ale
atomilor.
Andiferent de mecanismul !nclzirii, creterea e%agerat a temperaturii produce
denaturarea ire"ersi*il a proteinelor i a structurilor celulare cu manifestrile clinice
curente ale arsurilor.
;adia"ia vi$ibil nu are efecte patologice, ea fiind implicat !n fotodetecie i
fotocon"ersie. otui, dac este focalizat pe zone reduse, antreneaz arsuri tisulare,
12C
cum este cazul pri"irii cu ochiul li*er a soarelui !mpre-urare !n care se produc arsuri
de retin.
;adia"ia =? are cele mai multe efecte fotochimice, care se constat p&n la
profunzimi de 2- : mm. )rotecia !mpotri"a lor se face fiziologic prin pigmentarea
#*ronzarea$ pielii. 1ceasta poate fi determinat genetic la populaiile din zonele
tropicale, sau poate fi indus de e%punerea la =? a su*iecilor cu tegumente de
nuane deschise.
0n doze mici, radiaiile =? produc *ronzarea prin transformarea tirozinei !n
melanin, pigment a*sor*ant al acestora. 'ozele mari, a*sor*ite !n timp scurt, produc
fenomene similare arsurilor termice, cauza fiind denaturarea proteinelor. /fectul
*acteriostatic al dozelor mari de =? se e%plic mai ales prin !mpiedicarea
multiplicrii microorganismelor, ca o consecin a interaciunii cu acizii nucleici.
'ozele moderate i repetate de ultra"iolete au asupra tegumentelor, !n timp mai
!ndelungat, efecte carcinogene. #umorile maligne ale esuturilor epiteliale se
numesc carcinoame i o *un parte a celor cutanate, la "&rstnici, se datoresc
radiaiilor =?$. 5i acestea sunt consecine genetice rezultate din modificarea acizilor
nucleici.
11.0. INTERACIUNEA RADIAIILOR IONI%ANTE CU MATERIA #IE
Studiul efectelor radiaiilor ionizante asupra materiei "ii este mai complicat i
presupune parcurgerea mai multor etape,
- 0nelegerea mecanismelor de transfer a energiei lor ctre mediu i a producerii
ionizrilor care reprezint interac"iunea lor primar cu substan"a.
- 'escifrarea efectelor radioc%imice produse de ionizri. 1ceste efecte pot a"ea
loc fie datorit interac"iunii directe cu macromoleculele sistemului "iu, fie ca o
consecin a modificrilor induse de radiaii !n sol"entului apos, c&nd "or*im de
interac"iuni indirecte.
- ransformrile radiochimice sunt urmate, !n final de efecte biologice.
I&(5)a!234&5a 8)3ma)@ !4 .4.(a&2@ a )a"3a233*1) !1)84.!4*a)5 B&!@)!a(5
125
)rincipalul mecanism de transfer a energiei lor ctre mediul str*tut este acela de
ionizare a atomilor i moleculelor su*stanei. ;esponsabile de ioni$ri sunt
interac(iunile electrostatice dintre particul *i electronii atomilor.
)entru o particul, scderea energiei ei i creterea energiei mediului este
caracterizat prin transferul linear de energie, TLE. 1cesta reperezint energia
pierdut de particul pe fiecare unitate de lungime a traiectoriei sale.
'ac o particul face I ionizri pe unitatea de lungime, i energia medie pierdut
de la iniierea unei ionizri p&na la producerea urmtoarei
,
a"em, TLE J I.
0ntruc&t !ntre dou ionizri particula produce i un numr de e%citri ale atomilor,
este mai mare dec&t energia de ionizare. 1stfel, pentru aer i ap "alorile sunt de 02
5# i 0< 5#, respecti".
TLE crete cu ptratul sarcinei particulei i concentraia electronilor din mediu
dar nu are o "aloare constant de-a lungul traiectoriei. /a scade cu creterea
ptratului "itezei particulei deoarece, la "iteze mari ale acesteia, timpul c&t are loc
interaciunea cu electronii este mai redus. =nitatea curent utilizat, la str*aterea
mediilor apoase, este
T5#
/m.
'ac particula str*ate o su*stan compus dintr-un element pur, !n "ecintata
fiecrui punct al traiectoriei este "ala*il e%presia,
TLE
E
N
^
9
v
%& = =

d
d
2
unde dE este pierderea de energie pe distana dNZ ^ - o constant ce depinde de
natura particulei, a mediului i unitile de msur aleseZ 9 ; numrul de sarcini
elementare ale particuleiZ " - "iteza particulei !n punctul datZ % - numrul de ordine ai
atomilor mediuluiZ & ; numrul de atomi pe unitatea de "olum a mediului
#concentraia atomilor mediului$.
0ntruc&t % & J &
5
, concentraia electronilor !n mediu, formula se poate rescrie
TLE ^
9
v
& =

2
e
=ltima e%presie este util pentru calcularea "alorii TLE !n medii ce conin
amestecuri moleculare i pentru care &
5
este uor accesi*il calculului.
126
'ac "om considera dou particule de aceeai energie cinetic, una grea i alta
uoar, prima "a a"ea o "itez mai mic dec&t a doua. 'in acest moti" particulele
grele au un TLE mai mare dec&t cele uoare de aceeai energie.
)ri"ind din punctul de vedere a lungimii parcursului, particulele grele, pierz&nd
mai mult energie pe unitatea de lungime, au parcursuri mai scurte, pe c&nd cele
uoare str*at !n mediu distane mai mari. 'ac o particul are energie E i, pentru
!ntreg parcursul de lungime ", are un B/ mediu, notat TLE , aceste mrimi se
leag cu relaia simpl,
"
E
TLE
=
0n plus, particulele cu mas mare #alfa i protoni$, nu ricoeaz la ciocnirile cu
electronii, a"&nd traiectorii rectiliniiZ pe c&nd cele uoare #electronii$ dup fiecare
ciocnire cu un electron din mediu !i schim* direcia, prezent&nd traiectorii su*
forma unor linii fr&nte.
C1&.5!3&25 m5"3!a*5
.articulele al*a #cu sarcin mare, 9 J L2, i mas mare m J < 4.a.m.$ prezint un
pericol redus !n cazul iradierii e@terne, ad&ncimea lor de ptrundere nedepind
stratul cornos al epidermei. E astfel de particul cu energia de 5,: (e? #(ega
electron-?oli$ are un B/ tisular mediu de 1:0 He?;m i ptrunde la o
profunzime de ma%imum C0 m. Hradierea intern ce poate a"ea loc datorit
a*sor*iei digesti"e sau respiratorii a unor radionuclizi alfa-emitori duce la iradieri
importante ale celulelor "ecine locului unde se fi%eaz i se acumuleaz atomii
radioacti"i.
.rotonii #9 J L1 i m J 1 4.a.m.$ se comport apro%imati" similar !ntruc&t,
conform formulelor precedente, au B/ de 16 ori mai mic iar lungimea traiectoriei de
16 ori mai mare.
.articulele beta #electroni cu 9 J K1 i m J
1
/1C?D 4.a.m.$, datorit masei foarte
mici au "iteze e%trem de mari, ceea ce conduce la "alori de TLE foarte reduse, cu
parcursuri !n esuturi mult mai lungi. /le pot produce consecine at&t datorit iradierii
e%terne c&t i celei interne. Ba energii de zeci de (e?, particulele *eta au parcursuri
!n esuturi de 1 ... 2 cm.
127
I&(5)a!234&5a 8)3ma)@ a &54()1&3*1) !4 .4.(a&2a
Nea"&nd sarcin electric, neutronii nu interacioneaz electrostatic cu
componentele atomilor, fiind, prin sine, fr proprieti ionizante. /i produc ionizri
indirect, datorit interaciunilor cu nucleele atomice. 1ceste interaciuni sunt
difu$iunea i captura neutronic.
3i*u%iunea neutronilor este consecina fenomenului de ciocnire mecanic dintre
acetia i nucleele atomilor, !n urma cruia nucleele ciocnite #intele$ preiau parte din
energia cinetic a neutronilor #proiectilele$. 0n urma unei succesiuni de ciocniri,
neutronul !i pierde progresi" energia cinetic. .um !n mediile *iologice mai mult de
-umtate de nuclee sunt de hidrogen, iar legile ciocnirilor elastice arat c energia
preluat de int crete cu scderea masei acesteia, protonii de energie mare re$ulta"i
din cicniri vor fi principalii responsabili de producerea ioni$rilor. 0ntruc&t
pro*a*ilitatea ciocnirii nucleelor este destul de mic, parcursurile neutromilor !ntre

&
8

S 4 . ( a & ( a
r a s e e l e i o n i z a r i l o r p o d u s e d e
p r o t o n i i c i o c n i wi d e n e u t r o n i . a p t u r x n e u t r o n i c x
129
dou ciocniri sunt lungi, ceea ce e%plic marea lor putere de penetrare. )e de alt
parte, masele proiectilului #neutron$ i intei #proton$ sunt aporoape egale iar
neutronul ricoeaz dup fiecare ciocnire, efectele ionizante fiind difuze. 'e
e%emplu, !n ap, un neutron cu energia de 2 (e? i-o reduce la 1 e? dup 19
ciocniri, !n medie.
&a#tura neutronic este o reacie nuclear produs de neutronii leni, cu energii
inferioare a 1He?. 0n urma capturii rezut un nucleu izotopic de mas superioar cu 1
u.a.m., care este !n stare e%citat. 'eze%citarea lui se produce prin emisia unei radiaii
. Schema general a transformrilor este,
%
A
%
A
] & _ +
+
0
1 1
V
#radioacti"$
foton

%
A
_
+1
#sta*il$
+otonii , sunt !n continuare responsa*ili de ionizri prin mecanisme ce "or fi
sumarizate !n continuare.
I&(5)a!234&5a =a.!3!1*5*1) "5 =1(1&3 ] A3 !4 .4.(a&2a.
'ac un fascicol de radiaie m sau , monocromatic #fotoni monoenergetici$
str*ate normal un strat de su*stan, la ieire el se "a gsi atenuat. Not&nd I
o
intensitatea radiaiei incidente, I intensitatea celei emergente pe aceeai direcie, i cu
N grosimea stratului se demonstreaz teoretic i se constat e%perimental c atenuarea
fascicolului respect legea,
I I
N
=

o
e

Z e fiind *aza logaritmilor, iar coeficientul de atenuare

linear. Se mai constat c depinde at&t de energia fotonilor c&t i de natura
materialului str*tut.
)roprietile atenuante ale unui material fa de o radiaie cu fotoni de energie
dat se caracterizeaz prin grosimea de )n:umt"ire #%
1;2
$ care este grosimea stratului
care reduce intensitatea radiaiei emergente la
I
o
/2. 0nlocuind !n formul i
logaritm&nd am*ii mem*ri ai egalitii se o*ine,
129
ln
/
1
1 2
2
= N
Z
de unde rezult relaia dintre grosimea de !n-umtire i coeficientul de atenuare
linear,
N
1 2
2
/
ln
=

'ac se "or face msurtori pe alte direcii dec&t cea a fascicolului incident se "or
gsi intensiti de radiaii diferite de zero pentru fotoni de energii mai mici sau pentru
electroni accelerai. 1ceasta arat c interaciunile a radiaiilor ] i cu su*stana
sunt comple%e, !n urma acestora rezult&nd radia"ii difu$ate, unele )mpr*tiate iar
altele secundare. 0nseamn c reducerea intensitii fascicolului #atenuarea lui$ are
loc at&t prin absorb"ia energiei lui de ctre su*stan c&t i prin difu$ia energiei pe
alte direcii i su* alte forme dec&t cele ale fotonilor fascicolului incident. /nergia
transportat de fascicolul incident #`3&!H se "a regsi integral, distri*uit !ntre cea a
fascicolului emergent #`5m,$, energia a*sor*it de su*stana str*tut #`a.,
transferat mediului$ i energia radiaiei difuzate #`"3=$. =ltimele dou reduc
intensitatea #energia$ fascicolului emergent i, cu c&t reprezint o fraciune mai mare
din aceasta, coeficientul de atenuare linear #$ are "aloarea mai mare.
'ei sunt mai multe tipuri de interaciuni care reduc intensitatea fascicolelor de
fotoni m i , de importan practic sunt numai trei, efectul fotoelectric, efectul
Compton i generarea de perec%i #efectul de materiali$are$.
5*ectul *otoelectric se manifest prin absorb"ia integral a energiei unui foton de
ctre un electron al unui atom. /nergia lui se distri*uie integral !ntre energia
necesar e%traciei din atom i energia cinetic a electronului e%pulzat
#fotoelectronului$. 0n acest caz, efectele ioni$ante se datoresc fotoelectronilor, care
`inc @ `emg V `a*s V `dif
`inc `emg
`a*s
`dif
Su*stanwx
1:0
se comport similar radia"iei . /nergia lor "a fi a*sor*it de mediul str*tut. )e de
alt parte, atomii e%citai prin e%pulzarea unui electron din pturile inferioare re"in !n
stare fundamental prin tranziii ale celor din pturile superioare. 1stfel de tranziii
sunt responsa*ile de emisia unor radia"ii secundare de fluorescen" #m !n cazul
atomilor grei sau =? !n cazul celor uori$. /nergia radiaiilor astfel difuzate este, !n
general, negli-a*il.
1tenuarea prin efect fotoelectric a fascicolului se descrie cantitati" prin
coeficientul de atenuare linear
=
, care crete cu pro*a*ilitate producerii efectului.
1ceasta depinde pronunat de energia fotonilor incideni i de natura atomilor int.
Efectul fotoelectric este deosebit de important )n ca$ul fotonilor de energii reduse
care strbat materiale ce con"in elemente grele.
A8*3!a233*5 8)a!(3!5 ale efectului fotoelectic se regsesc !n alegerea *i
construc"ia filtrelor pentru realizarea imaginilor radiografice. 0ntruc&t nu sunt
potri"ite e%plorrii radiologice de profunzime, radiaiile cu fotonii de energii mici
#su* 50 He?$ sunt atenuate !n fasciculele policromatice emise de tu*urile Dentgen
cu filtre din cupru. )e de alt parte, contrastul optim al imaginilor radiografice se
o*ine !n domeniul 60 ... 120 He?, unde efectul fotoelectric !nc este manifest.
5*ectul &om#ton apare la ciocnirea dintre un foton *i un electron #considerat
liber sau slab legat$. Dezult un electron de recul' care primete o parte din energia
fotonului incident i un foton difu$at, cu energie #i frec"en$ mai mici dec&t a celui
incident. 1cest efect este semnificati" ca importan c&nd energiile de legare a
electronilor !n atom pot fi considerate negli-a*ile fa de energiile fotonilor incideni.
0n urma ciocnirii, energia fotonului incident se regse*te )n energia transferat
electronului de recul *i energia fotonului difu$at. /lectronii de recul au energii
suficiente pentru a produce ionizri similare razelor *eta, iar fotonii difuzai, !n
funcie de energia pe care o mai au, pot produce fie alte efecte .ompton fie efecte
fotoelectrice.
'ac !n cazul efectului fotoelectric aproape !ntreaga energie pierdut de fascicolul
incident este transferat su*stanei a*sor*ante, !n cazul efectului .ompton o parte
este emis de su*stana tra"ersat su* form de radiaie !mprtiat su* unghiuri mari
fa de cea incigent. 0n mediul *iologic, energia radiaiei difuzate #`dif$ este de C ...
1:1
5 ori mai mare dec&t energia transferat electronilior i a*sor*it #`a*s$ !n zona
str*tut de fascicol. .a urmare, efectele iradierii prin radiaia !mprtiat se "or
manifesta p&n departe de zona intit de fascicolul incident.
1tenuarea fascicolului incident se caracterizeaz cantitati" printr-un coeficient de
atenuare linear pe care-l "om nota
C
. 1cesta scade lent odat cu creterea energiei
fotonilor dar crete e%primat odat cu numrul de electroni din unitatea de "olum
#densitatea materialul$. 1stfel se e%plic proprietile a*sor*ante deose*ite ale
metalelor grele, cum este plum*ul.
>eanerarea de #erechi are loc atunci c#nd un foton de energie )nalt
traversea$ c#mpul electrostatic al unui nucleu. 'ac acest c&mp este destul de
intens, energia fotonului se 3materiali$ea$4, prin apari"ia unui electron #5
K
$ *i a
unui po$itron #5
L
, antiparticula electronului$. (aterializarea nu poate a"ea loc dec&t
dac energia fotonului depete de dou ori energia de repaus a unui electron #0,511
(e?$. )ragul teoretic al energiei fotonului este + a 2
.
0,511 @ 1,022 M5#. 0n
practic, atenuarea prin generare de perechi depete !n amploare celelalte fenomene
la energii cu mult mai mari, ne&nt&lnite !n practica medical, #5 (e? pentru plum* i
25 (e? pentru ap i car*on$.
'iferena dintre energia fotonului i cea necesar materializrii, este regsit ca
energie cinetic a electronului i pozitronului. 1ceast energie este a*sor*it de
mediu #`a*s$, prin ionizri similare celor produse de radiaia .
Spre deose*ire de electron, "iaa pozitronului este scurt. 'up !ncetinirea
responsa*il de ionizri, la !nt&lnirea unui electron, perechea pozitron - electron
sufer reac"ia de ani%ilare, energia particulelor transform&ndu-se !n dou cuante ,
fiecare cu + J 0,511 (e?. 1ceste cuante sunt emise pe o direcie oarecare, !n
sensuri opuse, i intr !n componena energiei difuzate #`"3=$. +otonii de anihilare
pot produce, !n alte zone dec&t cea supus iradierii primare, efecte fotoelectrice sau,
mai ales, .ompton.
'ac ne referim numai la pierderea de energie a fascicolului incident prin
generarea de perechi, aceasta se caracterizeaz prin coeficientul de atenuare linear
1:2

8
. )ierdere se datorete !n special a*sor*iei de ctre mediu, energia fotonilor
difuzai fiind o fraciune redus din cea a fotonilor ce a generat perechea.
C15=3!35&(4* ,*1a* "5 a(5&4a)5 *3&5a)@ "a fi suma celor trei, corespunztoare
fiercruia dintre efecte,
@
=
V
C
V
8

.ontri*uia independent la scderea energiei radiaiei incidente depinde de energia
fotonilor i de mediul str*tut. 0n ap, fasciculele de fotonii cu diferite energii sunt
atenuai dup cum urmeaz,
+ < ?D T5# ;;;;;;;a predomin efectul fotoelectric
?D T5# < + < 2D M5# ;;;;;;;a predomin efectul Compton
+ > 2D M5# ;;;;;;;a predomin generarea de perec%i
Andiferent de efectul considerat, radiaiile m i , prin natura lor au proprieti
ionizante directe sla*e. Aonizrile importante sunt indirecte i se datoresc electronilor
accelerai care rezult !n urma fiecruia din cele trei efecte discutate mai sus.
11.<. EFECTELE RADIOCHIMICE ALE RADIAIILOR IONI%ANTE
)rocesele chimice care au loc dup ionizarea unor molecule de ctre radiaii se
numesc efecte radioc%imice. 1a cum se "a "edea, ionizarea conduce la ruperea
legturilor co"alente simple cu formarea de radicali li*eri. 1cetia sunt fragmente de
molecul a"&nd electroni ne&mperecheai #celi*atari$, ceea ce !i face e%trem de
reacti"i. Deaciile date de radicalii li*eri sunt responsa*ile de toate consecinele
chimice pe care le au radiaiile ionizante asupra sistemelor "ii.
0n ecuaiile chimice prezena electronului n&mperecheat se semnaleaz cu un
punct plasat !n dreapta sus a radicalului, de e%emplu EX
.
#radical li*er o%idril$ sau X
.
#radical hidrogen$.
Ba iradierea unui sistem "iu, "or suferi ionizri at&t moleculele sol"entului apos
c&t i moleculele lui *iologice. 1pa "a suferi procesul de radioli$, radicalii li*eri
rezultai "or da reacii care se "or repercuta, !n moduri "ariate asupra
macromoleculelor sistemului. Dealiz&ndu-se prin intermediul sol"entului, acestea se
1::
numesc efecte radioc%imice indirecte. .onsecinele ionizrii macromoleculeor se
numesc efecte radioc%imice directe.
E=5!(5*5 )a"31!+3m3!5 3&"3)5!(5 a*5 )a"3a233*1) 31&39a&(5
Ra"31*39a a853
Aonizarea unei molecule de ap are loc dup reacia
X
2
E ------[ X
2
E
V
V e
8
Ba impactul cu particula ionizant electronul, de mas mai mic, "a a"ea o "itez
mai mare i "a fi proiectat departe de ionul de ap. 'in acest moti" ionii "or rm&ne
!n "ecintatea traiectoriei particulei iar electronii !mprtiai mai la distan.
+iecare din produii de ionizare este insta*il transform&ndu-se conform reaciilor,
X
2
E
V
------[ X
V
V EX

.
#l&ng traiectorie$
e
8
V X
2
E ------[ X

.
V EX
8
#la distan$
P)3&!38a*5*5 )5a!233 a*5 !1m84A3*1) "5 )a"31*39@
Dadicalii li*eri formai se pot recom*ina oricum, dar distri*uia lor spaial este
puin propice re-formrii apei,
X

.
V EX

.
------[ X
2
E
0n schim*, radiacalii li*eri de acelai tip se pot com*ina !ntre ei,
X

.
V X

.
------[ X
2
#la distan$
EX

.
V EX

.
------[ H
2
O
2
#l&ng traiectorie$
'ac hidrogenul molecular este neto%ic, apa o%igenat #X
2
E
2
$ este un agent
o%idant foarte puternic, ce produce denaturarea ire"ersi*il a proteinelor.
S-ar prea c efectele denaturante rm&n cantonate l&ng punctele de ionizare, dar
nu este aa din cauza prezenei o%igenului molecular !n mediile *iologice. Dadicalii
X
.
dau lanuri de reacii !n urma crora o%igenul este fi%at ca ap o%igenat,
X

.
V E
2
------[ HO
2
.
#radical pero%id de hidrogen, o%idant e%trem de
puternic$
2 XE
2
.
------[ H
2
O
2
V E
2
1:C
X

.
V E
2
------[ HO
2
.
s.a.m.d...
Dadicalii hidro%il i pero%id pot fi responsa*ili i de o%idarea unor grupri din
structura moleculelor organice, mai ales a celei 8SX, cu formarea unor puni 8S8S 8,
dup reaciile generale,
D
1
8SX V XS8D
2
V 2 EX

.
------[ D
1
8S8S8D
2
V 2 X
2
E
D
1
8SX V XS8D
2
V 2 XE
2
.
------[ D
1
8S8S8D
2
V 2 X
2
E
2
Dezultatul acestor reacii este apariia !n timp a unor macromolecule cu structuri
primare alterate i modificate ca funcie.
E=5!(5*5 )a"31!+3m3!5 "3)5!(5 a*5 )a"3a233*1) 31&39a&(5
(oleculele organice, la fel ca i moleculele de ap pot fi ionizate la ni"elul unei
legturi, urmarea fiind ruperea ei i apariia unor radicali li*eri organici suscepti*ili
de a se com*ina !ntre ei i;sau cu cei rezultai din radioliza apei. 'ac lum cazul a
numai dou molecule organice afectate rezult C radicali li*eri,
Da8D* ------[ Da
.
V D*
.

Dc8Dd ------[ Dc
.
V Dd
.

1ceti radicali se pot lega !ntre ei !n orice com*inaie i, !n plus, fiecare poate
adiiona radicali X

.
sau EX

.
din mediul apos. Dezult c ansa de refacere a
moleculelor originale este foarte mic !n raport cu cea de apariie a unora modificate.
1desea, !n cazul unor molecule comple%e, e%cesul de energie nu rm&ne localizat i
s rup legtura, ci se distri*uie la mai multe legturi sau se transfer de la o
molecul la alta. 1ceste reacii de transfer a energiei nu sunt imediate. =neori strile
acti"e persist mai multe ore sau zile i reaciile radiochimice se prelungesc mult
dup iradiere. 1stfel de post-efecte sunt foarte e"idente la proteine i acizi nucleici.
E%igenul din mediu produce pero%idarea !n lan a macromoleculelor, similar
mediului apos, conform reaciilor,
1:5
Da8X V EX
.
------[ Da
.
V X
2
E
Da
.
V E
2
------[ RaO
2
.
#radical pero%id organic$
D*8X V DaE
2
.
------[ RaOOH V D*
.

D*
.
V E
2
------[ RO
2
.
Dc8X V D*E
2
.
------[ ROOH V Dc
.
Dc
.
V E
2
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
s. a. m. d. . . . .
S-a putut, pornind de la o singur ionizare, s se pun !n e"iden formarea unui
lan de 70 de pero%izi organici.
A!234&5a a.48)a 8)1(53&5*1)
)roteinele sunt denaturate prin fragmentri, polimerizri, pero%idri i formri de
puni disulfidice. /fectele cele mai noci"e asupra funciilor celulare sunt produse prin
inacti"area enzimelor.
A!234&5a a.48)a a!393*1) &4!*53!3
(odificrile radiochimice ale acizilor nucleici sunt foarte comple%e. 1lterarea
structurii chimice a *azelor azotate produce disocierea du*lelor heli%uri datorit
imposi*ilitii de asociere a *azelor !n perechi. )e de alt parte, fiecare dintre
lanurile du*lului heli% poate suferi ruperi. +rec"ena ruperilor unui singur lan este
de 10 ori mai mare dec&t cea a ruperii !n acelai loc a am*elor lanuri. +aptul are
importan fiindc !n primul caz moleculele pot fi reparate, pe c&nd !n al doilea nu.
1a se e%plic sensi*ilitatea crescut la radiaii a organismelor haploide #cu stocare a
informaiei genetice !ntr-un singur lan 1N'$ fa de cele diploide #c&nd stocarea se
face !ntr-un du*lu heli%$.
Duperile, chiar pe un singur lan, dac nu sunt reparate rapid, pot conduce la
ramificri cu adoptarea de structuri tridimensionale, nerecognosci*ile *iochimic.
1:6
'egradarea radiochimic a acizilor nucleici este responsa*il de efectele asupra
sintezelor celulare #alturi de inacti"area enzimelor$ i, !ntr-o faz ulterioar, de cele
genetice.
11.?. EFECTELE 7IOLOGICE ALE RADIAIILOR IONI%ANTE
1pariia efectelor *iologice la organismele e%puse radierii este rezultatul
desfurrii !n timp a trei faze,
+a%a reac(iilor elementare, foarte scurt, de ordinul a 10
815
secunde, care
corespunde la a$ interac"iunea primar care are ca re$ultat e@citarea *i ioni$area
moleculelor i *$ la reac"iile radio8c%imice prin care apar radicali liberi *i rupturi
moleculare. /a nu este influenat de temperatur.
+a%a reac(iilor chimice, care dureaz de la c&te"a secunde la mai multe ore. 0n
timpul ei, radicalii liberi *i moleculele e@citate reac"ionea$ )ntre ele *i cu alte
molecule.?iteza acestor reacii crete cu temperatura, din care cauz se mai numete
fa$a termosensibil.
+a%a modi*icrilor *unc(iilor <i structurilor celulare corespunde efectelor
manifeste ale bolii de iradiere. 1cest stadiu *iologic poate dura de la c&te"a ore la
mai muli ani. #Su*iecii puternic iradiai !n noaptea accidentului de la .erno*&l au
sucom*at p&n a doua zi la amiaz, pe c&nd unele dintre "ictimele *om*ardamentului
de la Xiroima au supra"ieuit cu simptome manifeste 10 ... 20 de ani.$
Studiile e%perimentale asupra culturilor de celule iradiate cu doze creasctoare de
radiaii au condus la urmtoarele concluzii pri"ind unele funcii celulare,
F4&!23a !5*4*a)@ D195 m3!3 D195 ma)3
&re<terea accelerat diminuat
1ito%a )ncetinit oprit
1oatea celular tardiv precoce
/ste necesar o precizare a sensului terminologiei utilizate pentru moarte celular.
Boartea celular precoce !nseamn c !n urma iradierii mor chiar celulele iradiate.
Boartea celular tardiv caracterizeaz populaia care este condamnat s dispar la
tentati"a de reproducere a descendenilor de generaia a AA-a, a AAA-a, a A?-a . . .etc.. /a
semnific faptul c celulele iradiate )*i pierd capacitatea de reproducere indefinit.
1:7
)rimele constatri asupra radiosensi*ilitii au fost fcute de 75),1&35;
T)31&"5a4 !n 1906. /l a enunat o 3lege4 care sumarizeaz caracteristicile celulelor
suscepti*ile la efecte letale,
- popula"ie de celule este cu at#t mai sensibil le radia"ii cu c#t 1$ are vite$a
proceselor metabolice mai mareZ 2$ este iradiat )ntr8o fa$ mai precoce a mito$ei i
:$ este mai nediferen"iat. Sunt 3nedifereniate4 celulele care au un "iitor cariocinetic
lung, deci morfologia i funciile nu sunt definiti" fi%ate.
1ceast lege ofer un ghid simplu pentru msurile de radioprotec"ie medical i
pentru !nelegerea cazurilor !n care se practic radioterapia. Dadioprotecia impune
s nu fie e%puse radiaiilor esuturile sntoase sensi*ile, cele em*rionare, cele
hematopoetice, gonadele, epiderma i mucoasa intestinal. )e de alt parte,
*eneficiaz de radioterapie tumorile cu celule de radiosensi*ilitate mare. 1cestea
sunt, !n general, sarcoamele #!n special blastoamele$ care sunt tumori cu celule
deri"ate din esuturile mezenchimale #nedifereniate$. 1cestea satisfac !n foarte *un
parte cerinele specificate de Oergonie-ri*ondeau.
11.E. UTILI%AREA DETECTORULUI GEIGER;MbLLER SAU A
DETECTORULUI CU SCINTILAIE PENTRU DETERMINAREA
#ARIAIEI CU DISTANA A FLU]ULUI DE RADIAII
/miterea spontan de radiaii alfa, *eta i gamma de ctre unele nuclee se
numete radioacti"itate natural. )rin emiterea unei particule alfa are loc o
transformare a elementului dat !ntr-un alt element pentru ca numrul de ordine al
elementului scade cu 2 uniti, iar cel de mas cu C uniti. /%emplu,

C
2
222
96
226
99
+ ;n ;a
. 0n general,
n
1
m

2
C
Xe V
n-2
1-C

0n cazul emiterii de radiaii *eta numrul de mas 1 rm&ne constant, iar numrul de
ordine n crete cu o unitate. /%emplu,
0i e &b
21C
9:
0
1
21C
92
+

0n general,
F
!
S

e
0
1
V R
!
S 1 +
.
1:9
)articulele *eta emise, nu se gsesc !n nucleu, ele apar !n timpul tranziiei de la
proton !n neutron i in"ers c&nd se emit i particule de mas i sarcin zero numite
neutrino i antineutrino. /%emplu, p
1
1

n
1
0
V
V1
0

V

o
.


Ba emisia radiaiilor gamma, numrul atomic i cel de mas rm&n constante,
deoarece nucleul trece dintr-o stare e%citat la una normal.
'ac la un moment dat t @ 0, e%ist N
0
nuclee radioacti"e, dintr-un element oarecare,
atunci numrul de nuclee rmase nedezintegrate N, dup timpul t #!n sec $ "a fi,
N @ N
0
.e
-

t
, unde

este constanta de dezintegrare. ?aloarea ei depinde numai

de structura intern, specific fiecrui radionuclid, nu i de condiiile e%terioare.
Begea de mai sus ne indic faptul c numrul de nuclee rmase nedezintegrate scad
e%ponenial cu timpul.
)entru a caracteriza sta*ilitatea nucleului se utilizeaz !n loc de , timpul de
!n-umtire
1;2
. /l reprezint inter"alul de timp !n care se dezintegreaz -umtate
din numrul de nuclee iniiale, N
0
;2 , deci relaia "a fi,
2
0
N
@ N
0
.e
-

1;2
@

2 ln
impul de !n-umtire este foarte diferit de la un nucleu la altul, fiind cuprins !ntre
10
9
ani i c&te"a

s #microsecunde$.emple de timpi de injumatatire

1:9
1lt mrime folosit !n practic este activitatea unei surse radioacti"e, notat cu
i definit ca numrul de dezintegrri care au loc !ntr-o secund, !ntr- o cantitate
de su*stan radioacti". 1cti"itatea este deci dat de scderea !n timp a numrului
de nuclee insta*ile N,
@ -
dt
dN
@ N
1cti"itatea se msoar !n dezintegrri pe secund . E dezintegrare pe secund se
numete *ecaerel # Oa$. 0n practic e folosete .urie, 1 .i @ :,7 . 10
10
dez;sec sau
Oa.
)entru a pune !n e"iden i pentru a msura radiaiile nucleare se folosesc
detectoare de radiaii 'etectoarele de radiaii se *azeaz pe faptul c radiaiile alfa,
*eta i gama produc direct sau indirect o cantitate de ioni prin mediile prin care trec.
Nucleele care apar !n urma dezintegrrii alfa i *eta sunt !n general e%citate i re"in
instantaneu la starea fundamental prin emisia de fotoni gamma. /%ist !ns i
nuclee care rm&n !n stare e%citat un timp mai !ndelungat, stare metasta*il. 1ceste
nuclee dau natere la o radioacti"itate gamma "erita*il, caracterizat prin propria
perioad. =n fascicul de radiaii emis de o surs radioacti", dup ce a str*tut un
N
N
0
N
0
;2
N
0
;C

1;2

1;C
t
1C0
Fig. 11.1. Scderea )n timp a numrului de nuclee instabile
N
?
.
mediu oarecare poate fi caracterizat prin "iteza de numrare produs !ntr-un detector
adec"at,
? @
timp
impulsuri nr.
)entru cazul c&nd ne intereseaz mai mult efectele *iologice produse de ctre
radiaiile, alfa, *eta sau gama se folosesc alte mrimi ca, doza de ioni #msurat !n
;Yentgen$, doza de energie a*sor*it # msurat !n NraQ$, sau doza *iologic
# msurat !n Sievert$ etc.
Ba trecerea radiaiilor printr-un mediu oarecare ele sunt a*or*ite i intensitatea lor
scade e%ponenial cu distana parcurs !n mediu conform relaiei,
A @ A
o
.e
-
@
unde A
0
este intensitatea flu%ului incident, A intensitatea flu%ului emergent,

coeficientul de atenuare, iar @ distana parcurs prin mediul studiat.
Put 11.P4(5)5a 85&5()a&(a a )a"3a233*1):
Puterea p
X&rtie Bemn Oeton
.oeficientul

se poate determina msur&nd "itezele de numrare ale contorului,

?
2
i ?
1
, corespunztoare grosimilor stratului parcurs %
2
i %
1,
folosind e%presia,

@ T
1 2
1 2
ln ln
@ @
, ,

1C1
Q
c
d
)entru a elimina "aloarea constantei T, se fac msurtori relati"e pentru dou
materiale, cunosc&nd coeficientul de atenuare al unuia dintre ele. )entru fier

@
0,C55 cm
-1
, iar pentru plum*

@ 0,: cm
-1
.
'etectorii se clasific dup principiul lor de funcionare. =n dectector este
format din dou pri, a$ un mediu !n care radiaia produce un efect specific
#scintilaii, ionizri, efect fotoelectric sau efect .ompton$ i *$ un sistem de
!nregistrare a efectului produs de radiaii.
'etectorii cu scintilaii se *azeaz pe apariia de scintilaii !n cristalele anorganice
sau organice, atunci c!nd acestea sunt lo"ite de particulele respecti"e. +otonii
scintilailor sunt !nregistrai cu a-utorul unui fotomultiplicator produc&ndu-se un
impuls de tensiune. 1mplitudinea impulsului este proporional cu numrul de
scintilaii deci cu energia lor. 'in acest moti" detectorul cu scintilaii se folosete at&t
la numrarea particulelor emise c&t i la msurarea energiei lor. 'etectorul >eiger-
(uller este un detector cu ionizri !n gaz. /l este constituit dintr-un tu* metalic 8
catodul- i un fir central-anodul- am*ele fiind introduse !ntr-un cilindru de sticl,
etan. 1mestecul de gaze conine !n general heliu sau argon plus "apori de alcool
etilic. 'atorit simetriei cilindrice, intensitatea c&mpului !n -urul anodului "a scdea
rapid odat cu distana fa de aceasta. 0ntre cei doi electrozi se aplic o diferen de
potenial relati" mare, p&n la 2500 ?. Dadiaiile alfa i *eta ionizeaz direct gazul
din tu*, pe c&nd radiaiile gama ionizeaz gazul indirect prin electronii secundari.
Schema detectorului #contorului$ >eiger-(uller, ubul Geiger-Muller
U(3*39a)5a "5(5!(1)4*43 !4 .5m3!1&"4!(1)3 eRADIATION ALERTf.
1nod

>az la
presiune
-oas .atod
1C2
Sursa
1parat
de
msur
1cest tip de detector porta*il are tu*ul >( !ncasat !n instrument. Ba intrarea unui
flu% de particule ionizante !n tu*, acesta "a declana un impuls electronic care este
semnalizat prin apariia unei lumini roii i printr-un semnal sonor. +ondul cosmic
e%istent permanet poate fi !nregistrat !n fiecare minut i are "alori !ntre 5 8 25
impulsuri pe minut, depinz&nd de locaie i de altitudine. Se selecteaz ni"elul de
alert la poziia m1, iar dac numrtorul depete scala aparatului se trece la
ni"elurile superioare m10, m100. Semnalul sonor poate fi auzit acion&nd *utonul
EN;E++;1='AE. Se o*ser" c at&t indicatorul "izual de pe ecran c&t i cel audio
diminueaz progresi" pe msur ce se trece la ni"ele superioare de alert. )entru a
determina ce tip de radiaie #alfa, *eta sau gamma$ pro"ine de la o anumit surs,
procedm astfel,
- detectorul se poziioneaz "ertical cu partea din spate !n apropierea sursei, iar
dac se !nregistreaz un semnal, el poate pro"eni de la radiaia gamma sau *eta de
energie mare #deoarece razele gamma de energie -oas i razele m cu energie de 10-
C0 Te? nu pot penetra peretele tu*ului >(, dar pot ptrunde prin fereastr$.
- Se plaseaz o folie de aluminiu !ntre instrument i sursa, iar dac indicaia
ecranului se modific, este "or*a de radiaie *eta. (a-oritatea izotopilor conin at&t
radiaie gamma c&t i *eta.
- 'ac !n poziia de mai sus nu se inregistreaz semnal, se poziioneaz
instrumentul cu fereastra spre surs. Semnalul !nregistrat poate pro"eni !n acest caz
de la radiaie alfa, *eta sau gamma de energie -oas. 'ac se plaseaz o foaie de
h&rtie !ntre fereastr i surs, iar semnalul !nceteaz, este "or*a despre radiaie alfa.
Anter"alul de operare al instrumentului, 0-50 mD;h @ miliDentgens per or, sau 0-
500 bS";h @ microSie"erts per or #gamma i m$ i 0-50000 .)( @ counts per
minute #alfa si *eta$. Sensi*ilitatea instrumentului a"&nd ca referin izotopul
60
.o
este de 25 impulsuri;sec;1mD;h. 'ac se utilizeaz pentru detecia
125
A, se recomand
0.5 m.i sau mai mult. Ni"elul minim detecie este !n acest caz apro%imati" 0.02 b.i .

1C:
Fig.11./. a) &anoul frontal al detectorului de radia"ii. b) &o$i"ionarea sursei de radia"ii fa" de
detector.
1CC
M1"4* "5 *4!)4:
a$ Andiferent ce tip de radiaie urmeaz a fi detectat, se "a face o determinare iniial
a fondului cosmic, adic numrul de impulsuri;100 secunde !nregistrate de instrument
!n lipsa sursei studiate. Ba fiecare 100 secunde se noteaz "aloarea #timp de cinci
minute$ i apoi se "a face media, care reprezint de fapt fondul cosmic. 'eterminarea
numrului de particule radioacti"e care a-ung la detector se face plas&nd sursa
succesi" la diferite distane, 20 cm, 15 cm, 10 cm, 5 cm, 1 cm. Se !nregistreaz de
fiecare dat numrul de impulsuri ; 100 secunde, repet&ndu-se msurtorile de cte"a
ori i apoi se face media pentru fiecare distan aleas. Numrul de particule care
pro"in e%clusi" de la surs se afl prin scderea fondului cosmic din "aloarea medie a
impusurilor pentru fiecare distan. Se "a reprezenta grafic numrul de impulsuri
pro"enite de la surs, !n funcie de distan, iar din grafic se "a determina distana de
!n-umtire. Se completeaz ta*elul urmtor,
'istana sursa 8contor
cm
Nr. impulsuri;100 sec
(surat (edia
Nr.imp.;100sec pro"enite
de la sursa #media$
Anfinita#fond cosmic$ 0
1cm
5 cm
10 cm........
*$ Se fi%eaz distana dintre sursa radioacti" i detector la una din "alorile de mai
sus. Se introduc pe r&nd, !ntre surs i detector, plci de plum* de diferite grosimi i
se !nregistreaz de fiecare dat numrul de impulsuri. Se "a reprezenta grafic
numrul de impulsuri pro"enite de la surs !n funcie de grosimea stratului de
material a*sor*ant, iar din grafic se "a determina distana de !n-umtire. 1poi se "a
calcula coeficientul de atenuare g conform relaiei m
1;2
@

2 ln
@

69: , 0
1C5
CUPRINS
I. PROPRIETILE GENERALE ALE LICHIDELOR
1. 'eterminarea coeficientului de tensiune superficial a lichidelorh ...1
2. 'eterminarea coeficientului de "&scozitatehhhhhhhhhh..6
:. 'ensimetriehhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhh.11
C. (etode calorimetricehhhhhhhhhhhhhhhhhh..19
II. MSURAREA PROPRIEThILOR ELECTRICE ALE
LICHIDELOR 7IOLOGICE
5. .onductometriehhhhhhhhhhhhhhhhhhhh..25
6. Studiul unei pile de concentraiehhhhhhhhhhhhhh:2
III. PROPRIETI OPTICE ALE LICHIDELOR 7IOLOGICE
7. 'eterminarea indicelui de refracie al unei soluii cu a-utorul refractometrului
1OO/hhhhhhhhhhhhhhhhh...................................:9
9. 'eterminarea concentraiilor soluiilor optic acti"e cu a-utorul
polarimetruluihhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhh...C5
9. (icroscopie optic. Echiul-un sistem optic comple%hhhh........59
10. Spectrofotometrie. 1*sor*ia i emisia radiaiilor de ctre
molecule hhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhh90
=tilizarea spectrofotometului =?-?AS pentru trasarea unei cur*e
1C6
de etalonare i determinarea diferitelor forme ale hemoglo*inei !n
soluii i !n s&ngehhhhhhhhhhhhhhhhhhhh99
I#. INTERACIUNEA RADIAIILOR CU MATERIA #IE
11. .lasificarea radiaiilor. Surse de radiaiihhhhhhhh. hh.111
/fectele radiaiilor neionizantehhhhhhhhhhhh. h....11C
Anteraciunea radiaiilor ionizante cu materia "ie, efecte
radiochimicehhhhhhhhhhhhhhhhhhhhh..125
=tilizarea detectorului >eiger-(uller sau a detectorului cu
scintilaie pentu determinarea "ariaiei cu distana a flu%ului de
radiaii hhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhhh.1:0

7I7LIOGRAFIE SELECTI#h

SIMONA CAVALU
C1*a1)a(1)3 :
P18 L51&(3& L1)5"a&a 7[2

1C7
EDITURA UNI#ERSIThII DIN ORADEA 2DDE
1C9
1C9