UNIVERSITATEA DE MEDICIN I FARMACIE V.

BABE TIMIOARA
DISCIPLINA DE FIZIOLOGIE
DEPARTAMENTUL DE TIINE FUNCIONALE

FIZIOLOGIE GENERAL
CURSUL 1
Fiziologia membranei celulare
2015

CUPRINS
1.Organizarea morfo-funcional a membranei celulare
1.1. Lipidele membranare. Rol structural i funcional
1.2. Proteinele membranare. Rol structural i funcional
1.3. Structurile specializate ale membranei
2. Funcia de transport a membranei celulare
2.1. Transportul pasiv
2.1.1. Difuziunea
2.1.2. Osmoza
2.1.3. Filtrarea
2.1.4. Canalele ionice membranare
2

OBIECTIVE
Studentul trebuie s:

Explice organizarea i rolul matricei fosfolipidice n permeabilitatea
selectiv a membranei

Defineasc criteriile de clasificare i funciile principale ale proteinelor
membranare

Enumere criteriile generale de clasificare a mecanismelor de transport
membranar

Defineasc principalele caracteristici ale transportului pasiv

Descrie transportul pasiv prin difuziune i osmoz

Defineasc i s descrie caracteristicile generale ale transportul pasiv
prin canale ionice

Descrie transportul pasiv prin canale ionice voltaj dependente i
operate de ligand

STRUCTURA GENERAL A CELULEI

Componentele principale ale celulei sunt:

MEMBRANA CELULAR

CITOPLASMA

NUCLEUL

1. ORGANIZAREA MORFO - FUNCIONAL A

MEMBRANEI CELULARE
DEFINIIE - complex molecular lipidoproteic care delimiteaz
celula de mediul extracelular

membrana celular = plasmalem

FUNCIE PRINCIPAL - barier cu permeabilitate selectiv i

dinamic, care controleaz schimburile dintre celul i mediul
extracelular

STRUCTUR - modelul mozaicului fluid lipido-proteic:

Lipide - fosfolipide, colesterol, glicolipide

Proteine - glicoproteine pot fi: periferice sau integrale

Structuri specializate membranare - microvili, jonciuni intercelulare

LEGEND: 1. glucid, 2. glicoprotein, 3. glicolipid, 4. colesterol,

5. protein periferic, 6. protein integral, 7. filamente ale citoscheletului
celular, 8. extremiti hidrofile ale fosfolipidelor, 9. matrice fosfolipidic,
6
10. extremiti hidrofobe ale fosfolipidelor

1.1. LIPIDELE MEMBRANARE: ROL STRUCTURAL I

FUNCIONAL

FOSFOLIPIDELE - formeaz matricea fosfolipidic alctuit din
dou straturi monomoleculare. Fiecare strat prezint:
o extremitate hidrofil spre poriunea periferic a membranei
o extremitate hidrofob spre poriunea mijlocie a membranei
 miez hidrofob care restricioneaz pasajul liber al substanelor


COLESTEROLUL - este dispus n interiorul matricei fosfolipidice

asigur flexibilitatea i stabilitatea membranei
contribuie la caracterul selectiv al permeabilitii membranei

GLICOLIPIDELE - intr n structura nveliului celular numit
glicocalix sau atmosfera pericelular
stabilesc contacte cu structuri ale mediului extracelular

FUNCIILE MATRICEI FOSFOLIPIDCE

(a) ASIGUR PERMEABILITATEA SELECTIV A MEMBRANEI

membrana este permeabil pentru
molecule liposolubile mici, nepolare:
gaze respiratorii (O2, CO2)
acizi grai
glicerol
hormoni steroizi
uree
etanol

membrana este impermeabil pentru:
molecule mari nepolare (glucoz,
aminoacizi)
molecule mici polare (ioni)

membrana este parial permeabil
pentru ap

(b) SURS DE MESAGERI INTRACELULARI

Fosfatidilinozitol - 4,5 - bifosfat (PIP2)
Fosfolipaza C membranar
MESAGERI INTRACELULARI
IP3 (inozitoltrifosfat)
DAG (diacilglicerol)

IP3 stimuleaz eliberarea Ca2+ din
reticulul endoplasmatic  reglarea
contraciei fibrei musculare netede

DAG activeaz proteinkinaza C
membranar  activarea enzimelor
intracelulare care regleaz
metabolismul i secreia celular

10

(c) SURS DE MESAGERI EXTRACELULARI

Fosfolipide membranare
Fosfolipaza A2 membranar
ACID ARAHIDONIC
Calea ciclooxigenazei
PROSTAGLANDINE
(PG)

TROMBOXANI
(Tx)

PGI2 (prostaciclina)

TxA2

Vasodilataie
Inhib aderarea i
agregarea
trombocitelor

Vasoconstricie
Stimuleaz aderarea
i agregarea
trombocitelor

Calea lipooxigenazei
LEUCOTRIENE
(LT)

Rspuns inflamator
Contracia
musculaturii netede
bronice
11

1.2. PROTEINELE MEMBRANARE: ROL

STRUCTURAL I FUNCIONAL

reprezint jumtate din masa membranei

reprezint elementul activ care determin proprietile i funciile
specifice ale membranei
CLASIFICARE
n funcie de relaia cu matricea fosfolipidic se descriu:

proteine periferice (extrinseci)

proteine integrale (intrinseci)

12

(a) PROTEINELE PERIFERICE

sunt slab ancorate de matricea fosfolipidic prin fore electrostatice
au mobilitate mare n planul membranei
ROLURI

n principal rol de enzime membranare:
externe: acetilcolinesteraza (AChE) de la nivelul
membranei postsinaptice hidrolizeaz
acetilcolina (ACh) n acetat i colin
interne: adenilatciclaza (AC) genereaz AMPc
(mesager intracelular)

stabilesc contacte cu:
externe: componente ale matricei extracelulare
 fixeaz celula de structurile extracelulare
interne: citoscheletul celular  menine forma
celulei i particip la micrile celulare

13

(b) PROTEINELE INTEGRALE

strbat ntreaga matrice de pe o fa pe alta

au o structur asimetric
sunt puternic ancorate de matricea fosfolipidic
au o mobilitate mai redus n planul membranei
ROLURI

proteine canal pentru ioni i ap

proteine transportoare (carrier)

proteine receptori membranari

proteine de ataare intercelular

proteine de recunoatere
intercelular
14

1.3. STRUCTURILE SPECIALIZATE

ALE MEMBRANEI
DEFINIIE: sunt prelungiri ale citoplasmei acoperite de plasmalem
1. MICROVILII

sunt extensii n deget de
mnu situate la polul apical al
celulei

mresc suprafaa de schimb la
nivelul epiteliul intestinal i renal
2. JONCIUNI INTERCELULARE

sunt structuri complexe care asigur
contactul dintre dou celule

se clasific n:
jonciuni strnse (tight)
jonciuni de ancorare (desmozomi)
jonciuni largi (gap)

15

2. FUNCIA DE TRANSPORT A MEMBRANEI

CELULARE
DEFINIIE - reprezint procesul de
traversare a substanelor prin membrana
celular
CLASIFICARE

n funcie de dimensiunea substanei:
sisteme de microtransfer (micromolecule)
sisteme de macrotransfer (macromolecule)
 transport vezicular

n funcie natura forelor care asigur
transferul micromoleculelor:
transport pasiv
transport activ

16

2.1. TRANSPORTUL PASIV

CARACTERISTICI GENERALE

este spontan

are loc fr consum de energie (ATP)

se desfoar sub aciunea unor fore fizice i n sensul
reducerii unor gradiente:
de potenial electrochimic
de presiune osmotic
de presiune hidrostatic
MECANISME DE TRANSPORT PASIV

Difuziunea

Osmoza

Filtrarea
17

2.1.1. DIFUZIUNEA
DEFINIIE: transportul substanelor printr-o membran permeabil
pe baza gradientului electrochimic

Gradientul chimic - asigur difuziunea substanei dinspre partea
cu concentraie mai mare (C1) spre partea cu concentraie mai
mic (C2)

Gradientul de potenial electric - asigur difuziunea ionilor ctre
faa membranei ncrcat electric cu sarcina de semn contrar
K+

= 4 mEq/l

C2

Gradient electric

Extracelular

Intracelular
K+ = 140 mEq/l Gradient chimic
C1

18

EXEMPLU: difuziunea K+ prin membrana neuronal n repaus

1. Concentraia K+ intracelular = 140 mEq/l, iar K+ extracelular = 4
mEq/l  pe baza gradientului chimic are loc difuziunea K+ dinspre
interiorul spre exteriorul celulei = eflux de K+
2. Membrana este pozitiv la exterior i negativ la interior  pe
baza gradientului electric are loc difuziunea K+ dinspre exteriorul
spre interiorul celulei = influx de K+
K+

= 4 mEq/l

C2

Gradient electric

Extracelular

Intracelular
K+ = 140 mEq/l Gradient chimic
C1

19

MECANISME DE TRANSPORT PRIN DIFUZIUNE

(a) Difuziunea simpl prin matricea fosfolipidic
molecule de gaz (O2 i CO2)
molecule liposolubile (uree, etanol, h.steroizi, etc.)
ap (n proporie redus)
(b) Difuziunea simpl prin canale

Canale ionice de Na+, K+, Ca2+ i Cl voltaj - dependente
operate de ligand
operate mecanic

Canale de ap (acvaporine) - operate de ligand
RATA difuziunii simple i prin canale depinde de:
permeabilitatea membranei
mrimea gradientului electrochimic
mrimea suprafeei de schimb

Difuziunea simpl

Difuziunea prin
canale ionice
20

(c) Difuziunea facilitat

asigur transportul pasiv al substanelor
organice nepolare (ex: glucoza, aminoacizi)
necesit o protein carrier specific
viteza de transfer este crescut
transportul este limitat de capacitatea
transportorului pn la o valoare maxim
(Tmax)
poate fi influenat de substane biologic
active  insulina crete de 10-20 ori
difuziunea facilitat a glucozei prin creterea
numrului de proteine transportoare (GLUT)
RATA difuziunii facilitate depinde de:
mrimea gradientului
capacitatea transportorului (valoarea Tmax)

21

2.1.2. OSMOZA
DEFINIIE - difuziunea net a APEI dintr-o soluie osmotic activ,
printr-o membran semipermeabil, pe baza gradientului de
presiune osmotic de la concentraie mic la concentraie mare

Membrana semipermeabil
este permeabil pentru solvent = APA
este impermeabil pentru solvii = particule osmotic active

Soluia osmotic activ - conine solvii care atrag apa:

NaCl
Glucoz
Uree
Proteine

22

PARAMETRII

Concentraia osmotic (Cosm) = numrul de particule osmotic active
dizolvate n unitatea de volum
n plasm: 285 295 mOsmol/l

Presiunea osmotic (Posm) = fora care se opune trecerii apei
(osmozei) printr-o membran semipermeabil. Gradientul de Posm
determin sensul i mrimea transferului de AP
Plasm: 7,6 atm sau 5776 mm Hg

Posm (atm) = Cosm x R x T

Cosm = Osmol/L
R = constanta gazelor (0,082)
T = temperatura soluiei (K)

23

1. Dac 2 soluii osmotic active sunt puse n contact printr-o

membran semipermeabil  apa trece dinspre partea cu Posm
mai mic spre partea cu Posm mai mare
volumul soluiei cu Posm se mrete
transferul de AP se oprete atunci cnd
Posm1 Posm2
2. Dac o soluie osmotic activ este pus n
contact cu apa distilat printr-o membran
semipermeabil  apa trece dinspre apa
distilat spre soluia osmotic activ
transferul de AP se oprete datorit
apariiei gradientului de presiune
hidrostatic care se opune osmozei
24

2.1.3. FILTRAREA
DEFINIIE: reprezint transportul apei i a substanelor
micromoleculare prin membrane permeabile, pe baza gradientului
de presiune hidrostatic

Presiunea hidrostatic (Ph)
presiunea exercitat de o coloan de lichid pe suprafaa de schimb
gradientul de Ph asigur transferul apei i a substanelor
micromoleculare dinspre partea cu Ph mai mare spre partea cu Ph
mai mic

Ph = x g x h
= densitatea lichidului
g = acceleraia gravitaional
h = nlimea coloanei de lichid
25

2.1.4. CANALELE IONICE MEMBRANARE

DEFINIIE: proteine integrale care asigur transportul pasiv al
ionilor n sensul gradientului electrochimic
CLASIFICARE
(a) n raport cu dinamica

Canale ionice de scurgere care asigur
un flux continuu de ioni
Ex: canalul de scurgere de Na+ i K+

Canale ionice controlate de pori care
prezint configuraii moleculare tranzitorii
echivalente unei stri funcionale (canal
deschis sau canal nchis)
Ex: canale de Na+, K+, Ca2+, Cl26

(b) n raport cu selectivitatea canalului

Canale selective - pentru 1 ion (ex: Na+, K+, Ca2+, Cl-)

Canale parial selective - pentru 2 ioni (ex: Na+ i K+, Na+ i Ca2+)

Canale neselective - pentru 3 sau mai muli cationi (ex: canalele
cationice pentru Na+, K+, Ca2+)
SELECTIVITATEA canalului este condiionat de:
sarcina ionului
mrimea ionului
gradul de hidratare a ionului
(c) n raport cu factorul care condiioneaz dinamica canalului:

Canale voltaj - dependente

Canale operate de ligand

Canale operate mecanic (de ntindere - n cel. auditive din canalul
cohlear, deformarea mecanic a cililor deschide canale ionice) 27

I. CANALELE IONICE VOLTAJ-DEPENDENTE

DINAMICA CANALULUI este determinat de modificrile
conformaionale induse proteinei integrale de variaia de potenial
transmembranar
STRUCTUR
1.Filtrul de selectivitate
2.Porul sau canalul de trecere
3.Una/dou pori
4.Senzor de voltaj
TIPURI DE CANALE

Canale rapide de Na+

Canale de K+

Canale lente de Ca2+

Canale de Cl-

28

(a) CANALELE RAPIDE DE Na+

DISTRIBUIE: membrana
scheletice i miocardice

neuronal

fibrei

musculare

PARTICULARITI STRUCTURALE

sunt puternic ncrcate electric
negativ  asigur nlturarea
moleculelor de H20

prezint dou pori:
de activare (m)
de inactivare (h)
STRI FUNCIONALE
canal n repaus - poarta m nchis i poarta h deschis
canal activat - ambele pori deschise
canal inactivat - poarta m deschis i poarta h nchis

29

DINAMICA PORILOR

atingerea potenialului prag (- 55 mV) determin activarea
canalului rapid de Na+  influx de Na+ depolarizant (faza
ascendent a potenialului de aciune)

condiioneaz excitabilitatea membranei
canalele de Na+ activate sau inactivate  membran inexcitabil
canalele de Na+ n stare de repaus  membran excitabil

30

(b) CANALELE DE K+
DISTRIBUIE: membrana tuturor structurilor excitabile
PARTICULARITI STRUCTURALE

nu sunt ncrcate electric negativ

au o singur poart n - de activare
DINAMICA PORILOR - mai lent

depolarizarea complet (+ 30 mV) determin activarea canalului
de K+  eflux de K+ repolarizant (faza descendent a
potenialului de aciune)

31

(c) CANALELE LENTE DE Ca2+

CARACTERISTICI

sunt n general parial selective (Ca2+ > Na+)

se activeaz n urma depolarizrii membranei

determin un influx de Ca2+ implicat n reglarea:
excitabilitii celulare
contraciei musculare
secreiei celulare
Tip CANAL

Distribuie

Rol

L (long lasting)

Fibra muscular
cardiac i neted

Cuplarea
excitaie/contracie

T (transient)

Celula pacemaker
cardiac

Automatismul cardiac

N (neuronal)

Membrana neuronal
presinaptic

Exocitoza veziculelor cu
neurotransmitori
32

(d) CANALELE DE ClCARACTERISTICI

se gsesc n membrana fibrei musculare striate

se deschid n urma depolarizrii membranare

determin un influx de Cl
rol de stabilizare a potenialului de repaus

33

II. CANALELE IONICE OPERATE DE LIGAND

DINAMICA CANALULUI - modificrile conformaionale ale proteinei
integrale sunt induse sub aciunea unei substane biologic active
care se numete LIGAND:
se fixeaz pe un situs specific de la nivelul porilor
poate fi neurotransmitor, hormon sau mesager intracelular
TIPURI DE CANALE

operate de liganzi extracelulari

operate de liganzi intracelulari

Canal
nchis

operate de receptori prin proteine G

canale intercelulare (conexonii)

Canal
deschis
34

(a) Canalele operate de LIGANZI EXTRACELULARI

CARACTERISTIC: canalul intr n structura unor receptori ai
membranei postsinaptice, iar ligandul este un mediator chimic
Tip CANAL

Ligand

Sinapse

Efect

Canale de

Na+

ACh

SNC i SNP (excitatorii)

Placa motorie

influx de Na+
depolarizant

Canale de

Cl-

GABA
Glicin

SNC (inhibitorii)

influx de Clhiperpolarizant

Glutamat

SNC (excitatorii)

influx cationic
depolarizant

Canale
cationice
neselective
(Na+, K+,Ca2+)

SNC = sistem nervos central ACh = acetilcolin

SNP = sistem nervos periferic GABA = acid gamaaminobutiric

35

(b) Canale operate de LIGANZI INTRACELULARI

CARACTERISTICI

sunt canalele localizate n membrana celulelor epiteliale, iar
ligandul este un mesager intracelular (AMPc, Ca2+)

sunt canale localizate n membrana reticulului endoplasmatic, iar
ligandul este un mesager intracelular (IP3)
Tip CANAL

Ligand

Localizare

Canal de ap

AMPc

Celule epiteliale (nefrocit, mucoasa intestinal,

glande exocrine)

Canal de Na+

AMPc Celule epiteliale (nefrocit, glande exocrine)

Canal de K+

Ca2+

Membrana fibrei miocardice

Canal de Cl-

Ca2+

Celule epiteliale (glande exocrine, mucoasa

intestinal i a cilor aerifere)

Canal de Ca2+

IP3

Membrana reticulului endoplasmatic

36

(c) Canale operate de RECEPTORI prin proteinele G

CARACTERISTIC - sunt canale de K+ sau de Ca2+ activate:

direct - pentru canalul de K+ prin subunitatea a proteinei G

indirect - pentru canalul de Ca2+ prin subunitatea a proteinei G
care activeaz enzime membranare generatoare de mesageri
intracelulari:
adenilatciclaza pentru AMPc
guanilatciclaza pentru GMPc

37

PROTEINELE G MEMBRANARE
DEFINIIE - proteine - traductor ataate de faa intern a membranei
care asigur cuplarea RECEPTORULUI cu EFECTORUL:
un canal ionic de K+ sau Ca2+
o unitate catalitic = enzim membranar sau intracelular
STRUCTUR subunitate + complexul i
SUBUNITATEA

este o GTP-az

asigur funcia i
specificitatea proteinei G

are 2 forme:
forma activ fixeaz GTP
GTP GDP + Pi + E
forma inactiv fixeaz GDP

38

TIPURI DE PROTEINE G (subunitatea )

RECEPTOR

EFECTOR
ENZIMATIC

MESAGER
SECUNDAR

Gs

1 - adrenergici

AMPc
Activarea
( influxul de Ca2+ prin
adenilatciclazei
canale membranare)

Gi

2 - adrenergici
2 - adrenergici
M2 - colinergici

AMPc
Inhibiia
+ prin
(
efluxul
de
K
adenilatciclazei
canale membranare)

Gq

1 - adrenergici
M1,M3 - colinergici

RECEPTORII ADRENERGICI
receptori (1, 2)
receptori (1, 2)
au ca ligand NAdr. i Adr.

Activarea
fosfolipazei C

IP3, DAG ( efluxul

de Ca2+ din RS)
Ca2+- calmodulina

RECEPTORII COLINERGICI
receptori nicotinici (N)
receptori muscarinici (M1,M2M5)
au ca ligand ACh

39

ROLURILE PROTEINELOR G
1. Activarea unor fluxuri ionice transmembranare (K+, Ca2+)
 modificri de potenial membranar
2. Modularea activitii unor enzime membranare i intracelulare
 sinteza de mesageri secundari
3. Modularea transcripiei unor gene
 sintez de proteine i modificri structurale specifice

40

(d) Canale intercelulare - CONEXONII

CARACTERISTICI

se gsesc la nivelul jonciunii permeabile dintre 2 celule

reprezint sinapse electrice n fibrele musculare cardiace i netede

sunt permeabile pentru molecule cu diametru mic  ap, electrolii,
mesageri intracelulari, produi de metabolism

41

III. CANALELE IONICE OPERATE MECANIC

CARACTERISTICI
Dinamica lor depinde de gradul de intindere (stretching) al membranei
LOCALIZARE
In fibra musculara neteda: la intinderea membranei deschidere
canale de Na+ and Ca2+ depolarizare contractie

In celulele receptoare auditive deschiderea canalelor permite un

influx cationic depolarizare generare potential de receptor

TEST (complement multiplu)

Componentele lipidice ale membranei celulare sunt:
a. Fosfolipidele dispuse n dou straturi monomoleculare
b. Fosfolipidele dispuse cu extremitatea hidrofil spre poriunea
mijlocie a membranei
c. Colesterolul care contribuie la caracterul hidrofil al poriunii
mijlocii a membranei
d. Glicolipidele care contribuie la caracterul hidrofob al poriunii
mijlocii a membranei
e. Glicolipidele care intr n structura nveliului celular
numit glicocalix

44

TEST (complement multiplu)

Dac o soluie de NaCl este pus n contact cu apa distilat
printr-o membran semipermeabil:
a. Osmoza are loc dinspre soluia de NaCl spre apa distilat
b. Osmoza are loc dinspre apa distilat spre soluia de NaCl
c. Apa distilat i mrete volumul
d. Apa distilat i micoreaz volumul
e. Transferul de ap se oprete datorit gradientului de
presiune hidrostatic care se opune osmozei

45

TEST (complement multiplu)

Canalele de Na+ voltaj dependente:
a. Sunt puternic ncrcare electric negativ
b. Au o dinamic asociat cu depolarizarea membranar
c. Au o dinamic asociat cu repolarizarea membranar
d. Asigur un influx de Na+
e. Prezint o poart h de activare i o poart m de inactivare

46